نینو-پی ایس او انتظامیہ تکلیف دہ دماغی چوٹ کے نتیجے میں علمی اور اعصابی خسارے کو کم کرتی ہے حصہ 1

خلاصہ: ٹرامیٹک برین انجری (TBI)، نوجوان آبادی میں اعصابی نقصان کی سب سے عام وجوہات میں سے ایک ہے۔ یہ بڑے پیمانے پر نیوروڈیجینریٹیو بیماریوں، جیسے الزائمر کی بیماری (AD) اور پارکنسنز (PD) کی بیماری کے لیے ایک خطرے کا عنصر سمجھا جاتا ہے۔

تکلیف دہ دماغی چوٹ ایک تشویشناک حالت ہے جو ہمارے دماغوں کو شدید نقصان پہنچا سکتی ہے، جس سے ہمیں یادداشت، سوچ اور فیصلہ سازی میں مختلف درجات متاثر ہوتے ہیں۔ تاہم، اگرچہ یہ مسائل ہماری زندگیوں کو کچھ عرصے کے لیے متاثر کر سکتے ہیں، لیکن اب بھی بہت سے مثبت اقدامات موجود ہیں جو ہماری یادداشت کو بحال کرنے یا بہتر کرنے میں ہماری مدد کر سکتے ہیں۔

سب سے پہلے، ہم علمی تربیت کی ایک سیریز کے ذریعے اپنی یادداشت کو بہتر بنانے میں مدد کر سکتے ہیں، جس میں گیم کھیلنا، روزمرہ کے کاموں کو مکمل کرنا، اور نئی چیزیں سیکھ کر اپنے دماغ کو متحرک کرنا شامل ہے۔ یہ تربیت ہمیں نئے عصبی راستے تیار کرنے، ہماری سوچنے کی صلاحیت کو بہتر بنانے اور ہماری یادداشت کو بڑھانے میں مدد کر سکتی ہے۔

دوسرا، روزمرہ کی زندگی میں، ہم اپنی خوراک اور ورزش کی عادات کو تبدیل کرکے صحت مند دماغ کو برقرار رکھنے میں ہماری مدد کر سکتے ہیں۔ پروٹین، وٹامنز اور اینٹی آکسیڈینٹ سے بھرپور کچھ غذائیں، جیسے سبزیاں، پھل اور گری دار میوے، ہماری علمی صلاحیتوں کو بہتر بنانے اور دماغ کو نقصان سے بچانے میں ہماری مدد کر سکتے ہیں۔ اس کے علاوہ، باقاعدگی سے ورزش اور اچھی نیند کے معیار کو برقرار رکھنا بھی دماغ کی بحالی اور صحت کی دیکھ بھال کے لیے فائدہ مند ثابت ہو سکتا ہے۔

آخر میں، ہم خاندان، دوستوں، اور صحت کی دیکھ بھال کرنے والے پیشہ ور افراد کے ساتھ رابطے میں رہ کر اپنے بحالی کے عمل کی حمایت اور رہنمائی کر سکتے ہیں۔ دوسروں کے ساتھ بات چیت اور مدد اور مدد حاصل کرنے سے ہمیں ایک پرامید رویہ برقرار رکھنے میں مدد مل سکتی ہے، جو ہمارے دماغ کی بحالی اور یادداشت کی بہتری کے لیے ضروری ہے۔

آخر میں، اگرچہ تکلیف دہ دماغی چوٹ کچھ چیلنجز لا سکتی ہے، لیکن ہم ان مشکلات پر قابو پا سکتے ہیں اور مثبت اعمال کے ذریعے اپنی یادداشت اور علمی صلاحیتوں کو بہتر بنا سکتے ہیں۔ یاد رکھیں، ہر کوئی سخت محنت اور صبر آزما کوششوں سے مثبت نتائج حاصل کر سکتا ہے۔ یہ دیکھا جا سکتا ہے کہ ہمیں یادداشت کو بہتر بنانے کی ضرورت ہے، اور Cistanche نمایاں طور پر یادداشت کو بہتر بنا سکتا ہے کیونکہ Cistanche نیورو ٹرانسمیٹر کے توازن کو بھی کنٹرول کر سکتا ہے، جیسے کہ acetylcholine کی سطح میں اضافہ اور ترقی کے عوامل، جو یادداشت اور سیکھنے کے لیے بہت اہم ہیں۔ اس کے علاوہ، Cistanche خون کے بہاؤ کو بھی بہتر بنا سکتا ہے اور آکسیجن کی ترسیل کو فروغ دے سکتا ہے، جو اس بات کو یقینی بنا سکتا ہے کہ دماغ مناسب غذائیت اور توانائی حاصل کرے، اس طرح دماغی قوت اور برداشت کو بہتر بناتا ہے۔

اپنی یادداشت کو بہتر بنانے کے طریقے جانیں پر کلک کریں۔

یہ بیماریاں جزوی طور پر بیماری کے مخصوص غلط فولڈ پروٹین کے جمع ہونے کی وجہ سے نمایاں ہوتی ہیں اور مشترکہ پیتھولوجیکل خصوصیات، جیسے نیورونل موت، نیز سوزش اور آکسیڈیٹیو نقصانات کا اشتراک کرتی ہیں۔

انار کے بیج کے تیل کی نینو فارمولیشن [Nano-PSO (Granagard TM)] کو اس کے فعال اجزاء کو دماغ کو نشانہ بنانے کے لیے دکھایا گیا ہے اور اس کے بعد AD اور جینیاتی CreutzfeldtJacob بیماری کے چوہوں کے ماڈلز میں میموری کی کمی اور اعصابی موت کو روکتا ہے۔

اس مطالعے میں، ہم یہ ظاہر کرتے ہیں کہ ٹی بی آئی ایپلی کیشن سے پہلے یا بعد میں چوہوں کو نینو-پی ایس او کا انتظام علمی اور طرز عمل میں کمی کو روکتا ہے۔ اس کے علاوہ، دماغ کا امیونو ہسٹو کیمیکل داغ اس بات کی نشاندہی کرتا ہے کہ نینو-پی ایس او سے بچاؤ کے علاج سے نیورونل موت میں نمایاں کمی آئی، گلیوسس میں کمی آئی اور متاثرہ خلیوں میں مائٹوکونڈریل نقصان کو روکا۔

آخر میں، ہم نے مغربی بلوٹنگ کا استعمال کرتے ہوئے پرانتستا میں Sirtuin1 (SIRT1) اور Synaptophysin (SYP) کی سطحوں کی جانچ کی۔

نینو پی ایس او کی کھپت نے SIRT1 اور SYP پروٹین پوسٹ انجری کی اعلی سطح کو جنم دیا۔ ایک ساتھ مل کر، ہمارے نتائج بتاتے ہیں کہ Nano-PSO، ایک قدرتی دماغ سے ٹارگٹڈ اینٹی آکسیڈنٹ کے طور پر، TBI کی حوصلہ افزائی سے ہونے والے نقصان کو روک سکتا ہے۔

مطلوبہ الفاظ: TBI; نینو پی ایس او؛ neuroinflammation؛ آکسیڈیٹیو تناؤ؛ نیوروڈیجنریشن

1. تعارف

ٹرومیٹک برین انجری (TBI) صحت عامہ کی ایک گہری تشویش ہے اور نوجوان بالغوں اور بوڑھوں کی آبادی میں معذوری اور موت کی ایک بڑی وجہ ہے۔ یہ سب سے عام اعصابی چوٹوں میں سے ایک سمجھا جاتا ہے جو بیماری اور اموات کا سبب بنتا ہے اور ہر سال دنیا بھر میں 10 ملین سے زیادہ لوگوں کو متاثر کرتا ہے [1]۔ چونکہ سر کی چوٹوں کے لیے ہمیشہ مناسب طبی دیکھ بھال کی ضرورت نہیں ہوتی، اس لیے یہ اعداد و شمار اس سے بھی زیادہ ہونے کا امکان ہے۔

ٹی بی آئی کی اہم وجوہات میں گرنا، سڑک کے حادثات، حملے، اور کھیلوں کی چوٹیں شامل ہیں [2]۔ TBI عام ہے اور خاص طور پر نوعمروں اور نوجوان بالغوں میں سڑک حادثات اور الکحل سے متعلق چوٹوں کے بعد اکثر ہوتا ہے۔

یہ بوڑھوں میں ان کے بڑھتے ہوئے امکانات کی وجہ سے بھی عام ہے [3]۔ جن لوگوں کو ٹی بی آئی ہوا ہے وہ چوٹ کی شدت پر منحصر ہے، مختصر مدت اور طویل مدتی دونوں طرح کے رویے، علمی، اور جذباتی خرابیوں کا شکار ہو سکتے ہیں [3]۔ ]

ٹی بی آئی کے سامنے آنے والے مریض بغیر کسی نقصان کے ابھر سکتے ہیں لیکن انہیں ایسے زخموں کا بھی سامنا کرنا پڑ سکتا ہے جن کے لیے طویل عرصے تک ہسپتال میں داخل ہونا پڑتا ہے اور یہاں تک کہ موت تک پہنچ جاتی ہے۔ TBI کے بعد شدید چوٹ کے تقریباً 40% کیسز موت پر ختم ہو جائیں گے، بچ جانے والے مختلف اعصابی عوارض بشمول مرگی، ڈیمنشیا، اور نیوروڈیجینریٹو امراض میں مبتلا ہیں [3,4]۔

اعتدال پسند چوٹ شدید چوٹ کی طرح ہی مورفولوجیکل تبدیلیوں کا سبب بنتی ہے، لیکن وہ کم شدید ہوتے ہیں، اور علمی نقصانات زیادہ تر شدید چوٹ کی نسبت ہلکے ہوتے ہیں [5]۔ اس کے علاوہ، اس بات کے اچھی طرح سے ثابت شدہ شواہد موجود ہیں کہ ٹی بی آئی نیوروڈیجنریٹیو بیماریوں جیسے الزائمر اور پارکنسنز [6-8] کی نشوونما کے لیے ایک اہم خطرہ ہے۔

آکسیڈیٹیو تناؤ TBI کی ممکنہ ثانوی چوٹوں میں سے ایک ہے، جس میں سیکسائٹوٹوکسائٹی، سوزش، اپوپٹوسس، اور مائٹوکونڈریل dysfunction بھی شامل ہے۔ مائٹوکونڈریل dysfunction اکثر نیوروڈیجینریٹیو بیماریوں جیسے پارکنسنز اور الزائمر [9-12] کے مریضوں میں پایا جاتا ہے۔

Mitochondrial dysfunction ری ایکٹو آکسیجن پرجاتیوں (ROS) کی غیر منظم حد سے زیادہ پیداوار کا باعث بن سکتا ہے، جو TBI کی ثانوی چوٹ کا متواتر اشارہ ہے [13]۔ انسانی جسم ROS کی پیداوار میں ممکنہ اضافے کو آفسیٹ یا روکنے کے لیے اینڈوجینس اینٹی آکسیڈنٹس تیار کرتا ہے۔

جب TBI ROS کی پیداوار میں اضافے کا باعث بنتا ہے، تو جسم کی قدرتی اینٹی آکسیڈینٹ کی سطح غالب ہو جاتی ہے جس کی وجہ سے اکثر لپڈ پیرو آکسیڈیشن اور ڈی این اے اور پروٹین کو نقصان ہوتا ہے [14]۔ یہ یا تو ROS کی زیادتی یا کم اینٹی آکسیڈینٹ کی سطح کا باعث بن سکتا ہے، ایک ایسی حالت جسے آکسیڈیٹیو تناؤ کہا جاتا ہے جس کے تباہ کن اور اکثر زہریلے اثرات ہو سکتے ہیں، جس سے نیورونل سیلز اور ممکنہ روگجنن [15-19] کی موت ہو سکتی ہے۔

TBI کے پاس نقصان کو کم کرنے یا روک تھام کے لیے کوئی ثابت شدہ علاج نہیں ہے۔ اس وجہ سے، علاج کے مثالی پروٹوکول کا تعین کرنے کے لیے چوٹ کی پیروی کرنے والے پیتھولوجیکل میکانزم کی بہتر تفہیم حاصل کرنا انتہائی اہمیت کا حامل ہے۔

Nano-PSO (Granagard TM)، انار کے بیجوں کے تیل کی ایک نینو فارمولیشن جس میں پیونک ایسڈ کی اعلیٰ سطح شامل ہے، جو کہ سب سے مضبوط قدرتی اینٹی آکسیڈینٹ ہے، نیوروڈیجنریٹیو بیماریوں کے متعدد ماڈلز میں میموری اور سیل کی موت سمیت کم کرنے والی نیوروڈیجنریشن علامات کو دکھایا گیا تھا [20-22]۔

جینیاتی سی جے ڈی کے ٹرانسجینک چوہوں کے ماڈل میں، نینو-پی ایس او کی طویل مدتی انتظامیہ کے نتیجے میں بیماری کے بڑھنے میں تاخیر ہوئی اور سیل ڈیتھ کم ہوئی۔ AD کے لیے 5XFAD چوہوں کے ماڈل میں، Nano-PSO انتظامیہ نے یادداشت کی خرابی کو روکا اور A-beta کے جمع ہونے کو کم کیا، دونوں طرح سے انٹرا سیلولر اور انٹرا سیلولر۔

تمام ماڈلز میں، نینو-پی ایس او نے مائٹوکونڈریل سرگرمی میں کمی کو روکا، شاید اس کی مضبوط اور دماغی ٹارگٹڈ اینٹی آکسیڈینٹ فنکشن کی وجہ سے۔ انسانوں میں، نینو پی ایس او کو حال ہی میں ایک سے زیادہ سکلیروسیس کے مریضوں میں یادداشت بڑھانے کے لیے دکھایا گیا تھا [23]۔

موجودہ مطالعے میں، ہم یہ ظاہر کرتے ہیں کہ نینو-پی ایس او کی انتظامیہ، چوہوں میں ٹی بی آئی سے پہلے یا بعد میں ایک غذائی ضمیمہ، بصری اور مقامی یادداشت کی خرابیوں کو کم کرتی ہے۔

یہ دنیاوی پرانتستا اور ڈینٹیٹ گائرس میں اعصابی نقصان کو بھی کم کرتا ہے اور زخمی چوہوں کے دماغوں کے وقتی پرانتستا میں رد عمل کی آسٹروسائٹ کی شدت کو کم کرتا ہے۔ مزید برآں، یہ سائٹوکوم سی آکسیڈیز (COX) کی پیداوار کو بحال کرتا ہے، جو ایک مائٹوکونڈریل انزائم ہے جس کے بارے میں بتایا جاتا ہے کہ نیوروڈیجنریشن [24] کے دوران دماغ کے خلیات میں متاثر ہوتا ہے۔

مزید برآں، یہ سانس کی زنجیر میں کردار ادا کرتا ہے اور عصبی خلیات سمیت خلیات کے ذریعے 95 فیصد تک آکسیجنٹ کی کمی کے لیے ذمہ دار ہے [24]۔

2. نتائج

2.1 ٹی بی آئی سے پہلے اور بعد میں چوہوں کو نینو پی ایس او کا انتظام ان کے علمی بگاڑ کو روکتا ہے

نینو-پی ایس او کے ساتھ ٹی بی آئی کی نمائش اور علاج کے بعد یا تو روک تھام کے طور پر یا پھر ٹی بی آئی کے علاج کے طور پر (دیکھیں شکل 1 اور تجربات کی اسکیم کے طریقے)، مرد ICRmice کا جائزہ TBI کے بعد دو ہفتوں کے بعد ایلیویٹڈ پلس میز کا استعمال کرتے ہوئے الگ الگ گروہوں میں کیا گیا۔

ہم نے بالترتیب بھولبلییا کے کھلے بازوؤں میں گزارے ہوئے وقت اور ہر بازو کے داخلی راستوں کی کل تعداد کو ریکارڈ کرکے چوہوں کے اضطراب جیسے رویے کا اندازہ کیا۔

جانچ کی گئی دونوں طریقوں کے علاج کے دوران تمام گروپوں کے درمیان کھلے بازوؤں میں گزارے گئے وقت میں کوئی فرق نہیں تھا، جس سے ظاہر ہوتا ہے کہ چوہوں کے اضطراب جیسا رویہ یا تو چوٹ سے یا نینو پی ایس او کے علاج سے متاثر نہیں ہوا تھا (نتائج نہیں دکھائے گئے)۔

یادداشت کی تشکیل پر نینو پی ایس او کی کھپت کے علاج کے دونوں طریقوں (ٹی بی آئی سے پہلے یا بعد میں) کے اثرات کا اندازہ لگانے کے لیے، چوٹ کے بعد چوہوں کے مختلف گروہوں پر ناول آبجیکٹ ریکگنیشن (NOR) اور Y-mazeparadigms کیے گئے۔

TBI [25] کے ذریعہ TheNOR پیراڈیم کو مستقل طور پر خراب ہونے کی اطلاع دی جاتی ہے۔ جیسا کہ توقع کی گئی تھی، TBI چوہوں نے بصری یادداشت کی نمایاں کمی کا سامنا کیا اور دیگر تمام گروپس (p < 0} کے مقابلے میں، ناول آبجیکٹ کے قریب کم وقت گزارا۔ .

نینو-پی ایس او کے ذریعہ علاج کے دونوں طریقوں میں خسارے کو کم کیا گیا۔ اگلا، ہم نے مقامی میموری کا اندازہ کرنے کے لیے Y-maze ٹیسٹ کیا جیسا کہ پہلے بیان کیا گیا ہے [26]۔

علاج کے دونوں طریقوں پر، TBI چوہوں کو غیر علاج شدہ چوہوں کے مقابلے میں مقامی میموری کی خرابی کا سامنا کرنا پڑا (p < {{0}}.001، شکل 3A، B)۔ جب چوہوں نے نینو-پی ایس او کے ذریعہ علاج کا استعمال کیا تو، علاج کے دونوں طریقوں (پی <0.001) میں مقامی میموری کی خرابی کو بہتر بنایا گیا تھا۔

شکل 3. ٹی بی آئی چوہوں کے لیے نینو-پی ایس او انتظامیہ نے Y-mazetest میں تشخیص شدہ مقامی میموری کو بہتر کیا۔ TBI کے چوہوں کا علاج کیا گیا یا علاج نہیں کیا گیا TBI کے طریقوں میں بیان کردہ TBI کے بعد دو ہفتوں میں Y بھولبلییا ٹیسٹ کا نشانہ بنایا گیا: (A) چوہوں کا TBI سے پہلے Nano-PSO کے ساتھ علاج کیا گیا؛ اور (B) ٹی بی آئی کے بعد نانو-پی ایس او کے ساتھ علاج کیے گئے چوہے متعلقہ وقت کے ترجیحی اشاریہ کی نمائندگی کرتے ہیں جو چوہوں نے پرانے بازو کے مقابلے میں نوولرم کی کھوج میں صرف کیا۔

ون وے انووا کے شماریاتی تجزیے سے یہ بات سامنے آئی کہ ٹی بی آئی کے جانوروں میں دیگر تمام گروہوں کے مقابلے میں مقامی میموری کی کمی ہے۔ (A: F (3، 36)=16۔{7}}39، p=0۔{6}} Fisher's LSDpost hoc, *** p < 0۔ {15}}1, n=10; B: F (1, 15)=14.127, p=0.00 Fisher's LSD post hoc, ** p <0.01, n { {18}}).NS=اہم نہیں ہے۔ قدریں اوسط ± SEM کے طور پر پیش کی جاتی ہیں۔

2.2 نینو پی ایس او علاج TBI چوہوں میں اعصابی موت کو روکتا ہے۔

طرز عمل کے تجربات کے بعد، جس سے معلوم ہوا کہ نینو-پی ایس او دماغی چوٹ کے نتیجے میں ہونے والے علمی نقصان کو روک سکتا ہے، ہم نے امیونو سائیٹو کیمسٹری کے ذریعے سیلولر سطحوں پر نینو-پی ایس او کی موجودگی یا عدم موجودگی میں ٹی بی آئی کے دماغی نقصان کی سطحوں کا جائزہ لیا۔

چوہوں کو ختم کر دیا گیا اور ان کے دماغوں کو چوٹ کے بعد تین ہفتے کاٹا گیا، اس وقت مزید بائیو کیمیکل تبدیلیاں پائی گئیں [25,27]۔

تبدیلیوں کی جانچ ہپپوکیمپس کے CA3 علاقے، ہپپوکیمپس کے علاقے اور ڈینٹیٹ گائرس میں کی گئی۔ دماغ کے دونوں اطراف کے نتائج کو ہر ماؤس کے لیے ایک قدر میں ملایا گیا۔

اعداد و شمار 4A اور B دماغ کے ان علاقوں کو اینٹی نیو این اینٹی باڈی کے ساتھ امیونوسٹیننگ دکھاتے ہیں، جو بالغ نیوران کے نشان ہیں۔ نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ ٹی بی آئی کے بعد نیوران کی تعداد میں نمایاں کمی واقع ہوئی تھی، لیکن اگر نینو پی ایس او کو ٹی بی آئی یا پوسٹ ٹی بی آئی سے پہلے اور چوہوں کو ختم کرنے تک (تین ہفتے بعد) نیوران میں اس طرح کی کمی کو روکا گیا تھا۔

ٹی بی آئی نے دوسرے تمام گروپس (** p < {{0}}.01، *** p <0.001) کے مقابلے پرانتستا اور ڈینٹیٹ گائرس کے اندر نیورونل شمار میں کمی کی حوصلہ افزائی کی، جو تین ہفتوں میں ایک اہم نیورونل نقصان کی نشاندہی کرتا ہے۔ چوٹ کے بعد (شکل 4A، B)۔ دونوں علاج پرانتستا اور ڈینٹیٹ گائرس میں نیورونل گنتی کو محفوظ رکھتے ہیں۔

تاہم، حفاظتی علاج نے ان علاقوں میں اعصابی نقصان کو مزید کم کیا (** p < {{0}}۔{5}}1, *** p < 0.001) (شکل 4A) TBI کے بعد کے علاج کے مقابلے * p <0.05) (شکل 4B)۔

2.3۔ نینو پی ایس او کی انتظامیہ ٹی بی آئی کی وجہ سے ہونے والی سوزش کو کم کرتی ہے۔

GFAP اینٹی باڈی کا استعمال کرتے ہوئے مدافعتی ہسٹو کیمیکل سٹیننگ کے ذریعہ TBI کی نمائش کے بعد ہونے والے نیورو سوزش کے عمل کی تشخیص جو رد عمل والے ایسٹروائٹس [28,29] کا لیبل لگاتا ہے۔

یہ داغ اس بات کا جائزہ لینے کے لیے کیا گیا تھا کہ آیا چوٹ لگنے کے تین ہفتے بعد ایسٹروسائٹس ٹی بی آئی کے اظہار کی سطح میں کوئی تبدیلیاں ہوئی ہیں اور آیا نینو-پی ایس او کے ساتھ ٹی بی آئی کے بچاؤ یا بعد کے علاج نے ان تبدیلیوں کو متاثر کیا ہے۔ عارضی پرانتستا سے حاصل کردہ دماغ کے ٹکڑوں کا تین ہفتوں کے بعد چوٹ لگنے کے بعد مطالعہ کیا گیا۔

جیسا کہ شکل 5 میں دیکھا جا سکتا ہے، ٹی بی آئی کی نمائش نے پرانتستا (p < 0۔{3}}01,p < 0.01) میں ایسٹروائٹس میں نمایاں بلندی کی حوصلہ افزائی کی۔ بالترتیب (شکل 5)۔ جب نینو-پی ایس او کو ٹی بی آئی کے بعد کے علاج کے طور پر بچاؤ کے طور پر استعمال کیا گیا، تو اس نے بالترتیب p <0.001، p <0.05 میں کارٹیکس میں فعال آسٹروائٹس میں نمایاں کمی کی (شکل 5)۔

یہ نتائج ظاہر کرتے ہیں کہ TBI کی وجہ سے، جیسا کہ علاج نہ کیا گیا TBI سے، TBI سے پہلے Nano-PSO کے ساتھ علاج کیا گیا اور TBI کے بعد Nano-PSO کے ساتھ علاج کیا گیا NeuN (سبز) اور DAPI (نیلا) [اسکیل بار 50 µm کے لیے مدافعتی نظام ]; (B) تمام حصوں کے لیے NeuN امیونوسٹیننگ کی مقداری تشخیص (bregma temporal cortex −1.{24}}6 nm اور dentate gyrus−1.34 nm) ہر تجربے کے اختتامی نقطہ پر ایک طرفہ ANOVA (Cortex:PRE ( F (3, 16)=15.469, p=0۔{14}} Fisher's LSD post hoc, *** p < 0۔{36}}{{46} }}1، N=5؛ PSOT (F (3, 12) {{20}.607,p=0۔{23} } Fisher's LSD post hoc, * p < 0.05 ** p < 0.01, n=3–5)), (DG: PRE (F (3, 14)=6.804, p {{34 }}۔ }۔ NS=اہم نہیں ہے۔ اقدار ± SEM کے طور پر پیش کی جاتی ہیں۔

2.4 Nano-PSO TB1 کے بعد COX IV1 سرگرمی کو بحال کرتا ہے۔

یہ پہلے دکھایا گیا تھا کہ AD اور CJD جیسی نیوروڈیجینریٹیو بیماریوں کے بے ساختہ/جینیاتی ماڈلز میں، COX IV1 کا اظہار، خلیات میں توانائی کی پیداوار کے لیے ایک اہم mitochondrialenzyme، کو کافی حد تک کم کر دیا جاتا ہے اور اس کی جگہ COX IV2 لے لی جاتی ہے، جو کہ اعلی سطح کے تحت کام کر سکتا ہے۔ ROS [24,30]۔ تاہم، یہ ایک عارضی اثر ہے جب تک کہ ROS کی اس طرح کی سطحیں بالآخر اپوپٹوسس اور سیل کی موت کا باعث بنتی ہیں۔

نینو-پی ایس او انتظامیہ ROS کی سطح کو کم کرتی ہے اور COX اظہار کو بحال کرتی ہے [30]۔ لہذا، اس کام میں، ہم نے جانچا کہ کیا یہ TBI کے لیے بھی ہے، جو عام چوہوں کی وجہ سے باہر کی چوٹ ہے۔

اس اثر کے لیے، COX IV1 اینٹی باڈی کے ساتھ جیسا کہ اوپر بیان کیا گیا ہے دماغ کے ٹکڑوں کو ویمیمونسٹینڈ کیا۔ شکل 6 سے پتہ چلتا ہے کہ، جیسا کہ جینیاتی امراض کا معاملہ تھا، TBI بھی دماغ میں نقصان پہنچانے کے تین ہفتے بعد بھی COX IV1 کی سطح میں کمی کا باعث بنتا ہے۔

اس صورت میں، اور [30,31] سے پہلے دکھایا گیا ہے، نینو-پی ایس او کی انتظامیہ COX IV1 کی سطح کو کنٹرول میں اور TBI سے پہلے اور بعد کے چوہوں میں بڑھاتی ہے۔ چونکہ COX IV1 کی سطح میں اضافہ خلیات کی آکسیڈیٹیو حیثیت کی عکاسی کرتا ہے، اس لیے ہم یہ نتیجہ اخذ کرتے ہیں کہ Nano-PSO نہ صرف TBI سے متاثرہ چوہوں میں بلکہ کنٹرول مائس میں بھی ROS کی سطح کو کم کر سکتا ہے۔

شکل 6. نینو-پی ایس او کے علاج نے تمام چوہوں میں مائٹوکونڈریل COX IV1 اظہار کو بحال کیا: (A) علاج شدہ اور غیر علاج شدہ کنٹرولز سے دماغ کے عارضی پرانتستا کے ذریعے کورونالیکشنز، نیز علاج نہ کیے گئے TBI سے، TBI سے پہلے نینو-PSO کے ساتھ علاج کیا گیا اور نینو-پی ایس او کے ساتھ علاج کیا گیا۔ PSO پوسٹ TBI کو COX IV1 (سرخ) اور DAPI (نیلا) [اسکیل بار 50 µm] کے لیے حفاظتی امیونوسٹین کیا گیا تھا۔ (B) تمام سیکشنز کے لیے COX IV1 امیونوسٹیننگ کی مقداری تشخیص (bregma temporal cortex −1.06 nm) ہر تجربے کے اختتامی نقطہ پر یک طرفہ ANOVA (F (4, 12)=45 .101، p=0۔{17}} Fisher's LSD posthoc, ** p < 0.01, *** p <0.001, n=3–4)۔ NS=اہم نہیں ہے۔ قدریں اوسط ± SEM کے طور پر پیش کی جاتی ہیں۔

2.5 Nano-PSO TBI کے بعد SIRT1 اور SYP کی سطح کو بلند کرتا ہے۔

SIRT1 کی کل سطحوں کا امیونو بلوٹ، جو پرانتستا میں NAD پر منحصر deacetylasesirtuin-1 کا مارکر ہے، TBI کے بعد کے تین ہفتوں کے بعد تمام چوہوں کے لیے جانچا گیا (شکل 7)۔ SIRT1 کی سطح میں کمی پائی گئی۔

یہ نتائج ہماری لیب [32] کے نرم ٹی بی آئی ماڈل کے ساتھ پچھلے مطالعے کے مطابق ہیں۔ تاہم، اس کمی کو Nano-PSO کے ساتھ روک دیا گیا تھا جب ایونٹ کے بعد کئی ہفتوں تک اس کا فوری انتظام کیا گیا۔

شکل 7B Synaptophysin (SYP) کی کل سطحوں کا ایک امیونو بلوٹ دکھاتا ہے، جو ایک مارکر forsynaptic ڈھانچے، کنٹرول چوہوں کے دماغی ہم آہنگی سے جو نینو-PSO کے ساتھ علاج یا علاج نہیں کیا جاتا ہے اور ساتھ ہی TBI یا TBI کے بعد کے علاج شدہ چوہوں سے۔

نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ اعداد و شمار 4A، اور B میں دکھائے گئے نیورونل موت کے ساتھ ساتھ، Synaptic نقصان بھی TBI کی وجہ سے ہوا تھا۔ تاہم، اس نقصان کو روکا جا سکتا ہے اگر ایک مضبوط اور دماغی ہدایت والے اینٹی آکسیڈینٹ جیسے نینو-PSO کو فوری طور پر کئی ہفتوں تک استعمال کیا جائے۔ نقصان پہنچانے کے بعد.

اس سے پہلے یہ دکھایا گیا ہے کہ زیادہ تر متاثرہ نیوران چوٹ لگنے کے فوراً بعد نہیں مرتے تھے لیکن ٹی بی آئی کی وجہ سے ہونے والے وسیع آکسیڈیٹیو تناؤ کی وجہ سے بعد کے دنوں میں [33]۔ لہٰذا، فوری طور پر اینٹی آکسیڈینٹ علاج کافی موثر ہو سکتا ہے تاکہ طویل عرصے میں وسیع نقصان کو روکا جا سکے۔ چلائیں

شکل 7. ٹی بی آئی چوہوں کے پرانتستا میں SIRT1/SYP اظہار پر نینو-پی ایس او کا اثر: (A) علاج شدہ اور غیر علاج شدہ کنٹرول کے دائیں پرانتستا سے برین ہوموجنیٹس کے ساتھ ساتھ TBI اور NanoPSO سے علاج شدہ TBI کے بعد کے چوہوں کو مدافعتی بلوٹ کیا گیا تھا۔ SIRT1 اور TUB کے ساتھ بالترتیب (110 KDa، 50 KDa) پر پتہ چلا۔ SIRT1 کے immunoreactive بینڈز کے مقداری تجزیہ کو امیج جنڈ نے کنٹرول پروٹین TUB کے خلاف معمول بنایا۔

کنٹرول کے مقابلے TBI چوہوں کے پرانتستا میں SIRT1 کی سطح 30 دن کے بعد کی چوٹ میں نمایاں طور پر کم ہوئی۔ نینو پی ایس او کے علاج نے اس کمی کو روکا ** p <0.01۔ یکطرفہ ANOVA نے SIRT1 inmice کے اظہار میں ایک اہم بلندی کا انکشاف کیا جس نے زخم کے بعد علاج حاصل کیا۔ (F (3, 20)=1.084, p=0.002, N=5 Fisher's LSD post hoc)۔

(B) علاج شدہ اور غیر علاج شدہ کنٹرولوں کے دائیں پرانتستا سے دماغی ہم آہنگی کے ساتھ ساتھ TBI اور Nano-PSO سے علاج شدہ TBI چوہوں کو بالترتیب (37 KDa، 50 KDa) پر SYP اور TUB کے ساتھ امیونو بلوٹ کیا گیا تھا۔

SYP کے امیونو ایکٹیو بینڈز کے مقداری تجزیہ کو امیج جے کے ذریعہ مقدار درست کیا گیا اور کنٹرول پروٹین TUB کے خلاف معمول بنایا گیا۔

ایک طرفہ ANOVA نے TBI گروپ (F (3,20) ​​= 1.084، p {{6} کے مقابلے TBI کے بعد علاج حاصل کرنے والے چوہوں میں SYP کے اظہار میں ایک نمایاں بلندی کا انکشاف کیا۔ }.379، Fisher's LSD post hoc * p <0.5, n=4–5)۔ NS=اہم نہیں ہے۔ قدروں کو اوسط ± SEM کے طور پر پیش کیا گیا ہے۔

ہر گراف کے نیچے، تمام گروپوں کے درمیان دائیں پرانتستا میں SIRT1/SYP کی سطح اور گھریلو پروٹین ٹیوبلین (TUB) کی ایک نمائندہ تصویر پیش کی گئی ہے۔

For more information:1950477648nn@gmail.com