حصہ 2:ایچناکوسائیڈ نیوکلیوٹائڈ پول سینیٹائزنگ اینزائم ایم ٹی ایچ 1 کو روک کر اپوپٹوٹک کینسر سیل کی موت کا باعث بنتا ہے۔

echinacoside نیوکلیوٹائڈ پول سینیٹائزنگ انزائم MTh1 کو روک کر اپوپٹوٹک کینسر سیل کی موت کو اکساتا ہے۔

رابطہ:joanna.jia@wecistanche.com

Cistanche echinacosideہےاینٹی کینسراوراینٹی اپوپٹوٹکاثرات

براہ کرم حصہ 3 کے لیے یہاں کلک کریں۔

براہ کرم حصہ 1 کے لیے یہاں کلک کریں۔

نتائج

ایک MTh 1 inhibitor کے طور پر Echinacoside کی شناخت

MTH1 کو روکنے کے قابل قدرتی مرکبات کو تلاش کرنے کے لیے، ہم نے وٹرو اسکریننگ پرکھ میں MTH1-کیٹیلائزڈ انزیمیٹک رد عمل کو ایک اعلی تھرو پٹ کے طور پر استعمال کیا۔ آکسیڈائزڈ پیورین نیوکلیوٹائڈس کے علاوہ، MTH1 ڈی آکسی گوانوسین مونو فاسفیٹ اور پائروفاسفیٹ پیدا کرنے کے لیے نارمل ڈی آکسی گوانوسائن ٹرائی فاسفیٹ کو ہائیڈولائز بھی کر سکتا ہے۔ اضافی غیر نامیاتی پائرو فاسفیٹیس کی موجودگی میں، تمام پائروفاسفیٹس غیر نامیاتی فاسفیٹس میں تبدیل ہو جاتے ہیں، جن کی مقدار مالاکائٹ گرین پر مبنی جاذب پرکھ کے ذریعے کی جا سکتی ہے، 41 اس طرح MTH1 سرگرمی کی بالواسطہ پیمائش کی اجازت دیتا ہے۔ 32 پرکھ کے نظام کو جانچنے کے لیے، ہم نے پہلے پیمائش کی۔ (S)-crizotinib کا اثر، MTH1 inhibitor کے طور پر ثابت طاقت کے ساتھ ایک مرکب۔ 33 نتیجہ ظاہر ہوا کہ (S)-crizotinib واقعی 500 nM کے IC50 کے ساتھ MTH1 (شکل 1A) کو مضبوطی سے روکتا ہے، جو کہ Huber کی رپورٹ سے سات گنا زیادہ تھا۔ et al (72 nM). ہم نے ایک کم حساس کروموجینک طریقہ اپنایا، جب کہ Huber et al نے انتہائی حساس bioluminescent طریقہ استعمال کیا۔ 33 اس کو ذہن میں رکھتے ہوئے، ہم نے تجارتی طور پر دستیاب 12 قدرتی مرکبات (ٹیبل S1) کی اسکریننگ کی، جن میں سے ہر ایک روایتی جڑی بوٹیوں کا ایک اہم جزو ہے جس میں ممکنہ اینٹیٹیمر ہے۔ سرگرمیEchinacoside، پرجیوی دواؤں کے پودے Cistanche سالسا (شکل 1C) سے پاک کردہ ایک مرکب، 7.01±2.13 μM (شکل 1D) کے IC50 کے ساتھ، رد عمل کو نمایاں طور پر روکتا ہے (شکل 1B)۔ 50 گنا زیادہ پائرو فاسفیٹیز کو شامل کرنے سے نتیجہ پر کوئی اثر نہیں ہوا جبکہ پانچ گنا زیادہ MTH1 پروٹین شامل کرنے سے روک تھام کی ڈگری میں نمایاں کمی واقع ہوئی، یہ تجویز کرتا ہے کہEchinacosideخاص طور پر ان وٹرو انزیمیٹک پرکھ میں MTH1 کی سرگرمی کو روکتا ہے۔

Echinacoside نے انٹرا سیلولر 8-oxog کو بڑھانے کے لیے سیلولر MTh 1 کو روک دیا

اگلا، ہم نے پوچھاEchinacosideانٹرا سیلولر MTH1 سرگرمی کو روک سکتا ہے۔ سیلولر MTH1 کی روک تھام کے نتیجے میں انٹرا سیلولر 8-oxoG میں اضافہ ہوگا۔ Avidin کو اعلی خاصیت کے ساتھ 8-oxoG سے منسلک دکھایا گیا ہے؛ 42 لہذا، ہم نے Cy3-conjugated avidin کے ساتھ امیونو فلوروسینٹ سٹیننگ کا استعمال کیا تاکہ مختلف کینسر سیل لائنوں میں انٹرا سیلولر 8-oxoG لیولز کا موازنہ کیا جا سکے۔ کے بعدEchinacosideعلاج. انسانی MG{{0} osteosarcoma، SK-HEP-1hepatocarcinoma، MCF-7 چھاتی کے کینسر، اور SW480 کولوریکٹل کینسر کے خلیوں کا علاج 0 μM، 15 μM، 30 μM، 60 کے ساتھ کیا گیا تھا۔ μM، یا 80 μM Echinacoside 5 گھنٹے، 12 گھنٹے، یا 24 گھنٹے۔ Cy3-کنجوگیٹڈ ایوڈن کے ساتھ داغ لگنے سے یہ بات سامنے آئی کہ 60 μM Echinacoside کے ساتھ 24 گھنٹے تک علاج نے ان کینسر کے خلیوں میں سیلولر 8-oxoG (Cy3-avidin reactive مادہ) کی سطح کو واضح اور نمایاں طور پر بڑھا دیا ہے۔ شکل 2A اور B)۔ کا زیادہ ارتکاز (80 μM)Echinacosideاس کے نتیجے میں مضبوط سیلولر 8- آکسو جی سٹیننگ (شکل 2B)، خوراک اور ردعمل کا تعلق تجویز کرتا ہے۔ اسی طرح کے نتائج حاصل کیے گئے۔

ایک ماؤس مونوکلونل اینٹی-8-آکسو جی اینٹی باڈی (فگر S1A) کے ساتھ امیونو فلوروسینٹ سٹیننگ کے ذریعے۔43 کا ارتکازEchinacosideسیلولر 8- میں نمایاں اضافے کے لیے درکار (60 μM) oxoG ان وٹرو پرکھ سے IC50 (7.01 μM) سے بہت زیادہ تھا۔ یہ ممکنہ طور پر دونوں اسسیس کی حساسیت میں فرق کی وجہ سے تھا۔ امیونو فلوروسینٹ سٹیننگ ان وٹرو انزیمیٹک پرکھ سے کہیں کم حساس ہے۔ مزید برآں، روکنے والے مالیکیولز کی تعداد جو سیلولر MTH1 تک پہنچ سکتے ہیں اور ان کے ساتھ تعامل کر سکتے ہیں پیچیدہ حیاتیاتی عمل سے متاثر ہوتے ہیں۔ مزید برآں، ان وٹرو پرکھ میں، کم پسندیدہ dGTP کو سبسٹریٹ کے طور پر استعمال کیا جاتا ہے، اور اس وجہ سے MTH1 کو روکنا آسان ہو سکتا ہے (کم روکنے والے)، جس کے نتیجے میں ان وٹرو پرکھ میں IC50 کم ہو جاتا ہے۔

دیکینسر مخالفاوراینٹی آکسیڈینٹکے اثراتechinacosideسےCistanchedeserticola

سیلولر 8-oxoG ROS کے ذریعہ تیار کیا جاتا ہے، جو اینٹی آکسیڈینٹس کے مخالف ہے۔ اس طرح، سیلولر ROS میں اضافہ یا اینٹی آکسیڈینٹس کی سرگرمی کو دبانے کے نتیجے میں سیلولر 8-oxoG کی سطح میں اضافہ ہوگا۔Echinacosideبذات خود ایک طاقتور اینٹی آکسیڈینٹ 44,45 ہے اور اس طرح اسے اینٹی آکسیڈنٹس کی سرگرمی کو دبانے کے بجائے بڑھانا چاہیے۔ یہ جانچنے کے لیے کہ آیا سیلولر ROS کی سطح کو تبدیل کیا گیا تھا۔Echinacosideعلاج میں، کینسر کے اسی خلیات کا علاج 0 μM، 15 μM، 30 μM، 60 μM، یا 80 μM Echinacoside کے ساتھ 5 گھنٹے، 12 گھنٹے، یا 24 گھنٹے تک کیا گیا اور پھر فلوروسینٹ کے ساتھ داغ لگانے کے بعد بہاؤ سائٹومیٹری کے ذریعے تجزیہ کیا گیا۔ تحقیقات 2′،7′-ڈائیکلورو فلوروسین ڈائیسیٹیٹ۔ نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ ان میں سے کسی بھی علاج نے سیلولر ROS کی سطح کو تبدیل نہیں کیا (شکل 2C اور D)۔ اس طرح، سیلولر 8-oxoG کی سطح میں اضافہ ممکنہ طور پر Echinacoside کی طرف سے MTH1 کی روک تھام کے نتیجے میں ہوا ہے۔

echinacosideخاص طور پر کینسر کے خلیوں میں ڈی این اے کو وسیع پیمانے پر نقصان پہنچانے سے 8- آکسو جی کو ڈی این اے میں شامل کرنے سے بی ای آر اور ایم ایم آر کو تحریک ملے گی، جو سنگل اسٹرینڈ ڈی این اے بریکس (SSB) اور گیپس پیدا کرتے ہیں۔ ڈی این اے پولیمریزس اور لیگیسس کے ذریعے خلا کو بھرنے اور لگنے کے طریقہ کار کی مرمت۔ جانچنے کے لیے کہ آیاEchinacoside- سیلولر 8- آکسو جی میں حوصلہ افزائی سے ڈی این اے کو نقصان پہنچا، ہم نے ڈی این اے کو پہنچنے والے نقصان کے ابتدائی نشانات میں سے ایک کا جائزہ لیا، 53BP1، جو DSB کے ابتدائی سیلولر ردعمل کے طور پر DSB کی سائٹس سے منسلک ہے۔48 The MG-63, SK-HEP-1، MCF-7، اور SW480 کینسر سیل لائنز اور نان کینسر سیل لائنز انسانی نارمل جگر L-O2,49 انسانی ایمبریونک کڈنی HEK 293، اور ماؤس فائبروبلاسٹ NIH/ 3T3 کا علاج 0 μM، 15 μM، 30 μM، 60 μM، یا 80 μM Echinacoside کے ساتھ 5 گھنٹے، 12 گھنٹے، یا 24 گھنٹے تک کیا گیا۔ فلوروسینٹ امیونوسٹیننگ سے پتہ چلتا ہے کہ 24 گھنٹے تک 60 μM Echinacoside کے ساتھ علاج نے خاص طور پر تمام کینسر میں پانچ یا زیادہ مضبوط داغ والے جوہری 53BP1 فوکی والے خلیوں کی تعداد میں اضافہ کیا لیکن کسی بھی نان کینسر سیل لائنوں میں نہیں (شکل 2E اور F)۔ Echinacoside علاج (شکل 2F) کے آغاز کے 5 گھنٹے بعد 53BP1 پلس خلیوں کی تعداد میں نمایاں اضافہ دیکھا گیا۔ Echinacoside کی زیادہ ارتکاز (80 μM) یا طویل علاج کے وقت (12 گھنٹے اور 24 گھنٹے) کے نتیجے میں 53BP1 پلس خلیات (شکل 2F) اور سیلولر 53BP1 فوکی کی تعداد دونوں میں زیادہ اضافہ ہوا۔ ایک ساتھ، یہ نتائج بتاتے ہیں کہ Echinacoside کی طرف سے MTH1 کی روک تھام نے 8-oxoG جمع ہونے اور کینسر میں ڈی این اے کو وسیع نقصان پہنچایا لیکن غیر سرطانی خلیوں میں نہیں۔

echinacoside کینسر کے خلیوں کے پھیلاؤ کو دباتا ہے۔

سائیکلنگ سیلز میں، ڈی این اے اسٹرینڈ کے ٹوٹنے سے ڈی این اے ریپلیکیشن فورکس کے خاتمے کا سبب بنتا ہے، جس کے بعد سیل سائیکل گرفتاری اور اپوپٹوسس شامل ہو کر سیل کے پھیلاؤ میں رکاوٹ پیدا ہوتی ہے۔ 50 کے اثرات کو چیک کرنے کے لیےEchinacosideخلیوں کی نشوونما اور پھیلاؤ پر، ہم نے سب سے پہلے ایک کالونی تشکیل پرکھ کے ذریعے Echinacoside-treated MG-63، SK-HEP-1، MCF-7، اور SW480 کینسر کے خلیوں کی نشوونما کا تجزیہ کیا۔ نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ کینسر کے خلیوں کا علاج 60 μM یا 80 μM کے ساتھ کیا جاتا ہے۔Echinacosideبہت کم کالونیاں بنیں، اور جو کالونیاں بنیں وہ بہت چھوٹی تھیں (شکل 3A اور B)، جو ترقی کی بہت زیادہ صلاحیت کو ظاہر کرتی ہے۔ اگلا، ہم نے MTT پرکھ کے ذریعہ L-O2، HEK 293، اور NIH/3T3 نان کینسر خلیوں کے ساتھ مل کر کینسر کے ان خلیوں کے پھیلاؤ کا تجزیہ کیا۔ نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ Echinacoside خوراک پر منحصر طور پر کینسر کے پھیلاؤ کو روکتا ہے لیکن غیر کینسر کے خلیات (شکل 3C) کو نہیں۔ 60 μM Echinacoside کے ساتھ علاج کیے جانے والے کینسر کے خلیوں کے ٹائم کورس کے مطالعے سے پتہ چلتا ہے کہ 5 گھنٹے کے بعد، علاج نہ کرنے اور علاج کرنے والے گروپوں میں کوئی خاص فرق نہیں تھا، لیکن 12 گھنٹے کے بعد، کینسر کے خلیوں کے پھیلاؤ کو 60 μM سے نمایاں طور پر روک دیا گیا تھا۔Echinacoside(شکل 3D)۔

سیل سائیکل کے بہاؤ سائٹوومیٹری کے مراحل سے پتہ چلتا ہے کہEchinacosideعلاج کی خوراک پر منحصر S اور G2/M دونوں مراحل میں خلیوں کی فیصد کو کم کر دیا، جبکہ G1 مرحلے میں خلیوں کی فیصد میں اضافہ ہوا (شکل 4C اور D)۔ MG-63 خلیوں کے 24 گھنٹے تک 80 μM Echinacoside علاج کے بعد، G2/M مرحلے میں خلیات 15 فیصد سے کم ہو کر تقریباً صفر ہو گئے، اور S مرحلے میں خلیات 37 فیصد سے کم ہو کر 17 فیصد ہو گئے۔ ، جبکہ G0/1 مرحلے میں خلیات 43 فیصد سے بڑھ کر 80 فیصد ہو گئے (شکل 4E)۔ یہ نتائج بتاتے ہیں کہ علاج کے ساتھEchinacosideحوصلہ افزائی سیل سائیکل گرفتاری اور G1 مرحلے میں کینسر کے خلیات کو بلاک کر دیا.

Echinacoside کینسر کے خلیوں میں apoptosis کی حوصلہ افزائی کرتا ہے۔

سیل کے پھیلاؤ پر مشاہدات کے مطابق، مغربی دھبے کے تجزیے سے پتہ چلتا ہے کہ 60 μM اور 80 μM کے ساتھ علاجEchinacoside24 گھنٹے تک کینسر کے خلیات میں فعال کیسپیس-3 اور کلیویڈ پولی (ADP-ribose) پولیمریز پروٹین کی سطح میں اضافہ ہوا (شکل 5A اور B)، جو کیسپیس پر منحصر اپوپٹوس کو شامل کرنے کی تجویز کرتا ہے۔ اس کے بعد ہم نے اپوپٹوسس کے کئی سیلولر مارکروں کی جانچ کی۔ سب سے پہلے، جوہری مورفولوجیEchinacosideکینسر کے خلیوں کا علاج ڈی این اے ڈائی ڈی اے پی آئی سے داغ لگا کر کیا گیا، جس سے پتہ چلتا ہے کہ 60 μM اور 80 μM کے ساتھ 24 گھنٹے کا علاجEchinacosideاپوپٹوسس کے نشانات کی تعداد میں اضافہ ہوا، بشمول پکنوسس اور کنڈینسڈ کرومیٹن (روشن نیوکلی) (شکل 5C)۔ دوسرا، اسی طرح کے علاج شدہ کینسر کے خلیوں سے نکالے گئے ڈی این اے کا تجزیہ ایگروز جیل پر الیکٹروفورسس کے ذریعے کیا گیا، جس نے ایک عام اپوپٹوٹک سیڑھی کا نمونہ (فگر S1B) ظاہر کیا۔ آخر میں، سیلولر ایکٹیو کیسپیس-3 کا پتہ امیونو فلوروسینٹ سٹیننگ کے ذریعے کیا گیا، جس سے مضبوط چالو کیسپیس-3 سگنلز سامنے آئےEchinacoside-علاج شدہ کینسر کے خلیات (شکل S1C)۔

اگلا، اپوپٹوٹک خلیوں کی فیصد کو Annexin V-FITC اور PI ڈبل سٹیننگ اور فلو سائٹوومیٹری کے ذریعہ ماپا گیا۔ 0 μM، 15 μM، 30 μM، 60 μM، 80 μM، یا 160 μM کے ساتھ علاج کیے جانے والے خلیوں کا تجزیہEchinacoside2 گھنٹے، 5 گھنٹے، 12 گھنٹے، یا 24 گھنٹے سے ظاہر ہوتا ہے کہ 60 μM یا اس سے زیادہ ارتکازEchinacosideMG-63، SK-HEP-1، MCF-7، اور SW480 کینسر کے خلیات (شکل 6A) میں نمایاں اپوپٹوس کی حوصلہ افزائی ہوئی، لیکن غیر کینسر L-O2، HEK 293، اور میں نہیں NIH/3T3 خلیات (شکل S2)۔ 60 μM، 80 μM، یا 160 μM کے ساتھ MG-63 خلیوں کے علاج کے بعدEchinacoside24 گھنٹوں کے لیے، اپوپٹوٹک سیلز کا فیصد بالترتیب 8.89 فیصد سے بڑھ کر 33.72 فیصد، 39.01 فیصد، اور 48.12 فیصد ہو گیا (شکل 6A)۔ ٹائم کورس کے مطالعے سے پتہ چلتا ہے کہ 5 گھنٹے کے بعد، علاج نہ کرنے اور علاج کرنے والے گروپوں کے درمیان کوئی خاص فرق نہیں تھا، لیکن 12 گھنٹے تک Echinacoside کی 60 μM یا اس سے زیادہ تعداد کے ساتھ علاج کے بعد اہم apoptosis دیکھا گیا (اعداد و شمار 6B اور S3)۔

آخر میں، JC-1 فلوروسینٹ ڈائی کے ذریعے مائٹوکونڈریل جھلی کی صلاحیت کی پیمائش نے 60 μM کے ساتھ علاج کے بعد واضح طور پر مائٹوکونڈریل جھلی کی صلاحیت کا نمایاں نقصان ظاہر کیا۔Echinacoside12 گھنٹے (شکل 6C) کے لیے، لیکن 5 گھنٹے کے بعد نہیں، جو ڈی این اے کو بلند 8- آکسوڈ جی کی وجہ سے ہونے والے نقصانات کے بعد اندرونی اپوپٹوسس پاتھ وے کے فعال ہونے کی نشاندہی کرتا ہے۔

دیاینٹی کینسراور سوزش کے اثراتcistanche echinacoside

بحث

Echinacosideایک قدرتی مرکب ہے جو دواؤں کے پودوں Cistanche اور echinacea سے الگ تھلگ ہے۔ 51,52 یہ ورسٹائل صحت کو فروغ دینے والی اور بیماریوں سے بچاؤ کی خصوصیات رکھتا ہے، جس میں اعصابی تحفظ، ہیپاٹو پروٹیکشن، اینٹی سوزش، اینٹی تھکاوٹ، اینٹی سینسنس، اینٹی ذیابیطس، اور اینٹی ٹیومر سرگرمیاں شامل ہیں۔ 53-58 کی سب سے مشہور اور قبول شدہ بایو ایکٹیویٹیEchinacosideیہ اینٹی آکسیڈیٹیو اور آر او ایس اسکیوینجنگ ایکشن ہے؛ 44,45 تاہم، یہ کینسر کے خلیوں میں آکسیڈیٹیو ڈی این اے کو نقصان پہنچاتا بھی دکھایا گیا ہے، جس کے بنیادی میکانزم غیر واضح ہیں۔ پرکھ، ہم نے پایاEchinacosideمؤثر طریقے سے MTH1-کیٹیلائزڈ انزیمیٹک ردعمل کو روکتا ہے۔ ایم ٹی ایچ 1 انزائم کی مقدار میں اضافے سے روکنا کی ڈگری میں کمی واقع ہوئی جبکہ غیر نامیاتی پائرو فاسفیٹیس کی مقدار میں اضافے سے روکنا متاثر نہیں ہوا، جس سے یہ ظاہر ہوتا ہے کہ Echinacoside خاص طور پر وٹرو پرکھ میں MTH1 کی سرگرمی کو روکتا ہے۔ Echinacoside کے ساتھ مختلف انسانی کینسر سیل لائنوں کا علاج سیلولر ROS کی سطح کو تبدیل کیے بغیر سیلولر 8- آکسو جی کی سطح میں نمایاں بلندی کا باعث بنا۔ یہ دیکھتے ہوئے کہ Echinacoside خود ایک طاقتور اینٹی آکسیڈینٹ ہے، ان نتائج نے تجویز کیا کہ انٹرا سیلولر 8-oxoG کی سطح میں اضافہ ممکنہ طور پر Echinacoside کی طرف سے سیلولر MTH1 کی روک تھام کے نتیجے میں ہوا ہے۔

کے ساتھ علاجEchinacosideوسیع پیمانے پر ڈی این اے کو پہنچنے والے نقصانات اور G1/S-CDK بلاکر p21 کی نمایاں اپ گریجولیشن کا سبب بنی، جس کے بعد اپوپٹوٹک سیل کی موت اور سیل کے پھیلاؤ کو دبانا خاص طور پر کینسر میں تھا لیکن غیر سرطانی خلیوں میں نہیں۔ مزید برآں، اس کے بعد مائٹوکونڈریل جھلی کی صلاحیت کا نمایاں نقصان

Echinacosideعلاج نے اندرونی apoptosis کے راستے کو چالو کرنے کا اشارہ کیا۔Echinacoside-علاج کے 5 گھنٹوں کے اندر اندر ڈی این اے کو پہنچنے والے نقصانات اور p21 کی اپ گریجشن کا مشاہدہ کیا گیا، جبکہ کینسر سیل اپوپٹوسس، مائٹوکونڈریل جھلی کی صلاحیت میں خلل، اور علاج کے آغاز کے 12 گھنٹے بعد ترقی کی روک تھام کا مشاہدہ کیا گیا۔ یہ اعداد و شمار اس بات کی تائید کرتے ہیں کہ کینسر سیل اپوپٹوسس اور نمو کی روک تھام MTH1 کی روک تھام کی وجہ سے ہونے والے وسیع DNA نقصانات کے نتائج تھے۔ حالیہ مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ سیلولر ڈی این ٹی پی پول کے سائز میں کمی ڈی این اے کی نقل کے دباؤ اور ڈی این اے کو نقصان پہنچا سکتی ہے۔ ڈی این ٹی پی پول کے سائز میں کمی کا امکان، اور بی سی ایل 2، ایک پروٹین جو ڈی این ٹی پی پول کے سائز کو کم کرتا ہے، 60 میں Echinacoside سے علاج شدہ SW480 کینسر کے خلیات میں نمایاں کمی واقع ہوئی؛ 58 مزید یہ کہ ہمارے اعداد و شمار نے واضح طور پر ظاہر کیا کہ Echinacoside MTH1 کو براہ راست روکتا ہے، جو کم از کم ہو سکتا ہے۔ Echinacoside کی وجہ سے ڈی این اے کو پہنچنے والے نقصانات اور سیلولر اثرات کے لیے جزوی طور پر ذمہ دار۔

dNTP پول ROS کا ایک اہم ہدف ہے، اور آکسائڈائزڈ dNTPs آکسیڈیٹیو DNA کو پہنچنے والے نقصانات کے اہم ذرائع ہیں۔ 3,10 مرمت سے وابستہ DNA SSBs اور DSBs سیلولر سنسنی اور اپوپٹوس کا باعث بن سکتے ہیں، جو عمر بڑھنے اور انٹرا ٹیومر کی ایک اعلی ڈگری میں ملوث ہوتے ہیں۔ کینسر کے خلیوں میں متفاوت اور اعلی اتپریورتن کی شرح۔ اس کے برعکس، MTH1 کی روک تھام ایک فینوٹائپ کو نشانہ بناتی ہے جو کینسر کے زیادہ تر خلیوں کو عام خلیات سے ممتاز کرتی ہے اور اس وجہ سے ایک نئی اینٹی کینسر حکمت عملی کی نمائندگی کرتی ہے جو جینیاتی موافقت تک محدود نہیں ہے۔ دلچسپ بات یہ ہے کہ antiapoptosis پروٹین Bcl266,67 کے چھوٹے مالیکیول مخالف اور proapoptosis Bax68 کے agonists تیار کیے گئے ہیں اور ان کا مظاہرہ کیا گیا ہے کہ وہ امید افزا ناول اینٹینسر ایجنٹ ہیں۔ عمل کے ان کے تکمیلی میکانزم کو دیکھتے ہوئے، MTH1 inhibitors اور apoptosis کو فروغ دینے والے کیمیکلز کو یکجا کرنے سے کینسر کے خلاف ادویات کی ایک دلچسپ نئی نسل پیدا ہوگی۔

پہلی بار، ہم نے Echinacoside کے لیے ایک اینٹی کینسر قدرتی مرکب کے طور پر ایک نئے فنکشن کا مظاہرہ کیا۔ ان وٹرو پرکھ میں، Echinacoside نے MTH1 کو 7.01 μM کے IC50 کے ساتھ روکا۔ یہ IC50 قدر اب تک کی اطلاع کردہ MTH1 inhibitors سے زیادہ ہے۔ 32,33,69 (S)-crizotinib کو مثبت کنٹرول کے طور پر استعمال کرتے ہوئے، ہم نے ظاہر کیا کہ ہمارا پرکھ Huber et al کے استعمال سے سات گنا کم حساس ہے۔ ، Echinacoside کا اصل IC50 کم ہونے کا امکان ہے۔ اس کے باوجود، اسے علاج کے ایجنٹ کے طور پر تیار کرنے کے لیے، قدرتی Echinacoside مالیکیول کی افادیت کو بہتر بنانے کی ضرورت ہوگی۔ ایک قدرتی پراڈکٹ کے طور پر جو ایک طویل عرصے سے جڑی بوٹیوں کی دوا کے طور پر استعمال ہوتی رہی ہے، Echinacoside موثر اور ممکنہ طور پر محفوظ MTH1 inhibitors کی نشوونما کے لیے ایک اچھے کیمیکل اسکافولڈ کے طور پر کام کر سکتی ہے۔ عقلی ڈھانچے پر مبنی دوائیوں کے ڈیزائن کے لیے، 70 نقطہ نظر اسی طرح کے ہیں جو ہم نے یہاں استعمال کیے ہیں،

منشیات کی دریافت کے لیے قدرتی مصنوعات میں وسیع دلچسپیوں کے ساتھ، ہدف پر مبنی، موثر اور محفوظ نئی ادویات کی تلاش میں کارآمد ثابت ہوں گے۔

Cistancheechinacosideہےاینٹی کینسراور قوت مدافعت بڑھانے والے اثرات