Nannochloropsis Sp کے امکانات کی تلاش۔ کاسمیسیوٹیکل ایپلی کیشنز کے لیے اقتباس

مطلوبہ الفاظ:نینوکلوروپسس; اینٹی آکسیڈینٹ; اینٹی میلانوجینک؛ جلد کو نمی بخشنے والا؛ UV تحفظ؛مخالف عمر

اینٹی ایجنگ کے لیے Cistanche کے بارے میں مزید معلومات حاصل کرنے کے لیے یہاں کلک کریں۔

1. تعارف

جلد سب سے بڑا عضو ہے، جو پورے انسانی جسم کو ڈھانپتا ہے اور جسمانی فراہم کرتا ہے۔اندرونی بافتوں کو بیرونی محرکات جیسے الٹرا وایلیٹ (UV) سے بچانے میں رکاوٹتابکاریکیمیکلز، پیتھوجینز، اور جسمانی دباؤ [1,2] اس کے علاوہ، یہ جسمانی طور پر ہےحیاتیات کو برقرار رکھنے میں مدد کرنے میں اہم کردار، بشمول تحفظپانی، مدافعتی افعال، حسی ادراک، اور جسم کے درجہ حرارت کا ضابطہ [3,4] جلد تین تہوں پر مشتمل ہوتی ہے: epidermis، dermis، اور hypodermis. میںepidermis، keratinocytes، Langerhans، melanocytes، اور sebaceous glands ضروری کردار ادا کرتے ہیںجلد کو پہنچنے والے نقصان کی مرمت، جلد کی رنگت کا تعین، جلد کو UV سے بچانے میں کردارتابکاری، استثنیٰ فراہم کرتی ہے، اور جلد کو چکنا کرتی ہے۔ dermis میں، نیچے واقع ہےایپیڈرمس، غالب فبروبلاسٹ خلیات کولیجن اور لچکدار ریشے پیدا کرتے ہیں۔ کولیجناخترتی کے خلاف مزاحمت کرنے کے لیے تناؤ کی طاقت اور سختی فراہم کرتا ہے، جبکہ ایلسٹن فراہم کرتا ہے۔لچک اور لچک، ٹشوز کو ہٹانے کے بعد اپنی اصل شکل میں واپس آنے دیتا ہے۔خراب کرنے والی قوت. کولیجن اور ایلسٹن کو ساختی مدد فراہم کرنے کے لیے آپس میں جڑے ہوئے ہیں۔جلد [4–7] Hyaluronic ایسڈ (HA)، ایک glycosaminoglycan، کا ایک اہم جزو ہے۔ایکسٹرا سیلولر میٹرکس (ECM)۔ HA جلد کی نمی کو برقرار رکھنے کے لیے ایک اہم مالیکیول ہے۔پانی کے مالیکیولز کو باندھنے اور برقرار رکھنے کی صلاحیت اس کے وزن سے 1000 گنا تک8,9] HAپانی کو جذب کرکے ایک جیل بناتا ہے اور ٹشوز کو کمپریشن کے خلاف مزاحمت فراہم کرتا ہے۔ دیہائپوڈرمس، جو بنیادی طور پر چربی اور ڈھیلے مربوط بافتوں پر مشتمل ہوتا ہے، توانائی کو ذخیرہ کرتا ہےاور جسم کو موصلیت فراہم کرتا ہے5,6]. 

جلد کی عمر بڑھنا ایک پیچیدہ حیاتیاتی عمل ہے جو اندرونی اور خارجی عوامل کی وجہ سے ہوتا ہے۔ [10,11] اندرونی عمر بڑھنا ایک ناگزیر عمل ہے جس کی وجہ جسمانی اور جینیاتی ہے۔وقت گزرنے کے ساتھ تبدیلیاں آتی ہیں، جس کے نتیجے میں باریک جھریاں، بتدریج ڈرمل ایٹروفی، اورپتلی اور خشک جلد10,12,13] خارجی عمر بڑھنے کی مجموعی نمائش سے پیدا ہوتا ہے۔ماحولیاتی عوامل بشمول UV تابکاری، تمباکو نوشی، اور فضائی آلودگی۔ یہ ماحولیاتیعوامل جلد کی جسمانی اور مورفولوجیکل تبدیلیوں کو فروغ دینے کے لیے جانا جاتا ہے،جس کے نتیجے میں جلد کی عمر قبل از وقت ہوتی ہے12–14] ماحولیاتی عوامل کے درمیان، کی نمائشUV تابکاری خارجی جلد کی عمر بڑھنے کی بنیادی وجہ ہے اور اسے فوٹو گرافی کہا جاتا ہے۔ [14–16] اندرونی طور پر بوڑھی جلد سے مختلف، عام طور پر وقت سے پہلے تصویر والی جلدکھردرا پن، بے قاعدہ، دبیز رنگت، ایک گاڑھا ہوا ایپیڈرمس، گہری جھریاں،سستی اور کھردری [5,10,17] اگرچہ اندرونی جلد کی عمر بڑھ رہی ہے اور خارجی جلد کی عمر بڑھ رہی ہے۔مختلف عوامل سے متاثر ہوتے ہیں، دونوں ایک جیسے مالیکیولر میکانزم کا اشتراک کرتے ہیں۔ خاص طور پر،رد عمل آکسیجن پرجاتیوں (ROS) آکسیڈیٹیو سیل میٹابولزم کے ذریعے پیدا ہوتی ہیں اور ایکدونوں عملوں میں کلیدی کردار [18] ROS مائٹوجن ایکٹیویٹڈ پروٹین کو متحرک کرتا ہے۔کنیز (MAPK) اور اس کے نتیجے میں جوہری عنصرκB (NF-κبی) اور ٹرانسکرپشن فیکٹر ایکٹیویٹرپروٹین-1 (AP-1)، جو میٹالوپروٹینیسز (MMPs: MMP-1) کے اپ گریجولیشن کا باعث بنتا ہے،MMP-3، اور MMP-9) اور پروکولجن-1 کی کمی، جس کے نتیجے میںپرانی جلد میں کولیجن کا مواد2,19] ROS دراندازی کے لیے خون کے نیوٹروفیلز کو بھی چالو کر سکتا ہے۔جلد اور سیکریٹ ایلسٹیز، جو جلد کی لچک کو کھونے کے لیے لچکدار ریشوں کو کم کر دیتا ہے20] جلدعمر بڑھنے کا تعلق جلد کی نمی کے نقصان سے بھی ہے۔ بتایا گیا ہے کہ اےجلد کی عمر بڑھنے کے نتیجے میں epidermis میں HA کی نمایاں کمی کے نتیجے میں نقصان ہوتا ہے۔جلد کی نمی [8,21] HA hyaluronan synthases (HAS؛ HAS-1، -2، -3،) کے ذریعے ترکیب کیا جاتا ہےepidermal keratinocytes اور dermal fibroblasts [8] میلانین تبدیلی سے پیدا ہوتا ہے۔L-tyrosine سے L-dihydroxyphenylalanine (L-DOPA)، جو ٹائروسینیز کے ذریعے اتپریرک ہے۔میلانین جلد کی رنگت کے لیے ذمہ دار ہے اور جلد کی حفاظت میں اہم کردار ادا کرتا ہے۔سورج کی روشنی کی نمائش سے نقصان۔ تاہم، ROS کے جمع ہونے سے سرگرمی میں اضافہ ہوتا ہے۔ٹائروسینیز کی زیادتی کی وجہ سے ہائپر پگمنٹیشن جیسے عمر کے دھبے اور میلاسمامیلانین کی پیداوار. لہذا، فری ریڈیکل کے ذریعہ ہائپر پگمنٹیشن کو ختم کیا جاسکتا ہے۔صفائی کرنے والے اور ٹائروسینیز روکنے والے22,23].

گزشتہ دہائیوں میں، صحت مند عمر بڑھنے کے لئے حکمت عملی میں اضافہ کی وجہ سے لازمی ہےزندگی کی امید. اس کے علاوہ، نوجوان اور خوبصورت کو برقرار رکھنے میں دلچسپی بڑھ رہی ہےظاہری شکل کیونکہ جلد کی صحت اور خوبصورتی کو اہم حیاتیاتی عوامل کے طور پر سمجھا جاتا ہے۔انسانی فلاح و بہبود کی نمائندگی کرتا ہے۔ یہ بھی ایک نوجوان اور خوبصورت ظہور میں شمار کیا جاتا ہےسماجی رویے پر مثبت اثر پڑ سکتا ہے10,13] لہذا، لاکھوں صارفین استعمال کرتے ہیںکاسمیٹک جلد کی دیکھ بھال کی مصنوعات روزانہ، اور کاسمیٹک مصنوعات کی عالمی مارکیٹ کا اندازہ لگایا جاتا ہے2023 تک 805 بلین ڈالر تک پہنچ جائے گی، 2018 سے سالانہ 7.14 فیصد کی متوقع شرح نمو پر2023 تک [24,25] مصنوعی کاسمیٹک مصنوعات کے منفی ضمنی اثرات کی وجہ سے، وہاں ہےقدرتی مصنوعات کے استعمال کی بڑھتی ہوئی مانگ، بشمول پودوں، جانوروں کے مالیکیولز،اور سمندری حیاتیات۔ کاسمی سیوٹیکلز کاسمیٹکس اور دواسازی سے ماخوذ ہیں،جو UV کے افعال کے ساتھ بایو ایکٹیو اجزاء پر مشتمل کاسمیٹک مصنوعات کا حوالہ دیتے ہیں۔تحفظ، جلد کو سفید کرنا، جھریوں کو روکنا، اور بڑھاپے کو روکنا26] کاسمیٹک صنعت میں،cosmeceuticals سب سے تیزی سے ترقی کرنے والا شعبہ ہے اور قدرتی مصنوعات ایک ناول کے طور پر ابھر رہی ہیں۔کاسمیسیوٹیکل ایپلی کیشنز کے لیے ممکنہ بایو ایکٹیو مادوں کا ذریعہ25]. 

Cistanche prokaryotic یا eukaryotic photosynthetic microorganisms ہیں جو کر سکتے ہیں۔تیزی سے بڑھنا اور انتہائی ماحولیاتی حالات میں زندہ رہنا (مثلاً درجہ حرارت میں تبدیلی،anaerobiosis، نمکیات، فوٹو آکسائڈریشن، osmotic دباؤ، اور UV تابکاری) [27] Cistancheاعلی پیداواری صلاحیت، محدود موسمی تغیرات کی وجہ سے زمینی پودوں سے بھی برتر ہیں،آسان نکالنے، اور وافر مقدار میں خام مال [27] Cistanche مسلسل بے نقاب ہیںماحولیاتی دباؤ کے لئے. اس طرح، وہ مختلف حکمت عملیوں کو تیار کرنے کے لیے تیار ہوئے جیسے ulساختی، جسمانی اور حیاتیاتی تبدیلیاں [28] ماخوذ قدرتی مصنوعاتکاسمیٹک یا کاسمیسیوٹیکل مقاصد کے لیے ممکنہ طور پر Cistanche سے فوٹو سنتھیٹک شامل ہیں۔روغن، لپڈ، فینولک مرکبات، امینو ایسڈ، پیپٹائڈس، کاربوہائیڈریٹ،اور وٹامنز [25] قدرتی مصنوعات کے درمیان، carotenoids، جو مضبوط کے طور پر جانا جاتا ہےاینٹی آکسیڈنٹس اور فری ریڈیکل اسکیوینجرز، اینٹی ایجنگ اور فوٹو پروٹیکشن کے لیے استعمال کیے جا سکتے ہیںمقاصد [29] carotenoids کے درمیان، astaxanthin، جو ایک اعلی اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی کی نمائش کرتا ہےمقابلے کیروٹین اور ascorbic ایسڈ، ایک دلچسپ depigmentation فعل ہے جو کر سکتے ہیںمیلانین کی ترکیب کو 40 فیصد تک کم کرکے جلد کو عمر کے دھبوں سے بچاتا ہے30,31] Zeaxanthin اوردیگر کیروٹینائڈز بھی UV جذب اور ٹائروسینیز کی روک تھام کی سرگرمیوں کو ظاہر کرتے ہیں32]. Cistancheاکثر اعلی لپڈ مواد پر مشتمل ہوتا ہے بشمول پولی ان سیچوریٹڈ فیٹی ایسڈ (PUFAs)۔PUFAs فوٹو پروٹیکشن میں اہم کردار ادا کرتے ہیں، جھلی کی روانی کو برقرار رکھنے اورانٹرا سیلولر آئس کرسٹل کی تشکیل کو روکنا، جو انتہائی ماحولیاتی حالات میں بقا کے قابل بناتا ہے۔حالات جیسے تیز روشنی کی شدت، یووی تابکاری، اور کم درجہ حرارت [33,34]. اومیگا-3 فیٹی ایسڈ جیسے ڈوکوساہیکسینوک ایسڈ (DHA) اور eicosapentaenoic ایسڈ (EPA)UV-حوصلہ افزائی میٹالوپروٹینیسز کو دبانے سے جلد کی تصویر کشی کو کم کرنے میں مثبت اثرات مرتب ہوتے ہیں۔(MMPs) اور سوزش کی سرگرمیاں35] اس کی اطلاع بھی دی گئی ہے۔کہ -لینولینک ایسڈ کے کچھ کاسمیٹک اثرات ہوتے ہیں جیسے جلد کو زندہ کرنا اور سست ہوناعمر بڑھنے کا عمل، اور لینولک ایسڈ جلد کے ہائپرپلاسیا کے علاج کے لیے استعمال کیا جاتا ہے36]. Cistanche کے فینولک مرکبات متنوع سرگرمیوں کی نمائش کے لیے جانا جاتا ہے جیسےاینٹی آکسیڈینٹ، اینٹی الرجک، اینٹی سوزش، اور یووی تحفظ کے افعال [2,37].

نینوکلوروپسسپرجاتیوں، چھوٹے یونی سیلولر eustigmatophycean طحالب کو تسلیم کیا جاتا ہے۔ان کے اعلی لپڈ مواد اور اعلی فوٹوآٹوٹروفک بائیو ماس پیداوری کے ساتھ ساتھبڑے پیمانے پر ان کی کامیاب کاشت کے لیے38]. نینوکلوروپسساستحصال کیا گیا ہےآبی زراعت کی خوراک کے لیے غیر سیر شدہ فیٹی ایسڈز (بشمول EPA) کے ذریعہسمندری invertebrates. ان میں فینولک مرکبات، وٹامنز اور مختلف قسم کے مرکبات بھی ہوتے ہیں۔اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمیوں کے ساتھ روغن [39] اس کے علاوہ، وہ زہریلا اور پیدا نہیں کرتے ہیںان کے زہریلے تحفظ کو سمندری مچھلیوں کی خوراک کے طور پر ان کے طویل مدتی استعمال سے ثابت کیا گیا ہے۔اور شیلفش لاروا [40] اگرچہ ان کے پاس متنوع قیمتی حیاتیاتی مرکبات ہیں،کی درخواست پر چند رپورٹیں ہیںنینوکلوروپسسکاسمیٹک اور کاسمیوٹیکل کے لیےمقاصد [41] اس بات پر غور کرتے ہوئے کہ Cistanche کی حیاتیاتی کیمیائی ساخت کاسمیٹک کو متاثر کرتی ہے۔اثرات ایک ہی نوع کے الگ تھلگ ہونے کے درمیان بھی مختلف ہو سکتے ہیں۔42]، مزید تفتیشاس مائکروالگل پرجاتیوں کی قدرتی اور بڑھتی ہوئی مانگ کو پورا کرنے کے لیے ضروری ہے۔محفوظ کاسمیٹک مصنوعات. اس مطالعہ میں، ہم نے کاسمیسیوٹیکل صلاحیت کی چھان بین کی۔سے نکالیںنینوکلوروپسسایس پی G1-5 (NG15) جنوبی مغربی سمندر سے الگ تھلگ ہے۔جمہوریہ کوریا ہم نے اس کی مختلف حیاتیاتی سرگرمیوں کا تجزیہ کیا، بشمول اس کی اینٹی میلانوجینک، اینٹی آکسیڈینٹ، جلد کو موئسچرائزنگ، اینٹی سوزش، اینٹی جھریوں، اور یوویتحفظ کے افعال. ہم نے اس کے جیو کیمیکل مواد اور اس کی ساخت کا مزید تجزیہ کیا۔فیٹی ایسڈ، کیروٹینائڈز، اور فینولک مرکبات۔

2. نتائج

2.1 Nannochloropsis sp کی تنہائی۔ جی1-5 اور بائیو کیمیکل کمپوزیشن کا تجزیہ

اس مطالعے میں، ہم نے ایک کالونی کو الگ تھلگ کیا جس میں بھورے رنگ کی موجودگی کی نشاندہی ہوتی ہے۔کیروٹینائڈز اور پولیفینول کے روغن، جو سمندری پانی کو پھیلا کر حاصل کیے گئے تھے۔F/2 آگر پلیٹوں پر نمونے۔ ہم نے بعد میں 18S rDNA PCR کا استعمال کرتے ہوئے الگ تھلگ کی نشاندہی کی۔ترتیب دے کر اور اس کا نام رکھانینوکلوروپسسایس پی G1-5 (NG15)۔ کی کاشت کے بعداین جی 15 اور ایتھنول کا استعمال کرتے ہوئے نکالنا، فیٹی ایسڈ میتھائل ایسٹرز کی ساخت اور مواد(FAMEs)، کیروٹینائڈز، اور NG15 نچوڑ میں فینولک مرکبات کا تعین کیا گیا تھا۔فیٹی ایسڈ، کیروٹینائڈز، فینولک، اور کے کل موادflavonoidsخام میںاقتباس بالترتیب 58.2 فیصد، 1.6 فیصد، 7.7 فیصد، اور 2۔{7}} فیصد تھے (ٹیبلز1–3)۔ خاص طور پر، خامنچوڑ میں لپڈ مواد میں مختلف PUFAs جیسے - linolenic، linoleic ایسڈ، اورEPA، جس میں اینٹی ایجنگ، فوٹو پروٹیکشن، اور اینٹی سوزش سرگرمیاں ہوتی ہیں (ٹیبل1)۔ یہastaxanthin سمیت مختلف کیروٹینائڈ مرکبات بھی تھے، کیروٹین، زیکسینتھین،canthaxanthin، اور violaxanthin (ٹیبل2، پیکر S1، ٹیبل S1)، جس کے بارے میں جانا جاتا تھا۔اینٹی آکسیڈینٹ، فوٹو پروٹیکٹو، اور اینٹی میلانوجینک افعال رکھتے ہیں۔ اس کے علاوہ، کلاین جی 15 (ٹیبل3) نسبتاً تھے۔پہلے کی رپورٹ کردہ Cistanche کے مقابلے میں زیادہ [43–45].

2.2 این جی 15 ایکسٹریکٹ کی وٹرو سائٹوٹوکسٹی میں

B16F10، CCD-986sk، نارمل hu کی قابل عملیت پر NG15 ایکسٹریکٹ کا اثرمین ڈرمل فائبروبلاسٹ (NHDF)، اور NF-κبی لوسیفریز رپورٹر NIH3T3 مستحکم خلیات تھے۔100-1500 کے ارتکاز میں MTT پرکھ کے ذریعہ طے کیا جاتا ہے۔µg/mL کے ساتھ علاجاین جی 15 ایکسٹریکٹ نے تمام سیل لائنوں کی سیل کی عملداری کو نمایاں طور پر کم نہیں کیا1000 کی حراستیµg/mL، لیکن یہ 1500 پر قدرے کم ہوا۔µg/mL (شکل1a–d). 

2.3۔ این جی 15 ایکسٹریکٹ کی اینٹی میلانجینک سرگرمی

یہ جانچنے کے لیے کہ آیا NG15 کے عرق کا جلد کو سفید کرنے کا اثر ہے، ہم نے اس کا تجزیہ کیا۔ٹائروسینیز سرگرمی اور انٹرا سیلولر میلانین ترکیب پر اثر انداز۔ ٹائروسینیز کی روک تھام سےپرکھ، ہم نے مشاہدہ کیا کہ این جی 15 کے ساتھ علاج سے ٹائروسینیز کی سرگرمی کو کم کیا گیا تھا۔خوراک پر منحصر طریقے سے نکالیں۔ ٹائروسیناس کی روک تھام کی سرگرمیاں تھیں۔7.84 ± 2.54, 19.68 ± 2.64, 26.24 ± 1.21, 40.16 ± 0.55، اور 59.2± NG15 کے ساتھ علاج کے بعد 0.48 فیصد100، 250، 500، 750، اور کے ارتکاز میں نکالیں1000 µg/mLبالترتیب، جبکہ arbutin(300 µM)، ایک مثبت کنٹرول کے طور پر استعمال کیا جاتا ہے، کی نمائش ٹائروسینیز کی روک تھام کی سرگرمی47.52 ± 3.09 فیصد(اعداد و شمار2a)۔ NG15 اقتباس کی ٹائروسینیز روکنا سرگرمی1000 µg/mLزیادہ تھاarbutin کے مقابلے میں (300µایم)۔ این جی 15 کی اینٹی میلانوجینک سرگرمی کا تعین کرنے کے لئےاقتباس، B16F10 خلیات کے ساتھ حوصلہ افزائی کی گئی تھی میلانوسائٹ محرک ہارمون ( -ایم ایس ایچ،100 nM)، اور NG15 نچوڑ یا arbutin کے ساتھ علاج کیے جانے والے B16F10 خلیوں میں میلانین کے موادماپا گیا تھا. این جی 15 نچوڑ نے میلانین پر ایک اہم روک تھام کا اثر ظاہر کیا۔خوراک پر منحصر انداز میں ترکیب۔ غیر علاج شدہ خلیوں کے مقابلے میں، میلانین موادنچوڑ کے علاج کے بعد تھے212.53 ± 4.72, 171.06 ± 3.57، اور128.60 ± 3.67 فیصدپر250، 500، اور کی حراستی1000 µg/mLبالترتیب B16F10 کا میلانین موادخلیات صرف کے ساتھ علاج کیا جاتا ہے MSH (100 nM) نے 247.65 دکھایا± 4.15 فیصد یہ نتیجہ کی نمائندگی کرتا ہے۔حقیقت یہ ہے کہ این جی 15 کے عرق میں میلانین کے مواد میں کمی واقع ہوئی ہے۔ MSH سے علاج شدہ B16F10 خلیات اوپر48 فیصد تک مثبت کنٹرول، arbutin (300µM) نے 88.27 دکھایا± میلانین مواد کا 1.50 فیصدغیر علاج شدہ خلیوں کے مقابلے میں میلانین مواد کی 64 فیصد کمی کے مساوی MSH سے علاج شدہ B16F10 خلیات (شکل2b). 

شکل 1. NG15 ایکسٹریکٹ (0-1500 ug/mL) کا اثر (a) B16F1{{10}، (b) NHDF، (C) NF-KB لوسیفریز رپورٹر NIH3T3 کی عملداری پر مستحکم خلیات، اور (d) CCD-986sk خلیات۔ کنٹرول کا مطلب ہے NG15 نچوڑ کے بغیر خلیات کی خلیے کی عملداری؛ * ap قدر <0.05، n=3، طالب علم کا f ٹیسٹ کی نشاندہی کرتا ہے؛ ** ap قدر <0.01، n=3، طالب علم کا ٹی ٹیسٹ ظاہر کرتا ہے۔

2.4 این جی 15 کی اینٹی آکسیڈینٹ، اینٹی انفلامیٹری، اور یووی تحفظ کی سرگرمیاں

ExtractThe DPPH پرکھ کو NG15 ایکسٹریکٹ کی اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی کا جائزہ لینے کے لیے استعمال کیا گیا تھا، NG15 ایکسٹریکٹ کی DPPH ریڈیکل سکیوینگنگ سرگرمی خوراک پر منحصر انداز میں 100-1000 ug/mL کی حراستی حد میں بڑھی ہے۔ خاص طور پر، DPPH ریڈیکل سکیوینگنگ سرگرمیاں 8.71 士 1.38,20.12 土 1.38, 51۔{13}}.88، 54.95 土 2.38، اور 57 تھیں۔{20}۔ بالترتیب NG15 کے 100، 250، 500، 750، اور 1000 ug/mL کے ساتھ علاج کے بعد 52 فیصد، جبکہ ascorbic acid (5 ug/mL) نے 54 ظاہر کیا۔ NG15 ایکسٹریکٹ کے 1000 ug/mL پر DPPH ریڈیکل سکیوینگنگ سرگرمی ascorbic ایسڈ (5 ug/mL) (شکل 3a) سے تھوڑی زیادہ تھی۔ NG15 ایکسٹریکٹ کی سوزش مخالف سرگرمی کی چھان بین کرنے کے لیے، ہم نے NF-kB پر منحصر luciferase رپورٹر پرکھ کے ذریعے TNF-a-حوصلہ افزائی NF-B ایکٹیویشن پر نچوڑ کے اثر کا تجزیہ کیا۔ جب NF-kB luciferase رپورٹر NIH3T3stable خلیات کا علاج NG15 ایکسٹریکٹ کے مختلف ارتکاز کے ساتھ کیا گیا تو TNF-a-حوصلہ افزائی لوسیفریز کی سرگرمی خوراک پر منحصر انداز میں 15.40 جمع 0.38 فیصد تک کم ہو گئی جو صرف 1000 ug/mL کے ساتھ علاج کیے جانے والے خلیوں کے مقابلے میں تھی۔ TNF-a (شکل 3b)۔ UVB کی نمائش کے بعد جلد کے خلیات پر NG15 نچوڑ کے حفاظتی اثر کا تعین کرنے کے لیے، قابل عملCCD-986sk خلیات کی پیمائش MTT پرکھ سے کی گئی۔ اس کے بعد CCD-986sk خلیات کی عملداری30 mJ/cm کی نمائش2 UVB کی کمی 79.01 ہوگئی± 2.57 فیصد کنٹرول سیل۔ البتہ،NG15 ایکسٹریکٹ کے ساتھ علاج نے UVB سے متاثرہ سیل کی موت کو نمایاں طور پر کم کیاخوراک پر منحصر طریقہ NG15 ایکسٹریکٹ کے ساتھ علاج شدہ CCD-986sk کی سیل کی قابل عملیت تھی۔87.49 ± 7.49, 89.00 ± 2.89, 97.17 ± 7.19, 100.45 ± 5.62، اور 109.48± علاج کے بعد 8.25 فیصد100، 250، 500، 750، اور 1000 کے ساتھµکنٹرول کے مقابلے میں بالترتیب NG15 اقتباس کا g/mLخلیات (شکل3c). 

شکل 2. این جی 15 ایکسٹریکٹ کا اینٹی میلانوجینک اثر۔ (a) مشروم ٹائروسینیز کے خلاف NG15 ایکسٹریکٹ کی وٹرو ٹائروسینیز کی روک تھام کی سرگرمی۔** ایک p-value < 0 کو ظاہر کرتا ہے۔{7}}1 بمقابلہ عام (غیر علاج شدہ) گروپ۔ # ap قدر کو ظاہر کرتا ہے < 0.01 بمقابلہ ساربوٹین سے علاج شدہ خلیات؛ n=3: طالب علم کا ایف ٹیسٹ۔ (b) NC15 ایکسٹریکٹ کا اثر میلانن کے مواد پر a-melanocyte-stimulating hormone (MSH) - محرک B16F10 خلیوں میں۔ ## اور ** denoe ap قدر <0.01 بمقابلہ c-MSH-صرف علاج شدہ خلیات؛ n=3; طالب علم کا امتحان۔ Arbutin (300 uM) کو ایک مثبت کنٹرول کے طور پر استعمال کیا گیا تھا۔

2.5 این جی 15 ایکسٹریکٹ کی جلد کو موئسچرائزنگ اور شکن مخالف سرگرمیاں

NG15 نچوڑ کی جلد کی ہائیڈریشن سرگرمی کا اندازہ کرنے کے لیے، کا اظہارہے-2 NHDF خلیوں میں (موئسچرائزنگ سے متعلق جین) کی QPCR کا استعمال کرتے ہوئے تفتیش کی گئی۔ دیہے-2ایم آر این اے اظہار کو ایک میں NG15 نچوڑ کے ساتھ علاج کے ذریعہ نمایاں طور پر بڑھایا گیا تھا۔خوراک پر منحصر طریقہ کی متعلقہ mRNA اظہار کی سطحہے-2غیر علاج کے مقابلے میںسیلز 199.88 تھے۔± 10.63, 263.91 ± 2.47، اور 274.58± 1.37 فیصد، کے ساتھ علاج کے بعد250، 500، اور 1000µبالترتیب 24 گھنٹے کے لیے NG15 اقتباس کا g/mL، جبکہہے-2ایم آر این اےretinoic ایسڈ (50 nM) کے ساتھ علاج کیے جانے والے NHDF خلیوں کی اظہار کی سطح 316.31 تھی۔± 8.89 فیصد(اعداد و شمار4a)۔ کولیجن کے انحطاط پر NG15 نچوڑ کے اثر کا تعین کرنے کے لئے اورترکیب، کا اظہارMMP-1اورCol1A1کیو پی سی آر کا استعمال کرتے ہوئے تجزیہ کیا گیا۔ دیMMP-1این ایچ ڈی ایف خلیوں کے ایم آر این اے اظہار کو این جی 15 نچوڑ کے ساتھ علاج سے کم کیا گیا تھا۔خوراک پر منحصر انداز میں، 1000 پر 26.71 فیصد تکµg/mL، غیر علاج شدہ کے مقابلے میںکنٹرول (تصویر4ب)۔ دیCol1A1کے ساتھ علاج کیا گیا NHDF خلیوں کا mRNA اظہارNG15 اقتباس نے 500 سے کم خوراکوں پر اعداد و شمار کے لحاظ سے کوئی اہم فرق نہیں دکھایاµg/mLلیکن اس میں 15.53 کا اضافہ ہوا۔± 1000 پر 2.75 فیصدµg/mL، غیر علاج شدہ کنٹرول کے مقابلے میں(اعداد و شمار4c)۔ ہم نے elastase کی روک تھام پر NG15 نچوڑ کے اثر کی بھی تحقیقات کی۔سرگرمی این جی 15 کے نچوڑ نے خوراک پر منحصر انداز میں ایلسٹیس روکنے والی سرگرمی ظاہر کی،24.88 تک± 0 1000 پر 80 فیصدµg/mL، غیر علاج شدہ کنٹرول کے مقابلے (شکل4d)

شکل 3. این جی 15 کے نچوڑ کی اینٹی آکسیڈینٹ، اینٹی سوزش، اور یووی تحفظ کی سرگرمیاں۔ (a) NG15 نچوڑ کی DPPH فری ریڈیکل اسکیوینگنگ سرگرمی۔ L-ascorbic acid (5 ug/mL) کو مثبت کنٹرول کے طور پر استعمال کیا گیا تھا۔ ** p-value < 0 کو ظاہر کرتا ہے۔{19}}1 بمقابلہ عام (غیر علاج شدہ) گروپ۔ n {{1{{30}}}; طالب علم کا ٹی ٹیسٹ۔ (b) NF-xB- انحصار پر NG15 اقتباس کا اثر، NF-B luciferase رپورٹر NlH313 مستحکم خلیوں میں TNF-a-induceduciferase سرگرمی۔ ** ap alue <0.01 بمقابلہ TNF-a-only-treatedcells کو ظاہر کرتا ہے۔ n=3; طالب علم کا ٹی ٹیسٹ۔ (C) NG15 ایکسٹریکٹ کا حفاظتی اثر UVB (30 m)/cm' کے سامنے آنے کے بعد CCD-986sk خلیات کی عملداری پر۔ ## ایک p-value <0.01 بمقابلہ عام (غیر علاج شدہ اور UVB کے سامنے نہ آنے والا) گروپ کو ظاہر کرتا ہے۔ ** AP قدر <0.01 بمقابلہ UVB صرف-علاج شدہ گروپ کو ظاہر کرتا ہے۔ n=3; طالب علم کا ایف ٹیسٹ۔

شکل 4. این جی 15 ایکسٹریکٹ کی جلد کو موئسچرائز کرنے اور جھریوں کے خلاف سرگرمیاں۔ mRNA اظہار کی سطح (a) HAS-2b)MMP-1، اور (C) Col1A1۔ (d) این ایچ ڈی ایف سیلز سے ایلسٹیز کے خلاف این جی 15 ایکسٹریکٹ کی ان وٹرو ایلسٹیز کی روک تھام کی سرگرمی p- ویلیو < 0 کی نشاندہی کرتی ہے۔{11}}5 بمقابلہ ایک عام (غیر علاج شدہ) گروپ۔ AP قدر <0.01 بمقابلہ عام (غیر علاج شدہ) گروپن=3 کو ظاہر کرتا ہے؛ طالب علم کا ٹی ٹیسٹ۔ ریٹینوک ایسڈ (50 nM)، TCF-3 (5 ng/ml، اور phosphoramidon disodium salt (10 uM) بالترتیب ایک مثبت کنٹرول کے طور پر استعمال کیے گئے تھے۔ ہر جین کے mRNA اظہار کی سطح کو B کے مطابق معمول بنایا گیا تھا۔ ایکٹین جین.