کاسمیٹک مصنوعات میں ہائیڈرو فیلک سفید کرنے والے ایجنٹوں کا بیک وقت HPLC تعین

رابطہ:joanna.jia@wecistanche.com/ واٹس ایپ: 008618081934791

Miaw-Ling Chang a, Chur-Min Chang b,*

خلاصہ

سب سے زیادہ استعمال ہونے والے ہائیڈرو فیلک میں سے چار کی مقدار درست کرنے کے لیے ایک اعلی کارکردگی والا مائع کرومیٹوگرافک طریقہسفید کرناایجنٹ*/گلائیکولک ایسڈ (GA)، ascorbic ایسڈ (AA)،arbutin(اے آر ٹی)، اور ایم جی ایسکوربل فاسفیٹ (ایم اے پی) تیار کیے گئے ہیں۔ Isocratic علیحدگی ایک C18 کالم کا استعمال کرتے ہوئے آئن پیئر ایجنٹ کے ساتھ موبائل فیز کے طور پر کی گئی تھی۔ تجزیہ کاروں کو بالترتیب 220 اور 240 nm کی طول موج پر بالائے بنفشی روشنی جذب کرنے سے پتہ چلا۔ انشانکن کے منحنی خطوط 8۔{5}} mg/ml (GA), 10۔{7}} mg/ml (AA and ART)، اور 5۔{9}} mg/ml ( MAP)۔ لکیری ریگریشن تجزیہ کا ارتباط کا گتانک رینج 0 کے ساتھ تھا۔{11}}.9997۔ چار تجزیہ کاروں کی بازیافت 94.8 اور 100.1 فیصد کے درمیان تھی اور اس طریقہ کار کی درستگی 6.9 فیصد رشتہ دار معیاری انحراف (RSD) (n=3) سے بہتر تھی۔ یہ پایا گیا کہ AA ایک آبی محلول میں انحطاط پذیر ہوا۔ اس بات کا یقین کرنے کے لیے کہ AA HPLC تجزیہ کے دوران مستحکم تھا، تمام تجزیہ کاروں کو کشید پانی میں تحلیل کر دیا گیا تھا اور ان محلولوں کو نائٹروجن گیس سے صاف کیا گیا تھا تاکہ آکسیجن کو ہٹا کر 25 8C پر محفوظ کیا جائے۔ جانچ کے نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ یہ طریقہ کار تیز، آسان، انتخابی طریقہ ہے اور یہ تجارتی کے معمول کے تجزیہ کے لیے موزوں ہے۔کاسمیٹکس.# 2003 Elsevier BV جملہ حقوق محفوظ ہیں۔

مطلوبہ الفاظ: کاسمیٹک مصنوعات ہائیڈرو فیلک سفید کرنے والا ایجنٹ؛ گلیکولک ایسڈ؛ ascorbic ایسڈ؛ اربوٹین؛ ایم جی ایسکوربل فاسفیٹ؛ HPLC

Cistanche herbaایک قدرتی سفید کرنے والا ایجنٹ ہے۔

1. تعارف

مغربی لوگ دھندلی جلد کو صحت مند اور خوبصورت سمجھتے ہیں۔ اس کے برعکس مشرقی ممالک میں ہلکی جلد کو خوبصورت سمجھا جاتا ہے۔ لہذا، سفید کرنے والے لوشن نظریاتی میں بہت مقبول ہیں. ان کا اطلاق جلد کو سفید کرنے کے لیے کیا جاتا ہے۔ کیمیکل چھیلنے کا استعمال عام طور پر مہاسوں، میلاسما، عام مسوں وغیرہ سے پیدا ہونے والی خراب چہرے کی جلد کے طبی علاج میں کیا جاتا ہے۔ اس تکنیک میں،کاسمیٹککیموتھراپیٹک ایجنٹ پر مشتمل مصنوعات جلد کے خلیوں کی تجدید کو متحرک کرنے کے لیے جلد پر لگائی جاتی ہیں۔ جلد کا رنگ ہلکا ہو جاتا ہے۔ اس طرح اس کیمو تھراپیوٹیکانٹ کو بھی کہا جاتا ہے۔سفید کرناایجنٹ [1-6]۔ یہ بتایا گیا ہے کہ ایک سفید کرنے والا ایجنٹ جیسا کہ گلائکولک ایسڈ (GA)، جو ہائیڈروکسی ایسڈز میں سے ایک ہے، جلد کی ہائیڈریشن کو بڑھاتا ہے اور اس وجہ سے، ایک ہموار شکل دیتا ہے، جس کے نتیجے میں چہرے کی لکیریں اور جھریاں کم ہوتی ہیں [7,8]۔ سفید کرنے والے ایجنٹوں کی دو قسمیں ہیں: لیپوفیلک سفید کرنے والے ایجنٹ اور ہائیڈرو فیلک ایجنٹ۔ لیپوفیلک وائٹننگ ایجنٹس کی مثالیں ہیں کوجک ایسڈ، سیلیسیلک ایسڈ، ایسکوربیل پالمیٹیٹ، ایزیلک ایسڈ، اور اڈاپیلین۔ ہائیڈرو فیلک سفید کرنے والے ایجنٹوں کی مثالیں گلائکولک ایسڈ (GA)، ایسکوربک ایسڈ (AA)،arbutin(اے آر ٹی)، اور میگنیشیم ایسکوربل فاسفیٹ (ایم اے پی)۔ ہائیڈرو فیلک سفید کرنے والے ایجنٹوں کا یہاں مطالعہ کیا جاتا ہے کیونکہ ان کے قطبی گروہوں کا HPLC میں استعمال ہونے والے C18 کالم سے کم تعلق ہے اور HPLC میں انہیں الگ کرنا مشکل ہے۔ ہم نے اس مسئلے کو حل کرنے کے لیے آئن جوڑی کا طریقہ استعمال کیا۔

کیمیائی ڈھانچے اور ان ہائیڈرو فیلک کی زیادہ سے زیادہ ارتکازسفید کرناایجنٹوں کو جدول 1 میں دیا گیا ہے۔ تائیوان میں، کاسمیٹک مصنوعات میں استعمال ہونے والے GA اور AA کے ارتکاز کی کوئی حد نہیں ہے۔ ART، تاہم، 7 wt تک استعمال کیا جا سکتا ہے۔ فیصد اور MAP 3 wt تک۔ فیصد .اگرچہ کاسمیٹک مصنوعات میں استعمال ہونے والے GA کے ارتکاز کی کوئی حد نہیں ہے، لیکن امریکی فوڈ اینڈ ڈرگ ایڈمنسٹریشن کی طرف سے یہ اطلاع دی گئی ہے کہ یہ سفید کرنے والا ایجنٹ جلد کی شدید جلن یا سوجن کا سبب بن سکتا ہے [9]۔ عام طور پر، تقریباً 30-40 wt. میں GA کا فیصد استعمال ہوتا ہے۔کاسمیٹکسبیوٹی سیلون میں استعمال ہونے کے لیے اور زیادہ ارتکاز، 50-70wt. فیصد، کاسمیٹک مصنوعات میں استعمال کیا جاتا ہے جو ڈاکٹروں کے ذریعہ استعمال کیا جاتا ہے [10]۔

اس مطالعے کا مقصد کاسمیٹک مصنوعات میں سفید کرنے والے ایجنٹوں کی سطح کو درست طریقے سے ماپنے کے لیے مقداری تجزیہ کا طریقہ تیار کرنا ہے۔ یہ کام عوام کی حفاظت کے لیے بہت اہمیت کا حامل ہے۔ اگرچہ کاسمیٹک فارمولیشنز [11-16] میں سفید فاموں کے تخمینے کو بیان کرنے والی بہت سی اشاعتیں موجود ہیں، لیکن اس کے ساتھ ساتھ مقداری تجزیہ کے طریقوں کی ابھی تک ادب میں اطلاع نہیں دی گئی ہے۔ یہ مطالعہ ایک تجزیاتی طریقہ سے متعلق ہے، جو ہائیڈرو فیلک کا پتہ لگاتا ہے اور ساتھ ہی اس کی مقدار بھی بتاتا ہے۔سفید کرناایجنٹس

ہائیڈرو فیلکسفید کرناایجنٹ پانی کے محلول میں ہمیشہ مستحکم نہیں ہوتے ہیں۔ وہ آکسیکرن کا شکار ہیں۔ اگرچہ AA کے استحکام کے لیے متعدد مطالعات کی اطلاع دی گئی تھی [17-19]، لیکن ان رپورٹس میں AA کا ماحول HPLC کے لیے ہائیڈرو فیلک وائٹنرز کے بیک وقت تعین کے لیے موزوں نہیں ہے۔ یہ یقینی بنانا ضروری ہے کہ نتائج کی درستگی کے لیے تجزیہ کے دوران ہائیڈرو فیلک سفید کرنے والے ایجنٹ مستحکم ہوں۔

2. تجرباتی

2.1 ریجنٹس اور معیارات

GA، AA، ART، اور MAP اور کمرشل الفا کمپنی (امریکن)، AlfaCo سے خریدے گئے تھے۔ (امریکی)، واکو (جاپانی)، اور لیپو۔ کمپنی (امریکی)، بالترتیب۔ Methylparaben اور U-13 Induchem سے حاصل کیے گئے ہیں۔ کمپنی (سوئٹزرلینڈ)۔ AldrichCo سے سائٹرک ایسڈ، tetrabutylammonium hydroxide (TBAH)، سوربیٹول، فاسفورک ایسڈ، اور پوٹاشیم ڈائی ہائرو فاسفیٹ خریدے گئے تھے۔ (امریکی)۔ تمام کیمیکل تجزیاتی ریجنٹ گریڈ کے تھے۔ کمرشلکاسمیٹکمصنوعات، مختلف مینوفیکچررز سے، ریٹیل اسٹورز اور مقامی فارمیسی سے خریدی گئیں۔

2.2 ساز

HPLC اپریٹس (Hitachi Co., Japan) ایک ماڈیولر کرومیٹوگرافک نظام پر مشتمل تھا۔ جس کے لیے ایک پمپ (ماڈل I-7100)، ایک UV ڈیٹیکٹر (ماڈل I-7420؛ متغیر طول موج)، اور انجیکشن والو 25 ملی لیٹر نمونہ لوپ کے ساتھ (ماڈل 7725، رہوڈائن، کوٹیٹی، یو ایس) منسلک تھا۔ ڈیٹا کا حصول اور پروسیسنگ SISC سافٹ ویئر (تائیوان) کا استعمال کرتے ہوئے ایک پرسنل کمپیوٹر کے ساتھ مکمل کیا گیا تھا۔ نمونہ کے انجیکشن 25 ملی لیٹر (ہیملٹن، سوئٹزرلینڈ) کی سرنج سے لگائے گئے تھے۔ A 5 mm, 250 mm / 4.60 mm ID A سٹینلیس سٹیل Mightysil RP-18GP کالم استعمال کیا گیا تھا۔

2.3۔ کرومیٹوگرافک حالات

کرومیٹوگرافک تجزیہ سنگل کالم آئسوکریٹک ریورس فیز طریقہ کے ساتھ کیا گیا تھا۔ آئن پیئرنگ کے طریقہ کار میں، موبائل مرحلہ ایک0 تھا۔ ان تینوں کیمیکلز کی مقدار HPLC کے سپیکٹرم کی علیحدگی اور ریزولوشن پر بہت اچھا اثر ڈالتی ہے۔ ٹی بی اے ایچ کی حراستی 1 سے 10 ملی میٹر تک مختلف تھی۔ 1 سے 10 والیوم تک میتھانول فیصد . pH کی قدروں کو 2.5 سے 5.0 تک ایڈجسٹ کرنے کے لیے مختلف مقدار میں فاسفورک ایسڈ کو بفر ریزولوشن میں شامل کیا گیا تھا۔ جانچ کے نتائج اچھے ریزولوشن کے لیے موزوں موبائل فیز کو منتخب کرنے کی اجازت دیں گے۔ تمام موبائل فیزز کو ملی پور فلٹر کے ذریعے فلٹر کیا گیا، پور کا سائز 0.45 ملی میٹر، اور استعمال کرنے سے پہلے سونیکیشن کے ذریعے ڈیگاس کیا گیا۔ 1.1 ملی لیٹر فی منٹ کی بہاؤ کی شرح استعمال کی گئی۔ تجزیہ کاروں کا پتہ UV جذب سے 220 یا 240 nm پر پایا گیا۔ چار اجزاء کی شناخت کرومیٹوگرافی کے ذریعے مستند معیارات کے ساتھ تفویض کی گئی تھی۔ بیرونی معیار کے طریقہ کار کا استعمال کرتے ہوئے چوٹی کے انضمام کے ذریعہ مقدار کا تعین کیا گیا تھا۔

cistanche فوائدکیمؤثر جلد کو سفید کرنا

2.4 انشانکن وکر

ایجنٹوں کا درست وزن کرکے اور پھر انہیں پانی میں تحلیل کرکے اسٹاک سلوشن تیار کیے گئے۔ چار تجزیہ کاروں میں سے پانچ ورکنگ سلوشنز ان کے سٹاک سلوشنز سے آست پانی کے ساتھ {{0}} کے تناسب سے تازہ تیار کیے گئے تھے۔ ان کام کرنے والے حلوں کی مناسب کمی نے 10/300 mg/ml کی ارتکاز فراہم کی، سوائے GAand MAP کے، جہاں ارتکاز بالترتیب 8۔{4}}.0mg/ml اور 5.6/451 mg/ml تھی۔ انشانکن منحنی خطوط ہر ایک جزو کے چوٹیوں کو ارتکاز کے مقابلے میں ترتیب دے کر بنائے گئے تھے اور ڈھلوان کی قدروں کے ساتھ ساتھ ہر انشانکن منحنی خطوط کے لیے انٹرسیپٹ اور ارتباطی گتانک بھی دیے گئے تھے۔ انشانکن منحنی خطوط چار کی مقدار کے لیے تھے۔سفید کرناتجارتی کے چار نمونوں میں ایجنٹکاسمیٹکس.

2.5 بحالی کا مطالعہ

ایک نمونہ کریم جس میں نمبر ہے۔سفید کرناایجنٹوں کو بحالی کے مطالعہ میں ایک کنٹرول کے طور پر استعمال کیا گیا تھا۔ اس کنٹرول کریم میں چار ہائیڈرو فیلک وائٹنگ ایجنٹس، GA، AA، ART، اور MAP کی مختلف مقدار شامل کی گئی تھی۔ ارتکاز ٹیبل 4 میں دیا گیا تھا۔ ہر تیار کردہ نمونہ کریم میں سے تقریباً 1 جی کا وزن شیشے کے فلاسک میں کیا گیا اور اس میں 30 ملی لیٹر آست پانی ڈالا گیا اور پھر فلاسک کو الٹراسونک غسل میں 15 منٹ کے لیے ڈبو دیا گیا جو 25 8C پر رکھا گیا۔ اس کے نتیجے میں حل 100 ملی لیٹر کے حجم میں آست پانی کے ساتھ بنایا گیا تھا اور پھر تقریبا 3 منٹ کے لئے N2 کے ذریعہ فلٹر اور ڈی آکسیجن کیا گیا تھا اور پھر بیکلائٹ سکرو کیپ اور سلیکون کی انگوٹھی کے ساتھ سیل کیا گیا تھا۔

3. نتائج اور مباحثہ

3.1 کرومیٹوگرافی اور ریزولوشن

چار کی ساختسفید کرناایجنٹس، GA،AA، ART، اور MAP، جدول 1 میں دکھایا گیا ہے۔ یہ سب بہت قطبی مالیکیول ہیں۔ قطبی تجزیہ کاروں کے لیے، میتھانول یا ایسٹونائٹرائل عام طور پر HPLC کے C18 کالمنر سائانو پروپیل کالم میں موبائل فیز کے جزو کے طور پر استعمال ہوتا ہے۔ تاہم، ان قطبی تجزیہ کاروں کا co-Elution پایا گیا جب میتھانول یا acetonitrile استعمال کیا گیا۔ لہذا، ان تجزیہ کاروں کو الگ کرنا ناممکن ہے۔ co-Elution کے اس مسئلے کو حل کرنے کے لیے، ان کے قطبی کردار کو کم کرنے کے لیے آئن پیئرنگ کا طریقہ استعمال کیا گیا تاکہ برقرار رکھنے کا ایک قبول وقت حاصل کیا جا سکے۔ اس کے علاوہ، چار تجزیہ کاروں کے بیک وقت تجزیہ کے لیے ایک مناسب علیحدگی کی حالت تلاش کرنا ضروری ہے۔کاسمیٹکمصنوعات. بہترین تجزیاتی حالت کو حاصل کرنے کے لیے، موبائل فیز کے اثر و رسوخ اور اس کی pH قدروں پر غور کیا گیا ہے۔ حاصل کردہ نتائج کو تصویر 1 میں دکھایا گیا ہے۔ موبائل مرحلے میں TBAH کا ارتکاز 1 سے 10 mM تک مختلف تھا۔ ٹی بی اے کے ارتکاز میں اضافے کے ساتھ حسابی صلاحیت کا عنصر کم ہو جاتا ہے (دیکھیں تصویر 1(a))۔ صلاحیت کے عنصر کی قدروں میں یہ کمی MAP کے لیے تیز ہے لیکن GA، ART، اور AA کے لیے بہت ہلکی ہے۔ MAP اور دوسروں کے درمیان صلاحیت کے عنصر کے لیے اہم فرق MAP کے مضبوط ionic کریکٹر کی وجہ سے ہو سکتا ہے۔ صلاحیت کے عنصر میں ایک چھوٹا سا فرق HPLC میں برقرار رکھنے کا مناسب وقت دیتا ہے۔ لہذا، موبائل مرحلے کے لیے ٹی بی اے ایچ کی حراستی کو 10 ایم ایم منتخب کیا گیا تھا۔ کیپسٹی فیکٹر پر میتھانول کی مقدار کا اثر تصویر 1(b) میں دکھایا گیا ہے۔ اسی طرح کے نتائج TBAH کے لیے پائے گئے۔ میتھانول کا زیادہ ارتکاز، صلاحیت کے عنصر میں ایک چھوٹا فرق، اور HPLC میں برقرار رکھنے کا وقت کم۔ اس معاملے میں حجم میں میتھانول کا دس فیصد منتخب کیا گیا تھا۔

فاسفورک ایسڈ کی متنوع مقدار کو اوپر بیان کردہ بفر محلول میں 2.5 سے 5 تک pH کی قدروں کو تبدیل کرنے کے لیے شامل کیا گیا تھا۔{3}}۔ 5 کی pH قدر پر۔{5}}، کرومیٹوگراف کے نتائج میں وسیع اور متعدد چوٹیوں کا مشاہدہ کیا گیا۔ GA، AA، اور ART کے لیے کرومیٹوگراف کی چوٹیاں ایک دوسرے کے ساتھ اوورلیپ ہیں۔ پچھلے نتائج کے برعکس، MAP کے لیے پی ایچ کی قدروں میں اضافے کے ساتھ صلاحیت کا عنصر بڑھتا ہے (تصویر 1(c) میں دیکھیں)۔ GA، AA، اور ART کے لیے pH قدروں کی وجہ سے صلاحیت کے عنصر میں تبدیلی بہت کم ہے۔ پی ایچ ویلیو کا انتخاب کرنا ضروری ہے جو HPLC میں اچھی ریزولوشن کے لیے صلاحیت کے عنصر کی قدروں میں کافی فرق دیتا ہے۔ ان وجوہات کی بناء پر، 2.5 کے برابر pH قدر کا انتخاب کیا گیا۔ نتیجے کے طور پر، HPLC تجزیہ کے لیے ایک موزوں موبائل مرحلہ ایک 0.005 M potassiumdihydrophosphate بفر محلول ہے جس میں 10mM TBAH، 10 والیوم۔ میتھانول کا فیصد، اور فاسفورک ایسڈ۔ فاسفورک ایسڈ کا استعمال بفر حل کی پی ایچ ویلیو کو 2.5 پر ایڈجسٹ کرنے کے لیے کیا گیا تھا۔

3.2 UV ڈیٹیکٹر کے لیے طول موج کا تعین

ان کا یووی سپیکٹرمسفید کرناموبائل مرحلے میں تحلیل شدہ ایجنٹوں کو UV سپیکٹرو فوٹومیٹر کا استعمال کرکے حاصل کیا گیا تھا۔ جذب کرنے کی زیادہ سے زیادہ چوٹی GA کے لیے 220 nm، AA کے لیے 243 nm، ART کے لیے 227 nm، اور MAP کے لیے 238 nm پر ہے۔ 240 nm پر، UV ڈیٹیکٹر AA اور MAP کا پتہ لگانے میں انتہائی حساسیت رکھتا ہے، لیکن GA کے لیے حساسیت بہت کم ہے۔ اور ART (دیکھیں تصویر 2(b))۔ 220 nm پر، HPLCchromatograph میں تمام فور وائٹننگ ایجنٹوں کے لیے واضح چوٹیاں دکھائی گئیں (دیکھیں تصویر 2(a))۔ تمام تجزیہ کاروں کے لیے بہتر حساسیت حاصل کرنے کے لیے، چار تجزیہ کاروں کا پتہ لگانے اور مقدار درست کرنے کے لیے ڈیٹیکٹر کی طول موج کو 220 nm میں ایڈجسٹ کیا گیا۔ کمرے کے درجہ حرارت (تقریباً 26 8C) پر 12.1 منٹ کے تجزیاتی رن ٹائم کے ساتھ طریقہ کار نسبتاً تیز ہے۔

3.3 سفید کرنے والے ایجنٹوں کے لیے استحکام کا مطالعہ

AA پانی میں تحلیل ہونے پر dehydroascorbic acid (DHA) میں گل جاتا ہے۔ لہذا، نتائج کی درستگی کے لیے تجزیہ کے دوران تھیاسکوبک ایسڈ کو مستحکم رکھنا اہمیت کا حامل ہے۔ فرنینڈس وغیرہ۔ رپورٹ کیا کہ انحطاط کو متاثر کرنے والے بنیادی عوامل آکسیجن اور درجہ حرارت ہیں [19]۔ ان کے مطالعے میں، انحطاط 1 گھنٹہ میں اہم تھا، اور انحطاط پر محلول کے pH اقدار کے اثر کا ذکر صرف pH 5{3}} اور 5.6 پر کیا گیا تھا۔ ہمارے مطالعے میں، AA کا استحکام ارتکاز کی تبدیلی کا اندازہ لگا رہا تھا۔ AA مختلف ماحولیاتی حالات جیسے N2، pH ویلیو اور درجہ حرارت کے ساتھ علاج یا علاج نہ کیے جانے والے حل میں۔ اہم تبدیلی کا وقت جتنا زیادہ ہوگا، ascorbic اتنا ہی مستحکم ہوگا۔

نتائج، جن کا خلاصہ جدول 3 میں دیا گیا ہے، N2 کے ساتھ استحکام اور علاج شدہ یا غیر علاج شدہ حل کے درمیان مضبوط تعلق کو ظاہر کرتے ہیں۔ AA غیر علاج شدہ محلول کا نقصان علاج شدہ حل سے زیادہ تیز ہے۔ جیسا کہ جدول 3 میں دکھایا گیا ہے، 10 8C اور pH2 پر، AA کے 10 فیصد انحطاط کے لیے درکار وقت بغیر علاج کے تقریباً 10 گھنٹے اور علاج شدہ حل کے لیے تقریباً 48 گھنٹے تھا۔ یہ اس وجہ سے ہو سکتا ہے کہ آکسیجن کے لیے بہت کم آکسیجن دستیاب ہے۔ یہ نوٹ کیا گیا ہے کہ، 25 8C پر آکسیجن کی موجودگی میں، 10 گھنٹے کے بعد 8.7 اور 71.2 فیصد کے AA کی سطح pH 6.9 اور 2.0 کے لیے دیکھی گئی۔ اس نتیجے کی وضاحت pH 6.9 پر منقطع AA کی زیادہ مقدار سے کی جا سکتی ہے اور یہ فارم غیر منقطع شکل [19] سے کم مستحکم ہونا چاہیے۔ اس کے برعکس، آکسیجن کی غیر موجودگی میں اور 25 یا{22}}C پر، AA کا آبی محلول pH 6.9 پر زیادہ مستحکم ہوتا ہے۔ AA کے زیادہ مستحکم ہونے کی وجہ ابھی تک مزید تفتیش نہیں کی گئی ہے۔ محلول کے درجہ حرارت سے تعلق، علاج نہ کیے جانے والے حلوں میں، AA کم درجہ حرارت (10 8C) کے مقابلے زیادہ درجہ حرارت (25 8C) پر کم مستحکم ہوتا ہے۔ تاہم، علاج شدہ محلول کے لیے، AA کا آبی محلول مستحکم ہے اور درجہ حرارت سے متاثر نہیں ہوا تھا۔

3.4 قطعیت کے لیے توثیق اور درستگی کے لیے پرکھ

بیان کردہ کرومیٹوگرافک حالات کا استعمال کرتے ہوئے، ان تجزیہ کاروں اور دیگر مرکبات کے درمیان ایک معقول حل حاصل کیا گیا۔کاسمیٹکمصنوعات لکیری اور درستگی کے لیے طریقہ کار کی توثیق کی گئی تھی۔ ہر ایک کے لیے انشانکن منحنی خطوط کا حساب لگانے کے لیے لکیری وکر فٹنگ کا اطلاق کیا گیا تھا۔سفید کرناایجنٹ نتائج جدول 4 میں دیے گئے ہیں۔ 5.6 سے 451 mg/ml کی حد میں بہترین خطوط حاصل کیا گیا تھا سوائے GA کے تمام معیارات کے لیے جس کے لیے رینج 8 سے 36 mg/ml تک تھی۔ ارتباط کا گتانک 0 سے ہوتا ہے۔ .9974 سے 0.9997۔ طریقہ کار کی درستگی کا حساب ارتکاز کی ایک ہی حد میں فور ہائیڈرو فیلک وائٹنرز پر مشتمل اسسیس کے متعلقہ معیاری انحراف (RSD, n{{10}) کے طور پر لگایا گیا تھا۔ RSD کی حد 0.3 سے 6.43 فیصد تک پائی گئی۔

3.5 بازیابی۔

ایک کریم جس میں نمبرسفید کرناایجنٹوں کو بحالی کے مطالعہ میں ایک کنٹرول کے طور پر استعمال کیا گیا تھا۔ اس کنٹرول کریم میں سفید کرنے والے چار ایجنٹوں کی چھوٹی مقدار شامل کی گئی تھی۔ HPLC کرومیٹوگرافی سے پتہ چلتا ہے کہ کنٹرول کریم کے لیے UV جذب کرنے کی کوئی چوٹی نہیں ملی ہے (دیکھیں تصویر 3(a)) اور ان چار سفید کرنے والے ایجنٹوں پر مشتمل ایک نمونہ کریم کے لیے چار جذب چوٹییں پائی گئیں۔ InFig. 3(b)، چوٹی 1 GA کے لیے UV جذب کرنے کی چوٹی ہے۔ AA کے لیے چوٹی 2؛ ART کے لیے چوٹی 3؛ چوٹی 4 forMAP۔ ہر سفید کرنے والے ایجنٹ کا اپنا برقرار رکھنے کا وقت ہوتا ہے۔ یہ کردار بعد میں ان سفید کرنے والے ایجنٹوں کی شناخت کے لیے استعمال کیا جائے گا۔ نتائج کا خلاصہ جدول 2 میں دیا گیا ہے۔ چاروں ایجنٹوں کے لیے 94-100 فیصد ریکوری کی حد کم اور زیادہ دونوں جگہوں پر حاصل کی گئی۔ تین نقلوں سے شمار کیے گئے تغیرات کے گتانک 6.9 فیصد سے کم تھے۔

cistanche پلانٹہےمخالف عمر, اینٹی آکسیڈینٹ، اورجلد کی دیکھ بھال کے اثرات

3.6۔ درخواست

چار تجارتی طور پر دستیاب ہیں۔کاسمیٹکمصنوعات کا تجزیہ کیا گیا۔ وہ ہیںسفید کرناکریم (کاسمیٹک نمبر 1)، C20 وائٹننگ جیل (کاسمیٹک نمبر 2)، ایسنس لوشن (کاسمیٹک نمبر 3) اور چھلکا لوشن (کاسمیٹک نمبر 4) بالترتیب۔ ان کاسمیٹکس کو اس تحقیق میں بیان کردہ طریقہ کار کا استعمال کرتے ہوئے پرکھا گیا۔ ان چار کاسمیٹکس کے کرومیٹوگرافس تصویر 4(a/d) میں دیے گئے ہیں۔ کرومیٹوگراف 4 (a) چوٹی 4 کی ایک چھوٹی جذب چوٹی دیتا ہے، یعنی کاسمیٹک نمبر 1 میں ایم اے پی ہوتا ہے۔ کرومیٹوگراف 4 (b) چوٹی 2 کی چوٹی کی نمائش کرتا ہے، جو اس بات کا اشارہ ہے کہ کاسمیٹک نمبر 2 AA پر مشتمل ہے۔ کرومیٹوگراف 4 (c) اور (d) سے، کاسمیٹک نمبر 3 میں ART کی شناخت کی گئی تھی اور GA اور AA دونوں کی شناخت کاسمیٹک نمبر 4 میں کی گئی تھی۔ ایک غیر نشان زدہ چوٹی کرومیٹوگراف 4 (d) ہے۔ یہ UV جذب چوٹی چوٹی 3 کے مقابلے میں زیادہ برقرار رکھنے کا وقت ہے لیکن چوٹی 4 کے مقابلے میں بہت کم ہے۔ یہ واضح ہے کہ یہ غیر نشان زدہ جذب چوٹی سفید کرنے والے ایجنٹوں کی وجہ سے نہیں ہے بلکہ دیگر اجزاء کی وجہ سے ہے انکاسمیٹک نمبر 4۔ ان سفید کرنے والے ایجنٹوں کی مقدار کا تعین بیرونی معیاری کاری کے طریقہ کار کا استعمال کرتے ہوئے کرومیٹوگرافی میں چوٹیوں کا انضمام۔ ان چاروں میں سفید کرنے والے ایجنٹوں کی سطحکاسمیٹکسٹیبل 5 میں دیا گیا ہے۔ یہ نوٹ کیا جاتا ہے کہ حاصل کردہ نتائج درستگی کی تصدیق کرتے ہیں اور لیبل والے دعوے کی تعمیل ظاہر کرتے ہیں۔

4. نتیجہ

ہائیڈرو فیلک کے بیک وقت تجزیہ کے لیے تیار کردہ HPLC پرکھ آسان اور تیز ہے۔سفید کرناایجنٹس HPLC کے لیے موزوں موبائل فیز کا انتخاب کرنے کے لیے ایک صلاحیت کا عنصر استعمال کیا گیا تھا۔ ایک ایسی شرط کا انتخاب کرنے کی ضرورت ہے جو مناسب برقرار رکھنے کے وقت کے لیے صلاحیت کے عنصر میں تھوڑا سا فرق فراہم کرے۔ HPLC کے کرومیٹوگراف میں اچھی ریزولیوشن کے لیے قابلیت کے عنصر کی قدروں میں کافی فرق دینا چُننے والی شرط کے لیے ضروری ہے۔ نتیجے کے طور پر، HPLC تجزیہ کے لیے موزوں موبائل مرحلہ ایک 0.005 Mpotassium dihydrophosphate بفر محلول ہے جس میں 10 mM TBAH، 10 والیوم۔ میتھانول، اور فاسفورک ایسڈ کا فیصد۔ فاسفورک ایسڈ کا استعمال بفر سلوشن کی پی ایچ ویلیو کو 2.5 میں ایڈجسٹ کرنے کے لیے کیا گیا تھا۔ کے لیے بہتر پتہ لگانے والی طول موجسفید کرناHPLC کے لیے ایجنٹ 220 nm پر ہے۔ اس کے علاوہ، تجزیاتی طریقہ کار میں AA کو مستحکم کرنے کے لیے آسان طریقہ حاصل کیا گیا ہے۔ جو کہ نتائج کی درستگی کے لیے اہم ہے۔

cistanche tubulosaسلائسیں

تصویر پر کلک کریں اور مزید معلومات حاصل کریں۔