Cistanche کس طرح ادراک کو بہتر بناتا ہے اور افسردگی کو کم کرتا ہے۔
Mar 24, 2022
رابطہ:joanna.jia@wecistanche.com/ واٹس ایپ: 008618081934791
ڈونگ فانگ وانگ، 1 ہائیزن وانگ، 2 اور لی گو 2
دس فیصد سے زیادہ لوگ زندگی بھر میں ڈپریشن اور اس سے متعلقہ ذہنی عوارض کی کم از کم ایک قسط کا شکار ہوتے ہیں، اور ڈپریشن اور اس سے متعلقہ ذہنی عوارض دنیا کے سب سے بڑے عوامی صحت کے مسائل میں سے ایک ہیں۔ ایک سے زیادہ نظام کا نظریہ یہ رکھتا ہے کہ ایک سے زیادہ نظاموں کی بے ضابطگی ڈپریشن اور متعلقہ ذہنی عوارض کے روگجنن کو بنیاد بناتی ہے، اور ایک سے زیادہ نظام کے dysregulation تھیوری پر مبنی نئے علاج کی فوری ضرورت ہے۔ اس مطالعہ میں، جڑی بوٹی Cistanche deserticola YCMa سے کاڑھی کا انسداد اثر اثر اورCistanchetubulosa کی جانچ پڑتال کی گئی تھی. جڑی بوٹیCistancheکاڑھی نے ماؤس ٹیل سسپنشن ٹیسٹ میں عدم استحکام کی مدت کو نمایاں طور پر کم کیا۔ مورس واٹر میز ٹیسٹ میں جڑی بوٹیوں کے کاڑھے سے علاج کیے گئے چوہوں نے مقامی سیکھنے اور یادداشت کی بہتر صلاحیت کو ظاہر کیا۔ علاج شدہ جڑی بوٹیوں کی کاڑھی کے گروپوں نے ایک کم ریگولیٹڈ مونوامین آکسیڈیس (MAO) سرگرمی ظاہر کی۔ دماغ میں ڈوپامائن (DA) کا ارتکاز بڑھا دیا گیا تھا، جس سے ظاہر ہوتا ہے کہ جڑی بوٹی سیستانچے کا کاڑھنا اعصابی جوش میں بہتری لاتا ہے۔ کورٹیکوسٹیرون (CORT) کے سیرم کی حراستی کو کم کیا گیا تھا، جس سے ظاہر ہوتا ہے کہ چوہوں کو تناؤ کی کم سطح سے فائدہ ہوا ہے۔ لہذا، اس مطالعہ میں روایتی چینی جڑی بوٹی Cistanche کی اینٹی ڈپریسنٹ افادیت اور طریقہ کار کی کھوج کی گئی۔ ہرب Cistanche نے ڈپریشن کے لیے ایک تکمیلی اور متبادل علاج کے طور پر تیار کیے جانے کی صلاحیت ظاہر کی۔

Cistanche tubulosaادراک کو بہتر بناتا ہے اور افسردگی کو کم کرتا ہے۔
1. تعارف
ڈپریشن اور اس سے متعلقہ موڈ ڈس آرڈرز، ایک اندازے کے ساتھ 12∼17 فیصد آبادی کو زندگی بھر میں کم از کم ایک واقعہ کا سامنا کرنا پڑتا ہے، دماغی معذوری کی اہم وجوہات میں سے ایک ہیں اور اسے دنیا بھر میں صحت عامہ کے بڑے مسائل میں سے ایک سمجھا جاتا ہے [1]۔ خاص طور پر، ڈپریشن کے مریضوں کا ایک بڑا حصہ یادداشت میں کمی، ارتکاز کے مسائل، توانائی یا تھکاوٹ میں کمی، مشاغل اور سرگرمیوں میں دلچسپی یا لذت کی کمی، سونے میں دشواری، صبح سویرے بیدار ہونے، یا زیادہ نیند کا شکار ہوتا ہے۔ اگرچہ ڈپریشن اور اس سے متعلقہ سنڈروم میں اسامانیتا کے لیے عصبی ذیلی ذخائر واضح نہیں ہیں، لیکن یہ عام طور پر قبول کیا جاتا ہے کہ نیوروپلاسٹیٹی اور سیلولر لچک کی خرابی ڈپریشن کی پیتھوفیسولوجی کو جنم دیتی ہے اور کامیاب علاج کا انحصار نیورو ٹرانسمیٹر کی سطح کی مداخلت پر ہو سکتا ہے [2]۔ ڈپریشن کی دوائیوں کا نقطہ نظر بنیادی طور پر کلاسک مونوامین سسٹم کے مفروضے پر مبنی ہے، جس کا دعویٰ ہے کہ مونوامینز کی بے ضابطگی خاص طور پر سیروٹونن (5-HT) اور نورپائنفرین (NE) ڈپریشن روگجنن، اور ڈوپامائن کے ساتھ نیورو ٹرانسمیٹر سسٹم کی مداخلت میں معاون ہے۔ agonists اور dopamine-noradrenergic modulators بڑے ڈپریشن ڈس آرڈر کی علامات کو کم کریں گے [3]۔ اگرچہ وسیع پیمانے پر تجویز کیا گیا ہے، اینٹی ڈپریسنٹس کی علاج کی افادیت قابل اعتراض ہے اور اس کے ضمنی اثرات کو نظر انداز نہیں کیا جا سکتا کیونکہ مریضوں کا ایک بڑا حصہ مونوامین سسٹم کی ہیرا پھیری کا جواب نہیں دیتا ہے [4]۔ حال ہی میں، ڈپریشن روگجنن کے نئے نظریات سے پتہ چلتا ہے کہ ایک سے زیادہ نظام، بشمول سوزش کے راستے، آکسیڈیٹیو تناؤ کا راستہ، ہائپوتھیلمک-پیٹیوٹری-ایڈرینل (HPA) محور، میٹابولک اور بایو اینرجیٹکس سسٹم، نیوروٹروفک راستے، گلوٹامیٹ سسٹم، اور آپسی نظام۔ cholinergic نظام، قریب سے ڈپریشن کی موجودگی کے ساتھ منسلک ہیں [3]. شواہد سے پتہ چلتا ہے کہ ایک سے زیادہ ہدف کی مداخلت نے ایک ہی ہدف کی مداخلت سے بہتر افادیت پیدا کی [5]۔ ایک سے زیادہ سسٹم ڈس ریگولیشن تھیوری پر مبنی نئے علاج کی فوری ضرورت ہے۔
جڑی بوٹیوں کی مصنوعات مبینہ طور پر امریکی آبادی کا نصف سے زیادہ استعمال کرتی ہیں [6]۔ ڈپریشن کے علاج کے ضمنی طریقے کے طور پر جڑی بوٹیوں یا جڑی بوٹیوں کی مصنوعات کی دلچسپی اور مطالبات پوری دنیا میں بڑھ رہے ہیں۔ ڈپریشن سے نجات دلانے والے فائدہ مند اثر کو ظاہر کرنے کے لیے متعدد طبی پودے پائے جاتے ہیں۔ وہ جڑی بوٹیاں جن کے بارے میں بتایا گیا ہے کہ وہ افسردگی کو دبانے اور علمی افعال کو بہتر بنانے کے اثرات رکھتے ہیں ان میں سمندری بکتھورن [7]، جِنکگو بلوبا [8]، پائپر نگرم [9]، ہائپریکم پرفوریٹم [10]، گریفونیا سمپلی فولیا [11] شامل ہیں۔ فیرولک ایسڈ اور پائپرین کے امتزاج انتظامیہ نے مونومینرجک نظام میں ہیرا پھیری کرکے چوہوں میں ایک ہم آہنگی اینٹی ڈپریسنٹ جیسا اثر دکھایا [7]۔ البیفورین کی خصوصیت نیورو ٹرانسمیٹر ریسیپٹرز اور ٹرانسپورٹرز کے ساتھ اعلیٰ منتخب وابستگی تھی اور اس نے آزادانہ طور پر حرکت کرنے والے چوہوں کے ہائپوتھیلمس میں 5-HT اور NE کی ایکسٹرا سیلولر ارتکاز میں نمایاں اضافہ کیا تھا [12]۔ ایک طبی جڑی بوٹی Melissa officinalis L. نے سیرٹونرجک نیورو ٹرانسمیٹر کی سطح پر اثر ڈال کر چوہوں کے افسردہ رویے کو دور کیا [13]۔ یہ جڑی بوٹیاں یا کاڑھیاں، ڈپریشن کے متبادل علاج کے طور پر تیار کی گئی ہیں، ڈپریشن کی علامات کو کم کرنے میں مدد کرتی ہیں اور اینٹی ڈپریسنٹ دوائیوں کی نشوونما کے لیے ایک نیا ذریعہ فراہم کرتی ہیں۔ جڑی بوٹیCistancheچین کے شمالی حصے میں بنجر زمینوں اور صحراؤں میں تقسیم ہونے والی انواع روایتی چینی ادویات کی جڑی بوٹیاں ہیں اور چین میں 1،000 سال سے زیادہ عرصے سے مختلف بیماریوں کے علاج کے لیے وسیع پیمانے پر استعمال ہوتی ہیں۔ جڑی بوٹی کی متعدد افادیتCistancheکاڑھی افروڈیسیاک [14]، مدافعتی کو فروغ دینے والی [15]، اینٹی آکسیڈیٹیو [16]، اور ہیپاٹوپروٹیکٹو [17] خصوصیات کے درمیان ہوتی ہے۔C. deserticolaکاڑھیاں خصیوں کے سٹیرائیڈوجینک انزائمز کو اکساتی ہیں [18]، عضو تناسل کے عضو تناسل کے ردعمل کو فروغ دیتی ہیں، اور castrated چوہوں میں عضو تناسل کے ردعمل کی تاخیر کی مدت کو مختصر کرتی ہیں [19]۔ جڑی بوٹی Cistanche کو روکنے والے اپوپٹوس جینز اور نیوروٹروفک عوامل [20] کو منظم کرکے ڈوپامینرجک نیوران کی سرگرمیوں کو روکنے کی اطلاع دی گئی ہے۔ C. tubulosa decoctions نے A𝛽 1-42 کی وجہ سے پیدا ہونے والی علمی خرابی میں ترمیم کی جس کے ذریعے امائلائیڈ جمع کو روکا گیا اور کولینرجک اور ہپپوکیمپل ڈوپامینرجک نیورونل فنکشن کو بحال کیا [21]۔ جڑی بوٹیوں کے Cistanche کی نیورو پروٹیکٹو خاصیت کا مطلب علمی سے متعلقہ بیماریوں میں علاج کی صلاحیت ہے۔ افسردگی عام علامات کے طور پر بھول جانے اور علمی زوال کے ساتھ جذباتی رد عمل کا ایک عام مخلوط موڈ ہے [22]۔ جڑی بوٹی Cistanche عام طور پر ایک روایتی چینی دوا کے طور پر استعمال کیا جاتا تھا بھولنے کے علاج کے لئے؛ مزید برآں، ایک حالیہ رپورٹ سے پتہ چلتا ہے کہ C. tubulosa کے ساتھ مکمل شدہ cornmeal کی ابتدائی بالغوں کی انتظامیہ طویل عمری کے فروغ اور olfactory سے وابستہ سیکھنے اور nonvertebrate Drosophila ماڈل [23] میں یادداشت کی بہتری کے لیے فائدہ مند ہے۔ یہ حقائق جڑی بوٹیوں کی علمی بہتری کی خاصیت کی نشاندہی کرتے ہیں۔Cistanche; یہاں اس تحقیق میں، ہم نے پہلی بار اینٹی ڈپریسنٹ پراپرٹی اور اس کے ممالیہ ماڈل میں مونوامین سسٹم اور ایچ پی اے کے محور کو ریگولیٹ کرکے علمی بہتری کی سرگرمیوں سے تعلق کو نمایاں کیا۔ اینٹی ڈپریسنٹ پراپرٹی اور جڑی بوٹی Cistanche کے ابتدائی طریقہ کار کو روشن کرنے سے جڑی بوٹی Cistanche کے استعمال کے اسپیکٹرم کو بڑھایا جا سکتا ہے، جسے ڈپریشن کے متبادل علاج کے طور پر تیار کیا جا سکتا ہے۔

cistanche wirkung
2. مواد اور طریقہ
2.1 پلانٹ کا مواد اور کاڑھی کی تیاری۔ C. deserticola
وائی سی ایم اے نی منگول خود مختار علاقہ، چین سے حاصل کیا گیا تھا۔ C. tubulosa سنکیانگ Uygur خود مختار علاقہ، چین سے حاصل کیا گیا تھا. کاڑھی بنانے سے پہلے، جڑی بوٹی (C. deserticola YCMa یا C. tubulosa) کا معائنہ کیا گیا تاکہ ایچ پی ایل سی (اعلی کارکردگی والے مائع کرومیٹوگرافی) (ملفورڈ، ایم اے، واٹرس، یو ایس اے) کا استعمال کرتے ہوئے ایچیناکوسائیڈ اور ورباسکوسائیڈ کے مواد کا پتہ لگایا جا سکے۔ to Pharmacopoeia of the People's Republic of China) جانوروں کے تجربات کے لیے استعمال کیا گیا تھا۔ یہ کاڑھی پانی کے بخارات بنانے کے طریقہ کار کی بنیاد پر حاصل کی گئی تھی جسے ریاستی تعلیم کی وزارت کے فوڈ اینڈ ہیلتھ انجینئرنگ ریسرچ سنٹر سن یات سین یونیورسٹی نے تیار کیا تھا۔ خشکCistanchedeserticola125 جی کے وائی سی ایم اے کو میش اسکرین کے ذریعے توڑا اور چھلنی کیا گیا اور پھر پاؤڈر کو 3 ایل الٹرا پیور پانی میں تحلیل کیا گیا، 100∘C پر 2 گھنٹے کے لیے گرم کیا گیا، پھر کمرے کے درجہ حرارت پر ٹھنڈا کیا گیا، اور چھلنی؛ سپرنٹنٹ کو ری سائیکل کیا گیا تھا۔ اس کے بعد تلچھٹ کو 2 L الٹرا پیور پانی میں تحلیل کیا گیا اور پھر 1.5 گھنٹہ کے لیے گرم کیا گیا اور اوپر بیان کردہ سپرنٹینٹینٹ کو ری سائیکل کرنے کے لیے ٹھنڈا کیا گیا۔ اس کے بعد تلچھٹ کو سپرنٹنٹ کو ری سائیکل کرنے کے لیے استعمال کیا گیا۔ تمام سپرنٹنٹ کے مواد کو 60∘C پر روٹری ویکیوم ایوپوریٹر کے ذریعے افزودہ کیا گیا تھا۔ آخر میں، خام دوائیوں کا ارتکاز 0.5 g/ml مقرر کیا گیا اور پروڈکٹ کو −20∘C پر ذخیرہ کیا گیا۔
2.2 HPLC تجزیہ کے ذریعہ Echinacoside اور Verbascoside Assay۔
ایچ پی ایل سی (اعلی کارکردگی والے مائع کرومیٹوگرافی) کا استعمال echinacoside اور verbascoside کے معیار اور مقداری پرکھ کی پیمائش کے لیے کیا گیا تھا۔ verbascoside (پاکیزگی> 93 فیصد) اور echinacoside (پاکیزگی> 93 فیصد) کو نیشنل انسٹی ٹیوٹ فار فوڈ اینڈ ڈرگ کنٹرول (بیجنگ، چین) سے خریدا گیا اور معیاری کنٹرول کے طور پر استعمال کیا گیا۔

echinacoside
2.3۔ جانوروں کی دیکھ بھال اور تجرباتی طرز عمل۔
ذیلی مضامین SPF (مخصوص روگزن سے پاک) نر کنمنگ چوہے تھے جن کا وزن 21∼25 گرام تھا، جو گوانگ ڈونگ صوبے کے طبی تجرباتی جانوروں کے مرکز نے فراہم کیا تھا۔ جانوروں کو پلاسٹک کے پنجروں میں رکھا گیا تھا (فی پنجرے میں دس)؛ ماحول کی حالت حسب ذیل ترتیب دی گئی تھی: نمی 40∼70 فیصد، کمرے کا درجہ حرارت 21 ± 1∘C، اور 12 h : 12 h ہلکے اندھیرے کا دورانیہ۔ تمام جانوروں کے تجربات کو سن یات سین یونیورسٹی کی اینیمل ایتھکس کمیٹی نے منظور کیا۔
2.4 ٹیل معطلی ٹیسٹ۔
کرین ایٹ ال کے بیان کردہ پروٹوکول کے مطابق دم کی معطلی کا ٹیسٹ کیا گیا تھا۔ [24] معمولی تبدیلیوں کے ساتھ۔ مختصراً، 21 دن کو، چوہوں کو نایلان کیتھیٹر کے ذریعے باندھے گئے دھاتی پھانسی کا استعمال کرتے ہوئے دم سے لٹکا دیا گیا، جس کا سر فرش سے 50 ملی میٹر کی بلندی پر تھا۔ چوہوں کو اس کی دم کی انتہا سے 10∼20mm چپکنے والی ٹیپ پر ہک پر لٹکا دیا گیا تھا اور انہیں صوتی اور بصری طور پر کلیپ بورڈز کے ذریعے الگ تھلگ کیا گیا تھا۔ چوہے کی جسمانی حرکات کو ریکارڈ کیا گیا اور سانس کی حرکات کو نظر انداز کیا گیا۔ تجربے کے دن سے پہلے، چوہوں کو موافقت کے لیے 8 منٹ کے لیے معطل کر دیا گیا تھا۔
2.5 مورس واٹر میز ٹیسٹ۔
واٹر بھولبلییا ٹیسٹ Vorhees et al کی تفصیل کے مطابق کیا گیا تھا۔ [25-27] کا استعمال کرتے ہوئے
یہ آلہ چائنیز اکیڈمی آف میڈیکل سائنسز نے تیار کیا ہے۔ پانی سے بھرا ہوا ایک سرکلر پول (150 سینٹی میٹر قطر) (26 ± 1∘C؛ کنارے کی اونچائی (پانی کی سطح سے دیوار کے کنارے تک کا فاصلہ): 10 سینٹی میٹر) استعمال کیا گیا، سرکلر ریسکیو پلیٹ فارم (قطر: 11 سینٹی میٹر؛ پلیٹ فارم سینٹر پوائنٹ کے درمیان فاصلہ تالاب کی دیوار: 27 سینٹی میٹر) پانی کی سطح سے 1-1.5 سینٹی میٹر نیچے ڈوبی ہوئی تھی، اور جانچ کے علاقے کو انفلیکشن سے بچنے کے لیے بالواسطہ روشنی (50 ± 10 لکس) سے روشن کیا گیا تھا۔ شروع کے چار مقامات استعمال کیے گئے تھے، N, S, E، اور W۔ مقامی سیکھنے کے ٹیسٹ کے لیے، جانوروں کو روزانہ 9-11 دنوں میں مقررہ آغاز کے مقام پر تربیت دی جاتی تھی۔ فرار ہونے میں تاخیر کی مدت کو چوہوں کی مقامی میموری اور سیکھنے کی صلاحیت کو ظاہر کرنے کے لیے ماپا جاتا ہے۔ اگر چوہے پلیٹ فارم پر نہیں پا سکتے یا چڑھ سکتے ہیں، تو چوہوں کو پلیٹ فارم کی طرف لے جایا جائے گا اور 10 سیکنڈ تک رہیں گے۔ 60 سیکنڈ آرام کرنے کے بعد ٹریننگ کا اگلا سیشن شروع کیا جائے گا۔ آخری مقامی سیکھنے کے ٹیسٹ سے حاصل کردہ ڈیٹا کو مولڈنگ کے لیے بنیادی قدر کے طور پر استعمال کیا گیا۔ 23-28 دنوں میں، نیویگیشن ٹیسٹ اور مقامی تحقیقات کی گئیں۔ پلیس نیویگیشن ٹیسٹ 6 دن تک جاری رہا اور دوپہر 1 بجے لیا گیا، جانوروں کو پانی میں رکھا گیا اور ان کا سر تالاب کی دیوار کی طرف گھڑی کی سمت رکھا گیا، اور تاخیر کا دورانیہ (2 منٹ کے اندر) ریکارڈ کیا گیا۔ پلیس نیویگیشن ٹیسٹ ہونے کے بعد، پلیٹ فارم کو ہٹا دیا گیا۔ چوہوں کو پانی میں رکھا گیا تھا اور ان کا سر تالاب کی دیوار کی طرف بے ترتیب جگہ پر تھا، اور موشن ٹریل اور فریکوئنسی جو چوہوں نے 2 منٹ کے اندر پلیٹ فارم پر تیرا تھا ریکارڈ کیا گیا تھا۔ موشن ٹریل کو چوہوں کی حرکت کے ملٹی فنکشن آٹونومک ریکارڈر (YLS-1A, Yiyan Technology, Jinan, China) کے ذریعے ریکارڈ کیا گیا تھا۔
2.6۔ MAO سرگرمی کا پتہ لگانا۔
MAO سرگرمی کی پیمائش MAO ڈیٹیکشن کٹ (A034، Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute، Nanjing، China) کا استعمال کرتے ہوئے کی گئی، اور پتہ لگانے والے کے پروٹوکول کے مطابق کیا گیا۔ دماغ کے بافتوں سے ہوموجنیٹ حاصل کیا گیا تھا۔ 500𝜇l کو ایجنٹ 1 کے 300 𝜇l اور ایجنٹ 2 کے 300 𝜇l کے ساتھ ملایا گیا، 3 گھنٹے کے لیے 37∘ C پر انکیوبیٹ کیا گیا، اور پھر یکے بعد دیگرے 300 𝜇l، ایجنٹ 3 کا، 3ml ایجنٹ 4 کے لیے، اور 2 کے لیے ملایا گیا۔ رد عمل کے مرکب کو 10 منٹ کے لیے 3,000 rpm پر سینٹرفیوج کیا گیا تھا، اور 242 nm اتیجیت روشنی کا استعمال کرتے ہوئے الٹراوائلٹ اور مرئی اسپیکٹرم سپیکٹرو فوٹومیٹر (Lambda 25, PerkinElmer, USA) کے ذریعے سپرنٹنٹ کی آپٹک کثافت کا تعین کیا گیا تھا۔
2.7۔ نیورو ٹرانسمیٹر اور ACTH اور CORT کے اینزائم سے منسلک امیونوسوربینٹ پرکھ۔
ڈوپامائن (DA)، norepinephrine (NE) اور 5-hydroxytryptamine (5-HT) کے لیے Enzyme-linked Immunosorbent Assay (ELISA) کا پتہ لگانے والی کٹ بلیو جین، شنگھائی سے خریدی گئی تھی۔ ELISA کا پتہ لگانے والی کٹس Qiyun Biotech، Guangzhou سے خریدی گئیں۔
طریقہ کار درج ذیل ہیں: تجربہ کمرے کے درجہ حرارت پر کیا گیا تھا۔ کاربونیٹ/بائکاربونیٹ بفر (pH 9.6) میں 1–10𝜇g/mL ارتکاز پر کیپچر اینٹی باڈی کے ساتھ PVC مائکرو ٹائٹر پلیٹ کے کنوؤں کو کوٹ کریں۔ پلیٹ کو سیل کریں اور رات بھر 4∘C پر انکیوبیٹ کریں۔ پلیٹ کو PBS/tween سے 3 بار دھوئیں، اور غیر مخصوص بائنڈنگ سائٹس بلاک سلوشن کے ذریعے مسدود ہو جاتی ہیں۔ پھر پلیٹ کو PBS/tween سے 3 بار دھو لیں۔ معیارات اور نمونوں کو بلاکنگ سلوشن میں پتلا کیا جاتا ہے اور پلیٹ کے کنویں میں 100 𝜇l شامل کیا جاتا ہے، اور پلیٹ کو سیل کر دیا جاتا ہے اور 37∘C پر 1 گھنٹے کے لیے انکیوبیٹ کیا جاتا ہے۔ 100𝜇l پتلا پتہ لگانے والا اینٹی باڈی شامل کریں اور پلیٹ کو 37∘C پر 1 گھنٹے کے لیے سینکیں۔ پلیٹ کو PBS/Tween سے 3 بار دھوئے۔ 50 𝜇l کلر ڈیولپمنٹ سلوشن شامل کریں اور پلیٹ کو روشنی سے دور رکھیں اور اسے کمرے کے درجہ حرارت پر 15 منٹ تک سینکیں۔ رد عمل کو روکنے کے لیے 50 𝜇l سٹاپ بفر شامل کیا جاتا ہے۔ 30 منٹ میں 405 nm پر سیٹ مائکروپلیٹ ریڈر کے ساتھ ہر کنویں کے لیے نظری کثافت (OD) کی پیمائش کریں۔

جدول 1: C. deserticola YCMa اور C. tubulosa کے پاؤڈر اور کاڑھی میں echinacoside اور verbascoside کا مواد۔
2.8۔ شماریاتی تجزیہ.
تمام اعداد و شمار کو اوسط ± SEM (مطلب کی معیاری غلطی) کے طور پر پیش کیا گیا تھا، اہمیت کے فرق کا تجزیہ t-ٹیسٹ یا یک طرفہ ANOVA کے ذریعے کیا گیا تھا جس کے بعد SPSS 16 کا استعمال کرتے ہوئے ڈنکن کے متعدد رینج ٹیسٹ کے ذریعے کیا گیا تھا۔{3}}، اور درمیان فرق 𝑃 < 0.05 والے گروپس کو شماریاتی لحاظ سے اہم سمجھا جاتا تھا۔
3. نتائج
3.1 C. deserticola YCMa اور C. tubulosa کے نمونوں میں اہم حیاتیاتی اجزاء کے مواد کا تعین کرنا۔
phenylethanoid glycosides جیسے echinacoside اور verbascoside کو عام طور پر اہم حیاتیاتی اجزاء کے طور پر سمجھا جاتا ہے۔ لہذا C. deserticola YCMa اور C. tubulosa دونوں نمونوں میں echinacoside اور verbascoside کے مواد کا تعین HPLC نے کیا تھا۔ HPLC کرومیٹوگرامس کو شکل 1 میں دکھایا گیا تھا، اور نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ C. deserticola YCMa سے phenylethanoid glycosides کا کل مواد C. tubulosa سے تقریباً دو گنا تھا۔ Echinacoside اور verbascoside وزن، بالترتیب 1.27 ± 0۔{5}}09 فیصد اور 0.52 ± 0۔{17}}{ {19}} C. deserticola YCMa سے تیار کردہ پاؤڈر کا 3 فیصد اور C. tubulosa سے تیار کردہ پاؤڈر کا 19.81 ± 0.66 فیصد اور 2.45 ± 0.12 فیصد۔ Echinacoside اور verbascoside وزن بالترتیب 0.90 ± 0.001 فیصد اور 0.20 ± 0.001 فیصد C. deserticola YCMa کاڑھی اور 5.90 ± 0.12 فیصد اور 0.50± 0.54 C. tubulosa سے تیار کردہ پاؤڈر کا فیصد (ٹیبل 1)۔

ہربا سیستانچ
3.2 C. deserticola YCMa اور C. tubulosa کا کاڑھا تناؤ اور افسردگی کی سطح کو کم کرتا ہے۔
ٹیل سسپنشن ٹیسٹ (TST) چوہوں میں ادویات کے اینٹی ڈپریسنٹ اثر کا اندازہ لگانے کا ایک تیز اور کلاسک طریقہ ہے [24]؛ اس تحقیق میں، دم کی طرف سے معطل ہونے کے قلیل مدتی اور ناگزیر تناؤ کی وجہ سے پیدا ہونے والی غیر متحرک حیثیت کو چوہوں کے افسردگی کی سطح کو ظاہر کرنے کے لیے ایک خاصیت کے طور پر استعمال کیا گیا۔ ہم نے جانچا کہ آیا C. deserticola YCMa اور C. tubulosa کا کاڑھنا حرکت پذیری کو ریورس کر سکتا ہے اور فرار سے متعلق رویے کی موجودگی کو فروغ دے سکتا ہے۔ کنٹرول گروپس کے مقابلے میں، تناؤ والے گروپ کی عدم استحکام کی مدت میں 27.4 فیصد اضافہ ہوا؛ تناؤ والے گروپوں کے مقابلے میں، درمیانے درجے کے ساتھ علاج کیے جانے والے گروپوں میں C. deserticola YCMa جڑی بوٹیوں کے کاڑھے میں 44.1 فیصد اور 56.1 فیصد کی غیر متحرک مدت میں شماریاتی طور پر نمایاں کمی دیکھی گئی۔ C. tubulosa جڑی بوٹیوں کے کاڑھی کے درمیانے، زیادہ ارتکاز کے ساتھ علاج کیے جانے والے گروپوں نے 41.9 فیصد اور 47.7 فیصد (شکل 2) کی غیر متحرک مدت میں شماریاتی طور پر نمایاں کمی ظاہر کی۔ یہ نتائج بتاتے ہیں کہ C. deserticola YCMa اور C. tubulosa کا کاڑھنا چوہوں کے تناؤ اور افسردگی کی سطح کو کم کر سکتا ہے، اور C. deserticola YCMa decoction نے C. tubulosa decoction سے قدرے زیادہ افادیت کا مظاہرہ کیا۔

شکل 1: C. deserticola YCMa اور C. tubulosa پاؤڈر سے phenylethanoid glycosides کا HPLC کرومیٹوگرافک پروفائل۔
3.3 C. deserticola YCMa اور C. tubulosa کا کاڑھا چوہوں کی مقامی سیکھنے اور یادداشت کو بہتر بناتا ہے۔
ڈپریشن میں مبتلا لوگ (نوعمر اور بالغ دونوں) سیکھنے کی معذوری کا شکار ہوتے ہیں [28]؛ C. deserticola YCMa اور C. tubulosa کا کاڑھا تناؤ اور افسردگی کی سطح کو کم کرنے کے لیے ثابت ہوا ہے۔ پھر ہم نے اس بات کا جائزہ لینے کا انتخاب کیا کہ آیا C. deserticola YCMa اور C. tubulosa کی کاڑھی مورس واٹر میز ماڈل کا استعمال کرتے ہوئے مقامی سیکھنے اور یادداشت کو متاثر کر سکتی ہے، جس کا اطلاق دماغ کے متعلقہ علاقے کے مقامی سیکھنے اور میموری کے افعال کا اندازہ لگانے میں بڑے پیمانے پر کیا جاتا ہے [29] . تلاش میں تاخیر کے دوران موشن ٹریلز کو چار میں درجہ بندی کیا جاتا ہے۔ ایک سیدھی لکیر کی رفتار نے چوہوں کو ریسکیو پلیٹ فارم کی پوزیشن کی نشاندہی کی، ایک رجحان کی رفتار سے پتہ چلتا ہے کہ چوہوں نے بنیادی طور پر صحیح سمت کا مظاہرہ کیا، اور تیز رفتار رفتار سے پتہ چلتا ہے کہ چوہے یا تو ابتدائی تربیتی دور میں تھے یا ڈیمنشیا کا شکار تھے، کوشش کر رہے تھے۔ جبلت کی بنیاد پر ہدف کی جگہ تلاش کریں۔ بے ترتیب تلاش کی رفتار سے پتہ چلتا ہے کہ چوہوں میں پوزیشننگ کی کم صلاحیت تھی اور وہ ہدف کی جگہ کو بے مقصد تلاش کرتے تھے۔ معیار کے مطابق ڈیٹا حاصل کیا گیا۔
C. deserticola YCMa اور C. tubulosa decoctions کا خلائی سیکھنے اور تحمل کے دباؤ والے چوہوں کی یادداشت کی صلاحیت پر اثر تصویر 3 میں دکھایا گیا ہے۔ دم کی معطلی کے ٹیسٹ کے بعد، چوہوں نے نمایاں طور پر طویل تاخیر کا دورانیہ دکھایا۔ تناؤ والے گروہوں کے مقابلے میں، چوہوں کا علاج اعتدال پسند، زیادہ خوراک C. deserticola YCMa اور کم، زیادہ خوراک C. tubulosa decoction نے ایک مختصر تاخیر کی مدت کو ظاہر کیا۔ چوہوں کے چھپے ہوئے پلیٹ فارم پر تیرنے کی فریکوئنسی کو اعتدال پسند، اعلی خوراک C. deserticola YCMa کاڑھی کے ساتھ علاج کیے جانے والے گروپوں میں نمایاں طور پر الگ کر دیا گیا تھا۔ ان نتائج سے ظاہر ہوتا ہے کہ تناؤ کے شکار چوہوں نے جڑی بوٹیوں کے Cistanche کاڑھی کے استعمال سے فائدہ اٹھایا اور مقامی سیکھنے اور یادداشت میں بہتری کا مظاہرہ کیا۔

شکل 2: C. deserticola YCMa اور C. tubulosa decoctions کا اثر 5min میں دم کو معطل کرنے والے چوہوں کی عدم حرکت پر۔
3.4 C. deserticola YCMa اور C. tubulosa کی کاڑھی Monoamine Oxidase سرگرمی کو نیچے سے منظم کرتی ہے۔
MAO دماغ اور پردیی بافتوں میں امیائنز جیسے ٹائرامین، کیٹیکولامین، اور 5-ہائیڈروکسیٹریپٹامائن (5-HT) کے آکسیڈیٹیو ڈیمینیشن کو اتپریرک کرتا ہے۔ MAO سرگرمی کی روک تھام کے نتیجے میں اینٹی ڈپریسنٹ افادیت [30]۔ ہم نے C. deserticola YCMa اور C. tubulosa کے ذریعے antidepressant اثر کی وضاحت کرنے کی کوشش کی۔ پھر دماغ میں ایم اے او کی سرگرمی کا تعین کیا گیا تھا۔ دم معطلی کے ٹیسٹ کے بعد، MAO کی سرگرمی کو نمایاں طور پر بڑھا دیا گیا تھا۔ گروپوں میں MAO کی سرگرمی جس کا علاج دم کی معطلی کے ساتھ کیا گیا اور اس کے بعد C. deserticola YCMa سے اعتدال پسند، زیادہ مقدار میں کاڑھی لینے سے تقریباً 13.9 فیصد ∼12.3 فیصد کی نمایاں کمی واقع ہوئی۔ گروپوں میں MAO کی سرگرمی جن کا علاج دم کی معطلی کے ساتھ کیا جاتا ہے اور پھر C. tubulosa سے زیادہ مقدار میں کاڑھی کی جاتی ہے اس میں تقریباً 13.2 فیصد کی نمایاں کمی واقع ہوئی (شکل 4)۔ اعداد و شمار نے ظاہر کیا کہ C. deserticola YCMa اور C. tubulosa دونوں کا کاڑھا MAO کی سرگرمی کو روک سکتا ہے اور اینٹی ڈپریسنٹ اثر میں حصہ ڈال سکتا ہے، اور C. deserticola YCMa کی کاڑھی C. tubulosa کی نسبت زیادہ مضبوط افادیت کو ظاہر کرتی ہے۔
3.5 C. deserticola YCMa اور C. tubulosa decoction کی انتظامیہ کا نتیجہ مرکزی ڈوپامائن کے ارتکاز کو اپ گریجولیشن اور سیرم کورٹیکوسٹیرون کے ارتکاز کو کم کرنے کی صورت میں نکلا۔
مرکزی اعصابی نظام میں DA اور NE کی سطح اعصابی اتیجیت کا تعین کرنے کے لیے ماپا گیا۔ ٹیل سسپنشن ٹیسٹ کے 4 ہفتوں کے بعد، تناؤ والے گروپوں کے مقابلے میں، اعتدال پسند خوراک C. deserticola YCMa کے ساتھ علاج کیے جانے والے گروپوں کی DA کی سطح میں نمایاں طور پر 43.5 فیصد اضافہ ہوا ہے۔ اعتدال پسند خوراک C. tubulosa کے ساتھ علاج کیے گئے گروپوں کے DA کی سطح کو بھی نمایاں طور پر اپ ریگولیٹ کیا گیا تھا (شکل 5(a))۔ تناؤ والے گروپوں کے مقابلے میں دونوں جڑی بوٹیوں کے کاڑھے کے ساتھ علاج کیے گئے گروپوں میں NE کی سطح کو ہلکے سے بڑھا دیا گیا تھا، اور کوئی شماریاتی فرق نہیں پایا گیا تھا (شکل 5(b))۔ یہ نتائج جڑی بوٹی Cistanche کے اینٹی ڈپریسنٹ اثر کے مالیکیولر میکانزم کی وضاحت کر سکتے ہیں۔
Adrenocorticotropic ہارمون (ACTH)، ایک پولی پیپٹائڈ ہارمون جو anterior pituitary gland کے ذریعہ تیار کیا جاتا ہے اور چھپاتا ہے، adrenal cortex، zona fasciculata [31] پر عمل کرکے گلوکوکورٹیکوسٹیرائڈ کے اخراج کو متحرک کرتا ہے۔ کورٹیکوسٹیرون، ایک سٹیرایڈ ہارمون جو ادورکک غدود کے پرانتستا سے تیار ہوتا ہے، جسمانی عمل کے ضابطے میں شامل ہے جیسے توانائی بڑھانے، قوت مدافعت کے رد عمل، اور تناؤ کے ردعمل [32]، اس لیے ہم نے جڑی بوٹیوں کے کاڑھی کے اثرات کا مطالعہ کرنے کا انتخاب کیا۔ HPA محور. اور سیرم میں ACTH اور corticosterone کی حراستی کی پیمائش کی گئی۔ ٹیل سسپنشن ٹیسٹ کے 4 ہفتوں کے بعد، تناؤ والے گروپ کے ACTH اور corticosterone کے ارتکاز کو نمایاں طور پر بڑھا دیا گیا تھا (شکل 6)۔ تناؤ کے گروپ (شکل 6(a)) کے مقابلے جڑی بوٹیوں کے Cistanche decoction علاج کے گروپوں میں کوئی خاص تبدیلی نہیں دیکھی گئی۔ تناؤ والے گروپ کے مقابلے میں، اعتدال پسند، اعلی خوراک C. deserticola YCMa کاڑھی کے ساتھ علاج کیے جانے والے گروپوں کے کورٹیکوسٹیرون سیرم کی حراستی کو نمایاں طور پر کم کیا گیا تھا۔ اعلی خوراک C. tubulosa کے ساتھ علاج کیے جانے والے گروپوں کے کورٹیکوسٹیرون کے ارتکاز کو کم کیا گیا تھا لیکن اہم شماریاتی فرق سے نہیں
(شکل 5(ب))۔ اعداد و شمار سے پتہ چلتا ہے کہ C. deserticola YCMa اور C. tubulosa دونوں سے کاڑھی کورٹیکوسٹیرون سیرم کی ارتکاز کو کم کر سکتی ہے اور HPA کے محور کو منظم کرنے میں شامل ہو سکتی ہے، اور C. deserticola YCMa کی کاڑھی C. tubulosa کے مقابلے میں زیادہ مضبوط افادیت کو ظاہر کرتی ہے۔

شکل 3: C. deserticola YCMa اور C. tubulosa decoctions کا خلائی سیکھنے اور تحمل والے چوہوں کی یادداشت کی صلاحیت پر اثر۔
4. بحث
اس مطالعہ میں، اینٹی ڈپریسنٹ سرگرمیاں اور یادداشت میں بہتری اور جڑی بوٹی Cistanche کے سیکھنے کی تعریف کی گئی، جو جڑی بوٹی Cistanche کے فنکشن پر ایک نئی روشنی ڈال سکتی ہے اور علاج کے اطلاق کی حد کو بڑھانے کا اشارہ دے سکتی ہے۔ پچھلے مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ جڑی بوٹی Cistanche ایک ملٹی فنکشنل چینی دوا ہے جس میں اینٹی ایجنگ، اینٹی آکسیڈینٹ، ایسٹروجینک، اینٹی آسٹیوپوروٹک، افروڈیسیاک، اور سوزش کے اثرات کی حیاتیاتی سرگرمیاں ہیں [33]۔ ہرب Cistanche کو گردے کی کمی، بانجھ پن، اور دائمی قبض کے علاج کے طور پر تسلیم کیا گیا ہے (فارماکوپیا کمیٹی آف چائنا، 2010)۔ جڑی بوٹیوں کی کاڑھی اتار چڑھاؤ والے تیلوں، غیر متزلزل فینی لیتھانائڈ گلائکوسائیڈز (پی جیز)، ایریڈائڈز، لگنانس، الڈیٹولز، اولیگوساکرائڈز اور پولی سیکرائڈز پر مشتمل ہے۔ Echinacoside اور verbascoside کو عام طور پر اہم حیاتیاتی اجزاء کے طور پر دیکھا جاتا ہے [34]۔ Cistanche کی چار اہم انواع ہیں جن میں C. deserticola YCMa، C. tubulosa، Cistanche Sinensis G. Beck، اور Cistanche salsa var شامل ہیں۔ albiflorashi et al. [35]; ہم نے PeGs کے مواد کا تعین کرنے کے لیے اپنے ماڈل کے طور پر C. deserticola YCMa اور C. tubulosa کا انتخاب کیا، اور C. deserticola YCMa میں PeGs کا زیادہ مواد تھا (شکل 1)، جو کہ C. deserticola YCma کی اعلیٰ افادیت کی وضاحت کر سکتا ہے۔ نتائج بتاتے ہیں کہ اہم بایو ایکٹیو اجزاء کا مواد جڑی بوٹی Cistanche کی افادیت کا تعین کرتا ہے۔
پچھلے مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ جڑی بوٹیوں کی Cistanche کی مصنوعات چوہوں کے ہپپوکیمپس میں اعصاب کی نشوونما کے عنصر (NGF) کو اپ گریڈ کرکے نیوروڈیجینریٹیو عوارض کے علاج کے لیے فائدہ مند ہیں [36, 37]، لیکن اس میں جڑی بوٹی Cistanthe کی اینٹی ڈپریسنٹ اور علمی سیکھنے کی سرگرمیوں پر کوئی تحقیق رپورٹ نہیں ہوئی ہے۔ ستنداریوں کے ماڈل اس مطالعہ میں، جڑی بوٹی Cistanche کاڑھی تناؤ کی سطح کو کم کرنے اور ٹیل سسپنشن ٹیسٹ (شکل 2) میں بقا کے رویے میں خاطر خواہ اضافہ کرنے اور واٹر میز ماڈل (شکل 3) میں مقامی سیکھنے اور یادداشت کی صلاحیت کو بہتر بنانے کے لیے موثر ثابت ہوئی۔ لن وغیرہ۔ ثابت ہوا کہ جڑی بوٹی Cistanche نے فروٹ فلائی ماڈل میں ولفیٹری سے وابستہ یادداشت کو بہتر بنایا [23]۔ ہم نے اپنی تحقیق کو اینٹی ڈپریسنٹ اثر پر مرکوز کیا اور جانوروں کا ایک مختلف ماڈل اپنایا؛ نتیجہ نے ثابت کیا کہ جڑی بوٹی Cistanche نے مختلف قسم کے علمی فعل کو بہتر کیا، یعنی چوہوں میں مقامی سیکھنے کی صلاحیت۔ مونوامین تھیوری کے مطابق، تناؤ کا تجربہ اور ڈپریشن مونوامین نیورو ٹرانسمیٹر کی دماغی سطح سے قریب سے جڑے ہوئے ہیں، جیسے DA، NE، 5-HT، اور epinephrine [38]۔ اور ہم نے پایا کہ جڑی بوٹی Cistanche کاڑھی MAO سرگرمی کو کمزور کر سکتی ہے (شکل 4) اور مرکزی DA ارتکاز کو بڑھا سکتی ہے (شکل 5(a))۔ حیرت انگیز طور پر، مرکزی 5-HT ارتکاز کو جڑی بوٹیوں کے Cistanche decoction ٹریٹمنٹ کے ذریعے کم کیا گیا تھا (ڈیٹا نہیں دکھایا گیا)، کیونکہ پچھلی تحقیق سے پتہ چلتا ہے کہ مرکزی 5-HT سرگرمی میں کمی ڈپریشن سے وابستہ ہے [39]۔ ہائپوتھیلمک-پٹیوٹری-ایڈرینل محور کی بے ضابطگی اکثر افسردگی سے منسلک ہوتی ہے [40]، گلوکوکورٹیکائیڈ ریسیپٹر (GR) نظام کے ساتھ مداخلت نے چوہوں میں افسردگی کے فینوٹائپ کو کامیابی کے ساتھ پلٹ دیا [41]، اور ہم نے پایا کہ جڑی بوٹی Cistanche نے سیرم کی حراستی کو نمایاں طور پر کم کیا۔ CORT (شکل 6(b))۔ مونوامین سسٹم اور HPA محور کی ماڈیولیشن دونوں جڑی بوٹی Cistanche کے اینٹی ڈپریسنٹ اثر میں حصہ ڈالتے ہیں۔ echinacoside آزادانہ طور پر خون کے دماغ کی رکاوٹ کو عبور کر سکتا ہے اور مرکزی اعصابی نظام پر عمل کر سکتا ہے [42]، جو اس بات کی وضاحت کر سکتا ہے کہ جڑی بوٹیوں کی کاڑھی میں اینٹی ڈپریسنٹ کام کیوں ہوتا ہے۔ پہلی بار، ہم نے ماؤس ماڈل میں اینٹی ڈپریسنٹ پراپرٹی اور اس کے علمی بہتری کی سرگرمیوں سے تعلق کو نمایاں کیا، اور ابتدائی طریقہ کار کی کھوج کی گئی۔ پھر بھی، سالماتی سطح پر Cistanche کی antidepressant خاصیت کا طریقہ کار واضح نہیں کیا گیا ہے، اور جڑی بوٹی Cistanche کے جامع antidepressant طریقہ کار کو واضح کرنے کے لیے مزید تحقیق کی ضرورت ہے۔
مزید معلومات کے لیے، براہ کرم یہاں کلک کریں۔
اس بات کو مدنظر رکھتے ہوئے کہ جڑی بوٹی سیستانچے کاڑھی مرکبات کا مرکب ہے، جڑی بوٹیوں کے Cistanche کاڑھی کے متعدد طریقے ہو سکتے ہیں جو اینٹی ڈپریسنٹ اثر ڈالتے ہیں اور سیکھنے کی صلاحیت کو بڑھاتے ہیں۔ آکسیڈیٹیو تناؤ نیوران کے بہت سے سیلولر افعال کو متاثر کرتا ہے، اور ری ایکٹیو آکسیجن پرجاتیوں (ROS) کی زیادہ پیداوار سیل کو نقصان، اپوپٹوسس اور موت کا سبب بنتی ہے [43]۔ C. سالسا کے تنوں سے نکالا گیا Echinacoside ROS اور mitochondria-mediated apoptosis [44] کی پیداوار کو کم کر کے نیورو پروٹیکٹو اثر دکھاتا ہے۔ ایکٹیوسائیڈ، ایک انتہائی مضبوط اینٹی آکسیڈیٹیو مرکب، جزوی طور پر نیورو پروٹیکٹو اثر کے لیے ذمہ دار ہو سکتا ہے [45]۔ کاڑھی بنانے کے روایتی طریقہ کے علاوہ، جدید دواسازی کے طریقوں جیسے کہ کنٹرول شدہ ریلیز گلائکوسائیڈ کیپسول کا استعمال جڑی بوٹیوں کے کاڑھے کے اثر کو بڑھا سکتا ہے، کیونکہ حیاتیاتی اجزاء معدے کی نالی سے ہضم اور انحطاط ہو سکتے ہیں [37]۔
5. نتائج
اس تحقیق میں، ہم نے پایا کہ C. deserticola YCMa اور C. tubulosa کے کاڑھیوں نے ایک اینٹی ڈپریسنٹ اثر ظاہر کیا اور ماؤس ماڈل میں مقامی سیکھنے اور یادداشت کی صلاحیت کو بہتر بنایا، اور C. deserticola YCMa اور C. tubulosa کے کاڑھوں نے اس پر نمایاں اثر کیا۔ HPA محور؛ C. deserticola YCMa نے ایک مضبوط فارماسولوجیکل فنکشن دکھایا۔ C. deserticola اور C. tubulosa میں ڈپریشن کے لیے متبادل تھراپی دوا کے طور پر تیار کیے جانے کی صلاحیت ہو سکتی ہے۔







