Semen Rehmanniae میں پانچ مرکبات کے مواد کا تعین اور اس کے HPLC فنگر پرنٹ کا قیام

جدول 3 ریکوری ٹیسٹ کے نتائج (n=6)

2.4 نمونہ کا تعین

جمع کردہ رحمانیہ کے چھ بیچوں کو "2.2.2" کے تحت طریقہ کار کے مطابق تیار کیا گیا تھا اور "2.1" کے تحت کرومیٹوگرافک حالات کے مطابق نمونہ اور تعین کیا گیا تھا۔ مواد کے تعین کے نتائج جدول 4 میں دکھائے گئے ہیں۔ نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ پانچ اجزاء میں سے، رحمانیہ گلائکوسائیڈ ڈی کا مواد سب سے زیادہ ہے، جو 0.460% سے لے کر {{1} تک ہے۔ 0}}.730%؛ لیونوری گلائکوسائیڈ کا مواد دوسرے نمبر پر ہے، 0.100% سے 0.270% تک، اور مختلف پیداواری علاقوں کے نمونوں میں دو اجزاء کا مواد نمایاں طور پر مختلف نہیں ہے۔ نمونہ SX1 میں، echinacoside کے علاوہ، دیگر چار اجزاء کے مواد نمونوں کے دوسرے بیچوں سے نمایاں طور پر زیادہ ہیں۔ مختلف پیداواری علاقوں سے Rehmannia glutinosa میں echinacoside، cistancheside A، اور verbascoside کے مواد بالکل مختلف اور بے قاعدہ ہیں۔

CISTANCHE جڑی بوٹی کے ساتھاچھے معیار کی مستقل مزاجی

2.5 رحمانیہ گلوٹینوسا کے HPLC فنگر پرنٹ کا قیام اور مماثلت کی تشخیص

رحمانیہ گلوٹینوسا میں کثیر اجزاء کے مواد کے تعین کے کرومیٹوگرامس اور ڈیٹا کو "چائنیز ہربل میڈیسن کرومیٹوگرافک فنگر پرنٹ مماثلت تشخیصی نظام (2012 ایڈیشن)" سافٹ ویئر میں درآمد کیا گیا تھا، اور SX1 ٹیسٹ کے نمونے کا کرومیٹوگرام منتخب کیا گیا تھا۔ حوالہ سپیکٹرم کے طور پر. ٹائم ونڈو کی چوڑائی کو 0.10 منٹ پر سیٹ کیا گیا تھا، اور میڈین طریقہ سپر امپوزڈ سپیکٹرا اور حوالہ سپیکٹرا بنانے کے لیے استعمال کیا گیا تھا۔ کل 23 عام چوٹیوں کی نشاندہی کی گئی تھی (شکل 3 دیکھیں)۔ رحمانیہ گلوٹینوسا کے نمونے اور حوالہ کے فنگر پرنٹس کے درمیان مماثلت 0.904~0.950 تھی، جو اس بات کی نشاندہی کرتی ہے کہ مختلف پیداواری علاقوں سے تعلق رکھنے والے رحمانیہ گلوٹینوسا کے نمونے اور کچے رحمانیہ گلوٹینوسا اور پکے ہوئے رحمانیہ گلوٹینوسا کے درمیان ایک جیسے تھے اور ان میں اچھے معیار کی مستقل مزاجی تھی۔

جدول 4 منی رحمانیہ میں 5 اجزاء کے مواد کے تعین کے نتائج/%

13. rehmannioside D; 17. لیونورائیڈ؛ 19. echinacoside; 20. کاسٹانوسائیڈ اے؛ 21. ایکٹیوسائیڈ

تصویر 3 سیمین رحمانیہ (SX1-SX4، HN1، HN2) اور حوالہ (R) کے 6 بیچوں کے HPLC کرومیٹوگرامس کو اوورلینگ

3 بحث

3.1 کرومیٹوگرافک حالات کا انتخاب

اس مطالعہ میں چار موبائل فیز سسٹمز، acetonitrile-water، acetonitrile-0.1% formic acid محلول، methanol-water، اور methanol-0.1% formic acid محلول، کی چھان بین کی گئی۔ نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ پانچ اجزاء کے acetonitrile نظام میں علیحدگی کے اچھے اثرات تھے۔ acetonitrile-water mobile فیز سسٹم کے مقابلے میں، acetonitrile-0.1% فارمک ایسڈ سلوشن موبائل فیز میں رحمانیہ گلوٹینوسا اور مدر وورٹ گلائکوسائیڈز کی چوٹیاں تنگ تھیں اور ان کی چوٹی کی ہم آہنگی اچھی تھی۔ ایک ہی وقت میں، پانچ اجزاء کے مختلف الٹرا وایلیٹ جذب کی وجہ سے، اجزاء کا مواد بہت مختلف ہوتا ہے۔ ہر جزو کے مواد کو زیادہ درست طریقے سے تعین کرنے اور اس بات کو یقینی بنانے کے لیے کہ پانچ اجزاء کے جذب کی شدت ایک ہی کرومیٹوگرام میں یکساں طور پر تقسیم ہو، الٹرا وائلٹ جذبرحمانیہ گلائکوسائیڈ ڈی, motherwort glycoside، echinacoside، cistancheside A، اور verbascoside کا تجزیہ کیا گیا، اور متغیر طول موج کے تعین کا انتخاب کیا گیا، یعنی، 0-24 منٹ، پہلے الگ کیے گئے رحمانیہ گلائکوسائیڈ کا تعین 203 nm، اور 24-40 منٹ، الگ شدہ ایچیناکوسائڈ، سیستانچائڈ اے، اور ورباسکوسائیڈ کا تعین 330 این ایم پر کیا گیا تھا۔ اس کے علاوہ، اس مطالعے میں میتھانول کے نکالنے کے اثرات، 70% میتھانول محلول، 50% میتھانول محلول، اور 50% acetonitrile محلول بطور نکالنے والے سالوینٹس کی بھی چھان بین کی گئی۔ نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ 70% میتھانول محلول بطور ایکسٹریکشن سالوینٹ ان اجزاء کو بہتر طریقے سے تحلیل کر سکتا ہے جن کی جانچ کی جائے گی، اور نکالے گئے نمونے میں کم نجاست ہے۔ لہذا، اس مطالعہ نے 70% میتھانول کو نکالنے والے سالوینٹ کے طور پر، acetonitrile-0.1% formic acid محلول کو موبائل فیز سسٹم کے طور پر منتخب کیا، اور رحمانیہ میں پانچ اجزاء کے مواد کا تعین کرنے کے لیے متغیر طول موج کا استعمال کیا۔

3.2 نمونے کے تعین کے نتائج کا تجزیہ

عزم کے نتائج سے، یہ دیکھا جا سکتا ہے کہ بھاپ لینے کے بعد، echinacoside کے مواد میں معمولی اضافے کے علاوہ، دیگر چار اجزاء کے مواد میں نمایاں کمی واقع ہوئی، خاص طور پر لیونورائڈ اور cistancheside A؛ اسی پیداواری علاقے سے رحمانیہ گلوٹینوسا میں ریہمانیہ گلائکوسائیڈ ڈی اور سیستانچیسائیڈ اے کا مواد قدرے مختلف تھا، اور لیونورائڈ، ایچیناکوسائیڈ اور ورباسکوسائیڈ کا مواد نمایاں طور پر مختلف تھا۔ ہینان پروڈکشن ایریا سے رحمانیہ گلوٹینوسا میں ایچیناکوسائیڈ کا مواد شانکسی پروڈکشن ایریا کے نمونوں سے نمایاں طور پر زیادہ تھا، اور دیگر چار اجزاء کا مواد قدرے مختلف تھا۔ ایک ہی وقت میں، اس تحقیق میں قائم HPLC فنگر پرنٹ کے مطابق، رحمانیہ کے نمونوں کے 6 بیچوں اور کنٹرول فنگر پرنٹ کے درمیان مماثلت 0.904~0.950 تھی، جس سے ظاہر ہوتا ہے کہ بنیادی کیمیکل پروسیسنگ سے پہلے اور بعد میں رحمانیہ کے نمونوں کے 6 بیچوں کے اجزاء انتہائی مطابقت رکھتے تھے۔

خلاصہ یہ کہ اس مطالعہ میں مواد کے تعین کا طریقہ اور HPLC فنگر پرنٹ درست، قابل اعتماد اور اچھی خاصیت رکھتے ہیں۔ ان کا استعمال اجزاء میں ہونے والی تبدیلیوں اور پروسیسنگ سے پہلے اور بعد میں رحمانیہ گلوٹینوسا کی پروسیسنگ کی ڈگری کے لیے کیا جا سکتا ہے، اور رحمانیہ گلوٹینوسا کے کوالٹی کنٹرول کے لیے تکنیکی مدد فراہم کی جا سکتی ہے۔ تاہم، اس مطالعہ میں چھوٹے نمونے کے بیچز اور پیداواری علاقوں کی نامکمل کوریج کے نقصانات ہیں، جس کے لیے مزید تجزیہ اور تصدیق کی ضرورت ہے۔

حوالہ جات

[1] چینی فارماکوپیا کمیٹی۔ عوامی جمہوریہ چین کا فارماکوپیا: جلد 1 [S]۔ بیجنگ: چائنا میڈیکل سائنس اینڈ ٹیکنالوجی پریس، 2020: 129-130۔

[2] سو جون، فو زیٹونگ۔ پروسیس شدہ رحمانیہ گلوٹینوسا کے ناموں کے تاریخی ارتقاء اور اس کی افادیت کے مطالعہ پر تحقیق [جے]۔ چینی پیٹنٹ میڈیسن، 2017، 39 (9): 1913-1916۔

[3] Zhu Jue، Zhu Xiangmei، Shi Yuhe، et al. Rehmannia glutinosa پر تحقیقی پیشرفت اور اس کے کوالٹی مارکر کی پیشین گوئی کا تجزیہ [J]۔ چینی پیٹنٹ میڈیسن، 2022، 45 (2): 1273-1281۔

[4] چن جنپینگ، ژانگ کیکسیا، لیو یی، وغیرہ۔ Rehmannia glutinosa [J] کی کیمیائی ساخت اور فارماسولوجیکل اثرات پر تحقیقی پیشرفت۔ چینی ہربل میڈیسن، 2022، 52 (6): 1772-1784۔

[5] لی ہونگوی، مینگ ژیانگل۔ کیمیائی اجزاء اور رحمانیہ گلوٹینوسا کے فارماسولوجیکل اثرات پر تحقیقی پیشرفت۔

منشیات کی تشخیص کی تحقیق، 2015، 38(2): 218-228۔

[6] Zhang Boyong، Jiang Zhenzuo، Wang Yuefei، et al. UPLC/ESI-Q-TOF MS［J］ کے ذریعے تازہ رحمانیہ گلوٹینوسا، کچے رحمانیہ گلوٹینوسا اور پکے ہوئے رحمانیہ گلوٹینوسا کے کیمیائی اجزاء کا تجزیہ۔ چائنیز پیٹنٹ میڈیسن، 2016، 38(5): 1104-1108۔

[7] Zhang Lixian، Wei Yue، Li Feifei، et al. فنگر پرنٹ پیٹرن کی شناخت اور مختلف پروسیس شدہ رحمانیہ گلوٹینوسا پروڈکٹس کے کثیر اجزاء کے مواد کا تعین［J］۔ ہوبی ایگریکلچرل سائنسز، 2023، 62(9): 135-141۔

[8] چن جنپینگ، ژانگ کیکسیا، لیو یی، وغیرہ۔ کیمیائی اجزاء اور رحمانیہ گلوٹینوسا کے فارماسولوجیکل اثرات پر تحقیقی پیشرفت۔ چینی ہربل میڈیسن، 2021، 52(6): 1772-1784۔

[9] تاؤ یی، جیانگ یانہوئی، تانگ کیجیان، وغیرہ۔ UHPLC-Q-TOF/MS［J］ کے ذریعے پروسیسنگ سے پہلے اور بعد میں رحمانیہ گلوٹینوسا کے کیمیائی اجزاء کا تقابلی مطالعہ۔ نئی چینی ادویات اور کلینیکل فارماکولوجی، 2016، 27(1): 102-106۔

［10］ Xu Zhuo, Dai Xinxin, Su Shulan, et al. UPLC-TQ-MS［J］ پر مبنی رحمانیہ گلوٹینوسا میں نیوکلیوسائیڈ اور امینو ایسڈ اجزاء کا متحرک جمع۔ چینی ہربل میڈیسن، 2021، 52(23): 7323-7330۔

［11］ لی یوجیاؤ۔ Rehmannia glutinosa［D］ کی پروسیسنگ ٹیکنالوجی اور "نائن سٹیمنگ اینڈ نائن ایکسپوزر" کے طریقہ کار پر مطالعہ کریں۔ جنان: شیڈونگ یونیورسٹی، 2023۔

［12］ Wang Yue، Zhou Qiao، Zhang Xuelan، et al. HPLC رحمنیہ گلوٹینوسا میں آٹھ اجزاء کے مواد کا بیک وقت تعین اور UPLC فنگر پرنٹ تجزیہ اور ملٹی انڈیکس اجزاء کے مواد کے تعین [J] کے ذریعے اس کی مختلف پروسیس شدہ مصنوعات۔ چینی ادویاتی مواد، 2021، 44 (7): 64-68۔

[13] Guo Xiaokai، Xue Shujuan، Chen Suiqing. UPLC فنگر پرنٹ اور ملٹی انڈیکس اجزاء کے مواد کے تعین کی بنیاد پر رحمانیہ گلوٹینوسا کے معیار کی تشخیص [J]۔ چینی ادویاتی مواد، 2021، 44 (4): 917-923۔