Tyrosine Kinase C-Abl STAT1 فاسفوریلیشن کے ذریعے انٹرفیرون کی ثالثی سے اینٹی وائرل قوت مدافعت کو ممکن بناتا ہے

خلاصہ

انٹرفیرون (IFN) - ٹرانسکرپشن (STAT) فیملی کے سگنل ٹرانسڈیوسر اور ایکٹیویٹر کی حوصلہ افزائی اینٹی وائرل استثنیٰ میں ایک اہم واقعہ ہے۔ یہاں، ہم یہ ظاہر کرتے ہیں کہ نان ریسیپٹر کناسز c-Abl اور Arg براہ راست STAT1 کے ساتھ تعامل کرتے ہیں اور Y701 پر STAT1 کے فاسفوریلیشن کو ممکن بناتے ہیں۔ c-Abl/Arg IFNg کی غیر موجودگی میں Janus kinases سے آزاد STAT1 فاسفوریلیشن میں ثالثی کر سکتا ہے اور IFNg-ثالثی STAT1 فاسفوریلیشن کو ممکن بنا سکتا ہے۔ مزید یہ کہ، STAT1 dimerization، نیوکلیئر ٹرانسلوکیشن، اور ڈاؤن اسٹریم جین ٹرانسکرپشن کو c-Abl/Arg کے ذریعے منظم کیا جاتا ہے۔ c-Abl/Arg (abl1/abl2) کی کمی ویسکولر اسٹومیٹائٹس وائرس سے متاثرہ خلیوں میں اینٹی وائرل ردعمل کو نمایاں طور پر دبا دیتی ہے۔ گاڑی کے مقابلے میں، c-Abl/Arg سلیکٹیو انحیبیٹر AMN107 کی انتظامیہ کے نتیجے میں انسانی انفلوئنزا وائرس سے متاثرہ چوہوں میں اموات میں نمایاں اضافہ ہوا۔ ہمارا مطالعہ یہ ظاہر کرتا ہے کہ c-Abl STAT1 ایکٹیویشن سگنلنگ پاتھ وے میں ایک اہم کردار ادا کرتا ہے اور اینٹی وائرل امیونٹی ریگولیشن کے لیے ایک اہم نقطہ نظر فراہم کرتا ہے۔

cistanche tubulosa - مدافعتی نظام کو بہتر بنائیں

تعارف

انٹرفیرون (IFNs) جینس کنیزس (JAKs) اور سگنل ٹرانسڈیوسر اور ٹرانسکرپشن کے ایکٹیویٹر (STAT) کو ریگولیٹ کرکے اور سیلولر جین ایکسپریشن (اسٹارک اینڈ ڈارنل، 2012) کو دوبارہ پروگرام کرکے وائرل انفیکشن اور مدافعتی نگرانی کے خلاف فطری قوت مدافعت میں کلیدی کردار ادا کرتے ہیں۔ IFNs کو ان کے متعلقہ ریسیپٹرز کے ساتھ پابند کرنے کے نتیجے میں تین متعلقہ JAKs (JAK1، JAK2، اور TYK2) کے کراس فاسفوریلیشن اور STATs کی بھرتی ہوتی ہے، جس سے ان STATs کے C-ٹرمینل سروں کے قریب واحد ٹائروسین باقیات کو JAKs کے ذریعے فاسفوریلیٹ کیا جا سکتا ہے۔ (پلاٹانیاس، 2005)۔ چالو شدہ STATs پھر ڈائمرائز ہو جاتے ہیں، نیوکلئس میں منتقل ہو جاتے ہیں، اور IFN- ریسپانسیو جینز کے پروموٹرز سے منسلک ہو جاتے ہیں تاکہ ان کی نقل کو آمادہ کیا جا سکے۔ STATs کا ٹائروسین فاسفوریلیشن IFN سگنلنگ کے JAK-STAT راستے میں ایک ضروری قدم ہے اور STAT dimerization، نیوکلیئر ٹرانسلوکیشن، اور DNA بائنڈنگ (Stark and Darnell, 2012) میں شامل ہے۔ اس طرح، ٹائروسین فاسفوریلیشن اسٹیٹ ایکٹیویشن سوئچ کے طور پر کام کرتا ہے۔ چوہوں میں JAK جینوں کی ٹارگٹڈ رکاوٹ کے ذریعے حاصل ہونے والے شواہد سے پتہ چلتا ہے کہ JAKs سب سے اہم STAT ٹائروسین کناسز ہیں (Villarino et al.، 2017)۔ تاہم، STAT1، STAT3، اور STAT5 میں ٹائروسین کی باقیات کو بھی ایپیڈرمل گروتھ فیکٹر اور پلیٹلیٹ سے ماخوذ گروتھ فیکٹر ریسیپٹرز کے ذریعہ JAK کی کمی والے خلیوں میں فاسفوریلیٹ دکھایا گیا ہے جس میں اندرونی ٹائروسین کناز سرگرمی ہے (لیمن ایٹ ال۔، 1996; ، 1996)۔ اس کے علاوہ، STATs کی تشکیلاتی ایکٹیویشن تبدیل شدہ خلیوں میں دیکھی گئی ہے جو آنکوجینک ٹائروسین کنازس کا اظہار کرتے ہیں جیسے v-Src، v-Abl، اور BCR-Abl، لیکن کیا STATs ان کنیزوں کے براہ راست ذیلی حصے ہیں اس کا تعین کرنا باقی ہے (ڈینیل اور روتھمین ، 2000؛ ریڈی وغیرہ، 2000)۔ ممالیہ Abelson kinase c-Abl جو c-abl (abl1) جین کے ذریعے انکوڈ کیا گیا ہے اور Abl سے متعلقہ جین پروٹین Arg جو arg (abl2) جین کے ذریعے انکوڈ کیا گیا ہے، انٹرا سیلولر نان ریسیپٹر ٹائروسین کنازس کے خاندان کے ارکان ہیں جو متعدد سیلولر عمل کے لیے درکار ہوتے ہیں، بشمول پھیلاؤ، اپوپٹوسس، آسنجن، سیل کی منتقلی، اور تناؤ کے ردعمل (بریڈلی اور کولیسکے، 2009؛ کولیسیلی، 2010؛ گریبر ایٹ ال۔، 2013؛ پینڈرگاسٹ، 2002)۔ c-Abl کی کناز سرگرمی کو عام جسمانی حالات کے تحت سختی سے منظم کیا جاتا ہے۔ Retroviral transduction اور chromosomal translocation کے واقعات v-Abl یا BCR-Abl کے اظہار کو جنم دیتے ہیں، بالترتیب Abl کی ایک آنکوجینک شکل (اڈوانی اور پینڈرگاسٹ، 2002)۔ اس کے علاوہ، چوہوں میں سی-ایبل جین کو ہدف بنا کر حذف کرنے کے نتیجے میں مدافعتی نظام کی خرابی کے ساتھ منسلک پیلیوٹروپک فینوٹائپس کا نتیجہ ہوتا ہے، بشمول ہائی پیرینیٹل مہلکیت، سپلینک اور تھیمک ایٹروفی، لمفوپینیا، اور انفیکشن کے لیے حساسیت میں اضافہ (Schwartzberg et al.، 1991)۔ مزید برآں، Abl inhibitors STI571 (imatinib) اور AMN107 (nilotinib) کے ساتھ BCR-Abl-Positive دائمی مائیلوڈ لیوکیمیا (CML) کا علاج مریضوں کے ایک ذیلی سیٹ میں امیونوسوپریشن سے وابستہ ہے (Dietz et al.، 2004; Hochhaus et al. 2016؛ Mattiuzzi et al.، 2003)۔ پچھلے مطالعات نے یہ ثابت کیا ہے کہ سی اے بی ایل ٹی سی آر (ٹی سیل ریسیپٹر) - اور بی سی آر (بی سیل ریسیپٹر) کے ضابطے میں ایک کردار ادا کرتا ہے۔ ؛ Silberman et al.، 2008)۔ Abl کی کمی والے چوہے بھی T/B خلیوں کی کم تعداد کی نمائش کرتے ہیں (Gu et al.، 2009; Liberatore and Goff, 2009; Schwartzberg et al., 1991)۔ تاہم، سی-ابل کی عدم موجودگی یا روک تھام میں پیدا ہونے والے کمزور قوت مدافعت کے تحت ہونے والے میکانزم اب بھی غیر محفوظ ہیں۔ یہ بڑے پیمانے پر بتایا گیا ہے کہ JAK-STAT سگنلنگ پاتھ وے BCR-Abl-حوصلہ افزائی تبدیلی کے لیے ضروری ہے (Carlesso et al., 1996; Danial et al., 1998; de Groot et al., 1999)۔ لہذا، یہ تحقیق کرنے کے قابل ہے کہ آیا JAK-STAT بھی c-Abl میں شامل فطری استثنیٰ میں حصہ ڈال سکتا ہے۔ یہاں، ہم رپورٹ کرتے ہیں کہ STAT1 C-Abl کے ساتھ JAK سے آزادانہ انداز میں تعامل کرتا ہے اور اسے فاسفوریلیٹ کیا جاتا ہے، جس کے ذریعے STAT1 کی ڈائمرائزیشن، نیوکلیئر لوکلائزیشن، اور ڈاون اسٹریم جین ٹرانسکرپشن کو منظم کیا جاتا ہے۔ ان نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ، JAK kinase کے علاوہ، c-Abl STAT1 کی مکمل ایکٹیویشن اور اس کے نتیجے میں IFN کی ثالثی اینٹی وائرل ردعمل کے لیے ناگزیر ہے۔

cistanche tubulosa کے فوائد- مدافعتی نظام کو مضبوط کرنا

Cistanche Enhance Immunity مصنوعات دیکھنے کے لیے یہاں کلک کریں۔

【مزید پوچھیں】 ای میل:cindy.xue@wecistanche.com / واٹس ایپ: 0086 18599088692 / وی چیٹ: 18599088692

نتائج

انٹرفیرون گاما ایکٹیویٹڈ سیکوئنس ڈاون اسٹریم جینز کی نقل ابل کناز کے ذریعے ریگولیٹ ہوتی ہے۔

Our previous study suggested that c-Abl widely participates in the regulation of gene transcription (Dong et al., 2017). To illustrate the role of c-Abl in gene expression, the transcription of approximately 22,000 genes in wild-type (WT) and c-abl / arg / MEFs (mouse embryonic fibroblasts) was detected using Affymetrix GeneChips (Mouse Genome 430 2.0) (GEO accession: GSE154568). A total of 1,744 differentially expressed genes (DEGs) with fold changes >4 کی شناخت c-abl/arg ڈبل ناک آؤٹ (DKO) اور WT MEFs میں کی گئی تھی، جن میں سے 960 کو اپ ریگولیٹ کیا گیا تھا اور 784 کو ریگولیٹ کیا گیا تھا (شکل 1A، بائیں)۔ ان DEGs کے ممکنہ سیلولر افعال اور منسلک راستوں کی مزید تفتیش کے لیے، ہم نے جین اونٹولوجی (GO) تجزیہ (حیاتیاتی عمل، مالیکیولر فنکشن، اور سیلولر جزو کی شرائط کے لیے) (شکل S1A) کیا۔ c-Abl اور Arg کے ذریعے کم کیے گئے جین بنیادی طور پر وائرس کے دفاعی ردعمل (GO: 0009615، GO: 0051607، اور GO: 0045071) اور مدافعتی ردعمل (GO: 0002376، GO: 0045087) سے وابستہ تھے۔ مزید تجزیے سے پتہ چلتا ہے کہ IFN مخصوص جینز (Liu et al.، 2012) نیچے ریگولیٹڈ جینز (اعداد و شمار 1A، دائیں، اور S1B) کے درمیان افزودہ تھے۔ امتیازی اظہار کے پروفائلز کی توثیق کرنے کے لیے، اینٹی وائرل جینز کی ٹرانسکرپٹ لیولز، بشمول cxcl10، psmb9، tap1، اور isg15، کا تعین مقداری ریئل ٹائم ریورس ٹرانسکرپشن-پولیمریز چین ری ایکشن (RT-PCR) کے ذریعے کیا گیا تھا اور psma5 کی سطحوں کو معمول بنایا گیا تھا۔ ، جو c-Abl کے ذریعہ انتہائی منظم نہیں ہے۔ WT MEFs کے مقابلے میں، c-abl/arg/MEFs نے ان جینوں کی نمایاں طور پر کم نقل کی سطح کی نمائش کی، لیکن DKO کی حوصلہ افزائی میں کمی کو خوراک پر منحصر انداز میں c-Abl ریسکیو کے ذریعے مکمل طور پر تبدیل کر دیا گیا (اعداد و شمار 1B اور S1C)۔ ان اعداد و شمار نے تجویز کیا کہ IFN-حوصلہ افزائی جینوں کے ایک پینل کو c-Abl اور Arg کے ذریعہ منظم کیا گیا تھا۔ IFN کے جواب میں Abl kinases کے ذریعے ریگولیٹ کیے گئے کلیدی ٹرانسکرپشنی عناصر کی چھان بین کرنے کے لیے، IFNg (شکل 1C) کے ذریعے ریگولیٹ کیے گئے tap1/psmb9 مشترکہ بائی ڈائریکشنل پروموٹر کی بنیاد پر ایک لوسیفریز رپورٹر سسٹم بنایا گیا تھا۔ جیسا کہ توقع کی گئی ہے، c-Abl/Arg-selective inhibitor AMN107 نے نمایاں طور پر tap1 پروموٹر (سرخ) (شکل 1D) کی نقل کی سرگرمی کو روکا۔ خاص طور پر، NFkB- ایکٹنگ (نیلا) یا IFN اتفاق رائے (پیلا) عناصر کو حذف کرنے کے برعکس، AMN107 کے علاج کا tap1 پروموٹر کی سرگرمی پر بہت کم اثر پڑا جب گاما ایکٹیویٹیڈ سیکوینس (GAS) عنصر (سبز) کو حذف کردیا گیا تھا (شکل 1D) )۔ ان نتائج سے ظاہر ہوتا ہے کہ STAT1-ہدف بنائے گئے GAS cis-عنصر c-Abl-regulated tap1 ٹرانسکرپشن میں شامل ہے، جو سختی سے تجویز کرتا ہے کہ STAT1 IFN-ردعمل جین اظہار کے c-Abl-ثالثی ضابطے کے لیے ذمہ دار ہے۔

c-Abl براہ راست STAT1 کے ساتھ تعامل کرتا ہے۔

IFN-حوصلہ افزائی TAP1 اظہار کو c-Abl کے ذریعے منظم کیا جاتا ہے، ممکنہ طور پر STAT1 کے ذریعے، یہ تجویز کرتا ہے کہ STAT1 کا تعلق c-Abl سے ہو سکتا ہے۔ اس مفروضے کی تصدیق کرنے کے لیے، MCF-7 خلیوں کے lysates کو اینٹی سی-ابل امیونوپریسیپیٹیشن کا نشانہ بنایا گیا جس کے بعد اینٹی STAT1 اینٹی باڈی کے ساتھ امیونو بلوٹنگ کی گئی۔ STAT1 اینٹی c-Abl میں موجود تھا لیکن IgG امیونوپریسیپیٹیٹس (شکل 2A) میں نہیں تھا۔ اس کے بعد، 293T خلیوں کو Myc-cAbl اور Flag-STAT1 یا Flag-Vector کے ساتھ بطور کنٹرول منتقل کیا گیا۔ فلیگ-STAT1 کو ایک ساتھ ایکسپریس کرنے والے خلیوں سے تیار کردہ اینٹی فلیگ امیونوپریسیپیٹیٹس میں Myc-c-Abl کی موجودگی نے فلیگ-ویکٹر سے نہیں بلکہ ایکٹوپیکل طور پر اظہار کردہ Myc-c-Abl اور Flag-STAT1 (شکل 2B، بائیں) کے درمیان ایک تعلق ظاہر کیا۔ اسی طرح کا نتیجہ ایک باہمی تجربے میں بھی حاصل کیا گیا تھا (شکل 2B، دائیں)۔ مزید برآں، Abl خاندان کے دوسرے رکن، Arg (Abl2)، جو کہ اپنے N-ٹرمینل ڈومین (NTD) میں c-Abl سے انتہائی ہم آہنگ ہے، نے بھی STAT1 (Figure S2A) کے ساتھ بات چیت کی۔

شکل 1. c-Abl GAS عناصر کے ذریعے IFN- جوابی جین کے فروغ دینے والوں کو منظم کرتا ہے۔

اس کے بعد، 293T خلیوں سے تیار کردہ lysates جو Flag-c-Abl کا اظہار کرتے ہیں، صرف ایگرز-کنجوگیٹڈ GST-STAT1 یا GST کے ساتھ انکیوبیٹ کیے گئے تھے، اور GST-STAT1 میں Flag-c-Abl کا پتہ چلا تھا لیکن GST ایڈسوربیٹس نہیں (شکل 2C)۔ سیل لائسیٹس میں دیگر اجزاء کے ذریعہ بالواسطہ بائنڈنگ کو مسترد کرنے کے لئے، فلیگ-سی-ابل کو ظاہر کرنے والے 293T خلیوں سے تیار کردہ اینٹی فلیگ امیونوپریسیپیٹیٹس کو SDS-PAGE (سوڈیم ڈوڈیسائل سلفیٹ – پولی کریلامائڈ جیل الیکٹروفورسس) کا نشانہ بنایا گیا، اور پروٹین کو منتقل کیا گیا۔ ایک PVDF (پولی وینیلائڈین فلورائڈ) جھلی اور پھر گھلنشیل GST-STAT1 یا GST (ایک کنٹرول کے طور پر) کے ساتھ دھبہ۔ نتائج نے ظاہر کیا کہ GST-STAT1، لیکن GST نہیں، c-Abl کو براہ راست وٹرو میں پابند کرتا ہے (شکل 2D)۔ c-Abl-binding ڈومین کی وضاحت کرنے کے لیے، agarose-conjugated اور GST-fused full-length یا truncated STAT1 (Figure 2E، اوپری پینل) کو 293T سیلز کے lysates کے ساتھ انکیوبیٹ کیا گیا تھا جو Flag-c-Abl کو ظاہر کرتا ہے۔ اینٹی فلیگ اینٹی باڈی کے ساتھ امیونوبلوٹنگ کے ذریعے ایڈسوربیٹس کے تجزیے نے یہ ظاہر کیا کہ STAT1 کے امینو ایسڈ 577–750، جو ایک ایسا خطہ تشکیل دیتے ہیں جس میں SH2 ڈومین اور ٹرانس ایکٹیویشن ڈومین ہوتا ہے، c-Abl تعامل کے لیے ذمہ دار تھے (شکل 2E، لوئر پینل) . اسی طرح، فلیگ-STAT1 اینٹی فلیگ اینٹی باڈی کے ذریعے حفاظتی ٹیکوں کو SDS-PAGE کے ذریعے الگ کیا گیا تھا اور اسے PVDF جھلی پر منتقل کیا گیا تھا۔ اس کے بعد، جھلی کو گھلنشیل GST-c-Abl SH3 یا GST-c-Abl SH2 اور GST کے ساتھ داغ دیا گیا تھا۔ نتیجہ سے پتہ چلتا ہے کہ c-Abl SH3 ڈومین STAT1 ایسوسی ایشن (شکل 2F) کے لئے ذمہ دار بڑا ڈومین تھا۔ مزید برآں، STAT1 کے ساتھ endogenous c-Abl کی صورتحال میں تعامل کا اندازہ Duolink proximity ligation assay (PLA) کے ذریعے کیا گیا۔ STAT1: c-Abl کمپلیکس بنیادی طور پر سائٹوپلازم میں دیکھے گئے تھے، اور ان کمپلیکس کی تشکیل IFNg محرک (شکل 2G) کے ذریعہ کافی حد تک ممکن تھی۔ اجتماعی طور پر، یہ نتائج وٹرو اور ویوو دونوں میں c-Abl اور STAT1 کے درمیان براہ راست تعلق کو ظاہر کرتے ہیں۔

شکل 2. c-Abl STAT1 کے ساتھ تعامل کرتا ہے۔

c-Abl JAK سے آزاد STAT1 فاسفوریلیشن میں ثالثی کرتا ہے۔

یہ جانچنے کے لیے کہ آیا STAT1 c-Abl کا سبسٹریٹ ہے، پیوریفائیڈ His-tagged STAT1 کو ان وٹرو کناز پرکھ کے لیے ATP کی موجودگی میں ریکومبیننٹ c-Abl (امیینو ایسڈ 237–643 پر کیٹلیٹک ڈومین پر مشتمل) کے ساتھ لگایا گیا تھا۔ اینٹی فاسفو ٹائروسین اور اینٹی فاسفو-STAT1 Y701 کے ساتھ ری ایکشن پروڈکٹ کے امیونو بلوٹنگ نے یہ ظاہر کیا کہ STAT1 کو براہ راست فاسفوریلیٹ کیا گیا تھا c-Abl کے ذریعے ٹائروسین کی باقیات (s) بشمول Y701، وٹرو میں (شکل 3A)۔ اگلا، ہم نے پایا کہ 293T خلیوں میں ظاہر کردہ Flag-STAT1 ٹائروسین فاسفوریلیٹڈ تھا، خاص طور پر باقی Y701 پر Myc-c-Abl کے ذریعے لیکن کناز غیر فعال اتپریورتی Myc-c-Abl (K290R) نہیں۔ مزید برآں، c-Abl/Arg-selective inhibitor AMN107 کے ساتھ علاج کرنے پر، c-Abl-ثالثی STAT1 فاسفوریلیشن تقریباً ختم ہو گیا تھا، جو اس بات کی نشاندہی کرتا ہے کہ STAT1 کا ٹائروسین فاسفوریلیشن c-Abl kinase سرگرمی (شکل 3B) پر منحصر ہے۔ c-Abl-mediated STAT1 فاسفوریلیشن کافی حد تک خراب ہو گئی تھی جب STAT1 Y701 کو فینیلالینین کے ساتھ تبدیل کیا گیا تھا، جس سے ظاہر ہوتا ہے کہ Y701 Abl کا بڑا فاسفوسائٹ ہے (شکل 3C)۔ مزید یہ کہ STAT1 کو بھی Arg (Figure S2B) کے ذریعے فاسفوریلیٹ کیا گیا تھا۔ c-Abl کے ذریعہ فاسفوریلیٹڈ مخصوص STAT1 باقیات کو مزید واضح کرنے کے لئے، Myc-c-Abl کے ساتھ مل کر فلیگ-STAT1 کو مائع کرومیٹوگرافی کے ساتھ مل کر ٹینڈم ماس سپیکٹرومیٹری تجزیہ کا نشانہ بنایا گیا۔ اچھی طرح سے متعین اور فعال طور پر اہم STAT1 فاسفوسائٹ Y701 (Schindler et al., 1992; Shuai et al., 1993) کے علاوہ، دو دیگر فاسفوسائٹس، Y106 اور Y665، کی بھی شناخت کی گئی تھی (شکل S4A)۔ WT STAT1 کے مقابلے میں، Y106F اور Y701F دونوں اتپریورتیوں نے سمجھوتہ شدہ ٹائروسین فاسفوریلیشن (شکل 3C) دکھایا۔ تاہم، STAT1 Y701 کا فاسفوریلیشن Y106 اور Y665 کے فاسفوریلیشن سے زیادہ متاثر نہیں ہوا، جس سے ظاہر ہوتا ہے کہ Y106 اور Y665 الگ الگ کردار ادا کر سکتے ہیں (شکل S4B)۔ ایک ساتھ، یہ نتائج بتاتے ہیں کہ STAT1 کے ٹائروسین کی باقیات، بشمول پہلے رپورٹ شدہ باقیات Y701، ابل فیملی کنیزس کے ذریعے فاسفوریلیٹ کی جا سکتی ہیں۔

cistanche tubulosa - مدافعتی نظام کو بہتر بنائیں

JAKs بنیادی طور پر IFN-حوصلہ افزائی STAT1 Y701 فاسفوریلیشن (Villarino et al.، 2017) کے لیے ذمہ دار ہیں۔ جیسا کہ توقع کی گئی ہے، STAT1 Y701 فاسفوریلیشن IFNg کی طرف سے حوصلہ افزائی کی گئی تھی اور JAK1 اور JAK2 (شکل 3D) کے ایک مخصوص روکنے والے، ruxolitinib کے ذریعہ نمایاں طور پر روکا گیا تھا۔ خاص طور پر، Abl روکنا (شکل 3D، لین 4) پر ایک سمجھوتہ شدہ Y701 فاسفوریلیشن بھی دیکھا گیا، جس سے ظاہر ہوتا ہے کہ c-Abl جزوی طور پر IFNg کی حوصلہ افزائی STAT1 ایکٹیویشن میں حصہ ڈالتا ہے۔ مزید، STAT1 Y701 فاسفوریلیشن کو بھی DPH، ایک سیل پارگمیبل c-Abl ایکٹیویٹر، IFNg کے مقابلے میں کم حد تک حوصلہ افزائی کرتا تھا، جسے AMN107 (شکل 3E) کے ذریعے مکمل طور پر تبدیل کیا جا سکتا ہے۔ DPH کی حوصلہ افزائی Abl ایکٹیویشن کی تصدیق کرنے کے لیے، c-Abl Y412 فاسفوریلیشن، جو Abl ایکٹیویشن کا ایک اشارے ہے، کا بھی پتہ چلا (شکل 3E)۔ یہ ظاہر کیا گیا ہے کہ JAK2 ایکٹیویشن پہلے ہوتا ہے اور JAK1 (Briscoe et al.، 1996) کے بعد میں ایکٹیویشن کے لیے اس کی ضرورت ہے۔ STAT1 ایکٹیویشن پر JAK2 کے اثر کو خارج کرنے کے لیے، ہم نے CRISPR کے ذریعے ایک jak2-KO MCF-7 سیل لائن قائم کی۔ پیرنٹل MCF-7 سیلوں کے مقابلے jak2-KO MCF-7 خلیوں میں کم لیکن قابل شناخت STAT1 Y701 فاسفوریلیشن کا مشاہدہ کیا گیا، جو Myc-c-Abl کی موجودگی میں اسی طرح سے ممکن ہو سکتا ہے۔ لیکن Myc-c-Abl (K290R) (شکل 3F) نہیں اور AMN107 کے علاج کے بعد مزید کم ہو گیا تھا۔ c-abl/arg/cells میں، Y701 پر STAT1 کے IFNg-حوصلہ افزائی فاسفوریلیشن کو وقت اور خوراک پر منحصر انداز میں بہت زیادہ سمجھوتہ کیا گیا تھا (شکل 3G)۔ یہ تمام مشاہدات یہ ظاہر کرتے ہیں کہ c-Abl kinase IFNg-JAK سگنلنگ پاتھ وے سے آزاد STAT1 کو براہ راست فاسفوریلیٹ اور چالو کر سکتا ہے اور یہ کہ، اہم بات یہ ہے کہ یہ دونوں کناز Y701 پر STAT1 فاسفوریلیشن پر ہم آہنگی کے اثرات مرتب کر سکتے ہیں۔

شکل 3. STAT1 c-Abl کے ذریعہ فاسفوریلیٹڈ ہے۔

شکل 4. c-Abl STAT1 ڈائمر کی تشکیل اور جوہری درآمد کو فروغ دیتا ہے۔

c-Abl-ثالثی فاسفوریلیشن STAT1 کی منتقلی کی سرگرمی کو منظم کرتا ہے۔

STATs کا ٹائروسین فاسفوریلیشن IFN سگنلنگ کے JAK-STAT راستے میں ایک ضروری قدم ہے اور STAT dimerization، نیوکلیئر ٹرانسلوکیشن، اور DNA بائنڈنگ میں شامل ہے۔ اس بات کی جانچ کرنے کے لیے کہ آیا c-Abl-mediated phosphorylation STAT dimerization کو ریگولیٹ کرتا ہے، GFP-STAT1 اور Flag-STAT1 کو Myc-c-Abl کی موجودگی یا غیر موجودگی میں 293T خلیوں میں ایک ساتھ ظاہر کیا گیا تھا۔ اینٹی فلیگ امیونوپریسیپیٹیٹس میں GFP-STAT1 کی سطح STAT1 dimerization کی نشاندہی کرنے کے لئے جانچی گئی۔ جیسا کہ شکل 4A میں دکھایا گیا ہے، c-Abl کے مشترکہ اظہار نے STAT1-STAT1 homodimers کی تشکیل کو ممکن بنایا۔ MCF-7 خلیوں کی امیونو فلوروسینس مائیکروسکوپی نے مزید یہ ظاہر کیا کہ c-abl/arg کا خاتمہ یا AMN107 کے ساتھ علاج نے IFNg-حوصلہ افزائی STAT1 نیوکلیئر ٹرانسلوکیشن (اعداد و شمار 4B اور 4C) کو نمایاں طور پر خراب کیا۔

مزید برآں، STAT1 کی پروموٹر بائنڈنگ سرگرمی کا تجزیہ کرنے کے لیے الیکٹرو موبیلیٹی شفٹ اسسیس کا استعمال کیا گیا تھا۔ ایک بایوٹین ٹیگ شدہ IRF1 پروموٹر ریجن جس میں STAT1 بائنڈنگ کنسنسس سیکوئنس ہے، کو پتہ لگانے کی تحقیقات کے طور پر استعمال کیا گیا تھا (آرونسن اور ہورواتھ، 2002)۔ اس تحقیقات کو 293T خلیوں سے جوہری نچوڑ کے ساتھ سی-Abl کے ساتھ یا اس کے بغیر STAT1 کا ظاہری طور پر اظہار کیا گیا تھا، جو کہ شکل S5A کی بنیاد پر متوازن تھا۔ جیسا کہ شکل 4D میں دکھایا گیا ہے، STAT1 پر مشتمل متعدد IRF1 تحقیقات سے منسلک کمپلیکس جوہری نچوڑ (شکل 4D، لین 1) میں دیکھے گئے۔ IFNg ٹریٹمنٹ (شکل 4D، لین 2) کے ساتھ پیچیدہ تشکیل میں قدرے اضافہ ہوا اور C-Abl (شکل 4D، لین 3) کا اظہار کرنے والے خلیوں میں نمایاں طور پر اضافہ ہوا۔ تاہم، WT STAT1 کے مقابلے میں، c-Abl نے Y701F (شکل 4D، لین 7 اور 8) کو محفوظ رکھنے والے STAT1 کے پروموٹر بائنڈنگ پر کوئی اثر نہیں دکھایا، جبکہ Y106F اور Y665F تغیرات نے WT STAT1 کے ساتھ تقریباً کوئی فرق نہیں دکھایا۔ STAT1 اور پتہ لگانے کی تحقیقات پر مشتمل کمپلیکس کی خصوصیت کی تصدیق غیر ٹیگ شدہ مسابقتی تحقیقات (شکل 4D، لین 9) کے اضافے پر ہوئی۔ مزید یہ کہ اینٹی STAT1 اینٹی باڈی کے اضافے کے نتیجے میں ایک سپر شفٹڈ بینڈ بن گیا (شکل 4D، لین 11)۔ جب ٹیگ شدہ تحقیقات کو کنٹرول کے طور پر 293T خلیوں کے جوہری نچوڑ کے ساتھ لگایا گیا تھا، تو کوئی کمپلیکس نہیں دیکھا گیا (شکل 4D، لین 10)۔ یہ نتائج ظاہر کرتے ہیں کہ c-Abl-mediated STAT1 Y701 فاسفوریلیشن اپنے ہدف پروموٹرز کے ساتھ STAT1 کے پابند ہونے کو ممکن بناتا ہے۔

شکل 5. c-Abl IFN سے متعلقہ جین کے اظہار کو منظم کرتا ہے۔

پھر، بڑے STAT1-ریگولیٹڈ جینوں کی IFNg سے حوصلہ افزائی کی منتقلی کا جائزہ لیا گیا، بشمول ccl5, cxcl10, cxcl11, gbp2, ido1, ifi35, irf1, isg15, oasl, psmb9، اور tap1، WT یا c-abl میں جانچا گیا arg DKO MCF-7 سیلز بذریعہ RT-PCR۔ جیسا کہ توقع کی گئی تھی، c-abl/arg کی کمی (شکل 5A) سے جین کی نقل کو نمایاں طور پر خراب کیا گیا تھا۔ مزید یہ کہ، عام طور پر IFNg اور IFNa کے ذریعے حوصلہ افزائی کرنے والے جین AMN107 (اعداد و شمار 5B اور 5C) کی موجودگی میں IFNs کے ذریعے حوصلہ افزائی کرنے میں ناکام رہے۔ یہ نتائج یہ ظاہر کرتے ہیں کہ STAT1 کی منتقلی کی سرگرمی کو مثبت طور پر c-Abl کے ذریعہ منظم کیا جاتا ہے۔

c-Abl IFN پر منحصر اینٹی وائرل اثرات کو فروغ دیتا ہے۔

ٹی اے پی 1 اور پی ایس ایم بی 9 ایم ایچ سی کلاس I اینٹیجن پروسیسنگ پاتھ وے میں پیپٹائڈس کی تیاری اور پریزنٹیشن میں شامل ہیں (غنم ایٹ ال۔، 2014؛ وائٹیل ایٹ ال۔، 1998)۔ پچھلی دریافتوں کے مطابق، JAWS II خلیات کی طرف سے B3Z خلیات میں اوولبومین کی اینٹیجن پریزنٹیشن کو AMN107 نے نمایاں طور پر دبایا تھا کیونکہ IL2 کی پیداوار میں کمی (شکل 6A)۔ STAT1 ریگولیشن کے اینٹی وائرل حیاتیاتی نتائج کا مزید جائزہ لینے کے لیے c-Abl, WT، اور c-abl/arg/MEFs جو پہلے سے علاج شدہ IFNg کے ساتھ یا اس کے بغیر سیریلی طور پر پتلا کیے گئے تھے وہ ویسکولر اسٹومیٹائٹس وائرس (VSV) سے متاثر تھے۔ VSV انفیکشن گاڑیوں کے ساتھ علاج کیے جانے والے WT MEFs کے مقابلے c-abl/arg/MEFs اور AMN107 کے ساتھ علاج کیے جانے والے WT خلیوں میں زیادہ شدید سیل موت کا باعث بنا (شکل 6B)۔ IFNg کے علاج نے خاص طور پر وائرل انفیکشن کی وجہ سے سیل کی موت کو کم کیا، لیکن AMN107 کی موجودگی میں اس کا بہت کم واضح اثر ہوا۔ اس کھوج سے ہم آہنگ، MEFs میں c-abl/arg ablation کے نتیجے میں IFN محرک کے لیے غیر حساسیت پیدا ہوئی، لیکن یہ اثر خاص طور پر c-Abl ریسکیو (شکل 6B) کے ذریعے الٹ گیا۔ اس کے بعد، AMN107 کے ساتھ یا اس کے بغیر علاج کیے گئے A549 خلیات نیو کیسل بیماری وائرس (NDV) سے GFP کا اظہار کرتے ہوئے متاثر ہوئے، اور نتائج سے یہ بات سامنے آئی کہ وائرل نقل کو بھی AMN107 کے علاج سے ممکن بنایا گیا تھا لیکن c-Abl اظہار (شکل 6C) کے ذریعے دبا دیا گیا تھا۔ اس کھوج کے مطابق کہ ڈی این اے کی منتقلی endogenous IFN ردعمل (Park et al.، 2003) کو چالو کرنے کا باعث بنتی ہے، pcDNA ویکٹر کے ساتھ منتقلی وائرل پھیلاؤ کو روکتی ہے۔ خاص طور پر، Flag-c-Abl کے ساتھ منتقلی کے نتیجے میں خالی ویکٹر (شکل 6C) سے منتقلی کے مقابلے میں وائرل پھیلاؤ پر زیادہ واضح روک تھام کا اثر ہوتا ہے۔ مزید برآں، IFNg کے علاج کا c-Abl-selective inhibitor AMN107 (شکل 6D) کی موجودگی میں وائرل انفیکشن پر بہت کم اثر پڑا۔ یہ اعداد و شمار بتاتے ہیں کہ c-Abl STAT1-ثالثی اینٹی وائرل اثرات میں ایک اہم کردار ادا کرتا ہے۔ ہم نے اس کے بعد کال/fl، Lck-Cre (c-abl-conditional knockout, c-abl-cKO) چوہوں میں وائرل انفیکشن میں c-Abl کے کردار کی تحقیقات کی، جس میں c-abl کو خاص طور پر thymocytes (شکل S7A) میں ناک آؤٹ کیا گیا تھا۔ ) چونکہ c-abl جین کے جراثیم کی ناک آؤٹ کے نتیجے میں پیدائش کے بعد پہلے دو ہفتوں کے اندر اندر دوڑنا اور موت واقع ہو جاتی ہے (Koleske et al.، 1998؛ Schwartzberg et al.، 1991)۔ اس کے بعد، WT اور c-abl-cKO چوہے انفلوئنزا اے وائرس (IAV) سے اندرونی طور پر متاثر ہوئے تھے۔ WT چوہوں کے مقابلے c-abl-cKO چوہوں میں اعدادوشمار کے لحاظ سے غیر اہم زیادہ شرح اموات دیکھی گئی۔ ڈبلیو ٹی چوہوں نے مسلسل AMN107 کا انتظام کیا، جو کہ تمام ٹشوز میں c-Abl/Arg کنیز کو منظم طریقے سے دباتا ہے، IAV (شکل 6E) کے لیے نمایاں طور پر بڑھتی ہوئی حساسیت کا مظاہرہ کرتا ہے۔ اجتماعی طور پر، یہ نتائج بتاتے ہیں کہ جانوروں میں اینٹی وائرل قوت مدافعت کے لیے c-Abl کی ضرورت ہوتی ہے۔

تصویر 6. c-Abl IFN پر منحصر اینٹی وائرل اثرات کو فروغ دیتا ہے۔

بحث

IFNg سب سے اہم مدافعتی ماڈیولنگ سائٹوکائنز میں سے ایک ہے اور وائرل انفیکشن کے خلاف فطری قوت مدافعت میں اہم کردار ادا کرتا ہے۔ کیننیکل IFNg سگنلنگ میں، IFNg محرک پر، JAK1 اور JAK2 کو مجموعی IFNg ریسیپٹرز (IFNGRs) کی سائٹوپلاسمک ٹیل میں بھرتی کیا جاتا ہے اور ترتیب وار آٹو فاسفوریلیشن اور ٹرانس فاسفوریلیشن ایونٹس کے ذریعے چالو کیا جاتا ہے (اسٹارک، 2007؛ ولا 2007؛ ولا۔ اس کے بعد، STAT1 اپنے SH2 ڈومین کی ایسوسی ایشن کے ذریعے IFNGR (Y440DKPH444) میں ایک شناختی ترتیب کے ساتھ IFNGR پر ڈاک کرتا ہے، جس کے اندر Y440 کو JAKs (Greenlund et al.، 1995) کے ذریعے فاسفوریلیٹ کیا جاتا ہے۔ JAKs کے ذریعہ Y701 پر اس کے فاسفوریلیشن کے بعد، STAT1 dimerizes اور نیوکلئس میں نقل مکانی کرتا ہے، جہاں یہ IFNg- جوابی جینز کی ایک صف کی نقل کو فروغ دیتا ہے (Aaronson and Horvath، 2002؛ Stark and Darnell، 2012)۔ چوہوں میں stat1 کے خاتمے کے نتیجے میں IFN پر نقلی ردعمل کی عدم موجودگی اور خلیات میں IFN-حوصلہ افزائی antimicrobial اور antiviral سرگرمیوں کی کمی ہوتی ہے (Meraz et al.، 1996)۔ Stat1 / چوہے بے ساختہ اور کیمیائی (3-میتھائلکولانتھرین) سے متاثرہ ٹیومر (کپلان ایٹ ال۔، 1998) کی نشوونما اور بعض سوزشی پیتھالوجیز کے لیے انتہائی حساسیت کا بھی مظاہرہ کرتے ہیں (بیٹیلی ایٹ ال۔ .، 2010)۔ مزید یہ کہ، STAT1 سگنلنگ ٹی سیلز کو قدرتی قاتل سیل ثالثی سائٹوٹوکسیٹی (کانگ ایٹ ال۔، 2019) سے بچاتا ہے۔ان نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ STAT1 پیدائشی مدافعتی ایکٹیویشن اور ٹیومر کے استثنیٰ میں ثالثی کرتا ہے۔

cistanche tubulosa - مدافعتی نظام کو بہتر بنائیں

Schlatterer et al. نے اطلاع دی کہ c-Abl، لیکن Arg نہیں، STAT1 ایکٹیویشن اور انٹرفیرون کی پیداوار کا اشارہ دے کر اعصابی نقصان کو دلا سکتا ہے۔ تاہم، c-Abl پر منحصر STAT1 ایکٹیویشن کے لیے ذمہ دار عین طریقہ کار کی وضاحت نہیں کی گئی ہے (Schlatterer et al.، 2012)۔ یہاں، ہم یہ ظاہر کرتے ہیں کہ c-Abl STAT1 کو باندھتا ہے اور فاسفوریلیٹ کرتا ہے اور STAT2 کے ساتھ براہ راست وٹرو میں تعامل کرتا ہے (اعداد و شمار 2 اور 3، S8A، S9A، اور S10A)۔ STAT1 Y701 خصوصی طور پر JAK کنیز کے ذریعہ فاسفوریلیٹ ہے، جو STAT1 ڈائمر کی تشکیل کو منظم کرتا ہے (Schindler et al., 1992; Shuai et al., 1993) اور IFNg سگنلنگ کے دوران نیوکلیو سائیٹوپلاسمک شٹلنگ (Mao et al. Zhong et al.، 2005)۔ ہمارے مطالعے نے غیر متوقع طور پر پایا کہ C-Abl، JAKs کے علاوہ ایک اور کناز بھی STAT1 Y701 فاسفوریلیشن میں آزادانہ طور پر حصہ ڈالتا ہے (شکل 3)۔ اگرچہ c-Abl-mediated Y701 فاسفوریلیشن JAKs کی طرح طاقتور نہیں ہے، لیکن Y701 کے لیے زیادہ سے زیادہ فاسفوریلیشن تک پہنچنے کے لیے ضروری معلوم ہوتا ہے کیونکہ Y701 فاسفوریلیشن کو IFNg محرک پر c-abl/arg/cell میں دیکھا گیا تھا، اور IFNg- حوصلہ افزائی شدہ STAT1 Y701 فاسفوریلیشن کو AMN107 کے ذریعہ 1.25 mM سے 5 mM تک، خوراک پر منحصر انداز میں روکا گیا تھا (اعداد و شمار 3G اور S11A)۔ تاہم، Y701 فاسفوریلیشن Y106 اور Y665 کی فاسفوریلیشن حالت سے زیادہ متاثر نہیں ہوتا، c-Abl کے دیگر دو فاسفوسائٹس، جس سے یہ ظاہر ہوتا ہے کہ ممکنہ STAT1 Y701 فاسفوریلیشن C-Abl-ثالثی کثیر سائٹ فاسفوریلیشن کا نتیجہ نہیں ہے لیکن STpossib1 کا فاسفوریلیشن ہے۔ بہتر JAK سرگرمی سے منسوب۔ پچھلے مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ JAK1 کی تشکیلاتی ایکٹیویشن اور JAK2 کی متغیر ایکٹیویشن BCR-Abl-اظہار کرنے والے خلیوں میں دیکھی گئی ہے (Chai et al., 1997; Henderson et al., 1997; Shuai et al., 1996)۔ مزید برآں، BCR-Abl کو JAK1، JAK2، اور JAK3 (Henderson et al.، 1997) کے ٹائروسین فاسفوریلیشن کے ذریعے STAT1 اور STAT2 کو معمولی طور پر چالو کرنے کے لیے دکھایا گیا ہے۔ موجودہ شواہد اس بات کی تائید کرتے ہیں کہ Abl اور JAKs نے Y701 (شکل 3E) پر STAT1 فاسفوریلیشن پر ہم آہنگی کے اثرات ظاہر کیے ہیں۔

Y701 کے علاوہ، Y106 اور Y665 کے فاسفوریلیشن کی شناخت ایک ساتھ کی گئی تھی (اعداد و شمار 3C اور S4A)۔ یہ فاسفوسائٹس STAT1 Y701 فاسفوریلیشن یا STAT1 ہوموڈیمرائزیشن (اعداد و شمار S4B اور S4C) میں شامل نہیں تھے۔ تاہم، مرفی اور ساتھیوں نے پایا کہ NTDs (N-ٹرمینل پروٹین تعامل ڈومین، امینو ایسڈ 1-136) کے monomers کے درمیان تعامل نان فاسفوریلیٹڈ مکمل لمبائی کے STAT مالیکیولز (Ota et al.، 2004) کے dimerization کے لیے ضروری ہے۔ STAT1 اتپریورتی (F77A اور/یا L78A) نان فاسفوریلیٹڈ ڈائمرز بنانے میں ناکام رہتے ہیں، اور یہ اتپریورتی IFN-علاج شدہ خلیوں میں فینوٹائپ پرسسٹنٹ فاسفوریلیشن اور وٹرو میں TC45-میڈیڈیٹیڈ ڈیفاسفوریلیشن کے خلاف مزاحمت کی نمائش کرتے ہیں (Mertenset al206). NTD میں Y106، جو F77 اور L78 کے قریب ہے، فاسفوریلیٹڈ ڈائمر حالت میں STAT1 کو برقرار رکھنے اور آئنائزنگ ریڈی ایشن (فگرز S6A اور S6B) کے تحت نیوکلئس میں STAT1 کو برقرار رکھنے کے لیے ذمہ دار ہو سکتا ہے۔ مزید یہ کہ، SH2 ڈومین فاسفوریلیٹڈ ٹائروسین پر مشتمل ڈومین کے ساتھ تعامل کرتا ہے جب فاسفوریلیٹڈ ہوموڈیمر کی تشکیل IFN (شوائی ایٹ ال۔، 1994) کے ذریعہ ہوتی ہے۔ Y665، جو SH2 ڈومین میں ہے، dimerization کو متاثر کر سکتا ہے۔ c-Abl-mediated فاسفوریلیشن سائٹس (Y106 اور Y665) کے افعال کو مزید تفتیش کی ضرورت ہے۔

JAKs کی طرح، c-Abl-mediated فاسفوریلیشن STAT1 ڈائمر کی تشکیل کو منظم کرتا ہے (بشمول STAT1- STAT1 homodimer اور STAT1-STAT2 heterodimer کی تشکیل (اعداد و شمار 4A، S12A، اور S12B))، جوہری ٹرانسلوکیشن، DNA ، اور IFN محرک جینوں کی نقل۔ ابل رکاوٹ نے ممکنہ وائرل پھیلاؤ اور وائرس سے متاثرہ سیل کی موت میں اضافہ کیا (اعداد و شمار 6B، 6C، اور 6D)۔ مزید یہ کہ ہم نے پایا کہ ionizing تابکاری (IR) نے c-Abl inhibitor (اعداد و شمار S6A اور S6B) کی عدم موجودگی میں STAT1 جوہری نقل مکانی کی حوصلہ افزائی کی۔ IR براہ راست c-Abl کو چالو کرتا ہے (Pendergast, 2002) اور اس کے بعد STAT1-انحصار IFNg سگنلنگ، جو ایک بنیادی طریقہ کار فراہم کر سکتا ہے جس کے ذریعے ریڈی ایشن تھراپی ٹیومر پر IFN-کاسکیڈنگ فطری اور انکولی مدافعتی حملہ شروع کرتی ہے (برنیٹ ال .، 2011) اور IR محرکات کے جواب میں ایک مضبوط فطری قوت مدافعت پیش کرتا ہے۔ WT littermates کے مقابلے میں، چوہوں میں جن میں c-abl مشروط طور پر تھائموسائٹس میں دستک دی گئی تھی وہ زیادہ لیکن اعدادوشمار کے لحاظ سے اہم اموات نہیں دکھاتے تھے۔ خاص طور پر، چوہوں نے منظم طریقے سے c-Abl/Arg inhibitor AMN107 کو زیادہ شرح اموات (شکل 6E) کی، جو اس بات کی نشاندہی کرتا ہے کہ مختلف ٹشوز میں c-Abl کے اظہار نے جانوروں میں اینٹی وائرل قوت مدافعت میں اہم کردار ادا کیا۔ ان اعداد و شمار سے، ہم تجویز کرتے ہیں کہ اینڈوجینس ابل وائرل انفیکشن کے خلاف اویکت بیسل مزاحمت پیش کرتا ہے اور یہ متحرک ابل کو آئنائزنگ ریڈی ایشن شیلڈ سیلز کے ذریعے متحرک کرتا ہے۔ CML والے زیادہ تر مریضوں میں Abl kinases جزوی طور پر چالو ہوتے ہیں۔ Abl kinase inhibitors STI571 اور AMN107 CML تھراپی کے فرنٹ لائن علاج کی نمائندگی کرتے ہیں۔ تاہم، اوپری سانس کی نالی کا انفیکشن اور امیونوسوپریشن عام طور پر دیکھا جاتا ہے، جو STAT کے ثالثی مدافعتی ریگولیٹری راستے کے جبر کی وجہ سے ہو سکتا ہے (Hochhaus et al.، 2016; Mattiuzzi et al.، 2003)۔ ہمارے نتائج نے تھراپی کو بہتر بنانے کے لیے ایک نظریاتی بنیاد کا اضافہ کیا۔

cistanche tubulosa - مدافعتی نظام کو بہتر بنائیں

خلاصہ طور پر، ٹائروسین کناز سی-ابل کو Vivo اور وٹرو میں STAT1 کے ساتھ وابستہ پایا گیا، Y701 میں JAKs سے آزاد STAT1 فاسفوریلیشن کو فروغ دینے، ٹرانس ایکٹیویشن کو ممکن بنانے، اور انفیکشن کے خلاف پیدائشی مدافعتی ردعمل میں ثالثی کرنے کے لیے، خاص طور پر c کے تناظر میں۔ -Abl سے متعلق تناؤ۔ ہماری تلاش STAT1 ایکٹیویشن کے لیے ایک ضمنی نقطہ نظر فراہم کرتی ہے، جو IFN بہاو سگنلنگ پاتھ وے کے ریگولیشن کے حوالے سے علم کے بڑھتے ہوئے جسم میں حصہ ڈالتی ہے۔

حوالہ جات

ایرونسن، ڈی ایس، اور ہورواتھ، سی ایم (2002)۔ ان لوگوں کے لیے ایک روڈ میپ جو JAK-STAT کو نہیں جانتے۔ سائنس 296، 1653-1655۔

اڈوانی، اے ایس، اور پینڈرگاسٹ، اے ایم (2002)۔ BcrAbl متغیرات: حیاتیاتی اور طبی پہلو۔ لیوک Res. 26، 713–720۔

Bettelli, E., Sullivan, B., Szabo, SJ, Sobel, RA, Glimcher, LH, and Kuchroo, VK (2004). T-bet کا نقصان، لیکن STAT1 نہیں، تجرباتی آٹومیمون انسیفالومائلائٹس کی نشوونما کو روکتا ہے۔ J. Exp. میڈ. 200، 79-87۔

بریڈلی، ڈبلیو ڈی، اور کولسکے، اے جے (2009)۔ Abl-family kinases کے ذریعے سیل کی منتقلی اور مورفوجینیسیس کا ضابطہ: ابھرتے ہوئے میکانزم اور جسمانی سیاق و سباق۔ جے سیل سائنس 122، 3441–3454۔

Briscoe, J., Rogers, NC, Witthuhn, BA, Watling, D., Harpur, AG, Wilks, AF, Stark, GR, Ihle, JN, and Kerr, IM (1996)۔ JAK1 کے Kinase-negative mutants انٹرفیرون-gamma-inducible جین اظہار کو برقرار رکھ سکتے ہیں لیکن اینٹی وائرل حالت نہیں۔ ای ایم بی او جے 15، 799–809۔

کارلیسو، این، فرینک، ڈی اے، اور گرفن، جے ڈی (1996)۔ Tyrosyl فاسفوریلیشن اور DNA بائنڈنگ سرگرمی سگنل ٹرانسڈیوسرز اور ایکٹیویٹرز آف ٹرانسکرپشن (STAT) پروٹینز Bcr/Abl کے ذریعے تبدیل شدہ hematopoietic سیل لائنوں میں۔ J. Exp. میڈ. 183، 811–820۔

Chai, SK, Nichols, GL, and Rothman, P. (1997)۔ BCR میں JAKs اور STATs کی آئینی ایکٹیویشن Abl-expressing سیل لائنوں اور لیوکیمک مریضوں سے اخذ کردہ پیریفرل بلڈ سیلز۔ J. Immunol. 159، 4720–4728۔

کولیسیلی، جے (2010)۔ ABL ٹائروسین کناسز: فنکشن، ریگولیشن اور مخصوصیت کا ارتقاء۔ سائنس سگنل 3، دوبارہ 6۔

دانیال، این این، لوسمین، جے اے، لو، ٹی، یپ، این، کرشنن، کے، کرولیوسکی، جے، گوف، ایس پی، وانگ، جے وائی، اور روتھ مین، پی بی (1998)۔ STATs اور پھیلاؤ کے v-Abl کی حوصلہ افزائی کے لیے Jak1 اور v-Abl کا براہ راست تعامل ضروری ہے۔ مول سیل بائیول۔ 18، 6795–6804۔

دانیال، این این، اور روتھ مین، پی. (2000)۔ JAK-STAT سگنلنگ Abl oncogenes کے ذریعے چالو کیا گیا۔ آنکوجین 19، 2523–2531۔

ڈی گروٹ، آر پی، رائج میکرز، جے اے، لیمرز، جے ڈبلیو، جوو، آر، اور کونڈرمین، ایل (1999)۔ BCR-Abl کے ذریعے STAT5 ایکٹیویشن K562 لیوکیمیا سیلز کی تبدیلی میں معاون ہے۔ خون 94، 1108–1112۔

Dietz, AB, Souan, L., Knutson, GJ, Bulur, PA, Litzow, MR, and Vuk-Pavlovic, S. (2004). Imatinib mesylate وٹرو میں T-cell کے پھیلاؤ کو روکتا ہے اور Vivo میں تاخیر کی قسم کی انتہائی حساسیت کو روکتا ہے۔ خون 104، 1094–1099۔

ڈونگ، کیو، لی، سی، کیو، ایکس، کاو، سی، اور لیو، ایکس (2017)۔ c-abl/arg oncogenic kinases کے ذریعے امتیازی جین کے اظہار کا عالمی ضابطہ۔ میڈ. سائنس مانیٹ 23، 2625–2635۔

Ghannam, K., Martinez-Gamboa, L., Spengler, L., Krause, S., Smiljanovic, B., Bonin, M., Bhattarai, S., Grutzkau, A., Burmester, GR, Haupl, T. ، ET رحمہ اللہ تعالی. (2014)۔ myositis میں immunoproteasome subunits کی اپ گریجشن اینٹیجن پیش کرنے والے خلیات، CD8 T-cells اور IFNGamma کی شمولیت کے ساتھ فعال سوزش کی نشاندہی کرتی ہے۔ PLOS One 9, e104048۔

Greenlund, AC, Morales, MO, Viviano, BL, Yan, H., Krolewski, J., and Schreiber, RD (1995). ٹائروسین فاسفوریلیٹڈ سائٹوکائن ریسیپٹرز کے ذریعہ اسٹیٹ بھرتی: ایک ترتیب شدہ الٹ ایبل وابستگی سے چلنے والا عمل۔ استثنیٰ 2، 677–687۔

Greuber, EK, Smith-Pearson, P., Wang, J., and Pendergast, AM (2013)۔ کینسر میں ABL فیملی کنیز کا کردار: لیوکیمیا سے ٹھوس ٹیومر تک۔ نیٹ Rev. کینسر 13، 559–571۔

گو، جے جے، ریو، جے آر، اور پینڈرگاسٹ، اے ایم (2009)۔ ٹی سیل سگنلنگ میں ابل ٹائروسین کنیز۔ امیونول۔ Rev. 228، 170-183.

Henderson, YC, Guo, XY, Greenberger, J., and Deisseroth, AB (1997). JAK1 kinase کو چالو کرنے میں bcr-abl کا ممکنہ کردار۔ کلین کینسر ریس 3، 145–149۔

Hochhaus, A., Saglio, G., Hughes, TP, Larson, RA, Kim, DW, Issaragrisil, S., le Coutre, PD, Etienne, G., Dorlhiac-Llacer, PE, Clark, RE, et al. (2016)۔ دائمی مرحلے میں دائمی مائیلوڈ لیوکیمیا کے لیے فرنٹ لائن نیلوٹینیب بمقابلہ امیٹینیب کے طویل مدتی فوائد اور خطرات: 5-بے ترتیب ENESTnd ٹرائل کی سال کی تازہ کاری۔ لیوکیمیا 30، 1044–1054۔

کانگ، وائی ایچ، بسواس، اے، فیلڈ، ایم، اور سنیپر، ایس بی (2019)۔ STAT1 سگنلنگ T خلیوں کو NK سیل ثالثی سائٹوٹوکسٹی سے بچاتا ہے۔ نیٹ کمیون 10، 912۔

کپلن، ڈی ایچ، شنکرن، وی، ڈیگھے، اے ایس، اسٹاکرٹ، ای، اگیٹ، ایم، اولڈ، ایل جے، اور شریبر، آر ڈی (1998)۔ مدافعتی چوہوں میں انٹرفیرون گاما پر منحصر ٹیومر نگرانی کے نظام کا مظاہرہ۔ پروک ناٹل اکاد۔ سائنس USA 95، 7556–7561۔

Koleske, AJ, Gifford, AM, Scott, ML, Nee, M., Bronson, RT, Miczek, KA, and Baltimore, D. (1998). نیورولیشن میں ابل اور آرگ ٹائروسین کنیز کے لیے ضروری کردار۔ نیوران 21، 1259–1272۔

Leaman, DW, Pisharody, S., Flickinger, TW, Commane, MA, Schlessinger, J., Kerr, IM, Levy, DE, and Stark, GR (1996). STATs کو چالو کرنے میں JAKs کے کردار اور epidermal گروتھ فیکٹر کے ذریعہ c-fos جین اظہار کی تحریک۔ مول سیل بائیول۔ 16، 369–375۔