حصہ 2: Echinacoside چوہے کے دماغی اعصاب کے ٹرمینلز میں وولٹیج پر منحصر Ca2 پلس انٹری اور پروٹین کناز سی کو دبا کر گلوٹامیٹ کے اخراج کو روکتا ہے۔

رابطہ: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 ای میل:audrey.hu@wecistanche.com

چینگ وی لو 1,2، زو یو لن 1,2، شو کیوئی ہوانگ 1 اور سو جین وانگ 3،*

براہ کرم حصہ 1 پر واپس یہاں کلک کریں۔

3.2 علاج کے مضمرات

Excitotoxicity، ایک پیتھولوجیکل عمل جو کہ ضرورت سے زیادہ گلوٹامیٹ کے اخراج اور گلوٹامیٹ ریسیپٹر ایکٹیویشن کی وجہ سے ہوتا ہے، شدید اور دائمی دماغی عوارض جیسے کہ فالج، تکلیف دہ دماغی چوٹ، پارکنسنز، اور الزائمر کی بیماریوں میں نیورونل موت کی بڑی وجہ ہے [13,41]، اور علاج کی حکمت عملی۔ گلوٹامیٹ کی رہائی کی روک تھام کو شامل کرنا ایسی بیماریوں کے علاج کے لئے نیورو پروٹیکٹو حکمت عملی کا وعدہ کر سکتا ہے۔ Echinacoside کو خون کے دماغی رکاوٹ (BBB) ​​میں گھسنے کی تصدیق کی گئی ہے اور نیوروٹوکسائٹی [8,10–12,42] کے مختلف ان ویوو ماڈلز میں نیورو پروٹیکٹو اثرات کو ظاہر کرتا ہے۔ اگرچہ ان نیورو پروٹیکٹو اثرات کا طریقہ کار پوری طرح سے سمجھ میں نہیں آیا ہے، لیکن کئی ممکنہ میکانزم کی اطلاع دی گئی ہے جن میں سوزش کے ردعمل کی روک تھام، مائٹوکونڈریل فنکشن اسٹیبلائزیشن، اینٹی آکسیڈیشن، فری ریڈیکل اسکیوینجنگ، اور نیوروٹروفک فنکشن کی نقل کرنا [5,9,12,42] شامل ہیں۔ موجودہ مطالعہ میں، کی صلاحیتechinacosideاعصابی ٹرمینلز سے گلوٹامیٹ کی رہائی کو کم کرنے کے لیے بھی جزوی طور پر اس کے نیوروپروٹیکٹو میکانزم کی وضاحت ہو سکتی ہے۔ تاہم، چاہے یہ اثر ظاہری علاج کی صلاحیت میں حصہ ڈالتا ہے۔echinacosideگلوٹامیٹ سے وابستہ دماغی عوارض میں excitotoxicity مزید تحقیق کی ضمانت دیتا ہے۔

کے نیورو پروٹیکٹو اثراتcistancوہ echinacoside

4.مواد اور طریقے

4.1 کیمیکل

Fura-2-acetoxymethyl ester (Fura-2-AM) اور 3',3',3'-dipropylthiadicarbocyanine iodide [DiSC3(5)] Invitrogen (Carlsbad, CA, USA) سے خریدے گئے تھے۔ o-conotoxin MVIIC، rottlerin، 2-[1-(3-dimethylaminopropyl)indol-3-yl]-3-(indol-3-yl) maleimide ( GF109203X)، 5,6,7،13-ٹیٹراہائیڈرو- 13-میتھائل-5-oxo-12H-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,{ {27}}c]carbazole-12-propanenitrile (Go6976) اور N-[2-(p- bromocinnamylamino)ethyl]-5-isoquinolinesulfonamide (H89) Tocris Bioscience (Bristol, UK) سے خریدے گئے تھے۔ )۔Echinacoside, ڈینٹرولین، DL-threo-beta-benzyl-oxyaspartate (DL-TBOA)، 7-کلورو-5-(2-کلوروفینی)-1،5-ڈائی ہائیڈرو{ {10}}،1-بینزوتھیازپین-2(3H)-one (CGP37157)، 2-(2-امینو-3- میتھوکسیفینائل)-4H -1-بینزوپیران-4-ایک) (PD98059)، ethylene glycol bis(-aminoethyl ether)- N,N,N/,N/-tetraacetic acid (EGTA) اور دیگر تمام ریجنٹس سگما سے خریدے گئے تھے۔ Aldrich Co. (St. Louis, MO, USA)۔

4.2 جانور

دو ماہ کے نر Sprague – Dawley چوہے استعمال کیے گئے تھے۔ جانوروں کو معیاری ماحولیاتی حالات کے تحت رکھا گیا تھا (22 ± 1 oC؛ 50 فیصد رشتہ دار نمی؛ 12 گھنٹے روشنی/تاریک چکر) اور خوراک اور پانی تک لامحدود رسائی کی اجازت تھی۔ جانوروں کو سر کاٹ کر ہلاک کیا گیا تھا اور دماغی پرانتستا کو تیزی سے 4 oC پر ہٹا دیا گیا تھا۔ تجرباتی طریقہ کار کو فو جین انسٹیٹیوشنل اینیمل کیئر اینڈ یوٹیلائزیشن کمیٹی (A10259) نے لیبارٹری جانوروں کی دیکھ بھال اور استعمال کے لیے نیشنل انسٹی ٹیوٹ آف ہیلتھ گائیڈ کے مطابق منظور کیا تھا۔ جانوروں کی تکلیف کو کم کرنے اور قابل اعتماد نتائج پیدا کرنے کے لیے ضروری جانوروں کی کم از کم تعداد کو استعمال کرنے کے لیے تمام کوششیں کی گئیں۔

4.3 Synaptosomal تیاریاں

Synaptosomes کو چوہوں کے دماغی پرانتستا سے متضاد پرکول گریڈینٹ پر پاک کیا گیا تھا جیسا کہ پہلے بیان کیا گیا ہے [43,44]۔ مختصراً، ٹشو کو درمیانے درجے میں ہم آہنگ کیا گیا تھا جس میں 0.32 M سوکروز (pH 7.4) تھا، ہوموجنیٹ کو 10 منٹ کے لیے 3000× g (5{{25}) پر سینٹرفیوج کیا گیا تھا۔ JA 25.5 روٹر میں }00 rpm؛ بیک مین کولٹر، انکارپوریٹڈ، میامی، FL، USA) اور 4 oC، اور سپرنٹنٹ کو دوبارہ 12 منٹ کے لیے 14,500× g (11، JA 25.5 روٹر میں 000 rpm)۔ گولی کو آہستہ سے 0.32 M سوکروز (pH 7.4) میں دوبارہ معطل کیا گیا تھا، اور اس Synaptosomal سسپنشن (2 mL) کا ایک aliquot ایک 3 mL Percoll discontinuous gradient پر رکھا گیا تھا جس میں 0.32 M sucrose، 1 mM EDTA، 0.25m، D-25m اور D-25m. 3 فیصد، 10 فیصد، اور 23 فیصد پرکول (پی ایچ 7.4)۔ 4 oC پر 7 منٹ کے لیے 32,500×g (JA 20.5 روٹر میں 16,500 rpm) پر سینٹرفیوگریشن کے بعد، Synaptosomes کو 10 فیصد اور 23 فیصد پرکول بینڈ کے درمیان سے برآمد کیا گیا، اور انہیں 30mL کے حتمی حجم میں پتلا کر دیا گیا۔ HEPES بفر میڈیم (140 mM NaCl، 5 mM KCl، 5 mM NaHCO3، 1 mM MgCl2﹒ 6H2O، 1.2 mM Na2HPO4، 10 mM گلوکوز، اور 10 mM HEPES (pH 7.4))۔ 27،000× g (JA 25.5 میں 15,000 rpm) پر 10 منٹ کے لیے مزید سینٹرفیوگریشن کے بعد، Synaptosome گولی کو HEPES بفر میڈیم کے 3 mL میں دوبارہ معطل کیا گیا، اور بریڈ فورڈ پرکھ کے ذریعے پروٹین کے مواد کا تعین کیا گیا۔ آخر میں، Synaptosomes معطلی کا 0.5 ملی گرام HEPES بفر میڈیم کے 10 ملی لیٹر میں گھٹا دیا گیا اور 3000 × g (JA 20.1 روٹر میں 5000 rpm) پر 10 منٹ کے لیے سینٹرفیوج کیا گیا۔ سپرنیٹنٹ کو ضائع کر دیا گیا تھا، اور Synaptosomes پر مشتمل چھرے برف پر محفوظ کیے گئے تھے اور 4-6 گھنٹے کے اندر استعمال کیے گئے تھے۔

cistanche جڑی بوٹی

4.4 گلوٹامیٹ ریلیز

گلوٹامیٹ کی رہائی آن لائن فلورومیٹری کے ذریعہ کی گئی تھی جیسا کہ پہلے بیان کیا گیا تھا [45,46]۔ Synaptosomal چھروں کو HEPES بفر میڈیم (0.5 mg/mL) میں دوبارہ معطل کیا گیا اور 16 uM بوائین سیرم البومین کی موجودگی میں 37 oC پر 10 منٹ کے لیے پری انکیوبیشن کے دوران Synaptosomes سے خارج ہونے والے کسی بھی مفت فیٹی ایسڈ کو باندھنے کے لیے تیار کیا گیا۔ Synaptosomes کا ایک 2-mL aliquot ایک ہلائے ہوئے کیویٹ میں منتقل کیا گیا تھا جس میں 2 mM NADP پلس، 50 یونٹس گلوٹامیٹ ڈیہائیڈروجنیز، اور 1.2 mM CaCl2، اور NADPH کے فلوروسینس کو پرکن-ایلمر{14} میں ماپا گیا تھا۔ }} سپیکٹرو فلوریومیٹر (پرکن ایلمر لائف اینڈ اینالیٹیکل سائنسز، والتھم، ایم اے، یو ایس اے) بالترتیب 340 اور 460 nm کی حوصلہ افزائی اور اخراج طول موج پر۔ چونکہ Synaptosomes برقی محرک کے قابل نہیں ہیں، پوٹاشیم چینل بلاکر 4-امینوپیریڈین گلوٹامیٹ کے اخراج کو متحرک کرنے کے لیے استعمال کیا گیا تھا۔ 4-امینوپیریڈائن جھلی کی صلاحیت کو غیر مستحکم کرتی ہے اور یہ خیال کیا جاتا ہے کہ یہ بار بار اچانک Na پلس چینل پر منحصر ڈیپولرائزیشن کا سبب بنتا ہے جو Synaptic ٹرمینل کے vivo depolarization میں قریب سے لگ جاتا ہے جو وولٹیج پر منحصر Ca2 پلس چینلز اور نیورو ٹرانسمیٹر کی ریلیز کی طرف جاتا ہے۔ ] ڈیٹا 2 سیکنڈ کے وقفوں پر حاصل کیا گیا۔ ہر تجربے کے اختتام پر exogenous glutamate (5 nmol) کا ایک معیار شامل کیا گیا۔ معیاری اضافے سے پیدا ہونے والی فلوروسینس تبدیلی کی قدر کا استعمال گلوٹامیٹ کے نینومولس فی ملیگرام synaptosomal پروٹین (nmol/mg) کے طور پر جاری کردہ گلوٹامیٹ کے حساب سے کیا گیا تھا۔ متن میں بیان کردہ ریلیز ویلیوز ڈیپولرائزیشن (nmol/mg/5 منٹ) کے 5 منٹ کے بعد مستحکم حالت میں حاصل ہونے والی سطحیں ہیں۔ لوٹس 1-2-3 اسپریڈ شیٹس (IBM, White Plains, NY, USA) اور MicroCal Origin (OriginLab Corporation, Northampton, MA, USA) کا استعمال کرتے ہوئے مجموعی ڈیٹا کا تجزیہ کیا گیا۔

4.5 پلازما میمبرین پوٹینشل

پلازما جھلی کی صلاحیت کا تعین جھلی کے ممکنہ حساس رنگ کے ساتھ کیا گیا تھا، DiSC3(5) [48]۔ Synaptosomes کو HEPES بفر میڈیم میں دوبارہ معطل کیا گیا تھا، اور 2 mL aliquots کو ایک ہلچل شدہ کیویٹ میں منتقل کیا گیا تھا جس میں 5 uM DiSC3 (5) 37 oC پر ایک Perkin–Elmer LS-55 اسپیکٹرو فلوورومیٹر (PerkinElmer Science, Waltlyhams, Analysis) ، امریکا). مکسچر کو 3 منٹ تک متوازن ہونے کی اجازت دینے کے بعد، فلوروسینس کا تعین بالترتیب 646 اور 674 nm کے اتیجیت اور اخراج طول موج پر کیا گیا۔ ڈیٹا 2 سیکنڈ کے وقفوں پر اکٹھا کیا گیا۔ مائیکرو کیل اوریجن (اوریجن لیب کارپوریشن، نارتھمپٹن، ایم اے، یو ایس اے) کا استعمال کرتے ہوئے مجموعی ڈیٹا کا تجزیہ کیا گیا اور اس کا اظہار فلوروسینس یونٹس میں کیا گیا۔

4.6 سائٹوسولک Ca2 جمع ارتکاز ([Ca2 پلس ]C)

[Ca2 plus ]C کی پیمائش Ca2 پلس اشارے fura-2 سے کی گئی۔ Synaptosomes (0.5 mg/mL) کو HEPES بفر میڈیم میں پہلے سے انکیوبیٹ کیا گیا تھا جس میں 5 uM fura-2 اور 0.1 mM CaCl2 تھا، 30 منٹ کے لیے 37 oC پر ہلائی ہوئی ٹیسٹ ٹیوب میں . Fura-2 لوڈ ہونے کے بعد، Synaptosomes کو 30s کے لیے 3000×g (5000 rpm) پر مائکرو سینٹرفیوج میں سینٹرفیوج کیا گیا۔ Synaptosomal چھروں کو HEPES بفر میڈیم میں دوبارہ معطل کر دیا گیا تھا، اور Synaptosomal سسپنشن کو پرکن-ایلمر LS-55 سپیکٹرو فلورومیٹر (PerkinElmer Life and Analytical Sciences, Waltham, USAMA) میں تھرموسٹیٹیڈ کیویٹ میں ہلایا گیا تھا۔ CaCl2 (1 mM) کو 3 منٹ کے بعد شامل کیا گیا اور 10 منٹ کے بعد مزید اضافہ کیا گیا۔ فلوروسینس ڈیٹا 2 s کے وقفوں پر 340 اور 380 nm (اخراج طول موج 505 nm) کی حوصلہ افزائی طول موج پر جمع کیا گیا تھا۔ [Ca2 پلس]C (nM) کا حساب انشانکن طریقہ کار [49] اور پہلے بیان کردہ مساوات کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا تھا [50]۔ مائیکرو کیل اوریجن (اوریجن لیب کارپوریشن، نارتھمپٹن، ایم اے، یو ایس اے) کا استعمال کرتے ہوئے مجموعی ڈیٹا کا تجزیہ کیا گیا۔

4.7 ویسٹرن بلاٹنگ

Synaptosomes کو ایک lysis بفر (10 mM HEPES بفر، pH 7.4)، 1 فیصد Triton X-100، اور پروٹیز روکنے والے مرکب میں ہم آہنگ کیا گیا تھا۔ لائسیٹس کو سینٹرفیوگریشن کے ذریعے واضح کیا گیا تھا، اور پروٹین کے ارتکاز کا تعین پروٹین پرکھ کٹ (Bio-Rad Laboratories، Hercules، CA، USA) کے ذریعے کیا گیا تھا۔ پروٹین کی مساوی مقدار کو سوڈیم ڈوڈیسائل سلفیٹ-پولیاکریلامائڈ جیل الیکٹروفورسس (SDS-PAGE) کے ذریعہ الگ کیا گیا تھا اور نائٹروسیلوز جھلی میں منتقل کیا گیا تھا۔ جھلیوں کو ٹریس بفرڈ نمکین کے ساتھ بلاک کیا گیا تھا جس میں 5 فیصد کم چکنائی والا دودھ تھا اور مناسب پرائمری اینٹی باڈی (فاسفو پروٹین کناز سی (پین)، 1:3000، نووس بائیولوجیکل انکارپوریشن، بیورلی، ایم اے، یو ایس اے) کے ساتھ رات بھر 4 oC Tris-buffered saline میں تین بار دھونے کے بعد، اس کے بعد اس جھلی کا علاج ثانوی ہارسریڈش پیرو آکسیڈیز کنجوگیٹیڈ اینٹی باڈی (1:3000) سے کمرے کے درجہ حرارت پر 1 گھنٹے کے لیے کیا گیا۔ اس کے بعد جھلیوں کو کم از کم تین بار ٹریس بفرڈ نمکین سے دھویا گیا اور بہتر کیمیلومینیسینس سسٹم (ایمرشام، بکنگھم شائر، یوکے) کا استعمال کرتے ہوئے تصور کیا گیا۔ پی کے سی کو لوڈنگ کنٹرول کے طور پر پتہ لگانے کے لیے نمونوں کا ایک ایلی کوٹ لوڈ کیا گیا تھا اور اینٹی پی کے سی اینٹی باڈی کے ساتھ جانچ کی گئی تھی۔ اظہار یا فاسفوریلیشن کی سطح کا اندازہ بینڈ کثافت سے کیا گیا تھا، جس کی مقدار کثافت سے طے کی گئی تھی۔ Syngene سافٹ ویئر (Synoptics، کیمبرج، UK) کا استعمال کرتے ہوئے بینڈوں کی کثافت کی مقدار کا تجزیہ کیا گیا۔

4.8 شماریاتی تجزیہ

ڈیٹا ایک ہی synaptosomal تیاری سے حاصل کیا گیا تھا اور ایک دوسرے سے آزاد نہیں تھے۔ کنٹرول بمقابلہ منشیات کے اثر کی اہمیت کو جانچنے کے لیے، دو دم والے طالب علم کا ٹی ٹیسٹ استعمال کیا گیا۔ جب ایک اضافی موازنہ کی ضرورت تھی (جیسے کہ آیا ایک دوسرے علاج نے ایکناکوسائیڈ کے عمل کو متاثر کیا)، توکی کے ٹیسٹ کے بعد ایک طرفہ ANOVA استعمال کیا گیا۔ تجزیہ سافٹ ویئر SPSS (170; SPSS Inc., Chicago, IL, USA) کے ذریعے مکمل کیا گیا تھا۔ ڈیٹا کو اوسط ± SEM کے طور پر ظاہر کیا جاتا ہے۔ تمام شماریاتی اقدامات کے لیے p < 0.05="" پر="" اہمیت="" کا="" جائزہ="" لیا="">

cistanche

5. نتائج

یہ پہلا مطالعہ ہے جس سے یہ ظاہر ہوتا ہے کہ ایکناکوسائیڈ Cav2.2 اور Cav2.1 چینلز کے ذریعے Ca2 پلس انفلوکس کو کم کر کے چوہے کے دماغ سے گلوٹامیٹ کے اخراج کو روکتا ہے، اور یہ رہائی کی روک تھام ممکنہ طور پر پروٹین کے دبانے پر منحصر ہے، کم از کم پاتھ میں کناز حصہ موجودہ تلاش قابل قدر ہے کیونکہ یہ دماغ میں ایکناکوسائیڈ کے عمل کے طریقہ کار کے بارے میں ایک نئی بصیرت فراہم کرتی ہے۔

اعترافات: اس کام کو سائنس اور ٹیکنالوجی کی وزارت (MOST 103-2320-B-030-001 MY3) کی گرانٹ سے سپورٹ کیا گیا تھا۔

مصنف کی شراکتیں: زو یو لن اور سو جین وانگ نے تجربات کو تصور کیا اور ڈیزائن کیا؛ چینگ وی لو نے تجربات کیے۔ چینگ وی لو اور شو کوئی ہوانگ نے ڈیٹا کا تجزیہ کیا۔ سو جین وانگ نے مقالہ لکھا۔

مفادات کے تصادم: مصنفین مفادات کے تصادم کا اعلان نہیں کرتے ہیں۔

cistanche جڑی بوٹیوں کا عرق

حوالہ جات

1. ٹو، پی ایف؛ وانگ، بی؛ دیاما، ٹی. ژانگ، زیڈ جی؛ لو، RP-HPLC کی طرف سے Herba cistanchis کے phenylethanoid glycosides کا ZC تجزیہ۔ ایکٹا فارم۔ گناہ 1997، 32، 294–300۔

2. ڈالبی براؤن، ایل. بارنیٹ، ایچ. لینڈبو، اے کے؛ میئر، اے ایس؛ مولگارڈ، P. انسانی کم کثافت والے لیپو پروٹینز کے وٹرو آکسیڈیشن پر Echinacea purpurea سے الکامائڈز، کیفیک ایسڈ ڈیریویٹوز، اور پولی سیکرائیڈ فریکشنز کے Synergistic antioxidative اثرات۔ جے ایگرک فوڈ کیم۔ 2005، 53، 9413–9423۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

3. داپس، بی. Dall'Acqua, S.; بُلا، آر۔ Agostinis, C.; Perissutti، B.؛ Invernizzi, S.; گراسی، جی؛ Voinovich, D. امیونو موڈولیشن ایک جڑی بوٹیوں کے شربت کے ذریعہ ثالثی جس میں معیاری Echinacea جڑ کے عرق پر مشتمل ہے: سائٹوکائن جین اظہار پر صحت مند انسانی مضامین میں ایک پائلٹ مطالعہ۔ فائٹو میڈیسن 2014، 21، 1406–1410۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

4. وہ، ڈبلیو جے؛ فینگ، ٹی ایچ؛ Tu, Echinacoside کی فارماسولوجیکل سرگرمیوں پر PF ریسرچ کی پیشرفت۔ چین جے چن۔ میٹر میڈ. 2009، 34، 476–479۔

5. ڈینگ، ایم. Zhao, JY; ٹو، پی ایف؛ جیانگ، وائی؛ لی، زیڈ بی؛ وانگ، YH Echinacoside SHSY5Y نیورونل خلیوں کو TNFalpha-حوصلہ افزائی apoptosis سے بچاتا ہے۔ یور جے فارماکول۔ 2004، 505، 11-18۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

6. کو، کے اے؛ سنگ، ایس ایچ؛ پارک، JH؛ کم، ایس ایچ؛ لی، کے وائی؛ کم، وائی سی کالی کارپا ڈائکوٹوما سے فینی لیتھانائڈ گلائکوسائیڈز کی وٹرو نیورو پروٹیکٹو سرگرمیاں۔ پلانٹا میڈ۔ 2005، 71، 778–780۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

7. وانگ، YH؛ Xuan, ZH; تیان، ایس. Du, GH Echinacoside ROS کی پیداوار کو کم کرنے کے ذریعے 6-Hydroxydopamine-Induced Mitochondrial Dysfunction اور PC12 Cells میں سوزش کے ردعمل سے تحفظ فراہم کرتا ہے۔ ایوڈ پر مبنی تکمیل۔ متبادل میڈ. 2015، 2015، 189239۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

8. زو، ایم. لو، سی. Li, W. Echinacoside کا عارضی نمائش Trk سگنلنگ کو چالو کرنے اور روٹینون سے نیورونل خلیوں کی حفاظت کے لیے کافی ہے۔ J. نیورو کیم۔ 2013، 124، 571–580۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

9. گینگ، ایکس۔ تیان، ایکس؛ ٹو، پی. Pu, X. پارکنسنز کی بیماری کے ماؤس MPTP ماڈل میں echinacoside کے نیورو پروٹیکٹو اثرات۔ یور جے فارماکول۔ 2007، 564، 66–74۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

10. وی، ایل ایل؛ چن، ایچ. جیانگ، وائی؛ ٹو، پی ایف؛ Zhong، M.؛ ڈو، جے؛ لیو، ایف. وانگ، ایل. لیو، درمیانی دماغی شریانوں کے بند ہونے والے چوہوں میں ایکٹیو ماس کی ہسٹیو سنٹرل لیول پر ایچیناکوسائیڈ کے سی وائی اثرات۔ بایومیڈ ماحولیات۔ سائنس 2012، 25، 238–244۔ [پب میڈ]

11. وو، سی آر؛ لن، ہائی کورٹ؛ الزائمر کی بیماری جیسے چوہے کے ماڈل میں رویے کے خسارے سے Cistanche tubulosa کے پانی کے نچوڑ کے ذریعے Su, MH الٹ: امائلائڈ جمع اور مرکزی نیورو ٹرانسمیٹر فنکشن کے لیے مطابقت۔ بی ایم سی تکمیل۔ متبادل میڈ. 2014، 14، 202۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

12. زاؤ، ق. گاو، جے؛ لی، ڈبلیو. پارکنسن کی بیماری کے ذیلی ایم پی ٹی پی ماؤس ماڈل میں ایکیناکوسائڈ کے نیوروٹروفک اور نیورو ریسکیو اثرات۔ دماغ ریس 2010، 1346، 224–236۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

13. میلڈرم، بی ایس گلوٹامیٹ دماغ میں نیورو ٹرانسمیٹر کے طور پر: فزیالوجی اور پیتھالوجی کا جائزہ۔ J. Nutr.2000, 130, 1007S–1015S. [پب میڈ]

14. لی، ڈی. شم، ایم ایس؛ کم، کے وائی؛ Noh, YH; کم، ایچ. کم، ایس وائی؛ وینریب، آر این؛ Ju, WK Coenzyme Q10 گلوکوما کے ماؤس ماڈل میں گلوٹامیٹ ایکسائٹوٹوکسائٹی اور آکسیڈیٹیو تناؤ کی ثالثی مائٹوکونڈریل تبدیلی کو روکتا ہے۔ تفتیش کریں۔ Ophthalmol. Vis. سائنس 2014، 55، 993–1005۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

15. Choi، DW کیلشیم اور excitotoxic neuronal چوٹ۔ این۔ NY Acad. سائنس 1994، 747، 162–171۔ [CrossRef][PubMed]

16. لاؤ، اے. Tymianski، M. Glutamate ریسیپٹرز، neurotoxicity اور neurodegeneration. فلوگرز محراب 2010، 460، 525–542۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

17. سیٹلر، آر. Tymianski، M. گلوٹامیٹ ریسیپٹر ثالثی excitotoxic نیورونل سیل کی موت کے مالیکیولر میکانزم۔ مول نیوروبیول۔ 2001، 24، 107-129۔ [کراس ریف]

18. Schauwecker، PE نیورو پروٹیکشن بذریعہ گلوٹامیٹ ریسیپٹر مخالف عمر رسیدہ دماغ میں قبضے کی حوصلہ افزائی سے ہونے والے ایکزائٹوٹوکسک سیل کی موت کے خلاف۔ ختم نیورول. 2010، 224، 207–218۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

19. یگانیہ، ایف۔ نیک بخت، ایف۔ بہمن پور، ایس. رستیگر، کے. Namavar، R. NMDA اور گروپ I میٹابوٹروپک گلوٹامیٹ ریسیپٹر مخالف کے نیورو پروٹیکٹو اثرات چوہے کے ہپپوکیمپس میں ہومو سسٹین کے ذریعہ نیوروڈیجنریشن کے خلاف: ویوو اسٹڈی میں۔ جے مول نیوروسکی 2013، 50، 551–557۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

20. Doble، A. نیوروڈیجینریٹیو بیماری میں ایکزائٹوٹوکسیسیٹی کا کردار: تھراپی کے لیے مضمرات۔ فارماکول۔ 1999، 81، 163-221۔ [کراس ریف]

21. Muir، KW گلوٹامیٹ پر مبنی علاج کے نقطہ نظر: NMDA مخالفوں کے ساتھ کلینیکل ٹرائلز.Curr. رائے۔ فارماکول۔ 2006، 6، 53–60۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

22. گونزالیز، جے سی؛ Egea, J.; ڈیل کارمین گوڈینو، ایم؛ فرنانڈیز-گومز، ایف جے؛ Sánchez-Prieto, J.; Gandía, L.; گارسیا، اے جی؛ جارڈن، جے؛ Hernández-Guijo، JM Neuroprotectant minocycline hippocampal neurons میں glutamatergic neurotransmission اور Ca2 پلس سگنلنگ کو افسردہ کرتی ہے۔ یور J. Neurosci. 2007، 26، 2481–2495۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

23. لو، سی ڈبلیو؛ لن، ٹی وائی؛ وانگ، ایس جے میمینٹائن چوہے کے دماغی پرانتستا کے اعصاب کے ٹرمینلز میں وولٹیج پر منحصر Ca2 پلس انٹری اور پروٹین کناز سی کی روک تھام کے ذریعے گلوٹامیٹ کی رہائی کو دباتا ہے: ایک NMDA ریسیپٹر سے آزاد طریقہ کار۔ نیورو کیم۔ انٹر 2010، 57، 168–176۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

24. وانگ، ایس جے؛ سیہرا، ٹی ایس غیر مسابقتی میٹابوٹروپک گلوٹامیٹ 5 ریسیپٹر مخالف (E)-2-میتھائل-6- اسٹائریل-پائریڈائن (SIB1893) چوہے سیریرویبروکارٹیکل ٹرم میں وولٹیج پر منحصر Ca2 پلس انٹری کے ذریعے گلوٹامیٹ کی رہائی کو دباتا ہے۔ جے فارماکول۔ ختم وہاں. 2004، 309، 951–958۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

25. ڈنکلے، PR؛ جاروی، PE؛ ہیتھ، جے ڈبلیو؛ کڈ، جی جے؛ Rostas, JA پرکول گریڈینٹ پر synaptosomes کے الگ تھلگ کرنے کا ایک تیز طریقہ۔ دماغ ریس 1986، 372، 115-129۔ [کراس ریف]

26. اراک، اے. لی، این. ڈویل، RT؛ ہیڈن، PG SNARE پروٹین پر منحصر گلوٹامیٹ ایسٹروسائٹس سے جاری۔ نیوروسکی 2000، 20، 666–673۔ [پب میڈ]

27. ڈنلوپ، جے گلوٹامیٹ پر مبنی علاج کے طریقے: گلوٹامیٹ ٹرانسپورٹ سسٹم کو نشانہ بنانا۔

کرر رائے۔ فارماکول۔ 2006، 6، 103-107۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

28. زوچی، آر. Ronca-Testoni, S. سارکوپلاسمک ریٹیکولم Ca2 پلس چینل/ریانوڈین ریسیپٹر: ماڈیولیشن بذریعہ اینڈوجینس اثر کرنے والے، ادویات اور بیماری کی حالت۔ فارماکول۔ Rev. 1997, 49, 1-51. [پب میڈ]

29. فین، Y.؛ لی، جے؛ ژانگ، YQ؛ جیانگ، ایل ایچ؛ ژانگ، وائی این؛ یان، سی کیو پروٹین کناز سی ڈیلٹا نے پی سی 12 سیلز میں مستقل ایکسٹرا سیلولر سگنل ریگولیٹڈ کناز 1/2 ایکٹیویشن کے ذریعے 6-ہائیڈروکسائیڈوپامین کی ثالثی سائٹوٹوکسیٹی۔ نیورول. Res. 2014، 36، 53–64[کراس ریف] [پب میڈ]

30. Gschwendt, M.; مولر، ایچ جے؛ Kielbassa, K.; Zang, R.; کٹسٹین، ڈبلیو. Rincke, G.; مارکس، ایف روٹلرین، ایک ناول پروٹین کناز روکنے والا۔ بائیو کیم۔ بائیوفیس۔ Res. کمیون 1994، 199، 93-98۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

31. نکولس، ڈی جی؛ سحرا، ٹی ایس؛ Sanchez-Prieto، J. کیلشیم پر منحصر اور گلوٹامیٹ کی آزادانہ رہائی Synaptosomes سے مسلسل فلورومیٹری کے ذریعے نگرانی کی جاتی ہے۔ J. نیورو کیم۔ 1987، 49، 50-57۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

32. نکول، RA دماغ میں آئن چینلز میں نیورو ٹرانسمیٹر ریسیپٹرز کا جوڑا۔ سائنس 1988، 241,545–551۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

33. وو، ایل جی؛ Saggau، P. ایلیسیٹڈ نیورو ٹرانسمیٹر کی رہائی کی پریسینپٹک روکنا۔ رجحانات Neurosci. 1997، 20، 204-212۔ [کراس ریف]

34. ٹرنر، ٹی جے؛ Dunlap, K. Synaptosomal neurosecretion کے ذیلی سیکنڈ بائیو کیمیکل پیمائش کا استعمال کرتے ہوئے presynaptic کیلشیم چینلز کی فارماکولوجیکل خصوصیات۔ نیوروفرماکولوجی 1995، 34، 1469–1478۔ [کراس ریف]

35. میلان، سی.؛ سانچیز-پریٹو، J. چوہے کے دماغی پرانتستا میں گلوٹامیٹ ایکسوسیٹوسس کے لیے N- اور P/Q-قسم کیلشیم چینلز کا فرق۔ نیوروسکی لیٹ 2002، 330، 29-32۔ [کراس ریف]

36. وازکوز، ای. Sanchez-Prieto, J. گلوٹامیٹ کی رہائی کی Presynaptic ماڈیولیشن چوہا دماغی اعصابی ٹرمینلز میں مختلف کیلشیم چینلز کو نشانہ بناتی ہے۔ یور J. Neurosci. 1997، 9، 2009–2018۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

37. طویل، صفحہ؛ مرسر، اے. بیگم، آر۔ سٹیفنز، جی جے؛ سحرا، ٹی ایس؛ Jovanovic، JN اعصابی ٹرمینل GABAA ریسیپٹرز وولٹیج گیٹڈ Ca2 پلس انفلوکس اور گلوٹامیٹ ریلیز کو روکنے کے لیے Ca2 پلس /Calmodulin پر منحصر سگنلنگ کو چالو کرتے ہیں۔ J. Biol کیم 2009، 284، 8726–8737۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

38. ٹرنر، جے آر؛ زاویہ، جے ایم؛ سیاہ، ED؛ جویل، جے ایل؛ بوریاں، ڈی بی؛ مدارا، جے ایل پی کے سی پر منحصر ٹرانسپیٹیلیئل ریزسٹنس کا ضابطہ: ایم ایل سی اور ایم ایل سی کناز کے کردار۔ ایم۔ جے فزیول۔ 1999، 277، C554–C562۔ [پب میڈ]

39. وان، پی ایف؛ واکر، جے ایچ؛ Peers, C. پروٹین کناز C.Mol کے ذریعے نیورو ٹرانسمیٹر کے اخراج کا ضابطہ۔ نیوروبیول۔ 1998، 18، 125–155۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

40. کافی، ای ٹی؛ سحرا، ٹی ایس؛ نکولس، ڈی جی؛ Pocock، JM فاسفوریلیشن آف Synapsin I اور MARCKS اعصابی ٹرمینلز میں Ca2 پلس انٹری کے ذریعے Aga-GI حساس Ca2 پلس چینل کے ذریعے ثالثی کی جاتی ہے جو گلوٹامیٹ exocytosis کے ساتھ جوڑا جاتا ہے۔ FEBS Lett. 1994، 353، 264–268۔ [کراس ریف]

41. اوبرینووچ، ٹی پی؛ Urenjak، J. اعصابی عوارض میں گلوٹامیٹرجک ٹرانسمیشن کو تبدیل کیا گیا: ہائی ایکسٹرا سیلولر گلوٹامیٹ سے لے کر ضرورت سے زیادہ Synaptic افادیت تک۔ پروگرام نیوروبیول۔ 1997، 51، 39-87۔ [کراس ریف]

42. ژانگ، ڈی. لی، ایچ. وانگ، JB Echinacoside HEWL کے amyloid fibrillization کو روکتا ہے اور A-Induced neurotoxicity سے بچاتا ہے۔ انٹر J. Biol میکرومول۔ 2015، 72، 243–253۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

43. لن، ٹی وائی؛ لو، سی ڈبلیو؛ وانگ، سی سی؛ لو، جے ایف؛ وانگ، ایس جے ہسپیڈولن چوہے کے دماغی اعصاب کے ٹرمینلز میں گلوٹامیٹ کے اخراج کو روکتا ہے۔ ٹاکسیکول۔ اپل فارماکول۔ 2012، 263، 233–243۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

44. چانگ، سی وائی؛ لن، ٹی وائی؛ لو، سی ڈبلیو؛ ہوانگ، ایس کے؛ وانگ، وائی سی؛ چو، ایس ایس؛ وانگ، ایس جے ہیسپریڈن گلوٹامیٹ کے اخراج کو روکتا ہے اور چوہوں کے ہپپوکیمپس میں کینیک ایسڈ کے ذریعے پیدا ہونے والے ایکسائٹوٹوکسائٹی کے خلاف نیورو پروٹیکشن کا استعمال کرتا ہے۔ نیوروٹوکسیولوجی 2015، 2015، 157–169۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

45. نکولس، ڈی جی؛ Sihra، TS Synaptosomes گلوٹامیٹ کا ایک exocytotic پول رکھتے ہیں۔ نیچر 1986، 321، 772-773[کراس ریف] [پب میڈ]

46. ​​وانگ، سی سی؛ Kuo, JR; وانگ، SJ Dimebon، ایک اینٹی ہسٹامین دوا، چوہے کے دماغی اعصاب کے ٹرمینلز میں گلوٹامیٹ کے اخراج کو روکتی ہے۔ یور جے فارماکول۔ 2014، 734، 67–76۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

47. Tibbs, GR; بیری، اے پی؛ وین میگھم، ایف جے؛ Mc-Mahon, HT; Nicholls، DG الگ تھلگ اعصابی ٹرمینلز میں دہرائی جانے والی ایکشن پوٹینشلز 4-امینوپائرڈائن کی موجودگی میں: سائٹوسولک فری Ca2 پلس اور گلوٹامیٹ کے اخراج پر اثرات۔ J. نیورو کیم۔ 1989، 53,1693–1699۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

48. Akerman, KE; سکاٹ، LG؛ ہیکیلا، جے ای؛ Heinonen، E. Synaptoneurosomes میں جھلی کی صلاحیت اور گلوٹامیٹ ریسیپٹر سے منسلک ردعمل کا Ionic انحصار جیسا کہ سائینائن ڈائی، DiSC2(5) J. نیورو کیم۔ 1987، 48، 552–559۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

49. سحرا، ٹی ایس؛ بوگونیز، ای. نکولس، ڈی جی لوکلائزڈ Ca2 پلس انٹری ترجیحی طور پر پروٹین ڈیفاسفوریلیشن، فاسفوریلیشن، اور گلوٹامیٹ کی رہائی کو متاثر کرتی ہے۔ J. Biol کیم 1992، 267، 1983–1989۔ [پب میڈ]

50. Grynkiewicz, G.; پوینی، ایم؛ Tsien, RY بہت بہتر فلوروسینس خصوصیات کے ساتھ Ca2 پلس اشارے کی ایک نئی نسل۔ J. Biol کیم 1985، 260، 3440–3450۔ [پب میڈ]