حصہ 2: ایکٹیوسائیڈ ریپریسڈ مائیکروگلیہ M1 پولرائزیشن کے ذریعے روکا ہوا NF-κB سگنلنگ پاتھ وے اور AMPK-میڈییٹڈ مائٹوکونڈریا فنکشن ریکوری

رابطہ: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 ای میل:audrey.hu@wecistanche.com

براہ کرم حصہ 1 کے لیے یہاں کلک کریں۔

AD (ایک دماغی مرض کا نام ہے) ایک ترقی پسند اعصابی اور علمی dysfunction بیماری ہے، جس میں پیچیدہ غیر منظم میکانزم ہیں[17]۔ جمع ہونے والے شواہد نے دماغ میں مائیکروگلیہ سے چلنے والی انمیشن کے درمیان ایک اہم تعلق کا مظاہرہ کیا ہے۔ ایسا لگتا ہے کہ یہ AD کی ترقی میں ایک اہم کردار ادا کرتا ہے۔(ایک دماغی مرض کا نام ہے). مائکروگلیہ دماغ میں میکروفیج ہیں [18]۔ اسے کلاسیکی طور پر M1 in§Ammatory phenotype پر چالو کیا جا سکتا ہے، جس کی خصوصیت proin§ammatory cytokines کے بڑھے ہوئے سراو سے ہوتی ہے[4]۔ ضرورت سے زیادہ M1 ایکٹیویشن نیوران کو پہنچنے والے نقصان اور نیوروڈیجنریشن کو تیز کر سکتا ہے، یہاں تک کہ AD کو بڑھا سکتا ہے۔(ایک دماغی مرض کا نام ہے) [19]۔ اس طرح، مائیکروگلیہ پولرائزیشن پوائنٹس کو کنٹرول کرنے کے مقصد سے نئے علاج کے طریقوں کو تلاش کرنا لازمی ہے جو انکولی فوائد فراہم کرسکتے ہیں۔

ہمارے پچھلے کام نے اس ACT کی تصدیق کی ہے۔(cistanche سے acteoside)سیکھنے اور یادداشت کی صلاحیت کو بہتر بنانے اور چوہوں میں نیوران کی حفاظت کے اہم اثرات تھے [20]۔ مستقل طور پر، موجودہ مطالعہ نے یہ بھی ثابت کیا کہ ACT زیبرا میں AlCl3-کی حوصلہ افزائی ڈسکینیشیا اور کولینجک نظام کی خرابی کو دور کر سکتا ہے۔ پرجوش طور پر، ACT(cistanche سے acteoside)LPS کی حوصلہ افزائی BV-2 خلیوں میں قابل ذکر سوزش مخالف سرگرمیاں پیش کیں۔ ٹرانسکرپٹومک پرول نے کنٹرول سیلز کے مقابلے LPS-حوصلہ افزائی سیلز کے ساتھ ساتھ LPS-حوصلہ افزائی کے مقابلے میں ACT-علاج شدہ سیلز میں نمایاں تبدیلیاں کیں۔

ACT(cistanche سے acteoside) NK-κB راستے کو روک کر M1 پولرائزیشن کو دبایا۔ سوائے NF-κB پاتھ وے کے، RNA-seq نے وہ ACT بھی دریافت کیا۔(cistanche سے acteoside)علاج ارجنائن بائیو سنتھیسس کے ساتھ ساتھ پینٹوتھینیٹ اور CoA بائیو سنتھیس کو بھی متاثر کر سکتا ہے۔ دلچسپ بات یہ ہے کہ HPLC-Q-TOF-MS تجزیہ کے ذریعہ دو میٹابولک راستے مزید تصدیق شدہ تھے۔ یہ بڑے پیمانے پر رپورٹ کیا گیا ہے کہ iNOS Arg سے NO اور citrulline کو میٹابولائز کر سکتا ہے جبکہ Arg-1 Arg کو ornithine اور Urea میں ہائیڈولائز کر سکتا ہے، جو نیوران کی مرمت سے وابستہ ہے[21]۔ ایل پی ایس محرک نے iNOS (تصویر 3a) کی اپ گریجشن اور Arg-1 (تصویر 3b) کی تنزلی کا باعث بنا، جس کے نتیجے میں NO کی سطح میں اضافہ ہوا (تصویر 2f)۔ اعداد و شمار سے پتہ چلتا ہے کہ ACT(cistanche سے acteoside)ارجنائن بائیو سنتھیسس کے ذریعے بڑھتی ہوئی NO کی سطح کو کم کیا۔

پینٹوتھینک ایسڈ (PA) pantothenate kinase[22] کے لیے بنیادی سبسٹریٹ ہے، CoA بائیو سنتھیسز میں شرح کو محدود کرنے والے میٹابولائٹ کے طور پر۔ PA acetyl-CoA کا لازمی پیش خیمہ ہے، جو cholinergic neurons[23] کے لیے خاص اہمیت کا حامل ہے اور tricarboxylic acid سائیکل (TCA سائیکل) میں حصہ لیتا ہے[24]۔ ایک حالیہ مطالعہ سے پتہ چلتا ہے کہ CoA کا بلند ارتکاز مائٹوکونڈریل مورفولوجی میں تبدیلی اور ATP مواد کو کم کرنے کا باعث بنے گا[22]۔ LPS کی حوصلہ افزائی BV-2 خلیوں نے مائٹوکونڈریا کی تعداد میں کمی اور مائٹوکونڈریل شکل میں تبدیلی کی نمائش کی۔ LPS کی طرف سے حوصلہ افزائی کے بعد، BV-2 خلیوں میں ROS کی پیداوار میں اضافہ ہوا۔ پھر اوورلیڈڈ ROS کی وجہ سے جھلی فاسفولیپڈ پر فری ریڈیکل کا حملہ ہوا[25]۔ اس کے نتیجے میں ایم ایم پی کا نقصان ہوا، اس کے نتیجے میں، مائٹوکونڈریل dysfunction اور ATP کی کمی۔ یہ شاندار تھا کہ ACT(cistanche سے acteoside)علاج نے MMP اور ATP مواد کی کمی کو کم کیا۔ ان اعداد و شمار نے تجویز کیا کہ ACT(cistanche سے acteoside)پینٹوتھینیٹ اور CoA بائیو سنتھیسس کو ریگولیٹ کرکے مائٹوکونڈریل ڈیسفکشن کی حوصلہ افزائی۔

یہ بڑے پیمانے پر بتایا گیا ہے کہ مائکروگلیہ پولرائزیشن سیل میٹابولزم کے ساتھ قریب سے وابستہ ہے[14]۔ خاص طور پر، میٹابولک حب کے طور پر، مائٹوکونڈریا سیل میٹابولزم کو منظم کرنے میں نمایاں کردار ادا کرتا ہے۔ حال ہی میں، مائٹوکونڈریا کو مائیکروگلیہ پولرائزیشن میں ایک اہم فیصلہ کن نقطہ کے طور پر رکھا گیا ہے[26]۔ ACT کے طریقہ کار کو بہتر طور پر سمجھنے کے لیے(cistanche سے acteoside)، ہم نے مغربی بلاٹ تجزیہ کے ذریعہ مائٹوکونڈریا کے فعال محور کا فیصلہ کیا۔ اس نے انکشاف کیا کہ ACT(cistanche سے acteoside)AMPK /PGC- 1/UCP-2 محور کے ایکٹیویشن کے ذریعہ حوصلہ افزائی شدہ مائٹوکونڈریل dysfunction۔

PGC-1 اور UCP-2 دونوں کا تعلق mitochondrial biogenesis[27, 28] سے ہے، اور انہیں ROS کے ماسٹر ریگولیٹر کے طور پر سوچا جا سکتا ہے[29]۔ رپورٹس بتاتی ہیں کہ PGC-1 -ثالثی مائٹوکونڈریل بایوجنسیس اور ROS کی کمی UCP کی شمولیت پر منحصر ہے-2[27–29]۔ زیادہ لوڈنگ ROS کی وجہ سے، PGC-1 اور UCP-2 کے اظہار کو LPS کی حوصلہ افزائی BV-2 سیلز میں ڈاؤن ریگولیٹ کیا گیا تھا۔ اس نے تجویز کیا کہ ACT(cistanche سے acteoside)PGC-1 اور UCP-2 کے ذریعے ضرورت سے زیادہ ROS کو ختم کر سکتا ہے، اس طرح مائٹوکونڈریل فنکشن کو بحال کر سکتا ہے۔ ادب کے مطابق، BV-2 خلیوں میں PGC-1 کی تبدیلی پولرائزیشن کو منظم کرنے میں معاون ثابت ہو سکتی ہے۔ دلچسپ بات یہ ہے کہ ایک پچھلی رپورٹ میں پتہ چلا ہے کہ PGC-1 اظہار میں اضافہ LPS-حوصلہ افزائی BV-2 خلیوں میں NF-κB سرگرمی کو روکتا ہے[30]۔ اس نے ہمارے مطالعے میں PGC-1 اور NF-κB کے درمیان تعلق کو درست کیا۔

PGC-1 کا اظہار اپ اسٹریم پاتھ وے پروٹین، جیسے AMPK سے متاثر ہوتا ہے۔ AMPK سیلولر ہومیوسٹاسس[31] کی دیکھ بھال کے لیے کلیدی پروٹین ہے، جو مائکروگلیہ کے M2 پولرائزیشن کو فروغ دینے میں مختلف کردار ادا کرتا ہے[32]۔ یہ خلیوں میں میٹابولک راستوں کو ماڈیول کرتا ہے[33]۔ ہم نے وہ ACT پایا(cistanche سے acteoside)AMPK کی ایکٹیویشن کو فروغ دیا۔ ایک ہی وقت میں، کمپاؤنڈ C (AMPK inhibitor) کے استعمال نے LPS کی حوصلہ افزائی NO اضافی کو کم کرنے پر ACT کے اثر کو روک دیا۔ لہذا، ACT نے AMPK سگنلنگ پاتھ وے کے ذریعے LPS-حوصلہ افزائی M1 پولرائزیشن کو بھی دبا دیا۔

یہ ACT کے طریقہ کار کی اطلاع دینے کا پہلا وقت ہے۔(cistanche سے acteoside)مائکروگلیہ پولرائزیشن کو منظم کرنے پر (تصویر 10)۔ اعداد و شمار نے اس بات کی تائید کی کہ ACT کو neuroin§ammation کے ساتھ منسلک neurodegenerative بیماری کے علاج کے ایجنٹ کے طور پر تیار کیا جا سکتا ہے، جیسے AD(ایک دماغی مرض کا نام ہے) . خاص طور پر، ہم نے مائکروگلیہ پولرائزیشن کو سیل میٹابولزم سے جوڑ دیا، ACT کے اثر کی وضاحت کرتے ہوئے(cistanche سے acteoside)مائٹوکونڈریا فنکشن میں تبدیلی کے ذریعے۔ اس میٹابولک محور کی شناخت، اسے ایک منفرد ہستی کے طور پر نشانہ بنانا، مائیکروگلیہ M1 پولرائزیشن کے خلاف بہت بہتر علاج کے طریقوں کی اجازت دے سکتا ہے، خاص طور پر AD میں(ایک دماغی مرض کا نام ہے) .