Streptozotocin-Nicotinamide-حوصلہ افزائی ذیابیطس چوہوں میں مردانہ تولیدی فعل پر Cistanche Tubulosa کے عرق کا اثر-Ⅱ

3.2 Vivo تجزیہ میں

3.2.1 جسمانی وزن اور کیلوری کی مقدار پر CTE کے اثرات

6 ہفتوں کے تجربے کے بعد، ذیابیطس گروپ (HFD-DM) نے کنٹرول گروپ سے زیادہ جسمانی وزن ظاہر کیا۔ HFD-DME4 گروپ نے HFD-DM اور HFD-DMER گروپس (شکل 7a) سے کم جسمانی وزن ظاہر کیا۔ کنٹرول گروپ کی کیلوری کی مقدار دوسرے گروپوں کے مقابلے میں نمایاں طور پر کم تھی۔ دیگر پانچ گروپوں (شکل 7b) کی کیلوری کی مقدار میں کوئی خاص فرق نہیں تھا۔

3.2.2 ذیابیطس کی کامیاب شمولیت کا تعین کرنے کے لیے زبانی گلوکوز رواداری ٹیسٹ (OGTT)

زبانی گلوکوز رواداری ٹیسٹ (OGTT) ذیابیطس mellitus کا پتہ لگانے کے لئے ایک امید افزا ٹول کے طور پر استعمال ہوتا ہے۔ خون میں گلوکوز کی بڑھتی ہوئی سطح ذیابیطس کی حالت کی نشاندہی کرتی ہے۔ جیسا کہ شکل 8a میں دکھایا گیا ہے، CTE گروپس میں پلازما گلوکوز کی سطح ڈی ایم گروپ کی نسبت 0، 30، 90، اور 120 منٹ پر کم تھی۔ مزید، پلازما گلوکوز کی ارتکاز کے منحنی خطوط (AUC) کے نیچے کے علاقے سے پتہ چلتا ہے کہ CTE اور RSG گروپوں میں، خون میں گلوکوز لینے کی شرح میں اضافہ ہوا تھا (شکل 8b)۔

3.2.3 کل پلازما گلوکوز، کولیسٹرول، اور ٹرائگلیسرائیڈ مواد

پلازما روزہ رکھنے والے خون میں گلوکوز کی سطح ڈی ایم گروپ میں زیادہ تھی اور ڈی ایم ای 2 گروپ میں (سوائے کنٹرول کے) دوسروں کی نسبت کم۔ DME4 گروپ کے علاوہ گروپوں کے درمیان کل کولیسٹرول میں کوئی خاص فرق نہیں تھا۔ DME4 گروپ میں کولیسٹرول کی سطح دوسروں کے مقابلے میں کم تھی۔ ٹرائگلیسرائڈز کی سطح ڈی ایم گروپ میں زیادہ اور ڈی ایم ای 4 گروپ میں کم تھی اور سی ٹی ای (ٹیبل 2) کے ارتکاز میں اضافے کے ساتھ ٹرائگلیسرائیڈ کا مواد کم ہوا تھا۔ نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ ڈی ایم گروپ میں پلازما گلوکوز، کولیسٹرول اور ٹرائگلیسرائیڈز کی سطح زیادہ تھی اور CTE کے ساتھ علاج کرنے پر اس کی سطح میں نمایاں کمی واقع ہوئی تھی۔

3.2.4 پلازما انسولین کی سطح، پلازما لیپٹین کی سطح، اور ہومیوسٹاسس ماڈل اسسمنٹ – انسولین مزاحمت (HOMA-IR) کی قدریں

پلازما انسولین کی سطح، لیپٹین، اور HOMA-IR کی قدریں جدول 3 میں دکھائی گئی ہیں۔ DM گروپ میں پلازما انسولین اور پلازما لیپٹین کی سطح کنٹرول گروپ سے زیادہ تھی۔ DM گروپ میں HOMA-IR انڈیکس بھی نمایاں طور پر زیادہ تھا۔ CTE کے ارتکاز میں اضافے کے ساتھ پلازما انسولین، لیپٹین اور HOMA-IR کی قدروں میں کمی واقع ہوئی۔ CTE گروپوں میں پلازما لیپٹین کو نمایاں طور پر کم کیا گیا تھا لیکن RSG ڈرگ گروپ (DMR) نے DM گروپ سے کوئی خاص فرق نہیں دکھایا۔

3.2.5 ذیابیطس چوہوں میں پلازما LH اور ٹیسٹوسٹیرون کی سطح پر CTE کا اثر

جیسا کہ جدول 4 میں دکھایا گیا ہے، ذیابیطس چوہوں (DM) میں ٹیسٹوسٹیرون کی تعداد میں نمایاں کمی واقع ہوئی ہے، جبکہٹیسٹوسٹیرون کی تعداد میں نمایاں اضافہ ہوا ہے۔CTE کی مختلف خوراکوں پر۔ مزید، نتائج نے ڈی ایم آر، ڈی ایم ای 1، ڈی ایم ای 2، اور ڈی ایم ای 4 کے مقابلے ڈی ایم گروپ میں ایل ایچ کی سطح میں معمولی کمی ظاہر کی۔ DME4 گروپ میں LH کی پیداوار زیادہ تھی۔

3.2.6 ذیابیطس چوہوں کے سپرم پیرامیٹرز پر CTE کا اثر

تجرباتی نتائج سے معلوم ہوا کہ ڈی ایم گروپ میں سپرم کی تعداد اور حرکت پذیری میں کنٹرول گروپ کے مقابلے میں نمایاں کمی واقع ہوئی ہے جبکہ ڈی ایم گروپ میں سپرم کی غیر معمولی شرح میں نمایاں اضافہ ہوا ہے۔ دلچسپ بات یہ ہے کہ ڈی ایم آر گروپ کے سپرم نمبر، سپرم موٹیلٹی اور سپرم کی غیر معمولی شرح میں بہتری آئی ہے لیکن ڈی ایم ای 4 کے مقابلے سپرم کی حرکت پذیری قابل ذکر سطح تک نہیں پہنچ پاتی ہے۔ DME2 نے ان سب سے بہتر سپرم کاؤنٹ دکھایا اور DME4 گروپ میں حرکت پذیری کی شرح میں نمایاں اضافہ ہوا۔ RSG- اور CTE سے علاج شدہ گروپوں (ٹیبل 5) کے درمیان غیر معمولی سپرم کی تعداد میں کوئی خاص فرق نہیں تھا۔

3.2.7 ذیابیطس چوہوں میں Seminiferous Tubules کی شکل پر CTE کا اثر

شکل 9 ٹیسٹس سیکشن کے H&E داغ کو ظاہر کرتی ہے۔ سیاہ تیر Leydig سیل کو ظاہر کرتا ہے اور سفید تیر Sertoli سیل کو ظاہر کرتا ہے۔ ڈی ایم گروپ میں لیڈیگ سیل اور سیرٹولی سیل دونوں نے اہم ایٹروفی ظاہر کی اور لیمن میں ایک گہا دیکھا گیا۔ Leydig خلیات اور Sertoli کی ساخت کو CTE- اور RSG سے علاج شدہ گروپوں میں بحال کیا گیا تھا۔ سیمینیفرس نلی کی موٹائی ڈی ایم گروپ کے مقابلے CTE اور RSG گروپوں میں زیادہ تھی۔

3.2.8 ذیابیطس چوہوں کے ہائپوتھیلمس میں KiSS1، GPR54، SOCS-3، اور SIRT1 MRNAs پر CTE کا اثر

KiSS1 (شکل 10a)، GPR54 (شکل 10b)، SOCS-3 (شکل 10d)، اور SIRT1 (فگر 10c) کا اظہار شکل 10 میں دکھایا گیا تھا۔ ذیابیطس کے چوہوں میں KiSS1 اور رسیپٹر GPR54 کا mRNA اظہار تھا۔ کنٹرول گروپ کے مقابلے میں نمایاں طور پر کم۔ DMR، DME1، DME2، اور DME4 میں KiSS1 اور GPR 54 mRNA اظہار کی سطح میں نمایاں اضافہ کیا گیا تھا۔ خاص طور پر، DME4 میں GPR54 mRNA اظہار میں نمایاں اضافہ ہوا تھا اور یہ تقریباً کنٹرول گروپ سے ملتا جلتا تھا۔

ٹیسٹوسٹیرون پی ایچ جی ایس 75% ECH 30% ایکٹ 12% کی پیداوار کے تحفظ کے لیے نیچرل CISTANCHE TUBULOSA

اس تجربے نے چوہوں کے ہائپوتھیلمس میں SOCS-3 اور SIRT1 mRNAs کی مقدار کو مزید دریافت کیا۔ ذیابیطس کے چوہوں میں SOCS-3 mRNA کے اظہار میں نمایاں اضافہ ہوا ہے جس سے یہ ظاہر ہوتا ہے کہ لیپٹین کی رکاوٹ زیادہ سنگین تھی۔ ڈی ایم آر، ڈی ایم ای 1، ڈی ایم ای 2، اور ڈی ایم ای 4 گروپوں نے ذیابیطس کے گروپ کے مقابلے میں نمایاں بہتری دکھائی۔ ڈی ایم گروپ میں SIRT1 mRNA اظہار میں نمایاں کمی واقع ہوئی تھی اور DME1 اور DME4 گروپوں میں نمایاں اضافہ کیا گیا تھا۔

3.2.9 ذیابیطس چوہوں کے پلازما اور خصیوں میں اینٹی آکسیڈینٹ انزائمز پر CTE کا اثر

جدول 6 سے پتہ چلتا ہے کہ ذیابیطس کے چوہوں کی پلازما SOD سرگرمی، GPx سرگرمی، اور catalase سرگرمی میں نمایاں کمی واقع ہوئی ہے اور CTE- اور RSG سے علاج شدہ گروپوں میں سرگرمیاں بڑھائی گئی ہیں۔ اس کے علاوہ، DME4 نے GPx سرگرمی میں دوسروں کے مقابلے میں نمایاں بہتری دکھائی۔ نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ ذیابیطس کے چوہوں میں SOD اور catalase سرگرمیاں چھ ہفتوں کے بعد نمایاں طور پر کم ہوگئیں۔ DMR گروپ کی SOD اور catalase سرگرمی ایک اہم سطح تک نہیں پہنچتی ہے۔ CTE سے علاج شدہ گروپوں نے SOD اور catalase سرگرمی میں نمایاں بہتری دکھائی۔ CTE گروپوں میں catalase اور SOD کی بڑھتی ہوئی سرگرمیاں testis (ٹیبل 7) میں بھی دیکھی گئیں۔ SOD اور catalase کی سب سے زیادہ سرگرمی بالترتیب DME1 گروپ اور DME2 گروپس میں دیکھی گئی۔

3.2.10 ذیابیطس چوہوں کے پلازما اور خصیوں میں آکسیڈیٹیو تناؤ اور سوزش پر CTE کے اثرات

پلازما (شکل 11a) اور خصیوں (فگر 11b) میں نائٹرک آکسائیڈ (NO) کی پیداوار کو شکل 11 میں دکھایا گیا ہے۔ کنٹرول گروپ کے مقابلے ٹیسٹس اور پلازما دونوں میں DM گروپ میں NO کی پیداوار میں نمایاں اضافہ ہوا ہے۔ DME1، DME2، اور DME4 گروپس (پلازما میں) میں NO پیداوار کی بتدریج کمی دیکھی گئی۔ ڈی ایم آر گروپ نے بھی NO پیداوار میں نمایاں کمی ظاہر کی۔ خصیوں کے معاملے میں، CTE گروپس میں NO پیداوار میں معمولی کمی دیکھی گئی، جبکہ DMR گروپ نے NO پیداوار میں نمایاں کمی نہیں کی۔

جیسا کہ اعداد و شمار 12 اور 13 میں دکھایا گیا ہے، TNF- اور IL-6 کی سطح ذیابیطس کے چوہوں میں نمایاں طور پر بڑھی ہے (دونوں پلازما اور خصیوں میں)، جس سے ظاہر ہوتا ہے کہ سوزش زیادہ سنگین ہے۔ پلازما میں، TNF- کی سطح CTE- اور RSG-علاج شدہ گروپس (شکل 12a) میں یکساں ہے۔ CTE گروپوں نے نمایاں طور پر (خاص طور پر DME2) خصیوں میں TNF- کی سطح کو کم کیا (شکل 12b)۔ CTE اور RSG گروپس کے پلازما میں IL-6 کی سطح نمایاں طور پر کم ہو گئی تھی (شکل 13a)۔ خصیوں میں، IL-6 کی سطح میں کمی کا رجحان تھا، لیکن یہ ایک اہم سطح تک نہیں پہنچا (شکل 13b)۔

3.2.1.1 زیادہ چکنائی والی خوراک کی وجہ سے ذیابیطس کے چوہوں کے سپرمیٹوزوا میں آکسیڈیٹیو تناؤ اور سوزش پر CTE کے اثرات

شکل 14 چوہے کے نطفہ میں سوپر آکسائیڈ ایون مواد کو ظاہر کرتی ہے۔ نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ ذیابیطس کے چوہوں کے سپرم میں سپر آکسائیڈ اینون کی پیداوار میں نمایاں اضافہ ہوا اور ڈی ایم آر گروپ میں کوئی خاص بہتری نہیں دیکھی گئی۔ ڈی ایم ای 1 اور ڈی ایم ای 4 گروپس نے سپر آکسائیڈ ایون کی پیداوار میں نمایاں کمی ظاہر کی۔

3.2.12 زیادہ چکنائی والی خوراک کی وجہ سے ذیابیطس کے شکار چوہوں کے سپرمیٹوزوا میں لپڈ پیرو آکسیڈیشن پر CTE کے اثرات

مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ ٹائپ 1 اور ٹائپ 2 ذیابیطس کے مریضوں میں لپڈ پیرو آکسیڈیشن میں اضافہ ہوا ہے [19]۔ پلازما، نطفہ، اور خصیوں میں میلونڈیالڈہائڈ (MDA) کی سطح ٹیبل 8 میں دکھائی گئی ہے۔ DM گروپ کے پلازما، خصیوں اور سپرم میں MDA کی سطح نمایاں طور پر زیادہ تھی اور CTE اور RSG کے ساتھ علاج نے MDA کی پیداوار کو کم کر دیا۔ پلازما میں DME4 اور DMEI گروپس میں نمایاں کمی دیکھی گئی۔ اس تحقیق سے معلوم ہوا کہ ذیابیطس کے چوہوں نے نہ صرف پلازما میں لپڈ پیرو آکسیڈیشن کی ڈگری کو بڑھایا بلکہ خصیوں اور سپرم میں بھی اضافہ کیا۔ CTE کی مختلف خوراکوں میں نمایاں بہتری دیکھی گئی۔

4. بحث

ذیابیطس ایک دائمی بیماری ہے جس کا تعلق خون میں شوگر کی اعلی سطح سے ہے۔ اینٹی آکسیڈینٹ اور ROS کی سطح کے درمیان عدم توازن آکسیڈیٹیو اسٹریس نامی حالت کا باعث بنے گا۔ سپر آکسائیڈ، ہائیڈروکسیل ریڈیکل، ہائیڈروجن پیرو آکسائیڈ، نائٹرک آکسائیڈ، اور سنگل آکسیجن ROS کی کچھ مثالیں ہیں جو آکسیڈیٹیو تناؤ کے ذریعے ذیابیطس کے حالات میں حصہ ڈالیں گی [20]۔Cistanche tubulosaایک صحرائی پودا ہے جس میں فعال اجزا ہوتے ہیں جیسےپولی سیکرائڈز، اولیگوساکرائڈز، فینی لیتھانائڈ گلائکوسائیڈز (ایچناکوسائیڈ، ورباسکوسائیڈ)palmitic acid، linoleic acid، iridoids، alditols، اور lignans۔ یہ پلانٹ اینٹی سوزش، نیورو پروٹیکٹو، اینٹی بیکٹیریل، اینٹی وائرل، اینٹی آکسیڈیٹیو، اینٹی ٹیومر، اور امیونوموڈولیٹری اثرات پیدا کرنے کی صلاحیت رکھتا ہے [21]۔ ادبی مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ Cistanche tubulosa سے phenylethanoid glycosides اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی کی بڑی وجہ ہیں [22]۔ Resveratrol (RES) اور rosiglitazone (RSG) کو بالترتیب وٹرو اور ویوو اسٹڈیز میں مثبت کنٹرول کے طور پر لیا گیا۔ RSG ایک طاقتور انسولین سنسیٹائزر ہے اور اس کا تعلق پیروکسوم پرولیفریٹر ایکٹیویٹڈ ریسیپٹر (PPARc) کے آئسفارم سے ہے۔ یہ ذیابیطس کے مریضوں میں ہائپرگلیسیمیا کو کنٹرول کرتا ہے [23]۔ RES میں قدرتی اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی ہے اور یہ ایک واسوڈیلیٹر کے طور پر کام کرتا ہے، لیپوپروٹین میٹابولزم کو منظم کرتا ہے، پلیٹلیٹ جمع کو روکتا ہے، اور کینسر کو روکتا ہے [24,25]۔ ہماری تحقیقات نے اشارہ کیا کہ ECH CTE اور RES (شکل 1) کے مقابلے میں بہتر بنیاد پرستی کی سرگرمی دکھاتا ہے۔ یہ بھی سمجھا جاتا ہے کہ ECH LC-540 اور TM3 Leydig خلیات (شکل 2) کے لیے کوئی اہم زہریلا نہیں بناتا ہے۔

مردانہ جنسی فعل کے لیے نیچرل سیسٹینچ ٹیبلوسا PHGS75% ECH 30% ACT 12%

AGEs کا استعمال Leydig خلیوں میں تناؤ کے حالات پیدا کرنے کے لیے کیا گیا تھا۔ AGEs کی پیداوار، سوزش، آکسیڈیٹیو تناؤ اور ذیابیطس ایک دوسرے سے جڑے ہوئے ہیں۔ ذیابیطس کی ہائپرگلیسیمک حالت AGEs اور آکسیڈیٹیو تناؤ کی پیداوار کے ذریعے خلیوں کی چوٹ کو فروغ دیتی ہے۔ AGEs سیل کی زہریلا کی حوصلہ افزائی کرتا ہے، جو مزید مدافعتی خلیوں کی بھرتی اور سیل کی موت کو فروغ دیتا ہے. AGEs کی ایک بلند سطح دو قسم کے رسیپٹرز کے اظہار کو فروغ دیتی ہے جسے RAGE اور AGER1 کہا جاتا ہے [26]۔ آکسیڈیٹیو تناؤ کے دوران مائٹوکونڈریل سانس کی زنجیر سے سالماتی آکسیجن میں الیکٹران کی ٹپکنے اور بعد میں منتقلی کے نتیجے میں ایک سپر آکسائیڈ ایون کی تشکیل ہوتی ہے۔ ہمارے نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ AGEs کی طرف سے حوصلہ افزائی کی گئی سپر آکسائیڈ ایون کی پیداوار کو کنٹرول گروپ میں بڑھایا گیا اور ECH اور RES دونوں علاج کے ساتھ مزید بہتری دیکھی گئی۔ ہمارے مطالعے کے مطابق، یہ سمجھا گیا تھا کہ ECH اور RES کی موجودگی میں AGEs کے ذریعے پیدا ہونے والی سپر آکسائیڈ (شکل 3) اور H2O2 (شکل 4) کی پیداوار میں کمی واقع ہوئی ہے۔

NF-κB ذیابیطس سے وابستہ سوزش کے اہم ثالث کے طور پر جانا جاتا ہے [27]۔ NF-κB کا اظہار سیل کی خرابی اور سیل کی موت کا باعث بنتا ہے۔ آکسیڈیٹیو تناؤ کے ذریعہ NF-κB کو چالو کرنا سوزش کے حامی ردعمل ، اینڈوتھیلین کی اپ گریجشن اور اپوپٹوس کو متحرک کرتا ہے [28]۔ AGE محرک گروپوں میں RAGE اور NF-κB کے اظہار میں اضافہ کیا گیا تھا اور اس کے نتیجے میں کمی ECH- اور RES سے علاج شدہ خلیوں میں دیکھی گئی تھی (شکل 5)۔

ٹیسٹوسٹیرونایک anabolic سٹیرایڈ اور بنیادی ہےمرد جنسی ہارمونکولیسٹرول سے ترکیب شدہ۔ یہ عمل کولیسٹرول سائیڈ چین کلیویج جین (CYP11A) کے ذریعے کولیسٹرول کی سائیڈ چین کے آکسیڈیٹیو کلیویج سے شروع ہوتا ہے۔ یہ جین مائٹوکونڈریل جھلی میں مقامی ہے اور کولیسٹرول کو پریگنینولون میں تبدیل کرتا ہے۔ اس کے بعد، اینڈوپلاسمک ریٹیکولم سے CYP17A1 جین دو اضافی کاربن ایٹموں کو ہٹاتا ہے اور متعدد C19 سٹیرائڈز تیار کرتا ہے۔ اس کے علاوہ، pregnenolone کو hydroxysteroid dehydrogenase (3- -HSD) کے ذریعے androstenedione/progesterone بنانے کے لیے آکسائڈائز کیا جاتا ہے۔ آخر میں، ٹیسٹوسٹیرون اینڈروسٹینیڈیون کی 17ویں کاربن پوزیشن میں کیٹو گروپ کی کمی سے 17-بیٹا ہائیڈروکسیسٹرائڈ ڈیہائیڈروجنیز (17- -HSD) کے ذریعے تیار ہوتا ہے۔ Leydig خلیات ٹیسٹوسٹیرون کی بڑی پیداوار میں شامل ہیں۔ اندرونی مائٹوکونڈریل جھلی میں کولیسٹرول کی منتقلی کے لیے سٹیرائیڈوجینک ایکیوٹ ریگولیٹری پروٹین (اسٹار) کی کارروائی کی ضرورت ہوتی ہے۔ موجودہ مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ ستارہ، CYP11A1، CYP17A1، اور HSD17 3 کے اظہار میں AGE-علاج شدہ خلیات (کنٹرول) میں کمی واقع ہوئی تھی اور ECH- اور RES-علاج شدہ خلیوں میں زبردست اضافہ دیکھا گیا تھا (شکل 6) . اس طرح، نتائج ظاہر کرتے ہیں کہ کی پیداوارECH- اور RES-علاج شدہ گروپوں میں ٹیسٹوسٹیرون میں اضافہ ہوا تھا۔ 

جنسی طاقت کو بہتر بنانے کے لیے نیچرل سیسٹینچ ٹیوبولوسا PHGS75% ECH 30% ایکٹ 12%

ذیابیطس کی حالت کے دوران، اعضاء تک گلوکوز کی نقل و حمل محدود ہوتی ہے اور اس کے نتیجے میں، گلوکوز کی سطح بڑھ جاتی ہے [29]۔ لہذا، ہائپرگلیسیمک حالت ذیابیطس کا پتہ لگانے کے لئے ایک اہم مارکر ہے۔ ہمارے مطالعے سے پتہ چلتا ہے کہ ذیابیطس کے گروپوں میں پلازما گلوکوز کی سطح میں اضافہ ہوا تھا اور DM گروپ کا AUC دوسرے گروپوں کے مقابلے میں نمایاں طور پر زیادہ تھا (شکل 8)۔ پلازما گلوکوز کے ساتھ ساتھ، ڈی ایم گروپ (ٹیبل 2) میں کل کولیسٹرول اور ٹرائگلیسرائیڈ کے مواد میں نمایاں اضافہ ہوا ہے۔ ایتھروسکلروسیس کو کولیسٹرول اور ٹرائگلیسرائڈز کی بڑھتی ہوئی سطح سے سہولت فراہم کی جاتی ہے [30]۔ تاہم، CTE- اور RSG-علاج شدہ گروپوں میں کولیسٹرول اور ٹرائگلیسرائڈز کی سطح میں کمی واقع ہوئی۔ DME4 گروپ کا ٹرائگلیسرائڈ مواد کنٹرول گروپ کے تقریباً اسی قدروں تک پہنچ گیا۔

انسولین ایک ہارمون ہے جو لبلبے کے خلیات کے ذریعہ تیار کیا جاتا ہے اور جسم میں خون میں شکر کی سطح کو کنٹرول کرنے کے لئے فعال ہوتا ہے جبکہ لیپٹین ایک ہارمون ہے جو اڈیپوسائٹس کے ذریعہ تیار کیا جاتا ہے جو کھانے کی مقدار اور توانائی کے استعمال کو منظم کرنے کی صلاحیت رکھتا ہے۔ مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ لیپٹین موٹاپے کے پیتھوفیسولوجی میں شامل ہے اور لیپٹین اور انسولین کے درمیان ایک مثبت تعامل ہے [31]۔ ہمارے مطالعے سے پتہ چلتا ہے کہ ڈی ایم گروپ میں پلازما انولین اور لیپٹین کی سطح زیادہ تھی اور سی ٹی ای کے ارتکاز میں اضافے کے ساتھ انسولین کی سطح میں کمی واقع ہوئی تھی۔ آر ایس جی گروپ ڈی ایم گروپ سے کوئی خاص فرق نہیں دکھاتا ہے۔ انسولین مزاحمت اور سیل کے فنکشن کا اندازہ HOMA-IR طریقہ سے کیا گیا۔ DM گروپ میں HOMA-IR کی قدر میں اضافہ ہوا اور دوسرے گروپوں سے نمایاں طور پر مختلف تھا (ٹیبل 3)۔

DM HPG محور میں ہارمونل تبدیلی کے ذریعے تولیدی فعل کو متاثر کرتا ہے اور مطالعے سے یہ بات سامنے آئی ہے کہ خصیوں میں انسولین کا اظہار بھی ذیابیطس سے متاثر ہوتا ہے۔ اس کی خصوصیات سرٹولی سیل ویکیولائزیشن، ڈی این اے فریگمنٹیشن میں اضافہ، نطفہ کی خرابی، اور جراثیم کے خلیوں کی کمی میں اضافہ ہے۔ آکسیڈیٹیو تناؤ تولیدی فعل میں اسامانیتاوں میں بھی حصہ ڈالتا ہے [32]۔ مردانہ تولیدی اعضاء (ٹیسٹس) میں سپرم کی تشکیل کے عمل کو سپرمیٹوجنیسس کہتے ہیں۔ خصیہ مضبوطی سے جڑی ہوئی نلیوں پر مشتمل ہوتا ہے جسے سیمینیفرس نلیاں کہتے ہیں۔ سیرٹولی خلیات سیمینیفرس نلی کی دیواروں میں نظر آتے ہیں اور ناپختہ سپرم کو پرورش فراہم کرتے ہیں۔ سپرم پیرامیٹرز کی تحقیقات نے اشارہ کیا کہ سپرم اور حرکت پذیری کی تعداد میں کمی آئی ہے اور ڈی ایم گروپ (ٹیبل 5) میں اسامانیتاوں میں اضافہ ہوا ہے۔ CTE- اور RSG-علاج شدہ گروپوں میں ایک مخالف اثر دیکھا گیا۔ DM گروپ میں Leydig سیل اور Sertoli خلیات دونوں نے اہم atrophy ظاہر کی اور lumen میں گہا دیکھا۔ ڈی ایم گروپ میں سیمینیفرس نلی کی موٹائی بھی کم ہوگئی۔ CTE- اور RSG سے علاج شدہ گروپس (شکل 9) میں ایک بہتر نتیجہ دیکھا گیا۔ اس کے علاوہ، ڈی ایم گروپ میں ایل ایچ اور ٹیسٹوسٹیرون کی سطح کم ہوئی اور سی ٹی ای سے علاج شدہ گروپس (ٹیبل 4) میں سطح بڑھ گئی۔ مردوں میں، کم سیرم ٹیسٹوسٹیرون اور کم ایل ایچ پلس فریکوئنسی اکثر موٹاپا اور ذیابیطس mellitus قسم 2 [33] سے منسلک ہوتے ہیں۔

KiSS1 جین کے ذریعے انکوڈ شدہ Kisspeptins کو HPG محور کے طاقتور محرک کے طور پر جانا جاتا ہے اور kisspeptin جین میں کوئی بھی تبدیلی جنسی سٹیرائڈز اور گوناڈوٹروپین کی کم سطح کا باعث بنے گی۔ مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ STZ سے متاثرہ ذیابیطس چوہوں میں، Kiss1 mRNA کی سطح میں کمی واقع ہوئی ہے [33]۔ ممالیہ بانجھ پن کی شروعات اور دیکھ بھال جی پروٹین کپلڈ ریسیپٹر 54 (جی پی آر 54) سے جڑی ہوئی ہے۔ GPR 54 میں اتپریورتن جنسی پختگی کی عدم موجودگی اور گوناڈوٹروپک ہارمونز (LH اور FSH) کی کم سطح سے نمایاں ہے۔ سوزش کی حامی سائٹوکائنز جیسے IL-6 اور TNF- جگر اور اڈیپوسائٹس [34] میں سوزش میں ثالثی انسولین مزاحمت میں ملوث سائٹوکائن سگنلنگ 3 (SOCS3) کے دبانے والے کے اظہار کو منظم کرتی ہیں۔ SIRT 1 ایک جین ہے جو عمر بڑھنے کی کئی بیماریوں کے ضابطے سے وابستہ ہے۔ یہ جین لبلبہ کے خلیوں میں نمایاں طور پر ظاہر ہوتا ہے اور انسولین کے اخراج کو منظم کرتا ہے اور apoptosis کو روکتا ہے۔ موجودہ مطالعات نے اشارہ کیا ہے کہ ڈی ایم گروپ میں KiSS1، GPR54، اور SIRT1 کا اظہار کم ہوا ہے، لیکن CTE سے علاج شدہ گروپس (شکل 10) میں اظہار میں اضافہ ہوا ہے۔ DM گروپ میں SOCS-3 اظہار میں اضافہ سوزش کی حالت کی نشاندہی کرتا ہے۔ موٹاپا اور سوزش کے درمیان پہلا مالیکیولر لنک TNF- تھا۔ لہذا، TNF کی بڑھتی ہوئی سطح سوزش کا ایک اشارہ ہے. TNF- اور IL-6 جیسی سوزش کے حامی سائٹوکائنز کی کم ہوئی سطح CTE سے علاج شدہ گروپس (اعداد و شمار 12 اور 13) میں دیکھی گئی۔

ROS اور antioxidants کے درمیان عدم توازن ذیابیطس کی حالت کا باعث بنتا ہے۔ Superoxide dismutase (SOD)، catalase (CAT)، اور glutathione peroxidase (GPX) کو بنیادی اینٹی آکسیڈینٹ کے طور پر جانا جاتا ہے جو ROS کی بہترین سطح کو برقرار رکھنے کے لیے ذمہ دار ہیں [35]۔ نتائج سے پتہ چلا کہ ڈی ایم گروپ میں اینٹی آکسیڈینٹس کی سرگرمی نمایاں طور پر کم تھی۔ سی ٹی سے علاج شدہ گروپوں نے اینٹی آکسیڈینٹس کی پیداوار میں بہتری دکھائی۔ آر ایس جی کے زیر علاج گروپ نے اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی (ٹیبلز 6 اور 7) میں کوئی خاص بہتری نہیں دکھائی۔

نائٹرک آکسائیڈ (NO) ایک اہم ROS کے طور پر جانا جاتا ہے جو سوزش میں حصہ ڈالتا ہے۔ ہمارے مطالعے بتاتے ہیں کہ CTE سے علاج شدہ گروپس (شکل 11) میں NO کی سطح کم ہوئی تھی۔ نتائج سے معلوم ہوا کہ ذیابیطس کے شکار چوہوں کے سپرم میں سپر آکسائیڈ ایون کی مقدار میں نمایاں اضافہ ہوا ہے اور RSG کی انتظامیہ کے بعد کوئی خاص بہتری نہیں آئی۔ سی ٹی ای گروپس میں سپر آکسائیڈ کی پیداوار کم کردی گئی۔

ایم ڈی اے کا تعین لپڈ پیرو آکسائڈریشن کا اندازہ کرنے کے لئے بہت مفید ہے. لپڈ پیرو آکسائڈریشن لپڈ میں آکسیکرن کا عمل ہے اور آخر کار سیل کو نقصان پہنچاتا ہے۔ MDA polyunsaturated فیٹی ایسڈ کے لپڈ پیرو آکسائڈریشن کے نتیجے میں تیار کیا جاتا ہے. مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ ایم ڈی اے کی سطح عمر اور روزہ رکھنے والے خون میں گلوکوز کی سطح سے منسلک ہے [36]۔ موجودہ مطالعہ نے اشارہ کیا کہ CTE پلازما، خصیوں اور سپرم میں لپڈ پیرو آکسیڈیشن کو بہتر بناتا ہے (ٹیبل 8)۔

جنسی فعل کو بہتر بنانے کے لیے نیچرل سیسٹینچ ٹیبلوسا PHGS75% ECH 30% ACT 12%

5. نتائج

ذیابیطس کے حالات کے دوران آکسیڈیٹیو تناؤ مردانہ تولیدی نظام کو نطفہ کی خرابی اور گوناڈل کی خرابی کے ذریعے پریشان کرتا ہے۔ Cistanche tubulosa ایک صحرائی پودا ہے جو اس کے فارماسولوجیکل اثرات کی وجہ سے چینی طب میں بڑے پیمانے پر قبول کیا جاتا ہے۔Echinacoside (ECH)سی ٹی ای کا بنیادی جزو ہے جو اس کی اینٹی آکسیڈینٹ اور سوزش کی سرگرمیوں کے لیے ذمہ دار ہے۔ ہمارے ان وٹرو نتائج نے اشارہ کیا کہ ECH نے ٹیسٹوسٹیرون کی ترکیب کے راستے کو بحال کیا اور NF-κB اور RAGE پروٹین اظہار کی سطح کو کم کیا۔ ECH نے Leydig خلیات میں سپر آکسائیڈ anion اور H2O2 کی پیداوار کو مؤثر طریقے سے روک دیا۔ Vivo کے مطالعے سے پتہ چلتا ہے کہ ECH نے کولیسٹرول، ٹرائگلیسرائڈز، TNF-، اور IL-6 کی سطح کو کم کیا۔ اس کے علاوہ، ذیابیطس کے چوہوں کے ہائپوتھیلمس میں ایم آر این اے کے اظہار میں نمایاں بہتری آئی۔ یہ بات بھی قابل غور ہے کہ ECH نے ذیابیطس کے شکار نر چوہوں میں لپڈ پیرو آکسیڈیشن کو کم کیا اور انسولین کے خلاف مزاحمت کو بہتر کیا۔ اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمیاں پلازما اور ٹیسٹس دونوں میں بڑھ گئیں۔ لہذا، ہمارے مطالعے نے تجویز کیا کہ ECH نے STZ کی حوصلہ افزائی ذیابیطس نر چوہوں میں تولیدی خرابی کے خلاف مؤثر تحفظ فراہم کیا۔