N-(4-میتھوکسی فینائل) کیفیامائڈ کی حوصلہ افزائی میلانوجینیسیس انابیشن میکانزم

پس منظر:

کیفین کا مشتق اینٹی آکسیڈینٹ اور اینٹی ٹائروسینیز سرگرمی کو ظاہر کرتا ہے۔ میلانوجینیسیس پر N-(4-میتھوکسیفینیل) کیفین (K36E) کی سرگرمی اور طریقہ کار کی چھان بین کی گئی۔

طریقے:

B16F0 خلیوں کا علاج K36E کے مختلف ارتکاز کے ساتھ کیا گیا تھا۔ میلانین کے مواد اور متعلقہ سگنل کی منتقلی کا مطالعہ کیا گیا تھا۔ پروٹین کے اظہار کا تعین کرنے کے لئے مغربی بلوٹنگ پرکھ کا اطلاق کیا گیا تھا ، اور ٹائروسینیز سرگرمی اور میلانین مواد کی شناخت کے لئے سپیکٹرو فوٹومیٹری کی گئی تھی۔

نتائج:

ہمارے نتائج نے اشارہ کیا کہ K36E نے B16F0 خلیات میں میلانوسائٹ محرک ہارمون (-MSH) کی حوصلہ افزائی میلانین مواد اور ٹائروسینیز کی سرگرمی کو کم کیا۔ اس کے علاوہ، K36E نے فاسفو سائکلک اڈینوسین مونو فاسفیٹ (سی اے ایم پی) - رسپانس عنصر بائنڈنگ پروٹین، مائیکرو فیتھلمیا سے وابستہ ٹرانسکرپشن فیکٹر (MITF)، ٹائروسینیز، اور ٹائروسینیز سے متعلقہ پروٹین-1 (TRP{14}) کے اظہار کو روک دیا۔ })۔ K36E نے پروٹین kinase B (AKT) اور glycogen synthase kinase 3 beta (GSK3 ) کے فاسفوریلیشن کو چالو کیا، جس کے نتیجے میں MITF ٹرانسکرپشن سرگرمی کو روکا گیا۔ K36E کو کم کیا گیا -MSH-حوصلہ افزائی CAMP راستے، ہائپو پگمنٹیشن میں حصہ ڈالتے ہیں۔

اسی وقت، تحقیق میں، ہمیں Cistanche deserticola کے کل glycosides یا Cistanche deserticola کے phenylethanoid glycosides پر مشتمل ایکسٹریکٹ کا ایک نیا اطلاق بھی ملا اور tyrosinase پر Cistanche deserticola کے کل glycosides کے روکنے والے اثر کا مشاہدہ کیا tyrosinase dopa ریٹ کا استعمال کرتے ہوئے آکسیکرن طریقہ. ٹائروسینیز جلد کے میلانین کے حیاتیاتی ترکیب میں شرح کو محدود کرنے والا اہم انزائم ہے، اور یہ تانبے اور پروٹین کا ایک کمپلیکس ہے۔ یہ ٹائروسین کو ہائیڈرو آکسیلیٹ کر سکتا ہے، جو جسم میں میلانین کی پیداوار کے لیے اہم خام مال ہے، ایل ڈوپا پیدا کر سکتا ہے، اور پھر ڈوپا کو ڈوپاکوئنون میں آکسائڈائز کر سکتا ہے۔ Dopaquinone میٹابولک عمل کی ایک سیریز سے گزرتا ہے، دوبارہ ترتیب دیتا ہے اور پولیمرائز کرتا ہے، اور آخر میں پروٹین کے امتزاج کے ساتھ مل کر میلانین کی ایک سیریز تیار کرتا ہے جو براؤننگ کا سبب بنتا ہے، لہذا ہم نے پایا کہ Cistanche deserticola کا ٹائروسینیز پر ایک اہم ڈاؤن ریگولیشن اثر ہے۔

cistanche مصنوعات کے صحت کے فوائد پر کلک کریں۔

نتیجہ:

K36E نے p-CREB، p-AKT، p-GSK3، ٹائروسینیز، اور TRP-1 سمیت ڈاؤن اسٹریم پروٹین کے اظہار کو کم کرکے میلانین کی ترکیب کو منظم کیا، اور ٹرانسکرپشن فیکٹر، MITF کو فعال کیا۔ K36E میں جلد کو سفید کرنے والے ایجنٹ کے طور پر تیار ہونے کی صلاحیت ہو سکتی ہے۔

مطلوبہ الفاظ:

N-(4-میتھوکسیفینائل) کیفین، میلانوجینیسیس، پروپولیس، مائکروفتھلمیا سے وابستہ ٹرانسکرپشن عنصر، سی اے ایم پی ردعمل عنصر بائنڈنگ پروٹین، گلائکوجن سنتھیس کناز 3 بیٹا۔

پس منظر

میلانین جلد کی فوٹو ڈیمیج اور فوٹو کارسنوجنیسیس کو روکنے میں اہم کردار ادا کرتا ہے۔ تاہم، میلانین کا غیر معمولی جمع ہائپر پگمنٹیشن عوارض جیسے کہ عمر کے دھبے اور میلاسما [1، 2] کو جنم دیتا ہے۔ میلانوجینیسیس پیچیدہ عملوں کا ایک سلسلہ ہے جس میں بہت سے شریک عوامل ہیں۔ جینیاتی پس منظر جلد کی رنگت کا سب سے اہم عنصر ہے۔ میلانین بائیو سنتھیسس کو منظم کرنے کے لیے 150 سے زیادہ جینز پائے گئے ہیں [3–5]۔

مزید برآں، غیر جینیاتی عوامل، جیسے کہ ادویات، ہارمونل تبدیلیاں، سوزش، عمر بڑھنا، اور الٹرا وائلٹ (UV) شعاع ریزی سے جلد کی رنگت کو متاثر کرتے ہیں [4، 5]۔ میلانوجینیسیس مختلف پروٹینز اور انزائمز کے ذریعے ریگولیٹ ہوتی ہے جن میں ٹائروسینیز، مائکروفتھلمیا سے وابستہ ٹرانسکرپشن فیکٹر (MITF)، ٹائروسینیز سے متعلقہ پروٹین-1 (TRP-1)، اور ٹائروسینیز سے متعلقہ پروٹین-2 (TRP) -2) ​​[4، 6-8]۔ UV شعاع ریزی keratinocytes میں -melanocyte-stimulating hormone (-MSH) کے سراو کو متحرک کرتی ہے، جو melanocortin 1 ریسیپٹر (MC1R) سے منسلک ہوتا ہے اور اڈینوسین ٹرائی فاسفیٹ کو سائیکلک اڈینوسین مونو فاسفیٹ (9P) میں تبدیل کرتا ہے۔ سی اے ایم پی پروٹین کناز اے (پی کے اے) کو متحرک کرتا ہے، اور پی کے اے نیوکلئس میں نقل کرتا ہے اور سی اے ایم پی ریسپانس عنصر بائنڈنگ پروٹین (سی آر ای بی) کو چالو کرتا ہے [10، 11]۔ فاسفو-cAMP-رسپانس عنصر بائنڈنگ پروٹین (p-CREB) ٹائروسینیز، TRP-1، اور TRP-2 کے اظہار کو دلانے کے لیے MITF کے اظہار کو بڑھاتا ہے۔ ٹائروسینیز متعدد میکانزم کے ذریعے پختگی اور ایکٹیویشن سے گزرتی ہے، بشمول کاپر بائنڈنگ، گلائکوسیلیشن، اور فاسفوریلیشن، جس کے نتیجے میں میلانین کی ترکیب ہوتی ہے [12]۔

کافی تحقیق نے hypopigmented ایجنٹوں کی ترقی کے لئے melanin biosynthesis کے ریگولیشن کا مطالعہ کیا ہے. ٹائروسینیز کی سرگرمی کو روکنے اور میلانین کی ترکیب کو کم کرنے کے لیے، ہائپر پگمنٹیشن کو روکنے والے کئی ٹائروسینیز انحیبیٹرز کو یا تو ترکیب یا قدرتی ذرائع سے الگ تھلگ کرکے تیار کیا گیا ہے [1, 2, 7, 13]۔ N-(4-methoxyphenyl) کیفین (K36E؛ تصویر 1) کیفیک ایسڈ فینیتھائل ایسٹر کا ایک اینالاگ ہے، جو پروپولس کا ایک فعال جزو ہے۔ ہمارے پچھلے مطالعے میں، ایک کیفین سے مشتق نے اینٹی آکسیڈینٹ خصوصیات کی نمائش کی، UVB کی نمائش کے بعد جلد کے کولیجن کے انحطاط کو روکا، اور انسانی جلد کے فائبرو بلاسٹس اور بغیر بالوں والے چوہوں میں کولیجن کی ترکیب کو متحرک کیا [14، 15]۔ ایک اور کیفین مشتق نے ٹائروسینیز کی سرگرمی اور اظہار کو روک کر میلانوجینک مخالف سرگرمی کی نمائش کی [16]۔

مزید برآں، کیفیک ایسڈ مشتقات جیسے کہ ٹرانس-این-کیفیوائل ٹائرامین اور ٹرانس-این-ڈائی ہائیڈرو-پی-ہائیڈروکسائیسنامویلٹیرامین میلانوسائٹس میں ٹائروسینیز کی سرگرمی کو روکتے ہیں [17]۔ اس طرح، ہم نے قیاس کیا کہ K36E میلانوجینیسیس کو روکتا ہے۔ موجودہ مطالعہ میں، ہم نے B16F0 خلیات میں میلانین کی ترکیب پر K36E سرگرمی کے اثر کی تحقیقات کی، جو جلد کو سفید کرنے والے ایجنٹوں [18–20] کی تحقیقات کے لیے ایک اچھی طرح سے قائم کردہ ماڈل ہے۔ اس کے علاوہ، ہم نے تحقیقات کی کہ آیا K36E کی اینٹی میلانوجینک سرگرمی TRP1، AKT/glycogen synthase kinase 3 beta (GSK3 )/CREB، اور MITF کے ضابطے پر منحصر ہے۔

طریقے

مواد اور کیمیکلز

K36E کی ترکیب اور شناخت پروفیسر YuehHsiung Kuo نے 99.9 فیصد کی پاکیزگی کے ساتھ کی تھی [21]۔ MSH مرک (Darmstadt, Germany) سے خریدا گیا تھا۔ Arbutin, 3,4-dihydroxy-L-phenylalanine (L-DOPA), DL-dithiothreitol, H-89 dihydrochloride hydrate, phenylmethanesulfonyl fluoride، اور L-tyrosine Sigma-Aldrich کیمیکل کمپنی سے خریدے گئے تھے۔ سینٹ لوئس، MO، USA)۔ فیٹل بووائن سیرم (FBS)، Dulbecco کا ترمیم شدہ Eagles میڈیم (DMEM)، اور trypsin-ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) GIBCO Invitrogen Corporation (NY, USA) سے خریدے گئے تھے۔ MITF کو پہچاننے والا ایک اینٹی باڈی Abcam (کیمبرج، MA، USA) سے حاصل کیا گیا تھا۔ p-CREB اور CREB کو پہچاننے والی اینٹی باڈیز سیل سگنلنگ ٹیکنالوجی، انکارپوریٹڈ (Danvers, MA, USA) سے خریدی گئیں۔ phospho-AKT, AKT، اور phospho-glycogen synthase kinase 3 beta (p-GSK3 ) کو پہچاننے والی اینٹی باڈیز GeneTex, Inc. (CA, USA) سے حاصل کی گئیں۔ ایکٹین، GSK3، TRP-1، اور ٹائروسینیز کو پہچاننے والی اینٹی باڈیز سانتا کروز بائیو ٹیکنالوجی، انکارپوریشن (سانتا کروز، CA، USA) سے حاصل کی گئیں۔

مشروم ٹائروسیناز کی روک تھام پر K36E کا اثر

مشروم ٹائروسینیز کی سرگرمی کو پہلے بیان کردہ طریقہ کار میں معمولی ترمیم کے ساتھ سپیکٹرو فوٹومیٹرک طور پر طے کیا گیا تھا [7، 21-23]۔ اربوٹین (2 ایم ایم) ایک مثبت کنٹرول تھا۔ فاسفیٹ بفر سیلائن (PBS) میں ٹیسٹ کے نمونے اور L-tyrosine کو ایک 96-کنویں مائکروپلیٹ (Nunc، ڈنمارک) میں شامل کیا گیا تھا، اور مشروم ٹائروسینیز شامل کیا گیا تھا۔ انکیوبیشن کے بعد، رد عمل کے مرکب میں پیدا ہونے والے ڈوپاکروم کی مقدار کا تعین مائکروپلیٹ ریڈر (ٹیکن، گروڈگ، آسٹریا) کا استعمال کرکے 492 این ایم آپٹیکل کثافت پر کیا گیا تھا۔

سیل ثقافتیں۔

B16F0 خلیات تائیوان کے بائیو ریسورس کلیکشن اینڈ ریسرچ سینٹر سے خریدے گئے تھے اور DMEM میں 10 فیصد FBS اور 100 یونٹس/mL پینسلن اور سٹریپٹومائسن کے ساتھ 37 ڈگری پر 5 فیصد CO2 میں کلچر کیے گئے تھے۔

سیل وابستگی پرکھ

سیل کی نشوونما کے تجربات ایک 3-(4, 5- dimethylthiazol-2-yl)-2, 5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) پرکھ کا استعمال کرتے ہوئے کیے گئے پہلے بیان کردہ طریقہ کار [7، 8، 24، 25]۔ ہائیڈروجن پیرو آکسائیڈ کو مثبت کنٹرول کے طور پر استعمال کیا گیا تھا۔ خلیوں کو راتوں رات کلچر کیا گیا اور 48 گھنٹے کے لئے K36E کی مختلف تعداد کے ساتھ علاج کیا گیا، اور پھر ہر کنویں میں ایک MTT محلول شامل کیا گیا۔ انکیوبیشن کے بعد، ایک سوڈیم ڈوڈیسائل سلفیٹ (SDS) محلول شامل کیا گیا، جس سے خلیوں میں پیدا ہونے والے فارمازان کرسٹل کو تحلیل کیا گیا۔ آپٹیکل کثافت کو مائکروپلیٹ ریڈر (ٹیکن، گروڈگ، آسٹریا) کا استعمال کرتے ہوئے 570 این ایم پر ماپا گیا۔

سیلولر میلانین مواد

B16F0 خلیات میں میلانین کے مواد کی پیمائش پچھلے مطالعات [7، 8، 23] سے ترمیم شدہ طریقہ استعمال کرکے کی گئی۔ B16F0 خلیات کو 6-کنویں کی پلیٹوں میں 7 × 104 سیل فی کنویں کی کثافت پر سیڈ کیا گیا اور رات بھر انکیوبیٹ کیا گیا۔ خلیوں کو 48 گھنٹے کے لئے -MSH اور K36E پر مشتمل میڈیم کے سامنے لایا گیا تھا۔ اربوٹین (1 ایم ایم) ایک مثبت کنٹرول تھا۔ NaOH (2 N) خلیوں کو لیس کرنے کے لئے ہر کنویں میں شامل کیا گیا تھا ، جو پھر سینٹرفیوج تھے۔ ELISA ریڈر (Tecan، Grodig، Austria) کا استعمال کرتے ہوئے سپرنٹنٹ میں میلانین کا مواد 405 nm پر ماپا گیا۔

سیلولر ٹائروسینیز سرگرمی پرکھ

K36E علاج کے بعد B16F0 خلیوں کی ٹائروسینیز سرگرمی کو پچھلے مطالعات میں بیان کردہ طریقہ میں معمولی ترمیم کے ساتھ ماپا گیا تھا [7، 26، 27]۔ B16F0 سیلز کو 24-اچھی طرح سے ملٹی ڈشز میں چڑھایا گیا اور رات بھر انکیوبیٹ کیا گیا۔ خلیوں کا علاج K36E کے مختلف ارتکاز کے ساتھ کیا گیا تھا اور انہیں مزید 48 گھنٹے تک انکیوبیٹ کیا گیا تھا۔ انہیں PBS کے ساتھ دھویا گیا اور 1 فیصد Triton X-100 کے ساتھ 100 mM PBS (pH 6.8) میں ملایا گیا۔ نتیجے میں مرکب کو انکیوبیشن کے دوران −80 ڈگری پر 15 منٹ تک منجمد کیا گیا اور کمرے کے درجہ حرارت پر پگھلا دیا گیا۔ اس کے بعد، نمونوں کو سینٹرفیوج کیا گیا۔ ایک تازہ تیار شدہ سبسٹریٹ (48 mM pH 7.1 سوڈیم فاسفیٹ بفر میں 15 mM L-DOPA) کو سپرنٹنٹ میں شامل کیا گیا اور انکیوبیٹ کیا گیا۔ اس کے بعد مائکروپلیٹ ریڈر (ٹیکن، گروڈگ، آسٹریا) کا استعمال کرتے ہوئے جاذبیت کو 405 این ایم پر ماپا گیا۔

ٹائروسینیز سرگرمی کی شرح کا حساب درج ذیل مساوات کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا تھا۔

مغربی دھبے کا تجزیہ

جیسا کہ پہلے بیان کیا گیا ہے B16F0 خلیوں میں میلانوجینیسیس سے متعلق پروٹین کے اظہار پر K36E کے اثرات کو ظاہر کرنے کے لیے مغربی بلاٹ تجزیہ استعمال کیا گیا تھا [7، 8، 22، 28، 29]۔ B16F{{10}} خلیات کو 24 گھنٹے کے لیے ایک 10-سینٹی میٹر ڈش میں سیڈ کیا گیا اور اکیلے -MSH (کنٹرول گروپ) کے ساتھ یا -MSH کے علاوہ K36E کے مختلف ارتکاز کے ساتھ 48 گھنٹے تک علاج کیا گیا۔ لائسیٹس کو سینٹرفیوج کیا گیا تھا اور بریڈ فورڈ ریجنٹ (Bio-Rad، Hercules، CA، USA) کا استعمال کرتے ہوئے پروٹین کے مواد کا تعین کیا گیا تھا۔ بیس مائیکروگرام پروٹین کو سوڈیم ڈوڈیسائل سلفیٹ پولی کریلامائڈ جیل الیکٹروفورسس (SDS-PAGE) جیل پر الگ کیا گیا تھا اور پولی وینیلائیڈین ڈیفلوورائیڈ (PVDF) جھلی (Hybond ECL، Amersham Pharmacia Biotech Inc., Piscataway, NJ, US) کا استعمال کرتے ہوئے داغ دیا گیا تھا۔ ٹریس بفرڈ نمکین میں 5 فیصد (w/v) سکمڈ دودھ کے ساتھ دھبوں کو بلاک کیا گیا تھا جس میں 0.05 فیصد ٹوین 20 اور مخصوص اینٹی باڈیز شامل تھیں: ایکٹین (1:1000)، AKT (1:5000)، p-AKT (1:5000) )، CREB (1:1000)، p-CREB (1:1000)، GSK3 (1:500)، p-GSK3 (1:500)، MITF (1:1000)، TRP-1 (1: 500)، اور ٹائروسینیز (1:200)۔ PVDF جھلیوں کو متعلقہ کنجوجیٹڈ اینٹی امیونوگلوبلین جی ہارسریڈش پیرو آکسیڈیس (سانتا کروز بائیوٹیکنالوجی، انکارپوریٹڈ) کے ساتھ انکیوبیٹ کیا گیا تھا۔ Immunoreactive پروٹینوں کا پتہ ایک Enhanced Chemiluminescence Plus kit (Fujifilm, LAS4000) کا استعمال کرتے ہوئے پایا گیا، اور سگنل کی طاقت کو densitometric پروگرام (MultiGauge V2.2) کا استعمال کرتے ہوئے درست کیا گیا۔ مغربی بلاٹ اسیس کے نتائج کم از کم تین انفرادی تجربات کی نمائندگی کرتے ہیں۔

شماریاتی تجزیہ

قدروں کا اظہار کم از کم تین انفرادی تجربات کے نتائج سے اوسط ± معیاری انحراف کے طور پر کیا گیا تھا۔ مختلف علاج کے اثرات میں فرق کا موازنہ اسٹوڈنٹ کے ٹی ٹیسٹ یا انووا کے ساتھ ساتھ SPSS سافٹ ویئر (ورژن 12۔{2}}) کے ذریعے شیفے ٹیسٹ کے ذریعے کیا گیا۔ پی اقدار<0.05 indicated significance. 

نتائج

K36E کے ذریعہ مشروم ٹائروسینیز کی سرگرمی کی روک تھام

1000 μM پر K36E نے مشروم ٹائروسینیز کی سرگرمی کو نمایاں طور پر کم کردیا۔ 500، 750، اور 1000 μM پر مشروم ٹائروسینیز روک تھام کا اثر بالترتیب 6.8 فیصد ± 1.6 فیصد، 14.0 فیصد ± 7.1 فیصد، اور 36.8 فیصد ± 1.1 فیصد تھا۔ اس کے علاوہ، مشروم ٹائروسینیز کی سرگرمی پر 2 mM arbutin کی روک تھام کی شرح 65.3 فیصد ± 2.5 فیصد تھی۔

B16F0 خلیات کی عملداری پر K36E کا اثر

1، 1.5، 2، 2.5، 4، 5، 10، 25، اور 50 μM K36E کے ساتھ علاج کے بعد سیل کی قابل عملیت 92.7 فیصد ± 2 تھی۔{42}} فیصد، 91.7 فیصد ± 2.1 فیصد، 90.9 فیصد ± 2.2 فیصد، 87.8 فیصد ± 4.2 فیصد، 72.8 فیصد ± 1۔{61}} فیصد، 68.5 فیصد ± 2.4 فیصد، 54.6 فیصد ± 1.6 فیصد، 38.3 فیصد 0.8 فیصد، اور 28.4 فیصد ± 2.3 فیصد، بالترتیب۔ ہائیڈروجن پیرو آکسائیڈ ایک مثبت کنٹرول تھا، اور 48 گھنٹے کے علاج کے بعد 0.1 μM H2O2 کی سیل کی عملداری 48.9 فیصد ± 7.5 فیصد تھی۔ کاسمیٹکس کے لیے مواد تیار کرنے کے لیے سیل کی عملداری قابل قبول تھی۔ انٹرنیشنل آرگنائزیشن فار اسٹینڈرڈائزیشن (ISO) 10993–5:2009 (طبی آلات کی حیاتیاتی تشخیص) کے مطابق، 80 فیصد سے زیادہ خلیے کی عملداری کو نان سائٹوٹوکسٹی سمجھا جاتا ہے۔ نتائج نے اشارہ کیا کہ 0.5 سے 2.5 μM K36E کے ساتھ 48 گھنٹے تک علاج کا B16F0 خلیوں پر کوئی سائٹوٹوکسک اثر نہیں ہوا۔

B16F0 خلیوں میں K36E کے ذریعے میلانین بائیو سنتھیسز کی روک تھام

شکل 2a B16F0 خلیوں میں 0.5 μM -MSH کے ذریعے محرک کے بعد میلانین بائیو سنتھیسس پر K36E کے اثرات کو ظاہر کرتا ہے۔ انٹرا سیلولر میلانین کا مواد 124.6 فیصد ± 13 تک بڑھ گیا۔ MSH کے ساتھ علاج کے بعد۔{10} فیصد۔ 1.0 μM سے زیادہ مقدار میں K36E نے میلانین کے مواد کو نمایاں طور پر کم کیا، جو کم ہو کر 97.5 فیصد ± 1.9 فیصد، 96.6 فیصد ± 3.3 فیصد، 94.4 فیصد ± 2.8 فیصد، اور 90.8 فیصد ± 1.4 فیصد (تصویر 2a) ہو گیا۔ میلانین بائیو سنتھیسس پر K36E کا اثر 1 mM arbutin کی طرح تھا۔

B16F0 خلیوں میں K36E کے ذریعہ ٹائروسینیز سرگرمی کی روک تھام

K36E نے 48 گھنٹے تک علاج کے بعد B16F0 خلیوں میں ٹائروسینیز کی سرگرمی کو نمایاں طور پر روکا (تصویر 2b)۔ ٹائروسینیز سرگرمی کی سطحیں 83.2 فیصد ± 2.1 فیصد، 76.3 فیصد ± 2.9 فیصد، 72۔ ، اور 2.5 μM K36E، بالترتیب، 48 گھنٹے کے لیے۔ نتائج نے اشارہ کیا کہ K36E نے ٹائروسینیز سرگرمی کی روک تھام کے ذریعے B16F0 خلیوں کے میلانین مواد کو روکا۔

melanogenesis سے متعلق پروٹین پر K36E کے اثرات

K36E نیچے ریگولیٹڈ ٹائروسینیز اور TRP-1 اظہار

یہ جانچنے کے لیے کہ آیا K36E کے ذریعے میلانوجینیسیس کی روک تھام کا تعلق میلانوجینیسیس سے متعلق پروٹینز کے اظہار کی سطح سے تھا، بشمول ٹائروسینیز اور TRP-1، B16F0 خلیات -MSH (0) کے ساتھ انکیوبیٹڈ تھے۔ 5 μM) اور 48 گھنٹے کے لیے K36E (1–2.5 μM) کی مختلف تعداد۔ اگرچہ ٹائروسینیز ایکسپریشن نے -MSH کے ساتھ علاج کے بعد کنٹرول میں اس کے مقابلے میں 27-گنا اضافہ ظاہر کیا، K36E نے خوراک پر منحصر انداز میں ٹائروسینیز اظہار کو نمایاں طور پر دبایا (تصویر 3)۔ اس کے علاوہ، K36E نے 1.5 μM (تصویر 3) سے زیادہ مقدار میں -MSH-حوصلہ افزائی TRP-1 اظہار کو نمایاں طور پر کم کیا۔

K36E نے MITF اظہار کو کم کیا۔

B16F0 خلیوں میں MITF اظہار میں 15-مقابلے میں اضافہ ہوا جو کہ -MSH کے ساتھ علاج کے بعد کنٹرول میں ہے (تصویر 4)۔ K36E کا علاج 4 گھنٹے کی خوراک پر منحصر MITF اظہار کو روکا گیا اور B16F0 خلیوں میں 1 μM (تصویر 4) کے ارتکاز میں MITF اظہار کو نمایاں طور پر کم کیا گیا۔

K36E نے p-CREB اظہار کو کم کیا۔

B16F0 خلیوں میں p-CREB اظہار میں 1{4}}گنا اضافہ ہوا ہے جو کہ MSH علاج کے بعد کنٹرول میں ہے (تصویر 5)۔ K36E نے 1.5 μM سے زیادہ ارتکاز پر p-CREB اظہار کو نمایاں طور پر روکا اور اس کے بعد B16F0 خلیوں میں MITF اظہار کو کم کیا۔

میلانوجینیسیس سگنلنگ پاتھ وے پر K36E کے اثرات

K36E سے روکا ہوا میلانوجینیسیس PKA ریگولیشن سے وابستہ تھا۔

اس بات کا تعین کرنے کے لیے کہ آیا K36E- inhibited melanogenesis PKA کے ساتھ منسلک تھا، B16F0 خلیات کو 10 μM H-89، PKA inhibitor [30]، اور 2.5 μM K36E 48 گھنٹے کے لیے انکیوبیٹ کیا گیا تھا۔ . K36E اور H-89 کے ساتھ الگ الگ علاج کے نتیجے میں 12- اور 1{16}}بالترتیب -MSH-حوصلہ افزائی ٹائروسینیز اظہار میں گنا کمی واقع ہوئی، اس کے مقابلے میں کنٹرول میں (تصویر 6) )۔ اس کے علاوہ، K36E اور H-89 کے ساتھ cotreatment 09-ٹائروسینیز ایکسپریشن میں کنٹرول کے مقابلے میں گنا کمی کا سبب بنتا ہے۔ مزید برآں، کوٹریٹمنٹ کے بعد ٹائروسینیز ایکسپریشن K36E یا H-89 الگ الگ علاج کے مقابلے میں نمایاں طور پر کم تھا۔ نتائج نے اشارہ کیا کہ PKA کا راستہ K36E کے اینٹی میلانوجینک اثر میں شامل ہوسکتا ہے۔

K36E نے p-AKT اور p-GSK3 اظہار کو اپ گریڈ کرکے میلانوجینیسیس کو روکا

جیسا کہ تصویر 7 میں دکھایا گیا ہے، 1 گھنٹے کے لیے 2.5 μM K36E کے ساتھ علاج سے p-AKT اور p-GSK3 اظہار میں واضح اضافہ ہوا۔ p-AKT کی سطح 1 گھنٹے کے بعد زیادہ سے زیادہ (1{{{0}}گنا اضافہ کے مقابلے میں) 1 گھنٹے کے بعد اور 15-گنا اضافہ 2 گھنٹے کے بعد؛ p-GSK3 کی سطح نے بھی 1. MITF اظہار اور نقل کی سرگرمی اور، اس طرح، ٹائروسینیز جین کے اظہار کو روکنا۔

بحث

ٹائروسینیز اور اس کی سرگرمی میلانوجینیسیس [31–33] کو کنٹرول کرنے میں اہم کردار ادا کرتی ہے۔ ایجنٹ یا مصنوعات جو ٹائروسینیز کی سرگرمی کو روکتی ہیں جلد کو سفید کرنے والے کاسمیٹکس اور کاسمیٹکس میں استعمال کیے گئے ہیں [1، 2، 34]۔ Quercetin اور vanillic acid inhibited -MSH نے MITF، tyrosinase، TRP-1، اور TRP-2 کے اظہار کی حوصلہ افزائی کی، جس سے میلانوجینیسیس روکنا [35, 36]۔ ریسویراٹرول ڈیریویٹوز نے میلانجینک انزائم ایکسپریشنز جیسے ٹائروسینیز اور ٹی آر پی کی روک تھام کے ذریعے میلانین کی ترکیب کو روکا-1 [37]۔ ہمارے نتائج نے اشارہ کیا کہ K36E نے ٹائروسینیز کی سرگرمی اور -MSH حوصلہ افزائی پروٹین اظہار کو روکا، اس طرح میلانین بائیو سنتھیس کو دبایا۔ اس کے علاوہ، K36E نے میلانوجینیسیس سے متعلق پروٹین جیسے TRP-1 کو روکا۔ TRP-1 کو میلانوسومز [38, 39] کے یومیلینک پاتھ وے میں ساختی پروٹین اور کیٹلیٹک انزائم دونوں کے طور پر ایک اہم کردار ادا کرنے کے لیے سمجھا جاتا ہے۔ مذکورہ نتائج نے تجویز کیا کہ K36E کے میلانوجینیسیس میں کمی کو سگنلنگ پاتھ وے کی روک تھام کے ذریعے حاصل کیا جاسکتا ہے جو ٹائروسینیز اظہار اور سرگرمی کو منظم کرتا ہے۔

MITF ٹرانسکرپشن کا سب سے اہم عنصر ہے جو میلانوجینک جینز [5، 40] کے اظہار کو دلانے کے ذریعے میلانوجینیسیس کو منظم کرتا ہے۔ MITF ایکٹیویشن ٹائروسینیز اور TRP-1 کے اظہار کو بہتر بناتا ہے، اور اس کے نتیجے میں میلانین کی ترکیب میں اضافہ ہوتا ہے۔ اس مطالعہ میں، K36E نے -MSH حوصلہ افزائی MITF اظہار کو روک کر میلانوجینیسیس کو دبا دیا۔ CAMP پاتھ وے -MSH-حوصلہ افزائی melanogenesis میں ایک اہم کردار ادا کرتا ہے۔

پچھلے مطالعہ میں، CAMP کو بلند کرنے والے ایجنٹوں نے PI3K/AKT کو روکا۔ GSK3 میلانوجینک انزائمز کے اظہار کو متحرک کرنے اور میلانین کی پیداوار کو آسان بنانے کے لیے MITF کو اس کے ہدف کی ترتیب کے ساتھ پابند کرنے کی تحریک دے سکتا ہے [41]۔ cAMP PI3K اور AKT فاسفوریلیشن اور سرگرمی کو روکتا ہے، اور اپنی سرگرمی کو متحرک کرنے کے لیے GSK3 فاسفوریلیشن کو کم کرتا ہے۔ سی اے ایم پی سگنل کی نقل و حمل کو چالو کرنے کے نتیجے میں ایم آئی ٹی ایف کو ٹائروسینیز پروموٹر سے منسلک کیا جاتا ہے، اس طرح میلانوجینیسیس [41، 42] کی حوصلہ افزائی ہوتی ہے۔ AKT پاتھ وے کی ایکٹیویشن نے میلانجینک انزائمز کو کم کرکے میلانین کی ترکیب کو دبایا [41]۔ Cordycepin کو میلانین ترکیب سے متعلق انزائمز، جیسے ٹائروسینیز، TRP-1، اور TRP-2، CREB اور MITF کی سرگرمی کو دبانے، اور PI3K کو چالو کرکے -MSH اور IBMX-حوصلہ افزائی میلانین بائیو سنتھیسز کو روکنے کی اطلاع دی گئی تھی۔ B16F10 میلانوما خلیوں میں /AKT کا راستہ [43]۔ ہمارے نتائج میں، K36E نے CREB فاسفوریلیشن کو روکا۔ K36E نے p-AKT اور p-GSK3 کے اظہار کو بلند کیا، ممکنہ طور پر ٹائروسینیز جین کے اظہار کو دبانے کے لیے MITF ٹرانسکرپشن کو کم کیا۔ پچھلے مطالعات میں بتایا گیا ہے کہ AKT کی ایکٹیویشن نے میلانوسائٹس میں میلانوجینیسیس کو روکا [33، 44]۔ اس طرح، K36E نے روکا - AKT اور GSK3 ایکٹیویشن کی وجہ سے MSH حوصلہ افزائی ہائپر پگمنٹیشن، اور اس کے نتیجے میں MITF، CREB، ٹائروسینیز، اور TRP-1 کی پیداوار کو کم کر دیا (تصویر 8)۔

UV کی نمائش keratinocytes میں -MSH کے سراو کو متحرک کرتی ہے۔ MSH میلانوسائٹس میں MC1R سے منسلک ہوتا ہے، جس کے نتیجے میں CAMP کی پیداوار اور PKA ایکٹیویشن ہوتا ہے [10]۔ سی اے ایم پی پاتھ وے سے متعلق سگنل کی منتقلی، بشمول پی کے اے اور سی آر ای بی ٹرانسکرپشن عوامل کی ایکٹیویشن، ایم آئی ٹی ایف کی اپ گریجشن کا باعث بنتی ہے [45]۔ PKA بعد میں MITF جین اظہار کو چالو کرنے کے لئے CREB کو فاسفوریلیٹ کرتا ہے [46، 47]۔ نیکوٹینک ایسڈ ہائیڈروکسامیٹ نے B16F10 میلانوما خلیوں میں MEK/ERK اور AKT/GSK3 سگنلنگ راستوں کو چالو کرنے کے ذریعے میلانین کی ترکیب کو روکا [48]۔ خشک انار کا ارتکاز پاؤڈر B16F10 خلیوں میں p38 اور PKA/CREB سگنلنگ پاتھ ویز کو غیر فعال کرنے کے ذریعے ٹائروسینیز کی سرگرمی اور B16F10 خلیوں میں میلانین کی پیداوار کو مؤثر طریقے سے کم کر کے سفید کرنے کے اثرات مرتب کرتا ہے [49]۔ CAMP کی حوصلہ افزائی PI3K روکنا AKT فاسفوریلیشن اور اس کی فعالیت کو کم کرتا ہے۔ موجودہ مطالعہ میں، -MSH-حوصلہ افزائی MITF اظہار کو K36E اور H-89 کے ذریعے روکا گیا تھا، جو کہ PKA روکنے والا ہے۔ اس کے علاوہ، K36E اور H-89 کے ساتھ علاج نے میلانین کی ترکیب کی K36E کی حوصلہ افزائی میں کمی کو نمایاں طور پر کم کیا۔ ہمارے نتائج نے تجویز کیا کہ K36E کی اینٹی میلانوجینک سرگرمی PKA کے راستے سے وابستہ ہے اور اس طرح MITF (تصویر 8) کی تنزلی کا باعث بنتی ہے۔

نتیجہ

K36E نے CREB فاسفوریلیشن کو روک کر MITF اظہار کو کم کیا۔ مزید برآں، K36E نے AKT اور GSK3 کے فاسفوریلیشن کو اپ ریگولیٹ کرکے MITF اظہار کو روکا، جس نے بعد میں ٹائروسینیز اور TRP-1 کے اظہار کو روکا اور اس طرح میلانین بائیو سنتھیسز کو کم کیا۔ میلانوجینیسیس پر K36E کے اثر کی مزید تحقیقات کے لیے نارمل میلانوسائٹس اور ان ویوو اسٹڈیز کا اطلاق کیا جا سکتا ہے۔ آخر میں، K36E melanogenesis کے ضابطے کے لیے امیدوار ہو سکتا ہے اور مستقبل میں جلد کو سفید کرنے والی مصنوعات میں اس کے مختلف استعمال ہونے کا امکان ہے۔

اعترافات

اس تحقیق کو سائنس اور ٹیکنالوجی کی وزارت (NSC100-2320-B-039-002-MY3; MOST104-2320-B-039-006) کی طرف سے گرانٹس کے ذریعے تعاون کیا گیا، CMU اعلیٰ یونیورسٹی کے منصوبے کے مقصد کے تحت وزارت تعلیم، تائیوان، اور تائیوان کی وزارت صحت اور بہبود کے کلینیکل ٹرائل اینڈ ریسرچ سینٹر آف ایکسی لینس (MOHW105-TDU-B-212-133019)، اور چائنا میڈیکل یونیورسٹی (CMU102- ایشیا-18)۔

ڈیٹا اور مواد کی دستیابی

اس مضمون کے نتائج کی حمایت کرنے والے ڈیٹاسیٹس کو مضمون میں شامل کیا گیا ہے۔

مصنفین کی شراکتیں۔

YHK، CYL، اور HMC مطالعہ کے ڈیزائن اور تحقیقی فنڈ فراہم کرنے کے ذمہ دار تھے۔ PYW، CSW، اور PJS نے تجربات کو ڈیزائن کیا اور تکنیکی رہنمائی فراہم کی۔ CCC اور HMC نے تجرباتی آپریشن کیا۔ YHK، YHK، CYL، اور HMC نے مقالہ لکھا۔ تمام مصنفین نے حتمی مخطوطہ کو پڑھا اور منظور کیا۔

مسابقتی مفادات

مصنفین اعلان کرتے ہیں کہ ان کی کوئی مسابقتی دلچسپی نہیں ہے۔

اشاعت کے لیے رضامندی۔

قابل اطلاق نہیں۔

اخلاقیات کی منظوری اور شرکت کے لیے رضامندی۔

اس مطالعہ نے تجارتی طور پر دستیاب سیل لائنوں کا استعمال کیا؛ اس طرح اخلاقی منظوری کی ضرورت نہیں تھی۔

مصنف کی تفصیلات

1چینی فارماسیوٹیکل سائنسز اور چائنیز میڈیسن ریسورسز کا شعبہ، چائنا میڈیکل یونیورسٹی، تائیچنگ 404، تائیوان۔ 2 ڈیپارٹمنٹ آف بائیو ٹیکنالوجی، ایشیا یونیورسٹی، تائیچنگ 413، تائیوان۔ 3 شعبہ کاسمیوٹکس، چائنا میڈیکل یونیورسٹی، تائیچنگ 404، تائیوان۔ 4 شعبہ ڈرمیٹولوجی، چائنا میڈیکل یونیورسٹی ہسپتال، تائی چنگ 404، تائیوان۔ 5 سکول آف میڈیسن، چائنا میڈیکل یونیورسٹی، تائیچنگ 404، تائیوان۔ 6 نیشنل میوزیم آف میرین بائیولوجی اینڈ ایکویریم، پنگ ٹونگ 944، تائیوان۔

حوالہ جات

1. Solano F، Briganti S، Picardo M، Ghanem G. Hypopigmenting agents: حیاتیاتی، کیمیائی اور طبی پہلوؤں پر ایک تازہ ترین جائزہ۔ پگمنٹ سیل ریس۔ 2006؛ 19(6):550–71۔

2. چیانگ ایچ ایم، چن ایچ ڈبلیو، ہوانگ وائی ایچ، چن ایس وائی، چن سی سی، وو ڈبلیو سی، وین کے سی۔ میلانوجینیسیس اور قدرتی ہائپو پیگمنٹیشن ایجنٹ۔ 2012.

3. کوسٹن جی ای، ہیئرنگ وی جے۔ انسانی جلد کا رنگت: میلانوسائٹس تناؤ کے جواب میں جلد کے رنگ کو تبدیل کرتے ہیں۔ FASEB J. 2007؛ 21(4):976–94۔

4. کونڈو ٹی، ہیئرنگ وی جے۔ ممالیہ میلانوسائٹ فنکشن اور جلد کے پگمنٹیشن کے ضابطے پر اپ ڈیٹ۔ ماہر ریو ڈرمیٹول۔ 2011؛6(1):97–108۔

5. یاماگوچی وائی، ہیئرنگ وی جے۔ جسمانی عوامل جو جلد کی رنگت کو منظم کرتے ہیں۔ بائیو فیکٹرز۔ 2009؛35(2):193–9۔

6. سماعت VJ. melanocytes/melanogenesis میں سنگ میل۔ جے انویسٹ ڈرمیٹول۔ 2011;131(E1):E1۔

7. Chiang HM، Chien YC، Wu CH، Kuo YH، Wu WC، Pan YY، Su YH، وین KC۔ Rhodiola rosea L. (Crassulaceae) کا ہائیڈرو الکوحل کا عرق اور اس کا ہائیڈرولائزیٹ CREB/MITF/tyrosinase پاتھ وے کو ریگولیٹ کرکے B16F0 خلیوں میں میلانوجینیسیس کو روکتا ہے۔ فوڈ کیم ٹاکسیکول۔ 2014؛ 65:129–39۔

8. وین کے سی، چانگ سی ایس، چیئن وائی سی، وانگ ایچ ڈبلیو، وو ڈبلیو سی، وو سی ایس، چیانگ ایچ ایم۔ Tyrosol اور اس کے analogs الفا میلانوسائٹ محرک ہارمون کی حوصلہ افزائی میلانوجینس کو روکتے ہیں۔ Int J Mol Sci. 2013؛ 14(12):23420–40۔

9. Cui R، Widlund HR، Feige E، Lin JY، Wilensky DL، Igras VE، D'Orazio J، Fung CY، Schanbacher CF، Granter SR، et al. سنٹین ردعمل اور پیتھولوجک ہائپر پیگمنٹیشن میں p53 کا مرکزی کردار۔ سیل 2007؛ 128(5):853–64۔

10. Hocker TL, Singh MK, Tsao H. میلانوما جینیات اور 21ویں صدی میں علاج کے طریقے: ساحل کے کنارے سے پلنگ کی طرف بڑھنا۔ جے انویسٹ ڈرمیٹول۔ 2008؛128(11):2575–95۔

11. Drira R، Sakamoto K. Isosakuranetin، ایک 4′-O-methylated flavonoid، B16BL6 murine melanoma خلیات میں melanogenesis کو متحرک کرتا ہے۔ لائف سائنس. 2015؛ 143:43-9۔

12. چو ٹی ایچ، ڈنگ ایچ وائی، لن آر جے، لیانگ جے وائی، لیانگ سی ایچ۔ Origanum vulgare (oregano) سے protocatechuic acid کے ذریعے melanogenesis اور oxidation کی روک تھام۔ جے نیٹ پروڈکٹ۔ 2010؛73(11):1767–74۔

13. ییوم جی جی، من ایس، کم ایس وائی۔ 2,3,5,6-Ephedra sinica کا Tetramethylpyrazine UVA سے متاثرہ میلانوما/ کیراٹینوسائٹس کو کلچر سسٹم میں میلانوجینیسس اور سوزش کو منظم کرتا ہے۔ انٹ امیونو فارماکول۔ 2014؛18(2):262–9۔

14. چیانگ ایچ ایم، چن سی ڈبلیو، لن ٹی وائی، کوو وائی ایچ۔ N-phenethyl کیفین اور فوٹو ڈیمیج: قسم I پروکولجن انحطاط کو روک کر اور کولیجن کی ترکیب کو متحرک کرکے جلد کی حفاظت کرنا۔ فوڈ کیم ٹاکسیکول۔ 2014؛72C:154–61۔

15. Kuo YH، Chen CW، Chu Y، Lin P، Chiang HM. جلد کی فوٹو ڈیمیج کے خلاف N-Phenethyl Caffeamide کے حفاظتی عمل پر Vitro اور In Vivo اسٹڈیز۔ پی ایل او ایس ون۔ 2015؛ 10(9):e0136777۔

16. Shimoda H, Shan SJ, Tanaka J, Maoka T. beta-Cryptoxanthin ماؤس میں UVB-حوصلہ افزائی میلانوجینیسیس کو دباتا ہے: پروسٹاگلینڈن E2 اور میلانوسائٹ-حوصلہ افزائی ہارمون کے راستے کی روک تھام میں ملوث ہونا۔ جے فارم فارماکول۔ 2012؛64(8):1165–76۔

17. Okombi S, Rival D, Bonnet S, Mariotte AM, Perrier E, Boumendjel A. N-hydroxycinnamoylphenalkylamides کے analogues as inhibitors of human melanocyte-tyrosinase. Bioorg Med Chem Lett. 2006؛16(8):2252–5۔

18. Bellei B, Pitisci A, Izzo E, Picardo M. مرکبات کے پائریڈینائل امیڈازول کلاس کے ذریعہ میلانوجینیسیس کی روک تھام: Wnt/ beta-catein سگنلنگ پاتھ وے کی ممکنہ شمولیت۔ پی ایل او ایس ون۔ 2012;7(3):e33021۔

19. Wang L, Lu AP, Yu ZL, Wong RN, Bian ZX, Kwok HH, Yue PY, Zhou LM, Chen H, Xu M, et al. میلانوجینیسیس روکنے والا اثر اور ginsenoside Rb1 کی پرکیوٹینیئس تشکیل۔ اے اے پی ایس فارماسک ٹیک۔ 2014؛15(5):1252–62۔

20. Suwannalert P, Kariya R, Suzu I, Okada S. Salacia reticulata کے اینٹی سیلولر آکسیڈینٹ پر اثرات اور الفا-MSH-حوصلہ افزائی اور UV شعاع بردار B16 میلانوما خلیوں میں میلانوجینیسیس روکنا۔ نیٹ پروڈ کمیون۔ 2014؛9(4):551–4۔

21. Chou YC, Sheu JR, Chung CL, Chen CY, Lin FL, Hsu MJ, Kuo YH, Hsiao G. N-2- کی طرف سے MMP-9 پروڈکشن پر NF-kappaB کی نیوکلیئر ٹارگٹڈ روکنا ( 4-بروموفینائل) انسانی مونوسائٹک خلیوں میں ایتھائل کیفین۔ کیم بائیول انٹریکٹ۔ 2010؛184(3):403–12۔

22. Chiang HM، Lin JW، Hsiao PL، Tsai SY، Wen KC۔ لیموں کے پودوں کے ہائیڈرولیسیٹس میلانوجینیسیس کو متحرک کرتے ہیں جو UV-حوصلہ افزائی جلد کے نقصان سے بچاتے ہیں۔ Phytother Res. 2011؛25(4):569–76۔

23. Chiang HM, Ko Y, Shih I, Wen K. جلد کو سفید کرنے والے ایجنٹ اور ہیومیکٹینٹ کے طور پر وائن کیک کی ترقی۔ جے فوڈ ڈرگ اینال۔ 2011؛19(2):223–9۔

24. چیانگ ایچ ایم، چن ایچ سی، لن ٹی جے، شی آئی سی، وین کے سی۔ مشیلیا البا ایکسٹریکٹ انسانی ڈرمل فائبرو بلاسٹس میں ایم اے پی کناز پاتھ وے کے ذریعے میٹرکس میٹالوپروٹینیسز کے UVB حوصلہ افزائی اظہار کو کم کرتا ہے۔ فوڈ کیم ٹاکسیکول۔ 2012؛50(12):4260–9۔

25. Salucci S, Burattini S, Battistelli M, Buontempo F, Canonico B, Martelli AM, Papa S, Falcieri E. Tyrosol شعاع زدہ keratinocytes میں apoptosis کو روکتا ہے۔ جے ڈرمیٹول سائنس۔ 2015؛80(1):61–8۔

26. Zhang Y, Helke KL, Coelho SG, Valencia JC, Hearing VJ, Sun S, Liu B, Li Z. میلانوجینیسیس کو ریگولیٹ کرنے میں مالیکیولر چیپیرون gp96 کا لازمی کردار۔ پگمنٹ سیل میلانوما ریس۔ 2014؛27(1):82–9۔

27. پارک ایچ، سانگ کے ایچ، جنگ پی ایم، کم جے ای، رو ایچ، کم ایم وائی، ما جے وائی۔ Tyrosinase اظہار کے جبر کے ذریعے میلانین ترکیب پر Fructus Arctii Extract سے apigenin کا ​​روک تھام کا اثر۔ ایویڈ بیسڈ کمپلیمنٹ الٹرنیٹ میڈ: ای سی اے ایم۔ 2013; 2013:965312۔

28. چیانگ ایچ ایم، لن ٹی جے، چیو سی وائی، چانگ سی ڈبلیو، ہسو کے سی، فین پی سی، وین کے سی۔ Coffea arabica extract اور اس کے اجزاء MMPs اظہار اور MAP kinase پاتھ وے کو دبا کر فوٹو گرافی کو روکتے ہیں۔ فوڈ کیم ٹاکسیکول۔ 2011؛49(1):309–18۔

29. چیانگ ایچ ایم، چیو ایچ ایچ، لیاو ایس ٹی، چن وائی ٹی، چانگ ایچ سی، وین کے سی۔ Isoflavonoid-Rich Flemingia macrophylla Extract Reactive Oxygen species اور MAP Kinase اور MMP اظہار کو روک کر UVB سے متاثرہ جلد کے نقصان کو کم کرتا ہے۔ Evid پر مبنی تکمیلی متبادل میڈ۔ 2013؛ 2013:12۔

30. Bertolotto C, Bille K, Ortonne JP, Ballotti R. B16 میلانوما سیلز میں cAMP کے ذریعے ٹائروسینیز جین کے اظہار کے ضابطے میں TATA باکس کے ارد گرد دو CATGTG شکلیں شامل ہیں: مائیکرو فیتھلمیا جین پروڈکٹ کا مضمرات۔ جے سیل بائیول۔ 1996؛ 134(3):747–55۔

31. کورنر A، Pawelek J. Mamaliian tyrosinase میلانین کے بائیو سنتھیسس میں تین رد عمل کو اتپریرک کرتا ہے۔ سائنس (نیویارک، نیو یارک)۔ 1982؛217(4565):1163–5۔

32. ترپاٹھی آر کے، ہیئرنگ وی جے، یورابی کے، اروکا پی، اسپرٹز آر اے۔ انسانی ٹائروسینیز کی کیٹلیٹک سرگرمیوں کی باہمی میپنگ۔ جے بائیول کیم۔ 1992؛267(33):23707–12۔

33. Slominski A, Tobin DJ, Shibahara S, Wortsman J. Melanin pigmentation in mamalian skin and hermonal regulation. فزیول Rev. 2004؛ 84(4):1155–228۔

34. Fu YT، Lee CW، Ko HH، Yen FL. Artocarpus communis کے نچوڑ ERK اور JNK سگنلنگ پاتھ ویز کو چالو کرنے کے ذریعے الفا میلانوسائٹ محرک ہارمون کی حوصلہ افزائی میلانوجینیسیس کو کم کرتے ہیں۔ سائنٹیفک ورلڈ جرنل۔ 2014; 2014:724314۔

35. چو ٹی ایچ، ڈنگ ایچ وائی، ہنگ ڈبلیو جے، لیانگ سی ایچ۔ اینٹی آکسیڈیٹیو خصوصیات اور الفا میلانوسائٹ-حوصلہ افزائی ہارمون کی حوصلہ افزائی اوریگنم ولگیر سے وینلن اور وینیلک ایسڈ کے میلانوجینیسیس کی روک تھام۔ Exp Dermatol. 2010؛ 19(8):742–50۔

36. کمار کے جے، یانگ جے سی، چو ایف ایچ، چانگ ایس ٹی، وانگ ایس وائی۔ Lucidone، Lindera erythroderma Makino کے پھل سے ایک ناول melanin inhibitor. Phytother Res. 2010; 24(8):1158–65۔

37. Liu Q, Kim C, Jo YH, Kim SB, Hwang BY, Lee MK. میلانوجینیسیس انحیبیٹرز کے طور پر ریسویراٹرول ڈیریویٹوز کی ترکیب اور حیاتیاتی تشخیص۔ مالیکیولز (بیسل، سوئٹزرلینڈ)۔ 2015؛20(9):16933–45۔

38. Jimenez-Cervantes C, Solano F, Kobayashi T, Urabe K, Hearing VJ, Lozano JA, Garcia-Borron JC. میلانوجینک پاتھ وے میں ایک نیا انزیمیٹک فنکشن۔ 5،6-ڈائی ہائیڈروکسی انڈول-2-ٹائروسینیز سے متعلق پروٹین کی کاربو آکسیلک ایسڈ آکسیڈیز سرگرمی-1 (TRP1)۔ جے بائیول کیم۔ 1994;269(27):17993–8000۔

39. Kobayashi T, Urabe K, Winder A, Jimenez-Cervantes C, Imokawa G, Brewington T, Solano F, Garcia-Borron JC, Hearing VJ. ٹائروسینیز سے متعلقہ پروٹین 1 (TRP1) میلانین بائیو سنتھیسس میں DHICA آکسیڈیز کے طور پر کام کرتا ہے۔ EMBO J. 1994؛ 13(24):5818–25۔

40. Gaggioli C, Busca R, Abbe P, Ortonne JP, Ballotti R. Microphthalmia سے وابستہ ٹرانسکرپشن فیکٹر (MITF) کی ضرورت ہے لیکن میلانوجینک جینز کے اظہار کو دلانے کے لیے کافی نہیں ہے۔ پگمنٹ سیل ریس۔ 2003؛ 16(4):374–82۔

41. Khaled M, Larribere L, Bille K, Aberdam E, Ortonne JP, Ballotti R, Bertolotto C. Glycogen synthase kinase 3beta کو CAMP کے ذریعے چالو کیا جاتا ہے اور میلانوجینیسیس کے ضابطے میں فعال کردار ادا کرتا ہے۔ جے بائیول کیم۔ 2002؛277(37):33690–7۔

42. خالد ایم، لاریبیرے ایل، بلے کے، اورٹون جے پی، بیلوٹی آر، برٹولوٹو سی۔ مائیکرو فیتھلمیا سے وابستہ ٹرانسکرپشن فیکٹر فاسفیٹائیڈلینوسیٹول-3-کناز پاتھ وے کا ہدف ہے۔ جے انویسٹ ڈرمیٹول۔ 2003؛121(4):831–6۔

43. Shao YY، Chen CC، Wang HY، Chiu HL، Hseu TH، Kuo YH. اینٹروڈیا کیمفوریٹ کے کیمیائی اجزاء پورے شوربے میں ڈوب جاتے ہیں۔ Nat Prod Res. 2008؛22(13):1151–7۔

44. Oka M, Nagai H, Ando H, Fukunaga M, Matsumura M, Araki K, Ogawa W, Miki T, Sakaue M, Tsukamoto K, et al. انسانی G361 میلانوما سیلز میں فاسفیٹائیڈلینوسیٹول 3-کناز-اکٹ پاتھ وے کے ذریعے میلانوجینیسیس کا ضابطہ۔ جے انویسٹ ڈرمیٹول۔ 2000؛ 115(4):699–703۔

45. Busca R، Ballotti R. Cyclic AMP جلد کے پگمنٹیشن کے ضابطے میں ایک اہم میسنجر۔ پگمنٹ سیل ریس۔ 2000؛ 13(2):60-9۔

46. ​​Shibahara S, Takeda K, Yasumoto K, Udono T, Watanabe K, Saito H, Takahashi K. Microphthalmia سے وابستہ ٹرانسکرپشن فیکٹر (MITF): ساخت، فعل اور ضابطے میں کثیریت۔ J Invest Dermatol Symp Proc/Soc Invest Dermatol, Inc [اور] Eur Soc Dermatol Res. 2001؛6(1):99–104۔

47. لی جے وائی، چوئی ایچ جے، چنگ ٹی ڈبلیو، کم سی ایچ، جیونگ ایچ ایس، ہا کے ٹی۔ کیفیک ایسڈ فینیتھائل ایسٹر مائیکرو فیتھلمیا سے وابستہ ٹرانسکرپشن فیکٹر کی ٹرانس ایکٹیویشن ایکٹیویٹی کو دبانے کے ذریعے الفا میلانوسائٹ محرک ہارمون کی حوصلہ افزائی میلانین ترکیب کو روکتا ہے۔ جے نیٹ پروڈکٹ۔ 2013؛76(8):1399–405۔

48. ہوانگ جی جے، ہوانگ ایس ایس، لن ایس ایس، شاو وائی، چن سی سی، ہو ڈبلیو سی، کوو وائی ایچ۔ ینالجیسک اثرات اور اینٹروڈیا کیمفوریٹ سے ergostatrien{2}}beta-ol کی سوزش کے طریقہ کار نے پورے شوربے کو چوہوں میں ڈبو دیا۔ جے ایگرک فوڈ کیم۔ 2010؛58(12):7445–52۔

49. Tsai TC، Tung YT، Kuo YH، Liao JW، Tsai HC، Chong KY، Chen HL، Chen CM. ماؤس کی جلد کے اسکیمیا ماڈل میں، ایک جڑی بوٹیوں کی دوا، اینٹروڈیا کیمفوریٹ کے سوزش کے اثرات۔ جے ایتھنوفرماکول۔ 2015؛ 159:113-21۔

For more information:1950477648nn@gmail.com