PRAT 2 Cistanches Deserticola PhG-RE inhibiting ERS Apoptosis میکانزم کے ذریعے Myocardial Cell Apoptosis کو H2O2- حوصلہ افزائی اینڈوپلاسمک ریٹیکولم تناؤ سے بچانے کے لیے

حصہ 1 کے لیے یہاں کلک کریں۔

مزید معلومات کے لیے رابطہ کریں:Joanna.jia@wecistanche.com

Cistanchedeserticola کے بہت سے اثرات ہیں، مزید جاننے کے لیے یہاں کلک کریں۔

4. بحث

دل کی بیماریاں، جیسے I/R چوٹ، آکسیڈیٹیو تناؤ، کیلشیم اوورلوڈ، اور آکسیجن فری ریڈیکلز کی تشکیل کے ذریعے ERS کو آمادہ کر سکتی ہے۔ ان حالات میں، ER پروٹین کو صحیح طریقے سے فولڈ کرنے اور پروسیس کرنے میں ناکام ہو جاتا ہے، جس کے نتیجے میں اینڈوپلاسمک ریٹیکولم میں غلط فولڈ یا کھولے ہوئے پروٹین جمع ہو جاتے ہیں، جو پھر کھولے ہوئے

پروٹین رسپانس (UPR) یو پی آر ایک سیلولر تناؤ کا ردعمل ہے جو ابتدائی طور پر روکتا ہے۔apoptosis، لیکن آخر کار اسے مناتا ہے۔

مطالعات نے اس بات کی تصدیق کی ہے کہ ERS جزوی طور پر اس بات کا ذمہ دار ہے کہ اسکیمیا اور اینوکسیا دل کی بیماری کو کیوں بڑھا سکتے ہیں [6، 7]۔ apoptotic عوامل، GRP78، Caspase 12، CHOP، اور JNK، بیماری کی موجودگی میں اہم شرکاء ہیں [8-11]۔ اس مطالعہ میں، ہم نے H9c2 سیل میں PhG-RE کے مخالف اور متعلقہ میکانزم پر تحقیق کی۔apoptosisH2O2- حوصلہ افزائی ERS کا۔ 100 μmol mL−1 H2O2 کو بطور انڈیسر استعمال کرتے ہوئے، H9c2 خلیات میں ایک ERS ماڈل قائم کیا گیا تھا۔ ماڈل کی درستگی اور درستگی کو یقینی بنانے کے لیے، مخصوص اینڈوپلاسمک ریٹیکولم اسٹریس ایکٹیویٹر تھاپسیگارگین (TG) کا استعمال اس بات کا تعین کرنے کے لیے کیا گیا تھا کہ آیا PhG-RE خلیات کو ERS-حوصلہ افزائی سے بچاتا ہے۔apoptosis. ERS inhibitor 4-PBA کا استعمال اس بات کا تعین کرنے کے لیے بھی کیا گیا تھا کہ آیا PhG-RE مؤثر طریقے سے مقابلہ کرنے میں 4-PBA جیسا اثر پیدا کرتا ہے۔apoptosisH2O2-حوصلہ افزائی ERS کی وجہ سے۔

Cistancheسیل کو روک سکتا ہے۔apoptosis

اس مطالعہ میں، دونوں H2O2 اور ERS ایکٹیویٹر TG نے سیل کا سبب بناapoptosisخلیوں میں ERS کی ثالثی کے ذریعے۔ LDH، جو کہ cytoplasm میں موجود ایک مستحکم انزائم ہے، خلیے کے پھٹنے سے خلیے سے نکل جاتا ہے۔ لہذا، درمیانے درجے میں LDH رساو کی پیمائش کرکے سیلولر نقصان کا تعین کیا جا سکتا ہے۔ سیل کی قابل عملیت اور LDH کا رساو H9c2 خلیوں کو پہنچنے والے نقصان کی سطح کی نمائندگی کرتا ہے اور اسے خلیات پر PhG-RE پری ٹریٹمنٹ کے حفاظتی اثر کا جائزہ لینے کے لیے استعمال کیا جا سکتا ہے۔ PhG-RE کی نمائش نے TG اور H2O2 کے ذریعہ سیل اپوپٹوسس کو مؤثر طریقے سے کم کیا، بقا کو بڑھایا، اور LDH کی رہائی کو کم کیا۔ اس تلاش سے پتہ چلتا ہے کہ PhG-RE خلیات کی حفاظت میں 4-PBA کی طرح کا کردار ادا کرتا ہے۔ یہ نتیجہ اس بات کی نشاندہی کرتا ہے کہ PhG-RE خلیوں کی حفاظت کر سکتا ہے ERS سے متاثرہ چوٹ اورapoptosis.

عام خلیات میں جو دباؤ میں نہیں ہوتے ہیں، GRP78، جو ERS سے وابستہ ہے، سیل کی سطح پر متعدد ER ٹرانس میمبرین پروٹینز کے ساتھ جڑا ہوا ہے اور ایک غیر فعال اور مستحکم حالت میں ہے۔ جب ERS پہلی بار ہوتا ہے تو، کھولے ہوئے پروٹین UPR کو آمادہ کرتے ہیں، جو GRP78 سے ٹرانس میبرن پروٹین کی علیحدگی کو فروغ دیتا ہے۔ علیحدگی کے بعد، GRP78 ایک بڑھے ہوئے پروٹین ایکسپریشن [12–14] کے ذریعے ERS کا مقابلہ کرنے کے لیے کھولے ہوئے یا غلط فولڈ پروٹین کے ساتھ جڑا ہوا ہے۔ جیسے جیسے ERS ترقی کرتا ہے، اینڈوپلاسمک ریٹیکولم کا کام شدید طور پر خراب ہو جاتا ہے،

اس کے علاوہ، UPR کے پرو اپوپٹوٹک اثرات کی وجہ سے، pro-caspase-12 جاری کیا جاتا ہے، اورapoptosisشروع کیا جاتا ہے. دوبارہ لیز کردہ پرو-کیسپیس-12 کو اس کی فعال شکل، کیسپیس-12 میں تقسیم کیا گیا ہے۔ ERS کے اپوپٹوسس شروع کرنے کی ایک اہم وجہ یہ ہے کہ Caspase-12 ERS [17] کے ذریعے فعال ہوتا ہے۔ JNK، ایک اور عنصر جو آمادہ کرتا ہے۔apoptosis، کو IRE-1- TRAF2-ASK1 کمپلیکس کے ذریعے چالو کیا جاتا ہے، جو apoptosis کے دوران پیدا ہوتا ہے۔ ڈاؤن اسٹریم کیسپیس فیملی، جو اپوپٹوٹک کے حامی کردار ادا کرتی ہے، بھی فعال ہے۔

جین اور پروٹین کا پتہ لگانے والی ٹیکنالوجی پر روشنی ڈالتے ہوئے، اس مطالعہ نے اس طریقہ کار کا جائزہ لیا جس کے ذریعے PhG-RE مایوکارڈیل خلیوں کی حفاظت کرتا ہے۔ جب ER تناؤ ہوتا ہے تو، ٹرانسکرپشن فیکٹر CHOP Cyt C اور کی رہائی کا سبب بن سکتا ہے۔apoptosis- دلانے والے عوامل (AIFs)، جس کے نتیجے میں سیلولر اپوپٹوسس [18-20] ہوتا ہے۔ مزید برآں، انتہائی محفوظ شدہ ER جھلی پروٹین IRE1 کو فاسفوریلیٹ کیا جا سکتا ہے اور TRAF2- کے ذریعے متبادل راستے کو چالو کر کے سیل اپوپٹوسس کو آمادہ کر سکتا ہے۔apoptosisسگنل ریگولیٹنگ کناز 1 (ASK1) ثالثی سگنل کی نقل و حمل [21]۔ PhG-RE کے ساتھ پہلے سے علاج نے H2O2-حوصلہ افزائی خلیوں میں ER تناؤ کے دوران GRP78، CHOP، اور Caspase-12 کے mRNA اظہار کو کم کر دیا، ساتھ ہی GRP78، JNK کے TG-حوصلہ افزائی mRNA اظہار کو کم کر دیا۔ اور کیسپیس-12۔ PhG-RE پری ٹریٹمنٹ کا H2O2- پر ایک مخالف اثر پڑا اور GRP78، CHOP، p-JNK، اور Caspase-12 پروٹین ایکسپریشن لیول میں TG کی حوصلہ افزائی میں اضافہ ہوا۔ ان نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ PhG-RE، ERS inhibitor 4-PBA کی طرح کا کردار ادا کرتا ہے جو مایوکارڈیل خلیات کی حفاظت کرتا ہے اور ERS-حوصلہ افزائی apoptosis سے وابستہ عوامل کے mRNA اور پروٹین اظہار کو کم کر کے ERS-حوصلہ افزائی apoptosis کا مقابلہ کرتا ہے۔ اگرچہ JNK پروٹین میں کوئی خاص تبدیلی نہیں آئی، لیکن یہ تلاش اس لٹریچر سے مطابقت رکھتی ہے کہ JNK اپنے فعال ہونے کے ذریعے کام کرتا ہے۔

فارم، p-JNK. شکل 7 کا خاکہ دکھاتا ہے۔سگنلنگراستہ، جو واضح طور پر وضاحت کر سکتا ہے کہ پی ایچ جی-آر ای آر ایس کی حوصلہ افزائی کے خلاف مایوکارڈیل خلیوں کی حفاظت کے لیے کس طرح کام کرتا ہے۔apoptosis.

Cistancheمزاحمت کر سکتے ہیںآکسیکرناور روکناسیلapoptosis

5. نتائج

مایوکارڈیل اسکیمیا ریپرفیوژن انجری بڑھی ہوئی مایوکارڈیل چوٹ کی بنیادی وجہ ہے۔ ایک اور عنصر کے طور پر جو مایوکارڈیل بیماری کو متاثر کرتا ہے، ERS تحقیق کا ایک نیا مرکز رہا ہے جس کا مقصد مایوکارڈیل بیماری کے علاج کے اثرات اور افادیت کو بہتر بنانا ہے۔ اس مطالعے نے مایوکارڈیل خلیوں کی حفاظت میں PhG-RE کے کردار کو مزید دریافت کیا اور یہ ظاہر کیا کہ PhG-RE-ثالثی مایوکارڈیل تحفظ ERS-حوصلہ افزائی apoptosis کے ضابطے سے مضبوطی سے متعلق تھا۔ تاہم، چونکہ مایوکارڈیل بیماری متعدد عوامل کی وجہ سے ہوتی ہے، اس لیے PhG-RE کے اثرات پر مزید مطالعات کرنے کی ضرورت ہوگی۔

Cistancheمزاحمت کر سکتے ہیںآکسیکرناور روکناسیلapoptosis

ڈیٹا کی دستیابی

اس مطالعہ کے نتائج کی حمایت کرنے کے لیے استعمال ہونے والا ڈیٹا متعلقہ مصنف کی درخواست پر دستیاب ہے۔

مفادات میں تضاد

مصنفین اعلان کرتے ہیں کہ ان کی دلچسپی کا کوئی تنازعہ نہیں ہے۔

اعترافات

اس کام کو جیلن صوبائی تکنیکی ترقی کے پروگرام (گرانٹ نمبر: 20160101032JC) کے ذریعے تعاون حاصل تھا۔

حوالہ جات

[1] Q. Yu, X. Li, اور X. Cao، "فینی لیتھانائڈ گلائکوسائیڈ سے بھرپور عرق کے قلبی حفاظتی اثراتcistancheچوہوں میں ischemia-reperfusion-induced myocardial infarction میں deserticola،" اینالز آف ویسکولر سرجری، والیم 34، صفحہ 234–242، 2016۔

[2] X. Wang, L. Ni, L. Yang et al., "CYP2J2-ماخوذ epoxyeicosatrienoic ایسڈ دل کی ناکامی میں اینڈوپلاسمک ریٹیکولم تناؤ کو دباتے ہیں،" مالیکیولر فارماکولوجی، والیوم۔ 85، نمبر 1، صفحہ 105-115، 2014۔

[3] J. Guo, Y. Bian, R. Bai, H. Li, M. Fu, اور C. Xiao، "گلوبولر اڈیپونیکٹین اینڈوپلاسمک ریٹیکولم Ca2 پلس -ATPase سرگرمی کو اپ گریڈ کرکے مایوکارڈیل اسکیمیا/ریپرفیوژن کی چوٹ کو کم کرتا ہے اور روکتا ہے۔ اینڈوپلاسمک ریٹیکولم اسٹریس،" جرنل آف کارڈیو ویسکولر فارماکولوجی، جلد۔ 62، نمبر 2، صفحہ 143–153، 2013۔

[4] G.-l. زاؤ، L.-m. یو، ڈبلیو ایل گاو وغیرہ، "بربرین JAK2/ STAT3 سگنلنگ کو چالو کرنے اور اینڈوپلاسمک ریٹیکولم تناؤ کو کم کرنے کے ذریعے چوہے کے دل کو اسکیمیا/ریپرفیوژن انجری سے بچاتا ہے،" ایکٹا فارماکولوجیکا سینیکا، جلد۔ 37، نمبر 3، صفحہ 354–367، 2016۔

[5] T. Luo, JK Kim, B. Chen, A. Abdel-Latif, M. Kitakaze, and L. Yan, "ER تناؤ کی توجہ infarction کے بعد دل کی ٹوٹ پھوٹ اور کارڈیک اپوپٹوس اور دونوں کو ماڈیول کرکے دوبارہ تشکیل دینے سے روکتی ہے۔ فبروسس، "کیمیکو-بیولوجیکل تعاملات، والیوم۔ 225، صفحہ 90-98، 2015۔

[6] J. Groenendyk, LB Agellon, and M. Michalak, "Coping with endoplasmic reticulum stress in cardiovascular system," Annual Review of Physiology, vol. 75، نمبر 1، صفحہ 49–67، 2013۔

[7] ایم بوائس اور جے یوآن، "اینڈوپلاسمک ریٹیکولم تناؤ کا سیلولر ردعمل: زندگی یا موت کا معاملہ،" سیل کی موت اور تفریق، جلد۔ 13، نمبر 3، صفحہ 363–373، 2006۔

[8] E. Szegezdi, U. Fitzgerald, and A. Samali, "Caspase-12 and ER- stress-mediated apoptosis," Anals of the New York Academy of Sciences, vol. 1010، نمبر 1، صفحہ 186–194، 2003۔

[9] L.-H. ژانگ اور ایکس ژانگ، "فزیالوجی اور کینسر میں GRP78 کے کردار،" جرنل آف سیلولر بائیو کیمسٹری، والیم۔ 110، نمبر 6، صفحہ 1299–1305، 2010۔

[10] وائی یانگ، ایل لیو، آئی نائک، وغیرہ، "صحت اور بیماریوں میں ٹرانسکرپشن فیکٹر C/EBP ہومولوگس پروٹین،" فرنٹیئرز ان امیونولوجی، والیم۔ 8، ص۔ 1612، 2017۔

[11] این جے ڈارلنگ اور ایس جے کک، "اینڈوپلاسمک ریٹیکولم اسٹریس کے ردعمل میں MAPK سگنلنگ پاتھ ویز کا کردار،" Biochimica et Biophysica Acta (BBA) — مالیکیولر سیل ریسرچ، والیوم۔ 1843، نمبر 10، صفحہ 2150–2163، 2014۔

[12] AM Gorman، SJM Healy، R. Ja¨ger، اور A. Samali، "ER میں تناؤ کا انتظام: ER کے تناؤ سے متاثرہ اپوپٹوسس کے ریگولیٹرز،" فارماکولوجی اینڈ تھیراپیوٹکس، والیم۔ 134، نمبر 3، صفحہ 306–316، 2012۔

[13] SG de la Cadena, K. Hernandez-Fonseca, I. Camacho-Ar-Royo، اور L. Massieu، "گلوکوز کی کمی PERK پاتھ وے اور کیسپیس-7- اور کیلپین کی ثالثی کیسپیس کے ذریعے ریٹیکولم تناؤ کو جنم دیتی ہے۔ {6}} ایکٹیویشن، Apoptosis، جلد۔ 19، نمبر 3، صفحہ 414–427، 2014۔

[14] W. Chengji اور F. Xianjin، "ورزش چوہوں میں اینڈوپلاسمک ریٹیکولم اسٹریس پاتھ وے کی روک تھام کے ذریعے ذیابیطس کارڈیو مایوپیتھی کے خلاف حفاظت کرتی ہے،" جرنل آف سیلولر فزیالوجی، جلد۔ 234، نمبر 2، صفحہ 1682–1688، 2019۔

[15] XZ Wang, B. Lawson, JW Brewer, et al.، "زبردستی اینڈوپلاسمک ریٹیکولم سے سگنلز C/EBP-homologous پروٹین (CHOP/GADD153) کو آمادہ کرتے ہیں،" مالیکیولر اینڈ سیلولر بائیولوجی، والیوم۔ 16، نمبر 8، صفحہ 4273–4280، 1996۔

[16] T.-H. Lu, T.-J. تسینگ، C.-C. Su et al.، "آرسینک JNK کے ذریعے رد عمل آکسیجن پرجاتیوں کی وجہ سے نیورونل سیل اپوپٹوس کو اکساتا ہے۔

ERK-ثالثی مائٹوکونڈریا پر منحصر اور GRP 78/CHOP- ریگولیٹڈ پاتھ ویز،" ٹوکسیکولوجی لیٹرز، والیم 224، نمبر 1، صفحہ 130–140، 2014۔

[17] X. Chen, XS Fu, CP Lin, and HX Zhao, "ER stress and ER stress-induced apoptosis ذیابیطس کے چوہوں میں گیسٹرک SMCs میں چالو ہوتے ہیں،" ورلڈ جرنل آف گیسٹرو اینٹرولوجی، والیوم۔ 20، نہیں 25، صفحہ 8260–8267، 2014۔

[18] R. Iurlaro اور C. Muñoz-Pinedo، "Endoplasmic reticulum stress کی وجہ سے سیل کی موت،" Re FEBS Journal, vol. 283، نمبر 14، صفحہ 2640–2652، 2016۔

[19] H. Tsukino، T. Gotoh، M. Endo، et al.، "میکروفیجز میں اینڈوپلاسمک ریٹیکولم اسٹریس-C/EBP ہومولوگس پروٹین پاتھ وے میڈیٹڈ اپوپٹوس ایتھروسکلروٹک تختیوں کے عدم استحکام میں معاون ہے،" آرٹیروسکلروسیس، تھرومبوسس، اور عروقی حیاتیات، جلد۔ 30، نمبر 10، صفحہ 1925–1932، 2010۔

[20] S. Tuzlak, T. Kaufmann, and A. Villunger, "Introgating the relevance of mitochondrial apoptosis for vertebrate development and postnatal tissue homeostasis," Genes & Development, vol. 30، نمبر 19، صفحہ 2133–2151، 2016۔

[21] RP Junjappa، P. پاٹل، KR Bhattarai، HR Kim، اور HJ Chae، "IRE1 مضمرات ان اینڈوپلاسمک ریٹیکولم اسٹریس میڈیٹیڈ ڈیولپمنٹ اینڈ روگجنن آف آٹو امیون ڈیزیز،" فرنٹیئرز ان امیونولوجی، جلد۔ 9، ص۔ 1289، 2018۔