زیتون کے تیل اور اس کے فینولک مرکبات کی وجہ سے ایپی جینیٹک تبدیلیاں: ایک منظم جائزہ

از راہ کرم رابطہ کریںoscar.xiao@wecistanche.comمزید معلومات کے لیے

خلاصہ:بہت سے مطالعات نے یہ ثابت کیا ہے کہ زیتون کا تیل (خاص طور پر اضافی کنواری زیتون کا تیل: EVOO) فینولک مرکبات اینٹی کینسر، اینٹی سوزش، اینٹی ایجنگ اور نیورو پروٹیکٹو سرگرمیوں کے ساتھ بائیو ایکٹیو مالیکیولز ہیں۔ ان اثرات کو حال ہی میں ان مرکبات کی ایپی جینیٹک ترمیمات جیسے miRNA اظہار، ڈی این اے میتھیلیشن اور ہسٹون میں ترمیم کرنے کی صلاحیت سے منسوب کیا گیا ہے۔ اس مطالعے میں، ہم PRISMA کے بیانات کے بعد، EVOO اور اس کے ذریعے کی گئی ایپی جینیٹک تبدیلیوں کا منظم طریقے سے جائزہ اور تبادلہ خیال کرتے ہیں۔ مختلف تجرباتی نظاموں میں فینول۔ "PubMed"، "Web of Science" اور "Scopus" کے ذریعے لٹریچر کی تلاش کے اختتام پر، 43 مطالعات کا انتخاب کیا گیا۔ ان میں سے 22 مطالعات میں miRNAs، 15 DNA میتھیلیشن پر، اور 13 ہسٹون میں ترمیم کے بارے میں ڈیٹا کی اطلاع دی گئی۔ زیتون کے تیل کے فینول کی نمائش کے جواب میں مشاہدہ کی گئی زیادہ تر "ایپی جینومک" تبدیلیاں میکانکی طور پر کینسر سے بچاؤ اور سوزش کے اثرات سے وابستہ تھیں۔ بہت سے معاملات میں، زیتون کے تیل کے لیے ڈی این اے میتھیلیشن کے حوالے سے ایپی جینیٹک اثرات کا مظاہرہ کیا گیا لیکن فینول کی موجودگی یا نہ ہونے کے حوالے سے کوئی اشارہ نہیں دیا گیا۔ مجموعی طور پر، موجودہ منظم جائزے کے نتائج زیتون کے تیل کے صحت پر اثرات کے پیچھے ایپی جینیٹک میکانزم کو سمجھنے کے لیے اہم مضمرات ہوسکتے ہیں۔ تاہم، عام طور پر ایپی جینیٹکس میں ترمیم اور ای وی او او صحت سے متعلق اثرات کے درمیان کارگر تعلقات کے لیے کوئی براہ راست ثبوت فراہم نہیں کیا گیا۔ ای وی او او اور اس کے فینولک مرکبات کے ذریعہ ایپی جینیٹکس ترمیم کے حقیقی جسمانی نتائج کو ظاہر کرنے کے لئے مزید مطالعات ضروری ہیں۔

مطلوبہ الفاظ:اضافی کنواری زیتون کا تیل؛ secoiridoids؛ فینولک مرکبات؛ ایپی جینیٹکس؛ ڈی این اے میتھیلیشن؛ ہسٹون ترمیم؛ miRNA انسداد کینسر؛ غیر سوزشی

مزید جاننے کے لیے براہ کرم یہاں کلک کریں۔

1. تعارف

1960 کی دہائی کے اوائل سے پہلے شواہد سے جو بحیرہ روم کے علاقے میں رہنے والے لوگوں کی کھانے کی عادات اور کم قلبی اموات کے درمیان تعلق کا مشورہ دیتے ہیں، بحیرہ روم کی خوراک (MD) ان گنت مطالعات کا موضوع رہی ہے جس کا مقصد مختلف دائمی بیماریوں کے خلاف اس کی ممکنہ حفاظتی خصوصیات کی تحقیقات کرنا ہے۔ - انحطاطی بیماریاں [1]۔ زیادہ تر وبائی امراض کے امکانی ہم آہنگی کے مطالعے نے MD کی پابندی اور قلبی بیماری کے خطرے، قسم 2 ذیابیطس، کینسر، اور علمی عوارض کے درمیان الٹا تعلق کی اطلاع دی ہے [2]۔cistanche فوائدمزید برآں، MD کی پابندی الٹا ہر وجہ سے ہونے والی اموات کے خطرے سے منسلک تھی، خاص طور پر بحیرہ روم کے علاقوں میں [3]۔ اسی کے مطابق، 2013 میں، UNESCO نے MD کو غیر محسوس ثقافتی ہیومینٹی کی نمائندہ فہرست میں لکھا (https://ich.unesco.org/en/RL/mediterranean-diet-00884)۔ دیگر غذائی خصوصیات کے علاوہ، MD کی اہم خصوصیت یہ ہے کہ زیتون کا تیل بنیادی لپڈ کا ذریعہ ہے۔ جیسا کہ بہت سے تفتیش کاروں نے تجویز کیا ہے، زیادہ تر MD ہیومن ہیلتھ پرو موشن اثرات کو زیتون کے تیل سے منسوب کیا جا سکتا ہے، خاص طور پر "ایکسٹرا ورجن زیتون کے تیل" (EVOO) سے۔ پچھلے کچھ سالوں میں، EVOO کی صحت کی خصوصیات کی گہرائی سے چھان بین کی گئی ہے اور بہت سے بہترین جائزوں میں اس کا مؤثر طریقے سے خلاصہ کیا گیا ہے[4-6]۔

EVOO کی صحت کو فروغ دینے والی خصوصیات کو اس کی مخصوص کیمیائی ساخت سے منسلک کیا گیا ہے [7]۔ EVOO دونوں بڑے (تیل کے کل وزن کا 98 فیصد سے زیادہ) اور معمولی اجزاء پر مشتمل ہے۔ اہم اجزاء میں ٹرائگلیسرائڈز اور دیگر فیٹی ایسڈ مشتقات شامل ہیں جن میں بنیادی طور پر مونو سیچوریٹڈ فیٹی ایسڈ ہوتے ہیں، خاص طور پر اولیک ایسڈ (کل فیٹی ایسڈ مواد کا 83 فیصد تک)۔ معمولی اجزاء کی نمائندگی 230 سے ​​زیادہ مختلف کیمیکلز کے ذریعے کی جاتی ہے جن میں الیفاٹک اور ٹریٹرپینک الکوحل، فائٹوسٹیرولز، ہائیڈرو کاربن، ٹوکوفیرولز، غیر مستحکم مرکبات اور پولیفینول شامل ہیں۔ اگرچہ ماضی میں EVOO کے صحت کے اثرات کو بنیادی طور پر اولیک ایسڈ سے منسوب کیا گیا ہے، حال ہی میں فینولک مرکبات پر توجہ دی گئی ہے [9]۔ بائیو ایکٹیو مرکبات کے اس طبقے میں فینولک ایسڈز، فینولک الکوحل، فلیوونائڈز، سیکوائرائیڈز اور لگنان شامل ہیں۔ phe-nolic الکوحل میں سے، hydroxytyrosol (3,4-dihydroxyphenylethanol: 3,4-DHPEA) اور ٹائروسول (p-hydroxyphenylethanol: p-HPEA) خاص طور پر دلچسپی رکھتے ہیں کیونکہ یہ بہت زیادہ اور خصوصی طور پر موجود ہیں۔ EVOO۔وہ دونوں آزاد مرکبات کے طور پر موجود ہو سکتے ہیں اور یا تو ایلینولک ایسڈ (EA) یا اس کے ڈائلڈ ہائیڈک فارم (EDA) سے منسلک ہو سکتے ہیں، جس سے درج ذیل سیکوائرائڈائڈ ڈیریویٹوز کو جنم ملتا ہے: 3،4-DHPEA-EA (oleuropein aglycon)، p-HPEA-EA (ligstroside aglycon)، 3۔ مرکبات نے Vivo سسٹمز میں وٹرو النڈ دونوں میں بہت سی اضافی حیاتیاتی سرگرمیاں دکھائی ہیں۔ درحقیقت، کئی کنٹرول شدہ انسانی مداخلت کی آزمائشوں نے اب اس بات کی تصدیق کی ہے کہ بھرپور پولیفینول ای وی او او دل کے خطرے کے کچھ عوامل کو بہتر بنانے اور قلبی واقعات کو روکنے کے قابل ہے [12]۔cistanche کولیسٹرولاس کے باوجود، بہت سے مطالعات نے واضح طور پر یہ ظاہر کیا ہے کہ EVOO فینولک مرکبات بہت سے دوسرے حیاتیاتی افعال کے مالک ہیں جو ان کے انسداد کینسر [11,13]، اینٹی سوزش، اینٹی عمر، اور نیورو پروٹیکٹو سرگرمیوں [14,15] سے منسلک ہوسکتے ہیں۔ ان میں سے زیادہ تر اثرات فینول کی سیل سگنلنگ کے راستوں کو کنٹرول کرنے، ٹرانسکرپشن عوامل کی سرگرمی کو ماڈیول کرنے اور جین کے اظہار کو متاثر کرنے کی صلاحیت سے متعلق ہیں۔ EVOO اور اس کے فینولک مرکبات کی نیوٹریجینومک خصوصیات کا حال ہی میں جائزہ لیا گیا ہے [16]۔

Cistanche بڑھاپے کو روک سکتا ہے۔

ایپی جینیٹکس کی تعریف الٹ جانے والی وراثتی تبدیلیوں کے طور پر کی گئی ہے، جو ڈی این اے کی ترتیب میں تبدیلی کے بغیر رونما ہوتی ہیں، جو جین کے اظہار کو منظم کرنے کے قابل ہوتی ہیں۔ اب تک تین اہم متعلقہ ایپیج نیٹک میکانزم بیان کیے جا چکے ہیں: ڈی این اے میتھیلیشن، ہسٹون ترمیم (ایسٹیلیشن اور میتھیلیشن)، اور غیر کوڈنگ mi-croRNAs (miRNAs) کے ذریعے پوسٹ ٹرانسکرپشنل جین ریگولیشن [17]۔ "ایپیجینوم" کا درست ضابطہ اس بات کا تعین کرتا ہے کہ آیا، کب، اور کہاں ایک جین کو خاموش یا اظہار کیا گیا ہے۔ ایپی جینیٹک میکانزم میں خلل کا تعلق دائمی بیماریوں سے منسلک ہے، خاص طور پر کینسر [18]۔ مثال کے طور پر، miRNAs آنکوجینز اور ٹیومر کو دبانے والے دونوں کے طور پر کام کر سکتے ہیں، ٹارگٹ جینز کی روک تھام پر منحصر ہے [19]۔ بہت دلچسپ، الٹنے کے قابل ہونے کی وجہ سے، یہ عمل غذائی اور ماحولیاتی عوامل سے متاثر ہو سکتے ہیں۔ درحقیقت، غذائیت کی وجہ سے ایپی جینیٹک تغیر پوری زندگی کے دوران ہو سکتا ہے [20]۔

پچھلے کچھ سالوں میں، بہت سے مطالعات نے اس بات کی تحقیقات کی ہیں کہ آیا EVOO اور اس کے فینول کی بایو ایکٹیویٹی ایپی جینیٹک میکانزم کے ذریعے ثالثی کی جا سکتی ہے۔ تاہم، ابھی تک، miRNA اظہار، DNA میتھیلیشن کی ماڈیولیشن، اور ہسٹون میں ترمیم پر ان مرکبات کے ممکنہ اثرات پر توجہ مرکوز کرتے ہوئے کوئی منظم نظرثانی شائع نہیں کی گئی ہے۔ لہذا، اس مطالعے کا مقصد تمام لٹریچر ڈیٹا کا منظم طریقے سے جائزہ لینا اور اس پر تبادلہ خیال کرنا تھا جس میں ایپی جینیٹک اثرات ای وی او او اور اس کے فینولک مرکبات دونوں کے ذریعہ ظاہر کیے گئے ہیں۔ ہمارے نتائج زیتون کے تیل کے صحت پر اثرات کے پیچھے ایپی جینیٹک میکانزم کو سمجھنے کے لیے اہم مضمرات ہوسکتے ہیں۔ 2. نتائج اور بحث

PubMed (n=88)، ویب آف سائنس (n=69) اور Scopus(n=93) ڈیٹا بیس کے ذریعے اور ڈپلیکیٹ (n=10) کو ہٹانے کے بعد بنیادی ادبی تحقیق سے عنوان اور تجریدی نظر ثانی کے لیے 140 ریکارڈز کی نشاندہی کی گئی تھی (شکل 1)۔ ان میں سے، 66 آئٹمز کو مندرجہ ذیل وجوہات کی بنا پر خارج کر دیا گیا: 48 پر نظرثانی کے مضامین تھے، 15 آئٹمز کو دیگر iridoid مرکبات سمجھا جاتا تھا جیسے کہ جینیپین، کیٹلپول اور جینیپوسائیڈ زیتون کے تیل میں موجود نہیں تھے، ایک مضمون میں صرف "سیلیکو" ڈیٹا کی اطلاع دی گئی تھی، ایک کتاب تھی۔ ، اور ایک کا سراغ نہیں لگایا گیا تھا۔ 74 باقی مضامین کے مکمل متن پر نظر ثانی کے نتیجے میں مزید 33 اشیاء کو مندرجہ ذیل طور پر خارج کر دیا گیا: 17 زیتون کے تیل کو سالوینٹ یا کنٹرول کے طور پر استعمال کیا گیا، اور 16 آئٹمز میں زیتون کے تیل یا ایپی جینیٹک اثرات سے متعلق ڈیٹا نہیں دکھایا گیا۔ اس کے علاوہ، twvo مزید مضامین، جو پچھلی اشیاء کے حوالہ جات کی فہرست میں پائے گئے، شامل کیے گئے تھے۔ لہذا، انتخاب کے عمل کے اختتام پر، 43 مطالعات کو منظم جائزہ میں شامل کیا گیا تھا (شکل 1)۔ ان میں سے، 18 نے miRNAs [21-38]، ڈی این اے میتھیلیشن [39-48] پر 10، ہسٹون ترمیم [49-57]] پر 9، ہسٹون ترمیم/DNA میتھیلیشن [58 پر ڈیٹا رپورٹ کیا ہے۔ miRNAs/DNA میتھیلیشن [60,61] پر 59],2 miRNA/histone modification [62] اور miRNA/histone modification/DNA methylation [63](شکل 1) پر ایک۔

2.1.miRNAs

زیتون کے تیل اور اس کے فینولک مرکبات کے miRNA اظہار پر اثرات کی تحقیقات کرنے والے 22 منتخب مطالعات کی خصوصیات ٹیبل S1 میں دکھائی گئی ہیں۔ سولہ مطالعات نے مختلف سیل سسٹمز پر وٹرو میں ڈیٹا کی اطلاع دی[21,22,24,26-28,30-32,34-38,60,63],9 مطالعات نے جانوروں کے ماڈلز پر نتائج ظاہر کیے[23 24,29,30,33,60-62] اور 2 مطالعات نے انسانی مداخلت کی آزمائشوں کے نتائج کی اطلاع دی [24,25]۔ سات مطالعات میں hydroxytyrosol [24,27,28,33,35,36,62] کے اثرات کی چھان بین کی گئی، 5 مضامین میں oleuropein کے اعداد و شمار کی اطلاع دی گئی ہے [26,28,31,34,5 مطالعہ زیتون کے تیل کے ساتھ کیے گئے تھے [23,25] 29,60,61]اور اولیا یوروپیا کے پتے [21,22] سے حاصل کردہ فینولک نچوڑ کے ساتھ 2 مطالعات۔ دو تحقیقات نے oleoresin [37,63] پر اعداد و شمار کی اطلاع دی اور ہر ایک مطالعہ نے hydroxytyrosol-oleate [32]، hydroxytyrosol-3-O-sulphate [38] اور oleocanthal [37] کے اثر کی تحقیقات کی۔

2.1.1 کینسر مخالف اثرات

زیتون کے تیل اور اس کے فینول کی کینسر مخالف خصوصیات کی کئی وٹرو اور ویوو سسٹمز میں وسیع پیمانے پر تحقیق کی گئی ہے۔ Secoiridoids اور ان کے مشتقات نے مختلف ٹیومر خلیوں پر انسداد پھیلاؤ، پرو اپوپٹوٹک اور پرو تفریق کی سرگرمیاں دکھائی ہیں۔ ان اثرات میں شامل ایک سالماتی طریقہ کار miRNAs اظہار کی ماڈلن ہوسکتا ہے۔ درحقیقت، "oncomirs" وہ نام ہے جو سرطان پیدا کرنے والے عمل میں ایک کردار کے حامل miRNAs سے منسوب ہے، جو ٹیومر کو دبانے والے اور آنکوجینز دونوں کے طور پر کام کر سکتا ہے [19]اس منظم جائزے میں، ہم نے پایا کہ 22 منتخب مطالعات میں سے، 10 مضامین آپس میں جڑے ہوئے ہیں۔ مختلف ایم آر این اے کا اوپر یا نیچے کا اظہار فینول کی کینسر مخالف سرگرمی کے ساتھ۔ miRNAs پر phenols، Olea europaea (OLE) کے پتوں سے حاصل کردہ ایک فینولک عرق کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا تھا۔ یہ فینولک عرق، جو خاص طور پر oleuropein سے بھرپور تھا، کو glioblastoma (GBM) خلیوں پر آزمایا گیا تھا [21]۔cistanche deserticola کے ضمنی اثراتاسکرین کیے گئے 40 miRNAs میں سے، کئی کو OLE کے ذریعے GBM سیل لائنوں [21] اور بنیادی اسٹیم نما GBM سیلز [22] پر یا تو اوپر یا نیچے ریگولیٹ کرنے کا مظاہرہ کیا گیا۔ دلچسپ بات یہ ہے کہ سب سے زیادہ استعمال ہونے والی سائٹوسٹیٹک دوا Temozolomide (TMZ) کے ساتھ خلیات کا مشترکہ علاج سیل کے پھیلاؤ میں کمی اور apoptosis کی شمولیت پر OLE کے ساتھ ہم آہنگی کا اثر پیدا کرتا ہے۔ اس کے علاوہ، شریک علاج نے miRNAs کے سبسیٹ کے ایکسپریشن پروفائل کو تبدیل کردیا۔ سیل سائیکل کی ترقی اور اپوپٹوسس کے راستوں سے متعلق امتیازی طور پر اظہار کردہ miRNA ٹارگٹ جینوں کی شناخت کے لئے، بائیو انفارمیٹکس تجزیہ استعمال کیا گیا تھا [21]۔ ان میں سے کچھ اہم جین، جیسے TP53 (ٹیومر پروٹین p53)، OCT-4 (POU کلاس 5 ہومیو باکس 1)، SOX2 (SRY (جنس کا تعین کرنے والا علاقہ Y) باکس 2)، BCL2 (B-cell CLL/lymphoma 2) اور c-myc کو تجرباتی طور پر دکھایا گیا تھا کہ وہ GBM اسٹیم نما خلیات میں OLE کے ذریعے نیچے ریگولیٹ ہوتے ہیں[2]۔ اسی تجرباتی نظام کو ایم آر این اے اظہار [34] پر خالص اولیورپین کے اثر کی تحقیقات کے لئے استعمال کیا گیا تھا۔ اثرات OLE کے مقابلے میں کچھ وقت مختلف تھے، خاص طور پر let{23}}d کے اظہار کے حوالے سے جو OLE سے نمایاں طور پر متاثر نہیں ہوا تھا۔<2-fold), while="" it="" was="" dramatically="" increased="" by="" oleuropein="" (125="" and="" 263-fold="" at="" 277.5="" and="" 555="" um="" oleuropein="" concentrations,="" respectively)="" [34].="" some="" differences="" were="" also="" observed="" when="" the="" cells="" were="" co-exposed="" to="" oleuropein="" together="" with="" tmz[34].="" these="" results="" suggest="" that="" the="" complex="" olive="" leaves="" phenolic="" extract="" contains,="" in="" addition="" to="" oleuropein,="" other="" anticancer="" compounds="" acting="" with="" different="" molecular="" mechanisms.="" further="" investigations="" are="" necessary="" to="" clarify="" this="" point,="" since="" no="" other="" studies="" have="" reported="" the="" effect="" of="" olive="" oil="" phenolic="" extracts="" on="" mirna="">

اس کے بجائے، miRNA اظہار کی ماڈیولیشن کے سلسلے میں oleuropein کی کینسر مخالف خصوصیات کا HNEl اور HONEl nasopharyngeal carcinoma (NPC) خلیات[26]، Caov3 اور Skov3 رحم کے کینسر کے خلیات[30] اور MCF{{5} پر دونوں میں وٹرو میں تحقیق کی گئی۔ }} چھاتی کے کینسر کے خلیات [32]، اور زینوگرافٹ ماؤس ماڈلز پر vivo میں[26,30]۔ یہ پایا گیا کہ اولیورپین ایم آر این اے ایکسپریشنز [26,30] کی ماڈیولیشن کے ذریعے وٹرو اور ویوو دونوں میں NPC اور رحم کے کینسر کے خلیوں میں تابکاری کی حساسیت کو فروغ دینے کے قابل ہے۔ NPC خلیوں میں، oleuropein نے miRNA-519d کی اپ گریجولیشن کے ذریعے DNA ڈیمیج ریگولیٹڈ پروٹین (PDRG1) اظہار کو کم کیا۔ اس اثر کو ہائپوکسیا-انڈیکیبل فیکٹر-1a (HIFla) اظہار کی کمی اور miRNA-519d [26]ڈمبگرنتی کینسر کے خلیات اولیوروپین میں، miRNA کے اپ گریجولیشن کے ذریعے اس کے پابند ہونے کی روک تھام کے ذریعے ثالثی کی گئی تھی۔ -299، دبائے ہوئے ہیپرانیز (HPSE1) اظہار جو ان خلیوں میں تابکاری کی حساسیت میں اضافہ کا باعث بنتا ہے [30]۔ دوسری طرف، MCF7 چھاتی کے کینسر کے خلیوں میں، oleuropein نے ماسٹر "oncomirs" miRNA-21 اور miRNA-155 [31] کے اظہار کو دبایا۔ یہ اثر عملداری اور ہجرت میں کمی، اپوپٹوسس کی شمولیت، اور کینسر کے خلیوں میں کچھ جینوں کے mRNA کی اپ گریجشن سے وابستہ تھا۔ تاہم، miRNA اثرات اور اس سیلولر سسٹم میں oleuropein کی کینسر مخالف سرگرمی کے درمیان کسی وجہ کی تحقیقات نہیں کی گئیں [31]۔ oleuropein سے مختلف، ساختی طور پر ملتے جلتے مالیکیول oleacein نے ٹیومر کو دبانے والے miRNAs کے اپ گریجولیشن کو متحرک کیا، بشمول miRNA-29b اور miRNA-22 انسانی ایک سے زیادہ مائیلوما (MM) سیل لائن JJN3 [63] میں۔ یہ اثر ایم ایم خلیوں پر کینسر مخالف اثرات (پھیلاؤ اور سیل سائیکل کی روک تھام، اپوپٹوسس کی شمولیت) اور آنکوجینک ٹرانسکرپشن عنصر Sp1 کی روک تھام سے وابستہ تھا۔ اس کے باوجود، اس معاملے میں بھی، ان اثرات کے درمیان وجہ کی تحقیقات نہیں کی گئی [63]۔ اس مقابلے میں خاص مطابقت کا ایک اور مرکب ہائیڈروکسی ٹائروسول ہے، جو ای وی او او کا سب سے اہم اور سب سے زیادہ تحقیق شدہ فینولک جزو ہے۔cistanche dosage redditیہ oleuropein اور oleacein کی سالماتی ساخت میں موجود ہے، اور یہ ان secoiridoids کے ہاضمے کے دوران خارج ہوتا ہے۔ یہ نوٹ کرنا دلچسپ ہے کہ کسی بھی مطالعے نے اس بات کی تحقیقات نہیں کی ہیں کہ آیا کینسر کے خلیوں پر ہائیڈروکسی ٹائروسول کی کیموپریوینٹو خصوصیات miRNA اظہار کی تبدیلی کے ساتھ منسلک اور/یا ثالثی کی جا سکتی ہیں۔

تین مطالعات نے کینسر مخالف اثرات کے سلسلے میں miRNA اظہار پر EVOO کے اثر کی تحقیقات کی ہیں۔ CaCo-2 بڑی آنت کے کارسنوما خلیوں پر وٹرو تجربے سے، EVOO سے حاصل کردہ ایک فینولک نچوڑ پایا گیا جو پھیلاؤ کو روکتا ہے اور ٹیومر کو دبانے والے جین ٹائپ 1 کینابینوئڈ ریسیپٹر (CB1) کے اظہار کو اپ گریڈ کرتا ہے[60]یہ اثر تھا۔ EVOO کے ساتھ علاج کیے گئے چوہوں پر vivo میں تصدیق کی گئی (جس میں فینول کی ایک خاص مقدار شامل ہے: 320 mg/Kg) دونوں ایک خوراک کے ساتھ اور 10- دن کی انتظامیہ کے ساتھ۔ پے در پے، EVOO کا تجربہ کیا گیا تاکہ اس کے اثر کو ظاہر کرنے کے لیے چار miRNAs کے اظہار پر ظاہر کیا جا سکے جو کہ بڑی آنت کے کینسر کے روگجنن میں شامل ہیں۔ ان میں سے دو کا اظہار، miRNA23a اور miRNA30la، EVOO کی ایک یا 10- دن کی انتظامیہ کے بعد منتخب طور پر کم پایا گیا [60]۔ چونکہ چوہوں کے کنٹرول گروپ نے پانی حاصل کیا، ہم نہیں جانتے کہ EVOO کا کون سا جزو مشاہدہ کیے گئے اثرات کے لیے ذمہ دار تھا۔ اسی طرح، dimethylhydrazine (DMH) کے زیر علاج چوہوں کے بڑی آنت کے سرطان پیدا کرنے والے ماڈل میں، EVOO کا ایک واضح انسداد کینسر اثر ٹیومر کے واقعات، کثرت، اور حجم [61] کے لحاظ سے پایا گیا۔ یہ اثرات سوزش کے نشانات میں کمی (نیچے دیکھیں) اور اپوپٹوٹک مارکر (کیسپیس-3 اور کیسپیس-9) میں اضافے سے وابستہ تھے۔ ایک ہی وقت میں، "ٹیومر دبانے والے" miRNA-143 اور miRNA-145 کا ایک اپ گریجولیشن ان کے فروغ دینے والے خطوں کے بھاری ہائپر میتھیلیشن کے ساتھ دیکھا گیا تھا [61]۔ تاہم، کسی بھی وجہ کا مظاہرہ نہیں کیا گیا اور فینول کے ذریعہ ادا کردہ کردار کے بارے میں کوئی نتیجہ اخذ نہیں کیا جاسکتا ہے کیونکہ کوئی مناسب کنٹرول دستیاب نہیں تھا اور ای وی او میں موجود فینول کے مواد کے بارے میں کوئی ڈیٹا فراہم نہیں کیا گیا تھا [61]۔ سی این آر ایل جین پروموٹر پر ای وی او کے ذریعہ ڈی این اے میتھیلیشن تبدیلیوں پر اس مضمون کے مزید مشاہدات ذیل میں زیر بحث آئیں گے۔ آخر میں، ایک انسانی آزمائش کا مقصد صحت مند مضامین اور میٹابولک سنڈروم (MetS) کے مریضوں کے miRNome اور ٹرانسکرپٹوم پر EVOO کے اثرات کی تحقیقات کرنا تھا [25]۔ مضامین کو زبانی طور پر یا تو بھرپور یا کم پولیفینول EVOO کی ایک خوراک کا سامنا کرنا پڑا اور 4 گھنٹے کے بعد پیریفرل بلڈ مونو نیوکلیئر سیلز (PBMCs) پر جین ایکسپریشن مائیکرو رے کیے گئے۔ سوزش (نیچے ملاحظہ کریں) اور کینسر میں شامل جینز کے لیے ایکسپریشن کوڈنگ (DNA ڈیمیج ریسپانس سسٹم کی اپ گریجشن، سیل اور کینسر کے پھیلاؤ میں شامل مختلف راستوں کو دبانا جیسے ERK/MAPK، CXCR4، HGF/EGF، HIFla سگنلنگ جھرنوں)۔ کینسر کی پریشانی میں شامل کچھ جینوں کی تصدیق RTqPCR سے ہوئی جن میں retinoid X receptor-beta، heat shock70 kDa پروٹین 1A، cyclin K، اور دیگر شامل ہیں [25]۔ ایک ہی وقت میں، بھرپور پولیفینول EVOO کی مقدار نے دو آنکوجینک miRNAs (miRNA-19a-3p اور miR-181b-5p) کے اظہار کو کم کیا اور اظہار کو اپ گریڈ کیا۔ ٹیومر دبانے والے miRNA (miR-23b-3p)۔ بہت اہم بات یہ ہے کہ ان میں سے زیادہ تر تبدیلیاں کم پولیفینول ای وی او او چیلنج کے بعد نہیں دیکھی گئیں اور میٹ ایس کے مریضوں میں کم واضح تھیں۔ اگرچہ بہت دلچسپ، اس مطالعہ نے بنیادی طور پر miRNA کی کثرت، جین کے اظہار اور کینسر مخالف سرگرمیوں کے درمیان تعلق ظاہر کیا۔cistanche اقتباس کے فوائدان اثرات کے درمیان کارآمد تعلقات کو ظاہر کرنے کے لیے مزید مطالعات ضروری ہیں۔ 2.1.2 سوزش کے اثرات

جیسا کہ اوپر بتایا گیا ہے، کینسر مخالف خصوصیات کے علاوہ دو مطالعات، ایک چوہوں پر [61] اور ایک انسانوں پر[25] یہ ظاہر کرتی ہے کہ EVOO اینٹی سوزش خصوصیات کے ساتھ miRNAs اور جینز کو ماڈیول کرنے کے قابل تھا۔ DMH سے علاج شدہ چوہوں میں، EVOO انٹیک نے ٹرانسکرپشن فیکٹر NF-kB اور اس کے ہدف والے جین VEGF اور MMP کے mRNA اظہار کو کم کر دیا 9}} رسیپٹر سے وابستہ کناز 3، جو NF-KB اور IL-8 سگنلنگ میں ضابطے میں شامل ہے، اور سوزش مخالف miRNA-23b-3p miRNAs کو اپ ریگولیٹ کیا ہے[ 25]۔

ہائیڈرو آکسی ٹائروسول اور اولیورپین کے سوزش کے اثر کی تحقیقات وٹرو میں مورائن میکروفیجز RAW264.7 کی سیل لائن میں اور انسانی گرینولوسائٹس/مونوسائٹس [28] میں کی گئیں۔ کم، غذائیت کے لحاظ سے متعلقہ ارتکاز (10 uM) پر، ان مرکبات نے پی ایم اے کی حوصلہ افزائی سے گرینولوسائٹس اور مونوسائٹس کی ایکٹیویشن کو روک دیا۔ murine macrophages میں، hydroxytyrosol اور oleuropein نے LPS حوصلہ افزائی نائٹریٹس اور PGE کی پیداوار کو کم کیا، جبکہ LPS نے miRNA-146a کے ریگولیشن کو دبایا اور NRf2((erythroid-dirived 2)-like 2 کی حوصلہ افزائی جوہری نقل مکانی کو دبایا۔ ] عام طور پر، hydroxytyrosol oleuropein سے زیادہ فعال تھا۔ ایک اور ان وٹرو سسٹم میں، ہائیڈرو آکسی ٹائروسول TNF- [35] کے ذریعے پیدا ہونے والی اڈیپوسائٹس کی سوزش کا مقابلہ کرنے کے قابل تھا۔ دیگر اثرات کے علاوہ، hydroxytyrosol نے TNF-حوصلہ افزائی ROS کی پیداوار، NF-KB ایکٹیویشن اور MCP-1 CXCL-10,M-CSF,IL-1, VEGF,COX{{21} کی اپ گریجشن کو روکا۔ }} اور MMP-2 دونوں ایم آر این اے اور پروٹین کی سطح پر سمپسن-گولابی-بہمل سنڈروم ایڈیپوسائٹس [35]۔ متوازی طور پر، hydroxytyrosol نے miRNA-34a اور miRNA-155 کی سطحوں کے TNF کی حوصلہ افزائی کے ساتھ ساتھ خلیات اور excosomes دونوں میں let-7سی سطحوں کے ڈاؤن ریگولیشن کو روکا۔ بنیادی طور پر، انسانی اڈیپوسائٹس کے ایک ہی تجرباتی نظام میں اسی طرح کے اثرات oleocanthal اور olea-cein [37] کے لیے بھی دکھائے گئے ہیں۔ مزید برآں، لیٹ-7 miRNA کی اپ گریجولیشن انسانی نال اور ریٹنا کے اینڈوتھیلیل سیلز میں دیکھی گئی جو IL-1 کے ساتھ hydroxytyrosol{{35}O-sulphate کے ساتھ علاج کے بعد حوصلہ افزائی کرتی ہیں، جو اہم ہائیڈرو آکسی ٹائروسول پلازما میٹابولائٹ ہے [38]۔ اس سیلولر سسٹم میں، ہائیڈرو آکسی ٹائروسول-3-O-سلفیٹ نے IL-1 کی حوصلہ افزائی کی اینڈوتھیلیل سے میسینچیمل منتقلی کو بھی روکا [38]۔

2.1.3.دیگر اثرات

زیتون کے تیل کے فینولک مرکبات کی دیگر حیاتیاتی سرگرمیوں کے سلسلے میں miRNA کے اظہار کو ماڈیول کرنے کی صلاحیت کی تحقیق کی گئی ہے (ٹیبل S1)۔ ماڈیولیشن miRNA کے ذریعہ ثالثی شدہ ہائیڈروکسی ٹائروسول کے ممکنہ اینٹی اوسٹیو ارتھرائٹس اثر کو انسانی بنیادی اور C-28/I2 کونڈروسائٹس [27] دونوں پر رپورٹ کیا گیا تھا۔ اس فینول نے miRNA-9 کے اپریگولیشن کو روکا اور HzOz کے ساتھ chondrocytes کے علاج کے ذریعہ SIRT-1 کی کمی کو روکا۔ بہت اہم بات یہ ہے کہ، miRNA-9 اظہار کی اپ گریجشن اور SIRT-1 کی تنزلی کے درمیان کارآمد تعلق کو خاموشی کے تجربات اور luciferase پر مبنی جین رپورٹر پرکھ دونوں سے واضح طور پر ظاہر کیا گیا تھا [27]۔ ان تجربات سے یہ نتیجہ اخذ کرنے کی اجازت ملی کہ کونڈروسائٹس اور اوسٹیو ارتھرائٹس سے متعلقہ اثرات میں آکسیڈا ٹائیو تناؤ کے نقصان دہ اثرات کے خلاف ہائیڈرو آکسی ٹائروسول کی حفاظتی کارروائی ایم آر این اے کے ذریعے ثالثی کی گئی تھی (اور آکسیڈیٹیو تناؤ) miRNA-9 اظہار پر پروموٹر میتھیلیشن [42] میں مداخلت کرکے ثالثی کی گئی تھی۔ بنیادی طور پر، یہ علاج miRNA-9 اظہار کو پروموٹر میتھیلیشن کی حیثیت پر مخالف اثرات ڈال کر، آکسیڈیٹیو تناؤ کو کم کرنے اور HT کو بچانے اور CpG جزیروں کے ہائپرمیتھیلیشن کو برقرار رکھنے کے ذریعے ماڈیول کرتے ہیں[42]۔ اگرچہ بہت دلچسپ ہے، ہائڈروکسی ٹائروسول (100 uM) کی فارماسولوجیکل خوراکوں کے ساتھ حاصل کردہ یہ اعداد و شمار اس بات کا اندازہ لگانا مشکل بنا دیتے ہیں کہ غذا کے ساتھ اس مرکب کا روزانہ استعمال آسٹیوآرتھرائٹس کی روک تھام میں کوئی جسمانی مطابقت رکھتا ہے۔ ایک اینٹی آکسیڈینٹ اثر، ROS اور malondialdehyde کی پیداوار دونوں میں کمی کے لحاظ سے، انسانی keratinocytes [32] پر زیادہ جسمانی ارتکاز (5 uM) پر ہائیڈروکسی ٹائروسول-اولیٹ کے لیے دوبارہ پورٹ کیا گیا ہے۔ یہ اثرات miRNA-34a، miRNA-21 اور miRNA-29a [32] کے اپ گریجولیشن سے وابستہ تھے۔ آیا ان دو مظاہر کے درمیان کوئی سببی تعلق موجود ہے یا نہیں اس کا تعین ہونا باقی ہے۔

عمر رسیدہ ماؤس ماڈل میں، یہ پایا گیا کہ فینول سے بھرپور EVOO (H-EVOO: 718.8 mg/kg) موٹر کوآرڈینیشن، اسپا ٹائل میموری اور اضطراب سے متعلق رویے میں عمر سے متعلق کمی کا مقابلہ کرنے کے قابل تھا [29]۔ ان طرز عمل میں تبدیلیوں کا موازنہ چوہوں کو کم فینول ایوو (L-EVOO: 9.3 mg/kg) والی خوراک سے کیا گیا اور دماغ میں جین اور مائیکرو آر این اے اظہار میں تبدیلیوں سے وابستہ تھے۔ خاص طور پر H-EVOO عمر بڑھنے کے دوران پائے جانے والے کچھ دماغی جینوں کی کمی کو روکنے کے قابل تھا۔ ان میں، Synaptic پلاسٹکٹی کے ساتھ اور موٹر اور علمی رویے کے ساتھ منسلک جینوں کا ایک اہم اپ گریجولیشن بشمول Notch1، BMPs (ہڈیوں کی شکل دینے والے پروٹین)، NGFR (اعصابی نشوونما کا عنصر ریسیپٹر)، GLP1R (گلوکاگن نما پیپٹائڈ-1رسیپٹر) اور CRTC3 (CREB- ریگولیٹڈ ٹرانسکرپشن coactivator3) کا مشاہدہ کیا گیا [29]۔ ایک ہی وقت میں، H-EVOO نے 1203 میں سے 63 miRNAs کو کم کر دیا، جس کے نتیجے میں چوہوں کی کارٹیکس miRNA ایکسپریشن پروفائلز جوان چوہوں میں مشاہدہ کیے گئے جیسا ہی ہوتا ہے [29]۔ چوہوں پر ایک اور تحقیق سے یہ بات سامنے آئی ہے کہ ابتدائی حمل کے دوران مختلف قسم کے فیٹی ایسڈز کا استعمال زچگی اور اولاد دونوں میں miRNA اظہار کو متاثر کرتا ہے [23]۔ خاص طور پر، زیتون کا تیل n-9 فیٹی ایسڈ کے ماخذ کے طور پر استعمال کیا جاتا ہے جس نے سویا بین کے تیل کے مقابلے اولاد کے ٹشوز میں miRNA کی ایک سیریز کو بڑھا دیا، بشمول miR-215,miR-10b, miR{ {27}}، miR-377-3p، miR-21، اور miR-192۔ تاہم، زیتون کے تیل میں فینول کی موجودگی اور ارتکاز کا ذکر نہیں کیا گیا۔ اس کے علاوہ، اسی طرح کے اثرات دوسرے تیل جیسے مچھلی کے تیل، السی کا تیل، اور پام آئل کے ساتھ بھی حاصل کیے گئے جس کے نتیجے میں فینولک مرکبات کے کردار کو چھوڑ دیا گیا [23]۔

علمی تحریک اور اضطراب پر hydroxytyrosol کے ممکنہ فائدہ مند اثر، الزائمر کی بیماری (AD) سمیت مختلف نیوروڈیجینریٹیو بیماریوں کے لیے ایک خاصیت، oA42i- (گھلنشیل oligomeric amyloid 1-42 plus ibotenic acid) کے ماؤس ماڈل میں تحقیق کی گئی۔ [39]۔ Hydroxytyrosol نے oA42i کے ذریعے پیدا ہونے والے کئی مضر اثرات کو روکا۔ اس نے جذباتی فیصلہ سازی کو بہتر بنایا اور oA42i کے چیلنج والے چوہوں میں بے چینی جیسے رویے کو کم کیا۔ یہ اثر miRNA-124 کے چوہوں کے ہپپوکیمپی میں اپ گریجولیشن کے ساتھ منسلک تھا، جس میں oA42i علاج سے کمی واقع ہوئی تھی، اور HDAC6 اور HSP90 پروٹینوں کی کمی کی وجہ سے، جو oA42i علاج [39] کے ذریعے بڑھائے گئے تھے۔ دلچسپ بات یہ ہے کہ ہائیڈرو آکسی ٹائروسول نے CRTC1 کی ٹرانسکرپشنل ایکٹیویشن کی حوصلہ افزائی کی، جیسا کہ اوپر بیان کردہ عمر رسیدہ ماڈل میں CRTC3 کے لیے مشاہدہ کیا گیا اثر [29]۔ 100 uM کی ہائیڈروکسی ٹائروسول کی خوراک کا استعمال کرتے ہوئے آرگنوٹائپک ہپپوکیمپل سلائس کلچرز (OHSCs) پر وٹرو میں Vivo کے نتائج کی تصدیق ہوئی۔ چونکہ ان ویوو تجربات میں استعمال ہونے والے ہائیڈرو آکسی ٹائروسول کی انتظامیہ کے راستے اور خوراک کی اطلاع نہیں دی گئی ہے، اس لیے اس کمپاؤنڈ کی عام خوراک کی مقدار کے تحت انسانوں میں AD پر کوئی روک تھام کے کردار کی وضاحت نہیں کی جا سکتی ہے۔

دو مزید مطالعات نے یہ تجویز کیا ہے کہ ہائیڈرو آکسی ٹائروسول کی miRNA-ماڈیولنگ خصوصیات، کم از کم جزوی طور پر، آکسیڈیٹیو تناؤ، لپڈ میٹابولزم اور دیگر میٹابولک عمل [24,3] سے منسلک جینوں کے ضابطے میں شامل ہوسکتی ہیں۔ کئی miRNAs کو ہائیڈروکسی ٹائروسول سے کھلائے گئے چوہوں کے مختلف اعضاء میں ماڈیول کیا گیا تھا۔ اس کمپاؤنڈ کی انتظامیہ نے ٹرائگلیسرائڈ کی سطح میں اضافہ کیا [24]۔ خاص طور پر، ہائیڈرو آکسی ٹائروسول کے ساتھ ایک ہفتہ کی تکمیل کے نتیجے میں انسانی صحت مند مضامین میں miRNA-193a-5p کے اظہار میں اضافہ ہوا[24]۔ چوہوں کے مزید ٹرانسکرپٹومک تجزیہ میں، دو نئے ممکنہ ہائیڈروکسائٹی-روسول ٹارگٹ جینز ملے، یعنی Fgf21 اور Rora[33]۔ ایک بار پھر، یہ مطالعات تجویز کرتے ہیں، لیکن یہ ثابت نہیں کرتے، کہ ہائیڈروکسی ٹائروسول ماڈیولڈ miRNAs آکسیڈیٹیو تناؤ، لپڈ میٹابولزم اور دیگر میٹابولک عمل میں شامل جینوں کے ریگولیشن میں حصہ ڈالتے ہیں۔ مختلف حیاتیاتی اور صحت مند خصوصیات کے سلسلے میں زیتون کے تیل اور اس کے فینول کے miRNAs اظہار پر سب سے زیادہ متعلقہ اثرات تصویر 2 میں دکھائے گئے ہیں۔ 2.2.DNA Methylation

ڈی این اے میتھیلیشن پر زیتون کے تیل اور اس کے فینولک مرکبات کے اثرات کی تحقیقات کرنے والے 15 منتخب مطالعات کی خصوصیات ٹیبل S2 میں دکھائی گئی ہیں۔ پانچ مطالعات میں سیل سسٹمز پر وٹرو میں ڈیٹا کی اطلاع دی گئی[46,53,59,60,63]،8 مطالعات نے جانوروں کے ماڈلز پر نتائج ظاہر کیے [39,47]۔ زیتون کے تیل کے ساتھ گیارہ مطالعات کی گئیں [39-43,47,58-61],2 مضامین میں اولیاسین [46,63] پر ڈیٹا کی اطلاع دی گئی، ہر ایک مطالعہ نے ہائیڈروکسی ٹائروسول [4] کے اثرات کی تحقیقات کی۔ Olea europaea کے پتوں سے حاصل کردہ نچوڑ [44]۔

یہ مضمون مالیکیولس 2021، 26، 273 سے لیا گیا ہے۔ https://doi.org/10.3390/molecules26020273 https://www.mdpi.com/journal/molecules