Cistanche Glycoside Rg1 SAMP8 چوہوں میں NOX4/NLRP3 سوزش کو روک کر بڑھاپے کی وجہ سے جگر کے فبروسس کو کم کرتا ہے Ⅱ

شکل 4. SAMP8 چوہوں کے جگر میں ROS کی پیداوار پر Rg1 علاج کا اثر۔ (A) جگر میں ROS کی پیداوار کے جمع ہونے کی پیمائش DHE فلوروسینس اور Hoechst 33258 سٹیننگ (اسکیل بار، 20 µm؛ میگنیفیکیشن، x400) کے ذریعے کی گئی۔ (B) جگر میں ROS کی پیداوار (ریڈ فلوروسینس) کی اوسط کثافت۔ ڈیٹا کو اوسط ± SD کے طور پر پیش کیا جاتا ہے۔ n=3۔ **پی<0.01 vs. SAMR1; ##P<0.01 vs. SAMP8. Rg1, Cistanche glycoside Rg1; SAMP8, senescence‑accelerated mouse prone 8; SAMR1, senescence‑accelerated resistant mouse 1; DHE, dichloroethylene. 

Rg1 علاج SAMP8 چوہوں کے جگر میں NLRP3، ASC، caspase-1 اور IL-1 کے اظہار کی سطح کو کم کرتا ہے۔ یہ اطلاع دی گئی ہے کہ NLRP3 کو چالو کرناسوزشمیں اہم کردار ادا کرتا ہے۔سنسنی سے متعلق رینل فبروسس(42)۔ لہذا، موجودہ مطالعہ نے NLRP3 سے متعلق پروٹین کے اظہار کی سطح کی مزید تفتیش کی تاکہ اس بات کی تصدیق کی جا سکے کہ آیا NLRP3 سوزش عمر سے متعلقہ جگر کے فائبروسس میں ملوث ہے۔ SAMR1 گروپ (تصویر 6A‑E) کے مقابلے SAMP8 گروپ میں جگر کے ٹشوز کو نمایاں طور پر اپ ریگولیٹ کیا گیا تھا۔ SAMP8 گروپ کے مقابلے میں، ٹیمپول، اپوسینن اور Rg1 (5 اور 10 mg/kg) ٹریٹمنٹ گروپس نے SAMP8 چوہوں (تصویر 6A) کے جگر کے ٹشوز میں NLRP3، ASC، caspase-1 اور IL-1 کے اظہار کی سطح کو نمایاں طور پر کم کر دیا تھا۔ ‑E)۔ جگر کے ٹشوز میں NLRP3 کے اظہار کی سطح کی پیمائش کرنے کے لیے امیونو ہسٹو کیمیکل سٹیننگ کی گئی تھی۔ نتائج مغربی بلوٹنگ کا استعمال کرتے ہوئے ماپا NLRP3 کے اظہار کے مطابق تھے۔ SAMR1 گروپ (تصویر 7A اور B) کے مقابلے میں SAMP8 گروپ کے جگر میں NLRP3 کے اظہار کو نمایاں طور پر اپ گریڈ کیا گیا تھا، اور ٹیمپول، اپوسینن اور Rg1 (5 اور 10 mg/kg) کے علاج نے NLRP3 کے اظہار کی سطح کو نمایاں طور پر کم کر دیا تھا۔ تصویر 7A اور B)۔ ان نتائج نے تجویز کیا کہ NLRP3 سوزش کی ایکٹیویشن کا عمر بڑھنے کے دوران جگر کے فبروسس سے گہرا تعلق ہوسکتا ہے اور Rg1 NLRP3 inflammasome کے ایکٹیویشن کو روک کر جگر کے فبروسس کو بہتر بنا سکتا ہے۔ NF‑κB اور p‑NF‑κB کو مغربی بلوٹنگ کا استعمال کرتے ہوئے جگر کے ٹشوز میں ماپا گیا۔ نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ گروپوں کے درمیان NF‑κB کے اظہار کی سطح میں کوئی خاص فرق نہیں تھا (تصویر 8A اور B)۔ تاہم، SAMR1 گروپ (تصویر 8A اور C) کے مقابلے SAMP8 گروپ میں p‑NF‑κB کے اظہار کی سطح میں نمایاں اضافہ ہوا، اور ٹیمپول، اپوسینن اور Rg1 (5 اور 10 mg/kg) کے علاج نے اظہار کو نمایاں طور پر کم کر دیا۔ SAMP8 گروپ کے مقابلے p‑NF‑κB/NF‑κB کی سطح (تصویر 8A اور C)۔ نتائج نے تجویز کیا کہ Rg1 NF‑κB کے فاسفوریلیشن کو کم کرکے عمر بڑھنے کے دوران جگر میں سوزش کو روک سکتا ہے۔

شکل 7. SAMP8 چوہوں کے جگر میں NLRP3 کے اظہار کی سطح پر Rg1 علاج کے اثرات۔ (A) جگر میں NLRP3 کا اظہار (اسکیل بار، 50 µm؛ میگنیفیکیشن، x400)۔ (B) جگر میں NLRP3-مثبت داغ والے علاقے کی اوسط کثافت۔ ڈیٹا کو اوسط ± SD کے طور پر پیش کیا جاتا ہے۔ n=4۔**P<0.01 vs. SAMR1;#P<0.05, ##P<0.01 vs. SAMP8. Rg1, Cistanche glycoside Rg1; SAMP8, senescence‑accelerated mouse prone 8; SAMR1, senescence‑accelerated resistant mouse 1;NLRP3، NLR فیملی پائرن ڈومین جس میں 3 ہے۔

خستہکو فروغ دے سکتے ہیں۔متعدد اعضاء کی خرابی، جیسے جگر، گردے اور دماغ (43). بڑھاپے کو جگر کی سوزش یا فبروسس کے لیے حساسیت بڑھانے کے لیے دکھایا گیا ہے۔(5). Liver fibrosis جگر کی ساخت کو تباہ کر دیتا ہے۔کی طرف جاتا ہےجگر کے خلیوں کا نقصان اور جگر کے کام میں خلل، بالآخر جگر کی ناکامی کے نتیجے میں (44)۔ تاہم، کےکے میکانزمبڑھاپے کی وجہ سے جگر کی چوٹ اور فائبروسسابھی تک واضح نہیں ہیں اور اس کے لیے کوئی موثر دوائیں نہیں ہیں۔عمر بڑھنے سے متعلق جگر فبروسس کا علاج. لہذا، جگر کی عمر بڑھنے کے طریقہ کار کو تلاش کرنا اور جگر کی چوٹ اور فائبروسس کو کم عمری میں ہی روکنے کے لیے مناسب ادویات تلاش کرنا ضروری ہے تاکہ اس کے واقعات کو کم کیا جا سکے۔عمر سے متعلق جگر کی بیماریاں. 

Cistanche اینٹی ایجنگ سپلیمنٹس برائے فروخت

Rg1، cistanche کے اہم فعال اجزاء میں سے ایک، اس سے قبل اس کی سوزش اور اینٹی آکسیڈینٹ خصوصیات کے لیے تحقیق کی گئی ہے اور اسے جگر پر حفاظتی اثر ڈالتے ہوئے پایا گیا ہے (45)۔ پچھلے مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ Rg1 ہیپاٹک اسٹیلیٹ خلیوں کی myofibroblasts میں تبدیلی کو روک سکتا ہے اور CCl 4-حوصلہ افزائی چوہوں (45,46) میں جگر کے فبروسس کو روک سکتا ہے۔ ہمارے پچھلے مطالعے نے اشارہ کیا کہ Rg1 (5 اور 10 mg/kg) کے علاج نے SAMP8 چوہوں (35) میں عمر رسیدہ گردوں کی چوٹ اور فبروسس کو نمایاں طور پر بہتر کیا۔ موجودہ مطالعہ عمر بڑھنے کے دوران SAMP8 چوہوں میں عمر بڑھنے سے متعلق جگر کی چوٹ اور فائبروسس پر Rg1 (5 اور 10 mg/kg) علاج کے اثر اور طریقہ کار کا مطالعہ کرنے کے لیے ڈیزائن کیا گیا تھا۔ نتائج نے اشارہ کیا کہ Rg1 (5 اور 10 mg/kg) کا علاج بڑھاپے کی وجہ سے جگر کی چوٹ اور فائبروسس، خاص طور پر Rg1 (10 mg/kg) گروپ سے حفاظت کر سکتا ہے۔ ان نتائج سے یہ بھی پتہ چلا کہ ہیپاٹوسائٹس کا انتظام غیر معمولی اور بے ترتیب تھا اور زیادہ تر خلیات SAMP8 گروپ میں ویکیول نما انحطاط ظاہر کرتے ہیں، جبکہ Rg1 کے علاج سے جگر کی ہسٹوپیتھولوجی میں نمایاں بہتری دکھائی دیتی ہے۔ اس کے علاوہ، نتائج نے دریافت کیا کہ NOX4/NLRP3 سوزش سگنلنگ، جو عمر سے متعلق جگر کی چوٹ اور جگر کے فبروسس (20) سے گہرا تعلق ہے، Rg1 (5 اور 10 mg/kg) کے علاج سے نمایاں طور پر روکا گیا تھا، خاص طور پر Rg1 ( 10 ملی گرام/کلوگرام) گروپ۔ ان نتائج نے تجویز کیا کہ Rg1 کا علاج خوراک پر منحصر انداز میں عمر سے متعلق چوٹ اور فائبروسس کو روکنے میں مؤثر ہو سکتا ہے، ممکنہ طور پر NOX4 اور NLRP3 سوزش کو روک کر۔

پچھلے مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ عمر بڑھنا ایک اہم عنصر ہے جو جگر کے فبروسس (5,47) کی نسل اور ترقی کے ساتھ قریب سے وابستہ ہے۔ تاہم، فی الحال مؤثر علاج کے اختیارات کی کمی ہے۔ cistanche سب سے زیادہ استعمال ہونے والی قدرتی مصنوعات میں سے ایک ہے، اس کے فارماسولوجیکل اثرات اور حیاتیاتی سرگرمیوں کی وسیع رینج کی وجہ سے جو عمر بڑھنے میں تاخیر کر سکتی ہے (48)۔ فعال اجزاء، Rg1، TGF-حوصلہ افزائی HSC-T6 خلیات اور CCl 4-حوصلہ افزائی جگر فبروسس پر نر کنمنگ چوہوں (31) پر حفاظتی اثرات مرتب کرنے کی اطلاع دی گئی ہے۔ موجودہ مطالعہ میں، نتائج نے اشارہ کیا کہ جگر کے ٹشوز کو نمایاں طور پر نقصان پہنچا ہے اور 8 ماہ کے SMP8 چوہوں میں فائبروسس کی علامات ظاہر ہوئی ہیں، جیسے کہ خلیے کی خرابی، خلیے کی تنزلی اور اضافی خلیے کے کولیجن IV کا جمع ہونا، جس میں متعدد مماثلتیں ہیں۔ ڈومیوس ایٹ ال کے نتائج (49)۔

خاص طور پر، 9 ہفتوں کے لیے Rg1 کا علاج SAMP8 چوہوں میں جگر کی چوٹ اور ایکسٹرا سیلولر میٹرکس کے جمع ہونے کو نمایاں طور پر کم کرنے کے لیے پایا گیا۔ پہلے یہ دکھایا گیا تھا کہ TGF-1 نے Smad2 فاسفوریلیشن (p-Smad2) اور کولیجن کی ترکیب کے ذریعے جگر کے فائبروسس کو فروغ دیا، اور TGF-1 کو ختم کرنے سے جگر کے فبروسس (50) کو کم کیا جا سکتا ہے۔ موجودہ مطالعہ میں، نتائج نے ظاہر کیا کہ Rg1 علاج نے SAMP8 چوہوں کے جگر میں TGF-1 کے اظہار میں نمایاں کمی کی۔ ٹیمپول ایک فعال آکسیجن سکیوینجر ہے، جس کے بارے میں بتایا گیا ہے کہ H 2O2-علاج شدہ ہپپوکیمپل نیوران میں ROS کی پیداوار کو کم کرنے کی وجہ اس کی ROS سکیوینجنگ صلاحیت (51) ہے۔ Apocynin اکثر NADPH oxidase کے روکنے والے کے طور پر استعمال ہوتا ہے، اور یہ دکھایا گیا ہے کہ یہ مرکزی اعصابی نظام کی متعدد بیماریوں پر واضح اور واضح اینٹی آکسیڈینٹ اثر رکھتا ہے، بشمول پارکنسنز کی بیماری اور الزائمر کی بیماری (52-54)۔

موجودہ مطالعہ نے یہ بھی ظاہر کیا ہے کہ ٹیمپول اور اپوکینن نے عمر بڑھنے سے متاثر جگر کی چوٹ پر اسی طرح کے حفاظتی اثرات مرتب کیے ہیں۔ ان اعداد و شمار نے تجویز کیا کہ Rg1 علاج سے نمایاں طور پر تحفظ مل سکتا ہے۔بڑھاپے کی وجہ سے جگر کی چوٹ اور فائبروسسبوڑھے چوہوں میں

یہ نتائج پچھلے مطالعات (35) کے ساتھ مطابقت رکھتے ہیں، اور SAMP8 چوہوں (78) میں عمر بڑھنے سے متعلق جگر کی چوٹ کی موجودگی میں NLRP3 سوزش کے کردار کے لیے مزید معاونت فراہم کرتے ہیں۔ سوزش میں بہتری اور NLRP3 inflamasome ایکٹیویشن کی روک تھام کو ہدف کے اعضاء (76) پر حفاظتی اثرات مرتب کرنے کے لیے دیکھا گیا ہے۔

اسی طرح، موجودہ مطالعہ سے پتہ چلتا ہے کہ ٹیمپول، اپوسینن اور آر جی 1 کے ساتھ علاج نے SAMP8 چوہوں کے جگر کے ٹشوز میں IL-1، ASC، کیسپیس-1 اور NLRP3 کے اظہار کی سطح کو نمایاں طور پر کم کر دیا۔ یہ بات مشہور ہے کہ NF‑κB ٹرانسکرپشن فیکٹر فیملی سوزش کے عمل کا مرکزی ریگولیٹر ہے (79)۔ سیرین 536 میں NF-κB کی فاسفوریلیشن NF-κB ایکٹیویشن اور نیوکلیئر ٹرانسلوکیشن (80) کے لیے ضروری سمجھا جاتا ہے۔ یہ اطلاع دی گئی ہے کہ NF-κB سرگرمی کی منتخب روکنا CCl4-حوصلہ افزائی جگر فبروسس (81) کو دبا سکتا ہے۔ اس تحقیق میں، نتائج سے یہ بات سامنے آئی کہ p‑NF‑κB کا اظہار، جو NLRP3 سوزش کی تشکیل کو فروغ دیتا ہے، عمر رسیدہ چوہوں کے جگر کے ٹشوز میں نمایاں طور پر اپ گریڈ کیا گیا تھا اور SAMP8 چوہوں میں 9 ہفتوں تک Rg1 کے علاج کے بعد نمایاں طور پر کم ہوا تھا۔

مجموعی طور پر، ان نتائج نے اشارہ کیا کہ NLRP3 سوزش ایک اہم ہدف ہو سکتا ہے اور عمر رسیدہ جگر کی چوٹ میں قریب سے ملوث ہے۔ مزید برآں، NLRP3 سوزش کی روک تھام عمر بڑھنے سے متعلق جگر کی چوٹ اور فبروسس کو روکنے میں Rg1 کا ایک اہم بنیادی طریقہ کار ہو سکتا ہے۔

تاہم، موجودہ مطالعہ کی کئی حدود ہیں۔ مثال کے طور پر، اس نے صرف جانوروں کے تجرباتی نتائج فراہم کیے جو یہ ظاہر کرتے ہیں کہ Rg1 نے SAMP8 چوہوں میں NOX4 اور NLRP3 سوزش کی ایکٹیویشن کی روک تھام کے لیے بڑھاپے سے متعلق جگر کے فبروسس کو بہتر کیا۔ اس کے علاوہ، بائیو کیمیکل اشارے اور سیرولوجیکل اشارے جو جگر کے کام، سوزش اور آکسیڈیٹیو تناؤ کی سطح کی نمائندگی کرتے ہیں کی پیمائش نہیں کی گئی۔

مستقبل کی تحقیق کا مقصد سیرم میں بڑھتی ہوئی جگر کے فعل، سوزش اور آکسیڈیٹیو تناؤ سے متعلقہ اشارے پر Rg1 علاج کے اثر کا مزید مطالعہ کرنا ہے، جیسے aspartate aminotransferase، alanine transaminase، IL-1 اور سپر آکسائیڈ خارج کرنا۔ مزید برآں، وٹرو اور ویوو میں جگر کی چوٹ کے خلاف Rg1 کے صحیح بنیادی حفاظتی طریقہ کار کی مزید تفتیش کے لیے NOX4 inhibitors یا NOX4 ناک آؤٹ تجربات کیے جائیں گے۔

اعترافات

فنڈنگ

حوالہ جات

1. Stahl EC، Haschak MI، Popovic B، اور Brown BN: عمر رسیدہ جگر اور عمر سے متعلق جگر کی بیماری میں میکروفیجز۔ فرنٹ امیونول 9۔{3}}۔

2. ٹومیناگا کے اور سوزوکی ایچ ایل: سیلولر سنسنینس اور عمر سے متعلق پیتھالوجی میں TGF-B سگنلنگ۔ Int J Mol Sci 20: 5002، 2019۔

3. Iwasaki K.Brenner DA اور Kisseleva T: جگر کے فبروسس میں نیا کیا ہے؟ جگر کے فائبروسس میں میوفائبرو بلاسٹس کی اصل۔ I Gastroenterol Hepatol 27 (Suppl 2): ​​S65-S68 2012.Aydin MM اور Akcal KC: جگر کی فبروسس۔ ترک جے گیسٹرو اینٹرول 2914-21.2018۔

4.Kim IH, Xu J, Liu X, Koyama Y, Ma HY, Diggle K, You YH.5Schilling JM, Jeste D, Sharma K, et ak بڑھاپے سے جگر کی سوزش، جگر کے فبروسس اور عمر بڑھنے کی حساسیت بڑھ جاتی ہے۔ چوہوں میں زیادہ چکنائی والی خوراک۔ عمر (Dordr) 38: 291-302، 2016

.6. Stefanatos R اور Sanz A: عمر بڑھنے والے دماغ میں mitochondrial ROS کا کردار۔ فروری لیٹ 592: 743-758۔ 2018.

7. Davalli P Mitic T، Caporali A، Lauriola A اور DArca D: ROScell ​​سنسنی، اور عمر رسیدگی اور عمر سے متعلقہ بیماریوں میں ناول مالیکیولر میکانزم۔ Oxid Med Cell Longev 2016: 3565127, 2016.Kudryavtseva AV Krasnov GS.Dmitriev AA. Alekseev BYKardymon OL، Sadritdinova AF Fedorova MS، Pokrovsky AVMelnikova NV، Kaprin AD، et al: عمر بڑھنے اور کینسر میں Mitochondrial dysfunction اور oxidative stress. Oncotarget 7: 44879-449052016.Luangmonkong T, Suriguga S, Mutsaers HAM, Groothuis GMMOlinga P, اور Boersema M: جگر کے فبروسس کے علاج کے لیے آکسیڈیٹیو تناؤ کو نشانہ بنانا۔ Rev Physiol Biochem Pharmacol 17571-102,2018۔