گلوکوز میلانوسائٹس میں ٹائروسینیز کے بالواسطہ غیر فعال ہونے اور انسانی جلد کے مساوی ہونے سے ایک اینٹی میلانوجینک اثر ڈالتا ہے۔

خلاصہ:

شکر حیاتیات میں ہر جگہ پائی جاتی ہے اور کم سے کم ضمنی اثرات کے ساتھ جلد کو نمی بخشنے کے لیے معروف کاسمیٹک اجزاء ہیں۔ گلوکوز، ایک سادہ چینی جو زندہ خلیات کے ذریعہ توانائی کے ذریعہ کے طور پر استعمال ہوتی ہے، اکثر جلد کی دیکھ بھال کی مصنوعات میں استعمال ہوتی ہے۔ متعدد رپورٹس نے ثابت کیا ہے کہ شوگر اور شوگر سے متعلق مرکبات میلانوسائٹس پر میلانوجینک مخالف اثرات رکھتے ہیں۔ تاہم، بنیادی مالیکیولر میکانزم جس کے ذریعے گلوکوز میلانین کی ترکیب کو روکتا ہے نامعلوم ہے، حالانکہ گلوکوز کو سفید کرنے کے ساتھ ساتھ کاسمیٹکس میں نمی پیدا کرنے والے جزو کے طور پر بھی استعمال کیا جاتا ہے۔ اس کے ساتھ، ہم نے پایا کہ گلوکوز نے میلانوسائٹ-حوصلہ افزائی ہارمون (MSH) کے میلانین مواد کو نمایاں طور پر کم کر دیا - B16 خلیات اور تاریک رنگ میں رنگے ہوئے نارمل انسانی میلانوسائٹس جس میں سائٹوٹوکسٹی کی کوئی علامت نہیں ہے۔

مزید برآں، گلوکوز کے حالات کے علاج نے فوٹو گرافی، فونٹانا-میسن (ایف اینڈ ایم) سٹیننگ، اور رنگین 3D انسانی جلد کے ماڈل میلانوڈرم میں ملٹی فوٹون مائیکروسکوپی کے ذریعے اس کی سفیدی کی افادیت کا مظاہرہ کیا۔ تاہم، گلوکوز نے melanocytes میں بڑے میلانوجینک پروٹین کے جین کے اظہار یا پروٹین کی سطح کو تبدیل نہیں کیا۔ جب کہ گلوکوز نے میلانوسائٹس میں انٹرا سیلولر ٹائروسینیز کی سرگرمی کو قوی طور پر کم کیا، لیکن اس نے خلیے سے پاک تجرباتی نظام میں مشروم ٹائروسینیز کی سرگرمی کو کم نہیں کیا۔ تاہم، گلوکوز کو لیکٹک ایسڈ میں میٹابولائز کیا گیا تھا، جو ٹائروسینیز کی سرگرمی کو طاقتور طریقے سے دبا سکتا ہے۔ اس طرح، ہم نے یہ نتیجہ اخذ کیا کہ گلوکوز بالواسطہ طور پر ٹائروسینیز کی سرگرمی کو لیکٹک ایسڈ میں تبدیل ہونے سے روکتا ہے، میلانوسائٹس میں اس کے اینٹی میلانوجینک اثرات کی وضاحت کرتا ہے۔

ٹائروسینیز ایک انزائم ہے جو پروٹین میں ٹائروسین کو گل سکتا ہے اور اسے ٹائروسین آکسیڈیشن مصنوعات، جیسے ٹائروسین فینول اور دیگر مادوں میں تبدیل کر سکتا ہے۔ یہ انزائم انسانی جسم میں بڑے پیمانے پر موجود ہے، خاص طور پر آنتوں کی نالی میں، جہاں یہ کھانے کے ہاضمے اور جذب میں شامل ہے۔ اس کے ساتھ ہی تحقیق میں یہ بھی پایا گیا کہ cistanche ٹائروسینیز کی سرگرمی کو کم کر کے جلد کو سفید کر سکتا ہے۔

cistanche کیا ہے پر کلک کریں۔

مطلوبہ الفاظ:

melanogenesis؛ شکر؛ گلوکوز؛ ٹائروسینیز؛ انسانی جلد کے برابر

1. تعارف

میلانوجینیسیس میلانین کی پیداوار کا عمل ہے اور جلد کی حفاظت کے لیے ضروری ہے۔ میلانین الٹرا وایلیٹ (UV) روشنی کو جذب کرتا ہے اور جلد کو UV روشنی اور آزاد ریڈیکلز کے نقصان دہ اثرات سے بچاتا ہے [1]۔ تاہم، چونکہ میلانین کی ضرورت سے زیادہ پیداوار فریکلز اور لینٹیگو جیسے ہائپر پگمنٹیشن کا سبب بنتی ہے، جسے بے حس سمجھا جا سکتا ہے، کافی تحقیق کاسمیٹکس یا دوائیوں کے لیے موثر ڈی پیگمینٹری اجزاء تلاش کرنے کے لیے وقف کی گئی ہے [2–4]۔

شوگر جلد کی نمی کے لیے ایک طاقتور humectant ہے اور اسے کم سے کم ضمنی اثرات کے ساتھ جلد کو نمی بخشنے کے لیے کاسمیٹک اجزاء کے طور پر استعمال کیا جاتا ہے۔ اس کے علاوہ، شکر اور شوگر سے متعلقہ ایجنٹ میلانوجینیسیس کو متاثر کرتے ہیں [5,6]۔ میلانین کی ترکیب میں شامل ایک کلیدی انزائم، ٹائروسینیز کے گلائکوسیلیشن کو تبدیل کیا جا سکتا ہے، جو اس کی اتپریرک سرگرمی کو روکتا ہے اور اس کے انحطاط کو تیز کرتا ہے [7]۔ میلانوجینیسیس میں شکر کے کردار کو میلانوسائٹس کے پگمنٹیشن فینوٹائپ پر گلائکوسیلیشن کے اثر کی تحقیقات کرنے والے مطالعات اور ٹائروسینیز [5–7] کی کیٹلیٹک سرگرمی پر شوگر کی باقیات کے کردار پر روشنی ڈالی گئی ہے۔ کچھ مطالعات میں بتایا گیا ہے کہ شوگر کے مشتق ٹائروسینیز کی پختگی کو روک سکتے ہیں، اس کے گلائکوسیلیشن کو متاثر کرتے ہیں۔ مثال کے طور پر، N-acetylglucosamine (NAG)، ایک امینو ہیکسوز جو کہ ایک امینو گروپ کو گلوکوز میں شامل کرنے سے جسمانی طور پر پیدا ہوتا ہے، ٹائروسینیز گلائکوسیلیشن میں خلل ڈالتا ہے، جس کے نتیجے میں گنی پگ کی جلد اور انسانی جلد پر اثر انداز ہوتا ہے [8]۔

مزید برآں، حالیہ مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ شوگر سے متعلق مرکبات ٹائروسینیز کے اظہار یا ایکٹیویشن کو روکتے ہیں اور ساتھ ہی اس کے گلائکوسیلیشن کو بھی تبدیل کرتے ہیں۔ مثال کے طور پر، ہم نے galacturonic ایسڈ (GA) کی سفیدی کی افادیت کا اندازہ کیا، ایک شوگر ایسڈ جو کہ galactose کی ایک آکسیڈائزڈ شکل ہے اور pectin کا ​​بنیادی جزو ہے۔ Galacturonic ایسڈ B16 murine melanoma خلیات اور انسانی جلد کے مساوی [9] میں ٹائروسینیز سرگرمی اور اظہار کے ضابطے کے ذریعے سفیدی کا اثر ڈالتا ہے۔ ایک اور رپورٹ میں، سائکلک اولیگوساکرائیڈ کی ایک نئی قسم، جسے سائکلک نائٹروسیل نائجرز (CNN) کے نام سے جانا جاتا ہے، نے ٹائروسینیز کی انزیمیٹک سرگرمی پر ایک کمزور لیکن اہم براہ راست روک تھام کا اثر دکھایا، جو کہ ہائپو پیگمنٹیشن [10] کا ایک ممکنہ طریقہ کار تجویز کرتا ہے۔ مناسب گلائکوسیلیشن کے ذریعہ ٹائروسینیز کی پختگی کی طرح، CNN کا اظہار یا سرگرمی اینٹی میلانوجینک ایجنٹوں کا نشانہ بن سکتی ہے [11]۔ تاہم، متعدد اینٹی میلانوجینک ایجنٹوں کے شدید ضمنی اثرات ہوتے ہیں، جیسے وٹیلگو [12,13]۔ لہذا محفوظ ڈی پگمینٹری مرکبات میں بہت دلچسپی ہے۔

یہاں، ہم نے B16 مورین میلانوما خلیوں اور عام انسانی میلانوسائٹس پر گلوکوز کے اینٹی میلانوجینک اثرات کی تحقیقات کی۔ اس کے علاوہ، ہم نے انسانی جلد کے مساوی ٹشو سیکشن داغ کا استعمال کرتے ہوئے ٹشو کے رنگ اور ایپیڈرمل کی حیثیت کی جانچ کی۔ ہمارے نتائج کی بنیاد پر، ہم تجویز کرتے ہیں کہ گلوکوز کی سفیدی کا اثر لییکٹک ایسڈ کی پیداوار پر منحصر ہے، جس کے نتیجے میں ٹائروسینیز غیر فعال ہو جاتا ہے۔

2. نتائج

2.1 B16 اور NHMs میں گلوکوز کی اینٹی میلانوجینک افادیت

گلوکوز کے اینٹی میلانوجینک اثر کی تحقیقات کے لیے، ہم نے دو قسم کے میلانوسائٹس، B16 میلانوما سیلز (ایک مورین میلانوما سیل لائن) اور نارمل ہیومن میلانوسائٹس (NHMs) کا استعمال کیا۔ سب سے پہلے، ہم نے تعین کیا کہ کیا گلوکوز B16 خلیوں کے لیے زہریلا تھا۔ گلوکوز نے B16 خلیوں میں 100 mM تک ارتکاز میں کوئی سائٹوٹوکسیٹی نہیں دکھائی، جیسا کہ شکل 1A میں دکھایا گیا ہے۔ cytotoxicity ڈیٹا کی بنیاد پر، B16 خلیات کو 72 گھنٹے کے لیے گلوکوز کی مختلف ارتکاز کے ساتھ میلانوسائٹ-حوصلہ افزائی ہارمون (MSH) کی موجودگی میں علاج کیا گیا، جو میلانوجینیسیس کا ایک محرک ہے۔ جیسا کہ شکل 1B میں دکھایا گیا ہے، گلوکوز نے خوراک پر منحصر انداز میں انٹرا سیلولر میلانین مواد کو واضح طور پر اور نمایاں طور پر نیچے سے منظم کیا۔ کوجک ایسڈ (KA) کو اینٹی میلانوجینیسیس کے لیے ایک حوالہ مرکب کے طور پر استعمال کیا جاتا تھا کیونکہ یہ اکثر جلد کو ہلکا کرنے والے کاسمیٹک اجزاء کے طور پر استعمال ہوتا ہے [1,3,4]۔ گلوکوز سے علاج شدہ خلیوں میں لائسیٹس کا رنگ کنٹرول خلیوں کے رنگ سے ہلکا تھا (شکل 1C)۔

اس کے علاوہ، ہم نے تصدیق کی کہ کلچر میڈیا میں چھپنے والے میلانین کی مقدار میں کمی آئی اور میڈیا کا رنگ روشن ہوا (شکل 1D)۔ اگلا، ہم نے تاریک رنگت والے NHMs پر گلوکوز کے اینٹی میلانوجینک اثر کی تحقیقات کی۔ 100 ایم ایم تک ارتکاز میں گلوکوز چار 4 دن تک سائٹوٹوکسک نہیں تھا (شکل 1E)۔ جب 4 دن تک NHMs کے گلوکوز ٹریٹمنٹ کے بعد میلانین کے مواد کا تعین کیا گیا تو ہم نے پایا کہ میلانین کا مواد خوراک پر منحصر انداز میں کم ہوا ہے (شکل 1F)۔ ایک ساتھ لیا جائے تو، یہ نتائج بتاتے ہیں کہ گلوکوز میلانوسائٹس میں میلانین کی ترکیب کو دباتا ہے۔

2.2 3D انسانی جلد کے مساوی گلوکوز کا سفید کرنے کا اثر

گلوکوز کی اینٹی میلانوجینک صلاحیت کی مزید وضاحت کرنے کے لیے، ہم نے رنگین 3D انسانی جلد کا ماڈل، میلانوڈرم استعمال کیا۔ جیسا کہ مواد اور طریقوں کے سیکشن میں بیان کیا گیا ہے، گلوکوز کو بنیادی طور پر میلانو ڈرم پر 18 دنوں کے لیے لاگو کیا گیا تھا، اور سیل کی قابل عملیت کا تعین CCK-8 پرکھ کے ذریعے کیا گیا تھا۔ جیسا کہ شکل 2A میں دکھایا گیا ہے، 18 دنوں تک گلوکوز کے علاج کے بعد کوئی ٹشو سائٹوٹوکسیٹی نہیں دیکھی گئی۔ فوٹو گرافی کے ذریعہ ٹشو کے رنگ کی تبدیلیوں کا اندازہ لگایا گیا۔ جیسا کہ شکل 2B میں دکھایا گیا ہے، گلوکوز سے علاج شدہ ٹشو فاسفیٹ بفرڈ نمکین (PBS) سے علاج شدہ ٹشو کے مقابلے میں ہلکا تھا۔ اس کے علاوہ، ہیماتوکسیلین اور eosin (H&E) کے داغوں سے یہ بات سامنے آئی کہ گلوکوز ٹشووں کے گرنے کا باعث نہیں بنتا، جبکہ فونٹانا-ماسن (F&M) داغ سے ظاہر ہوتا ہے کہ گلوکوز نے بیسل پرت میں ہائپر پیگمنٹڈ میلانوسائٹس (جیسا کہ تیر کے ذریعہ اشارہ کیا گیا ہے) کی تعداد میں کمی کی ہے (Figure2) .

میلانین کے مواد میں ہونے والی تبدیلیوں کی مزید تفتیش کے لیے، ہم نے PBS- اور گلوکوز سے علاج شدہ ٹشوز کی میلانوسائٹ لیئرز میں میلانین کے آٹو فلوروسینس سگنلز کا موازنہ کیا جو ٹو فوٹون ایکسائٹیشن فلوروسینس (TPEF) مائکروسکوپی کا استعمال کرتے ہوئے، جیسا کہ شکل 2D میں دکھایا گیا ہے۔ ان تصاویر کے تجزیے سے پتہ چلتا ہے کہ میلانین کی مقدار میں تقریباً 36 فیصد کمی واقع ہوئی ہے اور میلانوسائٹ سے بھرپور علاقے میں میلانین کے لیے TPEF سگنل کی شدت پی بی ایس سے علاج شدہ ٹشوز کے مقابلے گلوکوز سے علاج شدہ ٹشوز میں تقریباً 38 فیصد کم ہوئی ہے۔

شکل 2. انسانی جلد پر گلوکوز کا اثر میلانوڈرم کے برابر۔ (A) گلوکوز کے ساتھ علاج کیے جانے والے انسانی جلد کے مساوی ہونے کی اہلیت۔ (B) انسانی جلد کے مساوی (MelanoDerm؛ n=3) کو 18 دن تک گلوکوز کے ساتھ اوپری طور پر علاج کیا گیا، اور پھر تصویر کھنچوائی گئی۔ ∆L قدر PBS سے علاج شدہ ٹشو کے مقابلے ہلکی پن کی ڈگری کی نشاندہی کرتی ہے۔ (C) H&E اور F&M ٹشو سیکشنز کا داغ۔ سلائیڈوں کو ایک فارملڈہائڈ محلول میں طے کیا گیا تھا اور داغ لگانے کے لیے پیرافین ویکس میں سرایت کی گئی تھی (اسکیل بار، 5{{10}} µm)۔ سیاہ تیر روغن میلانوسائٹس کی نشاندہی کرتے ہیں۔ (D) میلانین امیجنگ (200 × 200 × 60 µm3 ) انسانی جلد کے مساوی TPEF مائکروسکوپی کا استعمال کرتے ہوئے انجام دی گئی۔ سیوڈو کلرڈ (سرخ) سگنل میلانین (اسکیل بار، 50 µm) کی نشاندہی کرتے ہیں۔ گراف میلانین کے حجم اور TPEF سگنلز کی مقدار کی نشاندہی کرتے ہیں۔ ڈیٹا کو کم از کم تین آزاد پیمائشوں (*p <0.05، ***p <0.001) کے اوسط ± SD کے طور پر ظاہر کیا جاتا ہے۔

2.3 میلانوسائٹس میں میلانوجینک پروٹین کے اظہار پر گلوکوز کا اثر

اس کے بعد، melanocytes میں گلوکوز کے depigmentation کے طریقہ کار کو واضح کرنے کے لیے، ہم نے B16 خلیات اور NHMs میں tyrosinase اور Tyrp-1 جیسے میلانوجینک انزائمز کے اظہار پر اس کے اثر کا اندازہ کیا۔ B16 خلیوں کو -MSH کی موجودگی میں اشارہ شدہ اوقات کے لئے گلوکوز کے ساتھ علاج کیا گیا۔ پھر، tyrosinase اور Tyrp-1 کی پروٹین کی سطح کا تعین مغربی بلٹ پرکھ (شکل 3A) کے ذریعے کیا گیا۔ ٹائروسینیز اور ٹائرپ-1 کے اظہار کی سطح کسی بھی وقت گلوکوز سے کم نہیں ہوئی تھی۔ مزید برآں، ایم ایس ایچ محرک B16 خلیات (شکل 3B) میں گلوکوز سے ٹائروسینیز کی نقل کی سطح متاثر نہیں ہوئی۔ B16 خلیوں کی طرح، tyrosinase، Tyrp-1، اور MITF کی پروٹین کی سطحوں کو گلوکوز کے ساتھ علاج کیے جانے والے NHM خلیوں میں گلوکوز (شکل 3C) سے روکا نہیں گیا تھا، اور ٹائروسینیز اور ٹائرپ-1 کی mRNA سطحیں بھی نہیں تھیں۔ کمی واقع ہوئی ہے، بلکہ گلوکوز (شکل 3D) سے قدرے بڑھ گئی ہے۔

شکل 3. B16 خلیوں اور NHMs میں میلانوجینک پروٹین کے اظہار پر گلوکوز کا اثر۔ (A، B) B16 خلیوں کا علاج 20 ایم ایم گلوکوز کی موجودگی یا غیر موجودگی میں اشارہ شدہ وقت کے لیے -MSH کے ساتھ کیا گیا۔ اس کے بعد، ویسٹرن بلاٹ (A) اور qRT-PCR (B) اسسز کیے گئے۔ (C) NHMs کا علاج 48 گھنٹے کے لیے گلوکوز کی نشاندہی شدہ ارتکاز کے ساتھ کیا گیا۔ اس کے بعد، ویسٹرن بلٹ پرکھ کی گئی۔ (D) NHMs کا علاج 50 ایم ایم گلوکوز کی موجودگی میں بتائے گئے وقت کے ساتھ کیا گیا۔ اس کے بعد، کیو آر ٹی پی سی آر اسسز کیے گئے۔ ڈیٹا کو کم از کم تین آزاد پیمائشوں کے اوسط ± SD کے طور پر ظاہر کیا جاتا ہے۔

2.4 ٹائروسینیز کی سرگرمی پر گلوکوز کا اثر

گلوکوز کے عمل کے طریقہ کار کی مزید وضاحت کرنے کے لیے، ہم نے جانچ کی کہ آیا اس کا مشروم ٹائروسینیز کی سرگرمی پر کوئی روکا اثر ہے۔ جیسا کہ شکل 4A میں دکھایا گیا ہے، ہم نے پایا کہ مشروم ٹائروسینیز کی سرگرمی پر گلوکوز کا کوئی روکا اثر نہیں ہے، جس سے ظاہر ہوتا ہے کہ گلوکوز براہ راست ٹائروسینیز کی سرگرمی کو متاثر نہیں کرتا ہے۔ اس کے بعد ہم نے B16 خلیوں اور NHMs دونوں سے گلوکوز سے علاج شدہ سیل لائسیٹس کا استعمال کرتے ہوئے کل انٹرا سیلولر ٹائروسینیز سرگرمی پرکھ کی۔ دلچسپ بات یہ ہے کہ انٹرا سیلولر ٹائروسینیز کی سرگرمی کو -MSH (شکل 4B) کی موجودگی میں گلوکوز سے علاج شدہ B16 خلیوں میں خوراک پر منحصر انداز میں روکا گیا تھا۔ NHMs میں، گلوکوز نے انٹرا سیلولر ٹائروسینیز سرگرمی (شکل 4C) کو بھی روک دیا۔ یہ اعداد و شمار اس امکان کی تائید کرتے ہیں کہ گلوکوز بالواسطہ طور پر میلانوسائٹس میں ٹائروسینیز کو غیر فعال کر دیتا ہے۔

شکل 4. ٹائروسینیز کی سرگرمی پر گلوکوز کا اثر۔ (A) سیل فری نظام میں مشروم ٹائروسینیز کی سرگرمی پر گلوکوز کا اثر۔ (B، C) سیلولر ٹائروسینیز سرگرمی پرکھ۔ (B) B16 خلیوں کا علاج 24 گھنٹے تک گلوکوز کی اشارے شدہ تعداد کے ساتھ کیا گیا۔ پھر، سیلولر ٹائروسینیز سرگرمی پرکھ کی گئی، جیسا کہ طریقوں کے سیکشن میں بیان کیا گیا ہے۔ (C) NHMs کو اشارہ شدہ وقت کے لئے 50 mM گلوکوز کے ساتھ علاج کیا گیا۔ پھر، سیلولر ٹائروسینیز سرگرمی پرکھ کی گئی، جیسا کہ طریقوں کے سیکشن میں بیان کیا گیا ہے۔ سیلولر ٹائروسینیز کی سرگرمی کل پروٹین کے مواد کے ذریعہ معمول پر لائی گئی تھی۔ ڈیٹا کو کم از کم تین آزاد پیمائشوں کے اوسط ± SD کے طور پر ظاہر کیا جاتا ہے (*p < 0۔{9}}5, **p <0.01, ***p <0.001)۔

2.5 گلوکوز سے علاج شدہ میلانوسائٹس میں لییکٹک ایسڈ کی پیداوار کے ذریعہ ٹائروسینیز کا غیر فعال ہونا

گلوکوز کو سیلولر میٹابولائٹ لییکٹیٹ میں تبدیل کیا جاتا ہے، جو کہ محلول میں لییکٹک ایسڈ ہوتا ہے اور جس کو پگمینٹری گھاووں کے علاج میں موثر بتایا گیا ہے [14,15]۔ لہذا، ہم نے قیاس کیا کہ گلوکوز میلانوسائٹس میں لییکٹک ایسڈ میں تبدیل ہوتا ہے اور لییکٹک ایسڈ کی بڑھتی ہوئی سطح ٹائروسینیز غیر فعال ہونے کے ذریعے میلانوجینیسیس کو روکتی ہے۔ اس مفروضے کا اندازہ کرنے کے لیے، ہم نے پہلے گلوکوز سے علاج شدہ میلانوسائٹس سے میڈیا میں لییکٹک ایسڈ کی پیداوار کا اندازہ کیا۔ جیسا کہ توقع کی گئی ہے، گلوکوز نے B16 سیلز کلچر میڈیا (شکل 5A) میں لییکٹک ایسڈ کے مواد کو نمایاں طور پر ریگولیٹ کیا۔ اس کے علاوہ، کیونکہ لییکٹک ایسڈ ٹائروسینیز کی سرگرمی کو براہ راست روکتا ہے [15]، ہم نے جائزہ لیا کہ آیا لییکٹک ایسڈ مشروم ٹائروسینیز کی سرگرمی کو دباتا ہے۔ جیسا کہ شکل 5B میں دکھایا گیا ہے، لییکٹک ایسڈ نے گلوکوز کے برعکس مشروم ٹائروسینیز کی سرگرمی کو ڈرامائی طور پر روک دیا۔ یہ نتائج بتاتے ہیں کہ گلوکوز کو لیکٹک ایسڈ میں تبدیل کرنے کا لییکٹک ایسڈ کے ذریعے ٹائروسینیز غیر فعال ہونے کے ذریعے اینٹی میلانوجینک اثر ہوتا ہے۔

شکل 5. گلوکوز کے ذریعے لییکٹیٹ کی پیداوار اور ٹائروسینیز کی سرگرمی پر لییکٹک ایسڈ کا اثر۔ (A) گلوکوز سے علاج شدہ B16 خلیوں میں لییکٹیٹ کی پیداوار۔ (A) B16 خلیوں کا علاج 3 d کے لئے گلوکوز کی نشاندہی شدہ تعداد کے ساتھ کیا گیا تھا۔ پھر، کلچرڈ میڈیا کا استعمال کرتے ہوئے ایک لییکٹیٹ پرکھ کی گئی، جیسا کہ طریقوں کے سیکشن میں بیان کیا گیا ہے۔ (B) ایک سیل فری نظام میں مشروم ٹائروسینیز کی سرگرمی پر لییکٹک ایسڈ کا اثر۔ ڈیٹا کو کم از کم تین آزاد پیمائشوں کے اوسط ± SD کے طور پر ظاہر کیا جاتا ہے (*p < 0۔{8}}5, **p < 0.01, ***p <0.001) .

3. بحث

شوگر یا چینی سے ماخوذ مواد اکثر جلد کی حفاظت اور جسمانی کنٹرول کے لیے کاسمیٹک اجزاء کے طور پر استعمال ہوتے ہیں۔ مثال کے طور پر، ریفینوز ایم ٹی او آر سے آزاد آٹوفجی کو بڑھاتا ہے اور UVB-شعاع شدہ کیراٹینوسائٹس میں سیل کی موت کو کم کرتا ہے، جس سے یہ ظاہر ہوتا ہے کہ قدرتی ایجنٹ ریفینوز فوٹوڈیمیج کو محدود کرنے میں ممکنہ قدر رکھتا ہے [16]۔ ٹریہلوز اور سوکروز ایک ایم ٹی او آر سے آزاد راستے کے ذریعے انسانی کیریٹنوسائٹس میں آٹوفجی کے ناول متحرک ہیں [17]۔ یہ نتائج keratinocytes میں آٹوفجی کے شوگر کی ثالثی کے ضابطے میں نئی ​​​​بصیرت فراہم کرتے ہیں۔ گلوکوز کے معاملے میں، ٹاپیکل گلوکوز کو ایٹوپک ڈرمیٹیٹائٹس اور کیراٹینوسائٹ کلچر کے ماؤس ماڈل میں کلاڈن-1 اور فلیگرین ایکسپریشن کو دلانے کے لیے دکھایا گیا تھا، جس سے یہ ظاہر ہوتا ہے کہ اس کا جلد کی رکاوٹ کے فنکشن کو ٹھیک کرکے سوزش کا اثر ہوتا ہے [18]۔ اس کے علاوہ، گلوکوز پھیلاؤ کو روکتا ہے اور جلد کیریٹینوسائٹس کے فرق کو بڑھاتا ہے [19]۔ لہذا، گلوکوز ایپیڈرمل فزیالوجی کے مختلف پہلوؤں کو منظم کرتا ہے، جیسے کہ جلد کی رکاوٹ کے افعال اور کیراٹینوسائٹ ہائیڈریشن کی سطح۔

شوگر کئی مختلف میکانزم کے ذریعے ڈیپگمینٹری ایجنٹ کے طور پر کام کر سکتی ہے جس میں ٹائروسینیز شامل ہے۔ مثال کے طور پر، کچھ ایجنٹ ٹائروسینیز کی پختگی کو روکتے ہیں، جبکہ دوسرے ایجنٹ ٹائروسینیز جین کے اظہار یا سرگرمی کو روکتے ہیں [5,8–10]۔ تاہم، کچھ مطالعات نے گلوکوز کے depigmentation اثرات کے تحت میکانزم کی تحقیقات کی ہیں۔

melanogenesis پر گلوکوز کے اثر کا تعین کرنے کے لیے، ہم نے پہلے لیور X ریسیپٹرز (LXRs) پر توجہ مرکوز کی، جو کہ ligand-activated جوہری ریسیپٹرز ہیں جو لپڈ میٹابولزم اور کولیسٹرول ہومیوسٹاسس میں اہم کردار ادا کرتے ہیں [20]۔ ہم نے پایا کہ لیور ایکس ریسیپٹر ایکٹیویشن ایکسٹرا سیلولر سگنل ریگولیٹڈ کناز (ERK) میڈیٹیڈ مائکروفتھلمیا سے وابستہ ٹرانسکرپشن فیکٹر (MITF) انحطاط [21] کی سرعت کے ذریعے میلانوجینیسیس کو روکتا ہے۔ مزید برآں، گلوکوز ایک endogenous LXR ligand ہے [22]۔ اس طرح، ہم نے قیاس کیا کہ LXR پر منحصر راستے کو چالو کرنے کی وجہ سے گلوکوز میں اینٹی میلانوجینک اثرات ہوتے ہیں۔ تاہم، جیسا کہ شکل 3C میں دکھایا گیا ہے، گلوکوز نے ٹائروسینیز یا MITF کے اظہار کی سطح کو تبدیل نہیں کیا، حالانکہ LXR ایکٹیویشن نے میلانوسائٹس میں ان پروٹینوں کے اظہار کی سطح کو کم کر دیا۔

لہذا، ہم نے یہ نتیجہ اخذ کیا کہ گلوکوز کے LXR ایکٹیویشن سے آزاد میلانوسائٹس پر ڈپگمنٹنگ اثرات تھے۔

گلوکوز توانائی کی پیداوار کے لیے بنیادی سبسٹریٹ ہے، اور اسے کئی خامروں کے سیریل ری ایکشنز کے ذریعے ہائیڈولائز کیا جاتا ہے، جسے گلائکولائسز کہا جاتا ہے۔ متعدد مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ گلائکولائسز کی صرف ایک ہی مصنوعات ہوتی ہے، لیکٹک ایسڈ، خواہ ایروبک یا اینیروبک حالات میں۔ ایروبک حالات (O2) کے تحت، لییکٹیٹ کو mitochondrial lactate dehydrogenase (MLD) کے سبسٹریٹ کے طور پر استعمال کیا جاتا ہے۔ LDHs اسے پائروویٹ میں تبدیل کرتے ہیں جو ٹرائی کاربو آکسیلک ایسڈ (TCA) سائیکل میں داخل ہوتا ہے۔ اینیروبک حالات (N2) کے تحت، لییکٹیٹ سائٹوسول میں جمع ہوتا ہے۔ لہٰذا، گلائکولیسس کا راستہ گلوکوز سے اس کے سبسٹریٹ کے طور پر شروع ہوتا ہے اور لییکٹیٹ کی پیداوار کے ساتھ اس کی بنیادی پیداوار کے طور پر ختم ہوتا ہے [23]۔ اس کے علاوہ، David et al. گلوکوز کے اس حصے کی پیمائش کی جو عام انسانی میلانوسائٹ میں لییکٹک ایسڈ یا پائروویٹ میں تبدیل ہوا [24]۔ گلوکوز کے زیادہ تر میٹابولائٹس پائروویٹ کے بجائے لیکٹک ایسڈ تھے۔

لیکٹک ایسڈ ایک الفا ہائیڈروکسی ایسڈ (AHA) ہے؛ یہ تیزاب بڑے پیمانے پر کاسمیٹک فارمولیشنوں میں سطحی چھیلنے والے ایجنٹوں کے طور پر استعمال ہوتے ہیں [25]۔ اس کے علاوہ، لییکٹک ایسڈ ٹائروسینیز کی سرگرمی کو براہ راست روک کر میلانین کی تشکیل کو روکتا ہے، یہ اثر اس کی تیزابیت سے آزاد ہے، جس کا مطلب یہ ہے کہ روغن کے گھاووں پر لییکٹک ایسڈ کے اثرات نہ صرف ایپیڈرمل سیل ٹرن اوور کے تیز ہونے کی وجہ سے ہوتے ہیں بلکہ میلانین کی تشکیل کو براہ راست روکتے ہیں۔ میلانوسائٹس [15]۔ اس طرح، ہم نے استدلال کیا کہ گلوکوز لییکٹک ایسڈ کی پیداوار کے ذریعے اپنا اینٹی میلانوجینک اثر ڈال سکتا ہے کیونکہ گلوکوز کو لیکٹک ایسڈ میں تبدیل کیا جا سکتا ہے۔ جیسا کہ توقع کی گئی ہے، ہم نے پایا کہ گلوکوز کے علاج کے نتیجے میں میلانوسائٹس (شکل 5A) میں لییکٹک ایسڈ کی پیداوار ہوتی ہے۔

اس کے علاوہ، ہم نے تصدیق کی کہ لیکٹک ایسڈ طاقتور اور براہ راست ٹائروسینیز کی سرگرمی کو روکتا ہے (شکل 5B)۔ Usuki et al. یہ بھی دریافت کیا کہ لییکٹک ایسڈ نے B16 خلیوں اور انسانی HM3KO خلیوں میں انٹرا سیلولر ٹائروسینیز کی سرگرمی کو کم کیا [15]۔ رپورٹ میں، mRNA اور tyrosinase اور Tyrp-1 کی پروٹین کی سطح لیکٹک ایسڈ سے متاثر نہیں ہوئی۔ ایک ساتھ، یہ اعداد و شمار بتاتے ہیں کہ گلوکوز لییکٹک ایسڈ کی پیداوار کو بڑھاتا ہے اور یہ لییکٹک ایسڈ جین کے اظہار کی سطح کو متاثر کیے بغیر براہ راست ٹائروسینیز کی سرگرمی کو روکتا ہے، یہ ظاہر کرتا ہے کہ گلوکوز کا میلانوسائٹس میں اینٹی میلانوجینک اثر ہوتا ہے جس کا انحصار لیکٹک ایسڈ کی پیداوار پر منحصر بالواسطہ ٹائروسینیز غیر فعال ہونے کے ذریعے ہوتا ہے۔ تاہم، ڈیپگمنٹیشن میں لییکٹک ایسڈ اور گلوکوز کے کردار کی توثیق کرنے کے لیے مزید تجربات ضروری ہیں۔

اس مطالعے سے حاصل کردہ اجتماعی اعداد و شمار ابتدائی شواہد فراہم کرتے ہیں جو ٹاپیکل گلوکوز کی افادیت کو ایک مؤثر سفید کرنے کے ساتھ ساتھ ایک موئسچرائزنگ ریجنٹ کے طور پر بھی فراہم کرتے ہیں جو کاسمیٹکس اور ادویاتی فارمولیشنز میں محفوظ طریقے سے استعمال کیے جا سکتے ہیں۔

4. مواد اور طریقے

4.1 مواد

D-گلوکوز، -MSH، کوجک ایسڈ (KA)، L-tyrosine، L-DOPA، اور لیکٹک ایسڈ سگما-الڈرچ (سینٹ لوئس، MO، USA) سے خریدے گئے تھے۔ ٹائروسینیز اور ایکٹین کے خلاف اینٹی باڈیز ابکم (کیمبرج، یوکے) سے خریدی گئیں۔ ٹائرپ کے خلاف اینٹی باڈی -1 سانتا کروز بائیو ٹیکنالوجی (CA، USA) سے خریدی گئی تھی۔ ایم آئی ٹی ایف کے خلاف اینٹی باڈی پروٹینٹیک (شہر، IL، USA) سے خریدی گئی تھی۔

4.2 سیل کلچر اور قابل عمل پرکھ

ہم نے امریکن ٹائپ کلچر کلیکشن (ATCC, Manassas, VA, USA) سے B16 murine melanoma خلیات، Dulbecco کے ترمیم شدہ Eagle's Medium (DMEM)، اور fetal bovine serum (FBS) خریدے۔ B16 خلیوں کو DMEM میں کلچر کیا گیا تھا جس میں 4500 mg/L ہائی گلوکوز (ATCC 30-2002) تھا جیسا کہ مینوفیکچرر (ATCC) نے 5 فیصد FBS کے ساتھ تجویز کیا تھا، اور 95 فیصد ہوا پر مشتمل مرطوب ماحول میں 37 ◦C پر انکیوبیٹ کیا گیا تھا۔ 10 فیصد CO2۔ گہرے رنگ کے پگمنٹڈ پرائمری NHMs کو تھرمو فشر سائنٹیفک (#C2025C؛ والتھم، MA، USA) سے خریدا گیا تھا۔ خلیوں کو میڈیم 254 (#M254500) میں ہیومن میلانوسائٹ گروتھ سپلیمنٹ (#S0025) کے ساتھ مکمل کیا گیا تھا اور 5 فیصد CO2 ماحول کے تحت 37 ◦C پر انکیوبیٹ کیا گیا تھا۔ تجربات کے لیے، حصئوں 4 اور 7 کے درمیان بنیادی NHM استعمال کیے گئے تھے۔ سیل کاؤنٹنگ کٹ-8 (CCK-8) کا استعمال کرتے ہوئے مہذب خلیوں کی عملداری کا اندازہ لگایا گیا جیسا کہ مینوفیکچرر (DOJINDO, Tokyo, Japan) نے بیان کیا ہے۔

4.3 میلانین مواد کی پیمائش

میلانین کے مواد کا تعین جیسا کہ پچھلی رپورٹس میں بیان کیا گیا ہے [2–4]۔ مختصراً، B16 خلیوں کا علاج 72 گھنٹے کے لیے -MSH (200 nM) کی موجودگی میں گلوکوز کی نشاندہی شدہ ارتکاز کے ساتھ کیا گیا۔ NHMs کا علاج 4 دن تک گلوکوز کی نشاندہی شدہ ارتکاز کے ساتھ کیا گیا۔ اس کے بعد، تمام خلیوں کو فاسفیٹ بفرڈ نمکین (PBS) سے دھویا گیا اور 1 N NaOH میں 60 ◦C پر 1 گھنٹے کے لیے تحلیل کر دیا گیا۔ سیل لائسیٹس کو ایک 96-کنویں پلیٹ میں منتقل کیا گیا، اور جاذبیت کو 405 nm پر ناپا گیا۔ قدروں کو ہر نمونے میں اچھی طرح سے پروٹین کی تعداد کی بنیاد پر معمول بنایا گیا تھا۔

4.4 مشروم ٹائروسینیز ایکٹیویٹی پرکھ

ہم نے مشروم ٹائروسینیز کی سرگرمی پر گلوکوز کی نشاندہی شدہ تعداد کے براہ راست اثرات کی تحقیقات کی۔ مختصراً، گلوکوز پر مشتمل 100 µL فاسفیٹ بفر مشروم ٹائروسینیز (10 یونٹ/کنواں) کے ساتھ ملایا گیا اور آست پانی میں 50 µL 0.03 فیصد L-tyrosine یا L-DOPA کے ساتھ ملایا گیا۔ اس کے بعد، مرکب کو 10 منٹ کے لئے 37 ◦C پر ایک ساتھ لگایا گیا تھا، اور جذب 405 nm پر ماپا گیا تھا۔ کوجک ایسڈ (KA)، ایک معروف اینٹی ٹائروسینیز ایجنٹ، ایک حوالہ مرکب کے طور پر استعمال ہوتا تھا۔

4.5 انٹرا سیلولر ٹائروسینیز ایکٹیویٹی پرکھ

مختصراً، B16 خلیات یا NHMs کا علاج اشارے شدہ اوقات کے لیے گلوکوز کے اشارے کردہ ارتکاز کے ساتھ کیا گیا۔ پھر، خلیوں کو PBS سے دھویا گیا اور 50 mM فاسفیٹ بفر (pH 6.8) میں انکیوبیشن کے ذریعے لیس کیا گیا جس میں 1 فیصد Triton X-100 اور 0.1 mM phenylmethyl-sulfonyl fluoride تھا۔ پھر سیلولر لائسیٹس کو 20 منٹ کے لیے 12،{10} rpm پر 4 ◦C پر سینٹرفیوج کیا گیا۔ سیلولر ٹائروسینیز پر مشتمل سپرنٹنٹ جمع کیا گیا تھا اور پروٹین کے مواد کو معمول پر لانے کے لئے طے کیا گیا تھا۔ سیلولر ایکسٹریکٹ کو فاسفیٹ بفر میں L-DOPA کے ساتھ لگایا گیا تھا اور 30 ​​منٹ کے اندر اندر 405 nm پر جاذبیت کی پیمائش کرکے ڈوپاکروم کی تشکیل کی نگرانی کی گئی تھی۔

4.6 آر این اے تنہائی اور ریئل ٹائم کوانٹیٹیو ریورس ٹرانسکرپشن-پولیمریز چین ری ایکشن (qRT-PCR)

منتخب جینوں کے متعلقہ mRNA اظہار کا تعین کرنے کے لیے، مینوفیکچرر کی ہدایات کے مطابق کل RNA کو TRIzol (Invitrogen, CA, USA) کے ساتھ الگ تھلگ کیا گیا تھا، اور 4 µg RNA کو RT-premix (Bioneer, Seoul, South) کا استعمال کرتے ہوئے cDNA میں الٹا نقل کیا گیا تھا۔ کوریا)۔ مقداری PCR ABI 7500 فاسٹ ریئل ٹائم پی سی آر سسٹم (اپلائیڈ بایو سسٹم، فوسٹر سٹی، CA، USA) کا استعمال کرتے ہوئے انجام دیا گیا۔ tyrosinase اور Tyrp-1 کے لیے qRT-PCR پرائمر سیٹ اپلائیڈ بایو سسٹم سے خریدے گئے تھے، اور TaqMan Gene Express Assay کٹس (Applied Biosystems) کو بڑھاوا دینے کے لیے استعمال کیا گیا تھا۔ ٹارگٹ جین ایکسپریشن کو ہاؤس کیپنگ جین انکوڈنگ رائبوسومل پروٹین لیٹرل اسٹالک سبونائٹ P0 (RPLP0) کے مطابق معمول بنایا گیا تھا۔ متعلقہ مقدار سازی کارخانہ دار کی ہدایات کے مطابق تقابلی ∆∆Ct طریقہ استعمال کرتے ہوئے کی گئی۔

4.7 مغربی بلاٹنگ

خلیوں کو دو بار کولڈ پی بی ایس سے دھویا گیا اور پھر آئس کولڈ موڈیفائیڈ RIPA بفر (سیل سگنلنگ ٹیکنالوجی، MA، USA) میں پروٹیز انابیٹرز (Calbiochem, La Jolla, CA, USA) پر مشتمل ہے۔ کل پروٹین کی حراستی کا تعین کیا گیا تھا، اور پروٹین کو SDS-PAGE کے ذریعے 4-12 فیصد گریڈینٹ Bis-Tris جیلوں (تھرمو فشر سائنٹیفک، والتھم، MA، USA) پر حل کیا گیا تھا، جو نائٹرو سیلولوز جھلیوں (تھرمو فشر سائنٹیفک) میں منتقل کیے گئے تھے۔ منتقلی کے بعد، جھلیوں کو 5 فیصد بلاک کرنے والے محلول میں بلاک کر دیا گیا۔ جھلیوں کو 24 گھنٹے کے لیے 4 ◦C پر پرائمری اینٹی باڈیز کے ساتھ انکیوبیٹ کیا جاتا تھا، ٹریس بفرڈ نمکین سے دھویا جاتا تھا جس میں 0.1 فیصد ٹوین-20 (TBST) ہوتا تھا، اور 1 گھنٹے کے لیے پیرو آکسیڈیز کنجوگیٹڈ سیکنڈری اینٹی باڈیز کے سامنے آتے تھے۔ کمرے کے درجہ حرارت پر. جھلیوں کو ٹی بی ایس ٹی سے تین بار دھویا گیا۔ ویسٹرن بلاٹنگ ای سی ایل ریجنٹ (جی ای ہیلتھ کیئر، ہیٹ فیلڈ، یو کے) کا استعمال کرتے ہوئے ایک کیمیلومینسنٹ سگنل تیار کیا گیا تھا۔

4.8 تین جہتی (3D) انسانی جلد کے برابر

ہم نے MelanoDerm (MEL-300-B; MatTek Corp., Ashland, MA, USA) کو انسانی جلد کے ٹشو ماڈل کے طور پر استعمال کیا۔ یہ قابل عمل، دوبارہ تشکیل شدہ، 3D انسانی جلد کے مساوی سیاہ عطیہ دہندگان سے حاصل کیا گیا تھا اور اس میں نارمل میلانوسائٹس اور کیراٹینوسائٹس شامل ہیں۔ MelanoDerm EPI-100-NMM-113 میڈیم (MatTek Corp, Ashland, MA, USA) میں ہوا کے مائع انٹرفیس پر اگایا گیا تھا۔ گلوکوز کے علاج سے پہلے، بقایا مرکبات کو دور کرنے کے لیے ٹشوز کو 1 ملی لیٹر پی بی ایس سے دھویا جاتا تھا۔ گلوکوز کو پی بی ایس میں تحلیل کیا گیا تھا۔ گلوکوز کی حتمی حراستی 2 فیصد تھی۔ کنٹرول کے نمونے کا علاج صرف پی بی ایس کے ساتھ کیا گیا تھا۔ میلانوڈرم پر گلوکوز کا اطلاق 1، 4، 6، 8، 11، 13 اور 15 دنوں میں کیا گیا تھا۔ 18 دنوں کے بعد، میلانوڈرم کے ٹشوز کو 4 فیصد بفرڈ فارملڈہائیڈ میں طے کیا گیا، پیرافین میں سرایت کر کے، 3 µm کی موٹائی تک کاٹا گیا، اور تابع کیا گیا۔ H&E اور F&M سٹیننگ تک۔ بافتوں کے نمونوں کی قابل عملیت کا اندازہ سیل کاؤنٹنگ کٹ-8 (CCK-8) کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا جیسا کہ مینوفیکچرر (DOJINDO, Tokyo, Japan) نے بیان کیا ہے۔ میلانوڈرم کی رنگت کا اندازہ L* قدر میں تبدیلی کا موازنہ کرکے کیا گیا۔

4.9 دو فوٹون ایکسائٹیشن فلوروسینس (TPEF) امیجنگ

3D انسانی جلد کے مساوی میں میلانین کی تقسیم کو دیکھنے کے لیے، ہم نے TPEF امیجنگ کی، جیسا کہ ہماری پچھلی رپورٹوں میں بیان کیا گیا ہے [3,4]۔ مختصراً، ہر میلانو ڈرم کی تیاری کو 4 فیصد فارملین میں 24 گھنٹے کے لیے 4 ◦C پر طے کیا گیا اور پھر PBS/0.1 فیصد BSA (بووائن سیرم البومین، مرک، برانچبرگ، NJ، USA) سے دھویا گیا۔ ٹی پی ای ایف کی تصاویر میلانوسائٹ پرت میں انٹرا سیلولر میلانین کی پیمائش کرنے کے لئے بیسل پرت سے حاصل کی گئیں۔ پیمائش کے حجم میں میلانین کے لیے متعلقہ TPEF سگنل کی شدت کو Image-Pro پریمیئر 3D سافٹ ویئر (Media Cybernetics, Inc., Bethesda, MD, USA) کا استعمال کرتے ہوئے مقدار درست کی گئی۔

4.10 ایل لییکٹیٹ پرکھ

B16 سیلز کو 1 پر سیڈ کیا گیا تھا۔ گلوکوز کے ساتھ 3 دن تک علاج کرنے کے بعد، کارخانہ دار کے پروٹوکول کے مطابق L-lactate Colorimetric Asay Kit (Abcam، ab65331، کیمبرج، UK) کا استعمال کرتے ہوئے ایکسٹرا سیلولر لییکٹیٹ کی سطحوں کی مقدار درست کی گئی۔

4.11۔ شماریاتی تجزیہ

ڈیٹا کو ذرائع کے طور پر ظاہر کیا جاتا ہے ± SDs (معیاری انحراف)، اور شماریاتی اہمیت کا تعین طالب علم کے ٹی ٹیسٹ کے ذریعے کیا جاتا ہے۔ ایک p-value < 0.05 کو شماریاتی لحاظ سے اہم سمجھا جاتا تھا۔

مصنف کی شراکتیں:

تصوراتی، H.-JK، JL، اور CSL؛ ڈیٹا کیوریشن، SHL؛ تحقیقات، SHL؛ طریقہ کار، SHL، I.-HB، اور E.-SL؛ نگرانی، JL، اور CSL؛ تحریر - اصل مسودہ، SHL، اور CSL؛ تحریر — جائزہ اور ترمیم، JL تمام مصنفین نے مخطوطہ کے شائع شدہ ورژن کو پڑھا اور اس سے اتفاق کیا ہے۔

فنڈنگ:

اس تحقیق کو بنیادی سائنس ریسرچ پروگرام نے نیشنل ریسرچ فاؤنڈیشن آف کوریا (NRF) کے ذریعے مالی اعانت فراہم کی تھی جو وزارت تعلیم (گرانٹ نمبر: 2018R1D1A1B07049402) کے ذریعے فراہم کی گئی تھی۔

مفادات میں تضاد:

مصنفین مفادات کے تصادم کا اعلان نہیں کرتے ہیں۔

مخففات

ایم ایس ایچ - میلانوسائٹ محرک ہارمون

ٹائرپ-1 ٹائروسینیز سے متعلق پروٹین 1

MITF مائکروفتھلمیا سے وابستہ ٹرانسکرپشن عنصر

NHMs نارمل انسانی میلانوسائٹس

TPEF دو فوٹوون ایکسائٹیشن فلوروسینس

LXR جگر X رسیپٹر

AHAs الفا ہائیڈروکسی ایسڈ

H&E hematoxylin اور eosin

ایف اینڈ ایم فونٹانا میسن

حوالہ جات

1. سویل ویل، ایچ۔ لاٹیمر، جے. Haywood, RM; Birch-Machin, MA UVA/UVB اور ہائیڈروجن پیرو آکسائیڈ سے متاثرہ سیلولر اور مائٹوکونڈریل ROS کی پیداوار اور انسانی میلانوما خلیوں میں مائٹوکونڈریل ڈی این اے کو پہنچنے والے نقصان میں میلانین کے کردار کی تحقیقات کر رہا ہے۔ فری ریڈک۔ بائول میڈ. 2012، 52، 626–634۔ [کراس ریف]

2. لی، سی ایس؛ جنگ، ڈبلیو ایچ؛ پارک، ایم. جنگ، K.؛ بیک، ایچ ایس؛ جو، وائی ایچ؛ پارک، YH؛ Lim, KM ایک ناول ایڈمینٹائل بینزائل بینزامائڈ ڈیریویٹیو، AP736، CAMP-PKA-CREB-Activeated microphthalmia-Associated transscription factor اور tyrosinase expression کی روک تھام کے ذریعے melanogenesis کو دباتا ہے۔ ختم ڈرمیٹول 2013، 22، 762–764۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

3. لی، جے ایچ؛ لی، ای ایس؛ Bae, IH; ہوانگ، جے اے؛ کم، ایس ایچ؛ کم، ڈی وائی؛ پارک، NH؛ Rho, HS; کم، وائی جے؛ اوہ، ایس جی؛ ET رحمہ اللہ تعالی. میلانوسائٹس اور تین جہتی انسانی جلد کے مساوی میں میلاسولوف (3,4,5-Trimethoxycinnamate Thymol Ester) کی اینٹی میلانوجینک افادیت۔ سکن فارماکول۔ فزیول 2017، 30، 190-196۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

4. بی اے، آئی ایچ؛ لی، ای ایس؛ یو، جے ڈبلیو؛ لی، ایس ایچ؛ کو، جے وائی؛ کم، وائی جے؛ لی، ٹی آر؛ کم، ڈی وائی؛ Lee, CS Mannosylerythritol lipids عام انسانی میلانوسائٹس میں ERK-CREB-MITF-Tyrosinase سگنلنگ کو دبانے اور تین جہتی انسانی جلد کے مساوی میلانوجینیسیس کو روکتے ہیں۔ ختم ڈرمیٹول 2019، 28، 738–741۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

5. بن، بی ایچ؛ کم، ایس ٹی؛ بھین، جے؛ لی، ٹی آر؛ چو، ای جی شوگر پر مبنی اینٹی میلانوجینک ایجنٹوں کی نشوونما۔ انٹر جے مول سائنس 2016، 17، 583۔ [کراس ریف]

6. کماری، ایس. Tien Guan Thng, S.; کمار ورما، این. گوتم، HK میلانوجینیسیس انحیبیٹرز۔ ایکٹا جلد وینیرول۔ 2018، 98، 924-931۔ [کراس ریف]

7. اینڈو، ایچ۔ کنڈوہ، ایچ. Ichihashi، M.؛ سماعت، وی جے ٹائروسینیز کے کوالٹی کنٹرول کے ذریعے میلانین بائیو سنتھیسس کے روکنے والوں کی شناخت کے لیے اپروچ کرتا ہے۔ J. انویسٹ ڈرمیٹول۔ 2007، 127، 751–761۔ [کراس ریف]

8. ہوانگ، جے ایس؛ لی، ایچ وائی؛ لم، ٹی وائی؛ کم، میرا؛ یون، TJ N-acetylglucosamine کے ذریعے tyrosinase glycosylation کی رکاوٹ اور گنی پگ کی جلد اور انسانی جلد میں اس کے depigmenting اثرات۔ J. ڈرمیٹول سائنس 2011، 63، 199–201۔ [کراس ریف]

9. لی، سی ایس؛ بیک، ایچ ایس؛ Bae, IH; چوئی، ایس جے؛ کم، وائی جے؛ لی، جے ایچ؛ کم، B16 مورین میلانوما سیلز میں ٹائروسینیز ریگولیشن کے ذریعے گیلیکٹورونک ایسڈ کی ڈیپگمنٹیشن افادیت اور تین جہتی انسانی جلد کے مساوی۔ کلین ختم ڈرمیٹول 2018، 43، 708–712۔ [کراس ریف]

10. ناکامورا، ایس. کونیکاتا، ٹی. ماتسوموتو، وائی۔ حنایا، ٹی. Harashima, A.; نشیموتو، ٹی۔ Ushio, S. ماؤس میلانوما سیلز پر نان سائکلوڈیکٹرن سائکلک کاربوہائیڈریٹ کے اثرات: ہائپو پیگمنٹڈ شوگر کی ایک نئی قسم کی خصوصیت۔ PLOS ONE 2017, 12, e0186640۔ [کراس ریف]

11. خان، قدرتی وسائل سے ایم ٹی ناول ٹائروسینیز انابیٹرز – ان کی کمپیوٹیشنل اسٹڈیز۔ کرر میڈ. کیم 2012، 19، 2262–2272۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

12. سولانو، ایف۔ بریگنٹی، ایس. Picardo، M. Ghanem، G. Hypopigmentingants: حیاتیاتی، کیمیائی اور طبی پہلوؤں پر ایک تازہ ترین جائزہ۔ روغن۔ سیل Res. 2006، 19، 550-571۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

13. لی، سی ایس؛ جو، وائی ایچ؛ بیک، ایچ ایس؛ پارک، ایم. کم، جے ایچ؛ شن، ایچ جے؛ پارک، NH؛ لی، جے ایچ؛ پارک، YH؛ شن، ایس ایس؛ ET رحمہ اللہ تعالی. پانچ ڈی پگمینٹری مرکبات، روڈوڈینڈرون، رسبری کیٹون، مونوبینزون، روسنول، اور اے پی 736 کے میلانوجینیسیس اور انسانی ایپیڈرمل میلانوسائٹس کی عملداری پر مختلف اثرات۔ ختم ڈرمیٹول 2016، 25، 44–49۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

14. ملوکوتلا، قبل مسیح؛ خان، ایس. لینج، اے. ہو، ممالیہ سیل کلچر میں WS گلوکوز میٹابولزم: ونٹیج پاتھ ویز کو ٹویک کرنے کے لیے نئی بصیرتیں۔ رجحانات. بائیو ٹیکنالوجی 2010، 28، 476–484۔ [کراس ریف]

15. Usuki، A.؛ اوہاشی، اے. ساتو، ایچ. Ochiai, Y.; Ichihashi، M.؛ Funasaka, Y. میلانوما خلیوں میں میلانین کی ترکیب پر گلائکولک ایسڈ اور لیکٹک ایسڈ کا روک تھام کا اثر۔ ختم ڈرمیٹول 2003، 12، 43–50۔ [کراس ریف]

16. لن، ایس. لی، ایل. لی، ایم؛ گو، ایچ۔ چن، X. Raffinose آٹوفیجی کو بڑھاتا ہے اور UVB-Irradiated keratinocytes میں سیل کی موت کو کم کرتا ہے۔ جے فوٹوکیم۔ فوٹو بائیول۔ B 2019, 201, 111653۔ [کراس ریف]

17. چن، ایکس۔ لی، ایم؛ لی، ایل. Xu, S.; ہوانگ، ڈی. جو، ایم؛ ہوانگ، جے؛ چن، کے؛ Gu, H. Trehalose، sucrose، اور raffinose ایم ٹی او آر-انڈیپنڈنٹ پاتھ وے کے ذریعے انسانی کیراٹینوسائٹس میں آٹوفجی کے نئے متحرک کار ہیں۔ سائنس Rep. 2016, 6, 28423۔ [CrossRef]

18. یمادا، K.؛ Matsushita, K.; وانگ، جے؛ Kanekura، T. ٹاپیکل گلوکوز Atopic dermatitis کے ماؤس ماڈل میں اور کیراٹینوسائٹ کلچر میں Claudin-1 اور Filaggrin کے اظہار کی حوصلہ افزائی کرتا ہے، جلد کی رکاوٹ کے فنکشن کی مرمت کرکے سوزش مخالف اثرات مرتب کرتا ہے۔ ایکٹا جلد وینیرول۔ 2018، 98، 19-25۔ [کراس ریف]

19. سپراوچیکوف، این. سیزیاکوف، جی. گارٹسبین، ایم؛ Accili, D.; Tennenbaum, T.; Wertheimer، E. جلد کیریٹینوسائٹس پر گلوکوز کے اثرات: ذیابیطس کی جلد کی پیچیدگیوں کے مضمرات۔ ذیابیطس 2001، 50، 1627–1635۔ [کراس ریف]

20۔ کاسٹریلو، اے۔ ٹونٹونوز، پی. میکروفیج بائیولوجی میں نیوکلیئر ریسیپٹرز: لپڈ میٹابولزم اور سوزش کے سنگم پر۔ انو Rev. Cell دیو بائول 2004، 20، 455–480۔ [کراس ریف]

21. لی، سی ایس؛ پارک، ایم. ہان، جے؛ لی، جے ایچ؛ Bae, IH; چوئی، ایچ. بیٹا، ای ڈی؛ پارک، YH؛ لم، KM لیور ایکس ریسیپٹر ایکٹیویشن ERK-Mediated MITF انحطاط کے سرعت کے ذریعے میلانوجینیسیس کو روکتا ہے۔ J. سرمایہ کاری ڈرمیٹول 2013، 133، 1063–1071۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

22. Mitro، N.؛ مک، PA؛ ورگاس، ایل۔ گوڈیو، سی۔ ہیمپٹن، ای. مولٹینی، وی. Kreusch, A.; Saez, E. نیوکلیئر ریسیپٹر LXR ایک گلوکوز سینسر ہے۔ فطرت 2007، 445، 219–223۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

23. Schurr، A. کاربوہائیڈریٹ؛ IntechOpen: لندن، برطانیہ، 2017؛ صفحہ 21-35۔

24. سکاٹ، ڈی. رچرڈسن، اے. فلپ، ایف. Knutzen، C.؛ چیانگ، جی؛ Ronai، Z.؛ Osterman, A.; سمتھ، جے میلانوما سیل لائنوں کی تقابلی میٹابولک فلوکس پروفائلنگ: واربرگ اثر سے آگے۔ J. Biol کیم 2011، 286، 42626–42634۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

25. تانگ، ایس سی؛ یانگ، JH جلد پر الفا ہائیڈروکسی ایسڈز کے دوہری اثرات۔ مالیکیولز 2018، 23، 863۔ [کراس ریف]

For more information:1950477648nn@gmail.com