Cistanche Deserticola سے Phenylethanoid Glycosides کی اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمیوں پر مطالعہ

رابطہ: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 ای میل:audrey.hu@wecistanche.com

LI Li et al (چانگچن نارمل یونیورسٹی کی مرکزی لیبارٹری، چانگچون، جلن 130032)

خلاصہ[ مقصد ] اس تحقیق کا مقصد فینیلیتھانائڈ گلائکوسائیڈز کی اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمیوں کا منظم طریقے سے مطالعہ کرنا تھا۔Cistanchedeserticola. [طریقہ] دو ماڈل سسٹمز، فری ریڈیکل 2،2-ڈائفنائل-ایل -پکریل ہائیڈرزائل (DPPH ' ) پرکھ اور فوٹو کیمیلومینیسینس (PCL) پرکھ، C. deserticola extract کی اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی کی پیمائش کے لیے استعمال کیے گئے تھے، ایکٹیوسائڈ، آئسو ایکٹیوسائیڈ، اور ایچناکوسائیڈ۔ نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ echinacoside، acteoside، isoacteoside، اور C. deserticola کے 80 فیصد ایتھنول ایکسٹریکٹ میں کل فینولک مواد (TPCs) 753.95، 659.94، 356.14، اور 14.73 ملی گرام گیلک ایسڈ / جی نمونے تھے۔ C. deserticola اقتباس نے PCL تجربے میں مضبوط اینٹی آکسینٹ سرگرمی ظاہر کی، اس کے بعد echinacoside، acteoside، اور isoacteoside شامل ہیں۔ تاہم، echinacoside نے DPPH کے تجربے میں مضبوط اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی کی نمائش کی، اس کے بعد ایکٹیوسائیڈ، آئسویکٹیو سائیڈ، اور C. deserticola ایکسٹریکٹ۔

[نتیجہ]یہ تحقیق C. deserticola سے phenylethanoid glycosides کے فارما کولوجی اور حیاتیاتی سرگرمی کے مطالعہ کے حوالے فراہم کر سکتی ہے۔

کلیدی الفاظ Cistanche deserticola ; ایکٹیوسائیڈ Isoacteoside؛ Echinacoside ؛ اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی؛ ڈی پی پی ایچ؛ پی سی ایل

Cistanche (Cistanche deserticolaYC Ma.) کا ایک پودا ہے۔Cistancheکی نسل (Oro-banehaeeeae)Cistancheجینس (Cistanche)۔ کھجلی کے پتوں کے ساتھ Cistanche کا سوکھا مانسل تنے۔ مطالعے کی ایک بڑی تعداد نے پایا ہے کہ Cistanche پودوں کے اہم فعال اجزاء phenethyl الکحل glycoside مرکبات ہیں۔ . Phenylethanol glycoside مرکب ایک قسم کے پولیفینول مرکب سے تعلق رکھتا ہے، جو بہت سے قسم کے پودوں میں وسیع پیمانے پر تقسیم کیا جاتا ہے. فارماسولوجیکل ٹیسٹ اسٹڈیز سے پتہ چلتا ہے کہ ان مرکبات میں فارماسولوجیکل اور حیاتیاتی سرگرمیوں کی ایک وسیع رینج ہوتی ہے، جیسے کہ اینٹی ہیپاٹوٹوکسین، اینٹی سوزش، ینالجیسک، اور اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمیاں۔ ان میں سب سے زیادہ حیران کن بات یہ ہے کہ phenoxyethanol glycoside مرکب میں بہت اچھی اینٹی آکسیڈنٹ سرگرمی ہوتی ہے۔ مصنف نے بنیادی طور پر فینتھیل الکحل گلائکوسائیڈ مرکبات کی اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی کا ایک منظم تجزیہ کیا۔Cistancheوٹرو تشخیصی طریقوں میں دو اینٹی آکسیڈینٹ کا استعمال کرتے ہوئے، یعنی فوٹوہیمیلیومینیسیئنس (PCL) اور 2،2-ڈفینائل-1-پیریل-ہائیڈروکسیل (DPPH') 80 کی اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی کی پیمائش کے لیے دو مختلف نظام استعمال کیے گئے تھے۔ کا فیصد ایتھنول نچوڑCistanche, ergosteroside, isoergoside، اورechinacoside.

1 مواد اور طریقے

1.1 نمونے اور ری ایجنٹس

Cistanche (Cistanche deserticola)دواؤں کا مواد بیجنگ ٹونگرینٹانگ فارمیسی سے خریدا گیا تھا۔ایرگوسٹیروسائیڈ، isoergoside،echinacoside، فولن۔ Ciocalteu reagent, gallic acid, 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH.) وغیرہ SigmaChemicalCo سے خریدے گئے تھے۔ کمپنی (سینٹ لوئس، ایم او) پی سی ایل کے تجزیہ کے لیے استعمال ہونے والا سالوینٹ اینالیٹک جینا اے جی (برلن، جرمنی) نے فراہم کیا تھا۔ دیگر ری ایجنٹس تمام تجزیاتی ری ایجنٹس ہیں (بیجنگ کیمیکل پلانٹ کے ذریعہ تیار کردہ)۔ پانی انتہائی پیور پانی (18.2 nPa) ہے۔

1.2 نمونہ نکالنا

درست طریقے سے وزن 2.0005 گرامCistancheنمونہ پاؤڈر، کمرے کے درجہ حرارت پر 0.5 گھنٹے کے لیے الٹراسونک نکالنے کے لیے 80 فیصد ایتھنول کا 50rnl استعمال کریں، دو بار نکالیں، نمونے کے محلول کو فلٹر کریں، روٹری بخارات خشک ہونے تک (<40oc), use="" 100ml="" of="" distilled="" water="" dissolve,="" degrease="" twice="" with="" 100ml="" n-hexane,="" discard="" the="" n-hexane="" solution,="" extract="" the="" water="" part="" with="" 100="" ml="" of="" water-saturated="" n-butanol="" 3="" times,="" combine="" the="" n-butanol="" extracts,="" rotary="" evaporate="" to=""><40oc), and="" use="" 4ml="" for="" the="" residue="" the="" volume="" of="" absolute="" ethanol="" is="" fixed="" to="" obtain="" a="" sample="" of="">Cistanche deserticola.

1.3 نمونے کے کل پولیفینول مواد کا تعین

نمونے کے کل فینول کے مواد کا تعین F{{0}}lin-Ciocaheu طریقہ استعمال کرتے ہوئے کیا جاتا ہے، اور اس کے نتیجے کو ملی گرام گیلک ایسڈ فی گرام ایکسٹریکٹ کے طور پر ظاہر کیا جاتا ہے۔ 0.2rnI کے ایک خاص ارتکاز کے ساتھ ایک نمونہ حل لیں (جذب کو معیاری منحنی خطوط پر گرانے کے لیے)، 0.5mol/L کے ارتکاز کے ساتھ 1ml Folin-Ciocaheu reagent شامل کریں، اور پھر اچھی طرح سے مکس کرنے کے لیے 7.5 فیصد کے ارتکاز کے ساتھ 0.8 ملی لیٹر سوڈیم کاربونیٹ محلول شامل کریں، کمرے کے درجہ حرارت پر 0.5 گھنٹے کے لیے رکھا جائے، اور پھر جاذبیت کو 765nm پر ماپا جائے (الٹرا وائلٹ سے دکھائی دینے والا سپیکٹرو فوٹومیٹر: DU800، بیک مین کوہر، انکارپوریٹڈ USA)۔ معیاری وکر بنانے کے لیے گیلک ایسڈ محلول (بڑے پیمانے پر ارتکاز کی حد 002-0.20me/m1) استعمال کریں، اور تمام ٹیسٹ دو بار دہرائے جاتے ہیں۔

1.4 وٹرو تجزیہ میں اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی

1.4.1 PCL طریقہ کا تعین۔

ٹیسٹ میں Photochem@(Berlin, Ger-many) الٹرا فاسٹ اینٹی آکسیڈنٹ اور فری ریڈیکل آٹومیٹک اینالائزر کا استعمال کیا گیا۔ اصول فوٹو کیمیکل طریقہ سے آزاد ریڈیکلز پیدا کرنا ہے اور فری ریڈیکلز کا پتہ لگانے کے لیے کیمیلومینیسینس طریقہ استعمال کرنا ہے۔ تجربے میں، رد عمل کے مالیکیولز کو اکسانے کے لیے فوٹو کیمیکل ایکسائٹیشن اثر کے ساتھ ایک فوٹو سنسیٹائزر استعمال کیا گیا، تاکہ الٹرا وائلٹ لیمپ کے عمل کے تحت، آکسیڈیشن ری ایکشن 1000 بار ہوا۔ عام حالات سے زیادہ تیز، اور آزاد ریڈیکلز تیزی سے پیدا ہوئے۔ PCL-ACW-Kit طریقہ منتخب کریں سائیلیم ذیلی نمونوں کے پانی میں گھلنشیل اجزاء کی اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی کی پیمائش کریں۔ پائپیٹ 1۔{21}} ملی لیٹر ردعمل (بشمول 0.1moL/L سوڈیم کاربونیٹ کا ارتکاز، 10.5 کی pH قدر اور ارتکاز 0.1mmol/LNA، ایک EDTA، 1.5ml ACW- diluent (پانی )، ارتکاز 1mmol/LLumino1) رد عمل کے مالیکیولز کو اکسانے کے لیے فوٹو سنسیٹائزر کے طور پر کام کرتا ہے، تاکہ آزاد ریڈیکلز جلد پیدا ہوں، اور ساتھ ہی ایک فوٹو کیمیلومینیسینٹ مادہ کے طور پر۔ نمونہ اور معیار دونوں 10 "l ہیں۔ L کے مختلف ارتکاز (0.5, 1.0, 2.0 اور 3.0 nmol/L) کی پیمائش کرنے سے۔ ascorbic ایسڈ کے لیے معیاری منحنی مساوات Y=24.640Ox جمع 2.9311, R²=0.9969 ہے۔ ٹیسٹ میں نمونہ یا معیاری محلول کو پتلا کرنا ضروری ہے تاکہ وقفہ وقفہ معیاری وکر کی لکیری حد میں آئے۔ فوٹوکیم معیاری منحنی خطوط پیدا کرتا ہے اور نمونے کی اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی کو خود بخود جانچتا ہے، اور نمونے کی اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی L． کے برابر ہے۔ ascorbic ایسڈ کے nanomoles کی تعداد کی طرف سے شمار کیا جاتا ہے.

1.4.2 ڈی پی پی ایچ طریقہ کا تعین۔

Diphenylpicrylhydrazino radical [DPPH ·] ایک مستحکم نائٹروجن مرکوز ریڈیکل ہے جس کی طول موج 515nm پر زیادہ سے زیادہ جذب ہوتی ہے۔ [DPPH ·] میتھانول محلول جامنی رنگ کا ہے، اور اس کا ارتکاز جذب کے ساتھ ایک خطی تعلق رکھتا ہے۔" [DPPH ·] میتھانول محلول میں اینٹی آکسیڈنٹ شامل کرنے کے بعد، اینٹی آکسیڈنٹس [DPPH ·] فری ریڈیکلز کے ساتھ مل سکتے ہیں یا ان کی جگہ [DPPH ·] بنا سکتے ہیں۔ آزاد ریڈیکلز کی تعداد کم ہو جاتی ہے، اور محلول کا رنگ ہلکا ہو جاتا ہے، جو 515 nm کی طول موج پر جاذبیت میں مسلسل کمی سے ظاہر ہوتا ہے جب تک کہ یہ استحکام تک نہ پہنچ جائے۔" ٹیسٹ میں میتھانول کے بجائے ایتھنول کا استعمال کیا گیا۔ درست طریقے سے وزن کریں [DPPH ·] اور ارتکاز کو 0 پر ترتیب دیں۔ [DPPH ·] 0 کا ایتھنول محلول۔ , R=0.9993۔ آزاد ریڈیکلز کی بقایا شرح کی پیمائش کا طریقہ ادب سے مراد ہے [16]۔ ایتھنول کو سالوینٹ کے طور پر استعمال کرتے ہوئے، نمونہ اور معیاری محلول کی مختلف ارتکاز تیار کریں، بالترتیب 0.1ml نمونہ یا معیاری محلول لیں، اور 2.5mg/L کے بڑے پیمانے پر ارتکاز کے ساتھ 3.9ml [DPPH·] معیاری محلول شامل کریں (فی الحال استعمال کیا جاتا ہے)، نمونے کے محلول کو ایتھنول سے خالی کے طور پر تبدیل کریں۔ مخلوط محلول کو ہلائیں، 515nm کی طول موج پر مختلف اوقات میں اس کی جاذبیت کی پیمائش کرنے کے لیے کیویٹ کا استعمال کریں، اور [DPPH·] کی بقایا شرح کا حساب لگانے کے لیے اسے معیاری وکر کے مطابق [DPPH·] کے بڑے پیمانے پر ارتکاز میں تبدیل کریں۔ [DPPH ·] کی بقایا شرح اور شامل کردہ نمونے کی اسی مقدار کے مطابق، نمونے سے [DPPH -] فری ریڈیکلز کو ہٹانے کے لیے ایک وکر تیار کیا جا سکتا ہے۔ [DPPH ·] کے بڑے پیمانے پر ارتکاز اور جاذب کے درمیان تعلق کے منحنی خطوط کے مطابق، آزاد ریڈیکل سکیوینجر کے اضافے کے بعد ماپا جانے والے جذب کو [DPPH ·] کے بڑے پیمانے پر ارتکاز میں تبدیل کیا جا سکتا ہے تاکہ [DPPH ·] کا حساب لگایا جا سکے۔ فری ریڈیکل سکیوینجر کا اضافہ۔ بقایا شرح کا حساب کا فارمولا اس طرح ہے: [DPPH ·]REM=[DPPH·]/[DPPH·]r=0×100 فیصد جہاں [DPPH·] DPPH کا بڑے پیمانے پر ارتکاز ہے فری ریڈیکل اسکیوینگنگ کے عمل میں ایک خاص لمحے پر، [DPPH·]:۔ DPPH· کی اصل بڑے پیمانے پر ارتکاز ہے۔ شامل کیے گئے اینٹی آکسیڈنٹس کی تعداد اور [DPPH ·] کی بقایا شرح کے مطابق، دونوں کے درمیان تعلق کا منحنی خطوط بنایا جاتا ہے، اور رجعت کی مساوات لکیری ریگریشن تجزیہ کے ذریعے حاصل کی جا سکتی ہے۔ ریگریشن مساوات کے مطابق، اینٹی آکسیڈینٹ خوراک جب [DPPH ·] کی بقایا شرح 50 فیصد ہو تو اس کا حساب لگایا جا سکتا ہے۔ آدھا روکنا۔ نمونوں یا معیارات کے مختلف ارتکاز کے [DPPH·] فری ریڈیکل سکیوینگنگ وکر کے مطابق، جب [DPPH·] کی اصل بڑے پیمانے پر ارتکاز 50 فیصد (مستحکم حالت) تک کم ہو جائے تو نمونے کی مقدار EC کا حساب لگائیں۔ EC جتنا چھوٹا ہوگا، آزاد ریڈیکل اسکیوینگنگ کی صلاحیت اتنی ہی مضبوط ہوگی۔ متوازی طور پر 3 بار ٹیسٹ کریں۔

cistanche

2 نتائج اور تجزیہ

2.1 نمونے کے کل پولی فینول مواد کا تعین کل پولی فینول مواد کے تعین میں، کل پولی فینول موادechinacosideسب سے زیادہ ہے، جو 753.95 ملی گرام گیلک ایسڈ/جی ہے۔ اس کے بعد ergosteroid glycosides، isoergosteroid glycosides، اور اس کے خام عرقCistancheجو کہ بالترتیب 468.3، 356.14، اور 14.73 ملی گرام گیلک ایسڈ/جی تھے۔

2.2 نمونہ اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی کا تعین

2.2.1 PCL- ACW طریقہ کار کے تعین کے نتائج۔ PCL-ACW اینٹی آکسیڈینٹ ٹیسٹ میں، 1txg کی اینٹی آکسیڈینٹ صلاحیتCistancheدواؤں کا مواد 15.68nmol L-ascorbic ایسڈ کی اینٹی آکسیڈینٹ صلاحیت کے برابر ہے۔ 1 جیechinacoside14.03nmol ascorbic acid سرگرمی کی اینٹی آکسیڈینٹ صلاحیت کے برابر ہے: 1txgergosterosideascorbic ایسڈ کی اینٹی آکسیڈینٹ صلاحیت 11.44nmolL کے برابر ہے۔ 1Ixg isomergosteroside 8.24nmol ascorbic acid کی اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی کے برابر ہے۔

2.2.2 DPPH طریقہ پیمائش کے نتائج۔ یہ ٹیبل 1 سے دیکھا جا سکتا ہے کہ یہ صاف ہو گیا ہے۔ فری ریڈیکلز کی صلاحیت کی ترتیب ہے۔ergosteroside, echinacoside، isoergoside اور کا خام نچوڑCistanche, جس کے درمیان ergo طرف اورechinacosideڈی پی پی ایچ ٹیسٹ میں بنیادی طور پر ایک ہی اینٹی آکسیڈینٹ صلاحیت ہے۔ اس سے دیکھا جا سکتا ہے۔ چونکہ مختلف ان وٹرو اینٹی آکسیڈینٹ ٹیسٹ سسٹم نمونوں کی پیمائش کے لیے استعمال کیے جاتے ہیں، اس لیے اینٹی آکسیڈینٹ اثرات کا طریقہ کار مختلف ہے، اور نتائج متضاد ہو سکتے ہیں۔ ٹیسٹ میں بھی اس کی تصدیق ہوئی ہے۔ لہذا، مزید تصدیق کے لیے دیگر اینٹی آکسیڈینٹ تجزیہ کے نظام کو منتخب کرنا ضروری ہے۔

echinacosie

حوالہ جات

[1] یانگ Cuiping، Su Weiwei. گوشت کے سوپ کی تحقیقی پیشرفت

[2]لی لی، سونگ زیہونگ، ٹو پینگفی Cistanche پودوں کے کیمیائی اجزاء پر تحقیقی پیشرفت[J]۔Chinese Herbal Medicine,2003,34(5):473 -476۔

[3]ہیرومی کوبیاشی، ہیروکو کارساوا جوشیو میاسے۔ Constituents Cistanchis Herba پر مطالعہ۔ HI نئے فینیلپروپینائڈ گلائکوسائیڈز، سیستانوسائڈز A اور B[J] کی تنہائی اور ساخت۔ کیم فارم بل، 19^,32(10):3009 -3014۔

[4]LI LI، RONG TSAO، ریمنڈ یانگ، وغیرہ۔ سے phenylethanoid glycosides کی تنہائی اور تطہیرCistanche deserticolaتیز رفتار کاؤنٹر کرنٹ کرومیٹوگرافی کے ذریعے۔ فوڈ کیمسٹری، 2008,1(^:702-710۔

[5]LI LI، RONG TSAO، LIU ZQ، et al. ہائی 南-اسپیڈ کاؤنٹر کرنٹ کرومیٹوگرافی [J] کے ذریعے Plantago psyllium L. سے actec^ide اور isoacteoside کو الگ تھلگ اور صاف کرنا۔ جرنل آف کرومیٹوگرافی A,2005,1063: 161-169۔

[6] RAVN H، Nishib S، SASAhara M، et al. پلانٹاگو ایشیاٹیکا سے فینولک مرکبات[جے]۔ فائٹو کیمسٹری، 1990، 29: 3627-3631۔

[7] TOYAMA Y, MATSUMOTO M, NISHIOKA I. رحمنیہ گلوئینوسا ور کی بیماری والی جڑوں سے فینولک گلائکوسائیڈز۔ purpurea [J]. فائٹو کیمسٹری، 1987، 26: 983-986۔

[8] وانگ ژاؤوین، جیانگ ژاؤان، وو جی جے یا، وغیرہ۔ Cistanche cistanche Total glycosides in Vitro scavenging free radicals اور DNA کو پہنچنے والے نقصان پر حفاظتی اثرات OH [J] سے۔ چینی فارماسیوٹیکل جرنل، 2001، 36(1): 29-31۔

[9]XIONG Q, HASE K, TEZUKA Y, et al. سے phenylethanoids کی hepatoprotective سرگرمیCistanche deserticola[جے]۔ پلانٹا میڈ، 1998,64:120۔

[10] SCHAPOVAL EES، ونٹر ڈی ورگاس MR، CHAVES CG، et al. Stachytarpheta cayeunensis [J] سے نچوڑ اور الگ تھلگ مرکبات کی سوزش اور اینٹینوسیسیپٹیو سرگرمیاں۔ J Ethnopharmacol، 1998، 60: 53.

[11] LI J، WANG PF، ZHENG RL، et al. وٹرو میں آکسیڈیٹیو ہیمولیسس کے خلاف پیڈیکولریز سے فینیلپروپینائڈ گلائکوسائیڈز کا تحفظ [جے]۔ پلانٹا میڈ، 1993,59:315-317۔

[12] HE ZD, LAU KM, Xu HX, et al. برینڈیسیا کینسر [جے] سے فینی لیتھانائڈ گلائکوسائڈز کی اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی۔ ایتھنو فارماکولوجی، 2000، 71:483-486۔

[13]XIONG Q, KADOTA S, TANI T, et al. سے phenylethanoid کے اینٹی آکسائڈنٹ اثراتCistanche deserticola[جے]۔ بائیول فارم بل، 1996,19: 1580-1585۔

[14] TSAO R، YANG R، XIE S، et al. کون سے پولی فینولک مرکبات سیب کی کل اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمیوں میں حصہ ڈالتے ہیں؟ [جے]۔ جے ایگرک فوڈ کیم، 2005,53:4989-4995۔

[15] POPOV IN, LEWIN G. اینٹی ریڈیکل سرگرمی کا ہائیوٹو کیمیلومینسنٹ کا پتہ لگانا: پانی میں گھلنشیل اینٹی آکسیڈنٹس کی غیر اینزیمک U. جانچ۔ فری ریڈ بائیول میڈ، 1994، 17: 267-271۔

[16]BRAND-WILIAMS W, CUVEHER ME, BERGET C. اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی کا اندازہ کرنے کے لیے ایک آزاد بنیاد پرست طریقہ کار کا استعمال [J]۔ لیبینسم وِس ٹیکنالوجی، 1995,28:25-30۔

[17] لی چونیانگ، سو شیئنگ، وانگ ژانگ۔ آزاد ریڈیکلز [J] کو نکالنے کے لیے انگور کے بیج پروانتھوسیانائیڈنز کی صلاحیت کا تعین کرنے کے لیے DPPH طریقہ۔ جرنل آف فوڈ اینڈ بائیو ٹیکنالوجی، 2006، 25(2)" 02-106۔

SCHLESIER K, HARWICH M, BOHM V, et al. مختلف ان وٹرو طریقوں کا استعمال کرتے ہوئے اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی کا اندازہ [J]۔ فری ریڈیکل ریسرچ، 2002,36(2):177-187۔