Ovariectomized چوہا میں ہڈیوں کے نقصان پر Cistanches Herba Aqueous Extract کا اثر
Mar 04, 2022
رابطہ: آڈری ہوaudrey.hu@wecistanche.com
ہائیڈونگ لیانگ 1،*، فینگ یو 2، زیہونگ ٹونگ 1 اور زیگو ہوانگ 3
1 Hands and feet microsurgery, Dalian Municipal Central Hospital, Dalian 116033, China; E-Mail: tongzhih37@sina.cn
2 School of Medicine, Dalian University, Dalian 116033, China; E-Mail: yufangk7@sina.cn
3 Orthopedics Department, Dalian Municipal Central Hospital, Dalian 116033, China; E-Mail: huangzg41@sina.com
خلاصہ:ovariectomized (OVX) چوہے میں ہڈیوں کے نقصان کو روکنے کے لیے روایتی چینی ادویات Cistanches Herba Extract (CHE) کی صلاحیت کا اندازہ لگانے کے لیے، Cistanches Herba extract (CHE) کو چوہوں کو اندرونی طور پر دیا گیا۔ مادہ چوہوں کو پینٹوباربیٹل سوڈیم (40 mg kg−1, ip) کے ساتھ بے ہوشی کی گئی تھی، اور ان کے بیضہ دانی کو دو طرفہ طور پر ہٹا دیا گیا تھا۔ شیم سے چلنے والے گروپ میں چوہوں کو ان کے بیضہ دانی کو ہٹائے بغیر بے ہوشی، لیپروٹومی اور سیون کیا گیا تھا۔ سرجری سے صحت یاب ہونے کے 1 ہفتے کے بعد، OVX چوہوں کو تصادفی طور پر تین گروپوں میں تقسیم کیا گیا اور 3 ماہ تک H2O (OVX گروپ) یا CHE (100 یا 200 mg kg−1 روزانہ) کے ساتھ زبانی طور پر علاج کیا گیا۔ شرم سے چلنے والے گروپ (n=8) کا H2O کے ساتھ زبانی علاج کیا گیا۔ 3 ماہ کے بعد، جسم کی کل ہڈیوں کی معدنی کثافت (BMD)، ہڈیوں کے معدنی مواد (BMC)، ہڈیوں کے بائیو مکینیکل انڈیکس، خون کے معدنیات کی سطح، اور خون کے اینٹی آکسیڈینٹ انزائمز کی سرگرمیوں کی جانچ شیم سے چلنے والے، اوورییکٹومائزڈ اور Cistanches Herba ایکسٹریکٹ کے علاج شدہ چوہوں میں کی گئی۔ نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ Cistanches Herba Extract کا علاج نمایاں طور پر خوراک پر منحصر بڑھا ہوا ہڈیوں کے معدنی کثافت (BMD)، بون منرل مواد (BMC)، زیادہ سے زیادہ بوجھ، زیادہ سے زیادہ بوجھ پر نقل مکانی، زیادہ سے زیادہ بوجھ پر تناؤ، آٹو بریک پر لوڈ، آٹو بریک پر نقل مکانی ، اور آٹو بریک پر تناؤ، اور خون کے اینٹی آکسیڈینٹ انزائمز کی سرگرمیاں، OVX گروپ کے مقابلے میں خون کی Ca، Zn اور Cu کی سطح میں کمی۔ یہ تجربہ یہ ظاہر کرتا ہے کہ اوورییکٹومائزڈ چوہوں کے لیے Cistanches Herba ایکسٹریکٹ کا استعمال ہڈیوں کے نقصان کو روکتا ہے اور آسٹیوپوروسس کو روکتا ہے۔
مطلوبہ الفاظ:اوورییکٹومی؛ چوہا؛ ہڈی؛ اینٹی آکسیڈینٹ Cistanches Herba

1. تعارف
آسٹیوپوروسس عمر بڑھنے کی ایک بیماری ہے جس کا تعلق ہڈیوں کے گرنے سے ہوتا ہے جو اکثر علامات کے بغیر ہوتا ہے جب تک کہ مائیکرو آرکیٹیکچرل بگاڑ اتنا اہم نہ ہو جائے کہ ہڈیوں کا فریکچر ہمیشہ اس مقام پر ہوتا ہے جہاں ہڈیوں کے بڑے پیمانے پر کمی ہڈیوں کی سالمیت کے لیے ضروری ہے۔ صحت کی دیکھ بھال میں آسٹیوپوروسس کی بہت اہمیت ہے۔ اگرچہ بڑے پیمانے پر کم ہوتی ہے، معدنیات کے حوالے سے ہڈیاں معمول کے مطابق ہوتی ہیں لیکن ہسٹولوجیکل طور پر، پرانتستا کی موٹائی اور موٹے کینسلس ہڈی کے ٹریبیکولے کی تعداد اور سائز میں کمی واقع ہوتی ہے [1–3]۔
حالیہ برسوں میں اس بیماری کے بارے میں کافی تحقیق کی گئی ہے۔ جمع ہونے والے اعداد و شمار نے اس بات کی نشاندہی کی ہے کہ رجونورتی کے دوران ایسٹروجن کا نقصان بیماری کے روگجنن میں ایک اہم کردار ادا کرتا ہے کیونکہ یہ ہارمون آسٹیوکلاسٹ سرگرمی [4–6] کا ایک اہم منفی ریگولیٹر ہے، اور آسٹیو کلاسٹس آسٹیوپوروسس میں ہڈیوں کی دوبارہ تشکیل کے لیے ذمہ دار اہم خلیات ہیں۔ [7]۔
پوسٹ مینوپاسل آسٹیوپوروسس سب سے زیادہ بار بار میٹابولک ہڈیوں کی بیماری ہے، یہ معدنیات سے متعلق ہڈی کے ٹشو کا تیزی سے نقصان، ہڈی کے ٹریبیکولر فن تعمیر میں خلل، اور معدنی ذخائر کی کرسٹل لائن خصوصیات میں تبدیلی، جس کے نتیجے میں ساختی ناکامی (فریکچر) ہوتی ہے۔ کینسلس ہڈیوں سے مالا مال سائٹس، جیسے فقرے، کولہے اور بازو کے دور کا حصہ [8-11]۔ ایسٹروجن کی کمی پوسٹ مینوپاسل خواتین میں ہڈیوں کے گرنے کا سب سے بڑا عامل سمجھا جاتا ہے۔ Ovariectomized چوہوں اور کتوں کو آسٹیوپوروسس ماڈلز میں بڑے پیمانے پر استعمال کیا گیا ہے۔ 1996 میں، ovariectomized کتوں [12] پر ibandronate کے اثرات کی اطلاع ملی۔
Cistanches Herba (CH)، Cistanche deserticola YC Ma کا ہولوپراسیٹک پلانٹ، مشرقی روایتی ادویات میں ایک ٹنیفائینگ ایجنٹ کے طور پر درجہ بندی کیا جاتا ہے اور اسے عام طور پر بھول جانے، سماعت میں کمی، بانجھ پن، اور دائمی قبض کے علاج کے لیے استعمال کیا جاتا ہے۔ CH میں مختلف فارماسولوجیکل سرگرمیاں ہیں، بشمول antinociceptive، anti-inflammatory، اور immuno-enhancing اثرات [13,14]۔ پچھلی تحقیق میں بتایا گیا ہے کہ Cistanches Herba ہڈیوں کے mesenchymal اسٹیم سیلز (BMSCs) کو آسٹیو بلوسٹس میں فرق کرنے کے لیے رہنمائی کر سکتا ہے، جو آسٹیوپوروسس اور ہڈیوں کے فریکچر کے انحراف کے علاج کے لیے ایک سازگار امکان کا وعدہ کرتا ہے [15]۔ چن وغیرہ۔ [16] نے اطلاع دی کہ Cistanches Herba polysaccharides بون میرو سیل سائیکل کی منتقلی اور بون میرو افسردہ خون کی کمی والے چوہوں میں hematopoietic فعل کی بحالی کو فروغ دے سکتے ہیں، rubrum strain اور macronucleus strain میں hematogenesis کو تیز کر سکتے ہیں۔
اس تحقیق میں، ہڈیوں کی معدنی کثافت (BMD)، ہڈیوں کے معدنی مواد (BMC)، ہڈیوں کے بائیو مکینیکل انڈیکس، خون میں معدنیات کی سطح، اور خون میں اینٹی آکسیڈینٹ انزائمز کی سرگرمیوں کا جائزہ لیا گیا، شیم سے چلنے والے، اوورییکٹومائزڈ اور Cistanches Herba نے چوہوں کے علاج کے اثرات کا مطالعہ کیا۔ ہڈیوں کے معیار پر Cistanches Herba کے عرق کے ساتھ۔
روایتی چینی ادویات Cistanches Herba extract (CHE)
2. مواد اور طریقہ
2.1 Cistanches Herba Aqueous Extracts کی تیاری
سیستانچ ہربا کو 2010 میں نی منگول (اندرونی منگولیا) خود مختار علاقے کے الکسا لیگ میں صحرا سے جمع کیا گیا تھا۔
Cistanches Herba کے خشک تنے کو 100 ڈگری پر 2 گھنٹے کے لیے کشید پانی سے نکالا جاتا تھا۔ محلول کو 10 منٹ کے لیے 4000 r/min پر سینٹرفیوج کیا گیا۔ باقیات کو فلٹریشن کے ذریعے ہٹا دیا گیا تھا اور مطلوبہ ارتکاز (2.1 جی خشک پودے کے مساوی نچوڑ/mL) حاصل کرنے کے لیے مشترکہ فلٹریٹ کو گرم کرکے بخارات بنایا گیا تھا۔ نکالنے کی پیداوار 13.7 فیصد (w/w) تھی۔ پانی کے عرق کو 2-8 ڈگری پر ذخیرہ کیا گیا تھا۔
2.2 جانور
تجربے کے آغاز میں 240 سے 270 جی کے درمیان وزنی 3 ماہ کی بتیس خواتین چوہوں کو مطالعہ کے لیے استعمال کیا گیا۔ انہیں معیاری لیبارٹری کے حالات میں 12 گھنٹے روشنی اور تاریک سائیکل کے ساتھ برقرار رکھا گیا تھا، معیاری لیبارٹری چوہوں کے کھانے اور نلکے کے پانی تک مفت رسائی کے ساتھ۔
2.3۔ جانوروں کے تجربات۔
مادہ چوہوں کو پینٹوباربیٹل سوڈیم (40 mg kg−1, ip) کے ساتھ بے ہوشی کی گئی تھی، اور ان کے بیضہ دانی کو دو طرفہ طور پر ہٹا دیا گیا تھا۔ شیم سے چلنے والے گروپ میں چوہوں کو ان کے بیضہ دانی کو ہٹائے بغیر بے ہوشی، لیپروٹومی اور سیون کیا گیا تھا۔ سرجری سے صحت یاب ہونے کے 1 ہفتے کے بعد، OVX چوہوں کو تصادفی طور پر تین گروپوں میں تقسیم کیا گیا (ہر گروپ میں n=8) اور H2O (OVX گروپ)، Cistanches Herba extract (CHE) (100 یا 200 mg kg) کے ساتھ intragastrically علاج کیا گیا۔ -1 روزانہ) 3 ماہ کے لیے۔ شرم سے چلنے والے گروپ (n=8) کا H2O کے ساتھ زبانی علاج کیا گیا۔
تحقیق کے آخری دن جانوروں کا وزن کیا گیا اور ان کی قربانی کی گئی اور خون کے نمونے ایک ساتھ جمع کیے گئے۔ بایو مکینیکل ٹیسٹنگ کی پیمائش کے لیے فیمرز کو الگ کر دیا گیا اور نرم بافتوں کو الگ کر دیا گیا۔
تمام تجربات چین کی جانوروں کی دیکھ بھال کرنے والی کمیٹی کے قائم کردہ تحقیقی پروٹوکول کے مطابق کیے گئے تھے۔
2.4 ہڈیوں کی کثافت
فیمورل بون منرل مواد (BMC) اور بون منرل ڈینسٹی (BMD) کا تعین Hologic QDR{{0}}W DXA کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا تھا۔ آلے کو ایک انتہائی ہائی ریزولوشن موڈ کے لیے ڈھال لیا گیا تھا جس میں لائن سپیسنگ 0 تھی۔{6}}254 سینٹی میٹر، ریزولیوشن 0.0127 سینٹی میٹر، اور 0.9 سینٹی میٹر قطر کا کولیمیٹر۔ ہڈیوں کو پیٹری ڈش میں رکھا گیا تھا۔ ہڈیوں کے ارد گرد نرم بافتوں کی کثافت کی نقل کرنے کے لیے، 1 سینٹی میٹر کی گہرائی حاصل کرنے کے لیے ہڈیوں کے گرد نل کا پانی ڈالا گیا۔ نتائج بی ایم سی کے لیے اور ناپے گئے علاقے کے لیے دیے گئے ہیں۔ اس علاقے کے BMD کا حساب BMC کے رقبے کے حساب سے کیا جاتا ہے۔ کل فیمر کے نتائج کے علاوہ، فیمر کے ڈسٹل اور وسط ریجن کو ذیلی علاقوں کے طور پر تجزیہ کیا گیا تھا [17]۔
2.5 بون بائیو مکینیکل ٹیسٹنگ
فیمر ہڈیوں کو اس وقت تک 4 ڈگری پر رکھا گیا جب تک کہ ایک 5-kN فلیکسچر فکسچر کا استعمال کرتے ہوئے ٹوٹنے کی طاقت کا تعین نہیں کیا جاتا، تین پوائنٹ موڑنے والے ٹیسٹوں کے لیے ترتیب دیا گیا اور ایک 10- سے لیس ایک انسٹرون یونیورسل ٹیسٹنگ مشین ماڈل 4502 سے منسلک کیا گیا۔ کے این لوڈ سیل (انسٹرون، کینٹن، ایم اے، یو ایس اے)، جیسا کہ پہلے بیان کیا گیا ہے [18]۔ کراس ہیڈ کی رفتار 50 ملی میٹر فی منٹ تھی، اور ڈیٹا کے نمونے لینے کی شرح 10 نمونے فی سیکنڈ تھی۔ زیادہ سے زیادہ بوجھ، زیادہ سے زیادہ بوجھ پر دباؤ، ناکامی پر بوجھ، اور ناکامی پر دباؤ کا تعین فیمر میں Series IX, v 8.08 کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا تھا۔{11}} سافٹ ویئر (Instron)۔
2.6۔ بائیو کیمیکل تجزیہ
خون کی Ca، Zn اور Cu کی سطحوں کو جوہری جذب سپیکٹرو فوٹومیٹری سے ماپا گیا۔
کنگ اور آرمسٹرانگ [19] کے طریقہ کار کی بنیاد پر، الکلائن فاسفیٹیس (ALP) کی سرگرمی کو ڈسوڈیم فینائل فاسفیٹ کو بطور سبسٹریٹ استعمال کرتے ہوئے پرکھا گیا۔ تیار کردہ رنگ کو 10 منٹ کے بعد UV-vis spectrophotometer میں 510 nm پر پڑھا گیا۔ ALP کی سرگرمیوں کو IU/L کے طور پر ظاہر کیا گیا تھا۔
جین ایٹ ال کے ذریعہ بیان کردہ طریقہ کار کا استعمال کرتے ہوئے خون میں میلونڈیالچیچ (ایم ڈی اے) کی حراستی کا تعین کیا گیا تھا۔ [20]، TBA رد عمل پر مبنی۔ مختصراً، 0.2 mL erythrocyte pellets یا supernatant جو ٹشوز سے حاصل کیا جاتا ہے، 0.8 mL فاسفیٹ بفر (pH 7.4), 0۔{17}}25 mL BHT، اور { {19}}.5 ملی لیٹر 30 فیصد ٹی سی اے کو ٹیوبوں میں شامل کیا گیا اور ملایا گیا۔ −20 ڈگری پر 2 گھنٹے کے انکیوبیشن کے بعد، مرکب کو 15 منٹ کے لیے سینٹرفیوج (4000×g) کیا گیا۔ اس کے بعد، 1 ملی لیٹر سپرنٹنٹ لیا گیا اور ہر ٹیوب میں شامل کیا گیا، اور پھر 0.1 ایم ای ڈی ٹی اے کا 0.075 ملی لیٹر اور
0.25 ملی لیٹر کا 1 فیصد ٹی بی اے شامل کیا گیا۔ ٹیفلون کی لکیر والی اسکرو کیپس والی ان ٹیوبوں کو پانی کے غسل میں 90 ڈگری پر 15 منٹ تک انکیوبیٹ کیا گیا اور کمرے کے درجہ حرارت پر ٹھنڈا کیا گیا۔ آپٹیکل کثافت خون کے ایم ڈی اے حراستی کے لئے 532 پر ماپا گیا تھا۔
glutathione peroxidase (GSH-Px) کی سرگرمی لارنس اور برک [21] کے طریقہ کار کے مطابق طے کی گئی تھی۔ پرکھ کا مرکب 20 mL 75 mM فاسفیٹ بفر (pH 70)، 50 μL of 60 mM glutathione، {{15} پر مشتمل تھا۔ }.1 mL of 30 یونٹس/mL glutathione reductase, 0.1 mL of 15 mM EDTA, 0.1 mL 3 mM NADPH اور 3.0 mL کے حتمی حجم تک ٹشو سپرنٹنٹ کی مناسب مقدار . رد عمل 7.5 mM H2O2 کے 0.1 ملی لیٹر کے اضافے سے شروع ہوا تھا۔ NADPH کو NADP پلس میں تبدیل کرنے کے دوران جذب کی تبدیلی کی شرح 3 منٹ کے لئے 340 nm پر سپیکٹرو فوٹومیٹرک طور پر ریکارڈ کی گئی۔ ؤتکوں کے لئے GSH-Px سرگرمی کا اظہار NADPH کے μmoles کے NADP پلس min−1 mg−1 پروٹین میں آکسائڈائزڈ کے طور پر کیا گیا تھا۔
سوپر آکسائیڈ خارج کرنے کی سرگرمی (SOD) کا تعین خون میں Sun et al کے طریقہ کار کے مطابق کیا گیا تھا۔ [22]۔ طریقہ کار کا اصول ایک سپر آکسائیڈ جنریٹر کے طور پر xanthine-xanthine oxidase کے نظام کو استعمال کرکے نائٹرو بلیو ٹیٹرازولیم (NBT) کی کمی کو روکنے پر مبنی ہے۔ سرگرمی کا اندازہ 10000 گرام میتھانول/کلوروفارم (5/3، v/v) ٹشو ہوموجینیٹس کے نچوڑ (10 فیصد) میں کیا گیا۔ SOD کی ایک اکائی کو اینزائم کی مقدار کے طور پر بیان کیا گیا تھا جس کی وجہ سے NBT میں کمی کی شرح میں 50 فیصد رکاوٹ پیدا ہوتی ہے۔
Catalase (CAT) کی سرگرمی کو Abei کے [23] طریقہ کا استعمال کرتے ہوئے ماپا گیا۔ سیرم کو ایک کیویٹ میں شامل کیا گیا تھا جس میں 50 mmol/L فاسفیٹ بفر (pH 7۔{6}}) کا 2.89 mL ہوتا ہے۔ رد عمل کا آغاز 25 ڈگری پر 3.0 ملی لیٹر کا حتمی حجم بنانے کے لیے تازہ تیار کردہ 30 mmol/L H2O2 میں 0.1 ملی لیٹر شامل کرکے کیا گیا۔ H2O2 کی سڑن کی شرح ایک سپیکٹرو فوٹومیٹر پر 5 منٹ کے لیے 240 nm پر ناپی گئی۔ CAT کی ایک اکائی (U) کو 25 ڈگری اور pH 7.8 پر 1 nmol H2O2 فی منٹ گلنے کے لیے درکار انزائم کی مقدار کے طور پر بیان کیا گیا تھا۔
2.7۔ شماریاتی تجزیہ
تجرباتی نتائج کا اظہار ہر گروپ میں آٹھ جانوروں کے لیے اوسط ± SD کے طور پر کیا گیا۔ بائیو کیمیکل پیرامیٹرز کا شماریاتی طور پر تجزیہ ANOVA کے یک طرفہ تجزیہ کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا، اس کے بعد Dunnett کے متعدد موازنہ ٹیسٹ (DMCT)۔ P- قدر کی<0.05 was="" considered="" statistically="">0.05>

3. نتائج
مطالعہ کے دوران دو جانوروں کی میعاد ختم ہوگئی۔ نتیجتاً، مطالعہ کے اختتام پر گروپوں کے نمبر تھے: 8 شیم کنٹرول میں؛ OVX گروپ میں 7؛ CHE-علاج گروپ میں 7 (100 mg kg−1 روزانہ) اور 8 CHE-علاج گروپ میں (200 mg kg−1 روزانہ)۔ آپریشن کے دو دن بعد، چوہوں کی خوراک اور پانی کی مقدار آپریشن سے پہلے کے مقابلے میں قدرے کم تھی۔ کوئی جانور انفیکشن اور انابیوسس کا شکار نہیں ہوا۔ چوہوں میں کوئی طبی طور پر واضح منفی اثرات نہیں دیکھے گئے۔
آپریشن سے پہلے، گروپوں کے درمیان چوہوں کے جسمانی وزن میں کوئی خاص (p > {{0}}}۔{7}}1) فرق نہیں تھا۔ OVX گروپ کا جسمانی وزن نمایاں طور پر تھا (p < 0۔{16}}1)="" شم="" گروپ="" (ٹیبل="" 1)="" سے="" کم۔="" 100="" اور="" 200="" mg/kg="" روزانہ="" کی="" خوراک="" پر="" cistanches="" herba="" extract="" administration="" نمایاں="" طور="" پر="" (p=""><0.05) che-علاج="" شدہ="" گروپ="" میں="" چوہوں="" کے="" جسمانی="" وزن="" میں="" اضافہ="" ہوا="" (100="" اور="" 200="" mg/kg="" روزانہ)۔="" جانوروں="" سے="" حاصل="" کردہ="" اعداد="" و="" شمار="" سے="" پتہ="" چلتا="" ہے="" کہ="" ovx="" گروپ="" کے="" bmd="" اور="" bmc="" اور="" شیم="" کنٹرول="" (p="">0.05)><0.01) کے="" درمیان="" اعداد="" و="" شمار="" کے="" لحاظ="" سے="" اہم="" فرق="" تھے۔="" جیسا="" کہ="" توقع="" کی="" جا="" رہی="" تھی،="" 200="" ملی="" گرام/کلوگرام="" کی="" خوراک="" پر="" cistanches="" herba="" ایکسٹریکٹ="" ایڈمنسٹریشن="" che-علاج="" شدہ="" گروپ="" (p="">0.01)><0.05؛ p="">0.05؛><0.01) کے="" bmd="" اور="" bmc="" میں="" نمایاں="" اضافہ="" کا="" باعث="">0.01)>

4. بحث
آسٹیوپوروسس ایسٹروجن کی کمی اور عمر بڑھنے کے ساتھ منسلک سب سے عام عوارض میں سے ایک ہے۔ رجونورتی کے نتیجے میں ہڈیوں کا ٹرن اوور بڑھ جاتا ہے، ہڈیوں کی تشکیل اور ہڈیوں کی بحالی کے درمیان عدم توازن، اور ہڈیوں کا خالص نقصان ہوتا ہے۔ ایسٹروجن کی کمی کی وجہ سے ہڈیوں کا نقصان بنیادی طور پر انسانوں اور تجرباتی جانوروں دونوں میں آسٹیو کلاسٹک ہڈیوں کی ریزورپشن میں اضافے کی وجہ سے ہوتا ہے [24]۔
اگرچہ آسٹیوپوروسس بوڑھے مردوں اور عورتوں دونوں کو متاثر کرتا ہے، لیکن رجونورتی کے بعد کی خواتین آسٹیوپوروسس کی بنیادی توجہ رہی ہیں [25,26]۔ خواتین کے ہارمونز کی ڈرامائی کمی پوسٹ مینوپاسل خواتین کے آسٹیوپوروسس کا سب سے اہم عنصر ہے۔ OVX چوہا ماڈل عام طور پر پوسٹ مینوپاسل آسٹیوپوروسس [27,28] پر تحقیق میں استعمال کیا جاتا ہے، جس میں اوورییکٹومی کے نتیجے میں ہڈیوں کی تشکیل کے دوران ہڈیوں کی بحالی کی زیادتی ہوتی ہے اور ہڈیوں کے نقصان کا سبب بنتا ہے۔ OVX آپریشن جسمانی وزن میں نمایاں اضافہ کا سبب بنتا ہے جو آپریشن کی کامیابی کا اندازہ کرنے کے لیے ایک گائیڈ پوسٹ ہو سکتا ہے [29]۔ موجودہ مطالعہ کے اختتام پر، OVX گروپ کے جسمانی وزن میں شیم گروپ کے مقابلے میں واضح طور پر کمی واقع ہوئی، اور Cistanches Herba extract کے ساتھ علاج نے ان کمیوں کو مکمل طور پر روک دیا۔ ہم سمجھتے ہیں کہ OVX نے شدید جسمانی تکلیف کا باعث بنا جس نے چوہوں کے کھانے کی مقدار کو متاثر کیا۔ اس کے بعد، OVX گروپ کے جسمانی وزن میں نمایاں کمی واقع ہوئی۔
ہڈیوں کی معدنی کثافت کو ہڈیوں کی طاقت کا محض ایک سروگیٹ پیمانہ قرار دیا گیا ہے [30]؛ تاہم، مائیکرو آرکیٹیکچرل خصوصیات ٹریبیکولر ہڈی کے معیار پر علاج کے حقیقی اثرات کی تشخیص کے لیے ایک نیا ابھرا ہوا نشان ہے۔ اگرچہ ہڈیوں کا کم ماس فریکچر کے لیے ایک بڑا خطرہ ہے [31]، لیکن ٹریبیکولر ہڈیوں کے فن تعمیر کا تحفظ ہڈیوں کی مضبوطی میں نمایاں طور پر حصہ ڈالتا ہے اور یہ BMD اور BMC سے آگے فریکچر کے خطرے کو کم کر سکتا ہے، جیسا کہ متعدد مطالعات سے ظاہر ہوا ہے کہ مائیکرو اسٹرکچر کے درمیان قریبی تعلق کی اطلاع ہے۔ خصوصیات اور ہڈیوں کی بایو مکینیکل طاقت [32,33]۔ اس کام میں، بی ایم ڈی اور بی ایم سی شرم اور اوورییکٹومائزڈ گروپوں کے درمیان نمایاں طور پر مختلف پائے گئے۔ Cistanches Herba نچوڑ کے ساتھ علاج نے OVX چوہوں میں BMD اور BMC کو نمایاں طور پر بڑھایا۔ مزید برآں، Cistanches Herba extracts کی انتظامیہ اب بھی خوراک پر منحصر ہے زیادہ سے زیادہ بوجھ میں اضافہ، زیادہ سے زیادہ بوجھ پر نقل مکانی، زیادہ سے زیادہ بوجھ پر دباؤ، آٹو بریک پر لوڈ، آٹو بریک پر نقل مکانی، اور CHE-علاج شدہ گروپوں میں آٹو بریک میں تناؤ۔ OVX گروپ کے مقابلے میں۔ ان نتائج نے اشارہ کیا کہ چوہوں سے فیمر ہڈیوں کو کھلایا Cistanches Herba نچوڑ ناکامی پر زیادہ بوجھ رکھتا ہے اور اس طرح تناؤ کے فریکچر کے خلاف زیادہ مزاحم ہوسکتا ہے۔ اس کے علاوہ، OVX گروپ کے چوہوں کے خون میں Ca، Zn، اور Cu کی سطح شیم گروپ کے چوہوں سے زیادہ تھی۔ Cistanches Herba اقتباس کی انتظامیہ نے OVX چوہوں میں خون Ca, Zn اور Cu کی سطح کو کم کر دیا تھا۔
یہ خیال کہ آسٹیوپوروسس میں آکسیڈیٹیو کی حیثیت اہم ہے آسٹیوپوروسس اور ایتھروسکلروسیس کے درمیان مضبوط وبائی امراض کے ساتھ مطابقت رکھتا ہے، ایک ایسی بیماری جس میں آکسیڈینٹ تناؤ ایک اہم کردار ادا کرتا ہے۔ مزید برآں، حال ہی میں یہ دیکھا گیا ہے کہ خواتین میں آکسیڈینٹ تناؤ (آکسیڈیٹیو تناؤ کے بائیو مارکر سے ماپا جاتا ہے، 8-iso-PGF2-) [34]، اینٹی آکسیڈینٹ کی سطح [35]، اور ہڈی معدنی کثافت. طبی مطالعات جنہوں نے انسانوں میں غذائی اور/یا اضافی ایسکوربیٹ اور ہڈیوں کے بڑے پیمانے کے درمیان تعلق کا جائزہ لیا ہے وہ بھی ہڈیوں کے بڑھتے ہوئے بڑے پیمانے کے ساتھ وابستگی کا مشورہ دیتے ہیں [36]۔
چونکہ ایم ڈی اے میں امینو گروپس کی طرف زیادہ رد عمل ہے، اس لیے یہ نیوکلک ایسڈز اور پروٹین کی ترکیب کو روکتا ہے اور انزائمز کو بھی غیر فعال کرتا ہے [37,38]۔ اس طرح، OVX کے بعد دیکھے جانے والے فیمر اینٹی آکسیڈینٹ انزائمز میں کمی اونچی لپڈ پیرو آکسیڈیشن کی وجہ سے ہو سکتی ہے۔ اینٹی آکسیڈینٹ انزائمز فری ریڈیکل ثالثی ٹشو یا سیلولر نقصان کے خلاف دفاعی نظام میں شامل ہیں۔ وہ یا تو آزاد ریڈیکلز یا رد عمل آکسیجن انٹرمیڈیٹس کو غیر ریڈیکل مصنوعات میں میٹابولائز کرتے ہیں۔ ان انزائمز میں glutathione پر منحصر انزائمز کا ایک خاندان شامل ہے [39]۔ اس مطالعہ میں، ہم اینٹی آکسیڈینٹ انزائمز کی سطحوں میں نمایاں کمی کی اطلاع دیتے ہیں۔ اوورییکٹومائزڈ چوہوں کے خون میں SOD، GSH-Px، CAT۔ ان نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ ڈمبگرنتی ہارمونز کی کمی آکسیڈیٹیو تناؤ کا مقابلہ کرنے میں ناکامی سے تعلق رکھتی ہے۔ Cistanches Herba کی انتظامیہ OVX چوہوں میں نمایاں طور پر خوراک پر منحصر خون کی SOD، GSH-Px، اور CAT سرگرمیاں نکالتی ہے۔ یہ نتائج OVX کے دوران آکسیڈیٹیو تناؤ کے خلاف Cistanches Herba اقتباس کے بہتر حفاظتی اثر کی نشاندہی کرتے دکھائی دیتے ہیں۔
خلاصہ طور پر، Cistanches Herba اقتباس ڈمبگرنتی ہارمون کی کمی کی وجہ سے ہڈیوں کے نقصان کو روکنے میں مؤثر ہے جیسا کہ فیمر BMD، BMC اقدار، اور خون کی Ca، Zn، اور Cu کی سطح سے دیکھا گیا ہے۔ چونکہ آسٹیوپوروسس کا تعلق آکسیڈیٹیو تناؤ سے ہے، اس طرح کے مطالعے اینٹی آکسیڈینٹس کی علاج کی قدروں کی اہمیت کی تصدیق کرتے ہیں۔ ہمارا خیال ہے کہ Cistanches Herba ایکسٹریکٹ OVX چوہوں کی اینٹی آکسیڈینٹ انزائمز کی سرگرمیوں کو بڑھانے اور ہڈیوں کے معدنی عناصر کو کم کرنے کے ذریعے ممکنہ طور پر جزوی طور پر ہڈیوں کے معیار کو بہتر بناتا ہے۔

Cistanches Herba اقتباس: ہڈیوں کے نقصان کو روکنا
حوالہ جات
1. کینیلیس، ای. Giustina, A.; بلیزکیان، آسٹیوپوروسس کے لیے انابولک علاج کے جے پی میکانزم۔ این انگلش جے میڈ 2007، 357، 905-916۔
2. ہینی، آر پی؛ ریکر، آر آر؛ Saville، PD ہڈیوں کی دوبارہ تشکیل میں رجونورتی تبدیلیاں۔ جے لیب کلین میڈ. 1978، 92، 964-970۔
3. McNamara, LM; ایڈروین، اے جی ایچ؛ لیونز، سی جی؛ قیمت، C.؛ شیفر، ایم بی؛ وینانس، ایچ. Prendergast, PJ عمر بڑھنے کے دوران نارمل، اوورییکٹومائزڈ اور منشیات سے علاج شدہ چوہوں سے کینسلس بون ٹریبیکولر ٹشو کی طاقت۔ ہڈی 2006، 39، 392–400۔
4. کمپسٹن، جے ای ہارمون ریپلیسمنٹ تھراپی۔ کلین ریمیٹول۔ 1997، 11، 583–596۔
5. مائنر، SE ایک پھیلتا ہوا لینڈ سکیپ آسٹیوپوروسس: آج علاج کے اختیارات۔ Adv. نرس پریکٹس 1999، 7، 26–31۔
6. اوبن، جے ای؛ Bonnelye, E. Osteoprotegerin, and its ligand: osteoclastogenesis اور bone resoption کے ریگولیشن کے لیے ایک نیا نمونہ۔ آسٹیوپوروس انٹر 2000، 11، 905-913۔
7. روڈ مین، جی ڈی ایڈوانسز ان بون بائیولوجی: دی آسٹیو کلاس۔ اینڈوکر Rev. 1996, 17, 308–332.
8. شاہ بلوط، CH، III. ڈرگ تھراپی: کیلسیٹونن، بیسفاسفونیٹس، اور انابولک سٹیرائڈز۔ آسٹیوپوروسس میں: ایٹولوجی، تشخیص، اور انتظام؛ Riggs, BL, Melton, LJ, III, Eds.; Lippincott-Raven: Philadelphia، PA، USA، 1995۔
9. کوان، Q.-M.؛ وو، ڈبلیو؛ Li, Y.-X.; Cai، Q.-R. Barrenwort پرجاتیوں کے icariin اور flavonoid مواد میں تغیر۔ جے میڈ پودے Res. 2010، 4، 1176–1181۔
10. ڈو، ایکس جی؛ پین، HZ؛ ژانگ، سی وائی؛ Zhang, HY; لیو، ایچ ایم؛ چن، زیڈ وائی؛ Zeng، XY Zingiber officinale اقتباس چوہوں میں g-rays کے ذریعے مدافعتی قوت کو ماڈیول کرتا ہے۔ جے میڈ پودے Res. 2010، 4، 1647–1655۔
11. Paschalis, EP; بیٹس، ایف۔ ڈی کارلو، ای. مینڈیلسون، آر. بوسکی، AL FTIR غیر علاج شدہ آسٹیوپوروٹک ہڈی سے انسانی iliac کرسٹ بایپسیوں کا مائکرو اسپیکٹروسکوپک تجزیہ۔ کیلسیف۔ ٹشو انٹ 1997، 61، 487–492۔
12. Motoie، H.؛ کنوہ، ایچ. اوگاٹا، ایس. Kawamuki, K.; شکاما، ایچ. Fujikura, T. غذائی کیلشیم کی پابندی کے ساتھ ovariectomized کتوں میں bisphosphonate YM175 کے ذریعے ہڈیوں کے گرنے کی روک تھام۔ جے پی این جے فارماکول۔ 1996، 71، 239–246۔
13. لن، ایل ڈبلیو؛ Hsieh, MT; تسائی، ایف ایچ؛ وانگ، ڈبلیو ایچ؛ چوہوں میں Cistanche deserticola کی وجہ سے وو، CR اینٹی نوسیسیپٹیو اور اینٹی سوزش سرگرمی۔ J. Ethnopharmacol 2002، 83، 177–182۔
14. وو، ایکس ایم؛ گاو، ایکس ایم؛ Tsim, KW; Tu, PF Cistanche deserticola کے تنوں سے الگ تھلگ ایک arabinogalactan مہذب لیمفوسائٹس کے پھیلاؤ کو اکساتا ہے۔ انٹر J. Biol میکرومول۔ 2005، 37، 278–282۔
15. زینگ، جے سی؛ پرستار، YG؛ لیو، جے آر؛ زینگ YR؛ یی، سی زیڈ؛ لیانگ Y. سیرم پر مشتمل cistanche deserticola کی رہنمائی میں ہڈیوں کے mesenchymal اسٹیم سیلز (BMSCs) اور osteoblasts کے سمتی تفریق کا تجرباتی مطالعہ۔ Zhongguo Gu Shang 2010, 23, 606–608.
16. چن، زیڈ ڈبلیو؛ Zhu, B.-D.; Xu H.-Y. بون میرو افسردہ انیمیا چوہوں میں ریگولیٹڈ ہیمیٹوجنیسیس پر صحرائی زندہ رہنے والے سیستانچ پولی سیکرائڈز کا تجربہ مطالعہ۔ ٹھوڑی محراب روایت۔ ٹھوڑی میڈ. 2007، 25، 1473–1474۔
17. پرکاسم، جی؛ یہ، جے کے؛ چن، ایم ایم؛ کاسٹرو-مگانا، ایم. لیانگ، سی ٹی؛ Aloia, JF عمر رسیدہ اوورییکٹومائزڈ چوہوں میں کارٹیکل ہڈیوں کی تشکیل اور ہڈیوں کی کثافت پر گروتھ ہارمون اور ٹیسٹوسٹیرون کے اثرات۔ ہڈی 1999، 24، 491–497۔
18. میک کلنگ، جے پی؛ Stahl, CH; Marchitelli, LJ; Morales-Martinez, N.; مکین، کلومیٹر؛ نوجوان، اے جے؛ Scrimgeour, AG بڑھتے ہوئے چوہوں میں جسم کے وزن میں اضافے، جسمانی ساخت، اور ہڈیوں کے بائیو مکینکس پر غذائی فائٹیز کے اثرات کم زنک والی خوراک کھلاتے ہیں۔ جے نٹر بائیو کیم۔ 2006، 170، 190-196۔
19. کنگ، ای جے؛ آرمسٹرانگ، اے آر سیرم اور بائل فاسفیٹیس کی سرگرمی کا تعین کرنے کا ایک آسان طریقہ۔ کر سکتے ہیں۔ میڈ. ایسوسی ایشن J. 1934، 31، 376-381۔
20. جین، ایس کے؛ McVie, R.; ڈوئٹ، جے؛ ہربسٹ، جے جے اریتھروسائٹ میمبرین لپڈ پیرو آکسیڈیشن اور ذیابیطس میں گلائکوسلیٹڈ ہیموگلوبن۔ ذیابیطس 1989، 38، 1539–1543۔
21. لارنس، RA؛ برک، سیلینیم کی کمی والے چوہے کے جگر میں RF Glutathione peroxidase کی سرگرمی۔ بائیو کیم۔ بائیوفیس۔ Res. کمیون 1976، 71، 952-958۔
22. سورج، Y. اوبرلی، ایل ڈبلیو؛ ینگ، ایل۔ سپر آکسائیڈ خارج کرنے کے کلینیکل پرکھ کا ایک آسان طریقہ۔ کلین کیم 1988، 34، 497–500۔
23. Abei، H. Catalase in Vitro. انزیمول کے طریقے۔ 1988، 10، 121–126۔
24. مظفری، ج. ازارنیا، ایم. عبدالحمید انگاجی، S. چوہے کے جنین میں لمبی ہڈیوں کے بافتوں کی نشوونما پر Trigonella foenum-graecum leaf aqueous extract کے زہریلے اثرات کا جائزہ۔ جے میڈ پودے Res. 2010، 4، 1148–1155۔
25. Buencamino, MCA; سکون، AL؛ جین، اے. تھیکر، ایچ ایل آسٹیوپینیا کے علاج کے رہنما اصولوں پر عمل کرنے پر ایک مشاہداتی مطالعہ۔ J. خواتین کی صحت 2009، 18، 873–881۔
26. شمٹ، ایم این؛ شمٹ، جے؛ Dören, M. پوسٹ مینوپاسل خواتین میں آسٹیوپوروسس کی روک تھام میں جسمانی سرگرمی کا کردار — ایک تازہ کاری۔ Maturitas 2009, 63, 34-38.
27. لیلوواس، پی پی؛ Xanthos, TT; Thoma, SE; دھن، جی پی؛ Dontasi, IA لیبارٹری چوہا آسٹیوپوروسس کی تحقیق کے لیے جانوروں کے ماڈل کے طور پر۔ کمپ میڈ. 2008، 58، 424–430۔
28. Ncango, DM; Pohl, CH; وین وِک، پی ڈبلیو جے؛ کاک، JLF غیر سٹیرایڈیل اینٹی سوزش والی دوائیں (NSAIDs) خمیری پیتھوجینز کی نشوونما کو روکتی ہیں۔ افرو J. مائکروبیول۔ Res. 2011، 5، 1123–1125۔
29. فاضلیانہ، ایم. Nazaimoon, WMW; گو، ایچ ایف؛ Ostenson, CG Labisia pumila extract جسم کے وزن اور adipokines کو ovariectomized چوہوں میں کنٹرول کرتا ہے۔ Maturitas 2009, 62, 91-97.
30. بورین، ایس. عمان، پی. بونجور، جے پی؛ Rizzoli, R. عمر رسیدہ چوہوں میں طویل مدتی بیسفاسفونیٹ یا سلیکٹیو ایسٹروجن ریسیپٹر ماڈیولیٹر تھراپی کے بعد، قربت والے ٹیبیا کی ہڈیوں کی معدنی کثافت اور طاقت کی بازیافت، لیکن ہڈیوں کی ناسور کی ساخت نہیں ہے۔ ہڈی 2002، 30، 195-200۔
31. بورہ، بی. Dufresne, TE; Chmielewski, PA; مجموعی، جی جے؛ Prenger, MC; Phipps, RJ Risedronate trabecular architecture کو محفوظ رکھتا ہے اور ovariectomized minipigs کے vertebra میں ہڈیوں کی مضبوطی کو بڑھاتا ہے جیسا کہ تین جہتی مائکرو کمپیوٹیڈ ٹوموگرافی سے ماپا جاتا ہے۔ جے بون مائنر۔ Res. 2002، 17، 1139-1147۔
32. مولر، آر. حنان، ایم؛ سمتھ، SY؛ Bauss, F. وقفے وقفے سے ibandronate 16 ماہ کے علاج کے بعد lumbar spine میں ہڈیوں کے معیار اور ہڈیوں کی مضبوطی کو محفوظ رکھتا ہے۔ جے بون مائنر۔ Res. 2004، 19، 1787–1796۔
33. لین، NE؛ کمر، جے ایل؛ مجمدار، ایس. خان، ایم. لوٹز، جے؛ سٹیونز، RE؛ کلین، آر. فیلپس، کے وی مصنوعی کنجوگیٹڈ ایسٹروجن کے اثرات، اے (سینسٹن) ٹریبیکولر ہڈیوں کی ساخت اور اوورییکٹومائزڈ چوہا ماڈل میں طاقت پر۔ آسٹیوپوروسس انٹر۔ 2002، 13، 816-823۔
34. باسو، ایس. Michaelsson, K.; اولوفسن، ایچ۔ Johansson, S.; میلہس، ایچ. آکسیڈیٹیو تناؤ اور ہڈیوں کے معدنی کثافت کے درمیان ایسوسی ایشن۔ بائیو کیم۔ بائیوفیس۔ Res. کمیون 2001، 288، 275–279۔
35. میگیو، ڈی. باربانی، ایم. Pierandrei، M.؛ کرسٹینا پولیڈوری، ایم. Catani، M. میکوکی، پی. سینن، یو۔ پیسیفک، آر. Cherubini, A. عمر رسیدہ آسٹیوپوروٹک خواتین میں پلازما اینٹی آکسیڈنٹس میں نمایاں کمی: ایک کراس سیکشنل مطالعہ کے نتائج۔ جے کلین اینڈو کرائنول۔ میٹاب۔ 2003، 88، 1523–1527۔
36. مورٹن، ڈی جے؛ Barrett-Connor, EL; شنائیڈر، ڈی ایل وٹامن سی سپلیمنٹ کا استعمال اور پوسٹ مینوپاسل خواتین میں ہڈیوں کی معدنی کثافت۔ جے بون مائنر۔ Res. 2001، 16، 135-140۔
37. برڈ، آر پی؛ ڈریپر، مہذب ممالیہ خلیوں پر مالونالڈہائڈ اور ایسٹیلڈہائڈ کا HH اثر: گروتھ مورفولوجی، اور میکرو مالیکیولز کی ترکیب۔ J. ماحولیات صحت 1980، 6، 811-823۔
38. عبدلحلیم، MAK خرگوشوں میں خون کے سرخ خلیات کی ساخت اور خصوصیات پر ہائی کولیسٹرول کی خوراک کی وجہ سے آکسیڈیٹیو تناؤ کا ممکنہ اثر۔ افرو J. مائکروبیول۔ Res. 2010، 4، 836–843۔
39. Chaudiere, J.; Ferrari-Illiou, R. کیمیکل سے بائیو کیمیکل میکانزم تک انٹرا سیلولر اینٹی آکسیڈنٹس۔ فوڈ کیم۔ ٹاکسیکول۔ 1999، 37، 949-962۔







