اینٹی آکسیڈینٹ گرافین آکسائڈ نانوریبن ایک ناول سفید کرنے والے ایجنٹ کے طور پر میلانوجینیسیس میکانزم کو روکتا ہے۔

رابطہ:joanna.jia@wecistanche.com/ واٹس ایپ: 008618081934791

ہسن یو چو، ہوئی من ڈیوڈ وانگ،* Chia-Heng Kuo، Pei-Hsuan Lu، Lin Wang، Wenyi Kang، اور Chia-Liang Sun*

خلاصہ:میلانین کی ترکیب کے عمل میں، آکسیڈیٹیو رد عمل ایک ضروری کردار ادا کرتے ہیں، اور آکسیڈیٹیو تناؤ کو کم کرکے میلانین کی پیداوار کو روکنا ایک اچھی حکمت عملی ہے۔ فلرین اور اس کے مشتقات، یا کمپلیکسز کو مضبوط فری ریڈیکل اسکیوینجرز کے طور پر سمجھا جاتا تھا، اور ہم نے مزید دریافت کرنے کے لیے ملٹی لیئرڈ ایس پی 2 نینو کاربن کا استعمال کیا۔میلانینترکیب روکنے والے میکانزم۔ موجودہ مطالعے میں، ہم نے میلانین کی پیداوار کو منظم کرنے کے لیے اینٹی آکسیڈیٹیو ایجنٹس کے طور پر ناول نینو میٹریلز، جیسے ملٹی والڈ کاربن نانوٹوبس (MWCNTs)، مختصر قسم کے MWCNTs، گرافین آکسائیڈ نینوریبنز (GONRs)، اور مختصر قسم کے GONRs کا استعمال کیا۔ نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ GONRs میں دوسروں کے مقابلے انٹرا سیلولر اور ایکسٹرا سیلولر آکسیڈیٹیو تناؤ تجزیہ پلیٹ فارمز میں بہتر اینٹی آکسیڈیٹیو صلاحیتیں تھیں۔ ہم نے تجویز کیا کہ GONRs میں آکسیجن پر مشتمل فنکشنل گروپس ہوتے ہیں۔ 2′,7′-dichlorodihydrofluorescein diacetate پرکھ میں، ہمیں پتہ چلا کہ GONR ری ایکٹو آکسیجن پرجاتیوں کو ختم کرنے کے لیے دھاتی آئنوں کو چیلیٹ کر سکتا ہے۔ مالیکیولر بصیرت کے نظارے میں، ہم نے مشاہدہ کیا کہ ان نینو میٹریلز نے مائیکرو فیتھلمیا سے وابستہ ٹرانسکرپشن فیکٹر سے متعلق جین کے تاثرات کو کم کرکے میلانین کی ترکیب کو کم کیا، اور پروٹین کے اظہار میں بھی اسی طرح کے نتائج تھے۔ خلاصہ یہ کہ GONRs ایک نئے اینٹی آکسیڈنٹ اور جلد کو سفید کرنے والے کاسمیٹولوجی مواد کے طور پر ایک ممکنہ ایجنٹ ہیں۔

Cistanche بھی ہےایک ناول کے طور پر ایک ممکنہ ایجنٹاینٹی آکسیڈینٹاور جلد کو سفید کرناکاسمیٹولوجی مواد.

1. تعارف

جلد وہ عضو ہے جو انسانی جسم کی بیرونی سطح کا احاطہ کرتا ہے۔ چونکہ انٹرفیس ماحول کے ساتھ رابطے میں ہے، اس لیے جلد کی تہہ جسم کو پیتھوجینز سے بچانے، ضرورت سے زیادہ پانی کے ضیاع سے بچنے، جسم کے درجہ حرارت کو منظم کرنے وغیرہ میں اہم کردار ادا کرتی ہے۔ میلانوسائٹس جلد کے ایپیڈرمس کی بنیادی جھلی میں بڑھتے ہیں اور سیلولر مواد کے 5 فیصد سے 10 فیصد تک ہوتے ہیں۔ انہیں یون سیلولر "غدود" کے طور پر خصوصیت دی گئی ہے جس میں پتلی، لمبی، اسٹریمر نما ڈینڈرائٹس اور شاخیں ہوتی ہیں۔ میلانوسائٹس اپنے قریبی علاقے میں ایپیڈرمل خلیوں کے ذریعے حرکت کرتے ہیں، ہر میلانوسائٹ کے ارد گرد ایپیڈرمل خلیوں کا ایک نکشتر بناتے ہیں۔ جلد کی عمر بڑھنے کی بہت سی اندرونی اور بیرونی وجوہات ہیں، اور ایسا ہی ایک عنصر سورج کی روشنی سے الٹرا وائلٹ (UV) تابکاری ہے۔ متعدد ماحولیاتی زہریلے عوامل بھی جلد پر آکسیڈیٹیو تناؤ کو بڑھاتے ہیں، جیسے کیڑے مار ادویات، کاربن ٹیٹرا کلورائیڈ، بھاری دھاتیں، خوشبودار امائنز، اور پارٹیکولیٹ مادہ 2.5 (PM2.5)۔ انزیمیٹک نظام، میلانوجینیسیس پاتھ وے کو متحرک کرنے کے لیے انہیں ROS میں تبدیل کرتا ہے۔

ROS کے علاوہ، بہت سے عوامل ہیں جو متاثر کرتے ہیںمیلانین کی پیداوارجن میں جین کا اظہار، سوزش، اینڈوکرائن تبدیلیاں، اور روغن کا اخراج شامل ہے۔ دونوں روغن بنانے کے طریقہ کار ایک جیسے ہیں، جس میں L- tyrosine hydroxylation to 3،4-dihydroxy-L-phenylalanine (L-DOPA) اور L-DOPA آکسیڈیشن سے ڈوپاکوئنون شامل ہیں۔ اگلے مرحلے میں، ڈوپامائن کو میلانوسوم میں ٹائروسینیز سے متعلقہ پروٹین 1 (TRP-1) اور tyrosinase-related protein 2 (TRP-2) کے ذریعے آکسائڈائز کیا جاتا ہے، جو مائیکرو فیتھلمیا سے وابستہ ٹرانسکرپشن فیکٹر کے ذریعے منظم ہوتا ہے۔ MITF) میلانین بنانے کے لیے۔ آخر میں، میلانین پختہ ہو جاتا ہے اور سٹریٹم کورنیئم کے اندر تیز ہو جاتا ہے۔ میلانوسومز کے اندر پختہ میلانین کیراٹینوسائٹس 6−9 میں منتقل ہوتا ہے اور آخر کار دیرپا پگمنٹیشن کا باعث بنتا ہے۔ لینٹائنز، فریکلز، اور بھورے/کالے دھبے بعض اوقات مردوں اور عورتوں میں سماجی مسائل کا باعث بنتے ہیں۔ آکسیڈیٹیو تناؤ کو روکنا یا ٹائروسینیز کی سرگرمی کو دبانا ہائپر پگمنٹیشن اور ڈرمیٹولوجیکل عوارض کے سنڈروم کو کم کرنے کی ایک حکمت عملی ہے۔ اینٹی آکسیڈنٹس ROS کی وجہ سے ہائپر پگمنٹیشنز اور سیلولر نقصان کو ٹھیک کرتے ہیں۔ 10,11 اس لیے ترکیب شدہ اینٹی آکسیڈیٹیو مرکبات سکن کیئر ایپلی کیشنز میں بہت سے بائیو فنکشنل ایپلی کیشنز رکھتے ہیں۔

Fullerene (C60)، کاربن نانوٹوب (CNT)، گرافین، اور graphene nanoribbon (GNR) چار قسم کے sp2 نینو کاربن ہیں جن پر پوری دنیا میں وسیع پیمانے پر تحقیق کی گئی ہے۔آزاد بنیاد پرست صفائی کرنے والےایک لمبے عرصہ تک. یودھ وغیرہ۔ پانی میں گھلنشیل C60 کو کیٹابولک تناؤ کی حوصلہ افزائی انحطاط کے خلاف حفاظتی ایجنٹ کے طور پر استعمال کیا۔ انجیکشن وغیرہ۔ یہ نتیجہ اخذ کیا کہ C60(OH)24 ایک مضبوط اینٹی آکسیڈینٹ مرکب ہے جب آکسیڈیٹیو تناؤ بہت زیادہ ہو۔ Okuda et al. تجویز کیا کہ C60 کمپلیکس NO-ثالثی سیل کی چوٹ کو روک سکتے ہیں۔ 13,14 Tong et al. نے ظاہر کیا کہ C60 کمپلیکسز سپر آکسائیڈ کی بڑھتی ہوئی سطح کی وجہ سے دماغ سے متعلق بیماریوں کے علاج کے لیے امید افزا امیدوار ہو سکتے ہیں۔ دراصل، ایک جاپانی کمپنی نے 2006 میں کاسمیٹک استعمال کے لیے مضبوط اینٹی آکسیڈنٹ سرگرمی کے ساتھ فلرینز کی نشاندہی کی۔ Lucente- Schultz et al. نے یہ ظاہر کیا کہ فنکشنلائزڈ سنگل والڈ CNTs (SWCNTs) کی آکسیجن ریڈیکل سکیوینگنگ کی صلاحیت ڈینڈریٹک C60.15−19 Fenoglio et al کے مقابلے میں تقریباً 40 گنا زیادہ ہے۔ مشاہدہ کیا کہ ملٹی والڈ CNTs (MWCNTs) ہائیڈروکسیل یا سپر آکسائیڈ ریڈیکلز کے بیرونی ذریعہ کے ساتھ رابطے میں ایک قابل ذکر ریڈیکل اسکیوینگنگ کی صلاحیت رکھتے ہیں۔ 2004 میں، Novoselov et al. سب سے پہلے یہ ظاہر کیا کہ گرافین نے ایک مضبوط ایمبی پولر برقی اثر دکھایا ہے اور یہ الیکٹرانک ایپلی کیشنز کے لیے امید افزا ہو سکتا ہے۔ یہ دو اہم کاغذات، گرافین پر مبنی تحقیق پر زیادہ سے زیادہ توجہ دی گئی ہے۔ 24−30 مثال کے طور پر، Qiu et al. 2014 میں دکھایا گیا کہ گرافین آکسائیڈ اور چند پرتوں والا گرافین اہم اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی کی نمائش کرتے ہیں اور مختلف بائیو مالیکیولر مالیکیولز کو آکسیڈیشن سے بچا سکتے ہیں۔31 Han et al. تجرباتی طور پر 2007 میں ظاہر کیا گیا کہ لیتھوگرافی کے عمل کے دوران ربن کی چوڑائی کو تبدیل کر کے GNRs کے توانائی کے فرق کو کنٹرول کیا جا سکتا ہے۔ ہمارے علم کے مطابق، گرافین آکسائیڈ نینوریبنس (GONRs) کی اینٹی آکسیڈینٹ خصوصیات پر بہت کم تحقیق ہوئی ہے۔ 31,33 اس لیے، اس مطالعے میں، ہم نے احتیاط سے MWCNTs، مختصر MWCNTs، GONRs، اور مختصر GONRs کو تیار کیا اور اس کا مقصد ان کی اینٹی آکسیڈینٹ خصوصیات کا موازنہ کرنا تھا۔ متعلقہ نتائج منظم طریقے سے۔

2. نتائج اور بحث

2.1 MWCNTs اور GONRs کی شکلیات۔

Figure 1a shows the low- and high-magnification transmission electron microscopy (TEM) images of MWCNTs and short MWCNTs. Following acidic cutting under ultrasonication, the length of MWCNTs could be shortened from >10 μm سے 2−3 μm۔ اس کے ساتھ ہی، یہ بھی دیکھا گیا کہ نائٹرک ایسڈ کا علاج ہموار ٹیوب کی سطحوں کو کچل دیتا ہے۔ ہائی میگنیفیکیشن تصویر میں کچھ نشانات اور فاسد شکلیں دکھائی دیتی ہیں۔ مزید، مائکروویو ری ایکشنز کے ذریعے MWCNTs اور مختصر MWCNTs کا استعمال بالترتیب GONR اور مختصر GONR حاصل کرتا ہے۔ ہم نے GONR اور مختصر GONR کی کم اور اعلی میگنیفیکیشن TEM تصویروں کی بھی مثال دی۔ بڑے طول بلد ان زپ اور معمولی افقی کٹنگ کی وجہ سے، ایسا لگتا ہے کہ GONRs MWCNTs سے چھوٹے تھے۔ دوسری طرف، ہائی میگنیفیکیشن تصویروں نے MWCNTs کے مقابلے GONRs کے بڑے قطر، یعنی 0.11−0.18 μm دکھائے، جو اس بات کی نشاندہی کرتے ہیں کہ ان زپ کرنے کا عمل کامیاب تھا۔ اسی طرح، مختصر GONRs نے مختصر MWCNTs سے کم لمبائی اور بڑے قطر کی نمائش کی۔ ہمارے نئے ان زپنگ کے عمل کے ایئر کمپریسر میں، GONRs کی پتلی پرتوں والی ساختیں اس سے کم تھیں جو ہم نے ابتدائی رپورٹ میں 250 W کی اسی مائکروویو پاور کے لیے حاصل کی تھیں جبکہ موٹے مرکزی MWCNTs کو برقرار رکھتے ہوئے تھے۔ /GONR heterostructure نئے عمل میں تمام مائیکرو ویو پاورز کے ذریعے مکمل طور پر غیر زپ شدہ نانوربون ڈھانچے کی بجائے ظاہر ہوگا۔ ہمارے پچھلے مطالعات میں مختصر GONR کے ساتھ موازنہ کرنے کے لیے، 34 اعلی مائیکرو ویو پاور نے ربن کے اطراف میں زیادہ نشانات پیدا کیے اور ربن کے اچھے، ہموار کنارے نہیں بنائے۔ نوٹ کریں کہ ہم نے شکل 1a میں دو مختلف قسم کے Cu grids استعمال کیے ہیں۔ کافی طوالت کے ساتھ MWCNTs اور GONRs کے لیے، کاربن (پروڈکٹ نمبر 01881-F, Ted Pella, Inc., USA) سے مستحکم لیسی فارمور کے ساتھ Gu گرڈ کا استعمال کیا گیا۔ لیسی کاربن فلم میں کھلے سوراخوں نے نینو کاربن اور کاربن فلم کے درمیان اوورلیپنگ ٹرانسمیشن امیج کو روک دیا۔ گہرے سرمئی نیٹ ورک کا تعلق لیسی کاربن فلم سے ہے۔ تاہم، کاربن کے ساتھ مستحکم فارمور کے ساتھ Gu گرڈ (پروڈکٹ نمبر 01800-F, Ted Pella, Inc., USA) مختصر MWCNT اور مختصر GONR کے لیے درکار تھا۔ اس کی وجہ یہ تھی کہ لیسی کاربن فلم میں بڑے سوراخوں نے مختصر MWCNT اور مختصر GONR کو مؤثر طریقے سے رکھنے میں دشواری کا باعث بنا۔ جیسا کہ شکل 1 میں واضح کیا گیا ہے، مختصر MWCNTs اور مختصر GONRs کے نیچے ہلکا بھوری رنگ کا تضاد کاربن کی ہلکی تہہ ہے۔ اس کاربن کی تہہ نے الیکٹران بیم کے سامنے آنے والی فارمور فلم کو اپنی حرارت اور برقی چلانے والی خصوصیات کے ذریعے مستحکم کیا۔

2.2 MWCNTs اور GONRs کی بانڈنگ کنفیگریشنز۔

چار نینو کاربن کا رامان سپیکٹرا شکل 1b میں پیش کیا گیا ہے۔ غیر زپ کرنے کے عمل کے بعد GONRs کا D بینڈ MWCNTs سے زیادہ تھا۔ اس کی وجہ MWCNTs کے مقابلے GONR کے اعلی آکسیڈیشن لیول اور زیادہ تعداد میں ایج اسٹرکچرز ہیں۔ یہ رجحان بھی اس سے ملتا جلتا ہے جس کا ہم نے 2011.12 میں مشاہدہ کیا تھا اعلی گرافٹائزیشن کی سطح کی وجہ سے، MWCNTs کے G بینڈ میں سب سے کم پوری چوڑائی-سے-آدھی-زیادہ سے زیادہ تعداد تھی۔ چار نینو کاربن کے ID/IG تناسب {{10}} تھے۔{14}}بالترتیب 76، 0.502، 0.483، اور 0.700 تھے۔ مختصراً، لمبائی میں کمی اور سطح کے آکسیکرن نے خرابی کی سطح کو بڑھایا اور اس طرح ID/IG تناسب کو بلند کر دیا۔ D′ چوٹی تمام خراب گرافین میں موجود ہوتی ہے اور اسے معیار کی پیمائش کے طور پر دیکھا جاتا ہے۔ 35 جیسا کہ شکل 1b میں دکھایا گیا ہے، چار سپیکٹرا میں D′ چوٹییں یا تو کاٹنے یا ان زپ کرنے کے عمل کے بعد زیادہ نمایاں ہو جاتی ہیں، یہ تجویز کرتی ہے کہ وہ تباہ کن ہیں۔ عمل جو بہت سے نقائص کو متعارف کراتے ہیں۔ شکل 1c،d چار نینو کاربن کا ایکس رے فوٹو الیکٹران سپیکٹروسکوپی سپیکٹرا دکھاتا ہے۔ بظاہر، D′ چوٹی مختصر GONRs کے لیے سب سے واضح ہے۔ جیسا کہ شکل 1c میں دکھایا گیا ہے، تیزابیت والے ماحول میں KMnO4 کی مضبوط آکسیکرن صلاحیت کی وجہ سے O کی سطح 7.6 فیصد (MWCNTs) سے 19.9 فیصد (GONRs) تک نمایاں طور پر بڑھ گئی۔ دوسری طرف، MWCNT سے مختصر MWCNTs تک O کی سطح میں 0.8 فیصد کا تھوڑا سا اضافہ ہوا۔ اہم بات یہ ہے کہ مختصر GONR کے لیے سب سے زیادہ O لیول 38.3 فیصد ہے، جس کا مطلب یہ ہے کہ نانوریبن کے سرے پلانر sp2 سطحوں کے مقابلے آکسیجن فنکشنل گروپس کو جوڑنے میں آسان ہوں گے۔ MWCNTs اور مختصر MWCNTs دونوں کے غیر زپ کرنے کے عمل کے بعد بڑی پوری چوڑائی سے آدھی زیادہ سے زیادہ تعداد اور C 1s چوٹیوں کی ایک اعلی پابند توانائی کی طرف شفٹ کو شکل 1d میں دکھایا گیا ہے۔ گرافین آکسائیڈز کے لیے، ہائی بائنڈنگ انرجی سائیڈ میں غیر منقطع چوٹیوں کو C−C(CC)، C−O، CO، اور COOH بانڈنگز کو تفویض کیا جا سکتا ہے۔ ، 37 اور نتائج اس مطالعے کے نتائج سے ملتے جلتے تھے۔ اس مطالعے نے رمن سپیکٹرا کے مظاہر کا نتیجہ اخذ کیا، مطلب یہ ہے کہ ٹیوب سے ربن کی تبدیلی (شکل 2) کے دوران زیادہ آکسیجن پر مشتمل فنکشنل گروپس پیدا ہوئے تھے۔

2.3۔ MWCNTs اور GONRs کی اینٹی آکسیڈیٹیو خصوصیات۔

2.3.1 1،1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl Free Radical Scavenging Activity Assays کا تعین۔

1. چار نینو کاربن کے نتائج ٹیبل 2 میں بیان کیے گئے ہیں۔ DPPH پرکھ میں، 100 μM کے ارتکاز میں وٹامن سی کو مثبت کنٹرول کے طور پر استعمال کیا گیا تھا۔ MWCNTs، مختصر MWCNTs، GONRs، اور مختصر GONRs کی اینٹی آکسیڈیٹیو سرگرمیوں کو جانچنے کے لیے، خصوصیات کی پیمائش کے لیے 1، 5، اور 10 mg/L کی خوراکیں رد عمل کے حل میں ڈالی گئیں۔ MWCNTs، مختصر MWCNTs، GONRs، اور مختصر GONRs میں 10 mg/L (19.2 ± 0.3، 12.1 ± 0.3، 26.8 ± 0.3، اور 30.0 ± 0.4 فیصد)، جبکہ وٹامن سی کی 100 μM (93.4 ± 0.1 فیصد) پر دبانے کے لیے ایسی ہی حالت تھی۔

2.3.2 آئن چیلیٹنگ ایکٹیویٹی پرکھ۔

آکسیڈیٹیو تناؤ کی صورت حال کے اندر، فیروزین Fe2 پلس کے ساتھ ایک کمپلیکس تیار کر سکتی ہے جس کی مقداری پیمائش کی جائے۔ چیلیٹنگ ثالثوں کی موجودگی میں، کمپلیکس ٹوٹ جاتا ہے، جس کی وجہ سے فیرس آئن Fe2 پلس کمپلیکس کے گہرے سرخ رنگ سے کم ہو جاتے ہیں۔ ہم نے EDTA کو مثبت کنٹرول کے طور پر استعمال کیا۔ جدول 2 سے پتہ چلتا ہے کہ MWCNTs، مختصر MWCNTs، GONRs، اور مختصر GONRs میں 10 mg/L (29.2 ± {{10}}.8, 28.7 ± 0 پر چیلیٹنگ سرگرمی تھی۔ .7، 69.7 ± 0.6، اور 68.9 ± 0.3 فیصد )، جبکہ مثبت کنٹرول کی حالت 100 μM (93.4 ± 0.1 فیصد) پر تھی۔

2.3.3 فیرک کو کم کرنے والی اینٹی آکسیڈینٹ طاقت کی پیمائش۔

فیرک کو کم کرنے والا ممکنہ پرکھ ایک سادہ اور قابل اعتماد ٹیسٹ ہے جو Fe(III) -ferricyanide پیچیدہ ترکیب کی مقدار درست کرنے کے لیے استعمال کیا جاتا ہے۔ اس پرکھ میں، فیرس Fe(III)−TPTZ کمپلیکس پیدا کرنے والے چار نینو کاربن کی کم کرنے والی طاقت کا پتہ محلول کے رنگ میں پیلے سے سبز اور نیلے رنگ میں تبدیلیوں سے پایا گیا۔ جدول 2 یہ ظاہر کرتا ہے کہ MWCNT، مختصر MWCNT، GONR، اور مختصر GONR کی کم کرنے والی طاقتیں آپٹیکل کثافت (OD) 1.11، 1.13، 1.15، اور 1.11 10 mg/L پر تھیں۔

2.3.4 MWCNTs اور GONRs انٹرا سیلولر ROS جمع کو روکتے ہیں۔

بہت سی رپورٹوں سے پتہ چلتا ہے کہ ROS سیل کی جھلیوں کی ساختی سالمیت کو تباہ کر دیتا ہے، بشمول خلیے کی جھلیوں اور جوہری جھلیوں کو نقصان پہنچانے اور معمول کے کام کو ختم کرنے کے لیے۔ میلانین، اور ROS کی پیداوار کو روکنا میلانین کی ترکیب کو کم کرنے کے لیے ایک اچھی حکمت عملی ہے۔ اس مطالعے میں، ہم نے MWCNT اور GONR ٹریٹمنٹ سیلز میں انٹرا سیلولر آکسیڈیٹیو تناؤ کی سطح کا تجزیہ کرنے کے لیے 2′,7′-dichlorodihydrofluorescein diacetate (DCFDA) سٹیننگ پرکھ کا استعمال کیا۔ Phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) نے MWCNT اور GONR گروپس میں آکسیڈیٹیو محرکات پیدا کیے اور اسے منفی کنٹرول کے طور پر استعمال کیا گیا۔ قدر 38 فیصد GONRs اور MWCNTs کے علاج کے بعد، ROS کی سطح کو معمول کی سطح پر کم کر دیا گیا۔ اعداد و شمار سے پتہ چلتا ہے کہ دونوں مواد آکسیڈیٹیو تناؤ کی سطح کو روکتے ہیں، اور GONRs کا اینٹی آکسیڈیٹیو اثر MWCNTs (شکل 3) سے زیادہ تھا۔ جدول 1 اسی طرح کے نتائج کی فہرست دکھاتا ہے۔ ہم نے دعویٰ کیا کہ ہماری نئی دریافتوں کی تین وجوہات ہیں: پہلی، ان مواد کی حل پذیری کی ترتیب حسب ذیل تھی: مختصر GONRs > GONRs > مختصر MWCNTs > MWCNTs، مطلب یہ ہے کہ مختصر GONRs کا رابطہ علاقہ سب سے بڑا تھا، اس لیے یہ تھا۔ ROS کی صفائی کے لیے اعلیٰ۔ دوسرا، GONRs اور MWCNTs ایس پی2-کاربن ڈھانچے تھے جو ایڈکٹ فارمیشن یا الیکٹران کی منتقلی کے ذریعے ROS بجلی کو تباہ کر سکتے تھے۔42 ہم نے پایا کہ نانوربون ڈھانچے کے اینٹی آکسیڈنٹ اثرات نینو ٹیوب ڈھانچے کے مقابلے بہتر تھے، لہذا نانوریبن اسے بناتے ہیں۔ نانوٹوبس کے مقابلے الیکٹران کی منتقلی آسان ہے۔ آخر میں، شکل 1b میں، ہم مشاہدہ کرتے ہیں کہ GONR sp2-کاربن سائٹ MWCNTs کے مقابلے میں زیادہ آکسیجن فنکشنل گروپس پر مشتمل ہے، کاربو آکسیلک ایسڈ گروپ دھاتی آئنوں کو چیلیٹ کر سکتے ہیں، اور ہائیڈروکسیل گروپ ROS کو ختم کرنے کے لیے H- ڈونر ہو سکتے ہیں۔ میلانین کی پیداوار کو روکتا ہے۔

2.4 MWCNTs اور GONRs کی سائٹوٹوکسیسیٹی جس کا علاج انسانی ڈرمل فبروبلاسٹ سیلز میں کیا جاتا ہے۔

{{0}(4,5-Dimethylth-iazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) طریقہ کا استعمال Hs68 خلیوں پر GONRs کی سائٹوٹوکسک خصوصیات (شکل 3)، اور خلیوں کو 1، 5، اور 10 ug/mL کی مختلف خوراکوں پر کلچر کیا گیا تھا۔ ہم نے جانچا کہ MWCNT کی سیل قابل عملیتیں 100.7 ± 3.7، 99.8 ± 4.9، اور 94.1 ± 4.7 فیصد تھیں بالترتیب 1، 5، اور 10 mg/L؛ مختصر MWCNT کے لیے قابل عملیت کا حساب اسی ترتیب میں کیا گیا اور 93.9 ± 2.2، 86.4 ± 3.0، اور 98.9 ± 2.1 فیصد پایا گیا۔ ہم نے مشاہدہ کیا کہ B16−F10 خلیات زیادہ ارتکاز میں انکیوبیٹڈ تھے، اور Hs68 خلیات کی خلیات کی بقا 80 فیصد سے زیادہ تھی، جس سے معلوم ہوتا ہے کہ MWCNT اور مختصر MWCNT کا انسانی ڈرمل فائبرو بلاسٹس کے خلیوں پر کوئی زہریلا اثر نہیں ہے۔ GONR اور مختصر GONR کی سیل قابل عملیاں 86.24 ± 2.1، 90.87 ± 3.5، 88.58 ± 2.5، 89.03 ± 3.6، 90.71 ± 2.8، اور 90.64 ± 2.5 فیصد تھیں۔ شکل 4a میں یہ بھی بتایا گیا ہے کہ GONR اور مختصر GONR کا HS68 خلیوں پر قابل فہم سائٹوٹوکسک اثر نہیں تھا۔ پچھلی رپورٹس میں، کاسمیٹک مقاصد کے لیے بغیر ٹیسٹ کیے گئے نینو میٹریلز کے استعمال کو قابل اعتراض سمجھا جا سکتا ہے، 43,44 اور یہ عام طور پر ڈی این اے کے حملے کی وجہ سے ہوا جب نینو پارٹیکلز خلیوں میں داخل ہو گئے۔ cytotoxicity ٹیسٹ کے بعد، ہم نے پایا کہ ہمارے مواد نے جلد کے عام خلیات کو زہریلا نہیں بنایا۔ ہم نے نتیجہ اخذ کیا کہ نینو میٹریلز کے خلیوں میں داخل ہونے کے بعد، نینو میٹریلز صرف آکسیڈیٹیو تناؤ کو کم کرکے اور دھاتی آئنوں کو چیلیٹ کرکے میلانین کی پیداوار کو روکتے ہیں اور مائٹوکونڈریا یا ڈی این اے کو نقصان نہیں پہنچاتے، جس کا مطلب ہے کہ MWCNTs اور GONRs استعمال کرنے کے لیے محفوظ تھے۔

2.5 B16−F10 سیلولر ٹائروسینیز سرگرمی اور میلانین مواد میں دو قسم کے MWCNTs اور GONRs۔

میلانین کی ترکیب کے راستے میں، ٹائروسینیز ایک اہم کردار ادا کرتا ہے۔ ٹائروسینیز بائیو کیمیکل رد عمل کی ایک سیریز کے ذریعے آکسائڈائز کرتا ہے اور یومیلینن اور فیومیلینن بناتا ہے۔ اس بات کا تعین کرنے کے لیے کہ آیا GONRs اور MWCNTs ٹائروسینیز کی سرگرمیوں کو روکتے ہیں اور میلانین کی پیداوار میں کمی کا سبب بنتے ہیں، ہم نے B16−F10 خلیوں میں ٹائروسینیز کی سرگرمی کا تجزیہ کیا۔ ہم نے پایا کہ MWCNTs اور مختصر MWCNTs نے 10 mg/L پر تقریباً 17.1 فیصد اور 23 فیصد ٹائروسینیز کی سرگرمی کو روکا۔ GONRs اور مختصر GONRs کے دوسرے GONR کے مقابلے میں ایک ہی ارتکاز میں ٹائروسینیز کی سرگرمی کو دبانے میں بہتر اثرات مرتب ہوئے۔ وہ خوراک پر منحصر انداز میں بھی تھے اور 49.8 فیصد اور 44.7 فیصد ٹائروسینیز سرگرمی کو روکتے تھے، جیسا کہ شکل 4b میں دکھایا گیا ہے۔

میلانین انسانی جسم میں ایک ناگزیر روغن ہے، لیکن میلانین کا زیادہ اظہار اکثر بیماریوں کا ایک سلسلہ شروع کر دیتا ہے۔ پچھلے مطالعات میں، Xiao et al. ملتے جلتے مواد، ریڈیکل سپنج، ایک فلرین نینو پارٹیکل، ایک اینٹی میلانین ایجنٹ کے طور پر استعمال کیا گیا۔ 45 اس کے کچھ اچھے نتائج برآمد ہوئے۔ میلانین کی پیداوار کا تقریباً 20 فیصد روکا جا سکتا ہے۔ اس کی کارکردگی کو بہتر بنانے کے لیے، ہم نے میلانین کی روک تھام کی شرح اور اس کے مالیکیولر میکانزم کی پیمائش کرنے کے لیے جانچ کے مواد کو مزید بہتر کیا، جیسا کہ اعداد و شمار 4c اور 5 میں دکھایا گیا ہے۔ 16}}.2 فیصد 10 mg/L پر اور خوراک پر منحصر انداز میں۔ GONRs اور مختصر GONRs نے قدروں کو 32.0 ± 2.3 اور 35.3 ± 3.4 فیصد 10 mg/L پر طاقتور طریقے سے کم کر دیا۔ تجرباتی نتائج نے تجویز کیا کہ چاروں قسمیں میلانین کی ترکیب کو روک سکتی ہیں اور GONRs کا زیادہ اثر ہوتا ہے۔ دوسری طرف، ہم نے یہ بھی مشاہدہ کیا ہے کہ مختصر GONR میلانین کی پیداوار کو روکنے میں بہتر اثر رکھتا ہے۔ ہم یہ نتیجہ اخذ کرتے ہیں کہ مختصر GONRs میں زیادہ فعال گروپ ہوتے ہیں اور وہ مؤثر طریقے سے دھاتی آئنوں کیٹیلائزڈ ٹائروسینیز کو روک سکتے ہیں، جو میلانین کی پیداوار کو مزید روکتے ہیں (شکل 2)۔ جدول 1 میں، ہم مشاہدہ کرتے ہیں کہ دھاتی آئن چیلیٹنگ مختصر قسم کی کوشش عام قسم سے زیادہ ہے۔ اس کا مطلب ہے کہ یہ مختصر GONRs جلد کی دیکھ بھال کے ایجنٹوں کے طور پر کاسمیٹک فیلڈ میں ممکنہ طور پر لاگو کیے جا سکتے ہیں۔

2.6۔ MWCNTs اور GONRs کا طریقہ کار B16−F10 سیلولر میلانین مواد کو روکتا ہے۔

خلیے پروٹین کے اظہار کو منظم کرکے بیرونی آکسیڈیٹیو تناؤ کا جواب دیتے ہیں۔ B16−F10 خلیے c-myc جین کے اظہار اور اپ-ریگولیٹڈ AMPK کو آکسیڈیٹیو لیول کو کم کرنے کے لیے بڑھاتے ہیں، 46 اور اس کام میں، MITF مالیکیولر میلانین سنتھیسز سگنل کے راستے کو منظم کرنے کے لیے ٹائروسینیز کا ایک مخصوص ٹرانسکرپشن عنصر ہے۔ 47−49 شکل میں 5a، MWCNTs اور GONRs آکسیڈیٹیو تناؤ کو کم کرکے مائیکرو فیتھلمیا سے وابستہ ٹرانسکرپشن فیکٹر کو کم کرتے ہیں، اور پھر، نیچے کی طرف جین TRP-1 اور TRP-2 کو بھی کم کر دیا گیا۔ پروٹین کی سطح کے لیے، ایک ایسا ہی رجحان پایا گیا، جس کے تحت MWCNTs اور GONRs نے MITF سے متعلقہ میلانوجینیسیس پاتھ وے کو کم کر دیا اور پھر آخر میں میلانین مواد کو کم کر دیا (شکل 5b)۔

3. تجرباتی مواد اور طریقے

3.1 MWCNTs اور GONRs کی تیاری۔

GONRs بنانے کے متعلقہ عمل کی اطلاع پچھلے پیپر میں دی گئی تھی۔ 12 MWCNT (0۔{13}}5 g) کو 9:1 H2SO4/H3PO4 میں معطل کر دیا گیا تھا اور اسے مائکروویو ری ایکٹر (CEM-Discover) کے ساتھ علاج کیا گیا تھا۔ 2 منٹ کے لیے 250 W پر پاور سیٹ کے ساتھ۔ محلولوں میں KMnO4(0.25 g) کے اضافے کے بعد، محلول کو اسی مائکروویو پاور کے ساتھ 65 ڈگری پر 4 منٹ کے لیے ٹریٹ کیا گیا 12 پھر ہم نے اس عمل میں ترمیم کی جس کے بعد ایک ایئر کمپریسر کا استعمال کرتے ہوئے 8 منٹ کے چھوٹے دوسرے مرحلے کے مائیکروویو وقت کا استعمال کیا۔ یہاں، ایئر کمپریسر کو عمل کے دوران مائکروویو ری ایکٹر کے درجہ حرارت کو کنٹرول کرنے کے لیے استعمال کیا جاتا ہے۔ مائیکرو ویو پاور کو ابتدائی ٹیسٹوں میں 250 ڈبلیو پر سیٹ کیا گیا تھا۔

3.2 مختصر MWCNTs اور مختصر GONRs کی تیاری۔

مختصر GONRs بنانے کے متعلقہ عمل کی اطلاع ہمارے پچھلے مقالے میں دی گئی تھی۔ 34 تیزابی علاج کا وقت 8 گھنٹے کے طور پر منتخب کیا گیا تھا۔ مائیکرو ویو پاور 250 W پر سیٹ کی گئی تھی، جو GONRs حاصل کرنے کے برابر ہے۔

3.3 ڈی پی پی ایچ ریڈیکل اسکیوینگنگ ایکٹیویٹی۔

ڈی پی پی ایچ کو نمونوں کی صفائی کی صلاحیت اور اینٹی آکسیڈیشن خصوصیات کا تعین کرنے کے لیے کثرت سے استعمال کیا جاتا تھا۔ 50 ڈی پی پی ایچ ایک ارغوانی ریجنٹ ہے جو اگر فری ریڈیکل کو تجزیہ کار میں منتقل کیا جائے تو جامنی رنگ سے پیلے رنگ میں تبدیل ہو جاتا ہے۔ مناسب ارتکاز کے ساتھ مثبت اینٹی آکسیڈیٹیو نمونے حل میں شامل کیے گئے، اور نمونوں کا تجزیہ 30 منٹ کے لیے 517 nm پر کیا گیا۔ پچھلے DPPH ریڈیکلز کو کم کرنے کے لیے درکار اینٹی آکسیڈینٹ کی مقدار کی پیمائش کرنے کے لیے ہم نے ٹیسٹنگ نمونوں کے علاوہ باقی DPPH کے فیصد کا استعمال کیا۔ 100 μM پر وٹامن سی کو مثبت کنٹرول کے طور پر استعمال کیا گیا تھا۔ صفائی کی سرگرمی (فیصد) کے طور پر ماپا گیا تھا۔

صاف کرنے کی صلاحیت (فیصد)=(Asample − Ablank) / (Acontrol − Ablank) × 100 فیصد (1)

3.4 دھاتی چیلیٹنگ سرگرمی۔

دھاتی آئن وہ عنصر ہے جو لپڈ کی ضرورت سے زیادہ آکسیکرن کا سبب بنتا ہے، اور Fe2 پلس سب سے زیادہ متاثر کرنے والے آئنوں میں سے ایک ہے۔ 50 نینو بائیو میٹریل (1 μL) کے مختلف ارتکاز کو ایک 96-کنویں پلیٹ میں لوڈ کیا گیا تھا، جس میں 2 mM FeCl2·4H2O تھا۔ (10 μL)، اور پھر فیروزین (5 ایم ایم، 20 μL) میں بھری ہوئی ہے۔ مرکب کو 69 μL مینتھول کے ساتھ مکمل طور پر ملایا گیا تھا اور کمرے کے درجہ حرارت پر 10 منٹ تک رکھا گیا تھا۔ پھر، نمونے کے رد عمل کا حل 562 nm پر دیکھا گیا۔ EDTA کو 100 μM پر مثبت کنٹرول کے طور پر استعمال کیا گیا تھا، اور دھاتی چیلیٹنگ سرگرمی کے حساب کتاب کا فارمولہ eq 1 پر مبنی تھا۔

3.5 طاقت کو کم کرنا۔

طاقت کو کم کرنے کا حساب پچھلے مطالعہ پر مبنی ہے۔ 50 پہلے، 2.5 μL گرافین مواد کو PBS بفر (67 mM، pH 6.8) اور K3Fe (CN)6 (2.5 μL، 20 فیصد) کے ساتھ ملایا گیا اور پھر 50 ڈگری پر انکیوبیٹ کیا گیا۔ 20 منٹ کے لیے اس کے بعد، 10 فیصد ٹرائکلورو ایسٹک ایسڈ (160 μL) کو 20 منٹ کے لیے 300 گرام سینٹری فیوج پر ری ایجنٹس کے ساتھ ملایا گیا۔ جذب کی لمبائی 25 μL FeCl3 (2 فیصد) کے ساتھ ملانے کے بعد 700 nm پر طے کی گئی۔ بوٹیلیٹڈ ہائیڈروکسیانیسول (بی ایچ اے) 100 μM پر استعمال کیا گیا تھا۔

3.6۔ سیل کے پھیلاؤ کے امتحانات۔

سیل کے پھیلاؤ کے تناسب کا تجزیہ کرنے کے لیے انسانی ڈرمل فائبرو بلاسٹس سیل لائن HS68 کا استعمال کیا گیا تھا۔ HS68 کو Dulbecco کے ترمیم شدہ ایگل میڈیم (DMEM) میں انکیوبیٹ کیا گیا تھا جس میں 10 فیصد فیٹل بووائن سیرم اور 1 فیصد پینسلن اور سٹریپٹومائسن ملا ہوا تھا۔ 50,51 نمونوں کے مختلف ارتکاز کے ساتھ علاج کیے جانے کے بعد، ہم نے سیل کے پھیلاؤ کے تناسب کا پتہ لگانے کے لیے MTT کا اطلاق کیا۔ 8000 خلیات کو کنویں کی پلیٹوں میں سیڈ کیا گیا اور 24 گھنٹے تک نمونوں کے ساتھ علاج کیا گیا۔ سپرنٹنٹ محلول کو ہٹا دیا گیا تھا، اور ہم نے کلچر کے لیے MTT محلول کو 37 ڈگری پر 2 گھنٹے کے لیے استعمال کیا۔ انکیوبیشن کے بعد، ہم نے MTT پر مشتمل میڈیا کو ہٹا دیا اور اسے ڈائمتھائل سلفوکسائیڈ (DMSO) سے تحلیل کر دیا۔ حل کو OD 590 nm پر پڑھا گیا اور شرح eq 1 کے حساب سے شمار کی گئی۔

3.7 سیلولر میلانین مواد کی تشخیص.

ہم نے پچھلے پرکھ کی بنیاد پر معمولی ترمیم کے ساتھ ایک طریقہ استعمال کیا۔ Bioresource Collection and Research Center (BCRC, CRL 6323, Hsinchu, Taiwan) سے B16−F10 کے 52,53 سیل چھرے 2.0 کے مرکب میں تحلیل کیے گئے تھے۔ N NaOH اور 10 فیصد DMSO۔ نمونے کو بعد میں 1 گھنٹے کے لیے 90 ڈگری پر گرم کیا گیا اور 10،000 گرام پر مزید 10 منٹ کے لیے واضح سپرنٹنٹ حاصل کرنے کے لیے سینٹرفیوج کیا گیا۔ میلانین کی گنتی کا تعین 475 nm پر سپرنٹنٹ کے OD کی نگرانی کرکے کیا گیا تھا۔

3.8۔ B16−F10 سیلولر ٹائروسینیز سرگرمی۔

B16−F10 سیلولر ٹائروسینیز سرگرمی کے لیے، ہم نے کچھ ترمیم کے ساتھ پچھلے کام کا حوالہ دیا۔ نمونوں کے ساتھ علاج کے بعد، خلیات کو 3 گھنٹے کے لیے 1 فیصد Triton X-100/PBS اور 2 mM L-tyrosine (50 μL) میں ڈالا گیا۔ انکیوبیشن کے بعد، ہم نے میڈیا کو ہٹا دیا اور OD 590 nm پر جاذبیت کو پڑھا۔ ٹائروسینیز سرگرمی کے فارمولے کی گنتی eq 1 کے ذریعہ کی گئی تھی۔

Cistanche ایک tyrosinase inhibitor ہے۔

3.9 DCFDA سٹیننگ کے ذریعے ROS کا پتہ لگانا۔

پچھلے مطالعہ کا حوالہ دیتے ہوئے،54 1۔{1}}.105 B16−F10 خلیوں کو 6-کنویں پلیٹوں میں سیڈ کیا گیا تھا اور نمونوں کی مختلف ارتکاز کے ساتھ علاج کیا گیا تھا۔ سیلز کو PBS میں معطل کر دیا گیا تھا اور پھر DCFDA (5 μM) کے ساتھ نان فینول ریڈ DMEM میں 30 منٹ کے لیے 37 ڈگری پر لوڈ کیا گیا تھا۔ فلو سائٹو میٹر (امرود، مرک، جرمنی) کا استعمال DCFDA کے فلوروسینٹ سگنل کا پتہ لگانے کے لیے کیا گیا تھا۔ DCFDA کی حوصلہ افزائی اور اخراج طول موج بالترتیب 488 اور 535 nm تھی۔

3.10 مقداری ریئل ٹائم پولیمریز چین ری ایکشن۔

ہم نے Lin et al کے طریقوں پر عمل کیا۔ (2018) 1 ریئل ٹائم کوانٹیٹیٹو ریورس ٹرانسکرپشن-پولیمریز چین ری ایکشن (qRT-PCR) فلوروسینس پیدا کرنے کے لیے ایک خصوصی پرائمر پروب پر مشتمل ہے۔ اس نے فلوروسینس کا پتہ لگانے کی تکنیک کا استعمال کیا جو 7500 qRT-PCR سسٹم (Applied Biosystems, USA) کا استعمال کرتے ہوئے ہر سائیکل کو محسوس کرتا ہے۔ اس نے جاری کردہ فلوروسینس کی مقدار کی بنیاد پر سائیکل کا پتہ لگایا، اور پھر ہر سائیکل کی پیداوار کو پیدا کردہ مواد کے لیے شمار کیا گیا، جس کے نتیجے میں حقیقی وقت کے مقداری مقاصد حاصل ہوئے۔ ٹریزول (انویٹروجن، یو ایس اے) کو پھیپھڑوں کے ٹشو کا مکمل آر این اے نکالنے کے لیے استعمال کیا گیا تھا، جیسا کہ مینوفیکچرر کی طرف سے دی گئی ہدایت کے مطابق۔ اس کے بعد، ڈی این اے پیدا کرنے کے لیے ایک ریورس ٹرانسکرپشن کٹ (ٹاکارا، جاپان) کا استعمال کیا گیا۔ پرائمر کا استعمال کرتے ہوئے qRT-PCR میں، جدول 1 میں درج ہے، پہلے، نمونے کو گرم کیا گیا تاکہ DNA کا ایک اسٹرینڈ بنایا جا سکے۔ پھر ایک پرائمر بائنڈنگ ہوئی جس سے ایک ڈبل سٹرینڈڈ DNA (dsDNA) بنایا گیا، جس کے بعد SYBR گرین dsDNA کو ملایا گیا، جس کے لیے SYBR گرین پلس ریجنٹ کٹ (روچے، باسل، سوئس) استعمال کیا گیا، جس کے نتیجے میں فلوروسینس جاری ہوا۔ نتیجہ فلوروسینس کا پتہ لگانے کے نظام سے گزرا تھا۔ فلوروسینٹ سگنلز کا پتہ لگانا ہر سائیکل کے لمبا یا اینیلنگ مرحلے کے دوران ہوا؛ پتہ لگانے کے بعد، نمونے کے مشمولات کو پتہ چلنے والی فلوروسینس کی شدت سے پیچھے دھکیل دیا گیا تھا۔ 55 2−ΔΔCt طریقہ استعمال کرتے ہوئے ہدف جینوں کے اظہار کی سطح کو -tubulin کی سطح پر معمول بنایا گیا تھا۔

myricetin

3.11۔ ویسٹرن بلاٹ ٹیسٹ۔

B16−F10 خلیات کو راتوں رات 4 ڈگری پر ریڈیو امیونوپریسیپیٹیشن پرکھ بفر (تھرمو سائنٹیفک کمپنی، USA) کے ساتھ لیس کیا گیا، جس میں پروٹیز انابیٹرز ہوتے ہیں۔ بائیسنچونینک ایسڈ پروٹین پرکھ کٹ (BCA، سگما-الڈرچ کارپوریشن، USA) پروٹین کی مقدار کو درست کرنے کے لیے استعمال کی گئی تھی۔ نمونہ پروٹین کو 10 فیصد سوڈیم ڈوڈیسائل سلفیٹ-پولی کریلامائڈ جیل پر الگ کیا گیا تھا اور پولی وینیلائڈین ڈائی فلورائڈ (پی وی ڈی ایف) جھلی (پی اے ایل ایل لائف سائنس، این آربر، ایم آئی، یو ایس اے) میں منتقل کیا گیا تھا۔ PVDF جھلی کو بلاک کرنے والے بفر (تھرمو سائنٹیفک) کے ساتھ 1 گھنٹے کے لیے بلاک کیا گیا تھا اور 4 ڈگری پر راتوں رات مخصوص پرائمری اینٹی باڈی کے ساتھ انکیوبیٹ کیا گیا تھا۔ اس کے بعد، جھلی کو ٹریس بفرڈ نمکین- Tween 20 بفر سے دو بار دھویا گیا اور ثانوی اینٹی باڈیز کے ساتھ 1.5 گھنٹے تک انکیوبیٹ کیا گیا۔ اس کے بعد، جھلی کو کیمیلومینیسینس ڈیٹیکشن ریجنٹس (تھرمو سائنٹیفک) میں ڈبو دیا گیا اور ایک MiniChemi Chemiluminescence imager (بیجنگ سیج کریشن سائنس، چین) کے ذریعے تجزیہ کیا گیا۔ اینٹی باڈیز کے ذرائع میں خرگوش اینٹی MITF، خرگوش اینٹی TRP-1، خرگوش اینٹی TRP-2، اور ایکٹین (تھرمو سائنٹیفک) شامل ہیں۔

3.12۔ مواد کا تجزیہ۔

TEM (JEOL JEM-1230, 100 kV) کو نینو کاربن کی شکل کا مشاہدہ کرنے کے لیے استعمال کیا گیا تھا۔ نینو کاربن کے گونج کے طریقوں کو چیک کرنے کے لیے ایک مائیکرو رامن سپیکٹرو میٹر (PTT، RAMaker) لگایا گیا تھا۔ ایکسرے فوٹو الیکٹران سپیکٹروسکوپی (XPS، Kratos Axis Ultra DLD) کی پیمائش بھی ساختی تجزیہ کا تعین کرنے کے لیے کی گئی۔12,34

3.13۔ شماریاتی تجزیہ.

تمام نمونے اور معیاری تجربات کم از کم تین بار دہرائے گئے۔ ہم نے اسٹوڈنٹ کے ٹی ٹیسٹ کا اطلاق کیا تاکہ اوسط قدروں کی اوسط ± معیاری انحراف کا شماریاتی طور پر موازنہ کیا جا سکے۔

4. نتائج

خلاصہ یہ کہ ہم نے مشاہدہ کیا کہ مختصر GONR اسکی متعدد بایو فنکشنل خصوصیات (شکل 6) کی وجہ سے سکن کیئر پروڈکٹس کے لیے ممکنہ مواد تھا۔ نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ نینو کاربن نے ایکسٹرا سیلولر اور انٹرا سیلولر اینٹی آکسیڈینٹ کا کردار ادا کیا۔ دریں اثنا، نینو کاربن نے ٹائروسینیز کی سرگرمی اور میلانین مواد کو روکا اور روغن کے خلیوں کو کوئی شدید چوٹ نہیں پہنچائی۔ اس کام نے چار قسم کے نینو کاربن کے اینٹی میلانوجینیسیس افعال کو قائم کیا۔ مستقبل کے مطالعے میں میلانین کی پختگی، نقل و حمل اور جمع ہونے سے متعلق مخصوص جین اور پروٹین کے تاثرات پر ان مرکبات کے طریقہ کار کی جانچ کی جائے گی۔

Cistanche سفیدی کو بہتر بناتا ہے۔

براہ کرم تصویر پر کلک کریں اور مزید تفصیلات حاصل کریں۔