کیمپفیرول ایک ہائپوگلیسیمک اثر اور اپریگولیٹنگ SIRT1 کے ذریعہ چوہوں میں اسٹریپٹوزوٹوسین سے متاثرہ ذیابیطس کارڈیو مایوپیتھی کے خلاف حفاظت کرتا ہے۔

از راہ کرم رابطہ کریںoscar.xiao@wecistanche.comمزید معلومات کے لیے

اس مطالعہ نے اس بات کی تحقیقات کی کہ آیا کیمپفیرول کو کم کر سکتا ہے۔آکسیڈیٹیوسٹریپٹوزوٹوسن (STZ) میں بائیں وینٹریکلز (LVs) کا سوزشی، اور فبروٹک نقصان۔ بالغ نر چوہوں کو 5 گروپوں (n=12/each) میں بطور کنٹرول، کنٹرول پلس کیمپفیرول، STZ-حوصلہ افزائی ذیابیطس mellitus (STZ-DM)، STZ-DM پلس kaempferol، اور STZ-DM پلس kaempferol plus EX میں تقسیم کیا گیا تھا۔ -527، ایک sirtuin 1 (SIRT1) روکنے والا۔ ذیابیطس کے چوہوں کے لیے کیمپفیرول کی انتظامیہ نے LVs کے سسٹولک اور ڈائیسٹولک افعال کو نمایاں طور پر محفوظ رکھا جو وینٹریکولر کولیجن کے جمع ہونے، دراندازی میں نمایاں کمی سے وابستہ تھے۔سوزش کے خلیات، اور Bcl2-سے وابستہ X پروٹین (بیکس)، کلیویڈ کیسپیس-3، اور سائٹوکوم-سی کا پروٹین اظہار۔ کنٹرول اور ذیابیطس چوہوں دونوں میں، کیمپفیرول نے جسمانی وزن میں کمی کو کم کیا، روزے کو کم کیاگلوکوز کی سطح، اور روزہ رکھنے والے انسولین کی سطح میں اضافہ اور HOMA-b۔ اس کے علاوہ، کیمپفیرول نے رد عمل آکسیجن پرجاتیوں (ROS) کی سطح کو کم کیا،malondialdehyde(MDA)، ٹیومر نیکروسس فیکٹر-a (TNF-a)، اور interleukin-6 (IL-6)، نے ٹرانسفارمنگ گروتھ فیکٹر-b1 (TGF-b1) کو کم کیا، اور جوہری سطح کو کم کیا۔ NF-kB p65۔ اس کے ساتھ ساتھ، کیمپفیرول نے مینگنیج سپر آکسائیڈ ڈسموٹیز (MnSOD) اور گلوٹاتھیون (GSH) کی LV سطحوں میں اضافہ کیا اور Bcl2 کی کل پروٹین کی سطح، SIRT1 کی جوہری سرگرمی، اور جوہری عنصر erythroid 2- سے متعلقہ عنصر 2 کی جوہری سطح کو متحرک کیا۔ (Nrf2)۔ یہ واقعات ڈیسیٹیلیز کی بڑھتی ہوئی سرگرمی اور SIRT1 کی کل سطح اور Nrf2، NF-kB، smad2، اور FOXO1 کے ایسٹیلیشن میں متوازی کمی سے وابستہ تھے۔ آخر میں: ایس ٹی زیڈ سے علاج شدہ چوہوں میں کیمپفیرول کم ذیابیطس کارڈیو مایوپیتھی اس کے ہائپوگلیسیمک اور انسولین جاری کرنے والے اثرات کے ساتھ ساتھ ایک کارڈیک آزاد میکانزم جس میں SIRT1 کو چالو کرنا شامل ہے۔

مزید جاننے کے لیے براہ کرم یہاں کلک کریں۔

تعارف

ذیابیطس کارڈیو مایوپیتھی (DC)، جو کسی دوسرے خطرے والے عوامل یا خرابی کی عدم موجودگی میں دل کی ساخت اور کام میں اسامانیتاوں سے شناخت کی جاتی ہے، دل کی ناکامی (HF) اور ذیابیطس کے مریضوں میں بڑھتی ہوئی اموات کی سب سے بڑی وجہ ہے (1)۔ DC کے پھیلاؤ کی حالیہ شرحیں 19 سے 26 فیصد تک، دنیا بھر میں خطرناک ہیں (2)۔ تاہم، متاثرہ افراد میں DC کے بڑے طبی مظہر میں غیر فعال بائیں ویںٹرکولر (LV) ہائپر ٹرافی، منفی دوبارہ تشکیل دینا، اور ابتدائی ڈیاسٹولک اور دیر سے سسٹولک افعال (2) شامل ہیں۔ ہائپرگلیسیمیا ڈی سی کی نشوونما کے لیے ذمہ دار ایک اہم وجہ بنی ہوئی ہے جو کئی باہم جڑے ہوئے راستوں کو فعال کر کے آکسیڈیٹیو تناؤ کو جنم دیتی ہے،

سوزش، فبروسس، اورapoptosisبیماری کی اہم خصوصیات (2-4)۔ ان راستوں میں مائٹوکونڈریل آکسیڈیٹیو فاسفوریلیشن کی خرابی اور Ca2 پلس ہینڈلنگ، مقامی رینن-انجیوٹینسن سسٹم کو چالو کرنا، کارڈیک میٹابولزم اور سگنلنگ کے راستے تبدیل کرنا، ROS کی زیادہ پیداوار، غیر معمولی طور پر کم ہونے والے اینٹی آکسیڈنٹس، اور متعدد عوامل کی تبدیل شدہ سرگرمیاں شامل ہیں۔ })۔ فی الحال، یہ اچھی طرح سے قائم ہے کہ کئی ROS نسل کے راستوں کو چالو کرنا، نیوکلیئر فیکٹر erythroid 2- متعلقہ فیکٹر 2 (Nrf2) کو دبانا، ایک ماسٹر اینٹی آکسیڈینٹ ٹرانسکرپشن فیکٹر، نیوکلیئر فیکٹر کپا بی (NF-kB) کو چالو کرنا۔ ، اور تبدیل کرنے والے نمو کے عوامل-b1 (TGF-b1)/smad2/3 میں اضافہ، نیز اندرونی (mitochondria-mediated) سیل اپوپٹوس کو چالو کرنا جانوروں اور دونوں میں ہائپرگلیسیمیا سے متاثرہ DC کے لیے ذمہ دار بڑے مالیکیولر میکانزم ہیں۔ انسان (2، 7-11)۔

لہٰذا، ہائپرگلیسیمیا کو کنٹرول کرنا اور/یا ان نقصان دہ راستوں کو دبانا DC کو روکنے/کم کرنے کے لیے سب سے قابل قبول حکمت عملی ہے۔ Sirtuins، سیلولر سگنلنگ پروٹینز کا ایک خاندان، کو تناؤ والی محرکات (12) کے جواب میں سیلولر ہومیوسٹاسس کے ایک اہم ریگولیٹر کے طور پر تسلیم کیا گیا ہے۔ تمام آئسفارمز میں سے، SIRT1 (خاموش میٹنگ ٹائپ انفارمیشن ریگولیشن 2 ہومولوگ 1)، ایک نیکوٹینامائڈ ایڈنائن ڈینیوکلیوٹائڈ- (این اے ڈی پلس) - منحصر ڈیسیٹیلیز، ممالیہ کے دل میں بہت زیادہ ظاہر ہوتا ہے اور دل کی نشوونما اور تحفظ میں اہم کردار ادا کرتا ہے (13)۔ SIRT1 کے حفاظتی کردار کا مظاہرہ وٹرو اور ویوو میں کئی جانوروں کے ماڈلز جیسے اسکیمیا، اسکیمیا/ریپرفیوژن (I/R)، مایوکارڈیل انفکشن، اور HF (12-15) ​​میں کیا گیا۔ SIRT1 نے DC اور بعد میں HF کی نشوونما اور بڑھنے سے بھی حفاظت کی جہاں ان حالات (16-20) میں اس کے کارڈیک لیول میں نمایاں طور پر کمی کی اطلاع ملی۔ اسی مناسبت سے، متعدد مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ SIRT1 کے ٹرانسجینک یا فارماسولوجیکل ایکٹیویشن نے نہ صرف کارڈیک فنکشن کو محفوظ رکھا بلکہ ذیابیطس کے دلوں میں ہائپرگلیسیمیا سے متاثرہ کارڈیک آکسیڈیٹیو تناؤ، سوزش، اپوپٹوسس اور فائبروسس کو بھی روکا (17, 20, 21)۔ مجموعی طور پر، ان مطالعات نے یہ نتیجہ اخذ کیا ہے کہ SIRT1 کا حفاظتی اثر متعدد ثالثوں اور نقل کے عوامل کو ختم کرنے کی صلاحیت سے منسوب ہے، بشمول Nrf2, Sch66, NF-kB RelA/p65, FOXO3, p53, PGC-1a، اور smad2/3 (12، 17، 18، 20، 22-26)۔ فی الحال، کچھ قدرتی کی cardioprotective صلاحیتflavonoidsSIRT1 کو اپ گریجولیشن/ ایکٹیویشن کے ذریعے ثالثی ادب میں دکھایا گیا ہے اور بہت زیادہ توجہ حاصل کی گئی ہے (17, 21, 27)۔ Kaempferol، ایک بڑا flavonoid ہے جو سبزیوں میں کثرت سے پایا جاتا ہے اور اس میں سوزش، جگر، گردوں اور قلبی عوارض کے خلاف بہت سے تصدیق شدہ طبی علاج کی صلاحیتیں ہیں (21)۔ کیمپفیرول کے ذریعہ فراہم کردہ علاج کی صلاحیتیں متنوع ہیں اور ان میں اینٹی آکسیڈینٹ، اینٹی سوزش، اینٹی فبروٹک، اور اینٹی اپوپٹوٹک اثرات شامل ہیں (21)۔ اس نقطہ نظر کے اندر، کئی مصنفین نے ROS اور سوزش والی سائٹوکائنز کو کم کرنے، NF-kB اور TGF-b1 کو روکنے، اور مختلف حالات میں Nrf-2/اینٹی آکسیڈینٹ محور کو متحرک کرنے کے لیے کیمفیرول کی قوی صلاحیت ظاہر کی ہے (25، {{15) }})۔ بیڈ سائیڈز، کیمپفیرول کو ذیابیطس مخالف دوا کے طور پر بیان کیا گیا ہے جو اینٹی ہائپرگلیسیمیا کو کم کر سکتی ہے اور انسولین کے اخراج کو متحرک کر سکتی ہے (32-34)۔ اس کے کارڈیو پروٹیکشن کے بارے میں، کیمپفیرول نے دل کے افعال اور مائٹوکونڈریا کی سالمیت کو محفوظ رکھا اور دل کو پہنچنے والے نقصان کے متعدد جانوروں کے ماڈلز میں سوزش، فبروسس اور اپوپٹوس کو دبایا جس میں I/R چوٹ، doxorubicin (DOX)/ANG II-حوصلہ افزائی HF، اور DC (29) شامل ہیں۔ ، 35-37)۔ ایک بہت ہی حالیہ خوبصورت مطالعہ میں، کیمپفیرول نے H9c2 خلیوں میں ہائی گلوکوز (HG)/ہائپرگلیسیمیا سے متاثرہ اندرونی خلیات کی موت کو روکا اور اسٹریپٹوزوٹوسن (STZ) کے ذریعے علاج شدہ چوہوں کے دلوں میں سوزش والی سائٹوکائن کی پیداوار کو دبانے اور NF-kB اور TG کو چالو کرنے سے روکا۔ -b1، نیز حوصلہ افزا Nrf2 (31)۔ ہماری تازہ ترین تحقیق میں، ہم نے ROS کی صفائی، اینٹی آکسیڈنٹس کو اپ گریجولیشن، Nrf2 کو چالو کرنے، اور NF-kB (36) کو دبانے کے ذریعے STZ-حوصلہ افزائی نیفروپیتھی کے خلاف حفاظت کرنے کے لیے kaempferol کی صلاحیت ظاہر کی ہے۔ تاہم، اس کے اچھی طرح سے رپورٹ شدہ اینٹی آکسیڈینٹ اور سوزش کے اثرات کے باوجود، ذیابیطس کے چوہوں میں کیمپفیرول کے قلبی اثر کے پیچھے عین مالیکیولر میکانزم غیر واضح ہے۔ دلچسپی کی بات یہ ہے کہ کیمپفیرول کو کم کیا ہوا انوکسیا/ری آکسیجنیشن سے متاثر کارڈیو مایوسائٹی نقصان؛ I/R- حوصلہ افزائی عصبی اور پھیپھڑوں کا نقصان، کیڈمیم کلورائڈ (CdCl2) - حوصلہ افزائی ہپپوکیمپل نقصان، اور ہائیڈروجن پیرو آکسائیڈ (H2O2) - SIRT1 (36, 38-42) کے فعال ہونے سے ریٹنا کو نقصان پہنچا۔ لہذا، اس مطالعے میں، اور اس ثبوت کو دیکھتے ہوئے، ہم نے قیاس کیا کہ کیمپفیرول کی دائمی انتظامیہ نے کارڈیک فنکشن کو محفوظ رکھا ہے اور SIRT1 کو چالو کرنے سے STZ- حوصلہ افزائی DC کے چوہے کے ماڈل میں آکسیڈیٹیو تناؤ، سوزش، فبروسس اور اپوپٹوسس کو روکتا ہے۔ اس کے علاوہ، ہم نے اس مفروضے کو EX527، ایک منتخب SIRT1 روکنے والے کی شریک انتظامیہ کے ذریعے جانچا ہے۔

مواد اور طریقے

اخلاقی بیان تمام طریقہ کار کو KKU میں جانوروں کی اخلاقی کمیٹی کے ذریعہ منظور کیا گیا تھا جو یو ایس نیشنل انسٹی ٹیوٹ آف ہیلتھ کے ذریعہ شائع کردہ ضوابط اور رہنما خطوط پر عمل کرتا ہے۔ کنگ خالد یونیورسٹی (KKU)، ابھا، کے کالج آف سائنس کے جانوروں کے گھر سے کل 60 بالغ نر چوہے (150 ± 5 g/7 ہفتے پرانے) فراہم کیے گئے تھے۔ سعودی عرب، اور تجرباتی طریقہ کار کے دوران وہاں برقرار رکھا۔ تمام چوہوں کو پلاسٹک کے پنجروں میں 4 چوہوں/پنجرے کے طور پر رکھا گیا تھا اور ان کی عام چاؤ اور پینے کے پانی تک ہمیشہ مفت رسائی تھی۔ رہنے کے حالات 21 ± 1 ڈگری، 60 فیصد نمی، اور 12/12 گھنٹہ تاریک/روشنی سائیکل تھے۔ ذیابیطس mellitus (DM) DM کی شمولیت کو منتخب چوہوں میں شامل کیا گیا تھا جیسا کہ دوسروں نے بیان کیا ہے (43، 44)۔ مختصراً، ہر چوہے نے 12 گھنٹے کا روزہ رکھا ہے اور پھر اسے STZ (Ab142155, Abcam, UK, Cambridge) کے ساتھ 0.1 M سائٹریٹ بفر (65 mg/kg/ pH 4.5) میں تیار کیا گیا ہے۔ STZ کے بعد کے پہلے 24 گھنٹے کے علاج کے دوران، تمام چوہوں کو اچانک ہائپوگلیسیمیا کو روکنے کے لیے 5 فیصد گلوکوز محلول فراہم کیا گیا۔ تیسرے دن، فراہم کردہ کٹ (Cat. No. 10009582, Cayman Chemicals, Ann Arbor, MI, USA) کا استعمال کرتے ہوئے خون میں گلوکوز کی سطح کی پیمائش کی گئی اور ان چوہوں کو مطالعہ میں شامل کیا گیا جن میں خون میں گلوکوز کی مقدار 300 mg/kg سے زیادہ تھی اور انہیں ذیابیطس کا مریض سمجھا گیا۔ . تجرباتی ڈیزائن چوہوں کو 5 گروپوں میں تقسیم کیا گیا تھا (n=12/each) 1) کنٹرول گروپ: غیر ذیابیطس والے چوہے اور صرف 0.1 فیصد DMSO حل موصول ہوئے، زبانی طور پر، ایک گاڑی کے طور پر؛ 2) کنٹرول پلس کیمپفیرول سے علاج شدہ گروپ: غیر ذیابیطس والے چوہے تھے اور انہیں روزانہ کیمفیرول کی زبانی خوراک ملتی تھی (0.1 فیصد ڈی ایم ایس او میں تیار) /کلو)؛ 3) STZ-حوصلہ افزائی ذیابیطس ماڈل گروپ (STZ-DM): ذیابیطس کے چوہے تھے جنہوں نے صرف 0.1 فیصد DMSO کی زبانی روزانہ خوراک حاصل کی۔ 4) STZ-DM پلس kaempferol: ذیابیطس کے وہ چوہے تھے جنہیں روزانہ زبانی خوراک kaempferol محلول (50 mg/kg) ملتی تھی، اور 5) STZ-DM plus kaempferol plus EX-527-علاج شدہ گروپ: جن کا EX علاج کیا گیا تھا {48}}، 5 ملی گرام/کلوگرام (آئی پی دو بار/ہفتہ) کی حتمی خوراک پر ایک منتخب SIRT1 روکنا۔ تمام علاج 8 ہفتوں کے لئے کئے گئے تھے، ایک مدت جو چوہوں (31) میں ڈی سی کو دلانے کے لئے دکھایا گیا ہے۔ کیمپفیرول کی خوراک کا انتخاب پچھلے مطالعات کی بنیاد پر کیا گیا تھا جس نے حراستی میں کئی حفاظتی اثرات اور SIRT1 (38، 40) پر محرک اثر دکھایا ہے۔ EX-527 کی ان ویوو خوراک کو عید وغیرہ کے مطالعہ کے لیے منتخب کیا گیا تھا۔ (45) جنہوں نے یہ ظاہر کیا ہے کہ اس طرح کی حراستی زیادہ سے زیادہ کارڈیک SIRT1 کو بغیر کسی منفی اثرات کے روک سکتی ہے (45)۔ کارڈیک ہیموڈینامکس کی پیمائش آخری علاج کے بعد تین دن کے دوران ہیموڈینامک پیرامیٹرز کی پیمائش کی گئی۔ مختصراً، تمام چوہوں کو 12 گھنٹے کے لیے روزہ رکھا گیا اور 80/12 mg/kg ketamine hydrochloride/xylazine hydrochloride محلول (Cat. No. K-113, Sigma Aldrich, St Louis, MO, USA) کے ساتھ گہری بے ہوشی کی گئی۔ اینستھیزیا کی تصدیق کرنے کے بعد، ہر چوہے کو ہیٹنگ ٹیبل پر سوپائن پوزیشن میں رکھا گیا تھا۔ مقعد کی جانچ کے ذریعے درجہ حرارت کی نگرانی کی گئی۔ اس کے بعد، گردن کی جلد کو کھول دیا گیا اور بائیں کیروٹیڈرٹری کو مختص کیا گیا اور ارد گرد کے اعصاب اور ٹشوز سے آزاد ہو گیا. ایک پریشر کیلیبریٹڈ ملر کیتھیٹر (ماڈل نمبر SPR 320) جو 16 چینل پاور لیب ڈیٹا ایکوزیشن سسٹم (ماڈل نمبر 16/35، ADInstruments Pty Ltd., Bella Vista, NSW, Australia) سے منسلک ہے کیروٹڈ شریان کے ذریعے داخل کیا گیا تھا۔ دل کا LV. LV پریشر سگنل 20 منٹ کے لیے ریکارڈ کیا گیا اور محفوظ کیا گیا۔ اس کے بعد ذخیرہ شدہ سگنل کا تجزیہ LabChart سافٹ ویئر (ورژن 8، ADInstruments, Pty Ltd., Bella Vista, NSW, Australia) کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا اور درج ذیل پیرامیٹرز اخذ کیے گئے: LVSP (LV سسٹولک پریشر) اور LVEDP (LV end-diastolic پریشر)۔ تجزیہ کے دوران، ریکارڈنگ کے پہلے 5 منٹ کو شامل نہیں کیا گیا تھا اور اسے استحکام کا مرحلہ سمجھا جاتا تھا۔

یادداشت کو بہتر بنانے کے لیے سیستانچ

براہ راست ہیموڈینامک پیرامیٹرز کی پیمائش کے بعد، سینے کو کھولا گیا اور خون کے نمونے براہ راست دل سے سادہ ٹیوبوں میں جمع کیے گئے جنہیں سیرم جمع کرنے کے لیے 1200 × g پر سینٹرفیوج کیا گیا تھا۔ مزید بائیو کیمیکل تجزیہ کے لیے تمام سیرم کے نمونے -20 ڈگری پر محفوظ کیے گئے تھے۔ پھر دلوں کو تیزی سے نکالا گیا، وزن کیا گیا اور برف پر رکھا گیا۔ ہر دل کا LV نکال کر چھوٹے چھوٹے ٹکڑوں میں کاٹ دیا گیا۔ کچھ ٹکڑوں کو 10 فیصد بفرڈ فارملین محلول میں 24 گھنٹے کے لیے رکھا گیا اور ہسٹولوجیکل پروسیسنگ کے لیے بھیجا گیا۔ ہر LV کے دوسرے ٹشوز کو اسنیپ فریز کیا گیا تھا اور انہیں -80 ڈگری پر محفوظ کیا گیا تھا اور بعد میں بائیو کیمیکل اور سالماتی تجزیہ کے لیے استعمال کیا گیا تھا۔ ٹشو ہوموجنیٹس اور نیوکلیئر نچوڑ کی تیاری منجمد LV کے حصوں کو یا تو فاسفیٹ بفر سیلائن (PBS/pH=7.4) یا 1X RIPA بفر (Cat. No. 156034, Abcam, Cambridge, UK) کی 9 جلدوں میں ہم آہنگ کیا گیا تھا۔ پلس 10 µg/ml پروٹیز انحیبیٹر (Cat. No. 78429, ThermoFisher Sci, Waltham, MA, USA)۔ ہوموجنیٹس کو 11000 × g (4 ڈگری ) پر سنٹر فیوج کیا گیا تاکہ ان سپرنٹینٹس کو اکٹھا کیا جا سکے جو -80 ڈگری پر محفوظ کیے گئے تھے اور بعد میں بایو کیمیکل اور ویسٹرن بلوٹنگ کے لیے استعمال کیے گئے تھے۔ نیز، منجمد LVs کے حصوں کو صنعت کار کی ہدایات کے مطابق تجارتی طور پر دستیاب کٹ (Cat. No. 113474, Abcam, Cambridge, UK) کا استعمال کرتے ہوئے جوہری اور سائٹوپلاسمک نچوڑ تیار کرنے کے لیے استعمال کیا گیا۔ نیوکلیئر اور سائٹوپلاسمک فریکشن کی پاکیزگی کو بالترتیب وی ڈی اے سی اور اے ٹیوبلین اور اینٹی باڈیز کا استعمال کرتے ہوئے ویسٹرن بلوٹنگ کے ذریعے جانچا گیا۔ تمام سیل فریکشنز کی پروٹین لیول بریڈ فورڈ پر مبنی پروٹین ڈیٹرمینیشن کٹ (Cat. No. 23200; Thermo-Fisher Sci., Waltham, MA, USA) کا استعمال کرتے ہوئے ماپا گیا۔ کارخانہ دار کی ہدایات کے مطابق۔ فاسٹنگ گلوکوز کے سیرم سیرم میں بائیو کیمیکل پیمائش ایک پرکھ کی کٹ (Cat No. 10009582 Cayman Chemicals Co., Ann Arbor, MI, USA) کا استعمال کرتے ہوئے ماپا گیا۔ فاسٹنگ سیرم انسولین لیولز کی پیمائش ELISA کٹ (Cat. No. ELR-Insulin-1; RayBiotech Inc., Peachtree Corners, GA, USA) کے ذریعے کی گئی۔ اینڈوکرائن لبلبے کے بی سیلز کے کام کی پیمائش HOMA-b انڈیکس سے کی گئی جیسا کہ درج ذیل فارمولے سے کیا گیا ہے: [فاسٹنگ انسولین (ng/mL) × 20]/[فاسٹنگ گلوکوز (mg/dL) – 3.5] (46) . creatinine kinase-MB (CKMB) کے سیرم کی سطح ELISA کٹس (Cat. No. MBS2515061 اور Cat. No., MyBioSource, San Diego, CA, USA, بالترتیب) سے ماپا گیا۔ ٹراپونن-I کے سیرم کی سطح ELISA (Ab246529، Abcam، کیمبرج یوکے) کے ذریعے ماپا گیا۔ بائیں وینٹریکلز ہوموجینیٹس میں حیاتیاتی کیمیائی پیمائش LVs ہوموجینیٹس میں کم شدہ گلوٹاتھیون (GSH) اور مینگنیج سپر آکسائیڈ ڈسمیوٹیز (MnSOD) کی کل سطح کو ELISA کٹس (Cat No. MBS046356 اور Cat No.

نتائج

روزہ رکھنے والے سیرم میں گلوکوز کی سطح میں نمایاں اضافہ ہوا، جبکہ سیرم فاسٹنگ انسولین کی سطح، HOMA-b انڈیکس کی سطح، اور چوہے کے جسمانی وزن میں STZ سے متاثرہ ذیابیطس والے چوہوں میں کنٹرول چوہوں کے مقابلے میں نمایاں کمی واقع ہوئی (تصویر 1A{{3} }D)۔ دوسری طرف، فاسٹنگ گلوکوز کے سیرم کی سطح میں نمایاں کمی واقع ہوئی تھی، لیکن چوہوں کے جسمانی وزن اور فاسٹنگ انسولین اور HOMA-b کی سطحوں کے مقابلے میں کنٹرول پلس کیمپفیرول اور ایس ٹی زیڈ پلس کیمپفیرول سے علاج شدہ چوہوں دونوں میں نمایاں اضافہ ہوا ہے۔ بالترتیب کنٹرول یا STZ سے علاج شدہ چوہوں کو (تصویر 1A-1D)۔ اس کے برعکس، فاسٹنگ گلوکوز کی سطح نمایاں طور پر زیادہ رہی اور انسولین اور HOMA-b کی سطح، نیز چوہوں کا حتمی جسمانی وزن STZ پلس کیمپفیرول میں کنٹرول چوہوں کے مقابلے میں نمایاں طور پر کم رہا (تصویر 1A-1 ڈی)۔ اس کے علاوہ، روزہ رکھنے والے سیرم میں گلوکوز اور انسولین کی سطحوں کے ساتھ ساتھ HOMA-b اور چوہے کے جسمانی وزن کی سطحوں میں کوئی خاص فرق نہیں تھا جب STZ پلس kaempferol بمقابلہ STZ پلس kaempferol plus EX{{ کے درمیان موازنہ کیا گیا تھا۔ 13}} (ایک SIRT1 روکنے والا) (تصویر 1A-1D)۔ Kaempferol SIRT1-انحصار طریقے سے اسٹریپٹوزوٹوسن ذیابیطس چوہوں کے دلوں میں بائیں وینٹریکلز کی ساخت اور ہیموڈینامک فنکشن کو محفوظ رکھتا ہے عام LVs ڈھانچہ برقرار myofibrils ڈھانچے کے ساتھ جو عام طور پر افقی ترتیب میں ظاہر ہوتا ہے برقرار مرکزی طور پر واقع نیوکللی اور پیریفیرل سیلز تھے۔ کنٹرول چوہوں (تصویر 2A اور 2B) کے مقابلے میں کنٹرول پلس کیمپفیرول سے علاج شدہ چوہوں میں مشاہدہ کیا گیا۔ اس کے علاوہ، کنٹرول پلس کیمپفیرول سے علاج شدہ چوہوں نے LVSP میں نمایاں اضافہ دیکھا لیکن کنٹرول چوہوں کے مقابلے LVEDP اور CK-MB اور troponin-I کے سیرم کی سطح میں کوئی تبدیلی نہیں آئی (تصویر 3A-3D)۔ تاہم، کنٹرول چوہوں (تصویر 2C اور 2D) کے مقابلے میں STZ-حوصلہ افزائی والے ذیابیطس چوہوں کے LV میں غیر معمولی طور پر مبنی myofibrils میں اضافہ myofibril نقصان، hypertrophied cardiomyocytes، karyolytic nuclei، اور macrophages کی دراندازی کا مشاہدہ کیا گیا۔ اس کے علاوہ، STZ- ذیابیطس والے چوہوں میں LVSP کی قدریں بھی نمایاں طور پر زیادہ تھیں اور CK-MB اور troponin-I کے سیرم کی سطحیں LVSP (تصویر 3A-3D) میں متوازی نمایاں کمی کے ساتھ تھیں۔ کنٹرول چوہوں کے مقابلے LVEDP اور CM-MB اور troponin-I کے سیرم کی سطحوں میں نمایاں کمی اور LVSP کی قدروں میں نمایاں اضافہ کے ساتھ تقریباً نارمل کارڈیو مایوسائٹ ڈھانچہ STZ پلس kaempferol-treated چوہوں میں دیکھا گیا ( انجیر 2E اور 3A-2D)۔ تاہم، STZ پلس کیمپفیرول سے علاج شدہ چوہوں میں ان تمام مارکروں میں بہتری کنٹرول اور STZ پلس کیمپفیرول سے علاج شدہ چوہوں کے درمیان نمایاں طور پر مختلف رہی۔ تاہم، STZ ذیابیطس چوہوں کے LV میں پائے جانے والے آئینہ کی تصویری ساختی تبدیلیاں STZ پلس کیمپفیرول پلس EX-527- علاج شدہ چوہوں (تصویر 2F) کی زندگی میں بھی دیکھی گئیں۔ اس کے علاوہ، LVSP اور LVEDP کی سطحوں کے ساتھ ساتھ CK-MB اور troponin-I کے سیرم کی سطحوں میں کوئی خاص تغیر نہیں پایا گیا جب STZ- ذیابیطس والے چوہوں کا STZ پلس kaempferol plus EX-527-علاج شدہ چوہوں سے موازنہ کیا گیا (تصویر 3A{{51}D)۔ یہ اعداد و شمار بتاتے ہیں کہ کیمپفیرول کے بعد دل کی ساخت اور فنکشن میں بہتری SIRT1- منحصر ہے۔ کیمپفیرول SIRT1-بائیں وینٹریکلز فبروسس پر منحصر دبانے کی حوصلہ افزائی کرتا ہے جس میں تبدیلی کرنے والے گروتھ فیکٹر-b1 کو کم کر کے کنٹرول اور کنٹرول کے LVs کے علاوہ کیمپفیرول سے علاج شدہ چوہوں (تصویر 4A، 4B اور 4G) میں کولیجن فائبر کی عام چند سطحیں دیکھی گئیں۔ )۔ کنٹرول یا کنٹرول کے علاوہ کیمپفیرول سے علاج شدہ چوہوں (تصویر 3C اور 3G) کے مقابلے میں STZ-حوصلہ افزائی ذیابیطس چوہوں کے LVs میں کولیجن کے ذخیرہ میں اضافہ دیکھا گیا۔ تاہم، STZ پلس kaempferol کے LVs میں اور STZ سے علاج شدہ چوہوں (تصویر 4D اور 4E) کے مقابلے میں کولیجن کے جمع ہونے میں واضح کمی دیکھی گئی۔ دوسری طرف، STZ پلس kaemferol plus EX-527 کے LVs میں STZ plus kaempferol (تصویر 4F اور 4G) کے مقابلے میں کولیجن کا اضافہ بھی دیکھا گیا۔ ایک ہی وقت میں، کنٹرول چوہوں (تصویر 4H) کے مقابلے میں STZ ذیابیطس والے چوہوں کے LVs میں TGF-b1 کی پروٹین کی سطح میں اضافہ دیکھا گیا۔ بہر حال، TGF-b1 کی پروٹین کی سطح کنٹرول پلس kaempferol اور STZ پلس kaempferol دونوں کے LVs میں بالترتیب کنٹرول یا STZ ذیابیطس چوہوں کے مقابلے میں نمایاں طور پر کم ہوئی تھی (تصویر 4H)۔ قابل غور بات یہ ہے کہ جب STZ ذیابیطس چوہوں کا موازنہ STZ پلس kaempferol plus EX-527 (تصویر 4H) سے کیا گیا تو TGF-b1 کے پروٹین کی سطح میں کوئی خاص تبدیلی نہیں دیکھی گئی۔ Kaempferol بائیں ویںٹرکلز کے آکسیڈیٹیو تناؤ اور سوزش کو SIRT1-Nrf2 کے منحصر اپ گریجشن اور NF-kB p65 ROS، MDA، IL-6، اور TNF-a کی کل سطحوں کو دبانے کے ساتھ ساتھ جوہری کو روکتا ہے۔ NF-kB p65 کی سطحوں میں نمایاں طور پر اضافہ کیا گیا تھا، لیکن GSH اور SOD کی کل سطحوں کے ساتھ ساتھ Nrf2 کی جوہری سطحوں کو کنٹرول چوہوں کے مقابلے STZ سے متاثر چوہوں کے LVs میں نمایاں طور پر دبایا گیا تھا (تصویر 5A{ {94}}D اور 6A-6D)۔ تاہم، ROS، MDA، IL-6، اور TNF-a کی کل سطحوں میں نمایاں کمی، اور NF-kB p65 کی جوہری سطحوں میں SOD، GSH، اور جوہری سطحوں میں ایک ساتھ اضافہ کے ساتھ کنٹرول پلس کیمپفیرول اور ایس ٹی زیڈ پلس کیمپفیرول دونوں کے ایل وی میں Nrf2 کی سطح بالترتیب کنٹرول یا STZ ذیابیطس چوہوں کے مقابلے میں دیکھی گئی (تصویر 5A-5D اور 6A- 6D)۔ بہر حال، STZ plus kaempferol اور STZ plus kaempferol plus EX{107}}علاج شدہ چوہوں کے درمیان ان تمام پیرامیٹرز کی سطحوں میں کوئی خاص فرق نہیں دیکھا گیا، یہ تجویز کرتا ہے کہ Kaempferol کے اینٹی آکسیڈینٹ اور سوزش کے اثرات دونوں SIRT ہیں{109} } منحصر (تصویر 5A-5D اور 6A-6D)۔ Kaempferol ایک SIRT1- پر منحصر میکانزم میں cardiomyocytes کے اندرونی خلیے کی موت کو روکتا ہے جس میں سائٹوکوم-C کی سائٹوپلاسمک پروٹین کی سطح میں کوئی ردوبدل نہیں ہوتا ہے اور نہ ہی Bax اور کلیویڈ کیسپیس کی کل پروٹین کی سطحوں میں{116}}، Bcl2 کی کل پروٹین کی سطحیں نمایاں طور پر ہوتی ہیں۔ .

بالترتیب کنٹرول یا STZ سے متاثرہ ذیابیطس چوہوں کے مقابلے میں STZ پلس کیمپفیرول (تصویر 8A، 8B، اور 9A-9C)۔ EX-527 کی انتظامیہ، ایک منتخب SIRT1 روکنے والے نے دیگر تمام گروپس (تصویر 8A، 8B، اور 9A- 9D) کے مقابلے SIRT1 کی جوہری سرگرمی اور لوکلائزیشن کو نمایاں طور پر کم کیا۔ اس کے علاوہ، NF-kB p65 کی ایسیٹیل کی سطح نمایاں طور پر زیادہ رہی لیکن ایسیٹیل Nrf2 اور FOXO1 کی پروٹین کی سطح STZ- ذیابیطس والے چوہوں اور STZ پلس kaempferol plus EX{-527 (تصویر 9A-9C) کے درمیان نمایاں طور پر مختلف نہیں تھی۔ )۔

بحث

اس مطالعے کے اعداد و شمار نے چن ایٹ ال کے پہلے شائع شدہ مطالعے کی تصدیق کی۔ (29) اور ان نتائج کی حمایت کرتے ہیں، جو تجویز کرتے ہیں کہ چوہوں میں STZ-حوصلہ افزائی DC کے خلاف کیمپفیرول کا قلبی اثر ہائپوگلیسیمک، اینٹی آکسیڈینٹ، اینٹی سوزش، اینٹی فبروٹک، اور اینٹی اپوپٹوٹک اثرات کے ذریعے ثالثی کیا جاتا ہے۔ تاہم، اس مطالعے کی نئی دریافت یہ ہے کہ ہم پہلی بار یہ دکھا رہے ہیں کہ کیمپفیرول کے ذریعے فراہم کردہ یہ تمام قلبی حفاظتی میکانزم SIRT1-انحصار ہیں جہاں SIRT1 کو سلیکٹیو انحیبیٹر، EX-527 کے ذریعے روکتا ہے۔ kaempferol کے تمام فائدہ مند کارڈیک اثرات کو ختم کر دیا۔ STZ-حوصلہ افزائی DC کے خلاف کیمپفیرول کے ذریعہ فراہم کردہ تحفظ کے طریقہ کار کا خلاصہ تصویر 10 میں دکھایا گیا ہے۔ بی سیلز کی بڑھتی ہوئی تباہی کی وجہ سے ہائپرگلیسیمیا انسانوں اور تجرباتی جانوروں میں ڈی سی کی نشوونما اور بڑھنے کی بڑی وجہ ہے (2، 4، 47)۔ STZ، ایک سائٹوٹوکسک گلوکوز اینالاگ، سب سے عام دوا ہے جو بی سیلز کی آکسیڈیٹیو تباہی کا باعث بنتی ہے اور چوہوں میں ڈی ایم قائم کرنے کے لیے وسیع پیمانے پر استعمال ہوتی ہے اور جیسا کہ اس تحقیق میں دکھایا گیا ہے (48)۔ تاہم، کنٹرول اور ذیابیطس کے چوہوں دونوں کے لیے کیمپفیرول کی انتظامیہ نے روزہ رکھنے والے سیرم میں گلوکوز اور انسولین کی سطح کو نمایاں طور پر کم کیا اور HOMA-b کی قدروں میں نمایاں اضافہ کیا، جو لبلبے کے بی خلیات کے کام کا ایک اہم اشاریہ ہے، اس طرح اس کے قوی ہائپوگلیسیمک اور انسولین کے مطابق ہوتا ہے۔ - جاری کرنے والے اثرات۔ اس کے علاوہ، اس نے چوہوں کے حتمی جسمانی وزن میں اضافہ کیا جو انسولین کے پردیی عمل کو بہتر بنانے اور انسولین کی کمی سے متاثر ہونے والے پٹھوں اور ایڈیپوز ٹشوز کے ضیاع کو کم کرنے کا مشورہ دیتے ہیں۔ تاہم، عین طریقہ کار جس کے ذریعے کیمپفیرول خون میں گلوکوز کی سطح کو کم کرتا ہے اور انسولین کی گردش کی سطح کو متحرک کرتا ہے اس تحقیق میں تحقیق نہیں کی گئی اور اسی طرح کے پچھلے مطالعات سے مداخلت کی جا سکتی ہے۔ اس سلسلے میں، کیمپفیرول نے ایس ٹی زیڈ کی وجہ سے لبلبے کے خلیوں کے آکسیڈیٹیو نقصان کو محفوظ بنایا۔

اس کی اینٹی آکسیڈینٹ خصوصیات (32، 33)۔ تاہم، اگر یہ درست ہے تو، ہمارے اعداد و شمار سے پتہ چلتا ہے کہ لبلبے کے بی خلیات کا ایسا اینٹی آکسیڈینٹ حفاظتی طریقہ کار لبلبے کے SIRT1 کی سطح اور سرگرمی کو ماڈیول کرنے پر منحصر نہیں ہے جیسا کہ ذیابیطس کے چوہوں میں عام میٹابولک پیرامیٹرز دیکھے گئے جن کا علاج kaempferol اور SIRT1 inhibitor (EX{) سے کیا گیا تھا۔ {5}})۔ دوسری طرف، دیگر مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ کیمپفیرول کا ہائپوگلیسیمک اثر پردیی انسولین کی حساسیت کو بہتر بنانے، GLUT-4 اظہار کو متحرک کرنے، پردیی گلوکوز کی مقدار میں اضافہ، اور ہیپاٹک گلوکونیوجینیسیس (31, 33) کو دبانے سے ہوتا ہے۔ اس کے علاوہ، یہ بھی ممکن ہو سکتا ہے کہ کیمپفیرول کے ہائپوگلیسیمک اور انسولین جاری کرنے والے اثرات سیلولر میمبرین ڈیپولرائزیشن (یعنی ATP-حساس کے پلس چینلز کو متحرک کرنے) کے ذریعے زندہ بچ جانے والے بی-خلیوں سے انسولین کے اخراج کو متحرک کر کے ثالثی کر رہے ہوں، ایسا اثر جو اسی طرح کا ہے۔ سلفونی لوریاس ادویات (49، 50)۔ دوسری طرف، DC اور دیگر DM-حوصلہ افزائی پیچیدگیوں کی نشوونما کے دوران ROS کی زیادہ پیداوار ایک اہم نشانی ہے اور سوزش، فبروسس، اور apoptosis (10، 51) سمیت دیگر تمام منفی اثرات پر مشتمل ایک اہم پیتھوفزیولوجیکل میکانزم ہے۔ درحقیقت، پیداوار کو روکنا،

Nrf2 اور دیگر اینٹی آکسیڈنٹس (یعنی N-acetylcysteine ​​(NAC)، catalase، اور SOD) کی اوور ایکسپریسنگ یا فارماسولوجیکل ایکٹیویشن کے ذریعے ROS کی زیادہ تر ذیابیطس کی پیچیدگیوں کو کم کیا اور دل سمیت سرویل ٹشوز میں سوزش اور اپوپٹوٹک راستے کو روکا (10, {{3}) })۔ عام طور پر، ہائپرگلیسیمیا محرک آٹو آکسیڈیشن، لپڈ پیرو آکسیڈیشن، اور ROS پیدا کرنے والے دیگر راستوں جیسے انجیوٹینسن II/NDAPH آکسیڈیز، نائٹرک آکسائیڈ سنتھیس (NOS)، lipoxygenase (LOX)، مفت فیٹی ایسڈز/مائٹوکونڈری کو بڑھا کر کارڈیک ROS کو اکساتا ہے۔ kinase C (PKC)، ایڈوانسڈ گلائکیشن اینڈ پروڈکٹس (AGEs)، ہیکسامین، اور پولیول پاتھ ویز (4، 5، 11، 51، 55، 56)۔ منفی طور پر، ہائپرگلیسیمیا سے متاثرہ ROS کئی سوزش والی سائٹوکائنز اور آسنجن مالیکیولز، مونوکیٹس/نیوٹروفیلز کی دراندازی، اور NF-kB/ NRLP3 سوزش کو چالو کرکے (2, 7, 8}}7} {{1}) کے اظہار کو بڑھا کر دل کی سوزش کو متحرک کر سکتا ہے۔ اس کے علاوہ، ROS اور سوزش والی سائٹوکائنز Bax اظہار کو متحرک کرکے، Bcl2 کو کم کرکے، اور TGF-b/Samd2/3 سگنلنگ پاتھ وے (2, 9, 59, 60) کو چالو کرکے کارڈیک اندرونی اور خارجی سیل کی موت اور فبروسس کو متحرک کرسکتی ہیں۔ مزید برآں، ہائپرگلیسیمیا AGEs کے ساتھ بات چیت کرتے ہوئے اپنے گلائکوسیلیشن کو بڑھا کر کولیجن کے انحطاط کو روکتا ہے، جو دل کی سختی کو مزید فروغ دیتا ہے۔

(61)۔ تاہم، جب کہ ابتدائی ہائپرگلیسیمیا Nrf2 کی منتقلی کو متحرک کرتا ہے، طویل عرصے تک ہائپرگلیسیمیا اینٹی آکسیڈینٹ پر حاوی ہو جاتا ہے اور ان ٹرانسکرپشن عوامل کی ایکٹیویشن کو دباتا ہے (39، 62)۔ ان مطالعات کے بعد، ہمارے جانوروں کے ماڈل میں ڈی سی کی نشوونما اور بڑھنے میں ROS، آکسیڈیٹیو تناؤ، سوزش، فبروسس، اور اپوپٹوسس کے کردار کی بھی تصدیق چوہوں کے LVs، کولیجن کے جمع ہونے، اندرونی خلیے کے بڑھے ہوئے مارکروں میں ہونے والے واضح نقصان سے ہوئی۔ موت (یعنی اعلیٰ Bax، کلیویڈ کیسپیس-3، اور سائٹوکوم-C، اور کم Bcl2) اور LV فنکشن میں کمی۔ یہ نتائج ROS، لپڈ پیرو آکسائیڈز، اور سوزش والی سائٹوکائنز کے کارڈیک لیول میں نمایاں اضافے اور NF-kB p65 اور TGF-b1 کو چالو کرنے کے ساتھ بھی ہم آہنگ تھے۔ اس کے علاوہ، STZ کے ساتھ علاج نے Nrf2 کی جوہری سطح کے ساتھ ساتھ GSH اور SOD کی کل سطح کو بھی کم کیا۔ اس کے برعکس، kaempferol LV فنکشن کو محفوظ رکھنے، کولیجن کے جمع ہونے کو کم کرنے، کارڈیک فائبروسس کو دبانے، اور ان تمام بائیو کیمیکل واقعات میں ہونے والی تبدیلیوں کو تبدیل کرنے کے قابل تھا، اس طرح طاقتور اینٹی آکسیڈینٹ، اینٹی سوزش، اینٹی فبروٹک، اور اینٹی اپوپٹوٹک اثرات تجویز کرتا ہے۔ اس مطالعے میں ایک اہم مشاہدہ یہ ہے کہ کیمپفیرول MDA اور ROS کی سطح کو کم کرنے، NF-kB p65 کے جوہری لوکلائزیشن کو دبانے، اور Nrf2 کی جوہری سطحوں اور GSH، اور SOD کی کل سطحوں کو متحرک کرنے کے قابل تھا، بغیر کسی تبدیلی کے۔ کنٹرول چوہوں کے دلوں میں اپوپٹوٹک/اینٹی اپوپٹوٹک مارکر کا اظہار نہ ہی TGF-b1۔ ان اعداد و شمار کی بنیاد پر، ہم اس بات پر سختی سے بحث کر سکتے ہیں کہ اس جانوروں کے ماڈل میں ڈی سی کے خلاف کیمپفیرول کا قلبی اثر اینٹی آکسیڈینٹ اور اینٹی سوزش پوٹینشل کے ذریعے ثالثی کیا جاتا ہے، بنیادی طور پر Nrf2 کو چالو/اپ ریگولیٹ کر کے اور NF-kB p65 کو دبا کر۔ نیز، یہ اعداد و شمار یہ تجویز کرسکتے ہیں کہ ذیابیطس کے دلوں میں کیمفیرول کی مشاہدہ شدہ اینٹی فبروٹک اور اینٹی اپوپٹوٹک صلاحیت اس کے اینٹی آکسیڈینٹ اور سوزش کے اثرات کے لئے ثانوی ہوسکتی ہے۔ ان اعداد و شمار کی حمایت چن ایٹ ال کے حالیہ مطالعے سے ہوتی ہے۔ (31) جنہوں نے یہ بھی دکھایا ہے کہ کیمپفیرول آکسیڈیٹیو تناؤ، سوزش، فبروسس، اور اعلی گلوکوز سے ظاہر ہونے والے H9c2 خلیوں کے ساتھ ساتھ STZ سے متاثر ذیابیطس چوہوں کے دل میں بنیادی طور پر Nrf2 کی اپ گریجشن اور NrF2 کو روکتا ہے۔ kB اسی طرح، دوسرے جانوروں کے ماڈلز میں کارڈیک، رینل اور عصبی نقصان کے خلاف کیمپفیرول کا حفاظتی اثر بنیادی طور پر اس کی ROS کو ختم کرنے کی صلاحیت اور Nrf2 کو چالو کرنے اور NF-kB کو دبانے کے ذریعے ثالثی کی سوزش کو دبانے سے منسوب کیا گیا تھا (29، { {38}}، 40)۔

ذیابیطس کے دلوں میں کیمپفیرول اور اس کے قلبی تحفظ کے امکانات کا پہلے کبھی تجربہ نہیں کیا گیا تھا۔ اس وجہ سے، SIRT1 کے اظہار پر کیمفیرول کے اثر کی تحقیقات کرنا ہماری دلچسپی کا باعث تھا، یہ ایک بڑا پروٹین ہے جو سیلولر تناؤ کے ردعمل کے دوران ایک اہم کردار ادا کرتا ہے۔ یہ مفروضہ SIRT1 (12) کے وسیع اثرات، اینٹی آکسیڈینٹ، اینٹی سوزش، اینٹی فبروٹک، اور اینٹی اپوپٹوٹک اثرات پر مبنی تھا۔ اس کے علاوہ، دیر سے ڈی ایم کے دوران اور ناکام دلوں میں SIRT1 کی سطح اور سرگرمی دل میں نمایاں طور پر ختم ہو جاتی ہے، جبکہ SIRT1 کے فعال ہونے سے کارڈیک فنکشن محفوظ رہتا ہے اور اس سے منسلک کارڈیک آکسیڈیٹیو تناؤ، سوزش، اور اپوپٹوس (20, 21, 26) کو مکمل طور پر ختم کر دیا جاتا ہے۔ نیز، کارڈیو مایوسائٹس میں SIRT1 کے غیر فعال ہونے کے نتیجے میں طبی علامات پیدا ہوئیں جو DC سے بہت ملتی جلتی نظر آتی ہیں، جبکہ SIRT1 ایکٹیویٹر، resveratrol نے اسے الٹ دیا۔ نیز، کیمپفیرول دماغ، پھیپھڑوں، ریٹنا، اور کارڈیو مایوسائٹس، وٹرو میں، یا جانوروں کے دوسرے ماڈلز (36، 40-42) میں SIRT1 کو چالو کر سکتا ہے۔ تاہم، SIRT1 کے نظاماتی حفاظتی کردار کے بارے میں ہماری موجودہ تفہیم فی الحال اچھی طرح سے قائم ہے اور اس کی وجہ اس کی ڈیسیٹیلیز سرگرمی (12) ہے۔ اس کے مطابق، SIRT1 Lys373/Lys382 پر p53 کو ختم کر سکتا ہے اور p53-حوصلہ افزائی شدہ بیکس اپ گریجولیشن اور اس کے نتیجے میں اندرونی سیل اپوپٹوسس اور قبل از وقت سنسنی (12, 69) کو چالو کر سکتا ہے۔ نیز، SIRT1 p300/CBP سے وابستہ عنصر (PCAF) کو روکتا ہے جو p53 (70) کو مستحکم کرتا ہے۔ اس کے علاوہ، SIRT1 کا سوزش مخالف اثر NF-kB میں Lys310 میں RelA/p65 subunit کے deacetylation اور NF-kB ٹرانسکرپشنی سرگرمی (71-73) کے نتیجے میں ہونے والے نقصان سے ثالثی کرتا ہے۔ تاہم، SIRT1 کے ریڈوکس اسٹیٹ ریگولیشن اور اینٹی آکسیڈینٹ صلاحیت کو سرور ٹرانسکرپشنی عوامل کے ڈیسیٹیلیشن کے ذریعے ثالثی کیا جاتا ہے، بشمول FOXO-3a اور Nrf2، یہ دونوں متعدد اینٹی آکسیڈینٹ جیسے اینٹی آکسیڈینٹ انزائمز کی ترکیب کو متحرک کرتے ہیں۔ ؛ ایس او ڈی) اور جی ایس ایچ (20، 21، 25، 74)۔ درحقیقت، اگرچہ کچھ مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ Nrf2 کی acetylation اس کے فعال ہونے کے لیے ضروری ہے (75)۔ دوسرے دستیاب شواہد سے پتہ چلتا ہے کہ Nrf2 کی SIRT1-حوصلہ افزائی سے Nrf2 کی نقل اور اس کے جوہری لوکلائزیشن اور استحکام میں اضافہ ہوتا ہے (76)۔ مزید برآں، SIRT1 SERCA2 اظہار کو محفوظ رکھ کر کارڈیک ڈھانچے اور سکڑاؤ کو بھی ماڈیول کر سکتا ہے اور psch66 اور FOXO3/PGC-a-mediated mitochondrial biogenesis (17, 77) کو گھٹا کر اور روک کر ROS کی نسل کو روکتا ہے۔ اس کے علاوہ، SIRT1 Smad2/3 (44، 78) کے deacetylation کے ذریعے ٹشو فبروسس کو براہ راست روک سکتا ہے۔ مندرجہ بالا شواہد کی طرح، ذیابیطس کے دلوں میں جوہری ڈیسیٹیلیز سرگرمی اور SIRT1 کے اظہار میں نمایاں کمی ڈی ایم کی شمولیت کے 90 دن بعد مشاہدہ شدہ کارڈیک نقصان دہ اثرات میں نمایاں طور پر حصہ لیتی ہے۔ SIRT1 کی سطح/سرگرمی میں اس طرح کی کمی smad2، NF-kB، FOXO3، اور Nrf2 کی تیز رفتار سطحوں میں نمایاں واضح اضافہ کا باعث بنی، اس طرح ROS کی پیداوار، اینٹی آکسیڈینٹ کی سطح میں کمی، سوزش، اور خلیے کی اندرونی موت میں اضافہ ہوا۔ تاہم، اس مطالعے میں ایک نیا پتہ یہ ہے کہ کیمپفیرول SIRT1 اور deacetylate کو اپ گریڈ اور فعال کرنے کے قابل تھا، یہ تمام ٹرانسکرپشن عوامل کنٹرول اور STZ-DM دونوں چوہوں کے دلوں میں ہیں، اس طرح پہلے بیان کردہ شواہد کی تصدیق کرتے ہیں کہ کیمپفیرول ایک طاقتور ایکٹیویٹر ہے۔ SIRT1 کا۔ یہ جانچنے کے لیے کہ آیا تحفظ کا طریقہ کار SIRT1 کی طرف سے کافی حد تک حوصلہ افزائی کرتا ہے، ہم نے ذیابیطس کے چوہوں میں کیمپفیرول کے ساتھ EX-527، ایک منتخب SIRT1 روکنے والا مشترکہ انتظام کیا ہے۔ جیسا کہ توقع کی گئی تھی، EX-527 کی انتظامیہ نے کیمفیرول کے تمام کارڈیک اور بائیو کیمیکل فوائد کو مکمل طور پر ختم کر دیا ہے۔ یہ اعداد و شمار بتاتے ہیں کہ مشاہدہ کیا گیا مؤثر اینٹی آکسیڈینٹ اور اینٹی سوزش، اور اینٹی فبروٹک اثرات اور ان کے بعد کیمفیرول کے اینٹی اپوپٹوٹک اثرات SIRT1- منحصر ہیں۔

حوالہ جات
1. گلبرٹ RE، Krum H. ذیابیطس میں دل کی ناکامی: اینٹی ہائپرگلیسیمک دوائی تھراپی کے اثرات۔ لینسیٹ 2015; 385: 2107- 2017۔
2. جیا جی، ہل ایم اے، سوورس جے آر۔ ذیابیطس کارڈیو مایوپیتھی: اس طبی ادارے میں تعاون کرنے والے میکانزم کی تازہ کاری۔ سرک ریس 2018؛ 122: 624-638۔
3. جیا جی، ڈی مارکو وی جی، سوورس جے آر۔ ذیابیطس کارڈیو مایوپیتھی میں انسولین مزاحمت اور ہائپرانسولینمیا۔ Nat Rev Endocrinol 2016; 12: 144-153۔
4. Nunes S, Rolo AP, Palmeira CM, et al. ذیابیطس کارڈیو مایوپیتھی: آکسیڈیٹیو تناؤ، مائٹوکونڈریل dysfunction، اور سوزش پر توجہ مرکوز کریں۔ In: Cardiomyopathies-Types and Treatments, K. Kiraly (ed.) Intech 2017: 235-257۔
5. ولسن اے جے، گل ای کے، ابوڈالو آر اے، ایڈگر کے ایس، واٹسن سی جے، گریو ڈی جے۔ ذیابیطس کے دل میں ری ایکٹو آکسیجن پرجاتیوں کا اشارہ: علاج کے ہدف کے لیے ابھرتا ہوا امکان۔ دل 2018; 104: 293-299۔
6. رچی آر ایچ، ایبل ای ڈی۔ ذیابیطس دل کی بیماری کے بنیادی میکانزم۔ سرک ریس 2020؛ 126: 1501-1525۔
7. Lorenzo O، Picatoste B، Ares-Carrasco S، Ramirez E، Egido J، Tunon J. ذیابیطس کارڈیو مایوپیتھی میں جوہری عنصر kB کا ممکنہ کردار۔ ثالثی انفلام 2011; 2011: 652097. DOI: 10.1155/2011/652097.
8. Fuentes-Antras J, Ioan AM, Tunon J, Egido J, Lorenzo O. ذیابیطس کارڈیو مایوپیتھی سے وابستہ سوزش میں ٹول نما رسیپٹرز اور سوزش آمیز کمپلیکس کو چالو کرنا۔ Int J Endocrinol 2014; 2014: 847827. DOI: 10.1155/2014/847827
9. روسو اول، فرانگوگینس این جی۔ ذیابیطس سے وابستہ کارڈیک فائبروسس: سیلولر اثر کرنے والے، مالیکیولر میکانزم اور علاج کے مواقع۔ جے مول سیل کارڈیول 2016؛ 90: 84-93۔
10. Ge ZD، Lian Q، Mao X، Xia Z. ذیابیطس کارڈیو مایوپیتھی کے لیے ممکنہ علاج کے ہدف کے طور پر Nrf2 کی موجودہ حیثیت اور چیلنجز۔ انٹ ہارٹ جے 2019؛ 60: 512-520۔
11. جبیدی ایف ایف، زینلابدین ایس، ماریپن وی، بڈین ایس بی۔ ذیابیطس کارڈیو مایوپیتھی میں مائٹوکونڈریل dysfunction: فینولک ایسڈ کے ممکنہ علاج کے کردار۔ Int J Mol Sci 2020؛ 21: 6043۔ DOI: 10.3390/ijms21176043 12۔ D'Onofrio N، Servillo L، Balestrieri ML. SIRT1 اور SIRT6 قلبی امراض کے تحفظ میں سگنلنگ راستے۔ اینٹی آکسیڈ ریڈوکس سگنل 2018؛ 28: 711-732۔