SARS-CoV-2 ہلکے COVID-19 صحت یاب مریضوں میں میموری B اور T سیل پروفائلز ✩

خلاصہ

مقاصد:

اینٹی وائرل اڈاپٹیو امیونٹی میں میموری بی سیلز (ایم بی سی) اور میموری ٹی سیلز (ایم ٹی سی) شامل ہیں۔ شدید ایکیوٹ ریسپائریٹری سنڈروم کورونا وائرس 2 (SARS-CoV-2) میں MBC اور MTC کی حرکیات مزید تفتیش کی ضمانت دیتی ہیں۔

اینٹی وائرل اڈاپٹیو امیونٹی ایک مدافعتی ردعمل ہے جو جسم کی طرف سے وائرل انفیکشن کے لیے تشکیل دیا جاتا ہے، جس میں سیلولر استثنیٰ اور مزاحیہ استثنیٰ کے دو پہلو شامل ہیں۔ سیلولر استثنیٰ بنیادی طور پر ٹی سیلز اور قدرتی قاتل خلیات کو براہ راست متاثرہ وائرس کو مارنے یا وائرس کی صفائی کو فروغ دینے کے لیے استعمال کرتا ہے۔ مزاحیہ استثنیٰ بنیادی طور پر اینٹی باڈیز کے ذریعے ثالثی کی جاتی ہے تاکہ دوبارہ انفیکشن کو بے اثر، صاف اور روکا جا سکے۔ قوت مدافعت سے مراد انسانی جسم کی بیرونی پیتھوجینک مائکروجنزموں اور نقصان دہ عوامل کے حملے کے خلاف مزاحمت کرنے کی صلاحیت ہے اور یہ انسانی جسم کے لیے بیماریوں کے حملے کے خلاف مزاحمت کی ایک اہم ضمانت ہے۔ اینٹی وائرل ایڈاپٹیو امیونٹی کا استثنیٰ سے گہرا تعلق ہے کیونکہ اینٹی وائرل اڈاپٹیو امیونٹی انسانی جسم کے لیے وائرل انفیکشن کے خلاف مزاحمت کا ایک اہم ذریعہ ہے۔ صرف مضبوط قوت مدافعت کی حالت میں ہی جسم کافی اینٹی وائرل اڈاپٹیو مدافعتی ردعمل پیدا کر سکتا ہے اور جلد سے جلد وائرس کو صاف کر سکتا ہے۔ ، وائرل انفیکشن کی روک تھام اور علاج کے مقصد کو حاصل کرنے کے لئے۔ پھر اپنی روزمرہ کی زندگی میں بھی ہمیں اپنی قوت مدافعت کو بہتر کرنے کی ضرورت ہے۔ ہم Cistanche استعمال کر سکتے ہیں۔ Cistanche مختلف قسم کے اینٹی آکسیڈنٹ مادوں، جیسے وٹامن سی، وٹامن سی، کیروٹینائڈز وغیرہ سے بھرپور ہے۔ یہ اجزاء آزاد ریڈیکلز کو ختم کر سکتے ہیں اور آکسیڈیٹیو تناؤ کو کم کر سکتے ہیں، مدافعتی نظام کی مزاحمت کو بہتر بنا سکتے ہیں۔

cistanche tubulosa فوائد پر کلک کریں۔

طریقے:

اس کراس سیکشنل اور طول بلد مطالعہ میں، خون سے ماخوذ MBC اور MTC ردعمل کا اندازہ 68 اینٹی اسپائیک IgG-پازیٹو ہلکے کورونا وائرس بیماری 2019 (COVID-19) میں وزٹ 1 پر 1 سے 7 ماہ کے درمیان کیا گیا (میڈین 4.1 ماہ) بیماری شروع ہونے کے بعد۔ SARS-CoV-2 اینٹی اسپائیک IgG کا تعین ELISA، MBC کے ذریعے SARS-CoV-2-مخصوص ریسیپٹر بائنڈنگ ڈومین (RBD) ELISpot، اور انٹرفیرون-gamma (IFN-)-، interleukin 2 (IL2) نے کیا تھا۔ )-، اور IFN- اور IFN- اور IL2 SARS-CoV-2 FluoroSpot کے ذریعے IL2-MTC کو خفیہ کرنا۔ پہلے دورے میں نمونے لیے گئے 24 مریضوں کے لیے، IgG، MBC، اور MTC کے تجزیے بھی 3 ماہ بعد دوسرے دورے پر کیے گئے۔

نتائج:

72 فیصد صحت یاب MBC- اور MTC-مثبت تھے، 18 فیصد MBC-مثبت اور MTC-منفی، اور 10 فیصد MTC-مثبت اور MBC-منفی تھے۔ اعلی MBC رسپانس لیول کا پتہ COVID-19 کے آغاز کے 3 ماہ بعد ہوا اور انفیکشن کے بعد 7 ماہ تک برقرار رہا۔ S1، S2_N، اور SNMO پیپٹائڈ پولز کے جواب میں شروع ہونے کے 1 ماہ بعد اہم MTC لیولز کا پتہ چلا۔ SNMO پر MTC ردعمل کی فریکوئنسی اور شدت S1 اور S2_N سے زیادہ تھی۔ طولانی تجزیہ نے یہ ظاہر کیا کہ یہاں تک کہ جب مخصوص مزاحیہ استثنیٰ میں کمی واقع ہوتی ہے، سیلولر استثنیٰ برقرار رہتا ہے۔ نتیجہ: مطالعہ کے نتائج SARS-CoV-2 انفیکشن کے بعد کم از کم 7 ماہ تک انکولی سیلولر استثنیٰ کی پائیداری کو ظاہر کرتے ہیں، جو دیرپا تحفظ کا مشورہ دیتے ہیں۔

1. تعارف

پرائمری انفیکشن (Achiron et al., 2021; Hartley et al., 2020; Rodda et al., 2021؛ Sakharkar et al. نتیجے کے طور پر، SARS-CoV-2 کے خلاف دیرینہ استثنیٰ کی طرف توجہ مبذول کرائی گئی ہے جس میں میموری B اور میموری T خلیات (بالترتیب MBC اور MTC) شامل ہیں۔ مخصوص اینٹی SARS-CoV-2 MBC اور MTC کی موجودگی صحت یاب ہونے والے مریضوں میں ظاہر کی گئی ہے (فورتھل، 2021؛ ہارٹلی وغیرہ، 2020؛ پینگ ایٹ ال۔، 2006؛ پینگ ایٹ ال۔، 2020؛ روڈا et al.

کئی حالیہ مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ SARS-CoV-2-مخصوص IgG برقرار رہتا ہے اور اس کے ساتھ بیماری شروع ہونے کے بعد 8-9 ماہ تک MBC اور MTC کے تناسب میں بیک وقت اضافہ ہوتا ہے (Dan et al., 2021; Sandberg et al. , 2021؛ Sherina et al. 2020؛ روڈا وغیرہ، 2021؛ سخرکار وغیرہ، 2021)۔

کورونا وائرس کی بیماری 2019 (COVID-19) کے علاج کے دوران IgG کی سطح میں کمی کی اطلاع کے پیش نظر، دوبارہ انفیکشن کی صورت میں دوبارہ کال کے مدافعتی ردعمل کے لیے دیرپا انڈیپٹیو امیونٹی سب سے زیادہ متعلقہ ہے۔ سیرونگیٹو افراد میں SARSCoV-2 کے دوبارہ انفیکشن کی حال ہی میں کم تعدد کی اطلاع دی گئی ہے (Leidi et al., 2021; Murchu et al., 2021) نے SARS-CoV2 کے خلاف دفاع کے امکان کو دوبارہ کال کرنے سے اڈاپٹیو امیونٹی کو بڑھا دیا ہے۔ . لہذا، یہ مطالعہ SARS-CoV-2 MBC اور MTC ردعمل اور اینٹی سپائیک IgG- مثبت ہلکے COVID-19 مریضوں میں MTC کے ذخیرے کی پروفائل کے لیے کیا گیا تھا۔ خاص طور پر، IgG لیول میں کمی کے ساتھ COVID{18}} صحت یاب ہونے والے MBC اور MTC ردعمل کا جائزہ لیا گیا۔

2. طریقے

2.1 امیدوار

مطالعہ میں SARS-CoV-2 صحت یابی کو درج ذیل معیار کے مطابق شامل کیا گیا تھا: (1) مثبت RT-PCR SARS-CoV-2 RNA nasopharyngeal swab; (2) مثبت اینٹی SARS-CoV-2 IgG ٹیسٹ۔ مریضوں میں سے کسی کو بھی ہسپتال میں داخلے کی ضرورت نہیں تھی اور بیماری کی شدت ہلکی تھی، مریضوں میں کم از کم درج ذیل علامات میں سے ایک علامت تھی: تھکاوٹ، کمزوری، پٹھوں میں درد، کھانسی اور بخار۔ صحت مند افراد جن میں SARS-CoV-2 کی علامات کی کوئی تاریخ نہیں، متاثرہ مریض سے کوئی گھریلو رابطہ نہیں ہے، اور جو اینٹی اسپائک SARS-CoV-2 کے لیے سیرونگیٹو تھے، انہیں منفی کنٹرول گروپ کے طور پر شامل کیا گیا تھا۔ مدافعتی تشخیص کے لیے خون کے نمونے تمام شرکاء (N=84) سے حاصل کیے گئے، بشمول 68 صحت یاب اور 16 صحت مند مضامین۔ MBC کے جواب کا تعین تمام 68 صحت یاب ہونے والوں میں کیا گیا تھا، اور 41 کا پہلے دورے میں MTC کے لیے جائزہ لیا گیا تھا۔ طول البلد مطالعہ کے لیے، 3 ماہ بعد (دوسرا دورہ) کے اینٹی اسپائک آئی جی جی ٹیسٹ میں کمی کی خصوصیت والے 24 مریضوں کا دوبارہ MBC اور MTC ٹیسٹوں کے ذریعے تجزیہ کیا گیا۔

2.2 اخلاقیات کا بیان

اس مطالعہ کو شیبا انسٹیٹیوشنل ریویو بورڈ (SMC-750320) نے منظور کیا تھا اور تمام شرکاء سے باخبر رضامندی حاصل کی گئی تھی۔

2.3 SARS-CoV-2 اینٹی سپائیک S1 IgG اینٹی باڈیز کا پتہ لگانا

خون کے نمونوں میں SARS-CoV-2 IgG اینٹی باڈیز کا پتہ لگانے کے لیے امیونوسے Euroimmun (EI, Lubeck, Germany) anti SARS-CoV-2 IgG مقداری ELISA کٹ کا استعمال کرتے ہوئے انجام دیا گیا تھا SARS-CoV-2 سپائیک پروٹین کا ذیلی یونٹ۔ یہ ٹیسٹ تیار کنندہ کی ہدایات کے مطابق چست خودکار ELISA تجزیہ کار (DYNEX Technologies Inc., Chantilly, VA, USA) کے ذریعے کیے گئے۔ آپٹیکل کثافت (OD) کا پتہ 450 nm پر ہوا، اور کٹ میں شامل کیلیبریٹر کے پڑھنے سے ہر نمونے کے پڑھنے کا تناسب، ہر نمونے کے لیے شمار کیا گیا تھا (ذیل میں IgG سکور کے طور پر کہا جاتا ہے )۔ 1.0 سے زیادہ آئی جی جی سکور کی قدروں کو مثبت سمجھا جاتا تھا۔

2.4 COVID-19 میموری B سیل اور میموری T سیل کے جوابات

SARS-CoV-2-مخصوص MBC کا تجزیہ FluoroSpot پرکھ کا استعمال کرتے ہوئے ریسیپٹر بائنڈنگ ڈومین (RBD) سے مخصوص MBC سے ماخوذ IgG سیکریٹنگ سیلز کا پتہ لگانے کے لیے کیا گیا، پولی کلونل B سیل محرک کے بعد۔ مینوفیکچرر کی ہدایات کے مطابق ہیومن IgG SARS-CoV-2 ریسیپٹر بائنڈنگ ڈومین (RBD) مخصوص ELISpot PLUS کٹ (ALP کٹ؛ Mabtech، Sweden) استعمال کیا گیا تھا۔ مختصراً، R848 (1 ug/ml) اور interleukin 2 (IL2) (10 ng) کے مرکب کے ساتھ محرک کے بعد پیریفرل بلڈ مونو نیوکلیئر سیل (PBMC) کو اینٹی آئی جی جی فلورو اسپاٹ پلیٹ پر انکیوبیٹ کیا گیا (250 000 خلیات/کنواں) /ml) (بی سیل اسٹیم پیک؛ مابٹیک، سویڈن)۔ SARS-CoV-2-مخصوص IgG-secreting B خلیات کی تعداد کو Mabtech IRIS ریڈر کا استعمال کرتے ہوئے اسپاٹ فارمنگ یونٹس (SFU) میں ماپا گیا۔ غیر محرک خلیوں کے پس منظر کو گھٹانے کے بعد نتائج کو SFU فی 250 000 سیڈ سیل کی تعداد کے طور پر ظاہر کیا گیا۔ مثبت کٹ آف قدر صحت مند مضامین (HS) میں 90 فیصد اعتماد کے وقفے سے اوپر رکھی گئی تھی۔

انٹرفیرون-گاما (IFN-)-، IL2-، اور IFN- plus IL2-سیکریٹنگ MTC کا پتہ انسانی IFN- اور IL2 SARS-CoV-2 FluoroSpot PLUS کٹس کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا کارخانہ دار کا پروٹوکول (Mabtech AB، سویڈن)۔ مونوکلونل اینٹی IFN- /IL2 والی پری لیپت پلیٹوں کو RPMI-1640 میڈیم میں راتوں رات انکیوبیٹ کیا گیا تھا جس میں SARSCoV کے ساتھ 1{{20} فیصد فیٹل کاف سیرم (FCS) ضمیمہ تھا{{16} } پیپٹائڈ پول یا غیر مخصوص اینٹی CD3 محرک (0.1 ug/ml) اینٹی CD28 (0.1 ug/ml) اور 300 000 خلیات کی موجودگی میں ایک مرطوب انکیوبیٹر میں فی کنواں (5 فیصد CO2، 37 ڈگری )۔

SARS-CoV-2 S1 سکیننگ پول انسانی SARS-CoV-2 وائرس (#3629-1؛ Mabtech AB) سے 166 پیپٹائڈس پر مشتمل ہے۔ پیپٹائڈس 11 امینو ایسڈز کے ساتھ اوورلیپنگ 15-میرس ہیں، جو S پروٹین کے S1 ڈومین (امائنو ایسڈ 13–685) کو ڈھانپتے ہیں۔ S1 پول کو S1_1 (1–83) اور S1_2 (84–166) پیپٹائڈس کے طور پر فراہم کیا جاتا ہے۔ SARS-CoV-2 SNMO سے متعین پیپٹائڈ پول میں 47 مصنوعی پیپٹائڈز ہوتے ہیں جو انسانی لیوکوائٹ اینٹیجن (HLA) کے پابند ہوتے ہیں، جو S, N, M, ORF3a، اور ORF7a پروٹین (#3622-1; Mabtech) سے ماخوذ ہوتے ہیں۔ AB) (Peng et al.، 2020)۔ SARS-CoV-2 S2_N defined peptide pool میں SARS-CoV-2 وائرس (#-2) کے S اور N پروٹین سے اخذ کردہ HLA سے منسلک 41 مصنوعی پیپٹائڈز شامل ہیں۔ }، Mabtech AB) (احمد وغیرہ، 2020)۔

ELISpot اور FluoroSpot Asses کے نتائج کا اندازہ IRIS ریڈر کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا اور IRIS سافٹ ویئر ورژن 1.1.9 (Mabtech AB) کا استعمال کرتے ہوئے تجزیہ کیا گیا۔ پیپٹائڈ پول کے مخصوص جوابات کو IFN- -، IL2-، یا IFN- پلس IL2-پیدا کرنے والے MTC کی پیمائش کے ذریعے درست کیا گیا۔ کم از کم 5{9}} SFU کی پیمائش، جو کلچر میڈیا میں SFU پس منظر سے کم از کم 2- گنا زیادہ تھی، کو مثبت سمجھا جاتا تھا۔ پس منظر کا SFU پیمائش سے منہا کر کے SFU/250 000 سیلز کے بطور ظاہر کیا گیا۔ مجموعی طور پر IFN- -, IL2-، یا IFN- plus IL2-MTC ردعمل کو مثبت یا منفی کے طور پر تیار کرنے کے لیے، IFN- , IL2 کے لیے کم از کم ایک مثبت جواب والے مضامین ، یا IFN- plus IL2 سے لے کر کم از کم SARS-CoV-2 پیپٹائڈ پولز میں سے ایک کو مدنظر رکھا گیا تھا۔ تجزیہ شدہ سائٹوکائنز میں سے کسی ایک کے بارے میں مسلسل مجموعی MTC ردعمل کا جائزہ لینے کے لیے، S1، S2_N، اور SNMO پیپٹائڈس کے جواب میں مخصوص سائٹوکائن سیکریٹنگ MTC کے مثبت SFU کا خلاصہ کیا گیا جیسا کہ پہلے بیان کیا گیا ہے (شیرینا ایٹ ال۔ ، 2021)۔ مثبت کٹ آف قدر صحت مند کنٹرولز میں مخصوص MTC کی تعداد کے 90 فیصد اعتماد کے وقفے سے اوپر رکھی گئی تھی۔

2.5 شماریاتی تجزیہ

تمام مسلسل خصوصیات کو اوسط ± معیاری انحراف (SD) کے طور پر بیان کیا گیا ہے۔ غیر مسلسل خصوصیات کو 25-75 فیصد انٹرکوارٹائل رینج (IQR) کے ساتھ میڈین کے طور پر بیان کیا گیا ہے۔ اختلافات کا تعین مان – وٹنی یو-ٹیسٹ، فشر کے عین مطابق ٹیسٹ، اور چی اسکوائر ٹیسٹ؛ ارتباط کا اندازہ اسپیئر مین (رینک) ٹیسٹ کے ذریعے کیا گیا۔ ایک پی ویلیو<0.05 indicated significance.

3. نتائج

اڑسٹھ اینٹی اسپائک-آئی جی جی مثبت COVID-19 صحت یاب ہونے والے، 25 خواتین، اور 43 مرد، یعنی عمر 39.3 ± 13.2 سال، 4.1 ماہ (IQR) کے پہلے دورے پر بیماری کے آغاز (TFO) کے درمیانی وقت کے ساتھ۔ 2.6-6.1 ماہ) کو مطالعہ میں شامل کیا گیا تھا۔ MBC تجزیہ پہلے سے ہی 1-ماہ کے TFO پر تھا اور 7 ماہ تک جاری رہا (P< 0.005; Figure 3B–D). Notably, while anti-spike IgG levels, MBC, and MTC were significantly higher than in the HS, no statistical differences were observed in convalescents at the different time points.

اینٹی آر بی ڈی ایم بی سی کی تعداد اور اینٹی اسپائک آئی جی جی لیول (r=0.39، P=0.0009) اور IL2-سیکرٹنگ MTC (r {) کے درمیان اہم ارتباط دیکھے گئے۔ {7}}.45، P=0.004)، لیکن IFN- - سیکریٹنگ MTC (r=0.3، P=0.05) (شکل 4A) کے ساتھ کم –C)، جبکہ IFN- - اور IL2-سیکرٹنگ MTC بھی باہم مربوط تھے (r=0.48, P=0.001; شکل 4D)۔ IgG اور MTC کے درمیان اور MBC اور MTC کے درمیان TFO کے ساتھ کوئی خاص ارتباط نہیں دیکھا گیا۔

3.2 SARS-CoV-2-مخصوص T سیل میموری کا ذخیرہ

اس بات کا تعین کرنے کے لیے کہ آیا MTC COVID{{0}} صحت یابی میں تیار اور برقرار رہا، IFN- -، IL2-، اور IFN پلس IL2-کی تعداد SARS-CoV2 S1، S2_N، اور SNMO پیپٹائڈ پولز کے ساتھ محرک کے ردعمل کو بیک وقت ناپا گیا۔ مثبت IFN- -، IL2-، اور IFN- plus IL2-secreting MTC والے افراد کی نمایاں طور پر سب سے زیادہ تعدد SNMO پول کے جواب میں دیکھی گئی (82.9 فیصد، 57.5 فیصد، اور بالترتیب 72.3 فیصد) S1 کے مقابلے میں (56.6 فیصد، 34.1 فیصد، اور 43۔{25}} فیصد، بالترتیب؛ P < 0.0001) اور S2_N (31.7 فیصد، بالترتیب 7.3 فیصد، اور 17.5 فیصد؛ P <0.0001) (ضمنی مواد ٹیبل S1)۔ اس کے علاوہ، SNMO کے جواب میں MTC پیدا کرنے والے کم از کم IFN- -کی SFU سطحیں S1 یا S2_N (ضمنی مواد کی جدول S2) کے جواب میں نمایاں طور پر زیادہ تھیں۔

جیسا کہ SFU نمبر سے ظاہر ہوتا ہے، SNMO پول کے ساتھ محرک IFN{{0}}، IL2-، اور IFN- پلس IL{{3} کے پہلے فوری اور زیادہ مستقل ردعمل کی خصوصیت رکھتا تھا۔ }S1 اور S2_پیپٹائڈس کے ساتھ محرک کے بجائے MTC کو خفیہ کرنا۔ SNMO کے ساتھ محرک کے بعد، IFN- -، IL2-، اور IFN- plus IL2-سیکریٹنگ MTC میں TFO کے 1 مہینے کے بعد پہلے ہی نمایاں اضافہ ہوا ہے اور اب بھی 7 ماہ تک بڑھا ہوا ہے۔ فالو اپ (P <0.05) (شکل 5)۔ S1 پیپٹائڈس کا جواب تاخیر سے تھا اور 5 اور 7 ماہ میں HS سے نمایاں طور پر مختلف تھا یا تو سائٹوکائن تیار کرنے والے MTC (ضمنی مواد کے اعداد و شمار S2) میں۔ S2_N پیپٹائڈ پول کا ردعمل معمولی تھا اور IFN- -سیکریٹنگ MTC میں 5 ماہ کے TFO (ضمنی مواد کی شکل S3) میں دیکھا گیا۔ IFN- -، IL2-، اور IFN- plus IL2-کی سطحوں میں کوئی شماریاتی فرق نہیں دیکھا گیا جو MTC کو مختلف ٹائم پوائنٹس پر صحت یاب کرتے ہیں۔

3.3 طولانی تجزیہ

جیسا کہ پہلے دکھایا گیا، SARS-CoV-2 اینٹی سپائیک IgG کی سطح میں 50 فیصد کمی واقع ہوئی لیکن پھر بھی 9 مہینوں میں غالب رہی (Achiron et al., 2021)۔ طول بلد میموری سیل کے ردعمل کو بہتر طور پر سمجھنے کے لیے، ایک ہی مریض سے دو بار بار آنے والے IgG، MBC، اور MTC کی حرکیات کا تجزیہ کیا گیا۔ خاص طور پر، سیلولر میموری کی خصوصیت 24 صحت یاب ہونے والوں میں تھی جو پہلے وزٹ میں اینٹی اسپائک آئی جی جی پازیٹو تھے اور دوسرے دورے میں آئی جی جی کی سطح میں کمی آئی تھی۔ پہلی بار پوائنٹ (میڈین 1.22، IQR 1.14–1.58) پر مثبت IgG والے 24 میں سے چھ مریض دوسرے ٹائم پوائنٹ (میڈین 0.66، IQR 0 پر IgG-منفی پر بدل گئے۔ 40–0.96؛ P=0۔{57}}08) (شکل 6A)۔ اس ذیلی گروپ کے تمام مریضوں میں MBC کی تعداد میں اضافہ یا کوئی تبدیلی نہیں تھی: میڈین 23.5 (IQR 0–28.9) اور میڈین 28.1 (IQR 19۔{77}}–56.3)، بالترتیب (P=0.002) (شکل 6B)۔ تاہم، مجموعی طور پر IFN-secreting، IL2-secreting، اور IFN- plus IL2-Ssecreting MTC دونوں ٹائم پوائنٹس پر مستقل رہے: میڈین 17.7 (IQR 3.22–45.2) اور 5.85 (IQR 0–41.9 )، میڈین 9.5 (IQR 0–24.4) اور 7.7 (IQR 0–34.0)، اور میڈین 20.9 (IQR 1.65–34.6) اور 8.95 (IQR 4.75–18.5)، بالترتیب (P > 0.05) (Supleary FD) )۔

In contrast, the 18 patients with decreased IgG yet remaining IgG-positive (median 3.91 (IQR 2.81–7.73) and 2.53 (IQR 1.89–3.88); P = 0.01) (Figure 6C) displayed no significant changes in MBC (median 30.5 (IQR 1.73–56.3) and 12.1 (IQR 0–60.8); P = 0.2) (Figure 6D) and in the overall IFN-γ -secreting, IL2-secreting, and IFN-γ +IL2-secreting MTC (median 15.0 (IQR 0.68–38.6) and 25.7 (IQR 0.9–38.5), median 4.8 (IQR 0–22.4) and 8.45 (IQR 0–30.5), and median 5.4 (IQR 0–23.9) and 19.9 (IQR 0–42.5), respectively) (P >0.05) (ضمنی مواد کی شکل S4E–H)۔

4. بحث

دوبارہ انفیکشن کی روک تھام میں سیلولر میموری کے اجزاء شامل ہیں جو میموری B اور T خلیات کو پیدا کرنے والے اینٹیجن مقابلوں کا تیزی سے جواب دینے کے لیے پروگرام کیے گئے ہیں (Cromer et al.، 2021؛ Forthal، 2021؛ Mazzoni et al.، 2021؛ Turner et al. وغیرہ، 2020)۔ اس مطالعہ نے SARS-CoV-2 پیپٹائڈس کے لیے مخصوص SARSCoV-2 اینٹی سپائیک اینٹی باڈیز اور پائیدار میموری B اور T سیل ردعمل کی بیک وقت موجودگی کو ظاہر کیا ہے مہینوں بعد انفیکشن. یہ ظاہر کیا گیا کہ MBC اور MTC کی سطح شروع ہونے کے فوراً بعد بڑھ گئی۔ خاص طور پر، MTC ردعمل RBD مخصوص MBC سے پہلے تھا، جیسا کہ پہلے بتایا گیا ہے (ڈین ایٹ ال۔، 2021)۔ MTC ردعمل کی خصوصیت IFN- -, IL2-، اور IFN- plus IL2-S1, S2_N, اور SNMO پیپٹائڈ پولز کے جواب میں MTC کو خفیہ کرتی ہے۔

مزاحیہ اور انکولی مدافعتی ردعمل کی مشاہدہ شدہ حرکیات نے پچھلی اشاعتوں کی تصدیق کی جس میں بتایا گیا ہے کہ اینٹی اسپائک آئی جی جی تشخیص کے 6 ماہ بعد تک مستحکم رہا (ڈین ایٹ ال۔، 2021؛ گیبلر ایٹ ال۔، 2021؛ ہارٹلی ایٹ ال۔ وغیرہ، 2021)۔ اسپائیک کے خلاف پایا جانے والا مزاحیہ ردعمل اور RBD کے خلاف یاد کرنے والی میموری B سیل ردعمل، SARS-CoV-2 انفیکشن سے دیرپا تحفظ کی حمایت کرتا ہے۔ مزید یہ کہ، مطالعہ کے نتائج بتاتے ہیں کہ یہاں تک کہ جب SARS-CoV{10}} اینٹی باڈی لیول سیرون نیگیٹو میں بدل جاتا ہے، MBC اور MTC کی موجودگی ممکنہ طور پر دوبارہ انفیکشن کی صورت میں دفاع فراہم کرتی ہے۔ متعدد مطالعات میں لگ بھگ 1 فیصد دوبارہ انفیکشن کی وضاحت کی گئی ہے (لیڈی ایٹ ال۔، 2021؛ مرچو وغیرہ۔، 2021)۔ دوبارہ انفیکشن کے معاملات کی اس کم تعدد کی وضاحت ممکنہ طور پر انکولی قوت مدافعت کے اجزاء، یعنی میموری B اور T خلیات کی موجودگی اور شمولیت سے کی جا سکتی ہے۔ اس خیال کو ایک حالیہ مطالعہ (McMahan et al., 2021) سے مزید تقویت ملی ہے، جس نے ظاہر کیا ہے کہ نسبتاً کم اینٹی باڈی ٹائٹرز SARS-CoV کے خلاف تحفظ کے لیے کافی ہیں{18}} rhesus macaques میں اور یہ کہ سیلولر مدافعتی ردعمل تحفظ میں حصہ ڈال سکتے ہیں۔ اگر اینٹی باڈی ردعمل سب سے بہتر ہیں۔

IFN- -سیکریٹنگ انفیکٹر MTC کی دریافتیں داخلے کی روگجنوں کی جگہوں پر فوری، لیکن پائیدار تحفظ کی تجویز نہیں کرتی ہیں، جبکہ مرکزی MTC جس کی خصوصیت IL2 یا IFN-plus IL2 سراو ہے، ثانوی میں پھیلتے ہوئے ایک پائیدار دیرپا ردعمل کی تجویز کرتی ہے۔ لیمفائیڈ اعضاء اور نئے اثر کرنے والوں کی فراہمی (فورتھل، 2021)۔

IL2 مخصوص T خلیوں کی سیلولر توسیع اور انفیکٹر اور میموری T خلیات (Abbas et al.، 2018) کی نسل کے لیے ایک نمو کا عنصر ہے، جیسا کہ پہلے PBMCs کے شدید اور صحت یاب ہونے والے دونوں COVID سے وٹرو محرک پر پتہ چلا ہے۔ 2}} مریض (Braun et al., 2020; Grifoni et al., 2020; Peng et al., 2020; Sekine et al., 2020; Thiem et al., 2020; Weiskopf et al., 2020)۔ انٹرا سیلولر سٹیننگ نے انکشاف کیا کہ سی ڈی 8 پلس ٹی سیل اور سی ڈی 4 پلس ٹی سیل دونوں اس سائٹوکائن کے ذرائع ہیں، لیکن سی ڈی 4 پلس ٹی سیلز اہم پروڈیوسر دکھائی دیتے ہیں (براؤن ایٹ ال۔، 2020؛ گریفونی ایٹ ال۔، 2020؛ پینگ ایٹ ال۔ 2020؛ Sekine et al.، 2020)۔ IFN- اور IL2 کی پیداوار کی بنیاد پر، SARS-CoV-2-مخصوص CD4 پلس T خلیات کو تین الگ الگ آبادیوں میں تقسیم کیا جا سکتا ہے: سنگل IFN- -خفیہ خلیات، ڈبل IFN- جمع IL{{23} }خفیہ خلیات، اور واحد IL2-خفیہ خلیات (Yang et al.، 2006)۔ یہ درجہ بندی MTC کی متفاوتیت کو مزید ظاہر کرتی ہے اور یہ بھی بتاتی ہے کہ میموری CD4 پلس T خلیوں کی الگ الگ ذیلی آبادیوں میں مختصر/اثر IFN- -خفیہ اور طویل المدت/مرکزی IL2-خفیہ اور IFN- plus IL2-secreting MTC (Yang et al.، 2006)۔

جیسا کہ توقع کی گئی تھی، مطالعہ کے نتائج نے تمام SARS-CoV-2 پیپٹائڈ پولز کے لیے T-cell کے ردعمل کا مظاہرہ کیا۔ خاص طور پر صحت یاب ہونے والوں میں، SNMO پیپٹائڈ پول نے میموری کے مضبوط ترین T سیل جوابات حاصل کیے، جو ممکنہ طور پر وائرل پارٹیکل کے تمام اجزاء بشمول سپائیک (S)، نیوکلیوپروٹین (N)، جھلی پروٹین (M)، اور ORF (ORF) کی نمائش کی عکاسی کرتے ہیں۔ 3}a اور ORF-7a (Peng et al.، 2020)۔ اگرچہ ایسا لگتا ہے کہ SNMO پول S1 یا S2 کے مقابلے میں زیادہ ردعمل پیدا کرے گا، لیکن پچھلے مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ S1 پول میں صحت مند کنٹرولوں کے مقابلے COVID-19- بازیاب ہونے والے افراد میں نمایاں طور پر زیادہ رد عمل ہوتا ہے اور SFU میں تبدیلیاں ہوتی ہیں۔ S1 پول SNMO (Long et al., 2021) سے زیادہ ہے۔ مزید برآں، صحت یاب ہونے والے N پیپٹائڈ پول کے مقابلے میں نمایاں طور پر زیادہ پولی فنکشنل T خلیات S1 پیپٹائڈ پول کا جواب دیتے ہیں (سینڈبرگ ایٹ ال۔، 2021)۔ لہذا S1 پول کے مقابلے میں اعلی SNMO SFU ردعمل کی تلاش آسانی سے سیدھی نہیں ہے۔

اس کے باوجود، ہم توقع کرتے ہیں کہ ویکسین شدہ مضامین (mRNA پر مبنی ویکسین؛ Pfizer BNT162b2 کے ساتھ) کا ردعمل اسپائیک پروٹین پیپٹائڈ پول میں غالباً حاصل کیا جائے گا۔

حال ہی میں تیار کردہ اینٹی SARS-CoV-2 ویکسین اور ٹیکے لگائے گئے افراد میں اینٹی باڈی ٹائٹرز میں کمی کی اطلاع دی گئی (بیٹس ایٹ ال۔ ، سیرونگیٹیو اسٹیٹس پر سوئچ کرنے والے مریضوں میں MBC اور MTC کی سطحوں کی پیروی کرنا دلچسپ تھا۔ گردش کرنے والی اینٹی باڈیز میں کمی کے مریضوں میں اہم سوال یہ ہے کہ کیا SARS-CoV-2 انفیکشن کے خلاف مدافعتی مزاحمت کے دیگر عناصر اب بھی موجود ہیں۔

مطالعہ کے نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ ایسے مریضوں میں T اور B سیل کے مضبوط ردعمل نہ صرف برقرار رہے بلکہ اس میں اضافہ بھی ہوا، جیسا کہ پچھلے مطالعہ کے نتائج کی طرح جس میں SARS-CoV{1}}مخصوص IgG کو غائب کرنا ایک پائیدار میموری T سیل سے منسلک تھا۔ آئی جی جی پازیٹو رہنے والے صحت یاب ہونے والوں کے مقابلے میں ردعمل (Schwarzkopf et al.، 2021)۔ موجودہ مطالعے کے نتائج مڈل ایسٹ ریسپریٹری سنڈروم کورونا وائرس (MERS-CoV) اور شدید ایکیوٹ ریسپائریٹری سنڈروم کورونا وائرس 1 (SARS-CoV-1) انفیکشن سے متعلق پچھلی اشاعتوں کے مطابق ہیں جن میں میموری ٹی سیل کا ردعمل دیکھا گیا جب اینٹی باڈی کا ردعمل کم ہو گیا (ابایاسنگم ایٹ ال۔، 2021؛ الشوکیری ایٹ ال۔، 2016؛ چنپپناور ایٹ ال۔، 2014؛ زاؤ ایٹ ال۔، 2017)۔

اسی طرح، Sandberg et al. (2021) اور شیرینا وغیرہ۔ (2020) (Sandberg et al., 2021; Sherina et al., 2021) نے SARS-CoV-2 شروع ہونے کے بعد 8-9 ماہ میں آہستہ آہستہ اینٹی باڈی کی سطح میں کمی والے مریضوں میں MBC اور MTC کے مضبوط ردعمل ظاہر کیے (Dan et al. ، 2021)۔ اس سے پتہ چلتا ہے کہ اگرچہ اینٹی باڈی کے ٹائٹرز ختم ہو جاتے ہیں، لیکن مستقبل میں ہونے والے انفیکشنز کے لیے ایک مؤثر مدافعتی ردعمل سیلولر میموری اجزاء کے ذریعے تیار کیا جا سکتا ہے۔ SARS-CoV کی اعلی اتپریورتن کی شرح-2 اور ممکنہ مدافعتی فرار، اور یہ کہ مختلف اسپائیک اتپریورتنوں سے SARS-CoV-2 antigenicity (Harvey et al.، 2021) کو نقصان پہنچتا ہے، یہ ایک کھلا سوال ہے کہ آیا اصل میموری سیلز SARS-CoV-2 مختلف حالتوں کے ساتھ کراس ری ایکٹ کریں گے۔

اگرچہ موجودہ شواہد کہ اسپائیک امینو ایسڈ کی تبدیلیاں اینٹی باڈی نیوٹرلائزیشن کو متاثر کرتی ہیں (Harvey et al., 2021) اور کچھ مختلف قسمیں SARS-CoV-2 انفیکشن یا BNT162b2 ویکسینیشن، مخصوص CD4 پلس T سیل ایکٹیویشن کے ذریعے پیدا ہونے والی مزاحیہ قوت مدافعت سے جزوی طور پر بچ سکتی ہیں۔ کم از کم B.1.1.7 اور B.1.351 مختلف حالتوں (Geers et al.، 2021) میں تغیرات سے متاثر نہیں ہوتا ہے۔ SARSCoV-2 مختلف حالتوں کا تجزیہ Tarke et al. 2021 میں مجموعی SARS-CoV-2 T سیل ری ایکٹیویٹی کو نمایاں طور پر متاثر نہیں کیا؛ تاہم، جوابات میں دیکھی گئی کمی SARS-CoV-2 ارتقاء (Tarke et al.، 2021) کے تناظر میں T سیل ری ایکٹیویٹی کی فعال نگرانی کی اہمیت کو اجاگر کرتی ہے۔

آخر میں، (1) SARS-CoV-2 کے صحت یاب ہونے والے مریضوں میں 7 ماہ تک ہلکی علامات والے پائیدار مدافعتی مزاحیہ اور انکولی ردعمل دیکھے گئے، جو صحت یاب ہونے والے افراد میں مزاحیہ اور انکولی استثنیٰ کی لمبی عمر بتاتے ہیں۔ (2) صحت یاب ہونے والے مریضوں میں، S1، S2_N، اور SNMO پیپٹائڈ پولز کے لیے T سیل کے جوابات IFN- - اور IL2- کو خفیہ کرنے والے T خلیات اور پولی فنکشنل پیش کرتے ہوئے نمایاں تھے۔ IFN- plus IL2-T خلیات کو خفیہ کرتا ہے۔ (3) صحت یاب ہونے والے مریضوں میں، ایک گھٹتا ہوا اینٹی سپائیک IgG ٹائٹر مضبوط MBC اور IFN{14}}کے ساتھ ہو سکتا ہے جو MTC تیار کرتا ہے، جو ممکنہ دیرپا یادداشت کے ردعمل اور دوبارہ انفیکشن کے خلاف دفاع کی تجویز کرتا ہے۔

اعلانات

فنڈنگ

مصنفین کو عوامی، تجارتی، یا غیر منافع بخش شعبوں میں کسی فنڈنگ ​​ایجنسی سے کوئی خاص گرانٹ نہیں ملی۔

اخلاقی منظوری

مصنفین اعلان کرتے ہیں کہ انہوں نے مضمون میں شامل مریضوں سے باخبر رضامندی حاصل کی ہے اور یہ کہ اس رپورٹ میں ایسی کوئی ذاتی معلومات نہیں ہے جو ان کی شناخت کا باعث بن سکے۔

مفادات کا تصادم

مصنفین کے پاس رپورٹ کرنے کے لیے دلچسپی کا کوئی تنازعہ نہیں ہے۔

اضافی مواد

اس مضمون سے منسلک اضافی مواد، آن لائن ورژن میں، doi:10.1016/j.ijid.2021.12.309 پر پایا جا سکتا ہے۔

For more information:1950477648nn@gmail.com