ردعمل کی سطح کے طریقہ کار کے ذریعہ سسٹینچ ریگستان کے پولساکرائڈ نچوڑ کی ڈیکولرائزیشن کے عمل اور اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی کی اصلاح

خلاصہ:

 

مقصد:سسٹانچے صحراؤں کے پولیسیچرائڈس کے ڈیکولرائزیشن کے عمل کو بہتر بنانے اور ان کی اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی کو دریافت کرنے کے لئے۔

ڈیکولورائزنگ ایجنٹ کے طور پر چالو کاربن کا استعمال کرتے ہوئے ، 4 عوامل کے اثرات سمیت چالو کاربن خوراک ، ڈیکولرائزیشن کا درجہ حرارت ، ڈیکولورائزیشن ٹائم ، اور ڈیکولرائزیشن کی شرح اور پولیسیچارڈ کی بازیابی کی شرح پر پییچ کی تحقیقات کی گئیں۔ واحد عنصر کے تجربات کی بنیاد پر ، سسٹینچے صحراؤں کے پولیسیچرائڈ نچوڑ کے ڈیکولورائزیشن عمل کو ردعمل کی سطح کے طریقہ کار کا استعمال کرتے ہوئے بہتر بنایا گیا تھا۔ وٹرو اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی کی تشخیص کے طریقہ کار کا استعمال کرتے ہوئے ، 1 ، 1- diphenyl -2- picrylhydrazine (DPPH) کی آزاد بنیاد پرست اسکوینگنگ کی صلاحیت ، کل کم کرنے کی صلاحیت ، ہائیڈروکسائل ریڈیکل اسکیوینگنگ کی قابلیت ، اور 2،2'-ژینو BIS (3- ایتیل بینزوتیازول - 6- سلفونک ایسڈ) ڈائممونیم نمک (اے بی ٹی ایس) سسٹانچے صحرا سے پولیسیچرائڈس کی فری ریڈیکل اسکیوینگنگ صلاحیت کا تعین کیا گیا تھا۔ نتائج سسٹانچے صحراؤں سے پولیسیچرائڈس کے نکالنے کے لئے زیادہ سے زیادہ ڈیکولورائزیشن کے عمل کی شرائط مندرجہ ذیل ہیں: فعال کاربن خوراک 20 ٪ ، ڈیکولرائزیشن درجہ حرارت 37 ڈگری ، ڈیکولرائزیشن ٹائم 49 منٹ ، پییچ 5.03۔ ان زیادہ سے زیادہ شرائط کے تحت ، ڈیکولوزریشن کی شرح اور پولیسیچرائڈ کی بازیابی کی شرح بالترتیب 62.66 ٪ اور 96.16 ٪ تھی۔ ڈیکولرائزیشن کے بعد ، ڈی پی پی ایچ ریڈیکل اور ہائیڈروکسل فری ریڈیکل کو اسکیوینگنگ کرنے کی صلاحیتوں میں نمایاں اضافہ کیا گیا تھا ، جبکہ اسکیوینگنگ اے بی ٹی ایس اینون ریڈیکل کی صلاحیتوں میں نمایاں کمی واقع ہوئی تھی۔ نتیجہ اچھ declorization ی ڈیکولرائزیشن کے عمل کو چلانے میں آسان ہے ، اچھے ڈیکولرائزیشن اثرات اور پولیساکرائڈ کی بازیابی کی شرح کے ساتھ۔ اس کی درخواست کی اہم قیمت ہے اور یہ سسٹانچے صحراؤں کے بعد کی تحقیق اور ترقی کی بنیاد فراہم کرتی ہے۔

کلیدی الفاظ: سسٹانچے صحراپولیسیچرائڈ ؛ Declorization ؛ ردعمل کی سطح کا طریقہ کار ؛ اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی

سسٹانچیصحرا کے اثرات

 

1.2.3 پولیسیچرائڈ بحالی کی شرح کی پیمائش

معیاری وکر کی تیاری:
فینول سلفورک ایسڈ کا طریقہ استعمال کیا گیا تھا۔ تقریبا {0. 0} 5 0 0 G گلوکوز معیار (105 ڈگری پر مستقل وزن میں خشک) اسٹاک حل کو تیار کرنے کے لئے درست طریقے سے وزن کیا گیا تھا اور اسے 50 ملی لیٹر والیومیٹرک فلاسک میں گھٹا دیا گیا تھا۔ اس کے بعد ، 0.1 ملی گرام/ملی لیٹر معیاری حل حاصل کرنے کے لئے اسٹاک حل کے 1.0 ملی لیٹر کو درست طریقے سے ماپا گیا اور 10 ملی لیٹر میں گھٹا دیا گیا۔ 10 ، 20 ، 30 ، 40 ، 50 ، 60 ، 70 ، 80 ، 90 ، اور 100 μl گلوکوز کے معیاری حل کو درست طریقے سے 1.5 ملی لیٹر سنٹرفیوج ٹیوبوں میں ماپا گیا۔ ہر ٹیوب میں آست پانی کو شامل کیا گیا تاکہ 100 μl کی کل حجم تیار کی جاسکے۔ ایک اور 1.5 ملی لیٹر سنٹرفیوج ٹیوب جس میں 100 μl آست پانی پر مشتمل ہے اسے خالی کنٹرول حل کے طور پر استعمال کیا گیا تھا۔ ہر ٹیوب میں ، 5 fen فینول حل کے 100 μl کو شامل کیا گیا ، اچھی طرح سے ملایا گیا ، اور پھر 500 μL مرتبہ سلفورک ایسڈ کو جلدی سے شامل کیا گیا۔ نلیاں 3 منٹ کے لئے بھنور تھیں اور 35 منٹ تک کھڑے ہونے کے لئے چھوڑ دی گئیں۔ اس کے بعد ، 200 μl رد عمل کے حل کو 96- اچھی پلیٹ میں منتقل کردیا گیا ، اور جاذب کو خودکار مائکروپلیٹ ریڈر کا استعمال کرتے ہوئے 490 ینیم پر ماپا گیا۔ افقی محور کے طور پر عمودی محور اور گلوکوز حراستی (x ، ug/ml) کے طور پر جاذب (Y) کے ساتھ ایک معیاری منحنی خطوط تیار کیا گیا تھا۔ حاصل کردہ معیاری وکر مساوات یہ تھی:

Y = 5.507X – 0.01,
r² = 0.992.

پولیسیچرائڈ مواد کی پیمائش:
پتلا کے 100 μl کا ایک الکوٹسسٹانچے صحراپولیسیچرائڈ نچوڑ کو 1.5 ملی لیٹر سنٹرفیوج ٹیوب میں درست طریقے سے ماپا گیا تھا۔ جاذب قیمت کا تعین مذکورہ بالا طریقہ کار کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا تھا ، اور معیاری منحنی خطوط کا استعمال کرتے ہوئے پولیساکرائڈ حراستی کا حساب لگایا گیا تھا۔

پولیسیچرائڈ بحالی کی شرح کی پیمائش:
میں پولیسیچرائڈس کا بڑے پیمانے پرسسٹانچے صحرامذکورہ بالا طریقہ کار کا استعمال کرتے ہوئے ڈیکولورائزیشن سے پہلے اور اس کے بعد نکالیں۔ مساوات (2) کا استعمال کرتے ہوئے پولیساکرائڈ بحالی کی شرح کا حساب لگایا گیا تھا:

پولیسیچرائڈ بحالی کی شرح (٪)
= (maftermbefore) × 100 ٪ \ بائیں (\ frac {m _ \ text {after}} {m _ \ text {پہلے}}} \ دائیں) \ اوقات 100 \ ٪ (mbefore mafter) × 100 ٪
جہاں:

mbeforem _ \ text {} mbefore اور mafterm _ \ text {کے بعد ma مافٹر کے بعد عوام ہیںسسٹانچے صحراپولیسیچرائڈس بالترتیب (جی) بالترتیب ڈیکولرائزیشن سے پہلے اور بعد میں۔

 

 

1.2.4 سنگل فیکٹر تجرباتی ڈیزائن

چار عوامل سے چلنے والے کاربن خوراک ، ڈیکولرائزیشن درجہ حرارت ، ڈیکولورائزیشن ٹائم ، اور پی ایچ-آن ڈیکولورائزیشن کی شرح اور پولیساکرائڈ کی بازیابی کی شرح کے اثراتسسٹانچے صحراپولیسیچرائڈ نچوڑ کی تحقیقات کی گئیں۔

چالو کاربن خوراک کا اثر:
30 منٹ پر فکسڈ ڈیکولرائزیشن کا وقت ، 50 ڈگری پر ڈیکولورائزیشن کا درجہ حرارت ، اور 5.03 پر پییچ (نمونہ کی پیمائش کی پیمائش)۔ ڈیکولورائزیشن کی شرح اور پولیسیچارڈ کی بازیابی کی شرح پر چالو کاربن خوراک کے اثر و رسوخ کا مطالعہ کیا گیا۔

ڈیکولرائزیشن درجہ حرارت کا اثر:
20 ٪ (ایم: ایم) پر فکسڈ چالو کاربن خوراک ، 30 منٹ پر ڈیکولورائزیشن کا وقت ، اور 5.03 پر پییچ۔ ڈیکولرائزیشن درجہ حرارت کے اثر و رسوخ کی شرح اور پولیسیچرائڈ کی بازیابی کی شرح پر ڈیکلورائزیشن درجہ حرارت کے اثر کا مطالعہ کیا گیا۔

ڈیکولرائزیشن وقت کا اثر:
20 ٪ پر فکسڈ چالو کاربن خوراک ، 50 ڈگری پر ڈیکولورائزیشن کا درجہ حرارت ، اور 5.03 پر پییچ۔ ڈیکولرائزیشن کی شرح اور پولیسیچارڈ کی بحالی کی شرح پر ڈیکولرائزیشن وقت کے اثر و رسوخ کا مطالعہ کیا گیا۔

پی ایچ کا اثر:
20 ٪ (ایم: ایم) پر فکسڈ چالو کاربن خوراک ، 50 ڈگری پر ڈیکولورائزیشن کا درجہ حرارت ، اور 30 ​​منٹ میں ڈیکولرائزیشن کا وقت۔ ڈیکولرائزیشن کی شرح اور پولیساکرائڈ کی بازیابی کی شرح پر پییچ کے اثر و رسوخ کا مطالعہ کیا گیا۔

 

1.2.5 ردعمل سطح کی اصلاح تجرباتی ڈیزائن

سنگل عنصر کے تجربات میں شناخت کی جانے والی زیادہ سے زیادہ حالت کی حدود کی بنیاد پر ، باکس بِنکن تجرباتی ڈیزائن کا طریقہ استعمال کیا گیا تھا جس میں چار عنصر ، تین سطح کے ڈیزائن کو انجام دینے کے لئے استعمال کیا گیا تھا۔سسٹانچے صحراپولیسیچرائڈ نچوڑ۔ ڈیکولرائزیشن کی شرح اور پولیسیچارڈ کی بازیابی کی شرح کو تشخیصی اشاریوں کے طور پر استعمال کیا گیا تھا۔ ڈیزائن پیرامیٹرز ٹیبل 1 میں دکھائے گئے ہیں۔

1.2.6 اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی کا تعینسسٹانچے صحراپولیسیچرائڈس

(1) کا تعینسسٹانچے صحراپولیسیچرائڈس کی ڈی پی پی ایچ ریڈیکل اسکیوینگنگ قابلیت

کان Jintao et al کے طریقہ کار کی بنیاد پر۔ [21] معمولی ترمیم کے ساتھ ، 0. 5 ملی لیٹر 1. (1 ، {{1 0}}} diphenyl -2- picrylhydrazine) اور 1.1 ملی لیٹر آست پانی۔ اس مرکب کو 30 منٹ کے لئے 37 ڈگری پر اندھیرے میں رد عمل ظاہر کرنے کی اجازت تھی۔ رد عمل کے حل کی جاذبیت 517 ینیم پر ماپا گیا تھا ، اور ڈی پی پی ایچ ریڈیکل اسکیوینگنگ ریٹ 1.0 ملی گرام/ایم ایل پولیسیچارائڈس سے پہلے اور اس کے بعد ڈیکولورائزیشن کا حساب کتاب مساوات (3) کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا تھا:

DPPH ریڈیکل اسکیوینگنگ ریٹ (٪)

{{0}}} [1− (a1 - a2) a {0] × 100 ٪ {{6} \ \ بائیں [1 - \ frac {(a {{8} {} a}} {a a {a {a a a a a a a a a a a a a a a a a a a a a a a a a a a a a a a a a a a a a a a { 100 \ ٪=[1 - a0 (a1 −a2)] × 100 ٪

جہاں:

A1A _1 A1 نمونہ ٹیسٹ ٹیوب کا جاذب ہے ،

a2a _2 a2 جذب ہوتا ہے جب anhydrous ایتھنول DPPH حل کی جگہ لے لیتا ہے ،

A {{0}} a _0 a0 جب آستین پانی نمونے کی جگہ لے لیتا ہے تو جاذب ہوتا ہے۔

 

(2) کل کم کرنے والی طاقت کا تعینسسٹانچے صحراپولیسیچرائڈس

LU Xue et al کے ذریعہ طریقہ کار کا حوالہ دیتے ہوئے۔ [22] ، 1. 0 mg/ml polysaccharides declorization سے پہلے اور اس کے بعد تیار کیا گیا تھا۔ ایک 5 μl نمونہ اور 180 μl FRAP (فیریک آئن کو کم کرنے والے اینٹی آکسیڈینٹ پاور) ورکنگ حل کو 96- اچھی طرح سے ملایا گیا ، اچھی طرح سے ملایا گیا ، اور 5 منٹ کے لئے 37 ڈگری پر رد عمل ظاہر کرنے کی اجازت دی گئی۔ جاذب کو 593 ینیم پر ماپا گیا ، اور FESO4 معیاری حل کی حراستی کے لحاظ سے پولیسیچرائڈس کی کل کم کرنے والی طاقت کا اظہار کیا گیا۔

(3) ہائیڈروکسائل ریڈیکل اسکیوینگنگ قابلیت کا تعینسسٹانچے صحراپولیسیچرائڈس

ادب [23] میں بیان کردہ طریقہ کار کے بعد اور ہائیڈروکسیل ریڈیکل اسکیوینگنگ پرکھ کٹ کی ہدایات ، 1۔ 0 mg/ml پولیسیچارائڈس سے پہلے اور اس کے بعد ڈیکولرائزیشن تیار کی گئی تھی۔ آست پانی کا استعمال کنٹرول گروپ جاذب (ایکونٹولا _ \ text {کنٹرول} ایکونٹرول) کے لئے ہائیڈروجن پیرو آکسائیڈ کو تبدیل کرنے کے لئے کیا گیا تھا ، اور خالی پانی کو خالی گروپ جاذب کے نمونے کو تبدیل کرنے کے لئے استعمال کیا گیا تھا (ابلنکا _} {خالی} ابلانک)۔ جاذب اقدار کو 550 ینیم پر ماپا گیا ، اور ہائڈروکسل ریڈیکل اسکیوینگنگ ریٹ کا حساب مساوات (4) کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا۔

ہائیڈروکسائل ریڈیکل اسکیوینگنگ ریٹ (٪)

= [(acontrol - asample) (acontrol - ablank)] × 100 ٪=\ بائیں [\ frac {(a _ \ text {کنٹرول} - a _}}}} {6} {6 a {{8} \ text {خالی})} \ دائیں] \ اوقات 100 \ ٪=[(ایکونٹرول −ablank) (ایکونٹرول −ample)] × 100 ٪

جہاں:

asamplea {{0} \ \ Text {نمونہ} asample نمونہ گروپ کی جاذب ہے ،

ایکونٹولا _ \ متن {کنٹرول} ایکونٹرول کنٹرول گروپ کی جاذب ہے ،

ابلنکا _ \ متن {خالی} اببلانک خالی گروپ کا جاذب ہے۔

 

(4) اے بی ٹی ایس کیٹیشن ریڈیکل اسکیوینگنگ قابلیت کا تعینسسٹانچے صحراپولیسیچرائڈس

ادب [24] میں بیان کردہ طریقہ کار کے مطابق اور اے بی ٹی ایس کیٹیشن ریڈیکل اسکیوینگنگ پرکھ کٹ کی ہدایات ، 1۔ 0 مگرا/ایم ایل پولساکرائڈس اس سے پہلے اور اس کے بعد تیار کی گئی تھیں۔ ایک 10 μL نمونہ 20 μL ریجنٹ ورکنگ حل چار اور اے بی ٹی ایس کے کام کرنے والے حل کے 170 μl کے ساتھ ملا دیا گیا ، اچھی طرح سے ملا دیا گیا ، اور کمرے کے درجہ حرارت پر اندھیرے میں 6 منٹ تک اس پر رد عمل ظاہر کرنے کی اجازت دی گئی۔ ڈیونائزڈ پانی کو خالی کنٹرول کے طور پر استعمال کیا گیا تھا۔ جاذب کو 405 ینیم پر ماپا گیا ، اور مساوات (5) کا استعمال کرتے ہوئے اے بی ٹی ایس کیٹیشن ریڈیکل اسکیوینگنگ ریٹ کا حساب لگایا گیا۔

اے بی ٹی ایس کیٹیشن ریڈیکل اسکیوینگنگ ریٹ (٪)

=} [(bblank - bsemple) bblank] × 100 ٪=\ \ بائیں [\ frac {(b {3}} \ text {خالی} - b _ \ text}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}} 100 \ ٪=[bblank (bblank −bsample)] × 100 ٪

جہاں:

bblankb _ \ متن {خالی} bblank آست پانی اور ABTS حل کے مابین رد عمل کا جاذب ہے ،

Bsampleb _ \ Text {نمونہ} BSample نمونے اور ABTS حل کے مابین رد عمل کی جاذب ہے۔

 

1.3 ڈیٹا پروسیسنگ

سگماپلوٹ 12.5 سافٹ ویئر کو پلاٹنگ ، اور ڈیزائن ماہر 8 کے لئے استعمال کیا گیا تھا۔ 0. 6 سافٹ ویئر ڈیٹا تجزیہ کے لئے استعمال کیا گیا تھا۔