عمر بڑھنے کے جانوروں کے ماڈل میں لییکٹوباسیلس پلانٹیرم NJAU-01 کی اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی

از راہ کرم رابطہ کریںoscar.xiao@wecistanche.comمزید معلومات کے لیے

خلاصہ

پس منظر:ضرورت سے زیادہ رد عمل آکسیجن پرجاتیوں (ROS) انسانی جسم کو شدید نقصان پہنچا سکتی ہے اور مختلف دائمی بیماریوں کا سبب بن سکتی ہے۔ مطالعات سے پتہ چلا ہے کہ لیکٹک ایسڈ بیکٹیریا (LAB) میں اینٹی آکسیڈینٹ اور اینٹی ایجنگ اثرات ہوتے ہیں، اور یہ مائکروبیل اینٹی آکسیڈینٹس کی نشوونما کے لیے اہم وسائل ہیں۔ یہ مقالہ ایک اینٹی آکسیڈینٹ تناؤ کے ممکنہ کردار کو تلاش کرنا تھا، لیکٹو بیکیلس پلانٹارم NJAU-01 چوہوں کے D-galactose-حوصلہ افزائی ذیلی سنسنی کو منظم کرنے میں روایتی خشک علاج شدہ گوشت کی مصنوعات Jinhua Ham سے اسکرین کیا گیا تھا۔ کل 48 مخصوص پیتھوجین فری کون منگ چوہوں (SPF KM چوہوں) کو تصادفی طور پر 6 گروپوں میں مختص کیا گیا تھا: جراثیم سے پاک نمکین انجیکشن کے ساتھ کنٹرول گروپ، D-galactose کے subcutaneously انجیکشن کے ساتھ عمر رسیدہ گروپ، D-galactose کے انجیکشن کے ساتھ علاج گروپ اور intragastric Admin 10',10 ڈگری، اور 10 ڈگری FU/mL L.plantarum NJAU-01، اور D-galactose کے انجیکشن کے ساتھ مثبت کنٹرول گروپ اور 1 mg/mL وٹامن C کی انٹرا گیسٹرک انتظامیہ۔

نتائج:نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ ایل کے علاج گروپ. پلانٹارم NJAU-01 نے 10 ڈگری FU/mL پر زیادہ کل اینٹی آکسیڈینٹ صلاحیت (T-AOC) اور سپر آکسائیڈ ڈسمیوٹیز (SOD)، گلوٹاتھیون پیرو آکسیڈیس (GSH-Px)، اور کیٹالیس (CAT) کی اینٹی آکسیڈینٹ انزیمیٹک سرگرمیاں ظاہر کیں۔ سیرم، دل اور جگر میں دوسرے گروپوں میں سے۔ اس کے برعکس، آکسیڈیٹیو اسٹریس مارکر میلونڈیالڈہائڈ (ایم ڈی اے) کے مواد نے دوسرے گروپوں کے مقابلے کم سطح ظاہر کی (P<0.05). the="" antioxidant="" capacity="" was="" improved="" with="" the="" supplement="" of="" the="" increasing="" concentration="" of="" l.="" plantarum="">

مزید جاننے کے لیے براہ کرم یہاں کلک کریں۔

نتیجہ:اس طرح، یہ مطالعہ یہ ظاہر کرتا ہے کہ ایل پلانٹیرم NJAU-01 آکسیڈیٹیو تناؤ کو کم کر سکتا ہے آکسیڈیشن مزاحمت میں شامل انزائمز کی سرگرمیوں کو بڑھا کر اور چوہوں میں لپڈ آکسیڈیشن کی سطح کو کم کر کے۔ مطلوبہ الفاظ: لییکٹوباسیلس پلانٹرم NJAU-01، Jinhua Halm، D-galactose-حوصلہ افزائی عمر رسیدہ جانور، Malondialdehyde، Antioxidant کی صلاحیت

پس منظر

آکسیکرن ایک ایسا عمل ہے جو جسم میں سیلولر میٹابولزم کے لیے ضروری ہے۔ رد عمل آکسیجن پرجاتیوں (ROS) آزاد ریڈیکلز کے طور پر جو اینڈوجینس آکسیڈیشن-ریڈکشن (REDOX) کے رد عمل سے پیدا ہوتے ہیں آکسیکرن کے لیے ذمہ دار تھے۔ تاہم، جب خلیات کو آکسیڈیٹیو تناؤ سے متاثر بیرونی محرکات موصول ہوتے ہیں، تو ROS کی ضرورت سے زیادہ پیداوار سیلولر ROS کی صفائی کی صلاحیت کو زیر کر دیتی ہے [1]۔ کچھ تحقیقی اعداد و شمار سے پتہ چلتا ہے کہ آکسیڈیٹیو تناؤ کا تعلق حیاتیات کی عمر سے ہے [2]بقیہ ROS کو میٹابولائز کرنے سے قاصر ہونا انسانی جسم کو شدید نقصان پہنچا سکتا ہے اور عمر بڑھنے سے متعلق مختلف دائمی بیماریوں کا سبب بن سکتا ہے، جیسے ذیابیطس، دل کی بیماری، ہائی بلڈ لپڈس، گٹھیا، نیوروڈیجینریٹو امراض، قلبی اور دماغی امراض [3]۔ عام طور پر، جسم میں خامروں یا غیر انزائمز اور مرمت کے نظام کا ایک سلسلہ ہوتا ہے جو اینٹی آکسیڈینٹ دفاع میں شامل ہوتے ہیں اور انہیں آکسیڈیٹیو نقصان سے بچاتے ہیں [4-6]۔ مثال کے طور پر، ایسکوربک ایسڈ خود آکسیڈیشن کے ذریعے آکسیجن استعمال کرتا ہے، آکسیڈیشن میں کمی کی صلاحیت کو کم کرنے کے لیے دھاتی آئنوں کو کم کرتا ہے اور اینٹی آکسیڈینٹ دفاع میں شامل ہوتا ہے [7]۔ Superoxide dismutase (SOD) نقصان دہ سپر آکسائیڈ ریڈیکلز کو ہائیڈرو جن پیرو آکسائیڈ میں تبدیل کرنے کے قابل ہے [8]۔ Catalase (CAT) ہائیڈروجن پیرو آکسائیڈ کو گل کر سیلولر اینٹی آکسیڈینٹ دفاع میں حصہ لیتا ہے، اس طرح فینٹن کے رد عمل کو ہائیڈروکسیل فری ریڈیکلز پیدا کرنے سے روکتا ہے [9]۔ تاہم، ضرورت سے زیادہ ROS بہت سے عوامل کی وجہ سے آکسیڈیٹیو نقصان کا باعث بنے گا جیسے شعاع ریزی (ایکس رے، وائی رے، الٹرا وائلٹ)، کیمیکل ری ایجنٹس (میٹل آئنز، HONO، HOCl، اور HOBr)، منشیات اور ان کے میٹابولائٹس، اور یہاں تک کہ تمباکو نوشی جسم میں یہ قدرتی اینٹی آکسیڈینٹ نظام اکثر آکسیڈیٹیو نقصان کو روکنے کے لیے ناکافی ہوتے ہیں، جس کے لیے اینٹی آکسیڈنٹ سپلیمنٹس جیسے astaxanthin اور فولک ایسڈ کی ضرورت ہوتی ہے [10]۔ اس طرح، دستیاب نقطہ نظر کی تلاش جو سیلولر آکسیڈیٹیو نقصان کو کم یا روک سکتی ہے، کافی توجہ حاصل کی گئی ہے۔

لیکٹک ایسڈ بیکٹیریا (LAB) بڑے پیمانے پر پائے گئے ہیں اور خمیر شدہ گوشت کی مصنوعات میں استعمال ہوتے ہیں۔ خمیر شدہ خوراک کے غذائیت، ذائقہ اور تحفظ کو بہتر بنانے کے علاوہ، LAB میں اضافی پروبائیوٹک خصوصیات بھی ہیں [11، 12]۔ کچھ مطالعات سے پتہ چلا ہے کہ LAB میں اینٹی آکسیڈینٹ اور اینٹی ایجنگ اثرات ہیں، اور یہ مائکروبیل اینٹی آکسیڈنٹس کی نشوونما کے لیے اہم وسائل ہیں [13]۔ مثال کے طور پر، لییکٹوباسیلس کیس کو چینی گھریلو لیکور سے الگ کیا گیا تھا، جو مؤثر طریقے سے لپڈ پیرو آکسیڈیشن کو کم کرتا ہے اور ہائی کولیسٹرول کو صاف کرنے کی صلاحیت اور انسانی آنتوں کے خلیے کو چپکنے کی صلاحیت کی وجہ سے لپڈ میٹابولزم کو بہتر بناتا ہے [14]۔ ہم نے پہلے جینہوا ہیم سے کل اینٹی آکسیڈینٹ کیپ-ایسیٹی کے ذریعہ ایک لیکٹک ایسڈ بیکٹیریا کو الگ تھلگ اور اسکرین کیا ہے اور بائیو کیمیکل خصوصیات، کو-لونیئل مورفولوجی، اور 16 s rDNA کی ترتیب کا پتہ لگا کر اسے Lactobacillus plantarum کے طور پر شناخت کیا ہے، جس کا نام L. Plantarum NJAU ہے } [15]۔ L. Plantarum NJAU-01 نے وٹرو میں DPPH فری ریڈیکلز، ہائیڈروکسیل فری ریڈیکلز، اور سپر آکسائیڈ اینیون فری ریڈیکلز کی بہترین صفائی اور کم کرنے کی طاقت کا مظاہرہ کیا [16]۔ الیکٹرو کیمیکل سینسر کے ساتھ مل کر سیل ماڈل میں، آکسیڈیٹیو تناؤ کے جواب میں میکروفیج RAW264.7 کی صلاحیت کو L. plan-tarum NJAU کے ساتھ انکیوبیشن کے ذریعے نمایاں طور پر بڑھایا گیا تھا-01 [15]۔Cistanche Extract Anti Radiationاس کے علاوہ، ایل. پلانٹیرم NJAU-01 خمیر شدہ ساسیج میں پروٹین آکسیکرن کی ڈگری کو بھی کم کر سکتا ہے [17]۔ اس طرح، ایل. پلانٹارم NJAU-01 کا وٹرو میں اینٹی آکسیڈینٹ اثر ثابت ہوا ہے، جو vivo میں آکسیڈیٹیو تناؤ کو کنٹرول کرنے میں ممکنہ طور پر استعمال ہونے کا وعدہ کر رہا ہے۔

Cistanche بڑھاپے کو روک سکتا ہے۔

اس طرح جانوروں کے ماڈل کا استعمال کرتے ہوئے Vivo میں L. Plantarum NJAU-01 کے اینٹی آکسیڈینٹ اثر کا اندازہ لگانا ضروری ہے، جو جانوروں میں جذب، نقل و حمل اور میٹابولزم کا مؤثر طریقے سے مشاہدہ کر سکتا ہے۔ D-galactose-حوصلہ افزائی عمر رسیدہ چوہوں کو دہائیوں سے جسم کے عمر بڑھنے کے عمل میں آکسیڈیٹیو نقصان کی موجودگی کی نقل کرنے کے لیے تیار کیا گیا ہے [18]۔ D-galactose کم زہریلا، سست آکسیکرن عمل، اور کوئی مہلک اثر نہیں [19,20] کے فوائد کے ساتھ غیر انزیمیٹک گلائکشن کے ذریعے گلائکیشن اینڈ پروڈکٹس بنانے کے لیے امینو ایسڈ کے ساتھ رد عمل کے ذریعے ROS کی تخلیق میں حصہ ڈالتا ہے۔ D-galactose-حوصلہ افزائی چوہوں کے ماڈل کو اکثر پروبائیوٹکس جیسے L-carnitine، ursolic acid اور L. Plantarum AR501 [19,21,22] کی اینٹی آکسیڈینٹ صلاحیت کا جائزہ لینے کی اطلاع دی گئی ہے۔ لہذا، یہ بالغ D-galactose-حوصلہ افزائی والے عمر رسیدہ چوہوں کو چوہوں میں آکسیڈیٹیو تناؤ کو دور کرنے میں L. Plantarum NJAU-01 کے کردار کی ابتدائی تحقیقات کے لیے استعمال کیا گیا۔ L. plan-tarum NJAU-01 کو D-galactose-حوصلہ افزائی والے عمر رسیدہ چوہوں کو کھلایا گیا تھا تاکہ اس کے vivo antioxidant اثرات کا جائزہ لے کر کل اینٹی آکسیڈینٹ صلاحیت (T-AOC)، SOD، glutathione کی اینٹی آکسیڈینٹ انزیمیٹک سرگرمیوں کی پیمائش کر سکے۔ پیرو آکسیڈیس (GSH-Px)، اور CAT، نیز چوہوں کے سیرم، دل اور جگر میں آکسیڈیٹیو اسٹریس مارکر میلونڈیالڈہائڈ (MDA) کا مواد۔cistanche herbaیہ L. Plantarum NJAU-01 کو بطور پروبائیوٹک بنانے اور استعمال کرنے پر مزید تحقیق کی بنیاد فراہم کرے گا۔

نتائج

چوہوں میں جسمانی وزن اور اعضاء کے اشاریے۔

کھانا کھلانے کی مدت کے دوران کسی بھی جانور کی موت نہیں ہوئی اور تمام چوہوں کی تاریخ کو شامل کیا گیا تھا۔ L. Plantarum NJAU-01 کے ساتھ مختلف علاج کے چوہوں کے اعضاء کے اندر کے اعضاء پر اثرات ٹیبل 1 میں دکھائے گئے ہیں۔ D-galactose کے ساتھ انجکشن لگائے گئے عمر رسیدہ گروپ کے چوہوں نے دوسرے کے مقابلے میں نمایاں طور پر کم جسمانی وزن ظاہر کیا۔ گروپس (پی<0.05). no="" significant="" difference="" was="" ob-served="" in="" kidney="" liver="" index="" and="" lung="" be-tween="" the="" l.="" plantarum="" njau-01="" treatment="" groups="" normal="" positive="" group="" aging="" model="" p="">0.05)۔ عمر رسیدہ ماڈل گروپ کے دل کا انڈیکس عام گروپ کے مقابلے میں نمایاں طور پر زیادہ تھا (P<>

چوہوں کے سیرم، دل اور جگر کی T-AOC سرگرمی مختلف علاج گروپوں کے درمیان چوہوں کی T-AOC سرگرمی تصویر 1 میں دکھائی گئی ہے۔ عمر رسیدہ چوہوں کے ماڈل گروپ کی T-AOC سرگرمی 6.68 U/mL تھی، اور جب دل، سیرم اور جگر میں بالترتیب 6.62،3.55 اور 3.58 U/mg پروٹین تھے، جو دوسرے گروپوں سے کم تھے (P<0.05). in="" the="" l.="" plantarum="" njau-01="" lp3="" group,="" serum,="" heart,="" and="" liver="" had="" significantly="" higher="" t-aoc="" than="" the="" other="" groups=""><0.05). the="" liver="" t-aoc="" in="" the="" positive="" control="" group="" was="" significantly="" higher="" than="" the="" control="" group="" and="" the="" aging="" model="" group=""><0.05). however,="" the="" antioxidant="" activity="" of="" the="" heart="" and="" liver="" of="" the="" positive="" control="" group="" was="" significantly="" lower="" than="" that="" of="" the="" lp3="" group=""><0.05). the="" above="" results="" indicate="" that="" l.="" plantarum="" njau-01="" can="" enhance="" the="" t-aoc="" of="" the="" mice="" in="" a="" dose-dependent="">

چوہوں کے سیرم، دل اور جگر میں ایس او ڈی کی سرگرمی

چوہوں کے سیرم، دل اور جگر میں عمر رسیدہ ماڈل گروپ میں چوہوں کی SOD سرگرمیاں بالترتیب 16.72 U/mL، 18.93 U/mg پروٹین اور 44.82 U/mg پروٹین تھیں، جو کنٹرول گروپ (P) سے نمایاں طور پر کم تھیں۔<0.05,fig.2).in contrast,the="" sod="" activity="" in="" serum,="" heart="" and="" liver="" of="" mice="" in="" vc="" group="" was="" significantly="" higher="" than="" that="" of="" mice="" in="" the="" aging="" model="" group="" and="" control="" group=""><0.05). the="" sod="" activity="" in="" heart="" of="" mice="" lp2="" group="" was="" 61.85="" mg="" which="" not="" significantly="" different="" from="" that="" positive="" control="" p="">0.05)۔ دوسری طرف، ہائی ڈوز گروپ کے سیرم، دل اور جگر میں ایس او ڈی کی سرگرمیاں بالترتیب 48.83 U/mL، 74.67 U/mg پروٹین اور 69.55 U/mg پروٹین تھیں، جو دوسرے گروپوں کے مقابلے میں نمایاں طور پر زیادہ تھیں۔<0.05). these="" results="" showed="" that="" l.="" plantarum="" njau-01="" could="" alleviate="" the="" oxidative="" damage="" induced="" by="" d-galactose="" to="" the="" body,="" and="" increase="" sod="">

چوہوں کے سیرم، دل اور جگر میں GSH-Px

LP3 گروپ نے سیرم، دل اور جگر میں دوسرے گروپوں میں چوہوں کی نسبت زیادہ GSH-PX سرگرمی پیش کی (P<0.05, fig.="" 3).="" the="" gsh-px="" activity="" in="" the="" heart="" and="" liver="" tissues="" of="" mice="" in="" the="" positive="" control="" group="" was="" signifi-cantly="" higher="" than="" that="" of="" mice="" in="" the="" control="" group="" and="" the="" aging="" model="" group=""><0.05). there="" was="" no="" significant="" difference="" for="" the="" serum="" gsh-px="" activity="" between="" lp1="" and="" control="" group="" p="">0.05) اس کے علاوہ، چوہوں کے دل اور جگر میں عمر رسیدہ ماڈل گروپس بالترتیب 50.39 U/mL، 8.48 U/mg پروٹین اور 62.67 U/mg پروٹین تھے، جو GSH-Px کی سرگرمی سے کم دکھاتے ہیں۔ دوسرے گروپس (پی<0.05). therefore,l.="" plantarum="" njau-01="" has="" an="" enhancing="" effect="" on="" the="" antioxidant="" enzymatic="" activity="" of="" gsh-px="" in="" mice,="" and="" the="" strain="" concentration="" is="" related="" to="" the="" antioxidant="">

چوہوں کے سیرم، دل اور جگر میں CAT کی سرگرمی

جیسا کہ تصویر 4 میں دکھایا گیا ہے، LP3 چوہوں کے سیرم، دل اور جگر کی CAT سرگرمیاں بالترتیب 22.98 U/mL، 137.99 U/mg پروٹین اور 136.31 U/mg پروٹین تھیں، جن میں دیگر علاج کے مقابلے CAT کی سرگرمی زیادہ تھی۔ گروپس (پی<0.05), indicating="" that="" the="" concentration="" of="" the="" strain="" had="" a="" marked="" effect="" on="" the="" cat="" activity.="">cistanche عضو تناسل کی ترقیاس کے برعکس، عمر رسیدہ ماڈل گروپ نے چوہوں کے سیرم، دل اور جگر میں دوسرے گروپوں میں چوہوں کی نسبت کم CAT ایکٹیویٹی ظاہر کی (P<0.05). as="" for="" vc="" group,="" it="" presented="" higher="" cat="" activity="" than="" the="" control="" group="" and="" aging="" model="" group="" in="" serum,="" heart="" and="" liver="" of="" mice=""><0.05). these="" findings="" demonstrate="" that="" l.="" plantarum="" njau-01="" can="" enhance="" the="" cat="" activity="" in="" mice="" serum,="" heart="" and="" liver="">

چوہوں کے سیرم، دل اور جگر میں ایم ڈی اے کا مواد

عمر رسیدہ ماڈل گروپ میں چوہوں کے سیرم، دل اور جگر میں MDA کا مواد کنٹرول گروپ (P) سے نمایاں طور پر زیادہ تھا۔<0.05, fig.="" 5).="" the="" serum="" mda="" content="" of="" mice="" in="" the="" lp3="" group="" was="" 14.29="" nmol/ml,="" and="" the="" mda="" contents="" in="" the="" heart="" and="" liver="" were="" 8.00="" and="" 26.49="" nmol/mg="" protein,="" respectively,="" being="" significantly="" lower="" than="" that="" in="" the="" other="" groups=""><0.05). there="" was="" no="" significant="" difference="" in="" mda="" content="" among="" the="" positive="" control="" lp1="" and="" lp2="" groups="" p="">0.05).

بحث

D-galactose in-duction کے ذریعہ subacute عمر رسیدہ چوہوں کا ماڈل بڑے پیمانے پر استعمال کیا جاتا ہے اور اچھی طرح سے پہچانا جاتا ہے [14,23,24]۔ ماڈل میں D-galactose کا مسلسل انجیکشن شامل ہوتا ہے جو کہ خلیوں کے اندر galactose reductase کے ذریعے galactose میں کمی کرتا ہے، جس کے نتیجے میں خلیے اور ماحول کے درمیان اوسموٹک دباؤ میں تبدیلی آتی ہے اور پھر سیل کی سوجن اور عمر بڑھ جاتی ہے [25]۔ انٹرا سیلولر انزائمز جو آکسیڈیٹیو تناؤ کو دوبارہ دور کرتے ہیں، جیسے SOD، CAT اور GSH-Px، رد عمل آکسیجن کی نسلوں کو ختم کرنے کے لیے کافی نہیں ہوتے ہیں، جب جسم کے خلیے شدید آکسیڈیٹیو تناؤ کا شکار ہوتے ہیں۔ LAB کی اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی کا مطالعہ کرنے کا یہ ایک براہ راست اور مؤثر طریقہ ہے کہ LAB کو D-galactose-حوصلہ افزائی والے subacute عمر رسیدہ چوہوں میں انجیکشن لگا کر اور انزیمیٹک اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی، جیسے SOD، GSH-Px، اور CAT کا کنٹرول گروپ کے ساتھ موازنہ کر کے [21]۔

اس مطالعہ میں، عمر رسیدہ ماڈل گروپ اور مثبت کنٹرول (Vc کے ساتھ انجیکشن) گروپ کا L. Plantarum NJAU-01 علاج گروپ کی مختلف خوراکوں سے موازنہ کیا گیا۔ آرگن انڈیکس تجرباتی جانور میں کسی عضو کے وزن اور اس کے جسمانی وزن کا تناسب ہے اور اعضاء کے گتانک میں اضافہ عضو کی بھیڑ، ورم یا ہائپرپلاسیا کی نشاندہی کرتا ہے جبکہ اعضاء کے گتانک میں کمی اعضاء کی ایٹروفی اور دیگر تنزلی کی نشاندہی کرتی ہے۔ تبدیلیاں آرگن انڈیکس کو عمر بڑھنے کی ڈگری میں ہونے والی تبدیلیوں کے اظہار کے لیے بھی استعمال کیا گیا تھا جیسا کہ یو ایٹ ال کے مطالعے میں ثبوت ہے۔ (2016) اور Xu et al. (2016)[18,26]۔ موجودہ تحقیق سے یہ بات سامنے آئی ہے کہ عمر رسیدہ ماڈل گروپ کے چوہوں کا وزن کم اور ہارٹ انڈیکس دوسرے گروپوں کے چوہوں کے مقابلے میں زیادہ تھا۔ D-galactose کی انتظامیہ نے عمر رسیدہ ماڈل گروپ میں چوہوں کے سیرم، دل اور جگر میں اینٹی آکسیڈینٹ اینزائیمیٹک سرگرمی میں نمایاں کمی کی۔ L. Plantarum NJAU-01 سپلیمنٹس کو SOD، GSH-Px، اور CAT کی غیر معمولی سرگرمیوں کو نارمل سطحوں پر ریگولیٹ کرکے D-galactose-حوصلہ افزائی آکسیڈیٹیو تناؤ والے چوہوں کے جگر کی چوٹ کو کم کرنے کی تجویز دی گئی تھی۔ یہ رپورٹ شدہ مطالعات کے مطابق ہے جب اینٹی آکسیڈینٹ کے کردار کی تحقیقات کرتے ہوئے ہدف بنائے گئے تناؤ بشمول L. Plantarum AR113 اور ARS01 [12],L۔ del-brueckii subsp. بلغاریکس F17 [27]۔ اس طرح، موجودہ مطالعہ میں D-galactose subacute چوہوں کا ماڈل Vivo میں LAB کی اینٹی آکسیڈینٹ صلاحیت کی تحقیقات کے لیے خفیہ ثبوت فراہم کرنے کے لیے موثر ہے۔

پچھلے تحقیقی نتائج نے اشارہ کیا ہے کہ LAB کا اینٹی آکسیڈینٹ میکانزم بنیادی طور پر درج ذیل پہلوؤں میں ظاہر ہوتا ہے: چیلیٹڈ میٹل آئنز، آٹوٹروفک اینٹی آکسیڈینٹ انزائم سسٹم، اینٹی آکسیڈینٹ می ٹیبولائٹس کی پیداوار، میزبان اینٹی آکسیڈینٹ انزائم کی سرگرمی میں اضافہ، اینٹی آکسیڈینٹ سگنلنگ پاتھ ویز کا کنٹرول۔ ، اور آنتوں کے بیکٹیریا گروپ کا ضابطہ [28]۔ یہ پہلو ان بیماریوں کے خاتمے میں اہم کردار ادا کرتے ہیں جن کی نشوونما میں آکسیڈیٹیو تناؤ شامل ہوتا ہے [29]۔ ایم ڈی اے کو لپڈ پیرو آکسیڈیشن کے بائیو مارکر کے طور پر سمجھا جاتا ہے، اور یہ میکرو مالیکیولز کے کراس سے منسلک پولیمرائزیشن کا باعث بن سکتا ہے، جو سائٹوٹوکسیٹی اور جینوٹوکسٹی میں ممکنہ کردار ادا کرتا ہے۔ ایم ڈی اے کا مواد عام طور پر لپڈ پیرو آکسائڈریشن کی ڈگری کا اندازہ کرنے اور خلیوں کو پہنچنے والے نقصان کی سطح کو ظاہر کرنے کے لئے ایک بنیاد کے طور پر استعمال ہوتا ہے [30]۔cistanche سالسا فوائدموجودہ تحقیق سے پتا چلا ہے کہ D-galactose induced oxidative stress والے چوہوں نے L. plantarum NJAU-01 کے انجیکشن لگا کر سیرم، دل اور جگر میں MDA کی سطح کو نمایاں طور پر کم کر دیا ہے جس سے یہ ظاہر ہوتا ہے کہ L. Plantarum مؤثر طریقے سے اس کی تشکیل کو کم کر سکتا ہے۔ چوہوں میں لپڈ پیرو آکسائیڈ یہ ان وٹرو اسٹڈی سے مطابقت رکھتا ہے، جس نے L. Plantarum NJAU-01 سٹرین [16] کی مؤثر فری ریڈیکل سکیوینگنگ کی صلاحیت کو ظاہر کیا۔ اسی طرح، L. Plantarum ZLP001 کے ساتھ دودھ چھڑانے والے سوروں نے کنٹرول گروپ (6.23 nmol/ml) سے کم سیرم MDA مواد (4.1 nmol/ml) پیش کیا، جس سے یہ ظاہر ہوتا ہے کہ L. Plantarum ZLP001 میں اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی ہے [31]۔ موجودہ مطالعہ نے تجویز کیا کہ L. Plantarum NJAU-01 سپلیمنٹس بنیادی طور پر D-galactose سے متاثرہ چوہوں میں لپڈ آکسیڈیشن کی ڈگری کو دور کر سکتے ہیں، چوہوں کو آکسیڈیٹیو تناؤ سے بچاتے ہیں۔

جسم میں فری ریڈیکل اسکیوینجنگ انزائم ڈیفنس سسٹمز کا ایک سیٹ ہے، جیسے SOD، GSH-Px اور CAT، جو بالترتیب سپر آکسائیڈ ریڈیکلز، ہائڈروکسائل ریڈیکلز اور ہائیڈروجن پیرو آکسائیڈ کو ہم آہنگ کرتے ہیں [32] فری ریڈیکل آکسیڈیشن اور اینٹی آکسائیڈ حیاتیات کا دفاعی نظام متحرک توازن کی حالت میں ہے۔ جب جسم کو آکسیڈیٹیو تناؤ پیدا کرنے والے محرکات کا سامنا کرنا پڑتا ہے، تو یہ متحرک توازن درہم برہم ہو سکتا ہے۔ ROS کی ضرورت سے زیادہ پیداوار پروٹین، لپڈز اور نیوکلک ایسڈ مالیکیولز کو نقصان پہنچاتی ہے، جو بالآخر حیاتیات کی عمر بڑھنے اور مختلف بیماریوں کی نشوونما کا باعث بنتی ہے [3]۔ ایس او ڈی سپر آکسائیڈ ریڈیکلز کو ہائیڈروجن پیرو آکسائیڈ میں تبدیل کر سکتا ہے، جو اب بھی سائٹوٹوکسک ہے اور فینٹن کے رد عمل سے ہائیڈرو آکسائل ریڈیکلز پیدا کر سکتا ہے [34]۔ ہائیڈروکسیل ریڈیکل سب سے زیادہ فعال ROS میں سے ایک ہے، جو سیل میں موجود نامیاتی مادے کے ساتھ تیزی سے رد عمل کی شرح اور تباہ کن اثر کے ساتھ رد عمل ظاہر کر سکتا ہے [35]۔ مزید یہ کہ CAT سیل اینٹی آکسیڈینٹ دفاع میں حصہ لینے کے لیے ہائیڈروکسیل ریڈیکلز کو گل سکتا ہے [36]۔ جسمانی حالات کے تحت، اینٹی آکسیڈینٹ انزائمز، جیسے GSH-Px خلیوں میں پیدا کیے جا سکتے ہیں تاکہ ان خلیوں کو آکسیڈا سے متعلق نقصان سے بچایا جا سکے [25]۔ اس مطالعے سے پتہ چلتا ہے کہ L. plantarum NJAU-01 چوہوں کے سیرم، دل اور جگر میں SOD، GSH-Px، CAT اور T-AOC کی سرگرمیوں کو نمایاں طور پر بڑھا سکتا ہے، جس سے یہ ظاہر ہوتا ہے کہ L. Plantarum NJAU-01 D-galactose کی وجہ سے ہونے والے آکسیڈیٹیو نقصان کو کم کرتا ہے۔ اس اثر کو دو پہلوؤں سے منسوب کیا جا سکتا ہے۔ پلانٹیرم NAJU-01 چوہوں میں اینٹی آکسیڈینٹ انزائمز کی سرگرمی کو فروغ دے سکتا ہے، چوہوں میں ROS کے توازن کو معمول کی سطح پر منظم کرتا ہے۔ دوسری طرف، یہ آزاد ریڈیکلز کو بھی ختم کر سکتا ہے اور آکسیڈیٹیو تناؤ کو کم کرنے کے لیے SOD، GSH-Px اور CAT کے ساتھ ہم آہنگی سے کام کر سکتا ہے۔ پروبائیوٹک بیکٹیریا کے ذریعہ اینٹی آکسیڈینٹ انزائمز کی سرگرمیوں کے ضابطے کو لیکٹو بیکیلس فرمینٹم [37] اور لیکٹو بیکیلس فرمین ٹم ME-3 [38] کے لیے بھی رپورٹ کیا گیا تھا۔ یہ مطالعہ ظاہر کرتا ہے کہ L. plan-tarum NJAU-01 چوہوں میں اینٹی آکسیڈنٹ اثر ڈالتا ہے اور مصنوعی یا پودوں سے حاصل کردہ اینٹی آکسیڈنٹس کا ایک امید افزا متبادل ہے۔ یہ عام طور پر ساسیج اسٹارٹرز یا فعال مصنوعات کے مطالعہ کے لیے بائیو سورس اینٹی آکسیڈنٹ کے طور پر استعمال ہوتا ہے [18]۔ اگرچہ حالیہ برسوں میں LAB کی اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی پر تحقیق نے وسیع توجہ حاصل کی ہے، L. Plantarum NJAU-01 کے اینٹی آکسیڈیشن کے بنیادی میکانزم پر تحقیقات، خاص طور پر، میٹابولک راستے، پروٹین کے اظہار اور آنتوں کے ضابطے نباتات اب بھی کم ہیں. مزید یہ کہ لییکٹک ایسڈ بیکٹیریا میں متعدد اینٹی آکسیڈینٹ میکانزم کی کراس اور تکمیل کے لیے مزید تفتیش کی ضرورت ہے۔

نتائج

اس ابتدائی مطالعہ نے چوہوں کے D-galactose-حوصلہ افزائی والے عمر رسیدہ ماڈل پر Jinhua ham سے الگ تھلگ L. Plan-term NJAU-01 کے اثر کا ثبوت دیا۔ یہ پایا گیا کہ چوہوں کو کھانا کھلانے کے عمل کے دوران L. Plantarum NJAU-01 کا اضافہ اینٹی آکسیڈینٹ انزائمز کی سرگرمی کو نمایاں طور پر بڑھا سکتا ہے اور MDA کے مواد کو کم کر سکتا ہے۔ یہ مطالعہ L. Plan-tarum NJAU-01 کے بائیو اینٹی آکسیڈینٹ کے امکان کی تصدیق کرتا ہے اور L. Plantarum کے اینٹی آکسیڈنٹ میکانزم کے مزید مطالعہ کی بنیاد رکھتا ہے۔

طریقے

بیکٹیریل تناؤ اور جانوروں کی تیاری

L.plantarum NJAU{{0}} (CGMCC14194) کو روایتی طور پر خشک علاج شدہ گوشت کی مصنوعات Jinhua ham سے مورفولوجیکل، بائیو کیمیکل اور مالیکیولر جینیاتی شناخت کے طریقوں سے اسکرین کیا گیا تھا [15]۔ اس تناؤ میں اعلیٰ اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی تھی اور اسے یانگزو یونیورسٹی کے کالج آف فوڈ سائنس اینڈ انجینئرنگ میں محفوظ کیا گیا تھا [16]۔ Lactobacillus Plantarum NJAU-01 De Man, Rogosa, Sharpe (MRS) شوربے (Bio-way Technology Co., Ltd, Shanghai, China) میں منجمد (-80 ڈگری) اسٹاک کے طور پر محفوظ کیا گیا تھا جس کی تکمیل 20 فیصد تھی۔ (v/v) گلیسرول۔ 1 فیصد انوکولم کا تناؤ دو بار چالو کیا گیا اور 10 ملی لیٹر MRS شوربے میں 37 ڈگری پر 18 گھنٹے کے لیے اگایا گیا۔ 100 μL کے بیکٹیریل سسپنشن کو پھر ٹھوس MRS میڈیم میں آٹومیٹک ڈائلٹر اور پلیٹر (حوالہ 414،000، انٹرسائنس، سینٹ-نوم-لا-بریٹیک، فرانس) کے ذریعے ٹیکہ لگایا گیا۔ ٹیکہ لگائے گئے MRS ٹھوس میڈیم کو 24 گھنٹے کے لیے 37 ڈگری پر کلچر کیا گیا، اور قابل عمل شمار خودکار HD کالونی کاؤنٹر (Scan 1200, Interscience, Saint-Nom-la-Breteche, France) اور اسکین ڈگری کے ذریعے شمار کیا گیا۔ سافٹ ویئر ورژن 8.0 (انٹرسائنس، سینٹ-نوم-لا-بریٹچے، فرانس)۔ بیکٹیریل سسپنشن کا ارتکاز 2×10' CFU/mL ہونے کا پتہ چلا، اور 10 mL کے سٹرین کلچر کو 6،000 g پر 10 منٹ کے لیے 4 ڈگری پر سپرنٹنٹ کو ضائع کرنے کے لیے سینٹرفیوج کیا گیا۔ گولی کو تین بار جراثیم سے پاک نمکین سے دھویا گیا اور پھر L.plantarum NJAU-01 کا 1×10 ڈگری FU/mL حاصل کرتے ہوئے 20 ملی لیٹر جراثیم سے پاک نمکین میں تحلیل کر دیا گیا۔ اس کے بعد، 1×10 ڈگری FU/mL پر 2 ملی لیٹر بیکٹیریل سسپنشن کو ایک نئی ٹیوب میں ہٹا دیا گیا تاکہ 18 ملی لیٹر جراثیم سے پاک نمکین کو 1×10 ڈگری FU/mL بیکٹیریا کی خوراک بنانے کے لیے ملایا جا سکے۔ یکساں طور پر، 1×107 CFU/mL کا ارتکاز 1×10 ڈگری FU/mL بیکٹیریل سسپنشن کی کمزوری سے بنایا گیا تھا۔ تجرباتی جانور کے لیے SPF گریڈ KM چوہے (مادہ، 4 ہفتے کی عمر، وزن 18-20 g) کا انتخاب کیا گیا تھا۔ جانوروں کا چارہ اور بستر یانگ زو یونیورسٹی (ینگ زو، جیانگ سو، چین) کے انسٹی ٹیوٹ آف کمپریٹو میڈیسن نے فراہم کیے تھے۔ جانوروں کے تمام تجربات کو یانگ زو یونیورسٹی کی اینیمل ویلفیئر اینڈ ایتھکس کمیٹیوں نے منظور کیا تھا اور ادارہ جاتی انتظامی کمیٹی اور لیبارٹری اینیملز کی اخلاقیات کمیٹی (IACUC لائسنس نمبر: 201811009) کے رہنما خطوط کی تعمیل کی تھی۔ چوہوں کو 20 ± 2 ڈگری پر 55 ± 5 فیصد کی نسبتہ نمی کے ساتھ اٹھایا گیا تھا۔ چوہوں کو آدھے دن کی روشنی اور اندھیرے کے چکر کے دوران تصادفی طور پر چوہوں کی معیاری خوراک کھلائی گئی (صبح 7:00 بجے سے شام 7:00 بجے تک روشنی کا مرحلہ)۔ چار چوہوں کو ایک پنجرے میں پالا گیا، جنہیں روگزن سے پاک خوراک اور پانی کھلایا گیا۔ تمام مواد، بشمول ڈھکن، فیڈر، بوتلیں، اور بستر استعمال سے پہلے خود بخود بند تھے۔ چوہوں کی عمر بڑھنے والے ماڈل کے قیام سے پہلے ایک ہفتہ تک چوہوں کی عادت ڈالی گئی۔

عمر بڑھنے کے چوہوں کے ماڈل کا قیام

عمر بڑھنے کا ذیلی D-galactose-حوصلہ افزائی چوہوں کا ماڈل قائم کیا گیا تھا اور اسے Zhao et al کا حوالہ دیا گیا تھا۔ معمولی ترمیم کے ساتھ [39]۔ galactose انتظامیہ کا طریقہ گردن اور کمر میں subcutaneous انجیکشن کے ذریعہ کیا گیا تھا۔ مجموعی طور پر 48 SPF چوہوں کو تصادفی طور پر 6 گروپوں (8 چوہوں/گروپ) میں اکلیمیشن کے ایک ہفتے کے بعد تفویض کیا گیا تھا۔ مائیکروسافٹ ایکسل میں معیاری=RAND() فنکشن کا استعمال کرتے ہوئے بے ترتیب نمبر بنائے گئے تھے۔ کنٹرول گروپ کے علاوہ ہر گروپ میں چوہوں کو 500 ملی گرام ڈی گیلیکٹوز فی کلوگرام جسمانی وزن (شنگھائی بلیو سیزن بائیولوجیکل کمپنی، لمیٹڈ، شنگھائی، چین) کے ساتھ دن میں ایک بار 4 ہفتے تک انجکشن لگایا گیا تھا (ڈی-گلیکٹوز حل، 50 g/L)۔ کنٹرول گروپ کو 10 ملی لیٹر جراثیم سے پاک نمکین فی کلو جسمانی وزن کے ساتھ انجکشن لگایا گیا تھا۔ اس کے علاوہ، علاج کے تین گروپوں کو L کی انٹرا گیسٹرک خوراکیں دی گئیں۔cistanche tubulosa dosage redditپلانٹارم NJAU-01 (10' CFU/mL، 10 ڈگری CFU/mL، اور 10 ڈگری FU/mL) 20 mL فی کلو جسمانی وزن پر، اور بالترتیب LP1 گروپ، LP2 گروپ اور LP3 گروپ کے طور پر نامزد کیا گیا ہے۔ کنٹرول گروپ اور عمر رسیدہ گروپ کے چوہوں کو روزانہ 20 ملی لیٹر/کلوگرام کی شرح سے جراثیم سے پاک نمکین کھلایا جاتا تھا۔ مثبت کنٹرول گروپ میں چوہوں کا روزانہ 20 ملی لیٹر/کلوگرام پر 1 ملی گرام/ملی لیٹر وٹامن سی (Vc) کے ساتھ علاج کیا گیا۔ پورا تجربہ چار ہفتے تک جاری رہا۔

ٹشو کے نمونوں کی تیاری

چوہوں کو 3 فیصد isoflurane کے intraperitoneal انجیکشن کے ذریعے بے ہوشی کی حالت میں منتقل کیا گیا۔ موت کی تصدیق کے لیے دل کی دھڑکنوں کا بند ہونا اور نقصان دہ محرک (ہند پاو چٹکی) کے لیے عدم ردعمل کو معیار کے طور پر استعمال کیا گیا۔ چوہوں کی آنکھ کا بال ہٹا دیا گیا، اور خون نکالا گیا۔ پھر سیرم حاصل کرنے کے لیے خون کو فوری طور پر 3,00xg پر 10 منٹ کے لیے 4 ڈگری پر سینٹرفیوج کیا گیا اور تجزیہ ہونے تک -20 ڈگری پر محفوظ کیا گیا۔ euthanized ہونے کے بعد، چوہوں کو غیر شعوری طور پر سروائیکل verte-brae کھینچ کر مار دیا گیا، اور جگر، دل، تلی، گردے، پھیپھڑوں اور دماغ کی کٹائی کی گئی، اور اعضاء کے اشاریے کا تعین کرنے کے لیے ان کا وزن کیا گیا۔ جگر اور دل کے نمونوں کو 0.9 فیصد NaCl کے ساتھ 10 فیصد ٹشو ہوموجنیٹ میں یکساں کیا گیا تھا، اور سپر ناٹینٹ کو سینٹرفیوگریشن کے ذریعے جمع کیا گیا جیسا کہ اوپر بتایا گیا ہے۔

پیرامیٹر کا پتہ لگانا

T-AOC اور SOD، GSH-Px، اور CAT کی اینٹی آکسیڈینٹ انزیمیٹک سرگرمیاں، اور MDA کے مواد کا تعین کل اینٹی آکسیڈینٹ صلاحیت پرکھ کٹ (ABTS طریقہ، A015-2-1)، سپر آکسائیڈ ڈسمیوٹیز (SOD) پرکھ کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا تھا۔ کٹ (WST-1 طریقہ، A001-1-2)، glutathione peroxidase (GSH-PX) پرکھ کٹ (colorimetric طریقہ، A0060201)، catalase (CAT) پرکھ کٹ (colorimetric طریقہ، A007-2-1 ) اور میلونڈیالڈہائڈ (MDA) پرکھ کٹ (TBA طریقہ، A003-2-1)، بالترتیب۔ تمام کٹس نانجنگ جیانچینگ بائیو انجینئرنگ انسٹی ٹیوٹ کمپنی لمیٹڈ (نانجنگ، جیانگ سو، چین) سے خریدی گئی تھیں۔ تمام نمونوں کو سہ رخی میں جانچا گیا تھا، اور پتہ لگانے کے طریقہ کار ہدایات کے مطابق کیے گئے تھے۔

شماریاتی تجزیہ

ڈیٹا پروسیسنگ سسٹم 7 کا استعمال کرتے ہوئے ڈیٹا کا تجزیہ کیا گیا۔{2}}5 سافٹ ویئر (Hangzhou Ruifeng Information Technology Co., Ltd, Hangzhou, China)۔ ڈنکن کے نئے پیچیدہ رینج کے طریقہ کار سے مختلف ذرائع کا موازنہ کیا گیا۔ شماریاتی اہمیت کا ٹیسٹ 0.05 کی سطح پر کیا گیا تھا (P<>

یہ مضمون Ge et al سے ماخوذ ہے۔ BMC مائکرو بایولوجی (2021) 21:182 https://doi.org/10.1186/s12866-021-02248-5