عمر اور لمبی عمر حیاتیات کے لیے ہمیشہ موہک موضوعات رہے ہیں۔ خود تجدید کی صلاحیت کے ساتھ بالغ اسٹیم سیل کی ایک قسم کے طور پر

از راہ کرم رابطہ کریںoscar.xiao@wecistanche.comمزید معلومات کے لیے

خلاصہ:mesenchymal اسٹیم سیلز (MSCs) میں سنسنی نہ صرف MSCs کو دوبارہ پیدا کرنے والی دوائیوں میں استعمال کرنے میں رکاوٹ بنتی ہے بلکہ یہ حیاتیاتی عمر بڑھنے اور انحطاطی بیماریوں کی نشوونما سے بھی گہرا تعلق رکھتی ہے۔ اس مطالعہ میں، ہم نے کینائن بون میرو سے ماخوذ MSCs (cBMSCs) پر کرکومین (Cur) کے عمر مخالف اثرات کی چھان بین کی اور آٹوفجی کی ماڈیولیشن پر مبنی کارروائی کے ممکنہ طریقہ کار کو مزید واضح کیا۔ قبل از وقت سنسنی کا سیل ماڈل بنانے کے لیے معیاری طریقہ کار کے ساتھ cBMSCs کو وٹرو میں بڑھایا گیا تھا۔cistanche dosage redditہمارے شواہد اس بات کی نشاندہی کرتے ہیں کہ سی بی ایم ایس سی کے تیسرے حوالے کے مقابلے میں، سی بی ایم ایس سی کے چھٹے حوالے میں بہت سے عام سنسنی سے وابستہ فینوٹائپس کا مشاہدہ کیا گیا۔ Cur علاج cBMSC کی بقا کو بہتر بنا سکتا ہے اور مشاہدات کے مطابق CBMSC سنسنی کو روک سکتا ہے کہ Cur (1 uM) علاج کالونی بنانے والے یونٹ-فبرو بلوسٹس (CFU-Fs) کی کارکردگی کو بہتر بنا سکتا ہے اور pluripotent ٹرانسکرپشن عوامل (SOX) کے mRNA اظہار کو اپ گریڈ کر سکتا ہے۔ } اور نانوگ)، نیز سنسنی سے وابستہ بیٹا galactosidase (SA- -gal) سرگرمیوں اور سنسنی سے متعلق مارکر (pl6 اور p21) اور سوزش کے حامی مالیکیولز (ٹیومر نیکروسس فیکٹر) کے mRNA اظہار کو روکنا۔ (TNF-a)اور interleukin-6(IL-6))۔ مزید برآں، Cur（0.1 uM~10μM） کو آٹوفیجک سرگرمی میں اضافہ کرنے کا مشاہدہ کیا گیا، جیسا کہ مائکروٹوبول سے وابستہ پروٹین 1 لائٹ چین 3 (LC3)، unc51-کی طرح آٹوفیجی ایکٹیویٹ کناز کے اپ گریجولیشن سے شناخت کیا گیا۔ -1 (ULK1)، آٹوفیجی سے متعلق جین (Atg)7 اور Atg12، اور لائٹ چین 3 (LC3-II) کی قسم II کی نسل، اس طرح آٹوفیجک ویکیولز اور تیزابی ویکیولر آرگنیلز میں اضافہ ہوتا ہے، جیسا کہ p62 پروٹین کی سطح میں نمایاں کمی کا باعث بنتا ہے۔ مزید برآں، آٹوفیجی ایکٹیویٹر ریپامائسن (RAP) اور Cur کو جزوی طور پر cBMSCs کی سنسنی خیز خصوصیات کو بہتر بنانے کے لیے پایا گیا، جب کہ آٹوفیجی انحیبیٹر 3-میتھیلیڈینین (3-MA) کو cBMSCs کی سنسنی کو بڑھاتے ہوئے دکھایا گیا تھا اور Cur کا علاج کیا گیا تھا۔ دبی ہوئی آٹوفیجی کو بحال کرنے اور 3-MA-حوصلہ افزائی cBMSC سنسنی کا مقابلہ کرنے کے قابل۔ لہذا، ہمارا مطالعہ CBMSC سنسنی کو کم کرنے پر Cur-Induced autophagy کے اہم کردار اور اس کے اثرات پر روشنی ڈالتا ہے اور سنسنی میں تاخیر اور MSCs کی علاج کی صلاحیت کو بہتر بنانے کے لیے نئی بصیرت فراہم کرتا ہے۔

مزید جاننے کے لیے براہ کرم یہاں کلک کریں۔

مطلوبہ الفاظ:curcuminجوانی; آٹوفجی کینائن بون میرو سے ماخوذ mesenchymal اسٹیم سیل

1. تعارف

عمر اور لمبی عمر حیاتیات کے لیے ہمیشہ موہک موضوعات رہے ہیں۔ بالغ اسٹیم سیل کی ایک قسم کے طور پر جس میں خود کی تجدید، امیونوسوپریشن، تفریق اور منتقلی کی صلاحیت ہوتی ہے، mesenchymal اسٹیم سیل (MSCs) بڑے پیمانے پر مختلف ٹشوز اور اعضاء کے اندر رہتے ہیں، جیسے بون میرو، ایڈیپوز ٹشو، ایمنیٹک فلوئڈ، نال، نال ہڈی، اور عضلات [1،2]، اور ایک حیاتیات کی پوری زندگی میں ٹشو ہومیوسٹاسس کو برقرار رکھنے میں ایک اہم کردار ادا کرتے ہیں [3،4]۔ جمع ہونے والے شواہد سے یہ بات سامنے آئی ہے کہ حیاتیاتی بڑھاپے اور بہت سی انحطاطی بیماریوں کی نشوونما ایم ایس سی سنسنی [5,6] سے منسوب ہو سکتی ہے۔ اس کے علاوہ، MSCs سیل پر مبنی دوبارہ تخلیقی تھراپی کے امید افزا ذرائع ہیں، لیکن عام طور پر علاج کے لیے MSCs کی کم از کم ٹرانسپلانٹیشن نمبر (20-100 ملین) حاصل کرنے کے لیے وٹرو میں توسیع کی ضرورت ہوتی ہے [7]۔ تاہم، ان وٹرو کلچر MSCs کے in vivo مائیکرو ماحولیات کو مکمل طور پر نقل کرنے کے قابل نہیں ہے، اور ناگزیر طور پر سیلولر سنسنی کو متحرک کرتا ہے [8,9] mitotic خلیات میں سنسنی مختلف قسم کے دباؤ کے جواب میں ہوتی ہے، جیسے کہ telomere dysfunction [10]، DNA نقصان [11]، آکسیڈیٹیو تناؤ [12]، اور آنکوجین ایکٹیویشن [13]، اور بالآخر سیل ڈویژن کے خاتمے کا باعث بنتا ہے۔ مزید یہ کہ سنسنی MSCs حیاتیاتی افعال پر منفی اثر ظاہر کرتے ہیں، بشمول امیونو موڈولیشن، تفریق، اور ہجرت [14]۔ بہت سے کام نے MSCs میں سنسنی کو روکنے کے لئے موثر حکمت عملی قائم کرنے کی کوشش کی ہے۔ حال ہی میں، کئی جڑی بوٹیوں سے ماخوذ مصنوعات حیاتیات کی صحت اور لمبی عمر کو فروغ دینے کے لیے تجویز کی گئی ہیں اور یہ MSC سنسنی میں تاخیر کے لیے امید افزا ٹولز ہو سکتی ہیں [15]۔

Cistanche بڑھاپے کو روک سکتا ہے۔

Curcumin(Cur)، ایک ہائیڈروفوبک پولی فینول جو روایتی چینی طب ہلدی سے نکالا جاتا ہے، اپنے سوزش، اینٹی آکسیڈینٹ، اینٹی اپوپٹوٹک، اینٹی ٹیومر، اور ٹشو کے خلیوں میں عمر بڑھنے کے خلاف اثرات اور کچھ بیماریوں کے نمونوں کی وجہ سے خاصی توجہ مبذول کرایا ہے۔ {4}}]۔ متعدد مطالعات نے ثابت کیا ہے کہ Cur عمر سے متعلقہ بیماریوں میں صحت سے متعلق فوائد رکھتا ہے، بشمول osteoarticular، اعصابی، تولیدی، اور قلبی امراض [20-24]۔ عمر بڑھنے کا تعلق عضلاتی تبدیلیوں اور آسٹیوآرٹیکولر بیماریوں کے آغاز اور بڑھنے سے ہے۔ Cur کے ساتھ دائمی غذائی مداخلت درمیانی عمر کے بندروں میں ہاتھ اور ہندسوں کے موٹر فنکشن کو بہتر بنانے کے لیے پائی گئی اور اس کے بوڑھے کنکال کے پٹھوں پر فائدہ مند اثرات مرتب ہوئے [25,26]۔ Buhrmann اور ساتھیوں کے دستیاب اعداد و شمار نے انکشاف کیا ہے کہ Cur chondrocyte بقا اور اشتعال انگیز ردعمل [27,28] کو متوازن کرکے ماحول سے ماخوذ آسٹیو ارتھرائٹس کو کم کرسکتا ہے۔ مزید برآں، Cur آٹوفجی اور سوزش میں ثالثی کے ذریعے نیورو پروٹیکٹو اثرات مرتب کرتا ہے اور اس وجہ سے نیوروڈیجینریٹیو بیماریوں، جیسے کہ الیگزینڈر کی بیماری، الزائمر کی بیماری، اور پارکنسنز کی بیماری [29,30] کے مریضوں کے لیے ایک مؤثر علاج ہو سکتا ہے۔

درحقیقت، حقیقت یہ ہے کہ Cur کے پاس pleiotropic سرگرمی ہے MSCs [31,32] پر ان کی ایکٹیویشن اور تحفظ کے اثرات سے منسوب کیا جا سکتا ہے۔ متعدد مطالعات نے اس بات کی تصدیق کی ہے کہ Cur مدافعتی صلاحیتوں کو منظم کرنے میں ملوث ہے۔ MSCs کی مختلف سیل نسبوں (neurocyte، chondrocyte، adipocyte، اور osteoblast) کی امتیازی صلاحیت، اور متعدد سگنلنگ میکانزم میں اس عمل میں شامل ہے [2831,33-35]۔ مزید برآں، Cur کو ایک اچھا اینٹی آکسیڈنٹ بھی سمجھا جاتا ہے جس کے ذریعے ٹیلومیریز ریورس ٹرانسکرپٹیس (TERT) جین اظہار [36] میں اضافے کی وجہ سے چوہے کے ایڈیپوز ٹشو سے ماخوذ mesenchymal اسٹیم سیلز (ADSCs) کی عمر کو بہتر بنایا جاتا ہے۔ ایک حالیہ مطالعہ سے پتہ چلتا ہے کہ Cur کے ذریعہ p65 کی روک تھام انسانی نال سے ماخوذ MSCs [37] میں سیلولر سنسنی اور سوزش کو چالو کرنے سے روک سکتی ہے۔cistanche اقتباس کے فوائدظاہر ہے، MSCs میں Cur کے بڑھاپے کے مخالف اثرات پر ان کی بے پناہ علاج کی صلاحیت کی وجہ سے زیادہ توجہ مرکوز کی گئی ہے، لیکن اس اثر کے زیر اثر میکانزم ابھی تک واضح نہیں ہیں۔ ان وٹرو اسٹڈیز کے کچھ شواہد نے اس بات کی تصدیق کی ہے کہ Cur کے ذریعے کیے گئے فائدہ مند اثرات کو اس کی آٹوفجی کی ماڈیولیشن سے منسوب کیا جانا چاہیے [29,38-41]۔ ہان اور ساتھیوں نے یہ ظاہر کیا کہ Cur انسانی نال کے رگوں کے اینڈوتھیلیل سیلز (HUVECs) کو H2O2-حوصلہ افزائی آکسیڈیٹیو نقصان سے بچا سکتا ہے اور یہ کہ مثبت اثرات فاسفیٹائیڈیلینوسیٹول 3-کناز (PI3K)/Akt/ کے ذریعے آٹوفجی کو بڑھانے سے پیدا ہوتے ہیں۔ ریپامائسن (ایم ٹی او آر) کی روک تھام کا ممالیہ ہدف [40]۔ ایک اور مطالعہ سے پتہ چلتا ہے کہ Cur ہائپوکسیا/ری آکسیجنیشن (H/R) کی حوصلہ افزائی اپوپٹوسس اور کارڈیو مایوسائٹس کے درمیان ضرورت سے زیادہ آٹوفجی کو روک کر سیل کی بقا کو فروغ دینے کے قابل ہے [41]۔ لہذا، چاہے Cur آٹوفجی کے مثبت یا منفی ریگولیٹر کے طور پر کارکردگی کا مظاہرہ کرتا ہے تناؤ پیدا کرنے والے محرک اور سیلولر ترتیب پر منحصر ہے، اور اس بات کا تعین کرنے کے لیے مزید تفصیلات کی ضرورت ہے کہ آیا Cur کے ذریعے آٹوفیجی کی ماڈیولیشن MSC سنسنی میں تاخیر کے لیے ایک موثر حکمت عملی ہے۔ انٹرا سیلولر مادوں کے لیے انحطاط اور ری سائیکلنگ پاتھ وے کے اصول کے طور پر، آٹوفیجی سیلولر ہومیوسٹاسس کو برقرار رکھنے اور ماحولیاتی دباؤ کو برداشت کرنے میں ایک اہم کردار ادا کرتی ہے اور اس نے سیلولر سنسنی میں تاخیر اور عمر سے متعلقہ بیماریوں کے علاج کی بے پناہ صلاحیت کا مظاہرہ کیا ہے۔ آرگنیل کی خرابی اور زہریلے میٹابولائٹ کا جمع سینسنٹ MSCs کی کلیدی خصوصیات ہیں [42]، اس طرح آٹوفجی اور سنسنی کے درمیان ممکنہ ربط کا مشورہ دیتے ہیں۔ ما اور ساتھیوں نے پایا کہ عمر رسیدہ BMSCs کی آٹوفیجک سرگرمی نوجوان BMSCs کے مقابلے میں کم ہو گئی تھی اور یہ کہ آٹوفجی روکنے والا 3-میتھیلاڈینین (3-MA) نوجوان MSCs میں سنسنی کو تیز کر سکتا ہے۔ اس کے برعکس، انھوں نے پایا کہ آٹوفجی ایکٹیویٹر ریپامائسن (RAP) عمر رسیدہ BMSCs کی حیاتیاتی خصوصیات کو جزوی طور پر بحال کر سکتا ہے[5]۔ ایک حالیہ مطالعہ نے D-galactose (D-gal) کے ذریعے حوصلہ افزائی MSC سنسنی میں RAP اور 3-MA کی ملازمت کے ذریعے ماڈیولڈ آٹوفیجی کے کردار کی جانچ کی اور یہ ظاہر کیا کہ RAP نے MSC سنسنی کو نمایاں طور پر کم کیا [43]۔ دلچسپ بات یہ ہے کہ متعدد مطالعات نے یہ ثابت کیا ہے کہ سنسنی MSCs میں آٹوفیجی میں اضافہ دیکھا گیا ہے اور یہ کہ MSC سنسنی کے عمل کو برقرار رکھنے کے لئے آٹوفجی ناگزیر ہے [44,45]۔ لہذا، آیا آٹوفیجی کو MSCs میں سنسنی کا مثبت یا منفی ریگولیٹر سمجھا جا سکتا ہے، یہ متضاد اور مبہم ہے۔ نتیجتاً، آٹوفیجی، MSC سنسنی، اور Cur کے درمیان تعلق کی چھان بین کرنا دلچسپ ہوگا، جو سنسنی میں تاخیر اور MSCs کی علاج کی صلاحیت کو بہتر بنانے کے لیے ایک وسیع تناظر فراہم کر سکتا ہے۔

اس مطالعے میں، ہمارا بنیادی مقصد یہ واضح کرنا تھا کہ آیا Cur کا علاج کینائن بون میرو سے ماخوذ MSC (cBMSC) کے سنسنی میں تاخیر کر سکتا ہے اور کیا بنیادی طریقہ کار آٹوفجی کی ماڈیولیشن سے منسلک تھا۔ اس مقصد کے لیے، ہم نے سنسینٹ سی بی ایم ایس سی میں کر کے سامنے آنے کے بعد فینو ٹائپک خصوصیت، آٹوفیجک سرگرمی، اور جین کے اظہار کا جائزہ لیا، ساتھ ہی یہ بھی کہ آیا آٹوفیجی اور اس کے سی بی ایم ایس سی کے سنسنی پر اثرات کے درمیان تعلق کا تعین 3-MA اور RAP کے استعمال سے کیا جاتا ہے۔ .

2. نتائج

2.1 سی بی ایم ایس سی کی خصوصیات

سی بی ایم ایس سی کو معیاری طریقہ کار کے ساتھ وٹرو میں بڑھایا گیا تھا اور اسے نو نسلوں میں مستحکم طور پر گزرتے ہوئے دکھایا گیا تھا (ڈیٹا نہیں دکھایا گیا)۔ cBMSCs نے کلچرنگ کے پورے عمل میں پلاسٹک سے منسلک اور فائبروبلاسٹ جیسی ظاہری شکل ظاہر کی (شکل 1A)۔ سی بی ایم ایس سی کی تفریق کی صلاحیت کی تصدیق ایڈیپوجینک اور آسٹیوجینک انڈکشن (شکل 1B، C) سے ہوئی۔ سی بی ایم ایس سی کے امیونو فینوٹائپ کا فلو سائٹومیٹری کا استعمال کرتے ہوئے اندازہ کیا گیا۔ نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ سیل کی آبادی نے مثبت طور پر CD90، CD105، اور ITGB1 کا اظہار کیا، اور منفی طور پر CD31، CD34، اور CD45 کا اظہار کیا، جو کہ hematopoietic اصل (شکل 1 اور جدول 1) کے بجائے ان کے mesenchymal کی تجویز کرتے ہیں۔

2.2.cBMSCs وٹرو میں توسیع کے ساتھ بتدریج سنسنی خیز خصوصیات کو ظاہر کرتا ہے

ابتدائی گزرنے والے cBMSCs (P1 اور P3) ایک لمبی فیوسیفارم یا تکونی شکل دکھاتے ہیں اور وٹرو میں ترقی کے بعد ایک بھنور میں ترتیب دیے جاتے ہیں (شکل 2A)۔ اس کے بعد، cBMSCs نے وٹرو میں طویل مدتی کاشت کے دوران آہستہ آہستہ سنسنی سے وابستہ فینوٹائپس کو ظاہر کیا، جس کی خصوصیت ایک وسیع اور چپٹی شکل اور پھیلاؤ میں کمی (شکل 2A، B) ہے۔ مزید برآں، کالونی بنانے والی یونٹ فبروبلاسٹ (CFU-F) پرکھ کے نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ CFU-F کی تعداد اور کالونیوں کا سائز دونوں ثقافتی حصئوں (شکل 2C) کے ساتھ نمایاں طور پر کم ہو گئے تھے، جو کہ نیچے کی سطح کے mRNA کے مطابق تھے۔ 6ویں اور 9ویں حوالے (شکل 2G) میں pluripotent ٹرانسکرپشن عوامل نانوگ اور SOX-2 کا اظہار۔

Senescence سے وابستہ -galactosidase (SA- -gal) ایک لائسوسومل انزائم ہے، جس کی سرگرمی سیلولر سنسنی کے ساتھ مضبوطی سے منسلک ہے [46]۔ SA- -گیل سٹیننگ کے نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ SA- -گل مثبت خلیوں کی تعداد 7.5± 2.4 فیصد (P3) سے بڑھ کر 65 ہو گئی۔{12}} ±5۔{14}} فیصد (P6) اور 87.3± 3.3 فیصد (P9) بالترتیب (شکل 2D)۔چنگیز خانمزید برآں، سیل سائیکل کناز انحیبیٹرز (p21 اور p16) اور سوزش کے حامی مالیکیولز (TNF- اور IL-6) کے اظہار میں اضافے کا پتہ چلا، جو کہ سنسنی سے وابستہ سیکریٹری فینوٹائپ (SASP) کے اجزاء کے طور پر کام کرتے ہیں۔ 6ویں اور 9ویں حوالے میں (شکل 2E، F)۔ لہذا، سی بی ایم ایس سی سینسنٹ فینوٹائپس میں گزرنے پر منحصر اضافے کی نمائش کرتے ہیں اور 9ویں حوالے سے پھیلاؤ کو روکتے ہیں۔

2.3۔ Cur cBMSCs کی سنسنی خیز حالت کو ختم کرتا ہے۔

6th گزرنے والے cBMSCs کو Cur کی غیر موجودگی یا موجودگی میں 0.1،0.5,1,5، یا 10μmol/mL（μM） کی خوراکوں پر انکیوبیٹ کیا گیا تھا۔ 12h,24h, 48h, اور 72h، اور CCK-8 کا استعمال کرتے ہوئے ان کی سیلولر قابل عملیت کا اندازہ لگایا گیا۔ نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ Cur (0.1-10 uM) cBMSCs میں زہریلا اثر پیدا نہیں کرتا ہے اور علاج کے 24 گھنٹے بعد cBMSCs کی عملداری کو بڑھانے پر واضح اثرات مرتب کرتا ہے (شکل 3A)۔ سیلولر سنسنی پر Cur کے اثر کا اندازہ کرنے کے لیے، cBMSCs کو 24 گھنٹے کے لیے Cur (0.1,1، اور 10 uM) کے مختلف ارتکاز کا سامنا کرنا پڑا۔ نتیجہ سے پتہ چلتا ہے کہ CBMSCs میں SA- -gal-positive خلیات کی تعداد CBMSCs میں Cur（1 μM اور 10uM） کنٹرول گروپ (شکل 3B) کے مقابلے میں نمایاں طور پر کم ہوئی تھی۔ CFU-F assays کا استعمال CBMSCs (P6) کی خود تجدید کارکردگی پر Cur کے اثرات کا جائزہ لینے کے لیے کیا گیا تھا۔ Cur کی 1 uM کی خوراک cBMSCs کے CFU-F کی کارکردگی کو بہتر بنانے کے لیے سب سے زیادہ مؤثر ارتکاز پایا گیا۔ تاہم، 10 μM Cur کی خوراک نے cBMSCs (شکل 3C) کی خود تجدید کارکردگی پر منفی اثرات مرتب کیے، اس کے علاوہ، Cur کے سنسنی خیزی کے خاتمے کا اثر 1 μM کی خوراک پر دیکھا گیا، جو p16 کی کمی سے ظاہر ہوا، IL-6، اور TNF- اور نانوگ اور SOX-2 (شکل 3D-F) کے اظہار کی اپ گریڈیشن۔cistanche زندگی کی توسیعایک ساتھ مل کر، یہ نتائج بتاتے ہیں کہ Cur 1 uM کی خوراک پر مؤثر طریقے سے سینسنٹ cBMSCs پر سائٹو پروٹیکٹو اثرات مرتب کر سکتا ہے۔

2.4 CBMSCs میں Cur ٹریٹمنٹ بہتر آٹوفیجک سرگرمی

لائوسووم فنکشنل ایکٹیویشن آٹوفجی کے دوران ایک اہم کردار ادا کرتی ہے، اور لائسوسومل تیزابیت کے عوارض لائسوسومل انحطاط کے فنکشن [38] کے خلاف ہیں۔ لہذا، آٹوفیجک سرگرمی کا پتہ سب سے پہلے لائسو ٹریکر سٹیننگ کے ذریعے پایا گیا، جو لائسوسومل تیزابیت کی نگرانی کر سکتا ہے۔ نتیجہ نے اشارہ کیا کہ Cur خوراک کے ساتھ پیشگی شرط لگانے سے cBMSCs میں سرخ فلوروسینس کی شدت میں اضافہ ہوا، جس نے تجویز کیا کہ lysosome acidification میں اضافہ ہوا ہے (شکل 4D)۔

CBMSCs کی آٹوفجی پر Cur کے اثرات کا مزید جائزہ لینے کے لیے، ہم نے آٹوفیگوسم مارکر مائکروٹوبول سے وابستہ پروٹین 1A/1Belight چین 3 (LC3) اور p62/SQSTM1 کا استعمال کیا، جو آٹوفیجک بہاؤ کا جائزہ لینے کے لیے اہم مارکر ہیں،[4748 ] Cur کی نمائش کے بعد cBMSCs میں بڑھتی ہوئی آٹوفیجک سرگرمی دیکھی گئی، جیسا کہ LC{{10}I سے LC3-II کی تبدیلی میں خوراک پر منحصر اضافے سے دکھایا گیا ہے، اس کے ساتھ ساتھ p62 میں تیزی انحطاط (شکل 4A) اس کے علاوہ، ATG7، ATG12.LC3 کا mRNA اظہار۔ اور ULK1 کو Cur علاج (شکل 4B) کے بعد اپ گریڈ کیا گیا تھا۔ ٹرانسمیشن الیکٹران مائکروسکوپی کا استعمال کرتے ہوئے سی بی ایم ایس سی کے الٹرا سٹرکچر کی جانچ کی گئی۔ اس کے بعد ہم نے 24 گھنٹے (شکل 4C) کے لئے 0.1، 1، اور 10 μM کی خوراکوں میں Cur کے ساتھ علاج کے بعد cBMSCs میں آٹوفاگوسومز اور آٹولیسوسم کی تشکیل میں اضافہ دیکھا۔cistanche nzامیونو فلوروسینس سٹیننگ نے یہ بھی ظاہر کیا کہ کر ٹریٹمنٹ (شکل 4E) کے ذریعہ ایل سی 3 کے خصوصیت والے پنکٹیٹ فلوروسینٹ نقطوں کی تعداد میں نمایاں اضافہ ہوا ہے۔ ان نتائج نے اشارہ کیا کہ Cur خوراک پر منحصر انداز میں lysosomal acidification اور autophagy ایکٹیویشن کو فروغ دے سکتا ہے۔

یہ مضمون Int سے ماخوذ ہے۔ جے مول سائنس 2021، 22، 11356۔ https://doi.org/10.3390/ijms222111356 https://www.mdpi.com/journal/ijms