تیز رفتار کاؤنٹر کرنٹ کرومیٹوگرافی کے ذریعے Cistanches Deserticola YC Ma سے چار مرکبات کی تیاری کا الگ تھلگ اور صاف کرنا

رابطہ: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 ای میل:audrey.hu@wecistanche.com

خلاصہ:

سلیکا جیل کالم پر جزوی افزودگی کے قدم کے بعد، چارphenylethanoid glycosidesسے کامیابی سے الگ تھلگ کیا گیا تھا۔Cistanches deserticolaاور تیاری تیز رفتار کاؤنٹر کرنٹ کرومیٹوگرافی (HSCCC) کے ذریعے دو فیز سالوینٹ سسٹم کے ساتھ صاف کیا جاتا ہے جس میں ethyl acetate-n-butanol-ethanol-water (40:6:6:50, v/v) پر مشتمل ہوتا ہے۔ /v/v)۔ مجموعی طور پر 30.9 ملی گرام ایکٹیوسائیڈ، 13.0 ملی گرام آئسو ایکٹیوسائیڈ، 12.5 ملی گرام سیرنگلائڈ A 3'- -L-rhamnopyranoside، اور 7.2 mg 2'-acetylacteoside 95 فیصد سے زیادہ کی پاکیزگی کے ساتھ، جیسا کہ HPLC، HPLC کے ذریعے طے کیا گیا تھا۔ 297 ملی گرام سے ایک قدم علیحدگی میں حاصل کیا گیا۔Cistanche deserticola اقتباسبالترتیب ان کے ڈھانچے کی شناخت HR-MS، 1H-NMR، اور 13C-NMR سے ہوئی۔

مطلوبہ الفاظ: تیز رفتار کاؤنٹر کرنٹ کرومیٹوگرافی؛Cistanches deserticola YC Ma;phenylethanoid glycosides؛ ایکٹیوسائیڈ isoacteoside؛ سیرنگلائڈ A 3'- -L-rhamnopyranoside؛ 2'-acetylacteoside.

تعارف

Cistanches deserticolaYC Ma، کی ایک قسمسیستانچسجس کا تعلق Orobanchaceafamily سے ہے، گردوں کی کمی، خواتین کی بانجھ پن، مربیڈ لیکوریا، نیوراپراکسیا، اور بوڑھے قبض کے علاج کے لیے ایک مشہور روایتی چینی دوا ہے [1]۔ یہ ایک پرجیوی پودا ہے جو چین کے شمال مغرب میں وسیع پیمانے پر تقسیم کیا جاتا ہے۔ اب تک، کئی مرکبات، بشمول phenylethanoid glycosides (PhGs)، iridoids، اور lignans کو اس نوع سے الگ تھلگ کر دیا گیا ہے [2]۔ کچھ پی ایچ جی کے بارے میں بتایا گیا ہے کہ وہ اینٹی آکسیڈیٹیو، ہیپاٹو پروٹیکٹو، اور نیورو پروٹیکٹو سرگرمیاں [3–6] رکھتے ہیں۔ تاہم، پی ایچ جی کو الگ تھلگ کرنے اور صاف کرنے کا طریقہ کار مشکل اور وقت طلب ہے۔ مزید برآں، کلاسیکی متعدد کرومیٹوگرافک طریقے نہ صرف بڑی تعداد میں نامیاتی سالوینٹس کا استعمال کرتے ہیں بلکہ نمونہ کی بحالی بھی کم کرتے ہیں۔ ہائی اسپیڈ کاؤنٹر کرنٹ کرومیٹوگرافی (HSCCC)، ایک سپورٹ فری لیکوئڈ پارٹیشن کرومیٹوگرافک تکنیک، کچھ روایتی طریقوں کے مقابلے میں بہترین نمونے کی وصولی کی پیشکش کرتی ہے اور مختلف قدرتی مصنوعات کی علیحدگی اور صاف کرنے کے لیے وسیع پیمانے پر استعمال ہوتی رہی ہے [7-9] . اگرچہ کئی PhGs سے پاک ہو چکے ہیں۔سیستانچسHSCCC [10-14] کے ذریعہ جینس اور دیگر، کسی بھی کاغذ نے ایک بائفاسک نظام میں ایکٹیوسائڈ، آئسو ایکٹیوسائڈ، سیرنگلائڈ A 3'- -L-rhamnopyranoside اور 2'-acetylacteoside کو صاف کرنے کی اطلاع نہیں دی ہے۔

اس مقالے میں، ہم C. deserticola سے چار PhGs کو الگ کرنے اور صاف کرنے کے لیے ایک آسان طریقہ کی اطلاع دیتے ہیں۔ آخر میں، ایک قدم میں 30.9 ملی گرام ایکٹیوسائیڈ، 13.0 ملی گرام آئسو ایکٹیوسائیڈ، 12.5 ملی گرام سیرنگلائڈ A 3'- -L-rhamnopyranoside، اور 7.2 mg 2'-acetylacteoside حاصل کیے گئے۔ بالترتیب 99 فیصد، 95 فیصد، 99 فیصد، اور 98 فیصد کی پاکیزگی کے ساتھ 297 ملی گرام فریکشن سے علیحدگی۔ ان کے ڈھانچے کی خصوصیات 1H- اور 13C-NMR سپیکٹرل ڈیٹا اور HR-MS سپیکٹرا پر مبنی تھیں۔ اس تحقیقات میں شناخت شدہ چار PhGs کے ڈھانچے کو شکل 1 میں دکھایا گیا ہے۔

نتائج اور مباحثہ

خام نکالنے کا HPLC تجزیہ

C. deserticola سے n-butanoic اقتباس کے اجزاء افزودہ حصہ کا تجزیہ HPLC-UV نے کیا تھا۔ کالم استعمال کیا گیا ایک Acurasil C18 (250 mm × 4.6 mm, id 5 μm) (تھرمو فشر سائنسی آلات، شہر، ریاست کا خلاصہ، USA)، موبائل مرحلہ میتھانول-واٹر تھا (30:70، v/v)۔ بہاؤ کی شرح 1 ملی لیٹر/منٹ تھی۔ ڈیٹیکٹر طول موج 254 nm پر سیٹ کی گئی تھی۔ HPLC کرومیٹوگرام کو شکل 2 میں دکھایا گیا ہے۔ چوٹیاں 1 سے 4 ایکٹیوسائیڈ (1)، آئسویکٹیو سائیڈ (2)، سیرنگلائڈ A 3'- -L-rhamnopyranoside (3)، اور 2'-acetylacteoside (4) سے ملتی ہیں۔ بالترتیب

دو فیز سالوینٹ سسٹم کا انتخاب

HSCCC کے ذریعہ کامیاب علیحدگی کا زیادہ تر انحصار ایک مناسب دو فیز سالوینٹ سسٹم کے انتخاب پر ہوتا ہے، دو فیز سالوینٹ سسٹم کا انتخاب ہر ہدف والے جزو کی پارٹیشن کوفیشینٹ ویلیوز (K) کے مطابق کیا گیا تھا اور K کی زیادہ سے زیادہ رینج {{ سے ہونی چاہیے۔ 2}}.5 سے 2۔

تجربے میں، کئی دو فیز سالوینٹ سسٹمز کے ہدف کے اجزاء کے لیے K کی قدریں ٹیبل 1 میں دکھائی گئی ہیں (اگرچہ چوٹی 4 کے لیے تھوڑا زیادہ، نتائج کو قابل قبول دکھایا گیا)۔ ان میں سے، ethyl acetate–n-butanol–ethanol-water (40:6:6:50, v/v/v/v) نے ہدف کے مرکبات کے لیے مناسب تقسیم کے گتانک دیے۔ بالآخر، ethyl acetate–n-butanol– ethanol-water (40:6:6:50, v/v/v/v) پر مشتمل سالوینٹ سسٹم C. deserticola کے چار مرکبات کو الگ تھلگ اور پاک کرنے کے لیے استعمال کیا گیا، جیسا کہ اس میں دکھایا گیا ہے۔ شکل 3. جیسا کہ شکل 2 میں دکھایا گیا ہے، ہر HSCCC فریکشن کے HPLC تجزیہ سے یہ بات سامنے آئی ہے کہ چار خالص PhGs (ایکٹیوسائیڈ، 99 فیصد؛ isoacteoside، 95 فیصد؛ سیرنگلائڈ A 3′- -L-rhamnopyranoside 99 فیصد اور 2′ acetylacteoside 98 فیصد) خام حصہ سے حاصل کیا جا سکتا ہے۔

تجرباتی

اپریٹس

موجودہ مطالعہ میں استعمال کیا گیا HSCCC کا سامان ایک TBE-300B تیز رفتار کاؤنٹر کرنٹ کرومیٹوگرافی سسٹم (شنگھائی ٹاٹو بائیوٹیک کمپنی، شنگھائی، چین) تھا جس میں تین تیاری کے ملٹی لیئر کوائل علیحدگی کے کالم سیریز میں جڑے ہوئے تھے (ٹیوب کا قطر=2.6 ملی میٹر، کل حجم=300 ایم ایل) اور 20 ملی لیٹر نمونہ لوپ۔ انقلاب کا رداس یا ہولڈر محور اور مرکزی کے درمیان فاصلہسینٹری فیوج کا محور (سینٹری فیوج (R) کا محور 5 سینٹی میٹر تھا، اور قدر اندرونی ٹرمینل پر 0.5 سے 0.8 بیرونی ٹرمینل پر مختلف تھی (=r/R، جہاں r کنڈلی سے ہولڈر شافٹ تک کا فاصلہ ہے)۔ تجربے میں درجہ حرارت کو کنٹرول کرنے کے لیے ایک HX 105 مستقل درجہ حرارت کی گردش کا عمل (بیجنگ چانگلیو لیب انسٹرومنٹ کمپنی، بیجنگ، چین) استعمال کیا گیا تھا۔ HSCCC سسٹم ایک ماڈل TBP-5002 درمیانی دباؤ کے مستقل بہاؤ پمپ سے لیس تھا، ایک ماڈل TBP-2000 UV ڈیٹیکٹر جو 254 nm پر کام کرتا ہے، اور ایک ماڈل V4.0 ورک سٹیشن (Jinda Biochemistry Instrument Company, شنگھائی، چین)۔

اعلی کارکردگی والے مائع کرومیٹوگرافی (HPLC) کا سامان استعمال کیا گیا ایک Agilent 1200 سسٹم تھا جس میں ایک G1312A بائنری پمپ، ایک G1329A آٹو سیمپلر، ایک G1314A متغیر طول موج کا پتہ لگانے والا (VWD)، ایک G1316A تھرموسٹیٹڈ کالم، ڈی بی ایل سی 9، ڈی بی 3 گیس، ڈی ایل سی 3، 1329 اے آٹو سیمپلر شامل تھا۔ ورک سٹیشن ایک Alltech 3300 ELSD کو پاکیزگی کا پتہ لگانے کے لیے استعمال کیا گیا تھا۔ Agilent 6520 Q-TOF اور Bruker AVANCE III 500-NMR سپیکٹرو میٹر مرکبات کی ساختی شناخت کے لیے استعمال کیے گئے۔ 1H اور 13C-NMR سپیکٹرا (بالترتیب 500 اور 125 MHz پر) کمرے کے درجہ حرارت (22 ڈگری / 295.1 K) پر ماپا گیا۔

ریجنٹس اور مواد

ایتھل ایسیٹیٹ، این-بوٹانول، اور ایتھنول تجزیاتی گریڈ تھے اور میتھانول HPLC گریڈ تھا۔ تمام سالوینٹس تیانجن کنکورڈ ٹیکنالوجی کمپنی (تیانجن، چین) سے خریدے گئے تھے۔ ملی کیو واٹر (18.2 MΩ) (ملی پور، بیڈفورڈ، ایم اے، یو ایس اے) تمام حل اور کم کرنے کے لیے استعمال کیا جاتا تھا۔ C. deserticola کا rhizome جون 2009 میں عوامی جمہوریہ چین کے اندرونی منگولیا صوبے سے جمع کیا گیا تھا۔ پودے کی شناخت پروفیسر لیجوان ژانگ نے کی تھی، اور ایک واؤچر کا نمونہ (نمبر 20091001) ہماری لیبارٹری میں جمع کرایا گیا تھا۔

خام نمونے کی تیاری

C. deserticola (1 کلوگرام) کے پاؤڈر ہوا میں خشک مانسل تنوں کو ہر بار 2 گھنٹے کے لیے پانی کے ایتھنول (8 L، 60 فیصد v/v) کے ساتھ دو بار ریفلکس کیا گیا۔ نچوڑ کم دباؤ کے تحت اور 60 ڈگری کے درجہ حرارت پر ایتھنول کے مکمل بخارات بننے تک بخارات بن گیا تھا۔ باقیات کو پانی میں لٹکا دیا گیا اور کلوروفارم، ایتھائل ایسیٹیٹ، اور این-بوٹانول کے ساتھ لگاتار تین بار نکالا گیا، کم دباؤ میں بخارات میں خشک ہونے کے بعد 5.16 جی این-بیوٹانوک ایکسٹریکٹ فراہم کرتا ہے۔ اس کے بعد n-butanoic اقتباس کو سیلیکا جیل کالم (200–300 میش) پر ترقی پسند تدریجی اخراج (CHCl3–MeOH، 10:1 → 1:1) کا استعمال کرتے ہوئے آٹھ حصے دینے کے لیے الگ کیا گیا۔ فریکشن 6 (297 ملی گرام) مزید HSCCC تنہائی اور علیحدگی کے لئے استعمال کیا گیا تھا۔

دو فیز سالوینٹ سسٹمز کا انتخاب

دو فیز سالوینٹ سسٹمز کا انتخاب C. deserticola کے حصّے میں ہدف والے اجزاء کی تقسیم کے گتانک (K) کے مطابق کیا گیا تھا۔ K قدروں کا تعین LC تجزیہ کے ذریعے کیا گیا: مناسب مقدار میں خام نکالنے والے پاؤڈر (فرکشن 6) کو سالوینٹ سسٹم کے نچلے مرحلے میں تحلیل کیا گیا اور HPLC کے ذریعے تجزیہ کیا گیا۔ چوٹیوں کے علاقوں کو A1 کے طور پر ریکارڈ کیا گیا تھا۔ پھر حل میں اوپری مرحلے کا ایک مساوی حجم شامل کیا گیا اور تقسیم کے توازن تک پہنچنے کے لیے اچھی طرح ملایا گیا۔ اس کے بعد HPLC کے ذریعہ نچلے مرحلے کا دوبارہ تجزیہ کیا گیا۔ بعد کے چوٹی والے علاقوں کو A2 کے طور پر ریکارڈ کیا گیا۔ K- قدروں کا حساب درج ذیل مساوات کے مطابق کیا گیا: K=(A1 − A2)/A2 [15,16]۔

دو فیز سالوینٹ سسٹم اور سیمپل سلوشن کی تیاری

موجودہ مطالعہ میں، دو فیز سالوینٹ سسٹم جو ایتھائل ایسیٹیٹ – این-بوٹانول- ایتھنول-واٹر (40:6:6:50، v/v/v/v) پر مشتمل ہے HSCCC علیحدگی کے لیے استعمال کیا گیا تھا۔ ہر سالوینٹس کو الگ کرنے والے فنل میں شامل کیا گیا تھا اور کمرے کے درجہ حرارت پر اچھی طرح سے متوازن کیا گیا تھا۔ اوپری فیز اور نچلے فیز کو استعمال سے کچھ دیر پہلے 30 منٹ کے لیے سونیکیشن کے ذریعے الگ کیا گیا تھا۔ نمونہ کا حل 297 ملی گرام فریکشن 6 کے 15 ملی لیٹر میں ethyl acetate–n-butanol–ethanol-water (40:6:6:50, v/v/v/v) کے نچلے مرحلے میں تحلیل کرکے تیار کیا گیا تھا۔

HSCCC علیحدگی کا طریقہ کار

HSCCC مندرجہ ذیل طور پر انجام دیا گیا تھا۔ ملٹی لیئر کوائلڈ کالم سب سے پہلے اوپری نامیاتی اسٹیشنری مرحلے سے بھرا ہوا تھا۔ اس کے بعد نچلے پانی والے موبائل مرحلے کو 1.5 ملی لیٹر/منٹ کی بہاؤ کی شرح سے کالم کے سر کے آخر میں پمپ کیا گیا، اور اسی وقت، HSCCC اپریٹس کو 900 rpm کی انقلابی رفتار سے چلایا گیا۔ ہائیڈروڈینامک توازن قائم ہونے کے بعد، جیسا کہ ٹیل آؤٹ لیٹ پر ایک واضح موبائل فیز ایلوٹنگ سے ظاہر ہوتا ہے (تقریباً دو گھنٹے بعد)، ایک 15 ملی لیٹر نمونہ حل جس میں 297 ملی گرام خام عرق (فرکشن 6) ہوتا ہے انجکشن والو کے ذریعے انجکشن لگایا گیا تھا۔ کالم کے اخراج کی مسلسل 254 nm سے نگرانی کی گئی۔ کرومیٹوگرام کے مطابق چار چوٹی کے حصے جمع کیے گئے اور پھر کم دباؤ میں بخارات بن گئے۔ اپریٹس کا درجہ حرارت 25 ڈگری پر سیٹ کیا گیا تھا۔

HPLC تجزیہ اور HSCCC چوٹی کے حصوں کی شناخت

HSCCC کے چوٹی کے حصوں کا HPLC-ELSD کے ذریعہ تجزیہ کیا گیا۔ استعمال شدہ کالم ایک Acurasil C18 (250 mm × 4.6 mm، id 5 μm) تھا، موبائل فیز میتھانول واٹر (30:70، v/v) تھا۔ بہاؤ کی شرح 1 ملی لیٹر/منٹ تھی۔ ELSD کو درج ذیل شرائط کے تحت چلایا گیا: درجہ حرارت 45 ڈگری، گیس 1.6 L/منٹ۔ چار HSCCC چوٹی کے حصوں کی ساختی شناخت HR-ESI-MS، 1H، اور 13C-NMR سپیکٹروسکوپی کے ذریعے کی گئی۔

ساختی شناخت

حصہ I: HR-ESI-MS m/z 623.2001 (M−H)− پر مشاہدہ کیا گیا، C29H35O15 کے لیے calcd، 623.1981۔ 1H-NMR (500 MHz, CD3OD) δ ppm: 1.09 (3H, d, J=6 Hz, CH3 of rhamnose), 2.79 (2H, t, J=7.5 Hz, Ar-CH 2-)، 4.37 (1H, d, J=8 Hz, H-1 of گلوکوز), 5.18 (1H, d, J=1 Hz, H{{34} } of rhamnose)، 6.27 (1H, d, J=15.5 Hz, Ar-CH=CH-), 7.59 (1H, d, J=15.5 Hz, Ar -CH=CH-), 6.5–7.1 (6H, aromatic H).13C-NMR (125 MHz, CD3OD) δ ppm: 131.5 (C-1), 117.2 (C{{65} })، 146.2 (C-3)، 144.7 (C-4)، 116.4 (C-5)، 121.3 (C-6)، 72.4 (C-)، 36.6 (C-)، 127.7 (کیف-1)، 115.3 (کیف-2)، 146.9 (کیف-3)، 149.8 (کیف-4)، 116.6 (کیف{{{) 98}})، 123.2 (Caf{101}})، 168.3 (Caf-)، 114.8 (Caf-)، 148.1 (Caf-)، 104.3 (G-1)، 76.1 (Glc{{116}) })، 81.7 (Glc-3)، 70.5 (Glc-4)، 76.3 (Glc-5)، 62.4 (Glc-6)، 103.1 (Rha{{131} })، 72.3 (Rha-2)، 72.1 (Rha-3)، 73.9 (Rha-4)، 70.7 (Rha-5)، 18.5 (Rha{{146}) })۔ ادب میں دیے گئے اعداد و شمار کے مقابلے میں [17]، حصہ ایکٹیوسائیڈ سے مطابقت رکھتا ہے۔

حصہ II: HR-ESI-MS m/z 623.1987 (M−H)− پر مشاہدہ کیا گیا، C29H35O15، 623.1981 کے لیے calcd۔ 1H-NMR (500 MHz, CD3OD) δ ppm: 1.25 (3H, d, J=6.5 Hz, ch3 of rhamnose)، 2.78 (2H, t, J)=7 Hz, Ar-CH2-), 4.33 (1H, d, J=8 Hz, H-1 گلوکوز), 5.17 (1H, d, J {{ 33}} Hz, H-1 of rhamnose)، 6.28 (1H, d, J=15.5 Hz, Ar-CH=CH-), 7.56 (1H, d, J)=15.5 Hz، Ar-CH=CH-)، 6.5–7.0 (6H، خوشبودار H)۔ 13C-NMR (125 MHz, CD3OD) δ ppm: 131.5 (C-1), 117.2 (C-2), 146.2 (C-3), 144.7 (C-4 )، 116.5 (C-5)، 121.3 (C-6)، 72.4 (C-)، 36.7 (C-)، 127.8 (Caf-1)، 115.2 (Caf{{89}) }})، 146.8 (کیف-3)، 149.7 (کیف-4)، 116.6 (کیف-5)، 123.2 (کیف{101}})، 169.2 (کیف-)، 115.0 (Caf-) , 147.3 (Caf- )، 75.7 (Glc-5)، 64.7 (Glc-6)، 102.8 (Rha-1)، 72.4 (Rha-2)، 72.4 (Rha-3 )، 74.1 (Rha-4)، 70.5 (Rha-5)، 17.9 (Rha-6)۔ 1H-NMR اور 13C-NMR سپیکٹرل ڈیٹا اسویکٹیسائڈ کے ساتھ متفق تھے جیسا کہ ادب میں رپورٹ کیا گیا ہے [18]۔

حصہ III: HR-ESI-MS m/z 6{{108}}7.2032 (M−H)− پر مشاہدہ کیا گیا، C29H35O14، 607.2032 کے لیے calcd۔ 1H-NMR (500 MHz, CD3OD) δ ppm: 1.09 (3H, d, J=6 Hz, CH3 of rhamnose), 2.84 (2H, t, J=7.5 Hz, Ar-CH 2-), 4.37 (1H, d, J=8 Hz, H-1 of glucose), 5.19 (1H, d, J=1.5 Hz, H{{ rhamnose کا 35}})، 6.27 (1H, d, J=16 Hz, Ar-CH=CH-), 7.59 (1H, d, J=16 Hz, Ar-CH =CH-)، 6.6–7.1 (7H، خوشبودار H)۔ 13C-NMR (125 MHz, CD3OD) δ ppm: 130.8 (C-1), 116.2 (C-2), 130.9 (C-3), 156.8 (C-4 )، 130.8 (C-5)، 116.2 (C-6)، 72.4 (C-)، 36.4 (C-)، 127.8 (Caf-1)، 114.8 (Caf{{88) }})، 149.8 (کیف-3)، 146.9 (کیف-4)، 116.6 (کیف-5)، 123.2 (کیف-6)، 168.3 (کیف-)، 115.4 (Caf-)، 148.0 (Caf-)، 104.3 (G-1)، 76.3 (Glc-2)، 81.7 (Glc-3)، 70.4 (Glc-4 , 76.1 (Glc-5), 62.5 (Glc-6), 103.0 (Rha-1), 72.3 (Rha-2), 72.2 (Rha-3 )، 73.9 (Rha-4)، 70.7 (Rha-5)، 18.4 (Rha-6)۔ ادب کے مطابق [18]، حصہ III سیرنگلائڈ A 3'- -L-rhamnopyranoside سے مطابقت رکھتا ہے۔

حصہ IV: HR-ESI-MS m/z 665.21{{20} (M−H)− پر مشاہدہ کیا گیا، C31H37O16 کے لیے calcd، 665.2087۔ 1H-NMR (500 MHz, CD3OD) δ ppm: 1.09 (3H, d, J=6.5 Hz, CH3 of rhamnose), 2.00 (3H, s, OAc), 2.72 (2H, t, J { {25}}.5 Hz, Ar-CH2-), 4.55 (1H, d, J=8 Hz, H-1 گلوکوز), 4.90 (1H, d, J { {37}} Hz, H-1 of rhamnose), 6.29 (1H, d, J=15.5 Hz, Ar-CH=CH-), 7.62 (1H, d, J=15.5 Hz، Ar-CH=CH-)، 6.5–7.0 (6H، خوشبودار H)۔ 13C-NMR (125 MHz, CD3OD) δ ppm: 131.9 (C-1), 117.3 (C-2), 146.1 (C-3), 144.7 (C-4 )، 116.4 (C-5)، 121.4 (C-6)، 72.7 (C-)، 36.4 (C-)، 127.7 (Caf-1)، 115.4 (Caf{{93}) }})، 146.9 (کیف-3)، 149.9 (کیف-4)، 116.6 (کیف{102}})، 123.2 (کیف-6)، 168.1 (کیف-)، 114.7 (Caf-)، 148.2 (Caf-)، 101.8 (G-1)، 75.3 (Glc-2)، 80.3 (Glc-3)، 70.8 (Glc-4 , 76.2 (Glc-5), 62.3 (Glc-6), 103.3 (Rha-1), 72.0 (Rha-2), 71.8 (Rha-3 )، 73.7 (Rha-4)، 70.8 (Rha-5)، 18.5 (Rha-6)، 171.5 (C=O)، 20.9 (OAC)۔ 1H-NMR اور 13C-NMR سپیکٹرل ڈیٹا 2'-acetylacteoside [17] کے ساتھ متفق تھے۔

نتائج

ایکٹیوسائڈ، آئسو ایکٹیوسائیڈ، سیرنگلائڈ A 3'- -L-rhamnopyranoside اور 2'-acetylacteoside کی تیاری سے علیحدگی اور صاف کرنے کے لئے ایک HSCCC طریقہCistanches deserticola YC Maقائم ہوا. موجودہ مطالعہ اس بات کی نشاندہی کرتا ہے کہ HSCCC پلانٹ کے مواد سے بائیو ایکٹیو اجزاء کی تیاری اور علیحدگی کے لیے ایک بہت ہی طاقتور تکنیک ہے۔ نیز، مرکبات کو کافی بڑے پیمانے پر اعلیٰ پاکیزگی کے ساتھ الگ تھلگ کیا جاسکتا ہے اور پھر کرومیٹوگرافی یا بائیو ایکٹیویٹی اسٹڈیز کے لیے بطور حوالہ استعمال کیا جاسکتا ہے۔ پیچیدہ قدرتی مصنوعات کی تیزی سے تیاری کے لیے یہ طریقہ ایک قابل عمل، اقتصادی اور موثر تکنیک ہے۔

اعترافات

اس کام کو پروگرام برائے چانگجیانگ سکالرز اور یونیورسٹی میں اختراعی تحقیقی ٹیم (PCSIRT)، چین کی وزارت سائنس اور ٹیکنالوجی (2008DFB30070) کی جانب سے بین الاقوامی تعاون کے منصوبے (2008DFB30070)، اور الاشان کے بائیں بینر کے سائنسی پروگرام ({{2) کے ذریعے تعاون کیا گیا۔ }})۔

حوالہ جات

1. چینی فارماکوپیئل کمیشن۔ عوامی جمہوریہ چین کا فارماکوپیا؛ پیپلز میڈیکل پبلشنگ ہاؤس: بیجنگ، چین، 2010؛ جلد 1، ص۔ 126.

2. جیانگ، Y.؛ Tu, Cistanche پرجاتیوں میں کیمیائی اجزاء کا PF تجزیہ۔ J. Chromatogr 2009، 1216، 1970–1979۔

3. موریکاوا، ٹی. پین، Y. نینومیا، K.؛ Imura, K.; متسودا، ایچ. یوشیکاوا، ایم. یوآن، ڈی. موراوکا، O. صحرائی پودے Cistanche tubulosa سے hepatoprotective سرگرمی کے ساتھ Acylated phenylethanoid aminoglycosides۔ بائیو آرگ۔ میڈ. کیم 2010، 18، 1882–1890۔

4. چن، ایچ. جنگ، ایف سی؛ لی، سی ایل؛ ٹو، پی ایف؛ ژانگ، کیو ایس؛ وانگ، ZH Echinacoside monoamine neurotransmitters کے سٹرائٹل ایکسٹرا سیلولر لیول کو 6-ہائیڈرو آکسیڈوپامین لیزن چوہوں میں کم ہونے سے روکتا ہے۔ J. Ethnopharmacol 2007، 114، 285-289۔

5. موراوکا، او. نینومیا، K.؛ موریکاوا، ٹی. واکایاما، ایچ۔ متسودا، ایچ. یوشیکاوا، M. Cistanche tubulosa کے تنوں سے Hepatoprotective اجزاء۔ یاکوگاکو زشی 2007، 127، 49–51۔

6. کو، کے اے؛ سنگ، ایس ایچ؛ پارک، OH؛ کم، ایس ایچ؛ لی، کے وائی؛ کم، وائی سی کالی کارپا ڈائکوٹوما سے فینی لیتھانائڈ گلائکوسائیڈز کی وٹرو نیورو پروٹیکٹو سرگرمیاں۔ پلانٹا میڈ۔ 2005، 71، 778–780۔

7. لی، ایم؛ لیو، آر ایم؛ اتوار، AL؛ وو، ایس جے؛ لیو، این این سیپریشن اینڈ پیوریفیکیشن آف دی روٹین اور ایکسین کی چینی دواؤں کی جڑی بوٹی ہربا سرسی سے میکروپورس ایڈسورپشن رال اور تیز رفتار کاؤنٹر کرنٹ کرومیٹوگرافی کے امتزاج سے۔ J. Chromatogr سائنس 2009، 47، 329–332۔

8. ین، ایچ. Zhang, S.; لوو، ایکس ایم؛ لیو، YH تیز رفتار کاؤنٹر کرنٹ کرومیٹوگرافی کے ذریعے Acanthus ilicifolius L. سے دو بینزوکسازینائڈ گلوکوسائیڈز کی تیاری کی تنہائی اور تطہیر۔ J. Chromatogr 2008، 1205، 177–181۔

9. پینگ، ھ۔ لی، آر. Hu, J.; چن، ایل جے؛ زاؤ، ایکس؛ Luo, HD; ہاں، ہائے؛ یوآن، Y. وی، وائی کیو فلو ریٹ گریڈینٹ ہائی اسپیڈ کاؤنٹر کرنٹ کرومیٹوگرافی ٹراپیریجیم ولفورڈی سے پانچ ڈائٹرپینائڈز کی علیحدگی اور اسکیل اپ۔ J. Chromatogr 2008، 1200، 129–135۔

10. Xie, J.; ڈینگ، جے؛ ٹین، ایف. Su, J. تیز رفتار کاؤنٹر کرنٹ کرومیٹوگرافی کو ری سائیکل کرکے Penstemon barbatus (Can.) Roth سے echinacoside کی علیحدگی اور تطہیر۔ J. Chromatogr B2010، 878، 2665–2668۔

11. لی، ایل. تساؤ، آر. یانگ، آر. لیو، سی. ینگ، جے سی؛ Zhu, H. سے phenylethanoid glycosides کی تنہائی اور طہارتCistanche deserticolaتیز رفتار کاؤنٹر کرنٹ کرومیٹوگرافی کے ذریعے۔ فوڈ کیم۔ 2008، 108، 702-710۔

12. لی، ایل. تساؤ، آر. لیو، ZQ؛ لیو، SY؛ یانگ، آر. ینگ، جے سی؛ Zhu, HH; ڈینگ، زیڈ وائی؛ Xie, MY; فو، زیڈ ایچ آئسولیشن اور پلانٹاگو سائیلیم ایل سے ایکٹیوسائیڈ اور آئسو ایکٹیوسائیڈ کو تیز رفتار کاؤنٹر کرنٹ کرومیٹوگرافی کے ذریعے پاک کرنا۔ J. Chromatogr 2005، 1063، 161–169۔ مالیکیولز 2012، 17 8284

13. لئی، ایل۔ یانگ، ایف کیو؛ ژانگ، TY؛ ٹو، پی ایف؛ وو، ایل جے؛ Ito, Y. تیز رفتار کاؤنٹر کرنٹ کرومیٹوگرافی کے ذریعے Cistanches salsa (CA Mey.) G. Beck سے ایکٹیوسائیڈ اور 2'-ایسٹیل ایکٹیوسائیڈ کی تیاری کی تنہائی اور تطہیر۔ J. Chromatogr 2001، 912، 181–185۔

14. لئی، ایل۔ یانگ، ایف کیو؛ ژانگ، TY؛ ٹو، پی ایف؛ وو، ایل جے؛ چن، ایف کے؛ Ito, Y. تیز رفتار کاؤنٹر کرنٹ کرومیٹوگرافی کے ذریعے بیگل کتوں کے پاخانے کے نچوڑ سے فینی لیتھانائڈ گلائکوسائیڈز کی تیاری اور تطہیر۔ J. Liq کرومیٹوگر تعلق ٹیکنالوجی. 2001، 24، 2187–2195۔

15. گاو، ایس وائی؛ فینگ، بی؛ جھو، آر این؛ ما، جے کے؛ وانگ، ڈبلیو. تیز رفتار کاؤنٹر کرنٹ کرومیٹوگرافی کے ذریعے رومیکس جاپونیکس سے تین اینتھراکوئنز کی تیاری کا الگ تھلگ۔ مالیکیولز 2011، 16، 1201–1210۔

16. وہ، ایف۔ بائی، وائی ایچ؛ وانگ، جے؛ وی، جے؛ یو، سی وائی؛ لی، ایس. یانگ، ڈبلیو ایل؛ ہان، CH Isodon rubescens کے پورے پلانٹ سے Oridonin کی تنہائی اور پیوریفیکیشن ہائی سپیڈ کاؤنٹر کرنٹ کرومیٹوگرافی کے ذریعے۔ مالیکیولز 2011، 16، 7949–7957۔

17. کوبایشی، ایچ. اوگوچی، ایچ. تاکیزاوا، این. میاسے، ٹی. Ueno, A.; عثمان غنی، کے. احمد، ایم. نیو فینی لیتھانائڈ گلائکوسائیڈز فار سیستانچے ٹیوبولوسا (شرینک) ہک۔ f I. کیم۔ فارم۔ بیل. 1987، 35، 3309–3314۔

18. یوشیزاوا، ایف۔ دیاما، ٹی. تاکیزاوا، این. عثمان غنی، کے. احمد، ایم. سیستانچے ٹیوبلوسا (شرینک) ہک کے اجزاء۔ f II ایک نئے فینی لیتھانائڈ گلائکوسائیڈ اور ایک نئے نیولیگنان گلائکوسائیڈ کی تنہائی اور ساخت۔ کیم فارم۔ بیل. 1990، 38، 1927–1930۔