زیتون کے پتے (Olea Europaea L) ایکسٹریکٹ لوڈڈ لپڈ نینو پارٹیکلز: Box-Behnken کے شماریاتی ڈیزائن کے ذریعے پروسیسنگ پیرامیٹرز کی اصلاح، ان وٹرو کریکٹرائزیشن، اور اینٹی آکسیڈینٹ اور اینٹی مائکروبیل سرگرمی کی تشخیص حصہ 2
Jun 10, 2022
از راہ کرم رابطہ کریںoscar.xiao@wecistanche.comمزید معلومات کے لیے
2.5.6 استحکام کی تشخیص
بین الاقوامی کونسل برائے ہم آہنگی (ICH) کے رہنما خطوط کے مطابق آپٹمائزڈ فارمولیشن (F9) کے استحکام کی جانچ کی گئی۔ SLN بازی تین الگ الگ شیشے کی شیشیوں (ہر ایک میں 10 ملی لیٹر) میں لی گئی تھی۔ تین شیشیوں میں سے ایک کو ریفریجریٹر میں (4 ڈگری ±2 ڈگری)، دوسری کو کمرے کے درجہ حرارت پر (25±2 ڈگری /60±5 RH فیصد RH) اور آخری کو استحکام کے چیمبر (تھرمو) میں محفوظ کیا گیا تھا۔ سائنسی، سویڈن)40±2 ڈگری /75±5 ڈگری فیصد RH پر۔ ایک مخصوص ٹائم پوائنٹ یعنی 1,3,6 مہینے پر، نمونے نکالے گئے اور کچھ پیرامیٹرز جیسے پارٹیکل سائز، انٹریپمنٹ کی کارکردگی، زیٹا پوٹینشل اور PDI وغیرہ کے لیے جانچے گئے، جن کا تعین کیا گیا اور شماریاتی اعتبار سے صفر ٹائم ڈیٹا (ابتدائی) کے ساتھ موازنہ کیا گیا۔ . 2.5.7 اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی
اینٹی آکسیڈینٹ پوٹینشل کا پتہ لگانے کے لیے سب سے مفید طریقوں میں سے ایک 2،2-Diphenyl-1-Picryl-Hydrazyl-Hydrate فری ریڈیکلز (DPPH) طریقہ2 ہے۔ OLP-SLNs کی ریڈیکل اسکیوینگنگ سرگرمی (یعنی ڈی پی پی ایچ فری ریڈیکلز کو صاف کرنے کی ان کی صلاحیت کا تجزیہ) کا 517 nm پر سپیکٹرو فوٹومیٹرک انداز میں جائزہ لیا گیا۔ OLP کی اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی کے ساتھ ساتھ OPL-SLNs کا تعین (DPPH) طریقہ کی مدد سے کیا گیا تھا۔ ڈی پی پی ایچ کا حل ({{10}.1 ایم ایم) ایتھنول میں تیار کیا گیا تھا۔ OLP-SLNs (OLP کے 0.2 mg/mL کے برابر) کو فاسفیٹ بفر میں منتشر کیا گیا تھا اور دوائی کو جاری کرنے کے لیے 24 گھنٹے کے لیے چھوڑ دیا گیا تھا۔ OLP(0.2 mg/mL) اور خالی SLNs کا مساوی ارتکاز بھی اسی میڈیم میں تیار کیا گیا تھا۔ اس مطالعے میں، 0.2 ملی گرام/ملی لیٹر کے ارتکاز کے ascorbic ایسڈ کو ایک معیار کے طور پر لیا گیا تھا اور جب کہ DPPH محلول کو کنٹرول کے طور پر استعمال کیا گیا تھا۔cistanche آسٹریلیا3300 μL DPPH OLP-SLNs(500 μL)، خالی SLNs، اور OLP حل(500 μL) کے ہر حل میں ملایا گیا تھا۔ ہر رد عمل کے مرکب کو شیکر واٹر غسل میں 37 ± 0.5 ڈگری پر 30 منٹ کے لیے روشنی سے محفوظ حالات میں رکھا گیا تھا۔ آخر میں، ہر نمونے کی جاذبیت کا تعین UV-visible spectrophotometer (Shimadzu 1800, Japan) کے ذریعے 517 nm پر ایتھنول کو خالی کے طور پر استعمال کیا گیا تھا۔ ہر تجربے کا تین بار جائزہ لیا گیا اور قدروں کو اوسط ± SD کے طور پر پیش کیا گیا۔ اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی کی قیمت فیصد ڈی پی پی ایچ اسکیوینگنگ سرگرمی کی شکل میں درج ذیل فارمولے (مساوات 2) سے طے کی گئی تھی۔

2.5.8 اینٹی مائکروبیل مطالعہ
OLP سے بھری ہوئی SLNs (آپٹمائزڈ بیچ F9) کا اینٹی مائکروبیل مطالعہ اگر اچھی طرح سے پھیلاؤ کے طریقہ کار کو استعمال کرتے ہوئے کیا گیا تھا۔ بیکٹیریل تناؤ جیسے Staphylococcus aureus (Gram's Positive) اور Pseudomonas aeruginoza (Gram's Negative) تشخیص کے لیے استعمال کیے گئے تھے۔ غذائی اجزا کی پلیٹیں جراثیم سے پاک حالات اور بیکٹیریل معطلی کے تحت تیار کی گئی تھیں(100 μL، 10 ڈگری F/10 کے ارد گرد حراستی mL) ہر جراثیم کو ہر جراثیم سے پاک غذائی اجزا کی پلیٹ پر انفرادی طور پر 1 گھنٹہ کے لیے 37±0.5 ڈگری پر جراثیم سے پاک جھاڑیوں کی مدد سے رکھا گیا تھا۔cistanche فوائدہر پلیٹ پر 8 ملی میٹر قطر کے چار کنویں جراثیم سے پاک کارک بورر کی مدد سے بنائے گئے تھے۔ یہاں، خالی SLNs، مثبت کنٹرول (خالص اقتباس)، فزیکل مکسچر (OLP ایکسٹریکٹ پلس خالی)، اور SLNs اور آپٹمائزڈ OLP-SLNs تیاری(100 μL) کو اینٹی مائکروبیل مطالعہ کے لیے استعمال کیا گیا اور ہر کنویں میں رکھا گیا . پلیٹوں کو 37 ± 0.5 ڈگری کے درجہ حرارت پر انکیوبیٹ کیا گیا تھا۔ پہلے سے طے شدہ ٹائم پوائنٹس (6,12,24 h) پر، پلیٹوں کو واپس لے لیا گیا اور دیواروں کے ارد گرد رکاوٹ کے زون کو کیلیپر کی مدد سے ملی میٹر میں ناپا گیا۔

مزید جاننے کے لیے براہ کرم یہاں کلک کریں۔
3. نتائج اور مباحثہ
3.1 ابتدائی اسکریننگ اور فارم-اویکت متغیرات کی پری اصلاح
The highest solubility of OLP was found to be in compri-to 888 ATO as depicted in Fig.1. The descending order of OLP solubility/100 gm in different lipid was compritol 188 ATO(36.93±4.92mg)>Precirol ATO 5(29.37±3.01 mg)>GMS(23.84±2.73mg)>palmitic acid(21.41±2.81 mg)>سٹیرک ایسڈ (16.25±1.65 ملی گرام) کمپریٹول 888 اے ٹی او کو زبانی بنیاد پر ایس ایل این کی تیاری کے لیے لپڈ کے طور پر استعمال کیا گیا تھا۔
ابتدائی اسکریننگ مطالعہ کے نتائج کی بنیاد پر، بالترتیب 80 اور کمپریٹول 888 اے ٹی او کو سرفیکٹنٹ اور لپڈ کے طور پر منتخب کیا گیا تھا۔ دوسرے پیرامیٹرز جیسے دوا سے لپڈ کا تناسب (1:3-1:6)، سرفیکٹنٹ کا ارتکاز (فیصد ,15-4.5 فیصد) اور ہم آہنگی کی رفتار (rpm، 3000-6000 rpm)، ہم آہنگی کا وقت (2 گھنٹے)، سونیکیشن کا وقت (10 منٹ) کا فیصلہ ابتدائی تجربات کے ذریعے کیا گیا۔ دوائی سے لپڈ کا تناسب (A)، سرفیکٹنٹ ارتکاز (B)، اور ہوموجنائزیشن (C) جیسے عوامل کو 3-عوامل اور 3- سطحوں BBD کے ساتھ مل کر رسپانس سطح کے طریقہ کار (RSM) کا استعمال کرتے ہوئے دوبارہ بہتر بنایا گیا ، اور ان کے اثر و رسوخ کو منحصر عوامل پر پتہ چلا جیسے پارٹیکل سائز (Y1)، انٹریپمنٹ کی کارکردگی (Y2) اور PDI (Y3)۔
3.2 SLNs کی تیاری اور OLP بھری SLNS کی اصلاح
پہلے سے بہتر کردہ پیرامیٹرز کی قدریں جیسا کہ بیان کیا گیا ہے۔

اوپر ماہر ڈیزائن کے بی بی ڈی کے ساتھ لگائے گئے تھے۔ کل سترہ فارمولیشنز کی ترکیب کو BBD نے 5 سینٹر پوائنٹس کے ساتھ دریافت کیا۔ تمام فارمولیشنز تیار کی گئیں اور منحصر پیرامیٹرز کی اقدار جیسے پارٹیکل سائز، انٹریپمنٹ کی کارکردگی، اور PDI کی جانچ کی گئی اور حتمی نتیجہ حاصل کرنے کے لیے BBD میں مزید فٹ کیا گیا۔ متعدد مساوات اور 3D گراف تیار کیے گئے تھے جو منحصر عوامل پر آزاد عوامل کے اثر کو ظاہر کرتے ہیں۔ کثیر الجہتی مساوات کے مثبت نشان نے ایک مثبت اثر کو دریافت کیا اور منفی نشان نے منحصر متغیرات پر منفی اثر کی نشاندہی کی۔ اصل اور پیش گوئی شدہ منحصر متغیرات کی ریگریشن تجزیہ اور ماڈلز کے تغیراتی ڈیٹا کا تجزیہ بالترتیب جدول 1,2 اور 3 میں پیش کیا گیا ہے۔ کواڈریٹک ماڈل کو تمام ردعمل کے لیے بہترین فٹڈ ماڈل سمجھا جاتا تھا کیونکہ اس معاملے میں ریگریشن گتانک کی سب سے زیادہ قدر دیکھی گئی تھی۔
3.3 ذرات کے سائز پر کچھ پیرامیٹرز کا اثر (Y1)
بی بی ڈی سے درج ذیل کثیر الجہتی مساوات حاصل کی گئی جو ذرہ سائز (Y1) پر مختلف آزاد عوامل کے اثر کی نشاندہی کرتی ہے۔

اوپر دی گئی مساوات نے ظاہر کیا کہ کمپریٹول 888 اے ٹی او نے پارٹیکل کے سائز پر مثبت اثر دکھایا جبکہ 80 کے درمیان اور ہوموجنائزیشن نے پارٹیکل کے سائز پر منفی اثر دکھایا۔
یہاں، متغیرات A، B، C، AB، BC، اور B" کا ذرہ کے سائز پر ایک اہم اثر تھا۔cistanche کولیسٹرولAt a 95% confidence interval, the lack of fit was insignificant(p>0.05)جبکہ باقی پیرامیٹرز اہم پائے گئے (p<0.0001)with adequate="" precision(="">4) (ٹیبل 3) R² کی بنیاد پر



(0.9996)قدر، چوکور ماڈل کو مناسب سگنل کے ساتھ بہترین فٹ شدہ ماڈل سمجھا جاتا تھا (ٹیبل 4)۔
مختلف بیچوں کے ذرہ کا سائز 112 کی حد میں پایا گیا۔{1}}.46 nm۔ اگر دیگر متغیرات کو مسلسل برقرار رکھا گیا تھا، تو دوا کے لپڈ تناسب کو بڑھانے پر ذرہ کا سائز بڑھا دیا گیا تھا (ٹیبل 1، بیچ F1 237.05 nm اور F2 259.57 nm)۔ یہ ذرات کو منتشر کرنے کے لیے ناکافی سرفیکٹنٹ کی وجہ سے ذرات کے جمع ہونے کی وجہ سے ہو سکتا ہے۔ دوسری طرف، سرفیکٹنٹ (15-4.5 فیصد) نے ذرہ کے سائز پر منفی اثر ظاہر کیا (ٹیبل 1، بیچ F1 237.05 nm اور F3 112.35 nm )۔ یہ پانی اور لپڈ مرحلے کے درمیان انٹرفیشل تناؤ میں کمی کی وجہ سے ہوسکتا ہے جو ذرہ جمع کو روکتا ہے)۔ ہوموجنائزیشن کی رفتار نے ذرہ کے سائز پر منفی اثر (ٹیبل 1، بیچ F5 187.46 nm اور F7 134.27 nm) کی وجہ سے زیادہ قوت پیدا کی ہے جو ذرات کو توڑ دیتی ہے اور اس وجہ سے ذرہ سائز مساوات 3 نے اشارہ کیا کہ سرفیکٹنٹ (گتانک قدر-40.87) کا اثر ذرہ کے سائز پر زیادہ نمایاں اثر ظاہر کرتا ہے جیسا کہ ہم آہنگی کی رفتار (گتانک قدر -24.97) کے مقابلے میں۔cistanche deserticola کے ضمنی اثراتشکل 2 نے ذرہ سائز پر مختلف آزاد پیرامیٹرز کے اثر و رسوخ کی کھوج کی۔

Cistanche بڑھاپے کو روک سکتا ہے۔
3.4 پھنسانے کی کارکردگی (Y2) پر کچھ پیرامیٹرز کا اثر
مندرجہ ذیل پولیمر مساوات BBD سے حاصل کی گئی تھی جس میں انٹریپمنٹ کی کارکردگی پر مختلف آزاد پیرامیٹرز کا اثر ظاہر ہوتا ہے:

یہاں، متغیرات A, B, C, AB, AC, BC, A, اور B² کا انٹریپمنٹ کی کارکردگی پر نمایاں اثر تھا۔ 95 فیصد اعتماد کے وقفے پر، فٹ کی کمی غیر معمولی تھی (p<0.05)while the="" remaining="" parameters="" were="" found="" to="" be="">0.05)while><0.0001)with adequate="" precision(="">4) (ٹیبل 3)۔ چوکور ماڈل(R²=0.9991)کو مناسب سگنل کے ساتھ بہترین فٹڈ ماڈل سمجھا جاتا تھا (ٹیبل 4)۔
مندرجہ بالا مساوات 4 سے، یہ مشاہدہ کیا گیا ہے کہ لپڈ (compritol 888ATO) نے ایک مثبت اثر ظاہر کیا جبکہ باقی دو پیرامیٹرز نے انٹریپمنٹ کی کارکردگی پر منفی اثر ظاہر کیا۔ سرفیکٹنٹ (گتانک قدر -7.23) نے ہم آہنگی کی رفتار (گتانک قدر -5.76) کے مقابلے میں زیادہ نمایاں اثر کیا۔ لپڈ کا مثبت اثر انٹریپمنٹ کی کارکردگی پر (ٹیبل 1، بیچ F1 اور F2) دستیاب ادویات کی رہائش کے لیے زیادہ لپڈ کی دستیابی کی وجہ سے تھا۔ پھنسنے کی کارکردگی پر ایک متغیر اثر دیکھا گیا۔ ابتدائی مرحلے میں، سرفیکٹنٹ کو بڑھانے پر، انٹریپمنٹ کی کارکردگی کی قدر میں اضافہ کیا گیا تھا لیکن سرفیکٹنٹ کو مزید بڑھانے پر، بیرونی ماحول (ٹیبل 1، بیچ F1 اور F3) میں دوا کے رساو کی وجہ سے اس میں کمی واقع ہوئی تھی۔ ہوموجنائزیشن کی رفتار نے زیادہ قینچ کی قوت کی وجہ سے پھنسنے کی کارکردگی پر منفی اثر ظاہر کیا جو منشیات کے اخراج کے لیے ذمہ دار ہو سکتا ہے (ٹیبل 1، بیچ F5 اور F7)۔ شکل 3 میں مختلف آزاد پیرامیٹرز کے اثر کو دریافت کیا گیا ہے۔


3.5 PDI(Y3) پر آزاد پیرامیٹرز کا اثر
PDI پر مختلف پیرامیٹرز کے اثر کو ظاہر کرنے والی کثیر الثانی مساوات:

Here,variables like A,B, C,AB,AC,BC,A2,and C°had a significant effect on the PDI. At a 95% confidence interval, the lack of fit was insignificant(p>0.05)جبکہ باقی پیرامیٹرز اہم پائے گئے (p<0.0001)with adequate="" precision(="">4) (ٹیبل 3)۔ چوکور ماڈل (R=0.9991) کو مناسب سگنل (ٹیبل 4) کے ساتھ بہترین فٹڈ ماڈل سمجھا جاتا تھا۔

مساوات 5 سے، یہ بتایا گیا ہے کہ تینوں آزاد پیرامیٹرز جیسے ڈرگ لپڈ ریشو، سرفیکٹنٹ، اور ہوموجنائزیشن کی رفتار کا PDI پر مثبت اثر پڑا۔ غالب اثر ہوموجنائزیشن کی رفتار کی وجہ سے تھا (کو-ایفشینٹ ویلیو 0۔{4}}48) اس کے بعد لپڈ (گتانک قدر 0۔{19}}46) اور کم سے کم سرفیکٹنٹ تھا۔ (گتانک قدر 0.014)۔ ہم آہنگی کی وجہ سے، نظام کی حرکی توانائی کچھ زیادہ ہو گئی جو لپڈ نینو پارٹیکلز کے تصادم اور جمع کا سبب بنتی ہے (ٹیبل 1، بیچ F9 اور F11)۔ سرفیکٹنٹ کے زیادہ ارتکاز نے مزید چھوٹے ذرات پیدا کیے جو بڑے ذرات کے ساتھ ایک پل بناتے ہیں اور اس وجہ سے عدم یکسانیت پیدا ہوتی ہے جو PDI کو بڑھاتی ہے۔ مسلسل سرفیکٹنٹ کی سطح پر لپڈ کی حراستی میں اضافہ ذرات کے جمنے کا سبب بنتا ہے جس کے نتیجے میں ذرہ سائز کی غیر یکساں تقسیم ہوتی ہے۔ شکل 4 نے PDI پر مختلف آزاد متغیرات کے اثر و رسوخ کو دریافت کیا)۔ تین خصوصیات یعنی پارٹیکل سائز، انٹریپمنٹ افادیت، اور PDI کی بنیاد پر بیچ F9 کو پارٹیکل سائز، انٹریپمنٹ افادیت، اور PDI 277.46 nm، 80.48 فیصد، اور 0.275 بالترتیب کی قدر کے ساتھ ایک بہترین فارمولیشن سمجھا گیا۔
3.6 OLP-SLNs کی خصوصیت
3.6.1 پارٹیکل سائز، PDI، اور زیٹا پوٹینشل کا اندازہ
آپٹمائزڈ بیچ (F9) کے پارٹیکل سائز، PDI، اور زیٹا پوٹینشل کی قدر بالترتیب 277.46 nm، 0.282، (Fig.5A)، اور -23.18 mV پائی گئی۔ PDI کی چھوٹی قدر (<0.5)indicates the="" uniform="" or="" mono="" distribution="" of="" particles="" without="" any="" aggregation="" in="" the="" developed="" slns="" dispersion.="" a="" similar="" finding="" was="" observed="" by="" yasir="" et="" al.="">0.5)indicates>cistanche dosage redditناک سے دماغ کی ترسیل کے لیے Buspirone-loaded SLNs کی تیاری کے دوران۔ نینو پارٹیکل ڈرگ ڈیلیوری کے معاملے میں پارٹیکل سائز اور سطح چارج دونوں اہم ہیں۔ 500 nm سے کم ذرہ سائز کے بارے میں سوچا جاتا ہے کہ وہ میکروفیجز کے ذریعہ phagocytosis میکانزم سے بچ رہا ہے۔ نینو فارمولیشن کے مناسب استحکام کے لیے منفی سطح کے چارج (تقریباً -20 ایم وی) کی شکل میں زیٹا پوٹینشل ضروری ہے۔ زیٹا پوٹینشل کی مشاہدہ شدہ قدر -23.18 mV تھی جو اچھی جسمانی استحکام کی نشاندہی کرتی ہے۔


SLNs کی بازی۔ منفی سطح کے نینو پارٹیکلز کا ایک اہم کردار خراب ٹشوز سے مثبت چارج شدہ پروٹین کی طرف ان کی کشش ہے اور آکسیڈیشن کے عمل کو منظم کرنے میں مدد کرتا ہے۔
(F9) پارٹیکل سائز اور سطحی چارجز دونوں کے معیار کو پورا کر رہا تھا۔
3.6.2 مورفولوجیکل اسٹڈی
تیار شدہ OLP-SLNs(F9) کا بہتر بنایا ہوا بیچ تقریباً کروی شکل کی نشاندہی کرتا ہے جیسا کہ TEM مطالعہ (تصویر 5B) نے مشاہدہ کیا ہے۔
3.6.3 پھنسانے کی کارکردگی (فیصد)
OPL SLNs کے تیار کردہ بیچوں کی پھنسنے کی کارکردگی 50۔{1}}.46 فیصد کے ساتھ 80.48 فیصد آپٹمائزڈ فارمولیشن (F9) کی حد میں پائی گئی جو کہ ترقی یافتہ SLNs کی اچھی ڈرگ انٹریپمنٹ صلاحیت کی نشاندہی کرتی ہے۔ 3.6.4 ڈیفرینشل اسکیننگ کیلوری میٹری (DSC) اسٹڈی پراپرٹیز جیسے کرسٹالنیٹی اور ترقی یافتہ OLP-SLNs کا تھرمل رویہ اہم خصوصیات ہیں جو منشیات کی ترسیل میں ان کے استعمال کو یقینی بناتی ہیں۔ OLP(ڈرگ)، لپڈ(compritol 888 ATO)، اور آپٹمائزڈ فارمولیشن(F9) کا DSC تھرموگرام تصویر 6 میں دکھایا گیا ہے۔ OPL کے تھرمل سپیکٹرم نے 65.23 ڈگری پر ایک مختصر اور وسیع اینڈوتھرمک چوٹی دکھائی لیکن یہ 100.96 تک چلا گیا۔ ڈگری کمپریٹول 88ATO نے 70.5 ڈگری پر ایک اینڈوتھرمک چوٹی دکھائی جو اپنے پگھلنے والے نقطہ کے ساتھ دوبارہ مل رہی ہے۔ OLP کی خصوصیات کی چوٹی آپٹمائزڈ فارمولیشن (F9) کے تھرموگرام میں غائب تھی۔ یہاں، 67.81 ڈگری کے ارد گرد صرف ایک نسبتاً چوڑی چوٹی دیکھی گئی جو لپڈ میٹرکس میں OLP کے داخل ہونے کی نشاندہی کرتی ہے جس سے OLP-SLNs4 کی تشکیل ہوتی ہے۔
3.6.5 ان وٹرو منشیات کی رہائی
آپٹمائزڈ OLP-SLNs فارمولیشن (F9) سے منشیات کا اخراج 95.29±8.13 فیصد پایا گیا جیسا کہ تصویر 7 میں دکھایا گیا ہے۔ آپٹمائزڈ فارمولیشن سے ریلیز نے دو-


phasic پیٹرن یعنی ابتدائی تیز رہائی (پہلے 1 گھنٹے میں 23.83 ± 4.51) سطح پر جذب ہونے والی دوائی کی رہائی کی وجہ سے اور بعد میں برقرار (95.29 ± 8.13 فیصد 24 گھنٹے میں) SLNs میٹرکس سے منشیات کی رہائی کی وجہ سے۔ OLP فارم آپٹمائزڈ فارمولیشن کے ریلیز کائنیٹک کا پتہ لگایا گیا منشیات کی رہائی کے ڈیٹا کو مختلف کائینیٹک ماڈلز میں ڈال کر جیسا کہ تصویر 8 میں تصویری طور پر دکھایا گیا ہے۔ زیادہ سے زیادہ R²(0.9984)قدر پہلے آرڈر کائنےٹک ماڈل کے لیے پائی گئی۔ لہذا، فرسٹ آرڈر کائنےٹک کو بہترین فٹڈ ماڈل سمجھا جاتا تھا۔ ریلیز میکانزم کو ریلیز ایکسپویننٹ (n)0.441 کی قدر کے ساتھ Fickian ڈفیوژن ٹائپ پایا گیا۔
3.6.6 استحکام کی تشخیص
مناسب سٹوریج کے حالات کے تحت، کسی بھی تیار شدہ خوراک کے فارم کے استعمال کی مدت (میعاد ختم ہونے کی تاریخ) تک مستحکم رہنے کی امید ہے۔ یہاں، ترقی یافتہ آپٹمائزڈ OLP-SLNs فارمولیشن (F9) کو ICH رہنما خطوط کی طرف سے فراہم کردہ تفصیلات کے مطابق اسٹوریج کے مخصوص حالات میں محفوظ کیا گیا تھا۔ 4±2 ڈگری (ریفریجریٹر) اور کمرے کے حالات (25±2 ڈگری / 60±5 فیصد RH) میں ذخیرہ شدہ فارمولیشن نمایاں طور پر نہیں تھے (p<0.05) differ="" from="" the="" initial="" data(zero="" time)in="" respect="" of="" particle="" size,="" pdi,="" surface="" charge(zeta="" potential)="" and="" entrapment="" efficiency.="" a="" significant="">0.05)><0.05)in zeta="" potential(-19.27="" mv)and="" entrapment="" efficiency="" (73.29%)and="" a="" significant="">0.05)in><0.05)in particle="" size(388.37="" nm)was="" observed="" in="" the="" formulation="" stored="" at="" 40±2℃/75±5%="" rh.it="" might="" be="" due="" to="" the="" partial="" loss="" of="" surfactant="" covering(hence="" zeta="" potential="" reduced)which="" leads="" to="" aggregation="" of="" particles(hence="" particle="" size="" increased)and="" leakage="" of="" a="" drug="" in="" the="" external="" environment="" (hence="" entrapment="" efficiency="">0.05)in>
3.6.7 اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی
OLP کا بنیادی عمل فری ریڈیکلز کو صاف کر کے پیرو آکسیڈیشن کو روکنا ہے اور آکسیڈیٹیو تناؤ کی وجہ سے ہونے والی چوٹوں کو کم کرنے میں تعاون کرنا ہے۔ جیسا کہ تصویر 9 میں دکھایا گیا ہے، مفت OLP نے 48.38±5۔{4}} فیصد اینٹی آکسیڈینٹ کی نمائش کی جو نمایاں طور پر ہے(p)<0.01)less than="" the="" anti-oxidant="" activity="" (67.93±7.37%)of="" optimized="" formulation(f9).="" this="" could="" be="" due="" to="" the="" nano-size="" of="" the="" lipid="" particles="" which="" offered="" a="" higher="" surface="" area="" for="" the="" chemical="" quenching="" and="" also="" protect="" the="" olp="" in="" the="" external="" environment.="" no="" absorbance="" was="" found="" for="" the="" blank="" slns="" and="" hence="" blank="" slns="" did="" not="" exhibit="" any="" radical="" scavenging="" activity.="" similar="" findings="" were="" reported="" previously".="" the="" value="" of="" anti-oxidation="" activity="" for="" ascorbic="" acid="" was="" supposed="" to="" be="" 69.42±5.38%="" which="" was="" not="" significantly="">0.01)less><0.05)from the="" optimized="" formulation(f9).="" 3,6.8="" anti-microbial="">0.05)from>
مطالعہ نے اسٹفیلوکوکس اوریئس (گرام کا مثبت) اور سیوڈموناس ایروگینوسا (گرام کا منفی) جیسے بیکٹیریا کے خلاف OLP(F9) کی تیار کردہ SLNs کی تشکیل کی اینٹی مائکروبیل صلاحیت کو ظاہر کیا جیسا کہ تصویر 10 میں دکھایا گیا ہے نتیجہ ظاہر ہوا کہ انہی کا کوئی زون نہیں تھا۔ خالی فارمولیشن کے لیے کیونکہ یہ OLP ایکسٹریکٹ سے آزاد تھا۔

مثبت کنٹرول اور جسمانی مرکب (OLP ایکسٹریکٹ پلس خالی SLNs) کے لیے زیادہ سے زیادہ روک تھام کا زون پہلے 6 گھنٹے کے اندر دیکھا گیا۔ اس مدت کے بعد (پہلے 6h)، مثبت کنٹرول اور جسمانی مرکب کی روک تھام کے زون میں کوئی تبدیلی نہیں ہوئی۔ Pseudomonas aeruginosa اور Staphylococcus aureus کے خلاف مثبت کنٹرول کے لیے روک کے زون کی قدر بالترتیب 7.5±1.25mm اور 8±1.30mm تھی۔ اسی طرح، Pseudomonas aeruginosa اور Staphylococcus aureus کے خلاف جسمانی مرکب (OLP اقتباس پلس خالی SLNs) کے لیے روک تھام کے زون کی قدر بالترتیب 8.25±1.9 ملی میٹر اور 8.60±2.1 ملی میٹر پائی گئی۔ دوسری طرف، OLP سے بھری ہوئی SLNs نے مفت OLP اور جسمانی مرکب کے مقابلے میں طویل عرصے تک (24 گھنٹے تک) اینٹی مائکروبیل اثر کا مظاہرہ کیا۔ اس کی وجہ SLNs کی تشکیل سے OLP کی مستقل رہائی ہے۔ دونوں گرام مثبت کے خلاف OLP سے بھری ہوئی SLNs کا اینٹی مائکروبیل اثر

اور گرام منفی بیکٹیریا کو 24 گھنٹے تک دیکھا گیا۔ OLP-SLNs کا antimicrobial اثر نمایاں طور پر تھا (p<0.001)more than="" that="" of="" olp="" extract="" and="" physical="" mixture="" against="" pseudomonas="" aeruginosa="" and="" staphylococcus="" aureus.="" the="" value="" of="" the="" zone="" of="" inhibition="" of="" opl-slns="" against="" pseudomonas="" aeruginosa="" and="" staphylococcus="" aureus="" was="" observed="" at="" 14.75±2.25="" mm="" and="" 16.30±2.1="" mm="" in="" 24="" h="" respectively.="" moreover,="" study="" findings="" indicated="" that="" all="" formulations="" containing="" olp="" extract="" exhibited="" better="" anti-microbial="" efficiency="" towards="" gram-positive="" staphylococcus="" aureus="" as="" compared="" to="" gram-negative="" pseudomonas="" aeruginosa,4".="" to="" the="" best="" of="" our="" knowledge,="" the="" previous="" report="" showed="" that="" the="" major="" constituents="" for="" antimicrobial="" activity="" present="" in="" the="" olive="" extract="" are="" cyclotrisiloxane="" hexamethyl(36.98%),="" cyclo-tetrasiloxane="" octamethyl(15.18%),="" and="" cyclopentasilox-ane="">0.001)more>

4 نتیجہ
اس تحقیق میں زیتون کے پتوں کے عرق کا پاؤڈر جو کہ عام ماحولیاتی حالات میں کم مستحکم تھا کامیابی کے ساتھ ایک مستحکم SLNs فارمولیشن میں تبدیل کر دیا گیا۔ آپٹمائزڈ فارمولیشن نے ذرہ کے سائز، انٹریپمنٹ کی کارکردگی کے ساتھ ساتھ سطحی چارجز کی نمائش کی۔ بہتر شدہ فارمولیشن نے منشیات کی رہائی کے پہلے آرڈر کے کائنیٹک اور فکیئن ڈفیوژن قسم کے منشیات کی رہائی کے طریقہ کار کے بعد 24 گھنٹے تک مستقل منشیات کی رہائی کے نمونے کی نمائش کی۔ استحکام کا مطالعہ کیا گیا تھا اور آپٹمائزڈ فارمولیشن (F9) بیان کردہ اسٹوریج کی شرائط کے تحت مستحکم تھی۔ OLP فارمولیشن نے ایک امید افزا اینٹی آکسیڈینٹ خاصیت کی نمائش کی ہے جیسا کہ DPPH پرکھ کے طریقہ کار کے ذریعہ جائز ہے۔ گرام کے مثبت (Staphylococcus aureus) اور گرام کے منفی (Seudomonas aeruginosa) بیکٹیریا کے خلاف antimicrobial سرگرمی۔ آخر میں، یہ نتیجہ اخذ کیا گیا کہ SLNs زیتون کے پتوں کے عرق کے پاؤڈر کی ترسیل کے لیے امید افزا کیریئر ہو سکتے ہیں۔
یہ مضمون J. Oleo Sci سے ماخوذ ہے۔ 70، (10) 1403-1416 (2021)
