ہپپوکیمپس پر منحصر میموری اور مادہ چوہوں میں Synaptic پلاسٹکٹی پر ورزش سے پیدا ہونے والے فوائد کی عارضی برداشت حصہ 1

خلاصہ

ورزش ہپپوکیمپل نیوروجینیسیس اور نیوروپلاسٹیٹی کو سہولت فراہم کرتی ہے جو بدلے میں، علمی فعل کو فروغ دیتی ہے۔ ہمارے پچھلے مطالعات نے یہ ثابت کیا ہے کہ نر چوہوں میں رضاکارانہ ورزش ایسی حالتوں میں شپپوکیمپس پر منحصر سیکھنے کو قابل بناتی ہے جو عام طور پر بیٹھے ہوئے جانوروں میں طویل مدتی میموری کی تشکیل کے لیے ذیلی حد ہوتی ہے۔ اس طرح کے علمی اضافہ کو ورزش کے بند ہونے کے بعد بھی برقرار رکھا جا سکتا ہے اور اس کے بعد کے سب تھریشولڈ ایکسرسائز سیشن کے ذریعے دوبارہ مشغول کیا جا سکتا ہے، تجویز ہے کہ ورزش سے حاصل ہونے والے فوائد عارضی طور پر متحرک ہیں۔

نیوروپلاسٹیٹی سے مراد نیوران کی بیرونی محرکات اور اندرونی سرگرمیوں کے ساتھ مسلسل مطابقت پیدا کرنے کی صلاحیت ہے۔ یہ صلاحیت میموری کی تشکیل اور ذخیرہ کرنے میں اہم کردار ادا کرتی ہے۔ اس نے کہا، نیوروپلاسٹیٹی کا میموری سے گہرا تعلق ہے۔

نیوروپلاسٹیٹی نیوران کے درمیان synaptic کنکشن کے ذریعے ہوتی ہے۔ جب ہم کوئی نئی چیز وصول کرتے ہیں، تو دماغ میں نیوران کے درمیان رابطے بدل جائیں گے، نئے Synaptic کنکشن بن جائیں گے۔ اس عمل کو طویل مدتی اور مستحکم synaptic کنکشن پیدا کرنے کے لیے بار بار مشق اور تکرار کی ضرورت ہوتی ہے۔ صرف یہ طویل مدتی Synaptic کنکشن میموری کو متاثر کر سکتا ہے اور اسے محفوظ کر سکتا ہے۔

نیوروپلاسٹیٹی بھی عمر اور تجربے کے ساتھ بدلتی ہے۔ جب ہم جوان ہوتے ہیں تو نیوروپلاسٹیٹی بہت طاقتور ہوتی ہے، اور جب ہم نئی چیزیں سیکھتے ہیں تو دماغ بہت تیزی سے نئے Synaptic کنکشن بنا سکتا ہے۔ لیکن جیسے جیسے ہماری عمر ہوتی ہے، نیوروپلاسٹیٹی کم ہوتی جاتی ہے، یعنی نئی معلومات سیکھنا مشکل ہو جاتا ہے۔ تاہم، اگر ہم مثبت رویہ اور نئی چیزیں سیکھنے کی خواہش اور عادت کو برقرار رکھتے ہیں، تب بھی ہم نیوروپلاسٹیٹی کی ایک خاص سطح کو برقرار رکھ سکتے ہیں۔ اس کا مطلب ہے کہ ہم اپنی یادداشت اور ذہانت کو بہتر بناتے ہوئے سیکھنا اور بڑھنا جاری رکھ سکتے ہیں۔

خلاصہ کرنے کے لیے، نیوروپلاسٹیٹی اور میموری کا گہرا تعلق ہے۔ مثبت رویہ کو برقرار رکھنے اور نئے علم کو فعال طور پر سیکھنے کی عادت ہمیں اچھی نیوروپلاسٹیٹی کو برقرار رکھنے میں مدد دے سکتی ہے، اس طرح بہتر یادداشت اور ذہانت کو حاصل کیا جا سکتا ہے۔ آئیے ہم مسلسل مطالعہ کریں، مثبت رویہ رکھیں، اور اپنی صلاحیتوں اور خوبیوں کو مسلسل بہتر بنائیں۔ یہ دیکھا جا سکتا ہے کہ ہمیں اپنی یادداشت کو بہتر بنانے کی ضرورت ہے۔ Cistanche deserticola نمایاں طور پر یادداشت کو بہتر بنا سکتا ہے کیونکہ Cistanche deserticola ایک روایتی چینی ادویاتی مواد ہے جس میں بہت سے منفرد اثرات ہیں، جن میں سے ایک یادداشت کو بہتر بنانا ہے۔ کیما بنایا ہوا گوشت کی افادیت اس میں موجود مختلف فعال اجزاء سے آتی ہے، بشمول ایسڈ، پولی سیکرائڈز، فلیوونائڈز وغیرہ۔ یہ اجزاء مختلف طریقوں سے دماغی صحت کو فروغ دے سکتے ہیں۔

یادداشت کو بہتر بنانے کے 10 طریقے جانیں پر کلک کریں۔

خواتین میں، ورزش کے فوائد کو کس حد تک برقرار رکھا جا سکتا ہے اور اس دیکھ بھال کے بنیادی طریقہ کار کی ابھی تک وضاحت نہیں کی گئی ہے۔ یہاں، ہم نے خواتین C57BL/6J چوہوں میں ورزش کے فوائد کو شروع کرنے اور برقرار رکھنے کے لیے درکار ورزش کے پیرامیٹرز کا جائزہ لیا۔ آبجیکٹ لوکیشن میموری (OLM) ٹاسک کہلانے والے ہپپوکیمپس پر منحصر ٹاسک کے ذیلی تھریشولڈ ورژن کا استعمال کرتے ہوئے، ہم یہ ظاہر کرتے ہیں کہ 14d رضاکارانہ ورزش خواتین چوہوں میں ذیلی حد کے حصول کے حالات کے تحت سیکھنے کے قابل بناتی ہے۔ ابتدائی ورزش کے بعد، 7d بیہودہ تاخیر کے نتیجے میں کارکردگی میں کمی واقع ہوتی ہے، جس کو اس وقت دوبارہ سہولت فراہم کی جا سکتی ہے جب جانوروں کو بیٹھنے میں تاخیر کے بعد دوبارہ متحرک ہونے والی ورزش کا 2d موصول ہوتا ہے۔

ایسٹرس سائیکل کا اندازہ ڈیسٹرس فیز کی نسبت ایسٹرس فیز کے دوران وہیل چلانے کی بہتر سرگرمی کو ظاہر کرتا ہے، جب کہ ٹریننگ یا ٹیسٹ پر ایسٹروس فیز نے OLM کی کارکردگی کو متاثر نہیں کیا۔ اسی ورزش کے پیرامیٹرز کو استعمال کرتے ہوئے، ہم یہ ظاہر کرتے ہیں کہ 14d ورزش طویل مدتی صلاحیت کو بڑھاتی ہے۔ LTP) ہپپوکیمپس کے CA1 خطے میں، ایک ایسا اثر جو ان دن بھر میں تاخیر اور دوبارہ متحرک ہونے والے ورزش کے سیشن کے بعد برقرار رہتا ہے۔ پچھلے مطالعات میں Synaptic پلاسٹکٹی اور ادراک پر ورزش میں ثالثی کے فوائد کے بنیادی میکانزم کے طور پر ڈیکسرسائز کی حوصلہ افزائی BDNF اپ گریجولیشن کی تجویز پیش کی گئی ہے۔

تاہم، میموری کی بازیافت کے بعد ہپپوکیمپل Bdnf mRNAExpression کے بارے میں ہماری تشخیص ورزش کے حالات اور کنٹرول کے درمیان کوئی فرق ظاہر نہیں کرتی ہے، یہ تجویز کرتی ہے کہ ورزش کے حوصلہ افزائی کے فوائد کی بحالی کے لیے مستقل Bdnf اپ گریجشن کی ضرورت نہیں ہے۔ ایک ساتھ، ہمارے اعداد و شمار سے پتہ چلتا ہے کہ رضاکارانہ ورزش کا 14d مادہ چوہوں میں نیوروپلاسٹیٹی اور علمی فنکشن پر دیرپا فوائد کا آغاز کر سکتا ہے، جو خواتین میں ورزش سے حاصل ہونے والے فوائد کی عارضی برداشت کا پہلا ثبوت ہے۔

مطلوبہ الفاظ

ورزش؛ سیکھنا ہائےppocampus Synaptic پلاسٹکٹی؛ بی ڈی این ایف؛ ایسٹروس سائیکل۔

1. تعارف

دماغی صحت کی حمایت اور برقرار رکھنے پر جسمانی ورزش کے اثرات اچھی طرح سے دستاویزی ہیں۔ دماغ میں، ہپپوکیمپس سیکھنے اور یادداشت کی تشکیل کے لیے اہم ہے کیونکہ دماغ کے اس ڈھانچے میں خلل یادداشت کی خرابی کا باعث بنتا ہے (Packard & McGaugh, 1996; Riedel et al., 1999; Scoville & Milner, 1957)۔ لہذا، ہپپوکیمپس میں غیر معمولی مورفولوجیکل اور فنکشنل تبدیلیوں کو عمر اور بیماری کی حالتوں سے منسلک علمی خرابیوں سے منسوب کیا جاتا ہے (بیٹیو ایٹ ال۔، 2017)۔

دونوں انسانوں میں مطالعہ (دس برنکیٹ ال۔، 2015؛ ایرکسن ایٹ ال۔، 2011؛ ​​پاجونک ایٹ ال۔، 2010؛ ٹیکسیرا ایٹ ال۔، 2018) اور جانوروں کے ماڈلز (کوپر ایٹ ال۔، 2018؛ نیپر ایٹ ال۔، 1996؛ O'Callaghan et al. & Cotman، 2013؛ Lauretta et al.، 2021؛ Liu et al.، 2011؛ ​​Muscari et al.، 2010)۔

ورزش کے فائدہ مند اثرات اور ہپپوکیمپس اور علمی فعل کے درمیان تعلق کے بارے میں کافی تحقیق کے باوجود، ورزش سے پیدا ہونے والے فوائد کی وقتی حرکیات کے بارے میں بہت کم معلوم ہے۔ یعنی، ہپپوکیمپل فنکشن کو بڑھانے کے لیے ورزش کا دورانیہ کیا ہے، اور ورزش ختم ہونے کے بعد یہ فوائد کب تک برقرار رہتے ہیں؟

یہاں تک کہ بہت کم مطالعات نے ورزش کی حوصلہ افزائی کے فوائد کی دیکھ بھال کے تحت مالیکیولر میکانزم کی تحقیقات کرنے کی کوشش کی ہے۔ یہ دیکھتے ہوئے کہ انسانوں میں ورزش کے طریقے جانوروں کے مطالعے میں استعمال ہونے والے مقابلے میں کم سخت اور مستقل ہوتے ہیں (لی اور اسکریٹ، 2001)، یہ ضروری ہے کہ ورزش کے ایسے پروٹوکول تیار کیے جائیں جو لچکدار ہوں اور انہیں روزانہ ورزش کے معمول کی ضرورت نہ ہو لیکن پھر بھی وہ ورزش کی حوصلہ افزائی کے علم میں مشغول اور برقرار رکھ سکتے ہیں۔ فوائد جانوروں کے مطالعے میں، تمام مطالعات میں استعمال ہونے والے ورزش کے پروٹوکول میں کافی تغیر کی وجہ سے ورزش کے فوائد کو شروع کرنے اور برقرار رکھنے کے لیے درکار کم سے کم ورزش کی مدت کی نشاندہی کرنا مشکل ہے (لوپرینزی ایٹل۔، 2019)۔ لہذا، یہ ضروری ہے کہ ورزش کی حد کا جائزہ لیا جائے جو علمی فوائد اور بنیادی میکانزم کو اکساتا اور برقرار رکھتا ہے۔

ورزش نیوروپلاسٹیٹی، نیوروجینیسیس، اور اس کے نتیجے میں، سیکھنے اور یادداشت کے طریقہ کار کی سہولت فراہم کرتی ہے جو ہپپوکیمپس میں دماغ سے ماخوذ نیوروٹروفک فیکٹر (BDNF) کے نیوروٹروفک عمل کو اکساتی ہے (الوماری ایٹ ال۔ et al. مادہ اور نر چوہوں دونوں میں، ورزش میموری کے مختلف کاموں میں طرز عمل کی کارکردگی کو بہتر بناتی ہے، بشمول ہیوی مقامی پر مبنی، ہپپوکیمپس پر مبنی کام: مورس واٹر میز (MWM)، آبجیکٹ لوکیشن میموری (OLM) اور ریڈیل آرم میز دیگر کے علاوہ۔ ہپپوکیمپس پر مبنی میموری ٹاسک جیسے سیاق و سباق سے متعلق خوف کنڈیشنگ، غیر فعال اجتناب، اور نوول آبجیکٹ کی شناخت (انٹلکوفر ایٹ ال۔ 2013؛ لیمبرٹ ایٹ ال۔ 1999؛ وان پراگ، کیمپرمین، وغیرہ، 1999؛ ویور، پوٹر، اور وان پراگ، 2012)۔

لاغر چوہوں، ہمارے مطالعے اور دیگر نے اس بات کی نشاندہی کی ہے کہ سیکھنے اور یادداشت کے فوائد کے لیے کم سے کم ورزش کا دورانیہ 2 ہفتے درکار ہے جسے غیرفعالیت کے دورانیے میں برقرار رکھا جا سکتا ہے اور ایک مختصر، ذیلی حد 2d مشقوں کے دوبارہ تعارف کے ذریعے دوبارہ مشغول کیا جا سکتا ہے (Berchtold et al.، 2010؛ Butler et al.، 2019؛ Intlekofer et al.، 2013)۔ مالیکیولر لیول پر، 2 ہفتوں کی ورزش نر چوہوں میں ہپپوکیمپل دماغ سے ماخوذ نیوروٹروفک فیکٹر پروٹین کے اپ گریجولیشن کی حوصلہ افزائی کرتی ہے (برچٹولڈ ایٹ ال۔، 2005)۔

بی ڈی این ایف لیولز کے بیس لائن میں گرنے کے بعد، ایک مختصر، سب تھریشولڈ 2d ورزش سیشن کا دوبارہ تعارف ہپپوکیمپل بی ڈی این ایف (برچٹولڈ ایٹ ال۔، 2005) کی بلند سطحوں کو دوبارہ سہولت فراہم کر سکتا ہے۔ یہ ایک ممکنہ طریقہ کار کے طور پر ورزش کی ثالثی BDNF اپ گریجشن کا مشورہ دیتا ہے جو طویل عرصے تک چلنے والی نیورونل تبدیلیوں کو پرائم کرتا ہے تاکہ ورزش کی کم تعدد محرک کو ان موافقت سے فائدہ اٹھانے اور علمی فوائد کی سہولت فراہم کرے۔

BDNF سگنلنگ ہپپوکیمپلونگ ٹرم پوٹینشن (ایل ٹی پی) کو آمادہ کرنے کے لیے پروٹین کی ترکیب پر منحصر میکانزم کو فروغ دیتا ہے، جو سیکھنے اور یادداشت کا ایک سیلولر تعلق ہے (پانجا اور برہم، 2014؛ سلوا، 2003)۔ لہٰذا، ہپپوکیمپل ایل ٹی پی کے بعد ورزش کو بڑھانے کا مشورہ دیا جاتا ہے تاکہ ورزش کی سہولت سے سیکھنے کو کم کیا جاسکے (L. Bettio et al., 2019; Liuet al., 2011)۔ ہمارے علم کے مطابق، ابھی تک کسی بھی مطالعے نے اس بات کی تحقیق نہیں کی ہے کہ آیا ایل ٹی پی میں اضافہ کسی بھی جنس میں ورزش کے خاتمے کے بعد برقرار رہتا ہے۔ متعدد مطالعات نے ڈینٹیٹ گائرس میں ایل ٹی پی کو مؤثر طریقے سے بڑھانے کے لیے ورزش کا مظاہرہ کیا ہے (فارمر ایٹ ال۔، 2004؛ وان پراگ، کرسٹی، ایٹ ال۔، 1999؛ واسوتا ایٹ ال۔، 2007)، تاہم، ورزش کے بارے میں تحقیق کرنے کی حیرت انگیز کمی ہے۔ CA1 ذیلی فیلڈ (Cotman et al., 2007) میں synaptic plasticity کو ماڈیول کرتا ہے، جو spatial memory کے تناظر میں ہپپوکیمپس میں سب سے زیادہ زیر مطالعہ علاقے کے طور پر کام کرتا ہے (Patten et al.، 2015)۔ لہذا، ورزش اور CA1 پلاسٹکٹی کے درمیان تعلق کو تلاش کرنا باقی ہے۔

متعدد مطالعات نے اس مفروضے کی تائید کی ہے کہ ورزش سے حاصل ہونے والے فوائد عارضی طور پر متحرک ہیں (برچٹولڈ ایٹ ال۔، 2005، 2010؛ بٹلر ایٹ ال۔، 2019؛ وائی پی کم ایٹ ال۔ مادہ جانوروں کے بارے میں، اس عمل کے بارے میں ہماری سمجھ کم نمایاں ہے کیونکہ زیادہ تر کام بنیادی طور پر مردوں میں کیے گئے ہیں۔ سیکھنے اور یادداشت کے مطالعے نے اس بات کا ثبوت فراہم کیا ہے کہ جنسوں کے درمیان یکساں رویے کے نتائج میں مختلف اعصابی نظام شامل ہو سکتے ہیں (بیکر اور کوب، 2016؛ کیزر اینڈ ووڈ، 2019؛ سیز ایٹ ال۔، 2019)۔ اعداد و شمار کے باوجود کہ ورزش دونوں جنسوں میں نیوروپلاسٹیٹی اور ادراک کو بہتر بناتی ہے، ورزش کے جنسی مخصوص اثرات اور بنیادی میکانزم کے واضح ثبوت موجود ہیں۔

غیر انسانی، ورزش مردوں میں آبجیکٹ لوکیشن میموری کو بہتر کرتی ہے نہ کہ خواتین میں (کولمینیٹ ال۔، 2018)۔ چوہوں میں، ورزش بعض یادداشت کے کاموں میں ایک جنس کی کارکردگی کو منتخب طور پر بہتر بناتی ہے (برہا ایٹ ال۔، 2017)۔ سالماتی سطح پر، BDNFacross کے متعدد دماغی ڈھانچے اور ہپپوکیمپس کے ذیلی علاقوں کی تقسیم جنسوں کے درمیان مختلف ہے (Bakos et al.، 2009; Franklin & Perrot-Sinal, 2006)۔ جمع ہونے والے شواہد نے BDNF (Chan & Ye, 2017) کے افعال اور میکانزم میں جنسی فرق کو بھی اجاگر کیا ہے۔ مثال کے طور پر، تولیدی ہارمون، ایسٹروجن، مختلف میکانزم کے ذریعے BDNF اظہار کو منظم کر سکتا ہے، جن میں سے ایک BDFNF پر ایپی جینیٹک تبدیلیاں شامل ہیں۔ al.، 2014؛ Moreno-Piovano et al.، 2014؛ Chan & Ye، 2017)۔

ہپپوکیمپل بی ڈی این ایف پروٹین کی سطح ایسٹروس سائیکل میں مختلف ہوتی ہے جس میں ایسٹرس اور پروسٹریس کے دوران سب سے زیادہ اظہار ہوتا ہے، جو خواتین میں ایسٹروس سائیکل کے دوران ایسٹروجن کی سطح میں اتار چڑھاو کو بی ڈی این ایف اظہار کو مختلف طور پر متاثر کرتا ہے (Scharfman et al.، 2003)۔ اس کے علاوہ، ایسٹروس سائیکل ہپپوکیمپس میں BDNF سگنلنگ پاتھ ویز کے بہاو کے اہداف کو بھی تبدیل کر سکتا ہے (اسپینسر ایٹ ال۔، 2008؛ اسپینسر-سیگل ایٹ ال۔، 2011)۔ ہپپوکیمپل فنکشن میں شامل متعدد جینز کا اظہار بھی پورے پورے دور میں متحرک تبدیلیوں سے گزرتا ہے (Iqbal et al., 2020)۔ اجتماعی طور پر، یہ اعداد و شمار خواتین اور مردوں میں الگ الگ ورزش کی حوصلہ افزائی کے فوائد کی جانچ کرنے کی ضرورت پر زور دیتے ہیں۔

جیسا کہ ہمارے پچھلے مطالعہ نے ورزش کی حد کو قائم کیا ہے جو نر چوہوں میں ورزش سے بڑھے ہوئے علمی فعل میں مشغول اور برقرار رکھتا ہے (بٹلر ایٹ ال۔، 2019)، ہم نے اسی ورزش کے نمونے کو مادہ چوہوں میں ورزش سے حاصل ہونے والے فوائد کی وقتی حرکیات کا جائزہ لینے کے لیے استعمال کیا۔ اس مطالعے میں، ہم یہ ظاہر کرتے ہیں کہ مادہ چوہوں میں، رضاکارانہ ورزش کا 14d آبجیکٹ لوکیشن میموری (OLM) ٹاسک کے ذیلی حد کے حصول کے حالات کے تحت طویل مدتی میموری کی تشکیل کو قابل بناتا ہے۔ مردوں کی طرح (بٹلر ایٹ ال۔، 2019)، ابتدائی ورزش سے حاصل ہونے والے فوائد کو 7d بیٹھے ہوئے تاخیر کے دوران برقرار رکھا جاتا ہے اور ذیلی حد کے حصول کے حالات کے تحت طویل مدتی میموری کی تشکیل کو فعال کرنے کے لیے ورزش کو دوبارہ فعال کرنے کے مختصر 2d وقفے کے ذریعے دوبارہ مشغول کیا جا سکتا ہے۔

تربیت یا ٹیسٹ کے وقت OLM کی کارکردگی ایسٹروس سائیکل کے مراحل سے متاثر نہیں ہوئی تھی۔ تاہم، ایسٹرس مرحلے کے دوران رضاکارانہ وہیل چلانے کی سرگرمی میں اضافہ کیا گیا تھا۔ مزید برآں، ہم یہ ظاہر کرتے ہیں کہ ورزش خواتین میں ہپپوکیمپس کے CA1 خطے میں LTP کو بڑھاتی ہے، اور یہ اثر بیٹھے ہوئے تاخیر کی مدت کے بعد بھی برقرار رہتا ہے، جس سے خواتین میں ورزش کی حوصلہ افزائی نیوروپلاسٹیٹی کی عارضی برداشت کا پہلا ثبوت ملتا ہے۔ ہمارے حیرت کی بات یہ ہے کہ میموری کی بازیافت کے بعد ہپپوکیمپل Bdnf اظہار کی تشخیص سے تجرباتی گروپوں کے درمیان کوئی فرق نہیں نکلا، یہ تجویز کرتا ہے کہ BDNF کو مستقل طور پر اپ گریجولیشن کی ضرورت نہیں ہو سکتی ورزش کی حوصلہ افزائی کے علمی فوائد کو برقرار رکھنے کے لیے۔

2. مواد اور طریقہ

2.1 جانور

خاتون، 8-ہفتہ پرانے C57BL/6J چوہوں (جیکسن لیبارٹری) کو انفرادی طور پر سمجھنے والے حالات میں رکھا گیا تھا (20 ڈگری ± 1 ڈگری؛ 70% ± 10٪ نمی؛ 12 h:12 h روشنی اور تاریک سائیکل) اور اشتہار فراہم کیا گیا کھانے اور پانی تک محدود رسائی۔ تمام تجربات روشنی کے مرحلے کے دوران کیے گئے تھے۔ تمام تجربات جانوروں کی دیکھ بھال اور استعمال کے لیے نیشنل انسٹی ٹیوٹ آف ہیلتھ کے رہنما خطوط کے ذریعے کیے گئے تھے اور ان کی منظوری یونیورسٹی آف کیلیفورنیا، ارون کی ادارہ جاتی جانوروں کی دیکھ بھال اور استعمال کمیٹی نے دی تھی۔

2.2 ورزش کا علاج

چوہوں کو گروپس میں تقسیم کیا گیا تھا ({{0}}–0–0: n=8، 14–0–0: n=7, 14–7–0: n=8, 14–7–2; n=8) اور انفرادی طور پر یا تو ورزش کے پنجروں میں (چلتے ہوئے پہیے سے لیس) یا بیٹھے ہوئے پنجرے (معیاری پنجرے میں) )۔ ورزش کے پنجرے 9.3 انچ × 13.9 انچ × 7.7 انچ (لمبائی × چوڑائی × اونچائی) پولی کاربونیٹ سے بنے ہیں اور 40 سینٹی میٹر فریم، 12.7 سینٹی میٹر قطر (لافایٹ آلات) سے لیس وہیل سے لیس ہیں۔

رضاکارانہ پہیے کے چلنے کی نگرانی ایک {{0}},110سینسر/کاؤنٹر کے ذریعے ایک مرکزی انٹرفیس میں لگائی گئی تھی جو ScurryActivity مانیٹرنگ سافٹ ویئر (Lafyette Instruments) کے ساتھ ایک وقف شدہ PC سے منسلک تھا۔ ورزش کے پیرامیٹرز ابتدائی ورزش کی مدت (0 یا 14d) پر مشتمل ہوتے ہیں جس کے بعد بیٹھنے میں تاخیر (0 یا 7d) ہوتی ہے، جس کے دوران چلنے والے پہیے کو ہٹا دیا گیا تھا۔ غیرفعالیت کی اس مدت کے بعد، کچھ چوہوں کو دوبارہ متحرک ہونے والی ورزش سیشن حاصل کرنے کے لیے تفویض کیا گیا تھا، جس میں دوڑنے والے پہیوں تک 2D رسائی شامل تھی (تصویر 1 دیکھیں)۔

2.3 ماؤس ایسٹروس سائیکل مرحلے کی شناخت

ایسٹروس سائیکل کے مراحل کو روزانہ ایک ہی وقت (~ 10 am) کے ارد گرد ٹریک کیا جاتا تھا اور اس کی نگرانی وہیل چلانے کے پہلے دن سے ہوتی تھی۔ بصری تشخیص اور vaginalsmear دونوں دن میں ایک بار کئے گئے جیسا کہ McLean et al نے بیان کیا ہے۔ (2012) اور اجے اور اخیگبے (2020)۔ پائپیٹ کا استعمال کرتے ہوئے، گیلے اندام نہانی کے دھبوں کو 5 یو ایل نمکین میں لیا گیا۔

سیوڈوپریگننسی اثرات کو روکنے کے لیے (اڈلر اور زولوتھ، 1970)، پائپیٹ کی نوک کو احتیاط سے رکھا گیا تھا کہ اندام نہانی کے سوراخ میں داخل نہ ہوں۔ جمع کرنے والے سیال کو شیشے کی سلائیڈ پر رکھا گیا تھا اور RT پر ہوا سے خشک کیا گیا تھا۔ ایک بار جب سمیر مکمل طور پر خشک ہو گیا تو، سلائیڈوں پر 0.1% کرسٹل وایلیٹ داغ (McLean et al.، 2012) سے داغ دیا گیا ایسٹروس سائیکل کے مراحل کی نشاندہی کرنے کے لیے اس کے مطابق سائٹولوجی کا جائزہ لیا گیا (دیکھیں تصویر 2E)۔

2.4 سب تھریشولڈ آبجیکٹ لوکیشن میموری (OLM) ٹاسک

2.4.1 اپریٹس—سب تھریشولڈ، 3- منٹ کی آبجیکٹ لوکیشن میموری (OLM) کا کام 4 ایک جیسے چیمبروں کے سیٹ کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا تھا۔ ہر چیمبر سفید رنگ کے پلاسٹک سے بنا تھا جس کے طول و عرض 333 ملی میٹر × 320 ملی میٹر × 310 ملی میٹر (لمبائی × چوڑائی × اونچائی) اور ~ 1 سینٹی میٹر گہرے سانی چپس (پی جے مرفی فاریسٹ پروڈکٹس) پر مشتمل تھا۔ مقامی نیویگیشن کیو کے طور پر کام کرنے کے لیے ہر چیمبر کے ایک طرف عمودی دھندلا بلیک مارکنگ پٹی لگی ہوئی تھی۔ ہر سیاق و سباق کو مدھم پیلی روشنی (~15 lx) سے روشن کیا گیا تھا۔ ANY-maze ٹریکنگ سافٹ ویئر (Stoelting Co.

2.4.2 تجرباتی ڈیزائن — OLM کی تربیت، جانچ، اور تجزیہ کیا گیا جیسا کہ Vogel-Ciernia et al نے بیان کیا ہے۔ (2015) حصول کی مدت کو 3 منٹ میں ایڈجسٹ کرنے کے ساتھ، جسے ہم نے پہلے انکوڈنگ کے لیے ذیلی حد ہونے کا مظاہرہ کیا ہے، جس کے نتیجے میں مختصر اور طویل مدتی میموری دونوں میں خراب کارکردگی ہوتی ہے (Butler et al., 2019; Intlekofer et al., 2013; Malvaez et al.، 2013؛ McQuown et al.، 2011)۔ OLM کی تربیت سے پہلے، چوہوں کو سنبھالا گیا اور پھر تجرباتی سیاق و سباق کے مطابق بنایا گیا۔ چوہوں کو لگاتار 4 دن تک روزانہ 2 منٹ تک ہینڈل کیا گیا اور آخری 2 دنوں کی ہینڈلنگ عادت سے اوور لیپ ہو گئی۔ عادت 6 دنوں میں ہوئی، اس دوران چوہوں کو 5 منٹ روزانہ تجرباتی تناظر میں دیکھا گیا۔ ANY-maze طرز عمل تجزیہ سافٹ ویئر کا استعمال کرتے ہوئے ہیبیٹیویشن سیشنز کا تجزیہ کیا گیا (فاصلہ طے کرنے اور رفتار کا تعین کرنے کے لیے)۔ دنوں میں کم ہونے والی سرگرمی کو کامیاب عادت کے اشارے کے طور پر استعمال کیا گیا تھا (ضمنی شکل S1, S2)۔ ورزش کے نظام سے قطع نظر، رویے پر پہیے کے چلنے کے فوری اثرات کو ختم کرنے کے لیے OLM کی تربیت سے پہلے رات کو دوڑنے والے پہیوں کو ہٹا دیا گیا تھا۔

عادت کے بعد، چوہوں نے ایک 3- منٹ کے حصول کا سیشن حاصل کیا جہاں دو ایک جیسی اشیاء (100-سیمنٹ سے بھرے ایم ایل گلاس بیکر) کو الگ الگ مقامات پر رکھا گیا تھا (مقام A1، اوپری بائیں، آئن A2، اوپری دائیں)۔ اشیاء کو ایک دوسرے سے 9 سینٹی میٹر، سائیڈ والز سے 6 سینٹی میٹر، اور سامنے کی دیوار سے 1 سینٹی میٹر کے فاصلے پر رکھا گیا تھا۔ طویل المدتی یادداشت کا اندازہ لگانے کے لیے، چوہوں کا 5 منٹ کا ٹیسٹ، 24 گھنٹے بعد کی تربیت ہوئی جس کے دوران ایک مانوس چیز (مقابل توازن) کو ایک نئے مقام (مقام A3، نیچے کے وسط میں) نیچے کی دیوار سے 2.5 سینٹی میٹر کی جگہ پر منتقل کیا گیا۔ ناول (مقام A3) بمقابلہ واقف/مقررہ مقام (A1) میں آبجیکٹ کی تلاش کا جائزہ لیا گیا۔

ایکسپلوریشن صرف اس وقت اسکور کی گئی جب ماؤس ہیڈ چیز کی طرف اشارہ کیا اور 1 سینٹی میٹر کے اندر اندر آیا یا جب ناک چیز کو چھوتی۔ تلاش کا کل وقت ریکارڈ کیا گیا (t) اور ناول آبجیکٹ کے لیے ترجیح کو امتیازی اشاریہ (DI =) کے طور پر ظاہر کیا گیا۔ novel −familiar) / (ناول + واقف) × 100%)۔ ٹریننگ سیشنز کے لیے، ٹیسٹ سیشن کے دوران منتقل کیے جانے والے شے کو نوول آبجیکٹ کے طور پر استعمال کیا گیا تاکہ ٹریننگ اور ٹیسٹنگ DI کا براہ راست موازنہ کیا جا سکے۔

چوہے جنہوں نے دریافت کیا۔<2 s during testing or training were excluded from the study. Mice that showed a preference for either object during training (DI > ± 20) were also excluded. All habituation, training, test, and scoring were performed by experimenters blinded to the experimental groups. Mice were sacrificed 60 min after the test and the dorsal hippocampi were dissected and stored at −80 °C until processing for RT-qPCR.

For more information:1950477648nn@gmail.com