راب اور آرف فیملیز کے چھوٹے جی ٹی پیز: نیوروڈیجنریشن میں انٹرا سیلولر اسمگلنگ کے کلیدی ریگولیٹرزⅠ

خلاصہ:

Rab اور Arf خاندانوں کے چھوٹے guanosine triphosphatases (GTPases) vesicle کی تشکیل اور جھلیوں کی اسمگلنگ کے کلیدی ریگولیٹرز ہیں۔ جھلی کی نقل و حمل مرکزی اعصابی نظام میں ایک اہم کردار ادا کرتی ہے۔ اس سلسلے میں، نیوران کو ریسیپٹرز کی درست تقسیم کے لیے، ڈینڈرائٹس اور ایکسونز میں پروٹین اور آرگنیلز کی درست ساخت کے لیے، Synaptic vesicles کے مسلسل exocytosis/endocytosis اور غیر فعال پروٹین کے خاتمے کے لیے جھلیوں کے مسلسل بہاؤ کی ضرورت ہوتی ہے۔ اس طرح، یہ تعجب کی بات نہیں ہے کہ Rab اور Arf GTPases کا تعلق الزائمر اور پارکنسنز جیسی نیوروڈیجنریٹیو بیماریوں سے رہا ہے۔

cistanche tubulosa میموری کی بہتری کے اثر پروڈکٹ پر کلک کریں۔

دونوں پیتھالوجی خصوصیات کا اشتراک کرتے ہیں جیسے کہ پروٹین کے مجموعوں کی موجودگی اور/یا گولگی اپریٹس کا ٹوٹنا، وہ نشانات جو Rab اور Arf GTPases دونوں افعال سے متعلق ہیں۔ neurodegenerative عارضوں کے ساتھ ان کے تعلقات کے باوجود، بہت کم مطالعات نے neurodegeneration کے روگجنن میں ان GTPases کے کردار پر توجہ مرکوز کی ہے۔ اس جائزے میں، ہم الزائمر اور پارکنسنز کی بیماریوں کے آغاز اور بڑھنے کے ساتھ ساتھ نیوروڈیجنریشن کے ممکنہ علاج کے اہداف کے طور پر ان کے ابھرنے میں ان کی اہمیت کا خلاصہ کرتے ہیں۔

مطلوبہ الفاظ: Rab GTPase; Arf GTPase؛ چھوٹا GTPase؛ الزائمر؛ پارکنسن؛ neurodegeneration؛ جھلیوں کی اسمگلنگ؛ vesicle نقل و حمل

1. تعارف

Eukaryotic خلیات مسلسل بڑھنے کے عوامل، ہارمونز، پیپٹائڈس، اور آئنوں کو مخصوص ریسیپٹرز سے منسلک کرکے ایکسٹرا سیلولر میڈیم سے معلومات حاصل کرتے ہیں۔ یہ پابندی سائٹوپلازم میں سگنلنگ جھرنوں کے ذریعے پیغام کی ترسیل کو متحرک کرتی ہے تاکہ ایک عین حیاتیاتی ردعمل پیدا کیا جا سکے [1]۔ اس پیغام کے پھیلاؤ کے لیے ذمہ دار مرکزی عناصر میں سے ایک راس سپر فیملی کے چھوٹے guanosine triphosphatases (GTPases) ہیں۔ یہ چھوٹے GTPases سگنلنگ جھرنوں میں حصہ لیتے ہیں جو سیل کے ردعمل کی ایک وسیع رینج کو کنٹرول کرتے ہیں، جیسے کہ پھیلاؤ، تفریق، اور apoptosis [2,3]۔ چھوٹے GTPases مالیکیولر سوئچز ہیں جو دو حالتوں میں مل سکتے ہیں: ایک غیر فعال حالت جس میں چھوٹا GTPase GDP کا پابند ہے، اور ایک فعال حالت جس میں یہ GTP کا پابند ہے۔ وہ عمل جس کے ذریعے GTPase غیر فعال سے فعال حالت میں تبدیل ہوتا ہے اسے GTPase ایکٹیویشن سائیکل کہا جاتا ہے۔ تین اہم مالیکیول ایکٹیویشن/ڈی ایکٹیویشن سائیکل کو کنٹرول کرتے ہیں۔

گیانین ایکسچینج فیکٹرز (GEFs) جی ڈی پی کے اجراء اور جی ٹی پی کے پابند ہونے کی حمایت کرتے ہوئے GTPase کو فعال کرنے کے انچارج ہیں۔ GTPase ایکٹیویٹ کرنے والے پروٹین (GAPs)، اس کے برعکس، اندرونی GTPase سرگرمی کو شامل کرکے GTPase کو غیر فعال کرنے کے ذمہ دار ہیں جس کے نتیجے میں GTP کے ہائیڈولیسس ہوتے ہیں۔ آخر میں، گیانائن نیوکلیوٹائڈ ڈسوسی ایشن انحیبیٹرز (GDIs) GTPase سے GDP کو الگ کرنے سے روکتے ہیں، لہذا GTPase کو غیر فعال حالت میں برقرار رکھتے ہیں [4,5]۔ مزید یہ کہ چھوٹے GTPases کو بعد از ترجمے کی ترامیم کے ذریعے بھی ریگولیٹ کیا جا سکتا ہے جو انہیں مخصوص پروٹینوں یا جھلیوں سے منسلک کرنے کی اجازت دیتے ہیں۔ اس طرح، وہ اپنے سی ٹرمینل خطے میں فارنیسیلیٹڈ، جیرانیلجیرانیلیٹڈ، یا پالمیٹائلیٹڈ اور ان کے این ٹرمینل ریجن [5,6] میں مائرسٹائلیٹڈ ہوسکتے ہیں۔ چھوٹے GTPases کی راس سپر فیملی کو پانچ خاندانوں میں تقسیم کیا گیا ہے: Ras، Rho، Rab، Arf، اور Ran [2,3]۔ راس فیملی سیل کی نشوونما اور میٹابولزم کے کنٹرول میں مہارت رکھتی ہے۔ مزید برآں، راس فیملی GTPases سیل سائیکل، جین ایکسپریشن، اور سیل کی تبدیلی کو منظم کرنے کے لیے Rho فیملی کے ساتھ تعاون کرتے ہیں۔ ان افعال کے علاوہ، GTPases کا Rho خاندان ایکٹین سائٹوسکلٹن تنظیم کے لیے ذمہ دار ہے، جب کہ Rab اور Arf خاندان بالترتیب vesicles اور membranes کے intracellular ٹریفک اور vesicles کی تشکیل اور انٹرا سیلولر ٹرانسپورٹ کو کنٹرول کرتے ہیں۔ آخر میں، رن فیملی کے جی ٹی پیز نیوکلیو سائیٹوپلاسمک ٹرانسپورٹ [2,3,5,7] کے انچارج ہیں۔

زیادہ تر انٹرا سیلولر کمپارٹمنٹس، جیسے نیوکلئس، مائٹوکونڈریا، یا گولگی اپریٹس (GA)، جھلیوں سے الگ ہوتے ہیں۔ اس طرح، یوکرائیوٹک خلیوں کو ان آرگنیلز کے درمیان ٹریفک کے لیے مخصوص میکانزم کی ضرورت ہوتی ہے۔ مزید برآں، ملٹی سیلولر جانداروں میں مختلف سیل اقسام کے درمیان مربوط جھلیوں کی اسمگلنگ کی ضرورت ہے [8]۔ Rab GTPases، راس سپر فیملی کا سب سے بڑا خاندان، ویسیکل چھانٹنے اور جھلیوں کی اسمگلنگ کے کلیدی ریگولیٹرز ہیں۔ وہ کوٹ پروٹینز (COPI، COPII، اور کلاتھرین)، موٹر پروٹینز (کائنینس اور ڈائنین)، ٹیتھرنگ کمپلیکس (ابتدائی اینڈوسوم اینٹیجن 1 (EEA1)، گولگینز، ایکسوسیسٹ، اور ہوموٹائپک جیسے انفیکٹر مالیکیولز کے ساتھ تعامل کرکے اس ٹریفک کو کنٹرول کرسکتے ہیں۔ فیوژن اور پروٹین چھانٹنا (HOPS) کمپلیکس)، اور SNAREs [8]۔ اس کے برعکس، Arf GTPases vesicle کی تشکیل میں حصہ لیتے ہیں، خاص طور پر GA [9] میں، لیکن وہ پلازما جھلی، endosomes، اور لپڈ بوندوں میں بھی موجود ہوتے ہیں [9]۔ ویسیکل کی تشکیل کو منظم کرنے کے لیے، راب کی طرح، Arf GTPases انفیکٹر مالیکیولز جیسے کوٹ پروٹینز اور ان کے اڈاپٹرز (COPI، Golgi-localized-ear with Arf-binding proteins (GGA)، اور Munc18-تعامل کرنے والے پروٹینز کے ساتھ تعامل کرتے ہیں۔ ٹکسال)). لہذا، GTPases کے Rab اور Arf خاندان endomembrane نظام کو منظم کرتے ہیں (شکل 1)۔

جھلیوں کی اسمگلنگ نیوران میں اہم کردار ادا کرتی ہے۔ نیوران میں ایک مخصوص مورفولوجی ہوتی ہے جس کے لیے Synaptic فنکشن کو برقرار رکھنے کے لیے axons اور dendrites کے درمیان مسلسل جھلیوں کی اسمگلنگ کی ضرورت ہوتی ہے [8]۔ یہ Synaptic ٹرانسمیشن، جھلی ریسیپٹرز کی درست تقسیم، اور ڈینڈرائٹس اور ایکسونز میں عین مطابق آرگنیل اور پروٹین کی ساخت کو قابل بناتا ہے [8]۔ Synaptic فنکشن جھلیوں کے مسلسل بہاؤ کا مطالبہ کرتا ہے، کیونکہ Synaptic vesicles کو مسلسل exocytosis اور endocytosis کا نشانہ بنایا جاتا ہے۔ مزید برآں، سگنلنگ پیغام کو منتقل کرنے یا انحطاط پذیر ہونے کے لیے پروٹین کو ایکسن، ڈینڈرائٹس اور سیل باڈی کے درمیان منتقل کیا جانا چاہیے۔ اس کے علاوہ، دیر سے اینڈوسوم اور آٹوفاگوسوم کی ریٹروگریڈ نقل و حمل غیر فعال پروٹینوں کو ہٹانے کی اجازت دیتی ہے، جو درست نیورونل فنکشن اور بقا کے لیے اہم ہے۔ لہذا، جھلیوں کی اسمگلنگ نیورونل فنکشن کے تمام پہلوؤں میں شامل ہے، اور اس کی خرابی کو نیوروڈیجنریشن سے جوڑا گیا ہے [8]۔

نیوروڈیجنریشن نیوران [10] کے مخصوص ذیلی سیٹوں کے ترقی پسند نقصان پر مشتمل ہے۔ اہم نیوروڈیجنریٹیو بیماریاں الزائمر کی بیماری (AD) اور پارکنسنز کی بیماری (PD) ہیں۔ AD ڈیمنشیا کی سب سے عام شکل ہے [11]۔ یہ نیوران کے ترقی پسند نقصان کی خصوصیت ہے جس کے نتیجے میں یادداشت اور علمی افعال ضائع ہو جاتے ہیں۔ بیماری کی بنیادی خصوصیات ایکسٹرا سیلولر امائلائیڈ- (A) تختی اور نیوروفائبریلری ٹینگلز (NFTs) کا انٹرا سیلولر جمع ہیں، جو pTau جمع کے ذریعہ تشکیل پاتے ہیں۔ ان کلاسیکی خصوصیات ہونے کے باوجود، AD کی مالیکیولر پیتھالوجی پوری طرح سے سمجھ میں نہیں آئی۔ ایک طرف، amyloid precursor protein (APP) کی amyloidogenic پروسیسنگ جو A پیپٹائڈس کی نسل کا باعث بنتی ہے وہ انٹرا سیلولر کمپارٹمنٹس میں ہوتی ہے جس میں اینڈوسیٹک اسمگلنگ کی ضرورت ہوتی ہے۔ جسمانی حالات کے تحت، اے پی پی کو راب5-مثبت ابتدائی اینڈوسومس میں -سیکریٹیز (BACE1) کے ذریعے پروسیس کیا جاتا ہے، جس سے -کلیویج C-ٹرمینل ٹکڑوں (-CTFs) کو جنم ملتا ہے۔ اس طرح کے ٹکڑوں کو بعد میں اینڈوسوم یا ٹرانس گولگی نیٹ ورک (TGN) میں پروسیس کیا جاتا ہے تاکہ A پیپٹائڈس [12] پیدا کیا جا سکے۔ یہ AD پیتھالوجی میں ان GTPases اور جھلیوں کی اسمگلنگ کی اہمیت کو اجاگر کرتا ہے۔ اس کے علاوہ، اینڈو سائیٹک اسمگلنگ سے متعلق مختلف جینز AD [12] کی ترقی کے خطرے سے وابستہ ہیں۔

مثال کے طور پر، AD میں فاسفیٹائیڈلینوسیٹول بائنڈنگ کلاتھرین اسمبلی پروٹین (PICALM) کا کم اظہار بیان کیا گیا ہے، جو A peptides [12,13] کے اندرونی ہونے، اسمگلنگ اور کلیئرنس میں اہم کردار ادا کرتا ہے۔ PD کے حوالے سے، یہ دوسری سب سے عام نیوروڈیجینریٹو بیماری ہے۔ یہ Lewy جسموں کے جمع ہونے کی خصوصیت ہے، جو -synuclein ( -syn) کے جمع سے بنتا ہے، اور substantia nigra pars compacta [14] کے ڈوپیمینرجک نیوران کے منتخب انحطاط سے۔ اس کے نتیجے میں نقل و حرکت میں معذوری پیدا ہوتی ہے، بشمول آرام کے جھٹکے اور پٹھوں کی سختی۔ -syn میں تغیرات، PTEN-حوصلہ افزائی پوٹیٹیو کناز 1 (PINK1) میں، اور لیوسین سے بھرپور ریپیٹ کناز 2 (LRRK2) میں PD [14] کی نشوونما کے خطرے سے وابستہ ہیں۔ ان تغیرات کے علاوہ، Rab39B GTPase میں ہونے والے تغیرات کا تعلق اس بیماری کی نشوونما سے ہے [15]۔ Rab39B AMPA ریسیپٹر کے GluA2 ذیلی یونٹ کی اسمگلنگ کو کنٹرول کرتا ہے اور اس کا اظہار خصوصی طور پر نیوران میں ہوتا ہے [15]۔ مزید برآں، مختلف GTPases کو جھلیوں کی اسمگلنگ میں نقائص کے ساتھ منسلک کیا گیا ہے جو کہ -syn کے جمع ہونے کی وجہ سے ظاہر ہوتے ہیں [15]۔ اس طرح، اسی طرح جیسے AD میں، یہ GTPases اور جھلیوں کی اسمگلنگ کا تعلق PD پیتھالوجی سے ہے۔ خلاصہ طور پر، چھوٹی GTPase پر منحصر جھلیوں کی اسمگلنگ اعصابی نظام میں ایک اہم کردار ادا کرتی ہے، اور اس طرح کے عمل کی بے ضابطگیوں کو AD اور PD (ٹیبل 1) جیسی نیوروڈیجینریٹیو بیماریوں سے جوڑا گیا ہے۔ نتیجے کے طور پر، راس اور رہو خاندانوں سے ملتے جلتے انداز میں [5]، GTPases کے Rab اور Arf خاندان ان پیتھالوجیز کے علاج کے اہداف کے طور پر ابھرے ہیں۔

cistanche کا نیورو پروٹیکشن اثر کیوں ہوتا ہے؟

Cistanche ایک روایتی چینی دواؤں کا پودا ہے جو صدیوں سے صحت کی مختلف حالتوں کے علاج کے لیے استعمال ہوتا رہا ہے۔ حالیہ تحقیق سے یہ بات سامنے آئی ہے کہ cistanche کے نیورو پروٹیکٹو اثرات ہوتے ہیں، جس کا مطلب ہے کہ یہ دماغ اور اعصابی نظام کو نقصان سے بچانے میں مدد کر سکتا ہے۔ Cistanche کئی فعال مرکبات پر مشتمل ہے، بشمول echinacoside، phenylethanoid glycosides، اور acteoside، جن کے بارے میں خیال کیا جاتا ہے کہ وہ اپنے نیورو پروٹیکٹو اثرات کے لیے ذمہ دار ہیں۔ یہ مرکبات دماغ میں آکسیڈیٹیو تناؤ اور سوزش کو کم کرنے میں مدد کرتے ہیں، جو دو بڑے عوامل ہیں جو الزائمر اور پارکنسنز جیسی نیوروڈیجینریٹیو بیماریوں میں حصہ ڈالتے ہیں۔ مزید برآں، cistanche اعصاب کی نشوونما کے عوامل کی سرگرمی کو بڑھانے کے لیے دکھایا گیا ہے، جو کہ پروٹین ہیں جو دماغ میں نیوران کی نشوونما اور بقا کو منظم کرنے میں مدد کرتے ہیں۔ یہ نیوران کی موت کو روکنے اور نئے کی افزائش کو فروغ دینے میں مدد کر سکتا ہے، جو علمی افعال کو بہتر بنا سکتا ہے اور اعصابی عوارض کے خطرے کو کم کر سکتا ہے۔ مجموعی طور پر، cistanche کے neuroprotective اثرات کے بارے میں سوچا جاتا ہے کہ اس کی وجہ آکسیڈیٹیو تناؤ، اور سوزش کو کم کرنے اور دماغ میں اعصاب کی نشوونما کے عنصر کی سرگرمی کو فروغ دینے کی صلاحیت ہے۔

حوالہ جات

1بیریج، ایم جے کیلشیم سگنلنگ ری ماڈلنگ اور بیماری۔ بائیو کیم۔ Soc ٹرانس 2012، 40، 297–309۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

2. گوئٹر، ایل. ٹراپانی، ای. ترابلزینی، ایل۔ Retta, SF The Ras Superfamily of Small GTPases: The Unlocked Secrets. طریقے Mol. بائول 2014، 1120، 1–18۔

3. نغمہ، S.؛ کانگریس، ڈبلیو. چاؤ، ایس. شی، وائی. ڈائی، ڈبلیو. ژانگ، ایچ. وانگ، ایکس؛ وہ، بی؛ Zhang، Q. چھوٹے GTPases: ساخت، حیاتیاتی فعل اور نینو پارٹیکلز کے ساتھ اس کا تعامل۔ ایشین جے فارم۔ سائنس 2019، 14، 30-39۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

4. توما فوکائی، ایس. شمیزو، T. GEFs کے ذریعے چھوٹے GTPases کے ریگولیشن میکانزم میں ساختی بصیرت۔ مالیکیولز 2019, 24, 3308۔ [CrossRef] [PubMed]

5. ارازولا ساسترے، اے۔ Luque Montoro, M.; Gálvez-Martín، P.؛ Lacerda, HM; لوسیا، AM؛ Llavero, F.; زوگازا، راس اور رہو فیملیز کے جے ایل سمال جی ٹی پیز نیوروڈیجینریٹیو بیماریوں میں سگنلنگ پاتھ ویز کو آن/آف کرتے ہیں۔ انٹر جے مول سائنس 2020، 21، 6312۔ [کراس ریف]

6. پیوروس، ایف۔ Peyroche, G.; Cherfils, J. Small GTPase پیریفرل بائنڈنگ ٹو میمبرینز: مالیکیولر ڈیٹرمیننٹس اور سپرمولیکولر آرگنائزیشن۔ بائیو کیم۔ Soc ٹرانس 2018، 47، 13–22۔ [کراس ریف]

7. Llavero، F.؛ ارازولا ساسترے، اے۔ Luque Montoro, M.; مارٹن، ایم اے؛ ایرینس، جے؛ لوسیا، اے. زوگازا، جے ایل سمال جی ٹی پیز آف دی راس سپر فیملی اور ٹی سیلز میں گلائکوجن فاسفوریلیس ریگولیشن۔ چھوٹے GTPases 2021, 12, 106–113۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

8. کیرل، ایف آر؛ کوہرس، ایف ای؛ جن، ای جے؛ ہائیسنجر، PR Rab GTPases اور Neurodegeneration میں جھلیوں کی اسمگلنگ۔ کرر بائول 2018، 28، R471–R486۔ [کراس ریف]

9. Sztul, E.; چن، پی ڈبلیو؛ کاسانووا، جے ای؛ Cherfils, J.; ڈیکس، جے بی؛ لیمبرائٹ، ڈی جی؛ Lee, F.-JS; رینڈازو، PA؛ سینٹی، ایل سی؛ Schürmann, A.; ET رحمہ اللہ تعالی. ARF GTPases اور ان کے GEFs اور GAPs: تصورات اور چیلنجز۔ مول بائول سیل 2019، 30، 1249–1271۔ [کراس ریف]

10. گان، ایل. ککسن، ایم آر؛ پیٹروسیلی، ایل۔ لا اسپاڈا، اے آر نیوروڈیجنریشن میں جینیات سے میکانزم تک تبدیل کرنے والے راستے۔ نیٹ نیوروسکی 2018، 21، 1300–1309۔ [کراس ریف]

11. سوریا لوپیز، جے اے؛ گونزالیز، ایچ ایم؛ لیجر، جی سی الزائمر کی بیماری۔ ہینڈ بی۔ کلین نیورول. 2019، 167، 231–255۔

12. سو، ڈبلیو. فینگ، ایف. ڈنگ، جے؛ وو، سی. الزائمر کی بیماری میں راب5- کی ثالثی اینڈو سائیٹک راستے کی بے ضابطگی۔ ٹریفک 2018، 19، 253–262۔ [کراس ریف]

13. پاریکھ، I.؛ فردو، ڈی ڈبلیو؛ ایسٹس، ایس جینیٹکس آف PICALM اظہار اور الزائمر کی بیماری۔ PLOS ONE 2014, 9, e91242۔

14. یانگ، ایل. ماؤ، کے؛ یو، ایچ. چن، جے نیورو انفلامیٹری ردعمل اور پارکنسن کی بیماری: پیتھوجینک میکانزم اور علاج کے اہداف۔ J. Neuroimmune Pharmacol. 2020، 15، 830-837۔ [کراس ریف]

15. Guadagno, NA; پروگیڈا، C. Rab GTPases: انسانی بیماریوں کی طرف جانا۔ سیلز 2019, 8, 909۔ [CrossRef] [PubMed]

16. محمد، N.-V.؛ Desjardins, A.; Leclerc, N. Tau کے سراو کا تعلق گولگی کی حرکیات میں اضافے سے ہے۔ PLOS ONE 2017, 12, e0178288۔ [کراس ریف]

17. Coune, PG; بینسادون، جے سی؛ Aebischer، P.؛ شنائیڈر، BL Rab1A اوور ایکسپریشن گولگی اپریٹس کے ٹکڑے ہونے کو روکتا ہے اور پارکنسنز کی بیماری کے الفا-سینوکلین پر مبنی چوہے کے ماڈل میں موٹر خسارے کو جزوی طور پر درست کرتا ہے۔ J. Parkinsons Dis. 2011، 1، 373–387۔ [کراس ریف]

18. Tomás, M.; مارٹنیز الونسو، ای. Martínez-Martínez، N.؛ کارا ایسٹیبان، ایم؛ مارٹنیز مینارگیز، جے اے فریگمنٹیشن آف دی گولگی کمپلیکس آف ڈوپامینرجک نیورون ان ہیومن سبسٹینیا نگرا: پارکنسنز کی بیماری میں نئی ​​سائٹوپیتھولوجیکل نتائج۔ ہسٹول۔ ہسٹوپیتھول۔ 2020، 36، 47–60۔

جاری ہے...

الازنے آرازولا ساسترے 1,2، مریم لوق مونٹورو 1، ہیڈریانو ایم لاسرڈا 3، فرانسسکو لیویرو 1,4،* اور جوزے ایل زوگازا 1,2,5،*

1 اچوکاررو باسکی سینٹر فار نیورو سائنس، UPV/EHU کا سائنس پارک، 48940 Leioa، سپین؛ alazne.arrazola@ehu.eus (AAS); miriamluquem@gmail.com (MLM)

2 شعبہ جینیٹکس، فزیکل اینتھروپولوجی اور اینیمل فزیالوجی، یونیورسٹی آف باسک کنٹری UPV/EHU، 48940 Leioa، Spain

3 Three R Labs, Science Park of the UPV/EHU, 48940 Leioa, Spain; hadrilac@gmail.com 

4 ہسپتال 12 ڈی اکتوبر ریسرچ انسٹی ٹیوٹ (i پلس 12)، 28041 میڈرڈ، سپین

5 IKERBASQUE, Basque Foundation for Science, 48013 Bilbao, Spain * خط و کتابت: fcollavero.imas12@h12o.es (FL); joseluis.zugaza@ehu.es (JLZ)