سیستانچے-سیستانچے ایکسٹریکٹ، ہیلتھ سپلائیمنٹ، سیسٹانچے فوڈ لینے کے بہترین طریقے پر تحقیق

مؤلف:ایل آئی یانگ، قین یادی، بوبیاجیار حیلاتی، یاو جون، یوآن جی، یو لین

（1. اسکول آف فارمیسی، سنکیانگ میڈیکل یونیورسٹی، ارومچی 830011؛2. سنکیانگ سیکنڈ میڈیکل کالج، کلامی 834000;3. ہوٹن ڈیچن فارماسیوٹیکاس اینڈ بایوٹیک کمپنی، لمیٹڈ، ہوٹن 848000)

اخذ کرنا:

مقصد: سیستانچے کے ٹکڑوں میں چار فینائلایتھنول گلیکوسائڈز (ایچینکوسائڈ، ٹبولوسائڈ اے، ایکٹیوسائڈ، آئسوایکٹیوسائڈ) کی شناخت اور تعین کے لئے ایک طریقہ قائم کرنا، اس کے اقتباسات اور ٹی ایل سی اور کیو اے ایم ایس کی طرف سے متعلقہ صحت مند غذائیں۔

طریقہ:

(1)ٹی ایل سی: چار فینیل ایتھنول گلیکوسائڈز کو ٹی ایل سی نے پولی امائڈ فلم کے ساتھ سٹیشنری فیز اور کلوروفارم-میتھانول-ایسیٹک ایسڈ واٹر (1.5∶2∶1∶7) کو ترقی پذیر سالوینٹ کے طور پر شناخت کیا۔ اس جگہ کا پتہ بالائے بنفشی روشنی کے نیچے ٣٦٥ این ایم پر لگایا گیا تھا۔

(2) ایکاندرونی حوالہ کے طور پر ایچینکوسائڈ کا استعمال کرتے ہوئے، ہر جزو کے مواد کا حساب لگانے کے لئے ٹبلوسائڈ اے، ایسیٹونیڈ اور آئسوایکٹیوسائڈ کے لئے نسبتی اصلاح ی عوامل کا استعمال کیا گیا۔ کیو اے ایم ایس طریقہ کار کے حساب کے نتائج کا موازنہ بیرونی معیاری طریقہ کار کی اقدار سے کیا گیا۔

نتیجہ: سیستانچے ڈیکوٹیون ٹکڑوں، اقتباسات اور فنکشنل غذاؤں میں 4 فینائلایتھنول گلیکوسائڈز (ایچینکوسائڈ، ٹبولوسائڈ اے، ایکٹیوسائڈ اور آئسوایکٹیوسائڈ) کے ٹی ایل سی دھبے اچھی علیحدگی، مضبوط مخصوص اعتدال پسند آر ایف ویلیو کے ساتھ سب واضح تھے۔ ٹبلوسائڈ اے، ایکٹیوسائڈ اور آئسوایکٹیوسائڈ نسبتی اصلاح ی عوامل کی دوبارہ پیدا پذیری اچھی تھی اور دونوں طریقوں میں کوئی واضح فرق نہیں تھا۔

نتیجہ: اس مطالعے میں قائم کردہ طریقہ آسان، درست اور قابل تجدید ہے۔ یہ سیستانچے ڈیکوٹیون ٹکڑوں، عرق اور فنکشنل غذاؤں کے موثر اجزاء کے معیار پر قابو پانے کے لئے ایک حوالہ فراہم کر سکتا ہے۔

کلیدی الفاظ:سستانچے； دشنام طرازی کے ٹکڑے ؛ متعلقہ مصنوعات؛ فینیتھیل الکحل گلیکوسائڈز؛ٹی ایل سی； کیو اے ایم ایس

سیستانچے ڈیزیٹریکولا وائی سی ما. خاندان اوروبانچاسی کی ایک دائمی پرجیوی جڑی بوٹی ہے۔ یہ خشک گوشت دار تنوں کے ساتھ خارش دار پتوں کے ساتھ دوا کے طور پر استعمال کیا جاتا ہے۔ سیستانچے پہلی بار "شینلانگ ماٹیریا میڈیکا" میں شائع ہوا تھا اور اسے ایک اعلی گریڈ کے طور پر درج کیا گیا تھا۔ یہ ذائقہ میں میٹھا، فطرت میں گرم، نمکین، اور گردے اور بڑی آنت مریدین سے تعلق رکھتا ہے. اس میں آنتوں اور جولیوں کو نم کرنے، گردے یانگ کو حوصلہ افزائی کرنے اور جوہر اور خون کو فائدہ پہنچانے کے اثرات ہوتے ہیں۔ یہ بنیادی طور پر سنکیانگ، ننگکسیا، اندرونی منگولیا، چنگھائی، گانسو اور شمال مغربی چین کے دیگر بنجر علاقوں میں تیار کیا جاتا ہے۔ سیستانچے کے اہم کیمیائی اجزاء فینیلیتھانوئیڈ گلیکوسائڈز، ایریڈوئڈز، لیگنان، الکالائیڈز، مونوٹرپینز، شکر، غیر مستحکم تیل اور غیر نامیاتی سراغ عناصر ہیں۔ ان میں فینیلیتھانوئیڈ گلیکوسائڈز (فائس) فارما کولوجیکل اجزاء میں سے ایک ہے، جن میں اینٹی آکسیڈنٹ، نیورو پروٹیکشن، اینٹی وائرل، قوت مدافعت میں اضافہ، اینٹی تھکاوٹ اور یادداشت میں اضافہ اور قوت مدافعت میں اضافہ جیسی فارما کولوجیکل سرگرمیاں ہیں۔

سیستانچے اقتباس فوائد:

سیستانچے ایکسٹریکٹ سیستانچے کی خشک انزائم غیر فعال گولیوں سے بنایا جاتا ہے، جو نکال کر الگ کر دی جاتی ہیں۔ اسے جاپان، جنوبی کوریا، ملائیشیا اور دیگر بیرون ملک منڈیوں میں برآمد کیا گیا ہے اور صحت کی دیکھ بھال کی مصنوعات، کاسمیٹکس اور دوا سازی کی صنعتوں میں وسیع پیمانے پر استعمال کیا جاتا ہے۔ صحت کی دیکھ بھال کی مصنوعات سے پروسیس کیا گیاسیستانچے عرقجیسا کہ خام مال میں صحت کی دیکھ بھال کے دوہرے افعال ہیںجسمانی تھکاوٹ سے نجاتاورقوت مدافعت کو بہتر بنانا. اس وقت سیستانچے ایکسٹرکٹ اور ہیلتھ کیئر مصنوعات کے فعال اجزاء کی معیاری تشخیص کے لئے متعلقہ کنٹرول معیارات کا فقدان ہے اور پروسیسنگ اور مارکیٹ کی فروخت کے معیار اور تحفظ کو یقینی بنانا مشکل ہے۔ ایچینسیا اور وربسکوسائیڈ کی شے کے تحت شناخت اور مواد کے تعین کے لئے اشاریہ اجزاء ہیںسیستانچے ٹبلوساچینی فارما کوپیا کے 2020 کے ایڈیشن میں۔ اضافی طور پہسیستانچے ٹبلوسااس کے علاوہ دیگر فینیلیتھانوئیڈ گلیکوسائڈز بھی شامل ہیں، جیسے ٹیوبروسین اے، سالیڈروسائڈ، اسووربیسن، سیستانچیوسائڈ سی، سیستانچیوسائڈ ڈی، اوریروسائڈ، 2′-ایسیٹائلوربیسن وغیرہ۔اینٹی آکسیڈنٹ اور نیورو پروٹیکٹو اثرات کے مختلف درجے.صرف ایچینکوسائڈ اور وربسکوسائڈ کو کھوج اشاریوں کے طور پر استعمال کرکے اس کے معیار کا جامع اور درست جائزہ لینا مشکل ہے۔ ادب میں بتایا گیا ہے کہ سیستانچے اور سیستانچے میں ڈکٹالوسائڈ اے اور آئی سیورسائیڈ کے مواد بھی زیادہ تھے جو بالترتیب 0.29 فیصد، 0.21 فیصد، 0.06 فیصد اور 0.10 فیصد تک پہنچ گئے۔

سیستانچے کے مزید فوائد جاننے کے لیے یہاں کلک کریں

اس مقالے میں سیستانچے ٹبولوسا کے ڈیکوٹیون ٹکڑوں اور متعلقہ مصنوعات (اقتباسات، صحت کی مصنوعات) اور اعلی کارکردگی والے مائع کروماٹوگرافی (ایچ پی ایل سی) میں 4 فینیلیتھانوئیڈ گلیکوسائڈز (ایچینکوسائڈ، ٹیوبروسائڈ اے، وربسکوسائڈ، اسوراسکوسائڈ) کی ٹی ایل سی شناخت قائم کی گئی۔ تشخیص کا طریقہ (ایچ پی ایل سی-کیو اے ایم ایس) مواد کے تعین کا طریقہ سیستانچے ٹبلوسا کے معیار کی تشخیص کے طریقہ کار کو مزید بہتر بنانے کے لئے ایک حوالہ فراہم کرتا ہے۔

1 مواد اور سیستانچے لینے کا بہترین طریقہ منتخب کرنے کے طریقے

1.1 آلات اور ریایجنٹس

شیماڈزو ایل سی-20اے ٹی ہائی پرفارمنس لیکوئڈ کروماٹوگراف؛ شیماڈزو ایل سی-20اے بی ہائی پرفارمنس لیکوئڈ کروماٹوگراف؛ ایجلنٹ1260 ہائی پرفارمنس لیکوئڈ کروماٹوگراف؛ تجزیاتی توازن (اے بی 135-ایس، میٹلر ٹولیڈو1و کمپنی)؛ کے کیو-500ڈی الٹراسونک کلینر

(کے کیو-500ڈی، کنشان الٹراسونک انسٹرومنٹ کمپنی، لمیٹڈ)؛ نیم خودکار اسپاٹنگ انسٹرومنٹ (سی اے ایم اے جی، سوئٹزرلینڈ) .

(1) سیستانچے کے تجارتی طور پر دستیاب ڈیکوچیون ٹکڑے (ایس 1، ایس 2: سیستانچے ڈیزیٹریکولا، الکسا، سنکیانگ میں اصل؛ ایس 3، ایس 4: سیستانچی تونولوسا، اصل سنکیانگ): سے خریدا گیاویسستانچے کمپنی لمیٹڈ.; انزائم خشک گولیوں کی الکحل نکالنا، ایس 6: انزائم غیر فعال خشک گولیوں کا پانی نکالنا، ایس 7: انزائم غیر فعال خشک گولیاں رال کے ساتھ الکحل نکالنا)، اور صحت کی مصنوعات (ایس 8) سنکیانگ ہیتیان ڈیچن بائیو ٹیکنالوجی کمپنی، لمیٹڈ کی طرف سے فراہم کی جاتی ہیں۔

(2) ایچینسیا حوالہ مادہ (بیچ نمبر: ایس-003-01904003، پاکیزگی: ≥ 98 فیصد)، ٹیوبروسین اے (بیچ نمبر: جی-066-11812016، پاکیزگی: ≥ 98 فیصد، ورباکوسائڈ (بیچ نمبر: ≥ 98 فیصد) ایم-011-02103019، پاکیزگی: ≥ 98 فیصد، آئی سیورایکسائیڈ (بیچ نمبر: وائی-073-11803024، پاکیزگی: ≥ 98 فیصد: بیجنگ ینگلیک ٹیکنالوجی ڈویلپمنٹ کمپنی، لمیٹڈ۔

(3) میتھانول، ایسیٹونیٹریل اور فارمیک ایسڈ کروماٹوگرافک طور پر خالص تھے؛ کلوروفارم اور گلیشل ایسیٹک ایسڈ تجزیاتی طور پر خالص تھے؛ پانی انتہائی خالص پانی تھا۔

1.2 تجرباتی طریقہ

1.2.1 پتلی پرت کروماٹوگرافی کے ذریعہ شناخت

1.2.1.1 ٹیسٹ حل کی تیاری ٹیسٹ پاؤڈر لیں (0.5 گرام سیستانچے ڈیکوٹیشن ٹکڑے، 0.2 گرام سیستانچے ایکسٹریکٹ، 0.5 گرام ہیلتھ پروڈکٹ)، 50 فیصد میتھانول کی 20 ایم ایل شامل کریں، الٹراسونک طریقے سے اسے 15 منٹ اور فلٹر کے لئے علاج کریں۔

فلٹریٹ 2 ایم ایل تک مرکوز تھا، 0.45 μm مائیکروہورسجھلی سے گزرا، اور ٹیسٹ حل کے طور پر استعمال کیا گیا۔

1.2.1.2 حوالہ مادے کے حل کی تیاری ٹھیک 10 ملی گرام ایچینکوسائڈ، ویسوسائڈ اے، وربسکوسائڈ، اور اسوراسکوسائڈ حوالہ مادہ کا وزن، تحلیل کرنے کے لئے 50 فیصد میتھانول شامل کریں اور 10 میٹر ایل کے حجم میں پتلا کریں

بوتل، ایک حوالہ معیاری واحد معیاری اسٹاک حل کے طور پر. ہر حوالہ مادے کے واحد معیاری اسٹاک محلول کے تقریبا 2 ملین کی ٹھیک پیمائش کریں، اسی 10 میٹر حجم فلاسک میں 50 فیصد میتھانول شامل کریں، اور مخلوط حوالہ حل کے طور پر 0.45 μm مائیکروپریسجھلی سے گزریں۔

1.2.1.3 منفی نمونہ حل کی تیاری صحت کی مصنوعات کے نسخے کے مطابق سیستانچے کے علاوہ دیگر ادویاتی مواد کا وزن کریں، اور منفی نمونہ حل تیار کرنے کے لئے ٹیسٹ حل کی تیاری کے لئے اسی طریقہ کار کے مطابق کام کریں۔

1.2.2 مواد کا تعین از ایک ٹیسٹ-کثیر تشخیص طریقہ

1.2.2.1 کروماٹوگرافک حالات کالم: آئی این ای آر ٹی ایس آئی ایل او ڈی ایس-3 (250 ملی میٹر×4.6 ملی میٹر، 5μm)؛ موبائل مرحلہ: ایسیٹونیٹریل (اے)-0.1٪ فورمیک ایسڈ محلول (بی)، گریڈینٹ ایلوشن (0 ~ 12 منٹ، 17 فیصد ~ 20 فیصد اے؛ 12~30 منٹ، 20٪~22٪اے; 30~35 منٹ، 22٪~17٪اے); سراغ رسانی طول موج: 330این ایم؛ بہاؤ کی شرح: 1.0 ملین ایل · کم سے کم 1؛ کالم کا درجہ حرارت: 30° سینٹی سینٹی چ؛ انجکشن کا حجم: 10μL .

1.2.2.2 حوالہ مادے کے حل کی تیاری تقریبا 10 ملی گرام ایچینکوسائڈ، ٹیوبروسین اے، وربسکوسائڈ اور اسوراسکوسائڈ حوالہ مادہ ہر ایک لیں، ان کا درست وزن کریں، اور انہیں بالترتیب 10 ایم ایل والیمٹرک فلاسکس میں رکھیں، 50 فیصد استعمال کرتے ہوئے

میتھانول کو تحلیل کریں اور نشان تک بنائیں، بالترتیب 1.008، 1.011، 1.012 اور 1.012 ملی گرام·ایم ایل-1 کے ارتکاز کے ساتھ حوالہ مادے کے واحد معیاری اسٹاک حل کو حاصل کرنے کے لئے اچھی طرح ہلائیں۔ ہر حوالہ مادے کے واحد معیاری اسٹاک محلول کی مناسب مقدار کی پیمائش کریں، اسے اسی 10 میٹر ایل والیمیٹرک فلاسک میں ڈالیں، نشان میں 50 فیصد میتھانول شامل کریں، اچھی طرح ہلائیں، اور 201.60، 50.55، 101.20، 50.60μg·ایم ایل-1 کے ارتکاز کے ساتھ ایک مرکب تیار کریں حوالہ حل 0.45μm مائیکروفریشرڈ جھلی سے گزرا۔

1.2.2.3 ٹیسٹ حل کی تیاری

(1) سیستانچے ڈیکوٹیون ٹکڑوں کی جانچ کا حل: سیستانچے ڈیکوٹیون ٹکڑوں کے پاؤڈر کا تقریبا 1.0 گرام وزن (ایک نمبر سے گزرا) 4 چھلنی)، درست طور پر وزن, درست طور پر 50٪ میتھانول کی 25 ملین ایل شامل, اچھی طرح ہلا, وزن, اور الٹراسونک طور پر (طاقت 250ڈبلیو, فریکوئنسی 35کاہرٹز) 40منٹ, اسے ٹھنڈا ہونے دیں, دوبارہ وزن, 50٪ میتھانول کے ساتھ کم وزن سپلیمنٹ, اچھی طرح ہلائیں, فلٹر کاغذ کے ذریعے فلٹر, اور فلٹریٹ کو 0.45 μm مائیکروپریسر جھلی سے گزرنے کے لئے لیں۔

(2) جانچ کے لئے سیستانچے عرق کا حل: سیستانچے عرق کا پاؤڈر لیں (ایس 5: الکحل سے نکالے گئے انزائم سے غیر فعال خشک فلیکس، ایس 6: پانی سے نکالے گئے انزائم سے غیر فعال خشک فلیکس، ایس 7: الکحل سے نکالے گئے انزائم غیر فعال خشک فلیکس مع رال) تقریبا 0.2 گرام۔ ٹھیک تول یں اور "(1)" کے تحت طریقہ کے مطابق سیستانچے عرق کے آزمائشی حل کو تیار کریں۔ (3)ہیلتھ کیئر پروڈکٹ ٹیسٹ کا حل: 10 ہیلتھ کیئر پروڈکٹس لیں، ان کا درست وزن کریں، انہیں باریک پیس لیں، ٹیبلٹ کے اوسط وزن کا حساب لگائیں، 1 ٹیبلٹ (تقریبا 0.5 گرام) کا درست وزن کریں، اور صحت کی دیکھ بھال کی مصنوعات کو "(1)" کے تحت طریقہ کار کے مطابق تیار کریں۔ آزمائشی حل.

2 بہترین سیستانچے کے انتخاب کے نتائج اور تجزیہ

1.1 آلات اور ریایجنٹس

2.1 پتلی پرت کروماٹوگرافی کے ذریعہ شناخت

پتلی پرت کروماٹوگرافی (جنرل رول 0502) ٹیسٹ کے مطابق، حوالہ مادہ واحد معیاری حل، مخلوط حوالہ مادہ حل، ٹیسٹ حل، اور منفی نمونہ حل کے بالترتیب 2 μL بنائیں، اور انہیں اسی پولیایکرائلامائڈ حل پر اشارہ کریں۔

ایمن فلم پلیٹ میں، ترقی پذیر ایجنٹ کے طور پر کلوروفارم-میتھانول-گلیشل ایسیٹک ایسڈ واٹر (1.5:2:1:7) کا استعمال کریں، بالائے بنفشی روشنی (365 این ایم) کے تحت تیار کریں، باہر نکالیں، خشک کریں اور معائنہ کریں۔ نتائج ٹیسٹ مادے نے حوالہ مادے کے کروماٹوگرام پر اسی رنگ کے فلوریسنٹ دھبے دکھائے، اور منفی ہونے پر کوئی مداخلت نہیں ہوئی، جیسا کہ تصویر 1 میں دکھایا گیا ہے۔

شکل 1 ٹی ایل سی کروماٹوگرام زمیں کے ٹکڑے، عرق، صحت کی مصنوعات

نوٹ: بائیں سے دائیں ایچینکوسائڈ، ٹیوبروسائڈ اے، ورباسکوسائڈ، آئی سیورسائیڈ، مخلوط حوالہ مادہ، سیستانچے (ایس 1 ~ ایس 4)، سیستانچے (ایس 5 ~ ایس 7)، ہیلتھ کیئر مصنوعات (ایس 8)، صحت کی مصنوعات کے منفی نمونے (ایس 8) کے اقتباس

2.2 مواد کا تعین از ایک ٹیسٹ-کثیر تشخیص طریقہ

2.2.1 تخصیص ٹیسٹ

مخلوط حوالہ حل اور ٹیسٹ حل میں سے ہر ایک میں سے 10 μL لیں، اور 1.2.2.1 کے تحت کروماٹوگرافک حالات کے مطابق انجکشن اور تجزیہ کریں۔ حوالہ حل اور آزمائشی حل میں ہدف چوٹی اور ملحقہ اجزاء کے درمیان قرارداد 1.5 سے زیادہ ہے، اور خصوصیت اچھی ہے۔ اور کروماٹوگرام کو شکل 2 میں دکھایا گیا ہے۔

2.2.2 لکیری تعلقات کی تحقیقات

ٹھیک ٹھیک 0.5, 1, 2.5, 5, اور 10 ملین مخلوط حوالہ حل کے تحت "1.2.1.2" کے تحت کھینچیں، انہیں 10 ایم ایل والیمٹریک فلاسکس میں ڈالیں، 50 فیصد میتھانول کے ساتھ نشان تک بنائیں، اور ارتکاز مرکب کی ایک سیریز حاصل کرنے کے لئے اچھی طرح ہلائیں۔

حوالہ حل کو یکجا کریں، بالترتیب 10 μL درست طور پر پیپٹ کریں، اور چوٹی کے علاقے کی پیمائش کے لئے "1.2.2.1" کے تحت کروماٹوگرافک حالات کے مطابق نمونے داخل کریں۔ کے لئے

عمودی طور پر بیٹھیں، ایک رجعت منحنی بنائیں، اور لکیری رجعت کا حساب لگائیں۔ نتائج سے پتہ چلا کہ آر سب 0.9993 سے زیادہ تھے، اور چار فینیتھیل گلیکوسائڈز نے متعلقہ لکیری حد کے اندر چوٹی کے علاقے کے ساتھ ایک اچھا لکیری تعلق ظاہر کیا، جیسا کہ جدول 1 میں دکھایا گیا ہے۔

حوالہ مادہ اور نمونہ مادہ کی شکل 2 ایچ پی ایل سی سپیکٹرم

1۔ ایچینکوسائڈ؛2.  ٹبولوسائڈ اے؛3. ایکٹیوسائڈ؛4. آئسوایکٹیوسائڈ

نوٹ:

مخلوط حوالہ مادہ کا اے کروماٹوگرام؛

سیستانچے ڈوکیشن کے ٹکڑے بی کروماٹوگرام؛

سیستانچے عرق کا کروماٹوگرام؛

صحت کے ضمیمے کا ڈی کروماٹوگرام

جدول 1 4 اجزاء لکیری رشتے کے نتائج

2.2.3 درستی ٹیسٹ

"1.2.1.2" کے تحت مخلوط حوالہ حل کے 10 μL درست طور پر پیپٹ کریں، "1.2.2.1" کے تحت کروماٹوگرافک حالات کے مطابق مسلسل 6 بار انجکشن لگائیں اور پیمائش کریں، چوٹی کے علاقے کو ریکارڈ کریں اور اس کی آر ایس ڈی کا حساب لگائیں۔ نتائج ایچینکوسائڈ، ٹیوبروسین اے، وربسکوسائڈ اور اسووراسکوسائڈ کے چوٹی کے علاقوں کی آر ایس ڈی بالترتیب 0.79 فیصد، 1.24 فیصد، 0.59 فیصد اور 0.42 فیصد تھیں، جس سے ظاہر ہوتا ہے کہ آلات کی درستگی اچھی تھی۔

2.2.4 تکرار ٹیسٹ

ٹیسٹ پاؤڈر (ایس 3، ایس 6، ایس 8) کے ایک ہی بیچ کی 6 کاپیاں لیں، ان کا درست وزن کریں، "1.2.1.3" کے مطابق ٹیسٹ حل تیار کریں، "1.2.2.1" کے تحت کروماٹوگرافک حالات کے مطابق پیمائش کریں، اور ریکارڈ پیک ایریا، 4 اجزاء کے مواد اور ان کی آر ایس ڈی کا حساب لگایا گیا۔ نتائج جدول 2 میں دکھائے گئے ہیں، جس سے ظاہر ہوتا ہے کہ اس طریقہ کار میں اچھی دوبارہ پیدا کرنے کی صلاحیت ہے۔

جدول 2 تکرار جانچ

2.2.5 استحکام ٹیسٹ

آزمائشی حل (ایس 3، ایس 6، ایس 8) کا 10 μL، "1.2.2.1" کے تحت کروماٹوگرافک حالات کے مطابق پیمائش کریں، اور پیمائش کے لئے بالترتیب 0، 2، 4، 6، 8، 12 اور 24 گھنٹہ پر نمونے داخل کریں۔ نتائج ایچینکوسائڈ، اینالوسائڈ اے، ویراسکوسائڈ اور آئی سیورسائیڈ کے چوٹی کے علاقوں کے آر ایس ڈی (این=7) نمونے (ایس 3) میں بالترتیب 1.28 فیصد، 1.82 فیصد، 1.52 فیصد اور 1.56 فیصد تھے۔ نمونے (ایس 8) میں چار اجزاء کے چوٹی کے علاقوں کی آر ایس ڈی (این=7) بالترتیب 1.38 فیصد، 1.57 فیصد، 1.73 فیصد اور 2.49 فیصد رہی۔ اور نمونے (ایس 8) میں چار اجزاء کے چوٹی کے علاقوں کے آر ایس ڈی (این=7) 1.63 فیصد، 0.92 فیصد، 1.85 فیصد اور 2.24 فیصد تھے جو ظاہر کرتے ہیں کہ ٹیسٹ کا حل 24 گھنٹہ کے اندر مستحکم ہے۔

2.2.6 بحالی ٹیسٹ

معلوم مواد کے ساتھ ٹیسٹ پروڈکٹ (ایس 3، ایس 6، ایس 8) کے 9 پاؤڈرز کا وزن کریں، درست طور پر وزن کریں، اور "1.2.2.3" کے تحت طریقہ کار کے مطابق ٹیسٹ حل تیار کریں۔ متناسب طور پر چار اجزاء کے حوالہ محلول کی ایک خاص مقدار شامل کریں، انجکشن لگائیں اور "1.2.2.1" کے تحت کروماٹوگرافک حالات کے مطابق پیمائش کریں، چوٹی کا علاقہ ریکارڈ کریں، بحالی کی شرح اور اس کی آر ایس ڈی کا حساب لگائیں، اور نتائج جدول 3 میں دکھائے گئے ہیں۔

جدول 3 نمونہ وصولی کی شرح کے نتائج（ن=3）

2.2.7 نسبتی اصلاح عنصر حساب

نسبتی اصلاح عنصر کا حساب کثیر نقطہ اصلاح کے طریقہ کار سے لگایا جاتا ہے، فارمولا فائی/ایس=فی/ایف ایس=(وائی×اے ایس)/(ڈبلیو ایس×اے آئی) کے مطابق، جہاں فائی/ایس جزو کے درمیان نسبتی اصلاح کا عنصر ہے جس کی جانچ کی جائے گی اور اندرونی حوالہ، آئی، اے آئی، اے ایس جزو کے چوٹی کے علاقے ہیں جن کی پیمائش کی جائے گی اور اندرونی حوالہ، بالترتیب، اور وائی اور ڈبلیو ایس جزو کی مقدار ہے جس کی پیمائش بالترتیب کی جائے گی اور اندرونی حوالہ۔

اندرونی حوالہ کے طور پر ایچینکوسائڈ کا استعمال کرتے ہوئے، انجکشن کے حجم میں تبدیل کرنے کے لئے مخلوط حوالہ محلول کے 1، 2، 5، 10، 15، 20، اور 30 μL لیں، اور "1.2.2.1" کے تحت کروماٹوگرافک حالات کے مطابق انجکشن اور پیمائش کریں۔ ڈکٹوسائڈ اے (بی)، وربسکوسائیڈ (سی)، آئی سیورسائیڈ (ڈی) اور اندرونی حوالہ ایچینکوسائڈ (اے) کے نسبتی اصلاح عنصر (فائی/ایس) کی پیمائش کریں، اور اوسط قیمت کو مقدارکے لئے نسبتی اصلاح کے طور پر لیں 7 نکات پر حساب کیے گئے نسبتی اصلاح عنصر کے آر ایس ڈی کی تحقیقات کی گئیں۔ نتائج سے پتہ چلا کہ تینوں آزمودہ اجزاء کے نسبتی اصلاح ی عنصر کی آر ایس ڈی اور اندرونی حوالہ ایچینکوسائڈ سب 3 فیصد سے بھی کم تھے، جیسا کہ ٹیبل 4 میں دکھایا گیا ہے۔

جدول 4 3 اجزاء کے نسبتی اصلاحی عوامل (فی/ایس) اور ایچینکوسائڈ اندرونی حوالہ

نوٹ: اے: ایچینسیا، بی: ٹیوبروسائڈ اے، سی: وربیسن، ڈی: آئیسیورایکسائیڈ

2.2.8 نسبتی اصلاحی عوامل کی دوبارہ قابلیت

تین ہائی پرفارمنس مائع کروماٹوگراف، شیماڈزو ایل سی-20 اے ٹی، شیماڈزو ایل سی-20 اے بی، ایجلنٹ1260 اور آئی این ای آر ٹی ایس آئی ایل او ڈی ایس-3 (250 ملی میٹر×4.6 ملی میٹر، 5μm)، ایکس برج سی 18 کی بالترتیب تحقیقات کی گئیں۔

تین کروماٹوگرافک کالموں (250 ملی میٹر×4.6 ملی میٹر، 5μm) اور ایجلنٹ سی 18 (250 ملی میٹر×4.6 ملی میٹر، 5μm) کے نسبتی اصلاح ی عنصر پر اثرات، اور آر ایس ڈی کا حساب لگانے کے نتائج سب 3 فیصد سے بھی کم ہیں، جس سے ظاہر ہوتا ہے کہ مختلف اعلی کارکردگی والے مائعات میں قائم نسبتی اصلاح عنصر۔ مرحلہ کروماٹوگراف اور مختلف کروماٹوگرافک کالم دوبارہ تیار کیے گئے، نتائج جدول 5 میں دکھائے گئے ہیں

جدول 5 نسبتی اصلاح ی عوامل（فی/ایس）مختلف آلات اور مختلف ایچ پی ایل سی کالموں کے ذریعہ 3 اجزاء اور ایچینکوسائڈ

نوٹ: اے: ایچینسیا، بی: ٹیوبروسائڈ اے، سی: وربیسن، ڈی: آئیسیورایکسائیڈ

2.2.9 اجزاء کی کروماٹوگرافک چوٹیوں کی پوزیشننگ کی پیمائش کی جائے گی

"2.2.8" کے تحت حاصل کردہ برقراری کے وقت کے مطابق، جانچ کی جانے والی جزو کی نسبتی برقراری کی قدر اور اندرونی حوالہ ایچینکوسائڈ (آر آئی/ایس= ٹی آر آئی/ٹی آر، جہاں ٹی آر آئی اور ٹی آر برقرار رکھنے کا وقت ہیں) اور اس کی آر ایس ڈی کا حساب لگائیں۔ نتائج جانچے جانے والے اجزاء کی نسبتی برقراری کی اقدار کی آر ایس ڈی سب 5 فیصد سے بھی کم تھیں، جس سے ظاہر ہوتا ہے کہ نسبتا برقراری کی اقدار مستحکم تھیں اور ان اجزاء کی کروماٹوگرافک چوٹیوں کے مقام کے لئے استعمال کی جاسکتی ہیں جن کی جانچ کی جائے گی۔ نتائج جدول 6 میں دکھائے گئے ہیں۔

2.2.10 پیمائش کے نتائج کا موازنہ ایک ٹیسٹ اور متعدد تشخیص کے طریقہ کار اور بیرونی معیاری طریقہ کار کے درمیان

نمونوں کے ہر بیچ کا ٹھیک ٹھیک وزن کریں، آئٹم "1.2.1.3" کے مطابق ٹیسٹ حل تیار کریں، مخلوط حوالہ حل اور ٹیسٹ حل کے 10 μL درست طور پر بنائیں، اور نمونوں کو "1.2.2.1" کے تحت کروماٹوگرافک حالات کے مطابق انجکشن لگائیں۔ ، چار اجزاء کے چوٹی کے علاقوں کو ریکارڈ کریں، اور بیرونی معیاری طریقہ اور قائم کردہ ایک پیمائش-کثیر تشخیص طریقہ (وائی=فائی/ایس×ڈبلیو×اے آئی/اے ایس) کا استعمال کرتے ہوئے چار اجزاء کے مشمولات کا بالترتیب حساب لگائیں۔ نتائج جدول 7 میں دکھائے گئے ہیں۔ ایس پی ایس ایس 26.0 سافٹ ویئر کو ٹی ٹیسٹ کے ذریعے دونوں طریقوں کے نتائج کا تجزیہ کرنے کے لئے استعمال کیا گیا تھا، پی > 0.05، جس سے ظاہر ہوتا ہے کہ بیرونی معیاری طریقہ کار سے ماپا جانے والے مواد اور ایک ٹیسٹ، کثیر تشخیص کے طریقہ کار کے ذریعہ حساب کیے گئے مواد میں کوئی خاص فرق نہیں تھا، جس سے ظاہر ہوتا ہے کہ ایک پیمائش اور متعدد تشخیص کا طریقہ سیستانچے صحرائی ڈیکولاکوٹیون ٹکڑوں کے لئے استعمال کیا جاسکتا ہے، عرق اور صحت کی مصنوعات میں فعال اجزاء کی کوالٹی کنٹرول تحقیق۔

جدول 6 نسبتی برقراری کی اقدار（r）مختلف آلات اور مختلف ایچ پی ایل سی کالموں کے ذریعہ 3 اجزاء اور ایچینکوسائڈ

نوٹ: اے: ایچینسیا، بی: ٹیوبروسائڈ اے، سی: وربیسن، ڈی: آئیسیورایکسائیڈ

3 انتخاب کا اختتامسیستانچے لینے کا بہترین طریقہ

شناخت کی کارکردگی اور شناختی طریقوں کے تنوع کو بہتر بنانے کے لئے، اس ٹیسٹ میں چینی فارماکوپیا کے 2020 کے ایڈیشن میں سیستانچے ڈیزریبیکولا کی شے کے تحت شناختی ٹیسٹ کی بنیاد پر دو اجزاء، ڈوکٹوسائڈ اے اور آئی سیورایکسائڈ شامل کیے گئے۔ فارماکوپیا کی ترقیاتی شرائط استعمال کی گئیں: میتھانول۔ - گلیشل ایسیٹک ایسڈ - پانی = 2:1:7، یہ پایا گیا کہ ایچینکوسائڈ اور ٹیوبروسائڈ اے کی علیحدگی کی ڈگری ضروریات کو پورا نہیں کر سکی، اور سٹیشنری فیز اور ڈیولپنگ ایجنٹ کا اسکریننگ ٹیسٹ بالترتیب کیا گیا۔

پولی امائڈ فلم پلیٹ کا استعمال کرتے ہوئے، سلیکا جیل جی پتلی پرت پلیٹ، سلیکا جیل ایچ پتلی پرت پلیٹ بطور سٹیشنری مرحلہ، ایسیٹون-میتھانول-گلیشل ایسیٹک ایسڈ-واٹر=1:2:1:7، میتھانول-گلیشل ایسیٹک ایسڈ-واٹر=4:1: 5. ایتھل ایسیٹیٹ:ایتھنول=6:4، این بوٹانول ایتھنول-پانی=4:1:5، ٹرائیکلورومیتھین-میتھانول-گلیشل ایسیٹک ایسڈ واٹر=1.5:2:1:7 نتائج پولی امائڈ فلم پلیٹ کو سٹیشنری مرحلے کے طور پر استعمال کرتے ہوئے، کلوروفارم-میتھانول-گلیشل ایسیٹک ایسٹک واٹر=1.5∶2∶1∶7، دھبے واضح تھے، علیحدگی اچھی تھی، آر ایف ویلیو معتدل تھی اور دہرانے کی صلاحیت اچھی تھی۔ اجزاء کی فوری اور درست خصوصیات. ایک پیمائش کثیر تشخیص طریقہ ایک کثیر اشاریہ ہم وقت معیار کنٹرول طریقہ ہے, جو بنیادی طور پر ایک روایتی چینی دوا میں اسی طرح کے ساختی اجزاء کے تعین میں استعمال کیا جاتا ہے. اس تجربے میں پیمائش کیے گئے چار اجزاء میں یکساں ساخت اور اسی طرح کے زیادہ سے زیادہ جذب کرنے کے طول موج (330این ایم پر ایچینسیا گلیکوسائڈز، ٹیوبروسائڈ اے 331این ایم، وربسکوسائڈ 330این ایم، اسوراسکوسائڈ 327این ایم) ہیں، لہذا یہ طریقہ استعمال کیا جاسکتا ہے۔ ایچینکوسائڈ کو داخلی حوالہ کے طور پر استعمال کرتے ہوئے، قائم کیلیبریشن عنصر مختلف کروماٹوگرافک نظاموں اور کروماٹوگرافک کالموں میں اچھی دوبارہ پیدا کرنے کی صلاحیت رکھتا ہے، اور ایک پیمائش-کثیر تشخیص طریقہ اور بیرونی معیاری طریقہ کے مواد کے نتائج میں کوئی خاص فرق نہیں ہے، جس سے ظاہر ہوتا ہے کہ طریقہ قابل عمل اور درست ہے، اور اسے حوالہ مادے میں استعمال کیا جاسکتا ہے۔ اگر اس کا حصول مشکل ہے یا مہنگا ہے تو یہ سیستانچے ڈیزیٹریکولا کے متعدد اشارے حاصل کر سکتا ہے

اجزاء کا تعین بیک وقت کیا جاتا ہے۔

جدول 7 ہر اجزاء کا مشمول（%，ن=3）

آخر میں، سیستانچے میں چار فینیلیتھانوئیڈ گلیکوسائڈز کی شناخت کے لئے ایک طریقہ کار کا قیام ازٹی ایل سیاور متعدد تشخیصات کے ساتھ ایک امتحان میں مواد کا تعین درست، قابل اعتماد، سادہ، تیز اور انتہائی قابل عمل ہے۔ اس کی عملی سائنسی اہمیت اور اطلاق کی قدر ہے۔