ماحولیاتی دباؤ کے خلاف ہندوستانی صندل کی لکڑی کے تیل کی اینٹی آکسیڈینٹ اور عمر بڑھانے کی صلاحیت

از راہ کرم رابطہ کریںoscar.xiao@wecistanche.comمزید معلومات کے لیے

خلاصہ:سنٹلم البم کے ہارٹ ووڈ سے کشید کیا گیا، انڈین سینڈل ووڈ آئل ایک ضروری تیل ہے جسے تاریخی طور پر جلد کی حالت اور چمکدار بنانے کے لیے کاسمیٹکس میں قدرتی فعال جزو کے طور پر استعمال کیا جاتا رہا ہے۔ اسے اینٹی آکسیڈینٹ، اینٹی سوزش، اور انسداد پھیلانے والی سرگرمیوں کی نمائش کے لیے دستاویز کیا گیا ہے۔ یہاں، ہم نے HaCaI خلیوں میں اور انسانی جلد کی وضاحتوں میں آکسیڈیٹیو تناؤ کی نمائش کے بعد انڈین صندل کی لکڑی کے تیل کے حفاظتی اور عمر رسیدہ اثرات کی تحقیقات کی۔ پروب DCFH-DA کا استعمال کرتے ہوئے، 412nm اور 450 nm یا سگریٹ کے دھوئیں پر نیلی روشنی کی نمائش کے بعد ہندوستانی صندل کی لکڑی کے تیل کی اینٹی آکسیڈینٹ صلاحیت کی نگرانی کی گئی۔ صندل کی لکڑی کے تیل کے بڑھاپے کے خلاف اثر کو کولیجینیز لیول (MMP-1) کے تشخیص کے ذریعے انسانی جلد کی وضاحت میں بھی دریافت کیا گیا۔ ہم نے اطلاع دی ہے کہ ہندوستانی صندل کی لکڑی کے تیل میں اینٹی آکسیڈینٹ صلاحیت موجود ہے جو فری ریڈیکل جنریٹنگ کمپاؤنڈ (AAPH) کے ذریعہ تیار کردہ ROS کو ختم کر سکتی ہے۔ ماحولیاتی دباؤ کے بعد سامنے آنے سے یہ بات سامنے آئی کہ ہندوستانی صندل کی لکڑی کے تیل میں وٹامن ای (الفا ٹوکوفیرول) کے مقابلے میں اعلیٰ اینٹی آکسیڈنٹ سرگرمی ہوتی ہے۔ انسانی جلد کی وضاحت کا استعمال کرتے ہوئے، اس مطالعہ نے یہ ظاہر کیا کہ ہندوستانی صندل کی لکڑی کا تیل MMP کی آلودگی سے پیدا ہونے والی سطح کو بھی روک سکتا ہے-1۔bioflavonoidsنتائج نے اشارہ کیا کہ ہندوستانی صندل کی لکڑی کا تیل ممکنہ طور پر ماحولیاتی دباؤ کے خلاف کاسمیٹکس اور ڈرمیٹولوجی میں ایک حفاظتی اور بڑھاپے کے خلاف فعال جزو کے طور پر کام کر سکتا ہے۔

مزید جاننے کے لیے براہ کرم یہاں کلک کریں۔

مطلوبہ الفاظ:نمائش سابق vivo؛ وٹرو میں؛ اوکسیڈیٹیو تناؤ؛ عمر بڑھنے ہندوستانی صندل کا تیل

1. تعارف

ضروری تیلوں اور ضروری تیلوں پر مشتمل پودوں کے پرزوں کی انسانی صحت پر مثبت اثر ڈالنے کی صلاحیت کے لیے طویل عرصے سے قدر کی جاتی رہی ہے۔ ضروری تیلوں کو بڑے پیمانے پر ٹیرپینز کے طور پر درجہ بندی کیا جاتا ہے اور ان کے مونو آکسیجن والے اینالاگ کو ٹیرپینز کے طور پر درجہ بندی کیا جاتا ہے۔ یہ مالیکیولز فطرت میں بہت سے پودوں کے ذریعہ تیار کیے جاتے ہیں جن میں دو اہم قسم کے ٹیرپینز پائے جاتے ہیں: مونوٹرپینز، ایک C10 کاربن فریم والے مالیکیول، اور سیسکوٹرپینز، C15 کاربن فریم کے ساتھ۔

انڈین سینڈل ووڈ آئل ایک ضروری تیل ہے جو سنٹلم البم [1] کی خوشبو دار ہارٹ ووڈ کی بھاپ کشید کے ذریعے حاصل کیا جاتا ہے، جس میں بنیادی طور پر سیسکوٹرپینز ہوتے ہیں۔ یہ تیل نرم، گرم، اور لکڑی کی بو کے ساتھ اپنی گھنائی کی خصوصیات کے لیے مشہور ہے۔ اس بدبو کے نتیجے میں، تیل نے بہت سی ایپلی کیشنز جیسے پرفیومری، عطر، اور بخور میں اپنا راستہ تلاش کر لیا ہے [2]۔

ہندوستانی صندل کی لکڑی کے تیل میں اہم اجزاء isomers کا ایک گروپ ہے جسے sotalol، (za-santalol، z- -sotalol، trans- -bergamot، اور epi- -santalol) کہا جاتا ہے۔ یہ فارنسین پائروفاسفیٹ پر عمل کرنے والے سیسکوٹرپین ترکیب کے ذریعہ تیار ہوتے ہیں جس کے بعد پی450- منحصر مونو آکسیجنز کے ذریعہ آکسیکرن ہوتا ہے۔cistanche خریدیںسیسکوٹرپینول کا دوسرا گروپ فارنسین پائروفاسفیٹ (بیسابولولز، کرکومین-12-اول، اور لینسول) [3,4] پر monoterpene synthase کے عمل سے بھی تیار ہوتا ہے۔

Cistanche بڑھاپے کو روک سکتا ہے۔

ہندوستانی صندل کی لکڑی کے تیل کے اجزاء کو اچھی طرح سے بیان کیا گیا ہے اور ان کے ڈھانچے کو واضح کیا گیا ہے [5]۔ اجزاء کا تجزیہ گیس کرومیٹوگرافی کے ذریعے شعلہ آئنائزیشن ڈیٹیکشن (GC FID) کے ساتھ معمول کے تجزیہ کے طور پر کیا جا سکتا ہے [3]۔ یہ تسلیم کیا گیا ہے کہ ہندوستانی صندل کی لکڑی کاسمیٹک اور دواؤں کے اجزاء کے طور پر استعمال ہوتی ہے۔ درحقیقت، یہ قدیم ترین تسلیم شدہ کاسمیٹک اجزاء میں سے ایک ہے، جس کا دستاویزی استعمال 500 قبل مسیح تک ہے جہاں صندل کی لکڑی کو کاسمیٹک اور صحت کے مقاصد کے لیے استعمال کیا جاتا تھا اور ہندوستانی اور چینی روایتی ادویات میں شامل کیا جاتا تھا [6]۔ کلیوپیٹرا، جس کی شہرت جدید دور میں بھی اس سے آگے چلی آرہی ہے، نے مبینہ طور پر صندل کی لکڑی کو اس کے کاسمیٹک فوائد کے لیے استعمال کیا۔ صندل کی لکڑی پر مشتمل کاسمیٹک فارمولوں پر تفصیلی مقالے ہندوستان کے گپتا دور اور چین کے تانگ خاندان [2,6] میں لکھے گئے تھے۔

آیورویدک نظام طب نے صندل کی لکڑی کو خاص طور پر جلد کی صحت کے لیے ایک مادہ کے طور پر درج کیا ہے، جس سے اس کی سرگرمیوں کو پرفیوم کے طور پر سمجھی جانے والی خوشبو سے ہٹ کر نمایاں کیا گیا ہے۔ صندل کی لکڑی کو روایتی چینی طب (TCM) اور آیوروید [7,8] دونوں میں خون صاف کرنے اور توانائی بخشنے کے لیے اندرونی طور پر بھی استعمال کیا جاتا ہے۔ آج، ہندوستانی صندل کی لکڑی ہندوستان کے آیورویدک فارماکوپیا، چائنا فارماکوپیا میں پائی جاتی ہے، اور اسے حال ہی میں برطانوی فارماکوپیا میں شامل کیا گیا ہے۔

اس سے پہلے کے محققین نے تیل کی فارماسولوجیکل خصوصیات کو بھی دیکھا ہے جس میں اینٹی مائکروبیل، اینٹی سوزش، اینٹی وائرل، اور اینٹی پھیلاؤ جیسی خصوصیات کی تحقیقات کی جا رہی ہیں [9]۔ مثال کے طور پر، موہن کمار وغیرہ۔[10] آکسیڈیٹیو نیوروڈیجنریشن [10] پر اثر قائم کرنے کے لیے انسانی نیوروبلاسٹ سیل لائنوں پر ہندوستانی صندل کی لکڑی کے تیل کی اینٹی آکسیڈیٹیو خصوصیات کی اطلاع دی۔ شرما وغیرہ کے ذریعہ ہندوستانی صندل کی لکڑی کے تیل کی سوزش کی خصوصیات کی اطلاع دی گئی۔ جب بیکٹیریل لیپوپولیساکرائڈز [11,12] کے ذریعہ حوصلہ افزائی کی جاتی ہے تو ڈرمل فائبروبلاسٹ خلیوں کے لئے [11]۔cistanchیہ تھا: اطلاع دی گئی کہ ہندوستانی صندل کی لکڑی کے تیل کی علاج کی قیمت قدرتی سیسکیٹرپینز میں اس کے اعلیٰ مواد سے متعلق ہے، یعنی الفا-سنٹالول (تیل کی ساخت کا 50 فیصد) اور بیٹا-سینٹلول (تیل کی ساخت کا 20 فیصد)[13,14 ]جبکہ حالیہ برسوں میں ہندوستانی صندل کے فارماسولوجیکل اثرات کی تحقیق وسیع ہے، ہندوستانی صندل کی کاسمیٹک صفات پر تحقیق اتنی وسیع نہیں ہے۔

جلد جسم کا سب سے بڑا عضو ہے اور سب سے بیرونی رکاوٹ اکثر براہ راست اور کثرت سے ماحولیاتی آلودگیوں کے سامنے آتی ہے۔ یہ پریشانی کا باعث ہے، کیونکہ جلد کا بنیادی کام ماحولیاتی تناؤ سے بچانا ہے، لیکن یہ ان کے لیے بہت حساس بھی ہے۔ نقصان دہ مادے جیسے آلودگی اور سورج کی نقصان دہ ہم آہنگی جلد میں سوزش، آکسیڈیٹیو تناؤ، اور ناقص میٹابولک سرگرمیاں جیسے جلد کے حالات کا باعث بن سکتی ہے [15]۔ حالیہ کاسمیٹک رجحانات کا مقصد جلد کی صحت کو برقرار رکھنا اور آلودگی، الٹرا وایلیٹ ریڈی ایشن (UV) اور سورج اور ڈیجیٹل اسکرینوں سے نظر آنے والی روشنی کے سامنے آنے پر جلد کی مثبت عمر کو فروغ دینا ہے[16]۔ ڈرمیٹولوجی کے میدان میں پیشرفت نے UV اور مرئی روشنی کے جلد کے اثرات کی تحقیقات کرنے والے متعدد مطالعات کو جنم دیا ہے [17]۔ حالیہ برسوں میں، ادب کی ایک نئی شاخ نے یہ ظاہر کیا ہے کہ UV کے علاوہ، دیگر تناؤ جیسے کہ ہائی انرجی ویزیبل (HEV) لائٹ، یا مرئی سپیکٹرم کے 400-470 nm علاقے میں نیلی روشنی، بھی ماحولیاتی آلودگی، جلد کی سطح پر حیاتیاتی عمل کو متحرک کر سکتی ہے اور جلد کی قبل از وقت عمر بڑھنے کا باعث بن سکتی ہے [18] نیلی روشنی قدرتی طور پر سورج کی روشنی میں موجود ہوتی ہے جو زمین کی سطح تک پہنچتی ہے اور روشنی خارج کرنے والے ڈائیوڈس (ایل ای ڈی) بلب پر مشتمل مختلف الیکٹرانک آلات کے ذریعے بھی خارج ہوتی ہے۔ 19]پہلے یہ دکھایا گیا ہے کہ سورج سے نکلنے والی نیلی روشنی ماحولیاتی آلودگی جیسے ذرات، سگریٹ کا دھواں، اور اوزون کے ساتھ مل کر اہم آکسیڈیٹیو تناؤ، سوزش، اپوپٹوسس، اور کولیجن کی تنزلی کا باعث بن کر جلد کی سالماتی ساخت کو متاثر کرتی ہے۔ میٹرکس میٹالوپروٹینیسز جیسے ایم ایم پی-1 اور ڈی این اے کو نقصان پہنچانے کے ذریعے۔

وہ مادے جو فعال طور پر اوپر کی نمائش سے جلد کی حفاظت یا مرمت کرتے ہیں وہ ایڈاپٹوجنز [21] کے نام سے جانے جاتے ہیں۔ اس مطالعہ میں، نیلی روشنی (412 nm اور 450 nm)، سگریٹ کا دھواں، اور اوزون کو ماحولیاتی دباؤ کے طور پر منتخب کیا گیا تاکہ مقداری طور پر ہندوستانی صندل کی لکڑی کے تیل کی اینٹی آکسیڈینٹ اور اینٹی کولیجنیز صلاحیت کو ظاہر کیا جا سکے۔cistanche آسٹریلیاانڈین سینڈل ووڈ آئل کی ری ایکٹیو آکسیجن پرجاتیوں (ROS) پر انڈین سینڈل ووڈ آئل کی سکیوینگنگ سرگرمی کی پیمائش کر کے اینٹی آکسیڈنٹ کی صلاحیت کی کھوج کی گئی۔ پھر، MP-1 پر انڈین سینڈل ووڈ آئل کی روک تھام کی صلاحیت کی پیمائش کر کے اینٹی ایجنگ اثر کی چھان بین کی گئی۔ حاصل کردہ ڈیٹا وٹرو میں خلیات اور جلد پر حفاظتی اثر ڈال کر کاسمیٹک اور ڈرمیٹولوجیکل نگہداشت میں ہندوستانی صندل کی لکڑی کے تیل کی مناسب اڈاپٹوجن بننے کی صلاحیت پر روشنی ڈالنے میں مدد کرے گا۔

2. مواد اور طریقہ

2.1. ٹیسٹ اور کنٹرول مادہ

ہندوستانی صندل کی لکڑی کا تیل Quintis Sandalwood (Perth, WA, Australia) نے فراہم کیا تھا۔ یہ تیل سنٹالم البم کے درخت کی خوشبو دار لکڑی سے بھاپ نکالا گیا تھا، جو مغربی آسٹریلیا کے کنونورا میں واقع باغات میں اگایا گیا تھا۔ تیل کا تجربہ کیا گیا اور اس کی تصدیق آئی ایس او 3518[22] کی تعمیل کی گئی۔ ISO 3518 میں تفصیلی طریقہ کو استعمال کرتے ہوئے GC FID کے ذریعہ اجزاء کا تجزیہ ٹیبل 1 میں دیکھا جا سکتا ہے۔ Quercetin Gigma-Aldrich, St.Louis, MO, USA) اور الفا-ٹوکوفیرول (وٹامن E) (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) ، USA) کو مثبت کنٹرول کے طور پر استعمال کیا گیا تھا۔

2.2.خلیات اور ریجنٹس

انسانی لافانی keratinocyte سیل لائن، HaCaT (ATCC&Manassas, VA, USA) کی ثقافت Dulbecco's Modified Eagles Medium (DMEM) (Thermo Scientific, Waltham, MA, USA) میں کی گئی تھی اور اسے 100 strepcinmy, ug/m. 10 U/mL پنسلین (Pen-Strep)، 2mm L-glutamine، 10 فیصد گرمی سے غیر فعال FBS، اور 0.25 فیصد سوڈیم بائک کاربونیٹ (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA)۔ سیل لائن کو 37 ڈگری پر برقرار رکھا گیا تھا۔ 5 فیصد CO2 کے ساتھ۔ سیل کو سلسلہ وار 70-80 فیصد سنگم پر گزرا تھا۔ تجربات کرتے وقت، HaCaT خلیات 100 فیصد سنگم کے قریب بڑھے تھے، اور تمام علاج ایک ہی میڈیم میں کیے گئے تھے۔

2.3.انسانی جلد کی وضاحت کی تیاری

انسانی جلد کی وضاحتیں، تحقیق کی رضامندی کے ساتھ، میموپلاسٹی کے بعد بقایا جلد سے حاصل کی گئیں اور کسی بھی ذیلی چربی کو دور کرنے کے لیے تراشی گئیں۔ جراثیم سے پاک ڈرمل بایپسی پنچ (کائی میڈیکل، ڈلاس، TX، USA) کا استعمال کرتے ہوئے جلد سے آٹھ ملی میٹر کی جلد کی بایپسی لی گئی اور اسے تیزی سے 24-کنویں کی پلیٹ میں رکھا گیا۔ اس کے بعد، جلد کو ایک سکن کلچر میڈیم، GibcoTM DMEM میں، گلوٹامین یا فینول ریڈ (تھرمو فشر، والتھم، ایم اے، یو ایس اے) کے بغیر ایئر مائع انٹرفیس کلچر کے حالات میں برقرار رکھا گیا۔ مناسب موافقت کے وقت کے لئے جلد کو 5 فیصد COZ ماحول میں 37 ڈگری پر برقرار رکھا گیا تھا۔

2.4.تجرباتی ڈیزائن

تجرباتی ڈیزائن کو شکل 1 میں دکھایا گیا ہے۔

2.5.ماحولیاتی تناؤ (نیلی روشنی کی نمائش (412/450 این ایم) اور سگریٹ کا دھواں)

2.5.1.بلیو لائٹ ماخذ

ہر نیلی روشنی کا لیمپ (412nm اور 450 nm) 10 ایک جیسی LEDs (Honglitronic, Guangzhou, China) پر مشتمل ہوتا ہے جو ایک ریفلیکٹر میں سرایت کر کے مسلسل دکھائی دینے والی تابکاری خارج کرتا ہے، جسے شیشے کی شفاف کھڑکی سے ڈھانپا گیا تھا۔ لیمپ کے لیے 412 nm یا 450 nm کی زیادہ سے زیادہ طول موج والی واحد چوٹی کا مشاہدہ کیا جا سکتا ہے۔ روشنی کے منبع پر یپرچر 4.5 سینٹی میٹر × 4.5 سینٹی میٹر تھا۔ روشنی کے منبع سے تقریباً 5 سینٹی میٹر کے فاصلے پر نمائش کی سطح پر سرنی تقریباً 10 سینٹی میٹر × 10 سینٹی میٹر تھی۔ ایک تھرموپائل ڈیٹیکٹر (جینٹیک ای او یو ایس اے انکارپوریشن، لیک اوسویگو، یا، یو ایس اے) تفتیشی مقام کی سطح پر واٹ/سینٹی میٹر میں روشنی کے منبع کی درست شدت کی پیمائش کے لیے استعمال کیا گیا تھا۔ نمائش کا وقت اس بات کو یقینی بنانے کے لیے ایڈجسٹ کیا گیا تھا کہ 1 J/cm2 نیلی روشنی تفتیشی مقام پر پہنچا دی گئی تھی۔ 2.5.2.سگریٹ کا دھواں

کنویں کی پلیٹوں کو ایڈجسٹ کرنے کے لیے ایک شفاف نمائشی چیمبر اور ایئر پمپ سے منسلک سگریٹ کا استعمال کیا گیا تھا (ٹارسن، کولکتہ، انڈیا)۔ 30 منٹ کی نمائش کے دوران تین سگریٹ استعمال کیے گئے۔ سگریٹ کو ایک پمپ سے جوڑا گیا تھا جو تمباکو نوشی کرنے والے کی خواہش کی نقل کرتا ہے، اور چیمبر میں خارج ہونے والا دھواں خارج ہونے والے دھوئیں کے مساوی ہے۔ نمائش کے آغاز میں ایک سگریٹ جلائی گئی اور پھر ہر 10 منٹ پر کل تین سگریٹ فی 30 منٹ کی نمائش کے لیے۔

2.6.اوزون کی نمائش

اوزون ایک اوزون جنریٹر کا استعمال کرتے ہوئے تیار کیا گیا تھا۔ اسکن ایکسپلانٹس کو 30 منٹ کے کل نمائش کے وقت کے لئے 1.6 حصے فی ملین (ppm) کے سامنے رکھا گیا تھا۔

2.7.MTT (3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-Diphenyltetrazolium Bromide) Assay for Cell Viability and Proliferation

HaCaT سیل لائن پر وٹرو سیل کی قابل عمل تشخیص کی گئی تھی جس کے تحت 1 x 104 خلیے مکمل درمیانے درجے کے ہر کنویں میں فلیٹ نیچے والی پلیٹوں میں شامل کیے گئے تھے اور 16 گھنٹے کے لیے 5 فیصد CO2 میں 37 ڈگری پر انکیوبیٹ کیے گئے تھے۔ انکیوبیشن کی. خلیوں کو 37 ڈگری پر 24 گھنٹے یا 48 گھنٹے کے لیے ایتھنول میں ہندوستانی صندل کی لکڑی کے تیل کی مختلف ارتکاز کے ساتھ علاج کیا گیا۔ سپرنٹینٹس کو ہٹا دیا گیا تھا، اور 3-(4)5-ڈائمتھی1-2-تھیازول)-2،5-ڈفینی!-2ایچ ٹیٹرازولیم برومائڈ ( MTT) (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) حل (DMEM میں 1mg/mL) ہر کنویں میں شامل کیا گیا۔ خلیوں کو 37 ڈگری پر دو گھنٹے تک انکیوبیٹ کیا گیا تھا۔ انکیوبیشن کے بعد، ایم ٹی آئی محلول کو ہٹا دیا گیا، اور فارمازان کرسٹل کو تحلیل کرنے کے لیے آئسوپروپانول شامل کیا گیا۔ اس کے بعد، Synergy HTX ملٹی موڈ مائکروپلیٹ ریڈر (BioTek، Winooski، VT، USA) کا استعمال کرتے ہوئے جذب کو 570 nm پر ماپا گیا۔ 2.8 سیلولر اینٹی آکسیڈینٹ پرکھ

پہلے، 1 × 10مکمل درمیانے درجے کے 5 خلیات کو کنویں کی پلیٹ کے ہر کنویں میں شامل کیا گیا اور 16 گھنٹے تک انکیوبیشن کے لیے 5 فیصد CO2 میں 37 ڈگری پر انکیوبیشن کیا گیا۔ سائٹوٹوکسیٹی اور حل پذیری ٹیسٹوں سے حاصل کردہ ڈیٹا کی بنیاد پر، ہندوستانی صندل کی لکڑی کے تیل کی بہترین ارتکاز کا تعین ہندوستانی صندل کی لکڑی کے تیل کو آٹھ مختلف ارتکاز پر جانچ کر کے کیا گیا: یعنی، 0.2 فیصد،0.1 فیصد،0۔{15}}7 فیصد،0۔{20}5 فیصد،0۔{27}}25 فیصد ,{ {29}}۔{31}}1 فیصد،005 فیصد، اور 0.001 فیصد۔ مثبت کنٹرول کے طور پر، اس پرکھ میں 0.0075 فیصد، 0.00375 فیصد، 0.001875 فیصد، 0.0009375 فیصد، 0.002375 فیصد، 0.0043 فیصد اور 0.0047 فیصد کی چھ مختلف ارتکاز میں quercetin (Sigma-Aldrich, St.Louis, MO,USA) کا بھی تجربہ کیا گیا۔ اس کے بعد، HaCaT خلیوں کا علاج 1 ملی میٹر نان فلوروسینٹ پروب، 21,7'-ڈائیکلورو فلوروسین ڈائیسیٹیٹ (DCFH-DA) (Sigma, St. Louis, MO, USA) سے تین گھنٹے تک 37 ڈگری اور 5 فیصد CO2 کے ساتھ کیا گیا۔ . DCFH کا آکسیکرن رد عمل 600 uM AAPH (2,2'-azobis(2-amidinopropane) dihydrochloride) (Sigma, St. Louis, MO, USA) کے اضافے سے شروع ہوا تھا۔ Lysis بفر (PBS میں 2 فیصد Triton X-100) کنویں میں شامل کیا گیا تھا۔ پھر فلوروسینس کی پیمائش کی گئی۔ 485/88 nm اور اخراج 528/30 nm کی حوصلہ افزائی کی طول موج کو Synergy HTX ملٹی موڈ مائکروپلیٹ ریڈر (BioTek, Winooski, VT, USA) کا استعمال کرتے ہوئے ماپا گیا۔

2.9.انٹرا سیلولر ری ایکٹیو آکسیجن اسپیسز (ROS) سکیوینجنگ ایکٹیویٹی پرکھ

تقریباً 1×10 ڈگری HaCaT خلیات کو مختلف 24-کنویں پلیٹوں میں فی کنویں میں سیڈ کیا گیا تھا۔ 37 ڈگری پر 16 گھنٹے کے موافقت انکیوبیشن پیریڈ کے بعد، ہندوستانی صندل کی لکڑی کا تیل تین مختلف ارتکاز (0.2 فیصد، 0.1 فیصد، اور 0) میں خلیوں میں شامل کیا گیا۔ .05 فیصد) 24 گھنٹے کے لیے 37 ڈگری پر اور 5 فیصد CO2 کے ساتھ ضمیمہ۔ مثبت کنٹرول الفا-ٹوکوفیرول (وٹامن ای) (سگما-الڈرچ، سینٹ لوئس، ایم او، یو ایس اے) کا بھی تین مختلف ارتکاز پر تجربہ کیا گیا: یعنی، 15 یونٹس (2 فیصد کے مساوی)، 7.5 یونٹس (1 فیصد کے مساوی) ، اور 3.75 یونٹس (0.5 فیصد کے مساوی)۔ پھر، خلیات کا علاج DCFH-DA (Sigma, St. Louis, MI, USA) سے تین گھنٹے تک 37 ڈگری اور 5 فیصد CO2 پر کیا گیا۔ DCFH-DA علاج کے بعد، خلیات کو 1X PBS کے ساتھ تین بار دھویا گیا۔ پھر، 96-کنویں کی پلیٹوں کو 1J/cm2 پر 412 nm اور 450 nm نیلی روشنی یا سگریٹ کے دھوئیں کو ماحولیاتی دباؤ کے طور پر بے نقاب کیا گیا اور کنٹرول کے طور پر ایک تاریک ماحول میں بے نقاب چھوڑ دیا گیا۔ نمائش کے بعد، تمام 96 کنوؤں میں لیسز سلوشن (2 فیصد Triton X-100 کے ساتھ) شامل کیا جاتا ہے۔ اس کے بعد، کنویں کی پلیٹوں کو ہلا دیا گیا، اور فلوروسینس (485/88 nm اور اخراج 528/30 nm کی حوصلہ افزائی کی طول موج) کو Synergy HTX ملٹی موڈ مائکروپلیٹ ریڈر (BioTek، Winooski، VT، USA) کا استعمال کرتے ہوئے ماپا گیا۔

2.10 Collagenase Inhibition Assay بذریعہ میٹرکس Metalloproteinase-1(MP-1)

جلد کی بایپسی اور موافقت کے وقت کے بعد، ٹیسٹ آئٹم کو 24 ہیٹ 37 ڈگری اور 5 فیصد CO2 پر لگایا گیا اور انکیوبیٹ کیا گیا۔ پھر، کنویں کی پلیٹوں کو 30 منٹ تک سگریٹ کے دھوئیں یا اوزون (1.6 پی پی ایم) کے سامنے رکھا گیا۔ بقیہ پلیٹوں کو کنٹرول کے طور پر تاریک ماحول میں بے نقاب چھوڑ دیا گیا تھا۔cistanche فوائداس کے بعد، انسانی MMP-1 ELISA Kit (Sigma) کے مینوفیکچرر کی ہدایات پر عمل کرتے ہوئے، میٹرکس میٹالوپروٹینیز-1 (MP-1) کی سطح کا اندازہ لگانے کے لیے سپرنٹنٹ کو اینٹی باڈی لیپت کنویں پلیٹ میں منتقل کیا گیا۔ ، سینٹ لوئس، MI، USA)۔ رنگ کی شدت میں اضافے کی نگرانی 450 nm (BioTek، Winooski، VI، USA) پر اسپیکٹومیٹری کے ذریعے کی گئی۔ 2.11 شماریاتی تجزیہ

تجربات کو حیاتیاتی سہ رخی میں آزادانہ طور پر دہرایا گیا۔ گرافیکل ڈیٹا میں ایرر بارز اوسط (SEM) کے معیاری تخمینہ کی نمائندگی کرتے ہیں۔ گراف پیڈ پرزم ورژن 7 (GraphPad Software Inc., San Diego, CA, USA) کا استعمال کرتے ہوئے شماریاتی تجزیے کے لیے یک طرفہ انووا کا استعمال کیا گیا اور جب p-value {{3} سے کم تھی تو شماریاتی اہمیت کا دعویٰ کیا گیا۔ }.01 (p<>

3. نتائج

3.1.MTT(3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-Diphenyltetrazolium Bromide) Assay for Cell Viability and Proliferation

HaCaT خلیوں میں آکسیڈیٹیو تناؤ سے بچانے کے لیے ہندوستانی صندل کی لکڑی کے تیل کی افادیت کے تعین سے پہلے، صندل کی لکڑی کے تیل کی زیادہ سے زیادہ ارتکاز کو قائم کرنے کے لیے ایک MTI پرکھ کی گئی تھی جو سیل سائیکل یا سیل کے زہریلے پن میں کوئی خرابی پیدا نہیں کرے گی۔ اس طرح، HaCaT خلیوں کا علاج ہندوستانی صندل کی لکڑی کے تیل کے مختلف ارتکاز کے ساتھ 24 گھنٹے یا 48 گھنٹے (شکل 2A، B) کے لیے کیا گیا۔

24 گھنٹے بعد علاج میں، ہندوستانی صندل کی لکڑی کے تیل کی سب سے زیادہ ارتکاز کا تجربہ کیا گیا (10 فیصد، 2 فیصد، 0.6 فیصد،0.5 فیصد،{{1{{13} }}}}.4 فیصد، اور {{20}.3 فیصد ) نے خلیات کے مقابلے میں 70 فیصد سے کم سیل کے قابل عمل شمار کا انکشاف کیا جن کا علاج صرف سیل کلچر میڈیا سے کیا جاتا تھا۔ ہندوستانی صندل کی لکڑی کے تیل کے 0.2 فیصد سے کم یا اس کے برابر، 70 فیصد سے زیادہ سیل کی قابل عملیت دیکھی جا سکتی ہے۔ متوازی طور پر، ہندوستانی صندل کی لکڑی کے تیل کے ساتھ 48 گھنٹے تک علاج کیے گئے HaCaT خلیوں کی سیل کی گنتی کا بھی جائزہ لیا گیا (شکل 2B)۔ 10 فیصد، 2 فیصد، 0.6 فیصد، 0.5 فیصد، 0.4 فیصد، اور 0.3 فیصد کے ارتکاز پر۔ سیل کی تعداد میں 70 فیصد سے بھی کم کمی دیکھی جا سکتی ہے۔ تاہم، 0.2 فیصد ہندوستانی صندل کی لکڑی کے تیل یا اس سے کم کے ساتھ علاج کیے جانے والے خلیوں نے 70 فیصد سے زیادہ خلیے کی قابل عملیت کو ظاہر کیا، جو اس سے پہلے 24 گھنٹے کے علاج کے وقت کے مشاہدے کی یاد تازہ کرتا ہے۔ ان نتائج کی بنیاد پر، HaCaT خلیات میں کئے گئے تمام بعد میں افادیت کے تجربات اور ہندوستانی صندل کی لکڑی کے تیل کے ساتھ 24 گھنٹے یا 48 گھنٹے علاج کی ضرورت 0.2 فیصد سب سے زیادہ ارتکاز کے طور پر انجام دی گئی۔

3.2 سیلولر اینٹی آکسیڈینٹ پرکھ

اس کے بعد، HaCaT خلیوں میں پیروکسائل انیشی ایٹر AAPH کی طرف سے پیدا ہونے والے آکسیڈیٹیو تناؤ سے بچانے کے لیے ہندوستانی صندل کے تیل کی صلاحیت کی نگرانی کی گئی۔ جیسا کہ MTT پرکھ میں طے کیا گیا ہے، استعمال ہونے والے ہندوستانی صندل کی لکڑی کے تیل کی سب سے زیادہ ارتکاز {{0}.2 فیصد تھی، اور استعمال ہونے والی سب سے کم ارتکاز 0 تھی۔{6}}01 فیصد تھی۔ Quercetin، ایک معروف اینٹی آکسائڈنٹ، ایک مثبت کنٹرول کے طور پر استعمال کیا جاتا تھا. استعمال ہونے والی سب سے زیادہ ارتکاز 0.0075 فیصد تھی، جبکہ استعمال ہونے والی سب سے کم ارتکاز 0.00023 فیصد تھی (شکل 3A، B)۔

ہندوستانی صندل کی لکڑی کے تیل نے جانچ کی گئی پانچ سب سے زیادہ ارتکاز میں اینٹی آکسیڈینٹ صلاحیت ظاہر کی ({{0}.2 فیصد،0.1 فیصد،0۔{8}}7 فیصد،{ {11}}۔ مثبت کنٹرول quercetin. ان نتائج نے تجویز کیا کہ 0.2 فیصد کی حراستی، ہندوستانی صندل کی لکڑی کے تیل میں ایک اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی ہے جو 0.0075 فیصد پر مثبت کنٹرول کوئرسیٹن کی اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی کی طرح طاقتور تھی۔ ICso کا تعین ہندوستانی صندل کی لکڑی کے تیل کے لیے 0.03 فیصد اور quercetin کے لیے 0.002 فیصد پایا گیا (شکل 3B)۔ 3.3.انٹرا سیلولر ری ایکٹیو آکسیجن اسپیسز (ROS) سکیوینجنگ ایکٹیویٹی پرکھ

ماحولیاتی تناؤ کی وجہ سے پیدا ہونے والے آکسیڈیٹیو تناؤ سے بچانے کے لیے ہندوستانی صندل کی لکڑی کے تیل کی اینٹی آکسیڈینٹ صلاحیت کی بعد میں نگرانی کی گئی۔ اس مطالعے میں تین مختلف ماحولیاتی ذہنی تناؤ کا استعمال کیا گیا تھا یعنی 412 nm پر نیلی روشنی، 450 nm پر نیلی روشنی، اور سگریٹ کا دھواں۔ نیلی روشنی کی دونوں طول موجوں کو 1J/cm2 کی خوراک پر جانچا گیا۔ MTI پرکھ سے اچھی سیلولر اینٹی آکسیڈینٹ افادیت کو ظاہر کرنے والے ہندوستانی صندل کی لکڑی کے تیل کے تین ارتکاز اس پرکھ کے لیے استعمال کیے گئے: یعنی،0۔{9}}5 فیصد،0.1 فیصد، اور 0.2 فیصد۔ الفا-ٹوکوفیرول، ایک لیپوفیلک اینٹی آکسیڈینٹ، 0.5 فیصد اور 2 فیصد (شکل 4) کے ارتکاز پر مثبت کنٹرول کے طور پر استعمال ہوتا تھا۔

سطحوں یا ROS میں ایک تیز شمولیت بنیادی طور پر دیکھی جا سکتی ہے جب علاج نہ کیے جانے والے HaCaT خلیات تناؤ کے سامنے آئے: 412 nm پر نیلی روشنی، 450 nm پر نیلی روشنی، اور سگریٹ کا دھواں۔ جب HaCaT خلیوں کا علاج انڈین صندل کی لکڑی کے تیل کے تین ارتکاز (005 فیصد،0.1 فیصد اور 0.2 فیصد) کے ساتھ کیا گیا تھا، تو نیلی روشنی (412) سے آکسیڈیٹیو تناؤ میں نمایاں کمی nm یا 450 nm) یا سگریٹ کا دھواں دیکھا جا سکتا ہے۔ درحقیقت، 66 فیصد (p<0.0001),73%><0.0001),and><0001) decreases="" in="" the="" level="" of="" ros="" could="" be="" observed="" in="" cells="" treated="" with="" 0.05%,0.1%,="" and="" 0.2%="" of="" indian="" sandalwood="" oil,="" respectively="" prior="" to="" exposure="" to="" blue="" light="" at="" 412="" nm.="" in="" cells="" exposed="" to="" blue="" light="" at="" 450="" nm,="" a="" similar="" trend="" could="" be="" observed="" where="" 60%(p="0.0012),68%(p=0.0005),and" 75%(p="0.0002)decreases" could="" be="" observed="" for="" similar="" concentrations="" of="" indian="" sandalwood="" oil,="" respectively.="" moreover,="" in="" hacat="" cells="" that="" were="" exposed="" to="" cigarette="" smoke,="" indian="" sandalwood="" oil="" was="" observed="" to="" significantly="" protect="" against="" the="" ros="" induced,="" although="" the="" decrease="" was="" more="" modest="" in="" comparison="" to="" blue="" light="" at="" 412="" nm="" and="" 450="" nm.="" thus,="" at="" the="" highest="" concentration="" (0.2%)="" of="" indian="" sandalwood="" oil,="" only="" a="" 28%(p="0.001)" decrease="" in="" the="" level="" of="" ros="" was="">

جبکہ مثبت کنٹرول کے تینوں ارتکاز (0.5 فیصد، 1 فیصد، اور 2 فیصد)، الفا-ٹوکوفیرول، نیلی روشنی 450 nm کی طرف سے حوصلہ افزائی ROS کو نمایاں طور پر کم کر سکتا ہے، صرف دو اعلی ترین ارتکاز الفا- ٹوکوفیرول (1 فیصد اور 2 فیصد) غیر علاج شدہ نمونوں کے مقابلے میں سگریٹ کے دھوئیں سے پیدا ہونے والے ROS کی سطح کے خلاف حفاظتی اثر پیدا کر سکتا ہے۔ تاہم، الفا ٹوکوفیرول کے لیے ٹیسٹ کیے گئے تینوں میں سے کوئی بھی ارتکاز نیلی روشنی 412 nm کے ذریعے حوصلہ افزائی ROS کو نمایاں طور پر کم نہیں کر سکتا ہے۔ دلچسپ بات یہ ہے کہ نیلی روشنی 412 nm کی نمائش سے پہلے الفا ٹوکوفیرول کی سب سے زیادہ ارتکاز کے ساتھ علاج کیے جانے والے HaCaT خلیوں میں، علاج نہ کیے جانے والے لیکن بے نقاب خلیوں کے مقابلے ROS کی سطح میں اضافہ دیکھا جا سکتا ہے۔ اس سے پتہ چلتا ہے کہ مداخلت DCFH-DA پرکھ، الفا-ٹوکوفیرول، اور نیلی روشنی کے درمیان 412 nm پر ہو سکتی ہے۔

3.4 Collagenase Inhibition Assay(MMP-1)

چونکہ ماحولیاتی تناؤ سے پیدا ہونے والے آکسیڈیٹیو تناؤ کے خلاف ہندوستانی صندل کی لکڑی کے تیل کے حفاظتی اثر کا مظاہرہ کیا گیا تھا، اس لیے اس بات کا جائزہ لیا گیا کہ آیا ہندوستانی صندل کی لکڑی کا تیل ایک بہاو اثر کرنے والے، MMP-1 کی نگرانی کرکے آلودگی کے نقصان دہ اثر سے بچا سکتا ہے۔ (شکل 5)۔

غیر علاج شدہ نمونوں میں ایم پی{{0}} کی سطحوں میں زبردست اضافہ ہوا جب غیر علاج شدہ نمونوں کے مقابلے میں ماحولیاتی دباؤ کا سامنا کرنا پڑا۔ اوزون کے سامنے آنے پر، بھارتی صندل کی لکڑی کا تیل MMP-1 کے اظہار کو 88 فیصد (p <0.0001) سے="" روکتا="" ہے۔="" ہندوستانی="" صندل="" کی="" لکڑی="" کے="" تیل="" نے="" سگریٹ="" کے="" دھوئیں="" کے="" سامنے="" آنے="" پر="" mmp-1="" کی="" سطح="" پر="" بھی="" روک="" تھام="" کا="" اثر="" ظاہر="" کیا۔="" اس="" نمائش="" کے="" لیے،="" علاج="" نہ="" کیے="" گئے="" اور="" علاج="" کیے="" گئے="" نمونوں="" کے="" درمیان="" فرق="" 70="" فیصد="" (p="0.0003)" تھا،="" جو="" شماریاتی="" لحاظ="" سے="" اہم="">

4. بحث

ہندوستانی صندل کی لکڑی 2500 سالوں سے استعمال ہورہی ہے، اور اس کا تجارتی استعمال 300 قبل مسیح [2,6] سے شروع ہوتا ہے۔ اس سے پہلے اس کے اینٹی آکسیڈینٹ، اینٹی ٹائروسینیز، اینٹی انفلامیٹری، اینٹی پھیلاؤ، اور اینٹی مائکروبیل خصوصیات [10-12,23,24] کی اطلاع دی گئی ہے۔ چندن کی فارماسولوجیکل سرگرمی کی اطلاعات کے باوجود، صرف چند مطالعات نے کاسمیٹک اجزاء کے طور پر اس کے فوائد کا جائزہ لیا ہے۔ خاص طور پر، ماحولیاتی تناؤ کے نقصان دہ اثر سے جلد کی حفاظت میں ہندوستانی صندل کی لکڑی کے تیل کے ممکنہ فوائد کی کبھی اطلاع نہیں دی گئی۔ اس مطالعہ میں، ہم نے یہ ظاہر کیا کہ ہندوستانی صندل کی لکڑی کے تیل نے جلد کی صفائی میں سگریٹ کے دھوئیں اور اوزون جیسے آلودگیوں کے خلاف ایک اہم حفاظتی اثر دکھایا ہے۔ ہندوستانی صندل کی لکڑی کا تیل نیلی روشنی اور سگریٹ کے دھوئیں دونوں کے ذریعہ ماحولیاتی اشتعال انگیزی سے پیدا ہونے والے آکسیڈیٹیو تناؤ سے HaCaT خلیوں کی حفاظت کرتا ہے۔ ہم نے مزید یہ ظاہر کیا کہ ہندوستانی صندل کی لکڑی کا تیل جلد کے ایکسپلانٹس میں کولیگنیس MMP-1 کی سطح کو کم کرتا ہے۔ سیلولر اینٹی آکسیڈینٹ اسسز کئے گئے جو ہندوستانی صندل کی لکڑی کے تیل کے روکنے والے اثر کو ظاہر کرتے ہیں۔ اس مطالعے میں، 2,2'-azobis (2-amidinopropane) dihydrochloride (AAPH) کو ایک آزاد ریڈیکل پیدا کرنے والے مرکب کے طور پر استعمال کیا گیا جو HaCaT خلیوں میں آکسیڈیٹیو تناؤ کی نقل کر سکتا ہے۔ اس کا استعمال بنیاد پرست نسل کی مستقل شرح کو دلانے کے لیے کیا گیا تھا، جس سے آزادانہ بنیاد پرستوں کی صفائی کی سرگرمی کا اندازہ لگانے کے لیے کافی وقت دیا گیا تھا [25]۔ Quercetin کو مثبت کنٹرول کے طور پر منتخب کیا گیا تھا۔ ہمارے مطالعے سے پتہ چلتا ہے کہ ہندوستانی صندل کی لکڑی کے تیل میں قائم اینٹی آکسیڈینٹ کوئرسیٹن کے مساوی اینٹی آکسیڈینٹ صلاحیت ہے، جہاں ROS کی سطح میں 95-85 فیصد کمی دونوں ٹیسٹ مصنوعات کے لیے استعمال ہونے والے سب سے زیادہ ارتکاز پر دیکھی جا سکتی ہے۔

اس کے بعد، HaCaT خلیوں کو ماحولیاتی آکسیڈیٹیو تناؤ کا نشانہ بنایا گیا، سگریٹ کے دھوئیں اور اس کے بعد نیلی روشنی کی دو الگ طول موجوں کا استعمال کیا گیا۔ استعمال ہونے والی نیلی روشنی کی دو طول موجوں کے مقابلے میں سگریٹ کا دھواں HaCaT خلیوں پر کہیں زیادہ دباؤ ڈالتا ہے۔ درحقیقت، سگریٹ کا دھواں کیمیاوی طور پر فعال آلودگیوں کے انسانی نمائش کے ذریعہ کے طور پر ایک ہر جگہ ماحولیاتی خطرہ ہے۔ سابق ویوو تجربے میں اوزون کا استعمال اسی طرح کیا گیا تھا۔ دونوں تناؤ نے ہائیڈروکسیل ریڈیکلز اور ہائیڈروجن پیرو آکسائیڈ سمیت ROS کی اعلی سطح پیدا کی، جو جلد میں نقصان دہ پیتھولوجیکل عمل سے منسلک ہو سکتے ہیں [26,27]۔ ہندوستانی صندل کی لکڑی کے تیل کا حفاظتی اثر نیلی روشنی کے مقابلے سگریٹ کے دھوئیں کے سامنے آنے والے خلیوں میں زیادہ معمولی تھا۔ اس کی وضاحت اس حقیقت سے کی جا سکتی ہے کہ اس تحقیق میں کیے گئے مختلف تجربات میں، سگریٹ کا دھواں نیلی روشنی کے مقابلے میں تقریباً دو گنا زیادہ ROS پیدا کرتا ہے۔ اس طرح، ہندوستانی صندل کی لکڑی کے تیل کے سب سے زیادہ ارتکاز (0.2 فیصد) کے ساتھ ساتھ 2 فیصد (15 یونٹس) پر الفا ٹوکوفیرول کے کنٹرول پر بھی، وہ ROS کی بلند مقدار سے مغلوب ہو گئے تھے۔ حوصلہ افزائی

UV کی نمائش، عمر بڑھنے کی وجہ سے قدرتی فعال تبدیلیوں کے ساتھ مل کر، ڈرمل فائبرو بلاسٹس MMP کی پیداوار کو بڑھانے کا سبب بنتی ہے-1 [28,29]۔ میٹرکس میٹالوپروٹینیز-1 (MMP-1) ایک زنک اور کیلشیم پر منحصر اینڈو پیپٹائڈیس ہے جو ہم آہنگی کے ساتھ ہے اور ڈرمل فائبروبلاسٹ اور کیراٹینوسائٹس دونوں سے خارج ہوتا ہے۔ یہ ایکسٹرا سیلولر میٹرکس (ECM) میں پائے جانے والے کولیجن کو توڑ کر کام کرتا ہے۔ پھر، MMP-1 کو ایک غیر فعال پروینزائم کے طور پر جاری کیا جاتا ہے، جو بعد میں پروٹولیٹک کلیویج کے ذریعے فعال ہوتا ہے، جس سے اس کی فعال شکل جاری ہوتی ہے۔ اپ گریجولیشن کی وجہ سے اس کی سرگرمی کا ایک بلند اظہار ایکسٹرا سیلولر میٹرکس کے انحطاط کے ساتھ منسلک کیا گیا ہے اور انسانی جلد کے ساتھ ساتھ جلد کے کینسر کی قبل از وقت تصویر کشی کا باعث بنتا ہے [30]۔

جلد کے بافتوں یا کلچرڈ فائبرو بلاسٹس میں، MMP-1 کی فعال اور غیر فعال شکل دونوں ہی کلچر میڈیا میں جاری کی جاتی ہیں [28]۔ تاہم، یہ غور کرنا چاہیے کہ ہائی تھرو پٹ ELISA پرکھ نے صرف پرو ڈومین اور MMP کی فعال شکل کی مقدار درست کی ہے-1 لیکن MMP کی غیر فعال شکل کی مقدار نہیں بتائی ہے-1 [28]۔ خاص طور پر، ہندوستانی صندل کی لکڑی کا تیل سابق ویوو جلد میں میٹرکس میٹالوپروٹینیز-1 (MP-1) ​​کی سطح کو نمایاں مقدار میں کم کرنے کے قابل تھا۔ اس طرح، ہم MP-1 ہندوستانی صندل کی لکڑی کے تیل میں نمایاں کمی دکھا کر یہ ثابت کر سکتے ہیں کہ ممکنہ طور پر MMP-1 انزائم کی فعال شکل پر کام کیا ہے۔ اس طرح، یہ نتیجہ اخذ کیا جا سکتا ہے کہ ہندوستانی صندل کی لکڑی کے تیل نے کم از کم MMP-1 کی فعال شکل کی سرگرمی میں اضافہ کو مؤثر طریقے سے روکا۔ مستقبل میں، ان راستوں کو مزید دریافت کرنے کے لیے مزید مطالعات کیے جا سکتے ہیں جن کے ذریعے MMP-1 کی سرگرمی کو ہندوستانی صندل کی لکڑی کے تیل نے روکا تھا۔

یہ اچھی طرح سے دستاویزی ہے کہ وہ ماحولیاتی عوامل جلد میں کمزوری کا باعث بنتے ہیں، اور اس کے نتیجے میں جلد کی عمر قبل از وقت ہوتی ہے [16]۔ جلد کی عمر بڑھنے کے لیے ذمہ دار عوامل زیادہ تر ROS کے زیادہ اظہار اور MMPs کی اپ گریجشن کی وجہ سے ہیں [16]۔ درحقیقت، جلد کی عمر کے ساتھ، اور آزاد ریڈیکلز کے اظہار میں عدم توازن کی وجہ سے، epidermis میں keratinocytes کے ٹرن اوور نمبر میں کمی آئی۔ اس کے نتیجے میں جلد میں پائے جانے والے کولیجن میں کمی واقع ہوئی۔ یہ تبدیلیاں واپس لوٹنے اور آزاد ریڈیکلز [31] میں پیداوار میں اضافے میں حصہ ڈالنے کی اطلاع دی گئیں۔ اس کے علاوہ، قبل از وقت جلد کی عمر بڑھنے کا ایک اور عنصر MMPs کا بڑھتا ہوا اظہار اور اس کے روکنے والوں (TIMP) کی سطح میں کمی تھی۔ یہ ROS کی اپ گریجشن سے متعلق پائے گئے[32]۔ لہذا، جلد میں آر او ایس کی سطح نے قبل از وقت جلد کی عمر بڑھنے کے ردعمل میں مرکزی کردار ادا کیا۔

یہاں، ہم نے یہ ظاہر کیا کہ ہندوستانی صندل کی لکڑی کا تیل 412 nm اور 450 nm پر نیلی روشنی کی وجہ سے ہونے والے آکسیڈیشن سے محفوظ رکھتا ہے اور نیلی روشنی کے ساتھ مشاہدہ کی گئی ROS سرگرمی میں تقریباً 75 فیصد کمی کے ساتھ keratinocytes پر سگریٹ کے دھوئیں کے اثر کو روکتا ہے۔ ROS سرگرمی میں 30 فیصد سگریٹ کے دھوئیں کے لیے مشاہدہ کیا گیا۔ ROS اور MMP-1 میں اس کمی نے تجویز کیا کہ ہندوستانی صندل کی لکڑی کے تیل میں جلد کو بڑھاپے کے خلاف خصوصیات ہیں۔ یہ جلد کے عناصر جو آلودگیوں سے متاثر ہوئے تھے جلد کی جلد کی عمر کو روکنے کے لیے کاسمیٹک اجزاء جیسے بھارتی صندل کی لکڑی کے تیل سے نشانہ بنایا جا سکتا ہے۔ بالآخر، ماحولیاتی تناؤ کی وجہ سے جلد کی بڑھتی عمر جلد کی اچھی صحت کو برقرار رکھنے کے لیے ایک اہم عنصر ہے۔

جیسا کہ ویلاسکو ایٹ ال نے اطلاع دی ہے۔ ایک مثالی کاسمیٹک فارمولیشن حاصل کرنے کے لیے، دونوں خصوصیات کی بہت زیادہ تلاش کی جاتی ہے۔ یہ کاسمیٹک مصنوعات کو جنم دیں گے جو قلیل مدتی نقصانات کو کم کر سکتے ہیں جیسے سوزش اور میٹابولک سرگرمی اور خلیوں کی تفریق کو بڑھانے کے لیے سگنلنگ پاتھ وے کو اپ گریڈ کر سکتے ہیں [15]۔ اس مطالعہ میں، ہم نے بھارتی صندل کی لکڑی کے تیل کے حفاظتی اور عمر مخالف اثر کی تصدیق کرنے والے ابتدائی نتائج کی اطلاع دی۔ اس طرح، کاسمیٹک اجزاء کے طور پر ایک کامیاب امیدوار بننے کے لیے، ہندوستانی صندل کی لکڑی کے تیل کی فعال خصوصیت کا مزید جائزہ لینے کے لیے مزید افادیت کے ٹیسٹ کیے جانے چاہئیں۔ مزید برآں، vivo میں تیل کی ڈرمیٹولوجیکل سرگرمی اور استعمال کی سطحوں کا جائزہ لینا باقی ہے تاکہ ماحولیاتی نمائشوں کی نمائش کے طویل مدتی اور قلیل مدتی اثرات کا جائزہ لیا جا سکے۔

5. نتائج

ہم نے اس مطالعے میں ہندوستانی صندل کی لکڑی کے تیل کی ایک نئی خاصیت کو وٹرو اور انسانی جلد پر ماحولیاتی دباؤ کے نقصان دہ اثر کے خلاف ایک حفاظتی فعال جزو کے طور پر بیان کیا ہے۔

سیلولر اینٹی آکسیڈینٹ پرکھ کا استعمال کرتے ہوئے ہندوستانی صندل کی لکڑی کے تیل کی اینٹی آکسیڈینٹ افادیت کی کھوج کی گئی جس کے تحت ٹیسٹ مادہ نے پیروکسائل انیشیٹر AAPH کی طرف سے حوصلہ افزائی ROS کی سطح کو نمایاں طور پر کم کیا۔ بعد کے نتائج کی یاد تازہ کرتے ہوئے، ہندوستانی صندل کی لکڑی کا تیل بھی بعد میں HaCaT خلیوں کو ماحولیاتی دباؤ جیسے 412 nm اور 450 nm پر نیلی روشنی اور سگریٹ کے دھوئیں سے پیدا ہونے والے آکسیڈیٹیو تناؤ سے بچاتا دکھایا گیا تھا۔

آلودگی کے نقصان دہ اثر (سگریٹ کے دھوئیں اور اوزون) کے خلاف ہندوستانی صندل کی لکڑی کے تیل کے حفاظتی اثر کو بھی انسانی جلد کی وضاحت کے زیادہ پیچیدہ ماڈل کا استعمال کرتے ہوئے مانیٹر کیا گیا۔ ہمارے نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ ہندوستانی صندل کی لکڑی کا تیل سگریٹ کے دھوئیں یا اوزون سے پیدا ہونے والی MMP-1 کی سطح کو نمایاں طور پر کم کرنے کے قابل تھا۔

اس تحقیق میں پیش کیے گئے نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ ہندوستانی صندل کی لکڑی کا تیل پہلے سے موجود خوشبو اور اروما تھراپی ایپلی کیشنز کے علاوہ ماحولیاتی تناؤ سے تحفظ کے لیے ڈرمیٹولوجی میں ایک فعال جزو کے طور پر کام کرنے کی صلاحیت رکھتا ہے۔ کاسمیٹکس کی دیکھ بھال میں بہاددیشیی جزو کے طور پر اس کے استعمال میں ایک امید افزا امیدوار کے طور پر۔

یہ مضمون کاسمیٹکس 2021، 8، 53 سے لیا گیا ہے۔ https://doi.org/10.3390/cosmetics8020053 https://www.mdpi.com/journal/cosmetics