Fucales حصہ 3 میں Phlorotannins کے اجزاء کا جائزہ

سیستانچ کا گلائکوسائیڈ دل اور جگر کے بافتوں میں ایس او ڈی کی سرگرمی کو بھی بڑھا سکتا ہے، اور ہر ٹشو میں لیپوفسن اور ایم ڈی اے کے مواد کو نمایاں طور پر کم کر سکتا ہے، مختلف رد عمل آکسیجن ریڈیکلز (OH-، H₂O₂، وغیرہ) کو مؤثر طریقے سے ختم کر سکتا ہے اور DNA کو پہنچنے والے نقصان سے بچا سکتا ہے۔ OH ریڈیکلز کے ذریعہ۔ Cistanche phenylethanoid glycosides میں آزاد ریڈیکلز کو صاف کرنے کی مضبوط صلاحیت ہوتی ہے، وٹامن C کے مقابلے میں زیادہ کم کرنے کی صلاحیت ہوتی ہے، سپرم معطلی میں SOD کی سرگرمی کو بہتر بناتی ہے، MDA کے مواد کو کم کرتی ہے، اور سپرم کی جھلی کے کام پر ایک خاص حفاظتی اثر رکھتی ہے۔ Cistanche polysaccharides D-galactose کی وجہ سے تجرباتی طور پر حساس چوہوں کے erythrocytes اور پھیپھڑوں کے ٹشوز میں SOD اور GSH-Px کی سرگرمی کو بڑھا سکتے ہیں، نیز پھیپھڑوں اور پلازما میں MDA اور کولیجن کے مواد کو کم کر سکتے ہیں، اور elastin کے مواد کو بڑھا سکتے ہیں۔ ڈی پی پی ایچ پر اچھا اثر ڈالتا ہے، سینسنٹ چوہوں میں ہائپوکسیا کے وقت کو طول دیتا ہے، سیرم میں ایس او ڈی کی سرگرمی کو بہتر بناتا ہے، اور تجرباتی طور پر سنسنی والے چوہوں میں پھیپھڑوں کے جسمانی انحطاط میں تاخیر کرتا ہے، سیلولر مورفولوجیکل انحطاط کے ساتھ، تجربات سے معلوم ہوا ہے کہ Cistanche میں اینٹی آکسیڈنٹ کی اچھی صلاحیت ہے۔ اور جلد کی بڑھتی ہوئی بیماریوں کو روکنے اور علاج کرنے کے لیے ایک دوا بننے کی صلاحیت رکھتا ہے۔ ایک ہی وقت میں، Cistanche میں echinacoside میں DPPH فری ریڈیکلز کو ختم کرنے کی نمایاں صلاحیت ہے اور یہ رد عمل آکسیجن پرجاتیوں کو ختم کر سکتا ہے اور آزاد ریڈیکل-حوصلہ افزائی کولیجن کے انحطاط کو روک سکتا ہے، اور تھامین فری ریڈیکل ایون کے نقصان پر بھی ایک اچھا مرمتی اثر رکھتا ہے۔

میں کہاں خرید سکتا ہوں پر کلک کریں۔

【مزید معلومات کے لیے:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

جہاں تک Eckols کا تعلق ہے، dibenzodioxin ڈھانچے کی موجودگی کی وجہ سے، ان کو دوسرے گروپوں سے ان کے deprotonated مالیکیولر آئنوں کی بنیاد پر پہچانا جا سکتا ہے، جو عام طور پر برابر DPs کے ساتھ دوسرے PTs سے 2 Da کم ہوتے ہیں، ساخت میں موجود ہر dibenzodioxin motif کے لیے (شکل) 5D)۔ مثال کے طور پر، ایکول m/z 371 پر ایک [MH]− پیش کرتا ہے، جبکہ trifocal، triphlorethol، اور fucophlorethol سب موجود ہیں [MH]− m/z 373 پر۔ بدلے میں، بیکنز، جن کی ریڑھ کی ہڈی میں دو ڈائبینزوڈیوکسین ڈھانچے ہوتے ہیں، m/z 741 پر ایک [MH]− پیش کرتے ہیں، جب کہ ان کے ہیکسامر کے مساوی [MH]− m/z 745 پر موجود ہوتے ہیں۔ یہی کارمالول پر لاگو ہوتا ہے، جو کہ بنیادی طور پر وہ ہال ہوتے ہیں جن میں dibenzodioxin ڈھانچے ہوتے ہیں [120]۔ آخر میں، کچھ PTs جن میں furan کے حلقے ہوتے ہیں، جیسے کہ fucofuroeckol اور phlorofucofuroeckol، ڈی ہائیڈریٹڈ-ڈیپروٹونیٹڈ مالیکیولر آئن کی خصوصیت رکھتے ہیں، یعنی ایک [MH] - جو کہ 18 Da کم ہے، ان کے غیر فوران پر مشتمل مساوی DPs کے مقابلے میں (مثال کے طور پر، فیوکوفوریکول بمقابلہ فلورویکول ڈھانچے صرف فران رنگ کی موجودگی/غیر موجودگی پر مختلف ہوتے ہیں اور [MH]− بالترتیب m/z 496 اور 478 پر ظاہر کرتے ہیں) [120]۔ جدول 3 فوکلس میں PTs کی شناخت پر مرکوز مختلف مطالعات سے جمع کردہ MS ڈیٹا کو دکھاتا ہے۔

اگرچہ یہ بنیادی باتیں کم مالیکیولر-وزن PTs کی معقول ساختی شناخت حاصل کرنے کے لیے کارآمد ثابت ہو سکتی ہیں، لیکن جب اولیگومر اور اعلی مالیکیولر وزن والے پولیمر کی بات آتی ہے تو بڑی مشکلات پیدا ہوتی ہیں کیونکہ ان کا آئیسومرائزیشن تیزی سے بڑھتا ہے، اور فلوروگلوسینول کے انتظامات اور امتزاج کے متعدد امکانات مشکل سے ہو سکتے ہیں۔ MS یا MS/MS کے ذریعے واضح کیا گیا۔ اس کے باوجود، ایسی صورتوں میں، ایم ایس اب بھی فلوروٹانن مرکب میں موجود مرکبات کے ڈی پی کے بارے میں قیمتی معلومات فراہم کر سکتا ہے۔ اس سلسلے میں، میٹرکس کی مدد سے لیزر ڈیسورپشن/آئنائزیشن ٹائم آف فلائٹ MS (MALDI-TOF-MS) بڑے اولیگومرز کے تجزیہ کے لیے زیادہ موزوں نقطہ نظر تشکیل دیتا ہے کیونکہ یہ ESI- کی اوپری حد سے زیادہ m/z والے مالیکیولز کا پتہ لگا سکتا ہے۔ MS. اس تکنیک کا استعمال Sargassum wightii کے فلوروٹانین فریکشن کا مطالعہ کرنے کے لیے کیا گیا ہے، جس سے یہ فلوروگلوسینول [125] کے ڈائمرز، ٹرمرز اور ہیکسامرز کی موجودگی کی تصدیق کر سکتا ہے۔ ہائی ریزولیوشن MS (HRMS) ایک متبادل نقطہ نظر ہے جسے اعلی مالیکیولر وزن کے ساتھ PTs کے تجزیہ کے لیے بھی استعمال کیا جا سکتا ہے، متعدد چارج شدہ آئنوں پر انحصار کرتے ہوئے، اور پلس 1 13C آاسوٹوپ پیٹرن میں تبدیلیاں۔ دوسرے لفظوں میں، جب ایک مرکب ڈبل یا ٹرپل چارج ہوتا ہے، تو یہ بالترتیب 0.5 اور 0.33 کے m/z فرق کے ساتھ ایک جمع 1 13C آاسوٹوپ پیٹرن دکھاتا ہے۔ . اس اصول پر، Steevensz et al. [78] DP کے لحاظ سے P. canaliculata، F. spiralis، F. vesiculosus، اور A. nodosum کی PT ساخت کی پروفائل کرنے کے قابل تھے، 6000 Da تک کے مالیکیولر وزن والے مرکبات کا پتہ لگاتے ہیں جو بصورت دیگر بڑے پیمانے پر حد سے تجاوز کر جائیں گے۔ ESI-MS کا۔

مجموعی طور پر، اگرچہ ماس اسپیکٹومیٹری PTs کے کوالٹیٹو تجزیہ کے لیے ایک وسائل سے بھرپور تکنیک ہو سکتی ہے اور کم مالیکیولر-وزن مرکبات کی معقول حد تک اچھی خصوصیت حاصل کرنے کے لیے کافی طاقتور بھی ہو سکتی ہے، لیکن یہ مرکبات کی isomeric شکلوں کی قسم اور ربط کی پوزیشن پر کافی تفصیلات حاصل کرنے میں ناکام رہتی ہے۔ اعلی ڈی پی ایس کے ساتھ۔ لہذا، جب مقصد PTs- ساختی خصوصیات کو مکمل طور پر واضح کرنا ہے، NMR واحد موثر طریقہ ہے جو اس طرح کے گہرائی سے تجزیہ کے لیے کافی حل پیش کر سکتا ہے۔

5.2.3 NMR

NMR سپیکٹروسکوپی ایک براہ راست اور غیر تباہ کن تجزیہ پر مشتمل ہے جو نہ صرف PTs کے مواد تک رسائی حاصل کرنے کے لیے بلکہ PTs کی ساختی خصوصیات کو مکمل طور پر واضح کرنے کے لیے بھی مفید ہو سکتا ہے۔ جب مقداری اعداد و شمار کا ارادہ کیا جاتا ہے تو، الگل نچوڑ میں موجود تمام فینولک مرکبات کے 1H NMR گونج سگنلز کو مربوط کیا جاتا ہے اور ان کا موازنہ ایک مناسب اندرونی معیار کے ساتھ کیا جاتا ہے۔ ان مرکبات کو مستحکم، کیمیاوی طور پر غیر فعال، انتہائی خالص شکل میں دستیاب، اور نمونے کی طرح ڈیوٹریٹڈ سالوینٹس میں مکمل طور پر حل ہونے کی ضرورت ہے۔ مجموعی طور پر، مصنفین اس تکنیک کے ذریعے فینولک مرکبات اور/یا PTs کی مقدار درست کرنے کے لیے مختلف طریقوں اور طریقہ کار کا استعمال کر رہے ہیں، بشمول Fucale سے حاصل کردہ نمونوں میں۔

2009 میں، پیرس وغیرہ۔ بیان کیا گیا ہے، پہلی بار، مقداری 1H NMR (NMR) کا استعمال سال کے دوران A. nodosum کے فلوروٹانن مواد کی تغیر کا تعین کرنے کے لیے۔ ان کے کام میں، ٹرائیمیسک ایسڈ کو اندرونی معیار کے طور پر استعمال کیا گیا تھا (20 ملی گرام ٹرائیمیسک ایسڈ 0.8 ملی لیٹر ڈیوٹیریٹڈ میتھانول اور 0.2 ملی لیٹر ڈیوٹیریم آکسائیڈ)، اور فلوروگلوسنول کا استعمال کرتے ہوئے ایک انشانکن وکر تیار کیا گیا تھا۔ qHNMR کے ذریعہ اعلی PTs مواد کا پتہ لگانے کے باوجود، FC رنگین میٹرک طریقہ استعمال کرنے والوں کے مقابلے میں، دونوں طریقوں نے ایک ہی موسمی تغیرات کے رجحان کی پیروی کی [126]۔ یہ نوٹ کرنا ضروری ہے کہ رنگین پرکھ کے برعکس، جو PTs کے لیے مخصوص نہیں ہے یا یہاں تک کہ فینولک مرکبات کے لیے بھی، qHNMR میں 1H NMR سپیکٹرا کے گونج سگنلز کے انضمام کا موازنہ اندرونی معیار کے ساتھ کیا جاتا ہے۔ ان بنیادی اختلافات کی وجہ سے، دونوں طریقوں کے درمیان براہ راست موازنہ درست طریقے سے نہیں کیا جا سکتا [127,128]۔

ایک الگ نقطہ نظر کا استعمال کرتے ہوئے، Stiger-Pouvreau اور ساتھی کارکنوں نے بھوری طحالب، Cystoseira tamariscifolia میں PTs کی مقدار درست کرنے کے لیے ہائی ریزولوشن میجک اینگل اسپننگ (HR-MAS) کا استعمال کیا۔ اس مطالعے میں، Vivo میں phloroglucinol (monomer) کا پتہ لگانے کے لیے ٹھوس ریاست NMR کا استعمال کیا گیا تھا اور monomer کی مقدار کا اندازہ لگانے کے لیے 1H qNMR کا اطلاق کیا گیا تھا (ٹرائیمیتھائلسائل-پروپیونیٹ -d4 (TSP) کو اندرونی معیار کے طور پر استعمال کرتے ہوئے)۔ δ 6.02 ppm پر فلوروگلوسینول سنگلٹ، جو تین پروٹونوں میں ضم ہوا، نے نمونے کے اندر اس کی موجودگی کی تصدیق کی۔ اس طریقہ کی درستگی کا اندازہ phloroglucinol کے معیاری حل کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا تھا اور نتائج کو FC پرکھ کے مقابلے میں درست کیا گیا تھا۔ آخر کار، مصنفین نے دعویٰ کیا کہ پیش کردہ طریقہ کار فلوروگلوسینول کی مقدار درست کرنے کے لیے ایک جدید اور تیز رفتار طریقہ پر مشتمل ہے، جسے تمام الگل پرجاتیوں پر لاگو کیا جا سکتا ہے۔ کیو این ایم آر طریقہ کار کی واحد حد کم از کم سپیکٹرا سگنلز (سنگلٹ، ڈبلٹ، وغیرہ) میں سے ایک کی ضرورت میں ہے جو واضح طور پر ایک اور صرف ایک مرکب سے منسوب ہے [129]۔

اس سے قبل 2010 میں، انہی مصنفین نے پہلے ہی ساحلوں کے ساتھ موجود جینس، سیسٹوسیرا کی پانچ انواع کے عالمی کیمیائی پروفائل کا مشاہدہ کرنے کے لیے ماس سپیکٹرو میٹری (LC/ESI–MSn) سے وابستہ in-vivo 1H HR-MAS NMR کی صلاحیت کا مظاہرہ کیا تھا۔ فرانس میں برٹنی کا: C. baccata، C. foeniculacea، C. humilis، C. nodi caulis، اور C. tamariscifolia [130]۔ دی

ان کے کام کا بنیادی مقصد سیسٹوسیرا کے نمونوں کی شناخت اور ان کی درجہ بندی پر تبادلہ خیال کرنا تھا۔ نتائج نے بنیادی طور پر C. nodicaulis اور C. tamariscifolia میں فرق کرنے کے لیے پیش کردہ طریقہ کار کی کارکردگی کو ثابت کیا کیونکہ ان کے سپیکٹرا نے خصوصیت کے اشاروں کی موجودگی کا ثبوت دیا، جس سے ان کی غیر واضح شناخت کی اجازت دی گئی۔ پہلے اور بعد کے لیے 2.91 پی پی ایم پر سنگلٹ کی صورت میں، عین مطابق 6۔{3}} پی پی ایم کی چوٹی نے پرجاتیوں کی خصوصیت کی اور ایک سادہ فلوروٹانن کی ممکنہ موجودگی کی نشاندہی کی۔ Foeniculacea اور C. humilis عام طور پر 7.90 اور 7.36 ppm پر مساوی شدت کے دو ڈبلٹس کی موجودگی کی خصوصیت رکھتے تھے۔ تاہم، دونوں اشاروں کے درمیان مطلق امتیاز ناممکن رہا۔ ان ویوو NMR سگنلز کی مماثلت، دونوں پرجاتیوں کے معمولی اندرونی کیمیائی تنوع کے ساتھ مل کر، ان نتائج کو درست ثابت کرتی ہے۔ آخر میں، C. baccata کے معاملے میں، سب سے اہم کیمیائی تنوع ظاہر کرنے کے باوجود، بہت سے اشاروں نے دوسری نسلوں سے مسلسل امتیازی سلوک کی اجازت دی۔

2020 میں، والش اور ساتھی کارکنان [131] نے A. nodosum اور F. serratus سے دو خالص فلوروٹانین کے عرقوں کی جراثیم کش صلاحیت کا مظاہرہ کیا، جو دو انٹرٹیڈل براؤن سمندری سوار ہیں۔ اس کام میں، 1H اور 13C NMR تجزیہ نے نہ صرف کل فینولک مرکبات کی مقداری اور کوالیٹیٹیو تخمینہ لگانے کی اجازت دی بلکہ دونوں پرجاتیوں کے پیوریفائیڈ فینولک نچوڑ کے درمیان ربط کی پروفائل میں فرق تک بھی رسائی حاصل کی۔ جہاں تک FC پرکھ کا تعلق ہے، F. serratus کے مقابلے A. nodosum میں کل phenolic مرکبات کی نمایاں طور پر اعلیٰ سطح پائی گئی، اور نتائج کو FC پرکھ کے ذریعے درست کیا گیا۔ مزید یہ کہ، کیو این ایم آر اور ایف سی پرکھ دونوں کا استعمال کرتے ہوئے حاصل کردہ نتائج نے ہر ماہ جمع کیے گئے نمونوں کے درمیان اور دونوں طریقوں کے درمیان تغیرات کی موجودگی کو ظاہر کیا۔

PTs کے ڈھانچے کو واضح کرنے کے لیے، 1H اور 13C NMR تجزیہ سب سے پہلے Glombitza اور اس کے گروپ نے 70 کی دہائی میں لاگو کیا تھا جب انہوں نے مختلف بھوری طحالب کی انواع میں phloroglucinol کی نشاندہی کی تھی۔ ان مشتقات سے وابستہ سپیکٹرا کی پیچیدگی صرف چھوٹے پولی فینولک ڈھانچے کی شناخت کے لیے اجازت دیتی ہے۔ اس طرح، 1974 میں، یہ پہلی بار تھا کہ بائیفوہالول اور ڈیفلوریٹول کے کیمیائی ڈھانچے کو C. tamariscifolia [132] کے 80 فیصد ایتھنول کے عرق سے واضح کیا گیا۔

اس کے باوجود، اس کے بعد سے، NMR [133] کا استعمال کرتے ہوئے ایک سو سے زیادہ PTs ڈھانچے کو واضح کیا گیا ہے۔ اس کے لیے، نچوڑ کو عام طور پر ہیکسین یا پیٹرولیم ایتھر کے ساتھ علاج سے پہلے کے مرحلے میں جمع کیا جاتا ہے تاکہ بڑے PTs کو تیز کیا جا سکے۔ مزید برآں، PTs کے عدم استحکام کو روکنے، NMR تجزیہ کو آسان بنانے اور ان مرکبات کی قطبیت کو تبدیل کرنے کے لیے، وہ اکثر acetic anhydride اور pyridine کا استعمال کرتے ہوئے acetylated ہوتے ہیں، اس طرح، ان کے نارمل فیز-سلیکا کرومیٹوگرافی کو صاف کرنے کی اجازت دیتے ہیں [119]۔ اس قسم کے مرکب کے 1H NMR سپیکٹرا میں، دو پہلوؤں پر تبصرہ کرنا ضروری ہے: خوشبودار پروٹون کی گونج δ 60 اور 7.5 ppm کے درمیان ظاہر ہوتی ہے، اور acetyl گروپس δ 2 اور 3 ppm کے درمیان سنگلٹ چوٹیوں کے طور پر ظاہر ہوتے ہیں۔ . یہ اصل غیر محفوظ شدہ فینولکس میں فری ہائیڈروکسی گروپس کی تعداد قائم کرنے کے لیے ایک مفید ٹول ہے۔ دو قسم کے خوشبو دار رنگ کے نظام جو ہو سکتے ہیں تصویر 6 میں دکھائے گئے ہیں۔ دو قسم کے پروٹونز (Ha اور Hb) کا مخصوص کیمیائی محیط 1H NMR میں مشاہدہ شدہ سگنلز کی ضرب کے ساتھ ساتھ ان کے انضمام کو بھی بدل دیتا ہے۔

1H NMR سپیکٹروسکوپی، 13C اور HSQC، اور HMBC NMR سپیکٹرا کے ساتھ، پیوریفائیڈ PTs کے ڈھانچے کو واضح کرنے کے لیے استعمال کیا گیا ہے، بشمول Fucales میں۔ heteronuclear correlation-NMR-spectroscopic نقطہ نظر ایک نمونہ میٹرکس (monomer, fuel, chloroethyl, full, fucophloroethol, etc.) سے PTs کی کلاس کی شناخت کے لیے مفید ہے [134]۔ PTs کے خصوصیت والے 13C-NMR سگنلز کا خلاصہ جدول 4 میں دیا گیا ہے۔ خصوصیت کیمیکل شفٹوں پر ظاہر ہونے سے، کاربن کی ایک الگ قسم کی کاربن گونج ان کی شدت کے ساتھ کچھ سگنلز کو PTs کی مخصوص کلاسوں، خاص طور پر phlorethols e ہالوں سے منسوب کرنے کی اجازت دیتی ہے۔ .

1997 میں Glombitza et al. [135] نے براؤن الگا، Cystophora torulosa سے 33 PTs کی تنہائی اور خصوصیات کو بیان کیا۔ مختلف پی ٹی کلاسز کی نشاندہی کی گئی جن میں فلورتھولز اور ہالز، اور فوکوفلوریتھولز اور ہائیڈروکسی فیوکوفلوریتھول (شکل 7 میں مثالیں) شامل ہیں۔ مزید برآں، مؤخر الذکر کے حوالے سے، اضافی ہائیڈروکسیل گروپس والے سات نئے ہائیڈروکسی فیوکوفلوریتھول کی نشاندہی کی گئی اور ان کی خصوصیت (NMR اور MS) کی گئی۔ جیسا کہ پہلے کہا گیا ہے، آکسیکرن کو روکنے اور الگ تھلگ پی ٹی مشتقات کی لپوفیلیٹی کو بڑھانے کے لیے، مصنفین نے ان کی تنہائی کو ایسیٹیٹس [82] کے طور پر بیان کیا۔

کوچ وغیرہ۔ B. bifurcate [136] میں بڑے fuhalolacetates کی خصوصیت کے لیے 1H اور 13C NMR کے اطلاق کا بھی مظاہرہ کیا ہے۔ HSQC اور HMBC (2D) NMR سپیکٹروسکوپک تکنیکوں کو Cérantola et al نے استعمال کیا ہے۔ Fucus spiralis [137] کے نچوڑ میں فوکول اور فیوکوفلوریٹول ڈھانچے کی موجودگی کو ظاہر کرنے کے لیے۔ برٹنی میں پرچر ہیلیڈریس سلیکوسا کے ساتھ بھی یہی طریقہ استعمال کیا گیا تھا۔ 1D اور 2D NMR کے استعمال، اور MS تجزیہ نے چار فینولک مشتقات کی شناخت کی اجازت دی: trifuhalols اور tetrafuhalols، اور، پہلی بار، diphlorethols اور triphlorethols [125]۔ جدول 5 اوپر بیان کردہ مطالعات کا خلاصہ کرتا ہے جس میں 1H اور 13C NMR نے Fucales سے تعلق رکھنے والے طحالب سے نکالے گئے PTs کی ساخت کی وضاحت میں حصہ لیا۔

【مزید معلومات کے لیے:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】