پائیدار نوجوانوں کے لیے ٹرمینالیا بیلیریکا، فیلانتھس ایمبلیکا، تریفلا، اور کیریکا پپیتے کے عرق کے بڑھاپے کے مخالف اثرات

Jul 20, 2022

از راہ کرم رابطہ کریںoscar.xiao@wecistanche.comمزید معلومات کے لیے


خلاصہ:جیسے جیسے انسانی عمر لمبی ہوتی جاتی ہے، بہت سے لوگ بیرونی خوبصورتی کو سنبھالنے میں وقت اور پیسہ لگاتے ہیں۔ تاہم، ظاہری خوبصورتی کو سنبھالنے سے مضر اثرات پیدا ہونے کا نقصان ہوتا ہے یا یہ کہ اثر دیرپا نہیں رہتا۔ اس لیے خوبصورتی کے انتظام میں زیادہ سے زیادہ تاثیر، ماحول دوستی، اور پائیدار طریقے سے تحقیق اور ترقی کی ضرورت ہے۔ اس تحقیق کا مقصد تجرباتی طور پر عمر مخالف اثرات کی نشاندہی کرنا تھا، جیسے کہ جلد کی جھریوں اور لچک میں بہتری، بہیرا، فیلانتھس ایمبلیکا، تریفلا، اور کیریکا پپیتے کے عرق، اور ان کی سفیدی اور جھریوں کو فعال کاسمیٹک مواد کے طور پر ترقی کی تصدیق کرنا تھا۔ اس تحقیق میں ماحول دوست Terminalia bellirica، آملہ (Phyllanthus Emblica)، Triphala اور Carica papaya کا استعمال کرتے ہوئے ایک ٹھوس مرکب تیار کیا گیا اور تجرباتی نمونے نکالے گئے۔ تجرباتی نمونوں کی افادیت کو جانچنے کے لیے اینٹی آکسیڈینٹ ٹیسٹ، اینٹی بیکٹیریل ایکٹیویٹی ٹیسٹ، پولیفینول، فلیوونائڈ مواد، اور ڈیوڈورائزیشن ٹیسٹ کیے گئے۔cynomorium فوائدان تجربات کے طریقہ کار اور طریقوں کا خلاصہ اگلے مضمون میں دیا گیا ہے۔ اس تحقیق میں، ہم نے پایا کہ بہیرا، فیلانتھس ایمبلیکا، تریفلا، اور کیریکا پپیتے کے عرقوں نے سفیدی اور جھریوں کی بہتری پر نمایاں اثرات مرتب کیے ہیں اور یہ کہ ایتھنول پر مبنی عرقوں کو بطور شریک سالوینٹ استعمال کرنے کے اثرات اور بھی زیادہ ہیں۔ دوسرے لفظوں میں، بہیرا، فیلانتھس ایمبلیکا، تریفلا، اور کیریکا پپیتے کے عرقوں نے اینٹی آکسیڈنٹ، سفیدی اور شکن کو روکنے والے اثرات دکھائے، اور وہ عرق جو ایتھنول کو بطور حلول استعمال کرتے ہیں، زیادہ اثرات دکھاتے ہیں۔ خاص طور پر، ہم نے پایا کہ شریک سالوینٹ کے طور پر ایتھنول کا زیادہ سے زیادہ ارتکاز اس کی تاثیر کو 70 فیصد تک بڑھاتا ہے۔

مطلوبہ الفاظ:عمر مخالف اثر؛ ٹرمینالیا بیلریکا؛ آملہ Phyllanthus Emblica؛ تریفلا؛ کیریکا پپیتا؛ ماحول دوست مواد؛ پائیدار خوبصورتی کی دیکھ بھال

KSL17

مزید جاننے کے لیے براہ کرم یہاں کلک کریں۔

1. تعارف

تیزی سے صنعت کاری اور شہری کاری سنگین عالمی ماحولیاتی آلودگی اور وسائل کی کمی کا باعث بن رہی ہے، جس سے بنی نوع انسان کے مستقبل کو خطرہ ہے۔ ان وسائل کی تھکن اور محدودیت کو تسلیم کرتے ہوئے، پائیداری پر تحقیق حال ہی میں مختلف شعبوں میں فعال طور پر کی گئی ہے، اور ماحول دوست ترقی کے حصول کے لیے مختلف متبادلات تجویز کیے گئے ہیں [1]۔ کاسمیٹکس کی صنعت میں، قدرتی وسائل کا استعمال کرتے ہوئے مصنوعات تیار کرنے یا پائیدار خام مال کے متبادل کے لیے کوششیں کی جا رہی ہیں [2]۔ خاص طور پر، قدرتی کاسمیٹکس کے لیے صارفین کی ضروریات نئی مصنوعات کی ترقی کا باعث بن رہی ہیں جو ماحول دوستی کو فروغ دیتی ہیں۔

طبی ٹیکنالوجی کی ترقی اور معیار زندگی میں بہتری کی وجہ سے، جلد کی جھریوں، لچک، جلد کی سفیدی، اور متعلقہ کاسمیٹکس کی مارکیٹ کو بہتر بنانے میں دلچسپی بھی بڑھ رہی ہے [1]۔ جسم کو نقصان دہ بیرونی عوامل جیسے درجہ حرارت، نمی اور بالائے بنفشی شعاعوں سے بچانے کے لیے جلد ایپیڈرمس، ڈرمس، اور ذیلی بافتوں پر مشتمل ہوتی ہے [2]۔ جیسے جیسے جلد کی عمر بڑھتی ہے یا بالائے بنفشی شعاعوں کے سامنے آتی ہے، فائبرو بلاسٹس کے عمل اور خلیوں کی تعداد میں کمی کی وجہ سے کولیجن کی ترکیب کم ہوتی جاتی ہے۔ اس کے علاوہ، کولیگنیس اور ایلسٹیس، جو کولیجن کو توڑتے ہیں، جلد کی نمی میں کمی کو بڑھاتے ہیں اور جلد کی لچک اور لچک کو کم کرتے ہیں [3]۔

الٹرا وائلٹ شعاعیں ایک انتہائی اہم ماحولیاتی عوامل ہیں جو جلد کی عمر بڑھنے کا سبب بنتی ہیں [4]۔ جب جلد بالائے بنفشی روشنی کے سامنے آتی ہے، تو جلد میں ایک نقصان دہ میٹابولزم چالو ہوتا ہے، جو کولیجن اور ایلسٹن کے ساتھ غیر معمولی کراس لنکنگ کا باعث بنتا ہے، جو جلد کے بافتوں کو نقصان پہنچاتا ہے اور جلد کی جھریوں کا سبب بنتا ہے۔صحرائی آبشاراس طرح، ایسی سرگرمی والے مادے جو کولیجنیز اور ایلسٹیس کو روک سکتے ہیں، جلد کی جھریوں میں بہتری کا اثر ڈال سکتے ہیں [5]۔

Terminalia bellirica خاندان Terminalia کا ایک پرنپاتی درخت ہے جو بیکٹیریا اور مختلف بیماریوں پر اینٹی وائرل اثر رکھتا ہے۔ لہذا، ٹرمینالیا بیلیریکا کی اینٹی بیکٹیریل سرگرمی پر بہت سے مطالعہ کیے گئے ہیں، بنیادی طور پر ای کولی، اور پیلے رنگ کے اسٹیفیلوکوکس [6-10] میں۔ تاہم، جلد کی جھریوں میں بہتری یا لچک میں بہتری کے اثرات کے سلسلے میں ٹرمینالیا بلریکا پر مطالعہ محدود ہیں۔ Phyllanthus Emblica L.، ہندوستانی گوزبیری یا آملہ، "نئے جوان ہونے کا پھل" کے طور پر جانا جاتا ہے اور یہ مختلف بیماریوں اور بڑھاپے کو روکنے کا اثر رکھتا ہے، یہ خوبصورتی اور صحت کے لیے ضروری ہے اور اس میں وٹامن سی اور پولی فینول کی بڑی مقدار موجود ہوتی ہے جو خلیوں کے آکسیڈیشن کو روکتی ہے۔ اور آزاد ریڈیکلز کو کم کریں [1]۔ وٹامن سی کا اینٹی آکسیڈینٹ فنکشن خلیوں کو اضافی آزاد ریڈیکلز کے ذریعے تباہ ہونے سے روکتا ہے، جو انسولین جیسے نمو کے عنصر-1GF-1) کے سراو کو اکساتا ہے، جو جلد کی بہتری کو فروغ دیتا ہے، اور اس طرح کے عوامل کے اخراج کو روکتا ہے۔ جیسا کہ DK-1 اور TGF-11، اس طرح جلد کو صحت مند رہنے میں مدد ملتی ہے [12,13]۔

KSL18

Cistanche بڑھاپے کو روک سکتا ہے۔

تریفلا تین دواؤں کے پودوں کا مجموعہ ہے، Amalaki Phyllanthus Emblica (syn. Emblica Officinalis) Phyllanthaceae family، Haritaki (Terminalia chebula) Combretaceae family، اور Bahera (Terminalia bellirica) Combretaceae خاندان، اور قدیم زمانے سے استعمال ہوتا رہا ہے۔ یہ جسم کی قوت مدافعت کو بہتر بنانے کے لیے ایک بہت مفید آلہ ہے، کیونکہ یہ اینٹی جنز کے کسی بھی حملے سے لڑنے کے لیے جسم کی اینٹی باڈیز بنانے کی صلاحیت کو آسانی سے فروغ دیتا ہے [14]۔ املاکی وٹامن سی کا ایک بہترین ذریعہ ہے اور اس میں کیروٹین، نیکوٹینک ایسڈ، ڈی گلوکوز، ڈی فرکٹوز، رائبوفلاوین، ایمپیکول، اور میوک اور فیلیمبلک ایسڈز بھی ہوتے ہیں ہاریتاکی کو روایتی ادویات میں استعمال کیا جاتا ہے کیونکہ اس سے وابستہ فارماسولوجیکل سرگرمیوں کے وسیع میدان ہیں۔ اس پلانٹ میں موجود حیاتیاتی طور پر فعال کیمیکل۔ اس میں anthraquinone glycoside، chebulinic acid، tannic acid، terchebin، وٹامن C، اور arachidonic، linoleic، oleic، palmitic اور stearic acid ہوتے ہیں۔ یہ کینسر سیل لائنوں میں سیل کے پھیلاؤ اور سیل کی موت کی شرح کو روکتا ہے۔ بہیرا میں chebulagic acid، ellagic acid، اور اس کے ethyl ester، gallic acid، fructose، galactose، گلوکوز، mannitol اور rhamnose ہوتے ہیں [15]۔

کیریکا پپیتے[16] کے اینٹی بیکٹیریل عرقوں پر کی گئی ایک تحقیق کے مطابق، پپیتا سالمونیلا اور ٹائیفائیڈ جیسے روگجنک مائکروجنزموں کو دباتا ہے، جو گرمی کے علاج کے عمل کے لیے بائیو کیمیکل اشارے کے طور پر استعمال کیا جا سکتا ہے [17]، اور یہ بلڈ پریشر اور دل کی دھڑکن کو کم کرنے میں موثر ہے۔

دوسری طرف، فائٹوتھراپی کے طریقوں پر بہت سے مطالعہ کیے گئے ہیں، جو پودوں کے نچوڑ کے مخصوص اجزاء کو الگ نہیں کرتے ہیں لیکن پودوں کے نچوڑوں کے کچھ اجزاء کو الگ اور بہتر کرنے کے لیے سائنسی طریقہ کار استعمال کرتے ہیں۔ خاص طور پر، Terminalia bellirica، amla(Phyllanthus Emblica)، Triphala، اور Carica papaya ایسے مواد ہیں جن کے فارماسولوجیکل اثرات ثابت ہوتے ہیں، اس لیے انفرادی طور پر کچھ اجزاء کی فارماسولوجیکل افادیت کی بجائے ان کے مرکب کے امتزاج کی تصدیق کرنا زیادہ معنی خیز ہوگا۔

لہٰذا، اس تحقیق میں یہ تحقیق کی گئی کہ آیا ماحول دوست ٹرمینالیا بیلیریکا، آملا (فائلانتھس ایمبلیکا)، تریفلا، اور کیریکا پپیتے کے مرکب کو ایک پائیدار نقطہ نظر سے ادویات کے طور پر تیار کیے جانے کا امکان ہے، نہ کہ مختصر مدت میں۔ 2.

2. مواد اور طریقہ

اس مطالعہ میں، ہم نے Terminalia bellirica، amla (Phyllanthus Emblica)، Triphala، اور Carica papaya کا استعمال کرتے ہوئے ٹھوس مراحل کا ایک مرکب تیار کیا اور تجرباتی نمونے نکالے۔ تجرباتی نمونوں کی افادیت کو جانچنے کے لیے اینٹی آکسیڈینٹ ٹیسٹ، اینٹی بیکٹیریل ایکٹیویٹی ٹیسٹ، پولیفینول، فلیوونائڈ مواد، اور ڈی ڈی اوورائزیشن ٹیسٹ کیے گئے۔flavonoid نکالنے کا طریقہ pdfان تجربات کے طریقہ کار اور طریقے درج ذیل حصوں میں بیان کیے گئے ہیں۔ 2.1.ٹرمینالیا بیلیریکا، فیلانتھس ایمبلیکا، تریفلا، اور کیریکا پپیتے کے مرکب کی تیاری

Jibio Pharm Co., Ltd. (Goyang-si, Korea) سے فراہم کردہ Terminalia bellirica، Phyllanthus Emblica، Triphala، اور Carica Papaya کو صاف کرنے کے بعد، نمونوں کو 70 ڈگری پر 48 گھنٹے تک خشک کیا گیا اور 2 ملی میٹر کے سائز پر گرا دیا گیا۔ کم زمینی خام مال کو ایک خاص وزن (100 گرام: 100 گرام: 100 گرام: 100 گرام) کے ساتھ ملایا گیا تھا۔

2.2.ٹیسٹ کے نمونے تیار کرنا

ٹیسٹ کے نمونے تیار کرنے کے لیے، ایکسٹریکٹر (SC-CO2 ایکسٹرکشن سسٹم، Ilshin Autoclave Co., Ltd., Daejeon, Korea) کو دو گھنٹے کے لیے فراہم کیا گیا سپر کریٹیکل سیال تقریباً 40 ملی لیٹر فی منٹ کی بہاؤ کی شرح سے فراہم کیا گیا تھا 45 سے 55 ڈگری پر مکسچر، اور 100 سے 200 بار۔ بھری ہوئی سالڈ اسٹیٹ عمارت سے رابطہ کرکے اور سالڈ اسٹیٹ بلڈنگ سے نچوڑ نکال کر نکالنے کا عمل چار بار انجام دیا گیا۔ اس وقت، ایک ٹیسٹ نمونہ ایکسٹریکٹر کو ایتھنول کی فراہمی کی شرائط کے مطابق تیار کیا گیا تھا۔

KSL19

سب سے پہلے، TATP{{0}} کو کوئی ایتھنول فراہم نہیں کیا گیا تھا، اور 100 فیصد ایتھنول TATP-2 کو 1.0 ملی لیٹر فی منٹ، اور 70 فیصد کی بہاؤ کی شرح سے فراہم کیا گیا تھا۔ ایتھنول TATP-3 کو 1.0mL/منٹ کے بہاؤ کی شرح سے فراہم کیا گیا تھا۔

دوسرا، سپرکریٹیکل فلوئڈ اور ایکسٹریکٹ کا مرکب ایکسٹریکٹر سے باہر نکلا، پریشر ریگولیٹر (ایک بیک پریشر ریگولیٹر 2) کے ذریعے تقریباً 50 بار تک خارج کیا گیا، اور پھر موصلیت اور سیپریٹر تک پھیلایا گیا۔ نکالے گئے نچوڑ اور سیال کو الگ کرنے والے سے الگ کیا گیا تھا، اور الگ کیے گئے سیال کو کولر کے ذریعے مائع کیا گیا تھا جسے -1 ڈگری پر ایڈجسٹ کیا گیا تھا اور دوبارہ استعمال کے لیے ایک ذخائر میں محفوظ کیا گیا تھا۔ گردش کرنے اور فراہم کیے جانے والے سیال کے علاوہ، ذخائر میں ذخیرہ شدہ سیال کو پورے عمل سے سیال کے نقصان کی تلافی کے لیے بیرونی طور پر اضافی کیا جاتا تھا، اور اس سیال کو ایک پمپ کے ذریعے سپرکریٹیکل حالت میں دبایا جاتا تھا اور اسے ایکسٹریکٹر کے ذریعے واپس ایکسٹریکٹر تک پہنچایا جاتا تھا۔ گرمی ایکسچینجر. جداکار سے الگ کیے گئے نچوڑوں کو 0.45 um جھلی کے فلٹر کے ساتھ فلٹر کیا گیا اور ٹیسٹ کے نمونے تیار کرنے کے لیے خلا اور کمرے کے درجہ حرارت پر 3 گھنٹے کے لیے مرتکز کیا گیا (ٹیبل 1 دیکھیں)۔

2.3.کل پولی فینول اور کل فلاوونائڈ مواد پر تجربات 1. کل پولی فینول کے تجربات

سب سے پہلے، تیار کردہ تین نمونوں میں سے ہر ایک میں سے 100 ملی گرام لیا گیا اور 80 فیصد ایتھنول کا استعمال کرتے ہوئے 1{{10}} ملی لیٹر تک گھٹایا گیا۔ 100 ملی گرام گیلک ایسڈ لینے کے بعد 100 ملی لیٹر بنانے کے لیے 80 فیصد ایتھنول استعمال کیا گیا۔ دوسرا، اس محلول کی 0.1، 0.2،0.5، اور 1.0 ملی لیٹر کی مقدار لی گئی، اور 5 ملی لیٹر تک گھٹا ہوا حل معیاری حل کے طور پر استعمال کیا گیا۔ ایک ای ٹیوب میں 100 uL محلول اور 100 uL سوڈیم کاربونیٹ شامل کرنے کے بعد، Folin-Ciocalteu reagent (Sigma, St. Louis, MO, USA) کا 100 μL شامل کیا گیا، 30 سیکنڈ تک بھنور کے ساتھ ملا کر چھوڑ دیا گیا۔ 30 منٹ کے لئے ایک سیاہ جگہ میں. رد عمل کے حل کی جاذبیت قدر کو UV-vis spectrophotometer (Bekman, Germany) کا استعمال کرتے ہوئے 750 nm پر ماپا گیا۔ 2. فلاوونائڈ تجربہ

سب سے پہلے، تیار کردہ تین نمونوں میں سے ہر ایک میں سے 100 ملی گرام لیا گیا اور 80 فیصد ایتھنول کا استعمال کرتے ہوئے 10 ملی لیٹر تک گھٹایا گیا۔ 100 ملی گرام quercetin لینے کے بعد، 80 فیصد ایتھنول 100 ملی لیٹر بنانے کے لیے استعمال کیا گیا۔ دوسرا، اس محلول کی 0.1,0.2,0.5، اور 10mL کی مقدار لی گئی، اور 5 ملی لیٹر تک گھٹا ہوا محلول معیاری حل کے طور پر استعمال کیا گیا۔flavonoidsمجموعی طور پر، ایک ای ٹیوب میں 500 μL ٹیسٹ مائع اور معیاری مائع 10 فیصد ایلومینیم نائٹریٹ کے 100 μL اور 1 M پوٹاشیم ایسیٹیٹ کے 100 μL کے ساتھ شامل کیا گیا تھا۔ اختلاط کے 40 منٹ کے بعد، 415 nm پر جذب کو UV-vis spectrophotometer کا استعمال کرتے ہوئے ماپا گیا۔ 2.4.اینٹی آکسیڈینٹ کا تجربہ

1. ABTS ریڈیکل اسکیوینگنگ سرگرمی

تیار کردہ تین نمونوں میں سے ہر ایک میں سے 100 ملی گرام لینے کے بعد، پانی شامل کر کے 100 ملی لیٹر تک گھٹا دیا گیا۔ 7 ایم ایم اے بی ٹی ایس (سگما، یو ایس اے) اور 2.45 ایم ایم پوٹاشیم پرسلفیٹ کے مرکب کو کمرے کے درجہ حرارت پر 12 گھنٹے تک اندھیری جگہ پر رد عمل کیا گیا تاکہ ایک ABTS کیٹیشن بن سکے۔ پھر اسے 734 nm پر ایتھنول شامل کرکے ایڈجسٹ کیا گیا تاکہ جاذب کی قدر 0.70±0.02 ہو۔ ٹیسٹ سلوشن کے 100 μL اور تیار کردہ ABTS کے 100 μL محلول کو کمرے کے درجہ حرارت پر 7 منٹ تک رد عمل ظاہر کرنے کے لیے کنویں پلیٹوں میں شامل کیا گیا اور مائکروپلیٹ ریڈر (EpochTM2, BioTECH, Winooski, VI, USA) کے ذریعے ماپا گیا۔ 734 nm پر۔ ABTS ریڈیکل خاتمے کی شرح، یعنی، ABTS ریڈیکل اسکیوینگنگ سرگرمی، ٹیسٹ کے حل کے مقابلے میں فیصد ( فیصد ) کے طور پر شمار کی گئی تھی۔ 2. ڈی پی پی ایچ کی بنیاد پرست صفائی کی سرگرمی

KSL20

تیار کردہ تین نمونوں میں سے ہر ایک میں سے 100 ملی گرام لینے کے بعد، پانی شامل کر کے 100 ملی لیٹر تک پتلا کر دیا گیا۔ پھر 100 uL ٹیسٹ فلوئڈ اور 100 μL 0.2 mM DPPH (Sigma, NY, USA) کو 96-کنویں پلیٹوں میں ڈالا گیا اور، 30 منٹ کے بعد، مائیکرو پلیٹ ریڈر کا استعمال کرتے ہوئے جذب کو 517 nm پر ماپا گیا۔ ڈی پی پی ایچ ریڈیکل خاتمے کی شرح، یعنی، ڈی پی پی ایچ ریڈیکل اسکیوینگنگ ایکٹیویٹی، کو ٹیسٹ سلوشن کے مقابلے میں فیصد ( فیصد) کے طور پر شمار کیا گیا تھا۔ 3. SOS جیسی سرگرمی

تینوں تیار شدہ نمونوں کو پانی میں ایک مستقل ارتکاز میں پتلا کیا گیا اور پھر نمونے کے طور پر استعمال کیا گیا۔ Tris-HCl بفر کی 2.6 ملی لیٹر کی مقدار 8.5 ملی لیٹر پر درست کی گئی اور 0.2 ملی لیٹر 7.2 ایم ایم پائروگالول کو ٹیسٹ سلوشن کے 0.2 ملی لیٹر میں شامل کیا گیا اور 1{ کے لیے 25 ڈگری پر رد عمل ظاہر کیا۔ {13}} منٹ پھر اسے روکنے کے لیے رد عمل کے حل میں 1 N HCl کا 0.1 ملی لیٹر شامل کیا گیا۔ پائروگالول (سگما، NY، USA) آکسائڈائزڈ کی مقدار کو جذب کے لیے 420 nm پر ماپا گیا۔ 4. Xanthine oxidase inhibitory activity

تین تیار نمونوں کو ایک خاص حراستی میں پانی میں پتلا کیا گیا اور پھر نمونے کے طور پر استعمال کیا گیا۔ پھر {{0}.6 ملی لیٹر کا 0.1M پوٹاشیم فاسفیٹ بفر (pH7.5) اور {{10}}.2mL کا 1 mM xanthine کو 1 میں شامل کیا گیا۔ 0 ٹیسٹ حل کا ملی لیٹر۔ پھر رد عمل کو روکنے کے لیے 0.2 U/mL xanthine oxidase کا 0.1 mL شامل کیا گیا۔ تیار کردہ یورک ایسڈ کو 292 nm پر جاذبیت کے لیے ناپا گیا۔

2.5 سفید کرنے کی سرگرمی کا تجربہ

تین تیار نمونوں کو ایک خاص حراستی میں پانی میں پتلا کیا گیا اور پھر نمونے کے طور پر استعمال کیا گیا۔ 175 ایم ایم سوڈیم فاسفیٹ بفر (پی ایچ 6.8) کے {{0}.5 ملی لیٹر کی مقدار کو ٹیسٹ سلوشن کے 0.1 ملی لیٹر اور 0.2 ملی لیٹر میں شامل کیا گیا تھا۔ 10 ملی لیٹر L-DOPA (3,4-dihydroxy-L-phenylalanine) کو بھی ٹیسٹ سلوشن کے 0.1 ml میں شامل کیا گیا۔hesperidin استعمال کرتا ہےپھر 2 منٹ کے لیے 25 ڈگری پر رد عمل ظاہر کرنے کے لیے 110 U/mL محلول کا 0.2mL شامل کیا گیا، اور تیار کردہ DOPA کروم کو 475 nm پر جاذبیت کے لیے ناپا گیا۔ 2.6۔ جھوریاں کو ختم کرنے والی

تشخیصی تجربہ

شکن مخالف تشخیص کے لیے کولیجینیس انحیبیٹری ایکٹیویٹی اور ایلسٹیس انحیبیٹری سرگرمی کے تجربات کیے گئے۔ 1. کولیجینیس روکنے والی سرگرمی

تین تیار نمونوں کو ایک خاص حراستی میں پانی میں پتلا کیا گیا اور پھر نمونے کے طور پر استعمال کیا گیا۔ پھر 4 mM کیلشیم کلورائیڈ کو 0.1 M Tris-HCl بفر (pH7.5) میں شامل کیا گیا اور 0.2 ملی لیٹر محلول کو 4-فینائل ایزو بینزائل آکسی کاربونیل میں تحلیل کیا گیا۔ Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg (0.3mg/mL)۔ پھر 0.3mL of 200 U/mL collagenase type I(Sigma, NY, USA) کو 20 منٹ تک کمرے کے درجہ حرارت پر رد عمل ظاہر کرنے کے لیے شامل کیا گیا۔ رد عمل کو روکنے کے لیے، 0.5 ملی لیٹر 5 فیصد سائٹرک ایسڈ شامل کیا گیا اور 320 این ایم پر جاذبیت کی پیمائش کے لیے 1 ملی لیٹر ایتھائل ایسیٹیٹ شامل کی گئی۔ 2. Elastase روکنے والی سرگرمی

تین تیار نمونوں کو ایک خاص حراستی میں پانی میں پتلا کیا گیا اور پھر نمونے کے طور پر استعمال کیا گیا۔ لبلبے کے محلول میں 50 ug/mL شامل کرنے کے بعد، N-succinyl-(LA)3-p-nitroanilide (1 mg/mL) 50mM Tris-HCl بفر (pH8.6) میں تحلیل کیا گیا تاکہ 30 کے لیے رد عمل ظاہر کیا جا سکے۔ کم سے کم اور جذب 410 nm پر ماپا گیا۔

2.7 سیل استحکام کا تجربہ

نمونوں کے استحکام کا اندازہ کرنے کے لیے ایک عام سائٹوٹوکسیٹی ٹیسٹ، MTT پرکھ (سگما، USA) استعمال کیا گیا تھا۔ مقدار کو Mosman طریقہ میں ترمیم کرکے ناپا گیا۔ HaCaT خلیات 1 × 104 خلیات/mL مصروف تھے، 24 گھنٹے کے لیے انکیوبیٹڈ تھے، پھر اس کی جگہ ایک نئے میڈیم پر مشتمل تھے جس میں نمونے 0.5,1 کے ارتکاز پر گھٹائے گئے تھے۔{10}}، 1.5، اور 2.0mg/mL۔ پھر 20μL EZ-Cytox فی کنواں شامل کیا گیا، اور 5 فیصد CO2 انکیوبیٹر کے ساتھ 37 ڈگری پر انکیوبیشن کے بعد ELISA ریڈر کے ساتھ 450 nm پر جاذبیت کی پیمائش کی گئی۔ سیل کی قابل عملیت کا حساب درج ذیل مساوات (1) کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا:

3. نتائج

3.1 کل پولیفینول اور کل فلاوونائڈ مواد

TATP-3 کا پولی فینول مواد 195.7 mgGAE/g پر ماپا گیا، جو تین نمونوں میں سب سے زیادہ مواد کو ظاہر کرتا ہے۔ TATP-1 کے لیے بغیر کسی سالوینٹس کے سپرکریٹیکل سیالوں کے لیے، پولی فینول کے مواد کی پیمائش 95.2 mgAE/g، اور TATP-2 کے لیے 100 فیصد ایتھنول کے ساتھ، پولی فینول کے مواد کی پیمائش 143.8 mgAE/g کی گئی۔ تجزیہ کے یہ نتائج اس بات کی تصدیق کرتے ہیں کہ پولی فینول کا مواد اس وقت بڑھتا ہے جب کو-سالوینٹ کا مناسب ارتکاز سپرکریٹیکل سیالوں کے لیے استعمال کیا جاتا ہے۔

اس کے علاوہ، TATP-3 کے فلاوونائڈ مواد کی پیمائش 97.7 mgQE/g کی گئی، جو تین نمونوں میں سب سے زیادہ مواد کو ظاہر کرتا ہے۔ TATP-1 کے فلیوونائڈ مواد کو بغیر کسی سالوینٹ کے سپرکریٹیکل سیالوں کے لیے 42.4mgQE/g پر ماپا گیا تھا، اور TATP-2 کا فلیوونائڈ مواد 100 فیصد ایتھنول کے ساتھ بطور شریک سالوینٹ 54.1 mgQE پر ناپا گیا تھا۔ /g flavonoid مواد کے تجربے کے نتائج نے بھی پولیفینول مواد کے طور پر ایک ہی رجحان ظاہر کیا (شکل 1 دیکھیں)۔

image

3.2.اینٹی آکسیڈیشن

TATP{{0}} کے DPPH ریڈیکل تجزیہ نے 2 کے ارتکاز میں 68.3 فیصد دکھایا۔ دوسری طرف، TATP-2 بغیر کسی کو-سالوینٹ کے سپرکریٹیکل سیالوں میں 53.7 فیصد اینٹی آکسیڈینٹ مواد کو 2 پر ظاہر کرتا ہے۔ 100 فیصد ایتھنول کے شریک سالوینٹس کا استعمال کرتے ہوئے mL کا ارتکاز۔ تمام تجرباتی مواد کا تجزیہ ان کی صفائی کی سرگرمی کے لیے ارتکاز پر انحصار کے طور پر کیا گیا، اور سبھی کو کنٹرول گروپ ascorbic ایسڈ سے کم پایا گیا۔ اس کے علاوہ، TATP-3 کے لیے ABTS ریڈیکل تجزیہ نے 2 میں 84.9 فیصد کا سب سے زیادہ ارتکاز پایا۔ {57}}}}ملی گرام/ملی لیٹر ارتکاز بغیر شریک سالوینٹ کے، اور TATP-2 100 فیصد ایتھنول کے ساتھ بطور شریک سالوینٹ 64.7 فیصد 2.0mg/mL حراستی پر پایا گیا (شکل 2b دیکھیں) . ان تجرباتی نتائج نے ڈی پی پی ایچ کے تجرباتی نتائج جیسا ہی رجحان ظاہر کیا (شکل 2 دیکھیں)۔ جیسا کہ جدول 2 میں دکھایا گیا ہے، TATP-3 کے SOS جیسی سرگرمی کے تجزیے نے 2.0 ملی گرام/ملی لیٹر ارتکاز پر 38.8 فیصد پر سب سے زیادہ سرگرمی دکھائی۔ دوسری طرف، TATP-2 نے سپر کریٹیکل سیالوں میں کوئی کو-سالوینٹ کے بغیر 2.0 ملی گرام/mL کے ارتکاز میں 27.5 فیصد سرگرمی دکھائی، اور TATP-2 نے 100 فیصد ایتھنول کے کو-سالوینٹ کے ساتھ ناقص دکھایا۔ 2.0 mg/mL کے ارتکاز میں 35.6 فیصد پر سرگرمی۔ ارتکاز پر انحصار کی وجہ سے تمام تجرباتی مواد کا ان کی صفائی کی سرگرمی کے لیے تجزیہ کیا گیا، اور سبھی کو کنٹرول گروپ ascorbic ایسڈ سے کم پایا گیا۔ TATP-3 کے لیے، xanthine oxidase inhibitory analysis نے پایا کہ سب سے زیادہ ارتکاز 41.3 فیصد تھا؛ جب کہ TATP-1 کے لیے سپرکریٹیکل سیالوں کے لیے شریک سالوینٹ کے بغیر، یہ 2.0mg/mL ارتکاز پر 33.6 فیصد اور شریک سالوینٹ کے طور پر 100 فیصد ایتھنول پایا گیا۔

image

3.3 سفید کرنے کی سرگرمی

Tyrosinase روکنے والی سرگرمی کے تجزیے سے پتہ چلتا ہے کہ TATP{{0}} میں 2۔{10}} mg/mL ارتکاز پر 33.7 فیصد کی سب سے زیادہ روکنے والی سرگرمی ہے۔ دوسری طرف، TATP-1 جس میں سپر کریٹیکل سیالوں میں کوئی کو-سالوینٹ نہیں تھا، نے 2.0mg/mL کی ارتکاز پر 23.2 فیصد سرگرمی دکھائی، اور TATP-2 میں 100 فیصد ایتھنول کے مقابلے میں خراب روک تھام کی سرگرمی دکھائی گئی۔ TATP-3 2.0 mg/mL ارتکاز پر۔ تمام تجرباتی مواد کا حراستی انحصار کی وجہ سے ان کے خاتمے کی سرگرمی کے لیے تجزیہ کیا گیا، اور وہ سبھی کنٹرول گروپ ascorbic ایسڈ سے کم پائے گئے (شکل 3 دیکھیں)۔

3.4. اینٹی شیکن تشخیص

شکن مخالف تشخیص کے لیے کولیجینیس انحیبیٹری ایکٹیویٹی اور ایلسٹیس انحیبیٹری سرگرمی کے تجربات کیے گئے تھے، اور نتائج ٹیبل 3 میں دکھائے گئے ہیں۔ TATP-3 کے کولیجینیز انحیبیٹری سرگرمی کے تجزیے نے 2 میں 58.1 فیصد پر سب سے زیادہ روکنے والی سرگرمی دکھائی۔ {6}} mg/mL ارتکاز۔ مقابلے کے لحاظ سے، TATP-1 نے سپر کریٹیکل سیالوں میں شریک سالوینٹ کے بغیر 2 میں 41.3 فیصد کولیجینیز انحیبیٹری سرگرمی دکھائی۔ سالوینٹس کی تعداد ارتکاز انحصار کے ساتھ ان کے خاتمے کی سرگرمی کے لیے تمام تجرباتی مواد کا تجزیہ کیا گیا، اور وہ سبھی کنٹرول گروپ ascorbic ایسڈ سے کم پائے گئے۔

image

دریں اثنا، TATP{{0}} میں elastase روکنے والی سرگرمی کے تجزیے نے 48.6 فیصد دکھایا، جو کہ سب سے زیادہ ارتکاز 2۔{10} mg/mL ہے۔ دوسری طرف، TATP-1 کی ایلسٹیز انحیبیٹری سرگرمی بغیر شریک سالوینٹس کے 41.4 فیصد 2.0mg/mL کے ارتکاز پر ناپی گئی، اور TATP-2 کی ایلسٹیز روکی سرگرمی 100 فیصد ایتھنول کے ساتھ شریک سالوینٹس کا تجزیہ 2.0mg/mL کی تعداد میں کیا گیا۔ اس طرح، elastase inhibitory activity analysis کے نتائج نے collagenase inhibitory activity analysis کے نتائج جیسا ہی رجحان ظاہر کیا۔

3.5 سیل استحکام

اس مطالعہ میں عرقوں کی سائٹوٹوکسیٹی کو {{0}}.5,1۔{7}},1.5، اور 2.0mg/g پر جانچا گیا جس کا علاج نہیں کیا گیا سیل کی قابل عملیت (100 فیصد) کی بنیاد پر گروپ، تمام ارتکاز میں تمام نمونوں کے لیے کوئی سائٹوٹوکسیٹی نہیں دکھا رہا ہے۔ اس طرح، TATP-3 کے استحکام کی تصدیق HaCaT خلیوں میں کی جا سکتی ہے (شکل 4 دیکھیں)۔

4. بحث اور نتیجہ

جوں جوں انسانی عمر میں اضافہ ہوتا ہے، جدید لوگوں کا مقصد عمر رسیدگی کے خلاف اقدامات کے ساتھ خوشگوار زندگی گزارنا ہے، جیسے کہ جلد کی جھریوں اور لچک کو بہتر بنانا، صحت مند زندگی سے بڑھ کر عمر بڑھنے کی وجہ سے، اور اس پر کئی مطالعات کی جا رہی ہیں۔ اس کے علاوہ، جیسا کہ صارفین کو متنوع بنانے کی ضرورت ہے، کیمیائی مواد پر ماحول دوست مواد کی ترجیح بڑھ رہی ہے، یعنی، پائیدار نوجوانوں کو برقرار رکھنے کے لیے خصوصی کارکردگی کے ساتھ پودوں کے نچوڑ پر تحقیق فعال طور پر کی گئی ہے [18]۔ اس تحقیق میں جلد کی جھریوں اور لچک کو بہتر بنانے کے مقصد سے مختلف پودوں کے نچوڑ تیار کرنے کی کوشش کی گئی تاکہ پائیدار نوجوانوں کو برقرار رکھا جا سکے۔ اس مطالعے کا مقصد تجرباتی طور پر بڑھاپے کے مخالف اثرات کی نشاندہی کرنا تھا جیسے کہ بہیرا، فیلانتھس ایمبلیکا، تریفلا، اور کیریکا پپیتے کے عرقوں کی جلد کی جھریوں اور لچک میں بہتری، اور ان کی سفیدی اور جھریوں کو فعال کاسمیٹک مواد کے طور پر ترقی کی تصدیق کرنا تھا[19] .

مطالعہ کے نتیجے میں، پولی فینول اور فلیوونائڈ مرکبات کو سفید کرنے اور اینٹی آکسیڈینٹ کی سرگرمی میں اہم کردار ادا کرتے ہوئے دکھایا گیا ہے تاکہ خلیوں کو نقصان پہنچنے سے بچایا جا سکے [20]۔ فطرت میں وسیع پیمانے پر تقسیم کیے جانے والے نمائندہ قدرتی اینٹی آکسیڈنٹس میں ٹوکوفیرولز، فلیوونائڈز، اور پولیفینول شامل ہیں، اور ان میں سے، پولیفینول کا کل مواد کھانے کی اشیاء کی اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی کا تعین کرنے والا ایک بہت اہم عنصر بتایا جاتا ہے[21]۔ مزید برآں، فلیوونائڈز، مرکبات جس کی ساخت C6-C3-C6 ہے، جس کی بنیادی ساخت ایک flavone ہے، پودوں کے پھولوں، تنوں اور پھلوں میں وافر مقدار میں پائے جاتے ہیں، اور ان کی اطلاع دی جاتی ہے۔ مختلف افعال ہیں جیسے اینٹی آکسیڈینٹ، اینٹی کینسر، اور اینٹی سوزش اثرات[22]۔ کل پولی فینول اور کل فلیوونائڈ تجربات کے نتائج کے مطابق، پولی فینول اور فلیوونائڈز کے مواد میں اس وقت اضافہ ہوا جب سپر کریٹیکل سیال میں کو-سالوینٹ کا مناسب ارتکاز استعمال کیا گیا، اور نچوڑ نے اعلیٰ اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی کی نمائش کی۔

DPPH ریڈیکلز، ABTS ریڈیکلز، SOS جیسی سرگرمی، اور xanthine oxidase inhibitory activity کا تجزیہ اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی کا اندازہ کرنے کے لیے کیا گیا، اور نتائج کے مطابق، TATP-3 نے اعلیٰ اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی دکھائی۔ ہم نے فیصلہ کیا کہ TATP-3 کی اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی flavonoids اور polyphenol-based components کی وجہ سے ہے، اور اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی کے درست طریقہ کار کی انفرادی اجزاء کے معیاری مواد کا استعمال کرتے ہوئے چھان بین کی جانی چاہیے۔ اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی کے ٹیسٹ کے نتائج کے مطابق، عرقوں کو قدرتی کاسمیٹکس مواد کے طور پر بہت موزوں سمجھا جاتا ہے۔

سفیدی کے اثر کی نشاندہی کرنے کے لیے ٹائروسینیز سرگرمی کے تجزیے کے نتائج کے مطابق، TATP{{0}} نے 2.0 ملی گرام/ملی لیٹر کے ارتکاز میں 33.7 فیصد کی اعلیٰ روک تھام کی سرگرمی ظاہر کی، اور تمام نمونوں کی نشاندہی کی گئی کہ وہ کم ہیں۔ ascorbic ایسڈ کے مقابلے میں سرگرمی، جو کنٹرول تھا. ٹائروسینیز ایک انزائم ہے جو ابتدائی شرح کے تعین کے مرحلے میں شامل ہوتا ہے، جو انسانی جسم میں میلانین بائیو سنتھیسز کے راستے کا سب سے اہم مرحلہ ہے۔ اگر اس انزائم کی سرگرمی کو دبایا جائے تو میلانین کی پیداوار کو دبا دیا جائے گا۔ شیکنوں میں بہتری کے اثرات کی نشاندہی کرنے کے لیے کولیجینیز اور ایلسٹیس کی روک تھام کی سرگرمی کا تجزیہ کیا گیا، اور نتائج کے مطابق، تمام نمونوں میں ارتکاز پر منحصر سکیوینجنگ سرگرمی کا تجزیہ کیا گیا، اور یہ شناخت کیا گیا کہ تمام نمونوں کی سرگرمی ascorbic ایسڈ سے کم تھی۔ ، جو کنٹرول تھا۔ جلد کی لچک کو برقرار رکھنے کے لیے جلد کے جلد کے بافتوں میں کولیجن اور ایلسٹن نیٹ ورک ڈھانچے کی تشکیل کرتے ہیں۔ تاہم، کولیجن اور ایلسٹن ان کے نیٹ ورک ڈھانچے میں کولیگنیس اور ایلسٹیس سے ٹوٹ جاتے ہیں، جو جھریوں کے بغیر [23,24] کی بنیادی وجہ ہے۔ اس تجربے میں استعمال ہونے والے نچوڑ نے مؤثر طریقے سے کولیجینیز اور ایلسٹیز کو روکا۔

جلد کی عمر بڑھنے کی وجوہات میں تناؤ، نیند کی کمی، الٹرا وائلٹ (UV) کی نمائش، اور غذائیت کی کمی [18]، عمر کی وجہ سے قدرتی عمر اور تصویر کی عمر کو چھوڑ کر شامل ہیں۔ اس کے علاوہ، رد عمل والی آکسیجن پرجاتیوں (ROS)، الرجی پیدا کرنے والے مادے، اور جسمانی محرکات کے ساتھ ساتھ سوزش، مدافعتی اسامانیتا، ایپیڈرمل ہومیوسٹاسس کا عدم توازن، اور جلد کی دیگر بیماریاں بھی جلد کی عمر بڑھنے میں حصہ ڈالتی ہیں [19]۔ جھریاں اپیتھیلیم کی بیسل سیل پرت کو لینے والے خلیوں کے پھیلاؤ کی شرح کو کم کرتی ہیں، اپیتھیلیم کو پتلا بناتی ہے، اور جلد کو آسانی سے جھرریوں والی بناتی ہے [20]۔ جلد کی عمر میں جھریوں اور جلد کی لچک کو کم کرنے کا ایک اور طریقہ ڈرمس میں ایکسٹرا سیلولر میٹرکس (ECM) کی کمی ہے [21]۔ ایکسٹرا سیلولر سبسٹریٹ سبسٹریٹ کی وہ جگہ ہے جو خلیات کے درمیان ساختی معاونت کے لیے ذمہ دار ہے اور یہ ایک ساختی پروٹین پر مشتمل ہوتا ہے جو مختلف ساختوں اور خصوصیات کو ظاہر کرتا ہے۔ اہم اجزاء میں کولیجن، ایلسٹن، پروٹیوگلائیکنز، لامین اور فائبرونیکٹین شامل ہیں، جن میں کولیجن اور ایلسٹن پروٹین کا 90 فیصد سے زیادہ حصہ بناتے ہیں [22]جلد میں جھریوں کی پیداوار جلد کی تہہ میں خلیوں کی تخلیق نو کی صلاحیتوں کو کمزور کرنے کی وجہ سے ہوسکتی ہے۔ UV کی نمائش، کولیجن کی کم ترکیب، elastin فائبر پروٹین، اور dermis میں ECM کی کم مقدار [23,24]۔

Bahera، Phyllanthus Emblica، Triphala، اور Carica پپیتے کے عرقوں نے Tyrosinase سرگرمی کے لیے مضبوط روک تھام کی سرگرمیاں ظاہر کیں۔ ٹائروسینیز کی سرگرمی کو روک کر جلد کو سفید کرنے کا طریقہ کار arbutin کی طرح ہے، جو پہلے ہی تجارتی طور پر سفید کرنے والے مواد کے طور پر استعمال ہوتا ہے۔ اس تحقیق میں، Bahera، Phyllanthus Emblica، Triphala، اور Carica Papaya کے نچوڑ نے Tyrosinase کے فعال روک تھام کے طریقہ کار کو دکھایا، جیسے مصنوعی کیمیکل arbutin۔ خیال کیا جاتا ہے کہ عمل کا یہ طریقہ کار جلد کے خلیوں میں ٹائروسینیز کی سرگرمی کی روک تھام کے ذریعے میلانین کی پیداوار میں کمی سے منسوب ہے۔ مزید برآں، 2 تک سیل کی بقا کے تجزیے میں۔{1}}بہیرا، فیلانتھس ایمبلیکا، تریفلا، اور کیریکا پپیتے کے عرق کی ملی گرام/جی تعداد میں کوئی سائٹوٹوکسیٹی نہیں دکھائی گئی، اور یہ کہ تمام نمونے موجودہ آربوٹین کو تبدیل کرنے میں انتہائی موثر اور محفوظ تھے۔ مخالف مواد.

اس کے علاوہ، Bahera، Phyllanthus Emblica، Triphala، اور Carica Papaya کے نچوڑ کو DPPH ریڈیکل خاتمے اور فعال قدرتی مواد کے ABTS ریڈیکل خاتمے کے لیے ناپا گیا۔ Bahera، Phyllanthus Emblica، Triphala، اور Carica Papaya کے عرقوں کا HaCaT خلیات پر حفاظت کے لیے ایک سائٹوٹوکسیٹی ٹیسٹ، ایک MTT پرکھ کا استعمال کرتے ہوئے جائزہ لیا گیا، جس میں تمام نمونوں کے لیے کوئی سائٹوٹوکسیٹی نہیں دکھائی گئی جس میں جھریوں میں بہتری آئی۔ دوسرے الفاظ میں، 2۔{1}}mg/g ارتکاز تک کوئی سائٹوٹوکسیٹی موجود نہیں تھی۔

یہ نتائج بتاتے ہیں کہ Bahera، Phyllanthus Emblica، Triphala، اور Carica papaya extracts collagen اور elastin synthesis کو بڑھاتے ہیں، جو کہ عمر بڑھنے سے جلد کے پابند خلیوں کو پہنچنے والے نقصان کو روکتے ہیں۔ تاہم، ان بامعنی تحقیقی نتائج کے باوجود، اس مطالعے میں کلینیکل ٹرائلز یا جانوروں کے ٹیسٹ کے ماڈلز کو لاگو کرنے کے قابل نہ ہونے کی حدود تھیں۔ بعد کے مطالعے کو سفید کرنے پر کرنے کی ضرورت ہے، اور بہیرا، فیلانتھس ایمبلیکا، تریفلا، اور کیریکا پپیتے کے لیے سفید کرنے اور کریز کو بہتر بنانے کے لیے فنکشنل میکانزم اور سطحی اجزاء کا قیام، اور جانوروں کے نمونے کے تجربات، جو محفوظ قدرتی کی ترقی کا باعث بن سکتے ہیں۔ سفیدی اور جھریوں کی بہتری کے لیے مواد۔ اس تحقیق میں تیار کردہ پودوں کے عرق کو پائیدار جوانی کو برقرار رکھنے کے لیے چہرے کی جلد کو بہتر بنانے میں پیچیدہ فعالیت کے ساتھ محفوظ قدرتی پودوں کے مواد کی تیاری میں بنیادی مواد کے طور پر استعمال کیا جا سکتا ہے۔ خاص طور پر، یہ مطالعہ اس لحاظ سے معنی خیز ہے کہ اس نے ایسے وقت میں جب کورونا وائرس کی وجہ سے انسانی صحت سب سے اہم ہے، کیمیائی رد عمل کے بجائے ماحول دوست قدرتی پودوں کے ساتھ پائیدار عمر رسیدہ انتظام کی تحقیقات کی ہیں۔ اس کے علاوہ امید کی جاتی ہے کہ اس مطالعے سے متعلقہ کمپنیاں قدرتی وسائل کا استعمال کرتے ہوئے پائیدار مصنوعات کو ڈیزائن کرنے میں مددگار ثابت ہوں گی۔


یہ مضمون پائیداری 2022، 14، 676 سے لیا گیا ہے۔ https://doi.org/10.3390/su14020676 https://www.mdpi.com/journal/sustainability







































شاید آپ یہ بھی پسند کریں