Cistanche کی سالماتی شناخت میں پیشرفت

خلاصہ:سیستانچسہربا، چین میں ایک نایاب اور قیمتی دواؤں کا مواد ہے، جس کی طبی قدر اور ماحولیاتی قدر زیادہ ہے۔ سالماتی حیاتیات کی تکنیکوں کی ترقی کے درمیان، ڈی این اے پر مبنی مالیکیولر شناخت کی تکنیکوں کی ایک قسم کو بتدریج بہتر بنایا گیا ہے اور اس پر تحقیق میں اہم پیش رفت ہوئی ہے۔سیستانچسہربا یہ مقالہ ڈی این اے پر مبنی مالیکیولر شناخت کی تکنیکوں کا جائزہ لیتا ہے۔Cistancheاور حدود اور اطلاق کے امکانات پر تبادلہ خیال کرتا ہے، جس سے توقع کی جاتی ہے کہ وہ Cistanches Herba کی درست شناخت اور معیار کی جانچ، وسائل کے تحفظ اور عقلی استعمال، اور افزائش کی مختلف اقسام کے حوالے سے کام کرے گی۔

مطلوبہ الفاظ:Cistanche; سالماتی شناخت؛ سالماتی مارکر تکنیک؛ شناخت اور معیار؛ وسائل کا تحفظ

Cistanche کے اجزاء کے بارے میں مزید تفصیلات جاننے کے لیے یہاں کلک کریں۔

Cistanche Cistanche deserticola YC Ma اور کا خشک پیمانے پر چھوڑا ہوا مانسل تنا ہے۔Cistanche tubulosa(شینک) وائٹ، نسل کا ایک پوداCistancheخاندان Cistanche میں. Jiangyun، Cunyun، Cistanche، اور Chagangaoya (منگول زبان) کو "صحرا ginseng" [2] کے نام سے جانا جاتا ہے۔ حالیہ برسوں میں، چونکہ جنگلی سستانچے کے وسائل ختم ہونے کے دہانے پر ہیں اور ملکی مانگ میں روز بروز اضافہ ہو رہا ہے، چائنیز ہربل ادویات کی مارکیٹ میں سیستانچے کی جعلی مصنوعات کی ایک بڑی تعداد آ گئی ہے، جس سے مارکیٹ کی قیمتوں میں زبردست اتار چڑھاؤ آ رہا ہے۔ ، اور دواؤں کے مواد کے معیار کی ضمانت نہیں دی جاسکتی ہے، جو طبی ادویات کی حفاظت کو سنگین طور پر خطرے میں ڈالتی ہے۔ جنس [3]. لہذا، Cistanche پلانٹ کے جراثیمی وسائل کا تحفظ، تحقیق اور عقلی نشوونما اور استعمال بہت قریب ہے، اور Cistanche پودوں کے جراثیم کے وسائل کی درست شناخت خاص طور پر اہم ہے۔

جیسا کہ اہم ہے. "Pharmacopoeia of the People's Republic of China" کا 2020 ایڈیشن (جسے بعد میں "Chinese Pharmacopoeia" کہا جاتا ہے) صرف یہ ریکارڈ کرتا ہے کہ Cistanche deserticola کے سوکھے کھردرے گوشت والے تنوں کو حقیقی ادویات کے طور پر استعمال کیا جاتا ہے۔ صورت حال کے نقطہ نظر سے، "چینی فارماکوپیا" کے 2020 ایڈیشن میں درج کردہ Cistanche اور Cistanche tubehua پودوں کے علاوہ، Cistanche sinensis G. Beck، C. salsa (CA Mey.) G. Beck, Lanzhou بھی موجود ہیں۔ Cistanche C. lanzhouensis ZY Zhang، وغیرہ [4]، جعلی ڈوپنگ رجحان کی ایک بڑی تعداد بھی ہیں. سالماتی حیاتیات کی ٹیکنالوجی کی ترقی اور مسلسل بہتری کے ساتھ، سالماتی شناخت کی ٹیکنالوجی میں نمونے کی کم کھپت، تیز رفتاری اور اعلی درستگی کے فوائد ہیں، اور جانوروں اور پودوں کی پرجاتیوں کی شناخت میں بڑے پیمانے پر استعمال کیا گیا ہے۔ وسائل کی کان کنی کی تحقیق کی ترقی بھی نسبتاً تیز ہے [5]۔ فی الحال، مالیکیولر شناختی ٹیکنالوجی کے ذریعے Cistanche دواؤں کے مواد کی شناخت میں کچھ پیش رفت ہوئی ہے۔ سالماتی شناخت کے لیے درکار مالیکیولر مارکر ٹیکنالوجی کی درجہ بندی کے مطابق [6]، یہ مقالہ Cistanche deserticola کی جراثیمی شناخت اور دیگر پہلوؤں کا جائزہ لیتا ہے، اور Cistanche deserticola کی جراثیمی شناخت کے وجود پر بحث کرتا ہے۔ مسائل کا تجزیہ کریں اور متعلقہ حل پیش کریں، جس کا مقصد Cistanche پودوں کی نئی اقسام کے تحفظ، عقلی استعمال اور کاشت کے لیے حوالہ فراہم کرنا ہے۔

1 Cistanche پودوں کی شناخت میں DNA بارکوڈنگ ٹیکنالوجی کا اطلاق

1.1 ڈی این اے بارکوڈنگ ٹیکنالوجی

2003 میں، کینیڈا میں گیلف یونیورسٹی کے پروفیسر پال ہیبرٹ نے بار کوڈ ٹیکنالوجی کو حیاتیاتی دنیا میں متعارف کرایا اور سب سے پہلے "DNA بارکوڈ" کا تصور پیش کیا [7]۔ ڈی این اے بارکوڈ ٹیکنالوجی روایتی چینی ادویات اور کثیر پر مبنی خام مال کی شناخت کے لیے ایک مؤثر طریقہ ہے۔ متعلقہ ڈی این اے کے لیے، امیدواروں کے ٹکڑوں کو جنرل پرائمر پولیمریز چین ری ایکشن (PCR) کے ذریعے بڑھایا گیا، پی سی آر ایمپلیفیکیشن پروڈکٹس کو صاف کیا گیا، ترتیب دیا گیا اور تجزیہ کیا گیا، ہدف ڈی این اے بارکوڈ ترتیب کو تلاش کیا گیا، اور ڈی این اے بارکوڈ ریکگنیشن سسٹم بنایا گیا۔ ] آخر میں، ڈی این اے بارکوڈ شناخت ایک بائیو مالیکولر شناخت کا طریقہ ہے جو پرجاتیوں کی شناخت کے لیے ایک یا چند نسبتاً مختصر، معیاری ڈی این اے ٹکڑوں کو استعمال کرتا ہے [9]۔

حالیہ برسوں میں، ہائی تھرو پٹ سیکوینسنگ ٹیکنالوجی اور ڈی این اے بارکوڈ شناختی ٹیکنالوجی کے امتزاج کے ذریعے، ایک نئی ٹیکنالوجی تیار کی گئی ہے جو بیک وقت مخلوط نمونوں میں متعدد انواع کے بارکوڈ کی ترتیب کا پتہ لگا سکتی ہے——DNA میٹا بار کوڈ، جس کا بنیادی اصول ہائی تھرو پٹ سیکوینسنگ کو لاگو کرنا ہے ٹیکنالوجی مخلوط بارکوڈ کی وسیع ترتیب حاصل کرتی ہے، اور بایو انفارمیٹکس تجزیہ کے ذریعے مخلوط نمونے میں پرجاتیوں کی ساخت کی شناخت کرتی ہے[10]۔

1.2 ڈی این اے بارکوڈ کی ترتیب کا انتخاب

بار کوڈ کی ترتیب جو DNA بارکوڈنگ ٹیکنالوجی میں استعمال کی جا سکتی ہے ان میں mitochondrial coenzyme Ⅰ (CO Ⅰ) DNA، 12S rRNA، 16S rRNA ترتیب اور ribosomal 18S rDNA جانوروں کی انواع کی شناخت کے لیے شامل ہیں[11]؛ بیکٹیریا کی شناخت کے لیے رائبوسومل 16S rDNA[12] ]، رائبوسومل انٹرنل ٹرانسکرائبڈ اسپیسر (ITS) جین کے مخصوص ٹکڑے اور کوکیی شناخت کے لیے CO I کی ترتیب[13]؛ پودوں میں مائٹوکونڈریل جینوم کی سست ارتقاء کی شرح کی وجہ سے، بارکوڈ کے ٹکڑے بنیادی طور پر کلوروپلاسٹ جینوم پر منتخب کیے جاتے ہیں مجوزہ جین کے ٹکڑوں میں بنیادی طور پر rpoB، rpoC1، matK، rbcL، اور UPA شامل ہیں، اور نان کوڈنگ والے خطے کے ٹکڑے شامل ہیں atpH-atpH trnH-psbA، psbK-psbI، اور

نیوکلیٹیڈ جین ITS[14]۔ 2006 میں، چن شیلن کے تحقیقی گروپ نے 6,600 سے زیادہ پودوں کے نمونوں پر ITS2 کی امتیازی صلاحیت کا تجربہ کیا، اور پتہ چلا کہ ITS2 کی انواع کی سطح پر شناخت کی کارکردگی 92.7 فیصد تک زیادہ تھی، جس سے یہ ظاہر ہوتا ہے کہ ITS2 کی ترتیب معیاری DNA بارکوڈز کی شناخت کر سکتی ہے۔ دواؤں کے پودوں اور قریب سے متعلقہ پرجاتیوں. ITS2 کو دواؤں کے پودوں کے لیے ایک نئی قسم کے یونیورسل DNA بارکوڈ کے طور پر استعمال کیا گیا تھا [15]، اور بین الاقوامی ہم مرتبہ ماہرین نے اسے تسلیم کیا تھا [16]۔

2013 میں، نیشنل فارماکوپیا کمیٹی نے "چینی فارماکوپیا" کے ضمنی ایڈیشن میں چینی ادویاتی مواد کے لیے ڈی این اے بارکوڈز کی مالیکیولر شناخت کے لیے رہنما اصولوں کو شامل کرنے پر تبادلہ خیال کیا اور منظوری دی۔ ITS2 پودوں کے ادویاتی مواد کے لیے بنیادی DNA بارکوڈ شناختی نظام ہے [17]۔

اس وقت، بہت سے اسکالرز نے Cistanche پودوں پر سالماتی شناخت کی تحقیق کی ہے۔ چن شیلن وغیرہ کی تحقیق کے مطابق۔ [18]، ITS2 دواؤں کے پودوں کی شناخت کے لیے معیاری بارکوڈ ترتیب کے طور پر موزوں ہے۔ Sun Zhiying et al [19] نے پایا کہ ITS2 کی ترتیب کو چینی جڑی بوٹیوں کی دوا Cistanche deserticola اور DNA بارکوڈز میں اس کی جعلی مصنوعات کی مؤثر طریقے سے شناخت کرنے کے لیے بنیاد کے طور پر استعمال کیا جا سکتا ہے۔ Wang Xiaoyue et al[20] نے ITS2 بارکوڈز کا استعمال Cynomorium، Cistanche، Liedang اور Cistanche کی 4 عام مبہم مصنوعات کی شناخت کے لیے کیا، اور Cistanche کی مبہم مصنوعات کا "سالماتی شناختی کارڈ" کامیابی سے قائم کیا۔ ITS2 ترتیب کے ذریعے دواؤں کے پودوں کی شناخت کا طریقہ نسبتاً پختہ ہے، اور اس میں تیز رفتاری، درستگی اور کارکردگی کے فوائد ہیں۔ لہذا، Cistanche پودوں کی شناخت کے لیے ITS2 ترتیب کا استعمال عام طور پر استعمال ہونے والا طریقہ بن گیا ہے۔

1.3 ڈی این اے بارکوڈنگ کا ورک فلو

ڈی این اے بارکوڈنگ کا ورک فلو مالیکیولر فائیلوجنیٹک ریسرچ کے آپریشن جیسا ہی ہے، اور اس کے اہم مراحل کو شکل 1 میں دکھایا گیا ہے۔ Gu Xiuyan [21] نے ITS کی بنیادی ترتیب حاصل کی اور پرجاتیوں کے درمیان فرق کا تجزیہ کیا، اور پایا کہ Cistanche کا گہرا تعلق ہے۔ Cistanche نمکین سے، اور Lanzhou میں Cistanche کا Cistanche سے گہرا تعلق ہے، جو Cistanche کے منشیات کے نئے ذرائع کی نشوونما کے لیے ایک بنیاد بھی فراہم کرتا ہے۔ بنیاد Li Zhenhua et al[22] نے Cynomorium، Cistanche اور Huanghua Liedang پر DNA سالماتی شناخت کی تحقیق کی، اور سائٹ کے مخصوص PCR کے ذریعے Cistanche اور جعلی Cynomorium، Cistanche اور Huanghualiedang کی تیز اور درست شناخت کا احساس کیا۔

مختصراً، ڈی این اے بارکوڈز کا استعمال کرتے ہوئے پودوں کی انواع کی شناخت کے لیے پہلے سے ہی ایک نسبتاً مکمل عمل موجود ہے۔ ڈی این اے کی ترتیب کا تجزیہ کرکے سیستانچے کے پودوں کی شناخت کرنا اور متعلقہ ڈیٹا بیس قائم کرنا مستقبل میں سیستانچے پودوں کی شناخت اور درجہ بندی کے لیے مزید بنیاد فراہم کرسکتا ہے۔

1.4 ڈی این اے بارکوڈنگ کا ڈیٹا تجزیہ

حاصل کردہ ڈیٹا پر کارروائی اور تجزیہ کرنا ایک بہت اہم کام ہے[18]۔ ترتیب مکمل ہونے کے بعد، کم معیار کی ترتیب اور پرائمر علاقوں کو ہٹانے کے لیے ترتیب کا موازنہ اور دستی اصلاح کی جاتی ہے۔ عام طور پر استعمال ہونے والے سافٹ ویئر میں Chromas، CExpress[23]، وغیرہ شامل ہیں۔ حتمی ترتیب کا جینیاتی فاصلہ تجزیہ عام طور پر MEGA سافٹ ویئر [24] کے ذریعے مختلف پودوں کی انواع کے نمونوں کے درمیان جینیاتی فاصلے کا تجزیہ کرنے کے لیے کیا جاتا ہے، اور K2P ماڈل [25-26] کا استعمال انواع کے درمیان مخصوص فاصلے کا حساب لگانے کے لیے کیا جاتا ہے۔ ; پھر ترقیاتی درخت (https://itol.embl.de/) کو بہتر اور خوبصورت بنانے کے لیے iTol آن لائن ویب سائٹ [27] کا استعمال کرتے ہوئے پڑوسی-جوائننگ (NJ) فائیلوجنی ٹری بنائیں، اور ہر شاخ کی سپورٹ ریٹ چیک کریں۔ بوٹسٹریپ (1000 تکرار)۔

BLAST طریقہ BLAST پر مبنی سرچ الگورتھم ہے۔ جین کے ٹکڑوں اور پرجاتیوں کی شناخت کے کام کے بعد کے تجزیے کے لیے GenBank ڈیٹا بیس (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/) پر پرجاتیوں کی شناخت کے لیے ایک حوالہ ترتیب ڈیٹا بیس قائم کرنا یا ڈاؤن لوڈ کرنا ضروری ہے [28]۔ Xu Danyun et al[29] نے Lauraceae پودوں کی 22 اقسام کی شناخت کے لیے DNA بارکوڈ یونیورسل پرائمر کے 3 جوڑے استعمال کیے، اور پودوں کی 20 اقسام کی کامیابی سے شناخت کی۔ Adolfo et al[30] نے ITS2 اور matK بارکوڈز کا استعمال کرتے ہوئے Pueraria پودوں کی 3 اقسام کی کامیابی سے شناخت کی۔ مندرجہ بالا مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ دواؤں کے پودوں کے ڈی این اے کی ترتیب کو حاصل کرنے اور ان کا تجزیہ کرنے سے، پودوں کی انواع کی جلد اور مؤثر طریقے سے شناخت کی جا سکتی ہے۔

2 Cistanche پودوں کی شناخت میں دیگر مالیکیولر مارکر تکنیکوں کا اطلاق

جانداروں کے لیے، سالماتی سطح سے اوپر ان کے خصائص کا تعین بالآخر سالماتی خصلتوں سے ہوتا ہے۔ مورفولوجیکل تجزیہ [31] اور کروموسوم تجزیہ [32] کے مقابلے میں، مالیکیولر مارکر حیاتیاتی جینیاتی تنوع کا حقیقی چہرہ ظاہر کر سکتے ہیں۔ ثروت وغیرہ نے ایمپلیفائیڈ فریگمنٹ لینتھ پولیمورفزم (اے ایف ایل پی)، سلیکٹیو ایمپلیفائیڈ پولیمورفک مائیکرو سیٹلائٹ لوکس ٹیکنالوجی (ایس اے ایم پی ایل)، سادہ انٹرسیکوئنس ایمپلیفیکیشن آف ریپیٹس (آئی ایس ایس آر)، رینڈم ایمپلیفائیڈ پولیمورفک ڈی این اے (آر اے پی ڈی) اور دیگر مالیکیولر مارکر تکنیکوں کا استعمال کیا جن میں جینیاتی فرقوں کا پتہ لگایا گیا۔ Tribulus terrestris کے نمونے ہندوستان میں مختلف جگہوں سے جمع کیے گئے، اور نتائج سے معلوم ہوا کہ یہ چار سالماتی مارکر تکنیک ہر جغرافیائی خطے کے لیے منفرد ڈی این اے فنگر پرنٹس حاصل کرسکتی ہے۔ بین الاقوامی یونین فار دی پروٹیکشن آف پلانٹ ورائٹی رائٹس (UPOV) DNA مالیکیولر مارکر کی شناخت کو فصلوں کی اقسام کی DUS (مختلف یکسانیت اور استحکام) کی جانچ کے لیے معاون ذرائع کے طور پر بھی استعمال کرتی ہے [34]۔ فی الحال، مالیکیولر مارکر ٹیکنالوجیز جیسے کہ AFLP، RAPD، اور ISSR نسبتاً پختہ اور بڑے پیمانے پر Cistanche پودوں کی شناخت میں استعمال ہوتی ہیں (ٹیبل 1)۔

سپورٹ:

wallence.suen@wecistanche.com 0015292862950