ٹیومر میں دراندازی کرنے والی سی ڈی 8 پلس ٹی سیل اینٹیٹیمر افادیت اور تھکن: سالماتی بصیرت حصہ 1

خلاصہ

کینسر کے طبی انتظام میں میزبان قوت مدافعت کا ایک اہم کردار ہے۔ لہذا، ایسے علاج کا انتخاب کرنا فائدہ مند ہے جو ٹیومر سیل کی موت کو فروغ دے سکیں اور ساتھ ساتھ میزبان قوت مدافعت کو بڑھا سکیں۔ ڈائنامک ٹیومر مائیکرو ماحولیات (TME) اس بات کا تعین کرتا ہے کہ آیا ایک antineoplastic دوا ٹیومر میں دراندازی کرنے والی لیمفوسائٹس (TILs) سے سازگار یا نامناسب مدافعتی ردعمل پیدا کرے گی۔ CD8 پلس T خلیات ٹیومر میں دراندازی کرنے والے بنیادی مدافعتی خلیوں میں سے ایک ہیں جو اینٹیٹیمر ردعمل فراہم کرتے ہیں۔ یہاں، ہم CD8 پلس T سیل کی تھکن اور بقا اور امیونو تھراپی کے ذریعے CD8 پلس T سیل انفیکٹر فنکشن کو بحال کرنے کے لیے TME میں مختلف عوامل کے اثر و رسوخ کا جائزہ لیتے ہیں۔

خلیوں کی تھکن اور قوت مدافعت کے درمیان تعلق بہت گہرا ہے۔

خلیات بنیادی اکائیاں ہیں جو ہمارے جسم کو تشکیل دیتی ہیں، اور ان کی متحرک حالت ہماری صحت کے لیے اہم ہے۔ تاہم، ہمارے خلیات وقت کے ساتھ ختم ہو جاتے ہیں. یہ کمی مختلف عوامل کی وجہ سے ہو سکتی ہے جیسے ماحولیاتی آلودگی، غیر متوازن خوراک اور تناؤ۔

جب خلیے ختم ہو جاتے ہیں تو وہ کمزور اور ختم ہو جاتے ہیں جس کی وجہ سے ہماری قوت مدافعت کم ہو جاتی ہے۔ ہمارے جسم کو ہمارے جسم پر حملہ کرنے والے وائرس اور بیکٹیریا سے لڑنے کے لیے مدافعتی خلیات پیدا کرنے کے لیے خلیوں کی ضرورت ہوتی ہے۔ اگر ہمارے خلیے بہتر طریقے سے کام نہیں کر رہے ہیں تو ہمارا مدافعتی نظام تیزی سے کمزور اور انفیکشن کا شکار ہو جاتا ہے۔ اس سے ہم مختلف بیماریوں کا شکار ہو جائیں گے، جس سے ہماری زندگی اور کام متاثر ہوں گے۔

تاہم، ایسے اقدامات ہیں جو ہم اپنے خلیات کی کمی کو کم کرنے کے لیے اٹھا سکتے ہیں۔ مثال کے طور پر، کھانے کی اچھی عادات کو برقرار رکھیں اور کافی غذائی اجزاء اور پانی لیں۔ جسمانی تندرستی برقرار رکھنے کے لیے زیادہ ورزش کریں؛ صحت مند ذہنی حالت کو برقرار رکھنے کے لیے تناؤ کو کم کریں۔

اس کے علاوہ، ہم اپنے خلیات کو زندہ رہنے میں مدد کے لیے کچھ قدرتی سپلیمنٹس استعمال کرنے کا بھی انتخاب کر سکتے ہیں۔ مثلاً مچھلی کا تیل، وٹامن ڈی اور وٹامن ای وغیرہ۔

ایک لفظ میں، اگر ہم خلیات کی قوتِ حیات کو برقرار رکھنے کے لیے کچھ موثر اقدامات کر سکتے ہیں، تو ہماری قوتِ مدافعت مضبوط ہو جائے گی اور مختلف وائرسز اور بیکٹیریا کے حملے کا مقابلہ کرنے کے لیے، اپنی صحت اور خوشی کو برقرار رکھنے کے لیے بہتر ہو جائے گی۔ یہ دیکھا جا سکتا ہے کہ ہمیں اپنی قوت مدافعت کو بہتر کرنے کی ضرورت ہے۔ Cistanche ہماری قوت مدافعت کو نمایاں طور پر بہتر بنا سکتا ہے۔ گوشت میں موجود پولی سیکرائڈز انسانی مدافعتی نظام کے مدافعتی ردعمل کو منظم کر سکتے ہیں، مدافعتی خلیوں کی تناؤ کی صلاحیت کو بہتر بنا سکتے ہیں، اور مدافعتی خلیوں کی قوت مدافعت کو بڑھا سکتے ہیں۔ جراثیم کش اثر۔

cistanche tubulosa فوائد پر کلک کریں۔

ٹیزر:

کینسر کے علاج ٹیومر مائیکرو ماحولیات (TME) کی پلاسٹکٹی کو متاثر کرتے ہیں اور CD8 پلس T سیل کی ثالثی سے متعلق اینٹیٹیمر ردعمل کو تبدیل کرتے ہیں۔ لہذا، TME پلاسٹکٹی کی سمجھ اور مدافعتی نظام پر اس کے اثرات ایک کامیاب کینسر تھراپی کو ڈیزائن کرنے کے لیے بہت ضروری ہے۔

مطلوبہ الفاظ

ٹیومر میں گھسنے والی لیمفوسائٹس؛ سی ڈی 8 پلس ٹی سیل؛ ٹیومر مائکرو ماحولیات؛ امیونو تھراپی؛ کیموتھراپیٹک ایجنٹ.

تعارف

کامیاب کینسر کے علاج کے لیے میزبان استثنیٰ اور کینسر میں اس کے کردار کی صحیح سمجھ بہت اہم ہے۔ کینسر کے علاج میں مدافعتی نظام کی بہت زیادہ اہمیت کو مدنظر رکھتے ہوئے، متعدد امیونوموڈولیٹری ادویات اور امیونوتھراپیٹک ایجنٹوں کا استعمال مختلف امراض کے علاج کے لیے کیا گیا ہے۔ امیونوموڈولیٹری ایجنٹوں کی عام مثالیں سائٹوکائنز ہیں، بشمول انٹرفیرون (IFNs)، انٹرلییوکن-2 (IL-2)، IL-11، گرینولوسائٹ-میکروفیج کالونی محرک عنصر (GM-CSF)، اور erythropoietin [1]. طبی استعمال میں امیونوموڈولیٹری دوائیوں کی کلاسیکی مثال تھیلیڈومائڈ، لینالیڈومائڈ، اور پومالیڈومائڈ ہیں [2]۔

یہ تینوں دوائیں IL-2 [2] کے سیلولر ریلیز کو دلاتی ہیں۔ امیونو موڈیولٹنگ ادویات کی طرح، یو ایس فوڈ اینڈ ڈرگ ایڈمنسٹریشن (ایف ڈی اے) نے مدافعتی چیک پوائنٹ انحیبیٹرز کو منظوری دی ہے جو ٹی سیل کو-انحیبیٹری مالیکیولز کو نشانہ بنا سکتے ہیں، بشمول سائٹوٹوکسک ٹی لیمفوسائٹ سے وابستہ اینٹیجن 4 (CTLA-4)، پروگرام شدہ سیل ڈیتھ پروٹین۔ (PD-1)، اور پروگرام شدہ ڈیتھ لیگنڈ 1 (PD-L1)۔

ان امیونو تھراپیٹکس نے مختلف خرابیوں میں ٹی سیل ثالثی اینٹیٹیمر اثرات کو بڑھانے میں افادیت کو ثابت کیا ہے، بشمول میلانوما، نان سمال سیل پھیپھڑوں کا کینسر (NSCLC)، اور دیگر کینسر [3]۔ CTLA-4 اور PD-1 دونوں پردیی اور ٹیومر میں دراندازی کرنے والے T خلیوں کو منظم کرتے ہیں۔ پردیی مدافعتی نظام میں، CTLA-4 ابتدائی مدافعتی ردعمل کے دوران لمف نوڈس میں ٹی خلیوں کے پھیلاؤ کو منظم کرتا ہے۔ تاہم، PD-1 مدافعتی ردعمل کے بعد کے مرحلے کے دوران کام کرتا ہے اور T سیل کے کام کو روکتا ہے [4]۔ CTLA-4 کا اظہار بنیادی طور پر ریگولیٹری ٹی سیلز (Tregs) پر ہوتا ہے؛ ٹیومر کے اندر، تاہم، PD-1 کا اظہار بنیادی طور پر ختم ہونے والے T خلیوں پر ہوتا ہے [3]۔ کئی ٹیومر PD-L1 کا اظہار کرتے ہیں اور PD کو ظاہر کرنے والے T خلیوں کے ساتھ تعامل کرتے ہیں-1; یہ تعامل سمجھوتہ شدہ ٹی سیل انفیکٹر فنکشن کو فروغ دیتا ہے [5]۔

ٹیومر کے خلیے ایک پروٹومورجینک مقامی ماحول بنانے کے حق میں ہیں، جسے TME بھی کہا جاتا ہے۔ TME میں لیمفیٹک اور خون کی نالیاں، ایکسٹرا سیلولر میٹرکس (ECM)، سٹرومل سیل (مثال کے طور پر، فائبرو بلاسٹس)، لیمفوسائٹس، نیوٹروفیل، قدرتی قاتل (NK) خلیات، NK-T خلیات، ٹیومر سے وابستہ میکروفیجز (TAMs)، RNAs، خفیہ پروٹین شامل ہیں۔ ، اور چھوٹے آرگنیلس [6]۔ مدافعتی خلیوں کی موجودگی کی بنیاد پر، TMEs کو سوجن، امیونولوجیکل طور پر جاہل، یا مدافعتی صحراؤں کے طور پر درجہ بندی کیا جاتا ہے [7]۔ ٹی سیل انفلٹریٹس کی موجودگی اور غیر موجودگی کی بنیاد پر، سوجن والے ٹی ایم ای کو ٹی سیل انفلیمڈ بمقابلہ نان ٹی سیل انفلیمڈ ٹی ایم ای میں تقسیم کیا جا سکتا ہے۔ ٹی سیل سے سوجن والے TME میں T خلیات اور ان کے ذیلی سیٹ اور کیموکائنز ہوتے ہیں [8]۔

اس میں میکروفیجز، بی سیلز، اور پلازما سیلز بھی ہوتے ہیں، جب کہ نان ٹی سیل سے سوجن TME بنیادی طور پر میکروفیجز پر مشتمل ہوتا ہے [9]۔ اس کے برعکس، امیونولوجیکل جاہل TME میں T خلیوں پر ایکٹیویشن مارکر کی کمی ہے۔ امیونولوجیکل لاعلمی ایسی حالت کی نشاندہی کرتی ہے جس میں مدافعتی نظام کے انکولی اجزاء پیتھوجینز یا ٹیومر اینٹیجنز کو پہچاننے یا ان کا جواب دینے سے قاصر ہوتے ہیں [10]۔ مدافعتی صحرائی ٹی ایم ای ٹیومر کے اندر مدافعتی نظر انداز شدہ خطہ ہے جس میں فنکشنل ایفیکٹر ٹی سیلز کی کمی ہے [11]۔

ٹی ایم ای کے رہائشیوں کی دوبارہ پروگرامنگ بالواسطہ یا بالواسطہ طور پر مدافعتی اور سٹرومل خلیوں کو متاثر کرتی ہے، جس کے نتیجے میں کینسر کے خلیوں کی نشوونما اور بقا کو منظم کیا جاتا ہے [12]۔ TME کو ایک جنگی زون سمجھا جا سکتا ہے جس میں میزبان مدافعتی اور غیر مدافعتی خلیے ٹیومر کے خلیوں کے ساتھ تعامل کرتے ہیں، اور کئی حل پذیر ثالث، بشمول ILs، جاری کیے جاتے ہیں۔ ٹیومر سیل پلاسٹکٹی ٹی ایم ای کے پولرائزیشن کو مدافعتی یا سوزش والی سمت میں اکساتی ہے۔ TME کی مدافعتی زمین کی تزئین میزبان کی اینٹیٹیمر قوت مدافعت کو کم کرتی ہے، جس سے ٹیومر بڑھنے اور کینسر کے خلیوں کی نشوونما ہوتی ہے [13]۔ نیوروبلاسٹوما میں TME کی اہمیت کی مثال دی جاتی ہے، جو بنیادی طور پر بچوں کو متاثر کرتی ہے۔

اگرچہ MYCN آنکوجین بہت سے مریضوں میں تبدیل ہو جاتا ہے، لیکن MYCN-ہدف شدہ تھراپی نیوروبلاسٹوما کو متاثر کرنے میں ناکام رہتی ہے۔ تاہم، MYCN اتپریورتن صرف نیوروبلاسٹوما کی خرابی کے لیے ذمہ دار نہیں ہے۔ ٹی ایم ای نیوروبلاسٹوما ٹیومرجینیسیس میں بھی کافی حصہ ڈالتا ہے، اور اس طرح، ٹیومر سیل اور ٹی ایم ای دونوں کو نشانہ بنانے کی حکمت عملیوں پر غور کیا جانا چاہیے [14,15]۔ MYCN کی طرح، c-MYC ایک اور پروٹو آنکوجین ہے جس کا TME [16] میں مدافعتی ردعمل کو منظم کرنے میں اہم کردار ہے۔ c-MYC کینسر کی امیونو تھراپی میں رکاوٹ ڈالتا ہے اور اس لیے Myc inhibitor MYCi361، اور اس کا بہتر اینالاگ MYCi975، ٹیومر کو اینٹی PD1 امیونو تھراپی کے لیے حساس بنا سکتا ہے [17]۔ سی-ایم وائی سی کے برعکس، ٹیومر میں فاسفیٹیس اور ٹینسن ہومولوگ (PTEN) کا نقصان مدافعتی ٹی ایم ای [18] سے وابستہ ہے۔ PTEN کے نقصان کی طرح، جگر کے کناز B1 (LKB1) کا نقصان، ایک سیرین/تھریونائن کناز، بھی TME کو ریگولیٹ کرنے اور CCL2 سمیت سائٹوکائن اور کیموکین کی رطوبت کی بے ضابطگی کا سبب بنتا ہے، اور پروٹومورجینک میکروفیجز کی بھرتی میں اضافہ ہوتا ہے [19] ]

ٹیومر میں دراندازی کرنے والے ٹی خلیوں کے ذریعے ٹیومر سیل کی موت کو دلانے کے لیے مدافعتی طریقہ، ٹیومر کے خلیوں پر ظاہر کیے گئے مخصوص اینٹیجنز کو نشانہ بنانا، مختلف خرابیوں کے علاج کے لیے ایک ابھرتا ہوا علاقہ ہے۔ حالیہ مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ TME میں ٹی خلیوں کی تھکن اور فعال خرابیاں بہت سے کینسر کی خصوصیات کی وضاحت کر رہی ہیں۔ لہذا، T خلیات کی اندرونی خصوصیات کی مکمل تفہیم، جیسے کہ ان کی بقا اور اثر کرنے والے افعال، ایک اینٹیٹیمر مدافعتی ردعمل کو بحال کرنے کے لیے بنیادی ہوں گے [20]۔ مدافعتی خلیوں کی موجودگی، خاص طور پر TME کے اندر T خلیات، اس بات کا تعین کرتی ہے کہ آیا ٹیومر گرم ہے (T cell inflamed) یا ٹھنڈا (T cell non-inflamed) [8]۔

گرم ٹیومر کیموکائنز، ٹی سیل مارکر، اور IFN I کے دستخطوں کا اظہار کرتے ہیں جو ٹیومر کی مجموعی قوت مدافعت کو منظم کرتے ہیں [8]۔ ٹیومر کے استثنیٰ میں TIL کی اہمیت میٹاسٹیٹک میلانوما سے واضح ہوتی ہے، جس میں T-cell infiltration کو تھراپی کے جواب میں پروگنوسٹک بائیو مارکر سمجھا جاتا ہے۔ تاہم، انٹرٹومورل سی ڈی 8 پلس ٹی سیل شماروں کے تجزیے نے ہم آہنگی اور میٹاکرونس میٹاسٹیسیس کے لیے متفاوتیت کو ظاہر کیا۔ ہم وقت ساز ٹیومر میں، CD8 پلس T سیل کثافت کا موازنہ کیا جا سکتا ہے۔ تاہم، میٹاکرونس ٹیومر میں، CD8 پلس T سیل کی کثافت متغیر تھی [21]۔ یہ مشاہدات بتاتے ہیں کہ ٹیومر میں CD8 پلس T سیل کی دراندازی میں فرق استثنیٰ کو کنٹرول کرتا ہے۔

ٹیومر استثنیٰ ایک کثیر مرحلہ عمل ہے۔ ابتدائی مرحلے کے دوران، آنکوجینک اتپریورتن کے ساتھ ٹیومر کے خلیے مخصوص اینٹیجنز کا اظہار کرتے ہیں جو کینسر کے خلیات کو صحت مند خلیات سے ممتاز کرتے ہیں اور مدافعتی خلیات (یعنی، اینٹیجن پیش کرنے والے خلیات؛ اے پی سی) مخصوص ٹیومر اینٹیجنز کو پہچاننے میں مدد کرتے ہیں۔ اے پی سیز لمف نوڈس میں ٹی خلیوں میں ٹیومر اینٹیجنز پیش کرتے ہیں، اور اے پی سی اور ٹی خلیوں کے درمیان اس تعامل کے نتیجے میں ٹی سیل پرائمنگ اور ایکٹیویشن ہوتا ہے۔ متحرک ٹی خلیات گردش کے ذریعے ٹیومر میں منتقل ہوتے ہیں اور گھس جاتے ہیں۔ ٹیومر میں دراندازی کرنے والے ٹی خلیے کینسر کے خلیوں پر مخصوص اینٹیجن کو پہچانتے ہیں اور بالآخر انہیں تباہ کر دیتے ہیں۔ مرتے ہوئے ٹیومر کے خلیے مزید اینٹیجن کو جاری کرتے ہیں، جو ٹیومر کے مدافعتی سائیکل کو یقینی بناتا ہے [22]۔

کئی عوامل، بشمول سائٹوکائنز، کنیز، اور سیلولر میٹابولائٹس، ٹیومر میں دراندازی کرنے والے ٹی خلیوں کی بقا اور اثر کرنے والے کام کو منظم کرتے ہیں۔ اس جائزے میں، ہم مختلف TME حاصل شدہ عوامل پر تبادلہ خیال کرتے ہیں جو ٹیومر میں دراندازی کرنے والے CD8 پلس T سیل کی خرابی کو متاثر کرتے ہیں اور مختلف حکمت عملیوں پر غور کرتے ہیں جو امیونو تھراپی کی افادیت کو مزید بڑھانے کے لیے ان کے افعال اور بقا کو بحال کرنے میں مدد کر سکتی ہیں۔

ٹھوس ٹیومر میں CD8 پلس T خلیات کی دراندازی

پردیی مدافعتی نظام اور TME کے درمیان کراسسٹالک انفیکٹر سی ڈی 8 پلس ٹی سیلز کے اینٹیٹیمر ردعمل کے لیے اہم ہے۔ لہذا، پردیی اور ٹیومر میں دراندازی کرنے والے ٹی خلیوں کی مناسب تفہیم علاج کے نقطہ نظر سے بہت ضروری ہے۔ ٹیومر اینٹیجنز کے لیے مخصوص T خلیات کی ابتدائی، توسیع اور منتقلی مقامی پیریفرل لمفائیڈ آرگن میں ہوتی ہے، خاص طور پر ٹیومر نکالنے والے لمف نوڈس (dLN) میں۔ dLN کے رہائشی T خلیات ٹیومر، ٹیومر کے ٹکڑوں، اور اپوپٹوٹک ٹیومر سیلز کے گھلنشیل اینٹیجنز کے ذریعے چالو ہوتے ہیں۔

ڈینڈریٹک خلیات (DCs) ٹیومر سے dLN تک ٹیومر اینٹیجینک پیپٹائڈز بھی لے جا سکتے ہیں [23]۔ کینسر کے آخری مراحل کے دوران، ٹیومر پیدا کرنے والے چوہوں اور مریضوں کے لمفائیڈ اعضاء میں CD8 پلس T خلیے اپنا اثر کرنے والا کام کھو دیتے ہیں، بالآخر اینٹیٹیمر ردعمل کو کم کر دیتے ہیں [24]۔ TILs TME کے لازمی اور لازمی اجزاء میں سے ایک ہیں۔ ٹیومر میں دراندازی کرنے والے مونو نیوکلیئر مدافعتی خلیات TILs کا ایک اہم حصہ بناتے ہیں اور کئی کینسروں میں منشیات کی افادیت کے پیش گوئی کے اشارے کے طور پر کام کرتے ہیں۔ TILs کا یا تو پرو یا antitumorigenic TME بنانے میں ایک ضروری کردار ہوتا ہے، جو ٹیومر کے بڑھنے اور تھراپی کی مزاحمت کو متاثر کرتا ہے [25]۔ T lymphocytes TILs کے اہم اجزاء ہیں، جن میں سے CD4 plus، CD8 plus، اور Tregs اکثر مختلف کینسر میں دیکھے جاتے ہیں۔ سی ڈی 8 پلس ٹی سیلز کا سی ڈی 4 پلس ٹی خلیوں کے ساتھ مل کر اینٹیٹیمر مدافعتی ردعمل میں اہم کردار ہوتا ہے۔ CD8 پلس T خلیات گرینزائم B، perforin، اور IFN- کو جاری کرتے ہیں، اور سائٹوٹوکسک خلیات کے طور پر کام کرتے ہیں جو بالآخر کینسر کے خلیوں کو مار دیتے ہیں۔ کینسر جینوم اٹلس (TCGA) ڈیٹا سیٹس کا استعمال کرتے ہوئے Oncomine Platform (Thermo Fisher, Ann Arbor, MI, USA) دماغ، چھاتی، کولوریکٹل (CRC) اور ڈمبگرنتی ٹیومر جیسی خرابیوں میں CD8 جین کے اظہار کے لیے، اشارہ کیا کہ CD8 جین کا اظہار۔ دماغ، سی آر سی، اور رحم کے کینسر میں کم ہے، لیکن چھاتی کے کینسر میں غیر تبدیل شدہ ہے (شکل 1a–d)۔

تاہم، TCGA ڈیٹا سیٹس کا استعمال کرتے ہوئے میلانوما اور پھیپھڑوں کے کینسر میں ہونے والے تجزیوں نے تجویز کیا کہ عام اور مہلک ٹشوز (شکل 1e،f) کے درمیان CD8A کاپی نمبر میں کوئی بڑا فرق نہیں ہے۔ TCGA ڈیٹا سیٹ مختلف خرابیوں میں CD8 جین کے اظہار کی متفاوتیت کی نشاندہی کرتے ہیں۔ ٹیومر میں رہائش پذیر CD8 پلس T خلیات (TILs) بنیادی طور پر میموری T خلیات ہیں اور اس وجہ سے انہیں ٹشو ریذیڈنٹ میموری (TRM) T سیل کہا جاتا ہے۔ TRM خلیات سطحی نشانات CD103 اور/یا CD49a انٹیگرینز، اور T سیل ایکٹیویشن مارکر، CD69 [26] کے اعلی اظہار سے نمایاں ہوتے ہیں۔ اینٹیجن مخصوص CD8 پلس T سیل ایکٹیویشن، توسیع، اور ٹیومر میں منتقلی کے طریقہ کار کو شکل 2 میں پیش کیا گیا ہے۔
TRM T خلیات کے علاوہ، TME میں CD8 پلس T خلیات کی کئی دوسری فینوٹائپس ہیں۔ خاص طور پر، خلیہ نما CD8 پلس T سیل فینوٹائپ کو اینٹیٹیمر ردعمل کے لیے اہم سمجھا جاتا ہے [6]۔ تنوں کی طرح CD8 پلس T خلیات انفیکٹر سائٹوٹوکسک CD8 پلس T خلیات میں فرق کرتے ہیں اور ٹیومر کے مقام میں مقامی بناتے ہیں، جہاں اے پی سی کی آبادی وافر ہوتی ہے [6]۔ تاہم، کچھ ایسی خرابیاں ہیں جن میں ٹیومر کے اندر اے پی سی کم سے کم ہوتے ہیں اور سی ڈی 8 پلس ٹی سیل کی دراندازی کو کم کرنے کے مساوی ہوتے ہیں، جس کی وجہ سے ٹیومر سے مدافعتی فرار ہو جاتا ہے۔ مناسب اے پی سی کی غیر موجودگی میں، CD8 پلس T خلیات کو چالو کرنے میں کافی سمجھوتہ کیا جاتا ہے۔

دلچسپ بات یہ ہے کہ ٹیومر میں دراندازی کرنے والے CD8 پلس T خلیے بھی ایک بائی اسٹینڈر ایکٹیویشن کے طور پر کام کر سکتے ہیں جہاں ایک مخصوص اینٹیجن کے لیے متحرک T خلیے بھی غیر متعلقہ اینٹیجن کے خلاف جواب دے سکتے ہیں [27]۔ مثال کے طور پر، سی آر سی اور پھیپھڑوں کے کینسر میں، ٹیومر میں دراندازی کرنے والے CD8 پلس T خلیے ٹیومر اینٹیجنز کے ساتھ ساتھ غیر متعلقہ اینٹیجنز کے ساتھ رد عمل ظاہر کرتے ہیں، جیسے Epstein – Barr وائرس (EBV)، ہیومن سائٹومیگالو وائرس (HCMV)، یا انفلوئنزا وائرس [28]۔ ٹیومر میں بائی اسٹینڈر سی ڈی 8 پلس ٹی سیلز کی موجودگی اس کے مدافعتی فرار کو روک سکتی ہے۔ مؤخر الذکر ایک پروٹومر رجحان ہے جو ٹیومر سیل کی نشوونما اور بقا کا باعث بنتا ہے، اور CD8 پلس T خلیات کے ذریعہ پیدا ہونے والے اینٹیٹیمر ردعمل کا جواب دینے میں ناکامی ہے۔ CD8 پلس T خلیات کی کم ہوئی دراندازی کو مدافعتی دبانے والے میکانزم کے ذریعے بھی کنٹرول کیا جاتا ہے، جو انڈولیمائن-2، 3-ڈائی آکسیجن (IDO)، PD-L1/B7-H1، اور FoxP3 پلس کے ذریعے ثالثی کرتا ہے۔ Tregs [29]. کینسر ریڈیو تھراپی سی ڈی 8 پلس ٹی خلیوں کے ٹیومر کی دراندازی کو بھی متاثر کرتی ہے۔

ریڈیو تھراپی TME میں خون کی نالیوں کو نقصان پہنچاتی ہے، جو TAMs، myeloid-derived suppressor cells (MDSCs)، اور Tregs کی دراندازی کی اجازت دیتی ہے جو بالآخر CD8 پلس T سیل کی دراندازی کو ٹیومر میں کم کرتی ہے، جس سے مدافعتی دباؤ [30] پیدا ہوتا ہے۔ ٹیومر میں دراندازی کرنے والے CD8 پلس T خلیات چھاتی کی خرابی میں پیش گوئی اور پیش گوئی کے لحاظ سے اہم ہیں [31]۔ TILs کی پیشن گوئی قدر خاص طور پر ٹرپل-منفی بریسٹ کینسر (TNBCs) اور انسانی ایپیڈرمل گروتھ فیکٹر ریسیپٹر 2 (HER2 پلس) چھاتی کے کینسر میں خاص طور پر متعلقہ ہے [32]۔ TNBCs لیمفوسائٹ پر غالب چھاتی کے کینسر ہیں، جو لیمفوسائٹ انفلٹریٹس کے جھرمٹ کو ظاہر کرتے ہیں [33]۔ دلچسپ بات یہ ہے کہ ٹی این بی سی ٹیومر میں ٹی سیل کی دراندازی مجموعی طور پر بقا سے وابستہ ہے [34]۔ تاہم، HER2 پلس چھاتی کے کینسر میں، لیمفوسائٹ کی دراندازی کا بقا کے ساتھ براہ راست تعلق نہیں ہے [35]۔ TNBCs کی طرح، TILs میں اضافہ، اور Tregs میں کمی بیضہ دانی کے کینسر کے مریضوں میں بہتر بقا کے ساتھ تعلق رکھتی ہے [36]۔ TNBC کے برعکس، لبلبے کی ڈکٹل اڈینو کارسینوما (PDAC) میں CD8 پلس T خلیات کی ٹیومر کی دراندازی کا فقدان ہے۔ تاہم، PDAC TME سوزش کے خلیوں سے بھرا ہوا ہے۔ PDAC میں، TME میں سوزشی دراندازی کی موجودگی ٹیومر کی نشوونما اور میٹاسٹیسیس کو تیز کرتی ہے اور سائٹوٹوکسک CD8 پلس T خلیات [37] کے انفیکٹر فنکشن کو دباتی ہے۔ \

یہ مثالیں اجتماعی طور پر تجویز کرتی ہیں کہ ٹیومر میں دراندازی کرنے والے CD8 پلس T خلیوں کا ٹیومر کے رجعت اور مجموعی طور پر بقا میں ایک اہم کردار ہے۔ تاہم، ٹیومر میں CD8 پلس T خلیوں کی متفاوت دراندازی مختلف ٹیومر میں غیر واضح رہتی ہے۔ اس تقسیم کو کئی عوامل کے ذریعے منظم کیا جا سکتا ہے، بشمول TME میں cytokine milieu، پروٹین کنیز کی حیثیت، اور میٹابولک حیثیت میں تبدیلی۔

ٹیومر میں سی ڈی 8 پلس ٹی سیل کی دراندازی میں سائٹوکائنز اور ان کا کردار

سائٹوکائنز چھوٹے خفیہ پروٹینوں کا ایک گروپ ہیں جو مختلف قسم کے خلیات کے ذریعہ بنائے جاتے ہیں، بشمول مدافعتی اور ٹیومر کے خلیات۔ سائٹوکائنز ٹی ایم ای پلاسٹکٹی کے اہم ریگولیٹرز ہیں اور سی ڈی 8 پلس ٹی سیل انفلٹریشن اور انفیکٹر فنکشن (ٹیبل 1) میں ان کا اہم کردار ہے۔ IL-2 CD8 پلس T سیل ایکٹیویشن اور پھیلاؤ کو منظم کرتا ہے اور CD8 پلس T سیل میں ثالثی اینٹی ٹیومر ردعمل [38] کو آمادہ کرتا ہے۔

یہ IL-12 اور IFN- کے ساتھ ٹیومر میں دراندازی کرنے والے CD8 پلس T خلیات [39] کے سائٹوٹوکسک فنکشن کو بڑھاتا ہے۔ ان سائٹوکائنز کے برعکس، کئی دیگر سائٹوکائنز، بشمول IL-10 اور IL-35، ٹیومر میں دراندازی کرنے والے CD8 پلس T خلیات [40] کے اینٹی ٹیومر فنکشن کو دباتی ہیں۔ IL-10 ایک immunosuppressive cytokine ہے جو CD8 پلس T سیل ٹیومر کے ری ایکٹیویشن کو بنیادی طور پر ٹیمپرنگ IFN- پروڈکشن [41] کے ذریعے متاثر کرتی ہے۔ IL-10 اور IL-35 Tregs کے ذریعہ جاری کیے جاتے ہیں اور کو-انحیبیٹری پروٹینز کو اپ گریڈ کرتے ہیں، جیسے PD-1، PD-L1، اور CTLA-4 ٹیومر میں دراندازی کرنے والے CD8 پر اظہار۔ پلس ٹی سیلز۔ ٹی سیل کو-انحیبیٹری مالیکیولز ٹی سیل ایکٹیویشن، توسیع، اثر کرنے والے فنکشن، اور بقا میں dysfunction کو فروغ دیتے ہیں۔ IL-10 اور IL-35 کو-اِنحیبیٹری پروٹین کا مشترکہ نیٹ ورک انفیکٹر فنکشن کو دباتا ہے اور ٹیومر میں دراندازی کرنے والے CD8 پلس T سیلز [40] میں تھکن پیدا کرتا ہے۔ IL-10 اور IL-35 کو جاری کرنے کے علاوہ، Tregs CD11c plus DCs کے ساتھ بھی تعامل کرتے ہیں اور ٹیومر میں CD8 پلس T خلیوں کی ایکٹیویشن اور توسیع کو کم کرتے ہیں۔ حالیہ مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ PDAC میں Tregs کی کمی IFN- -کی دراندازی کو بڑھاتی ہے جو ٹیومر میں سائٹوٹوکسک CD8 پلس T خلیات پیدا کرتی ہے [42]۔ ایک اور ضروری سائٹوکائن، ٹرانسفارمنگ گروتھ فیکٹر-بیٹا (TGF-) کے بارے میں بھی بتایا جاتا ہے کہ ٹیومر کی نشوونما/بقا اور میزبان قوت مدافعت میں اس کا کردار ہے۔ TGF- میزبان میں مدافعتی دباؤ پیدا کرتا ہے اور ٹیومر کو مدافعتی نظام سے فرار ہونے میں مدد کرتا ہے [43]۔ اس طرح، یہ اطلاع دی گئی ہے کہ TGF- attenuation CD8 پلس T سیل ثالثی اینٹیٹیمر ردعمل کو فروغ دیتا ہے [43]۔

اسی طرح، PDAC کے ایک مورین ماڈل میں ایک مطالعہ سے پتہ چلتا ہے کہ TGF-insensitive CD8 پلس T خلیات کی گود لینے والی منتقلی نے ٹیومر ریگریشن کی حوصلہ افزائی کی [44]۔ IL-4 اور IL-12 اسی طرح Foxp3−IL-10 پلس فینوٹائپ [45] کے ساتھ CD8 پلس Tregs کی توسیع کو متاثر کر کے CD8 پلس T سیل انفیکٹر فنکشن کو منفی طور پر متاثر کرتے ہیں۔ کینسر اور سٹرومل خلیوں کے ذریعہ جاری کردہ ٹیومر نیکروسس فیکٹر الفا (TNF-) ٹیومر میں دراندازی کرنے والے CD8 پلس T خلیات [46] میں اپوپٹوس پیدا کرنے کی اطلاع ہے۔

مدافعتی سائٹوکائنز کے ساتھ ساتھ، TME میں، سوزش مخالف سائٹوکائنز موجود ہیں جو cytotoxic CD8 پلس T سیل کے فنکشن کو بحال کرنے میں مدد کرتی ہیں۔ pleiotropic cytokine، IL-15، مختلف مدافعتی اور غیر مدافعتی خلیوں کی قسموں سے چھپا ہوا ہے اور اس کا تعلق سوزش اور دفاعی قوت مدافعت سے ہے [47]۔ IL-15 NK، NK-T، اور cytotoxic CD8 plus T خلیات کی حوصلہ افزائی کرتا ہے، اور کینسر کے امیونو تھراپی کے لیے ممکنہ امیدوار سمجھا جاتا ہے [48]۔ بیضہ دانی کے کینسر میں اینٹی ٹیومر ردعمل کو فروغ دینے میں IL-15 کا کردار دکھایا گیا ہے۔ IL-15 اور p38 inhibitor کے امتزاج کے ساتھ، CD4 پلس Th17-ثالثی ردعمل اور CD8 پلس T سیل سائٹوٹوکسٹی [49] کے ساتھ سائٹوکائن سے پختہ انسانی DCs پر ڈمبگرنتی ٹیومر اینٹیجن سے بھری ہوئی ہے۔

Th17 مددگار خلیات CD4 پلس T خلیات کا ایک ذیلی سیٹ ہیں جو ایک پروانفلامیٹری سائٹوکائن، IL-17 کو جاری کرتے ہیں، جو اینٹیٹیمر قوت مدافعت کو بھی بڑھاتا ہے۔ رحم کے کینسر کے ماڈل میں، TME میں IL-17 نے اینٹیٹیمر مدافعتی ردعمل کی حوصلہ افزائی کی [49]۔ IL-18، جسے IFN- -انڈیوسنگ فیکٹر (IGIF) بھی کہا جاتا ہے، ایک اینٹی ٹیومر سائٹوکائن ہے اور ٹی سیل ایکٹیویشن کو فروغ دیتا ہے [50]۔ syngeneic اور humanized ٹیومر ماڈلز میں، ectoenzyme CD39 کی ناکہ بندی نے فعال IL-18 کی رہائی کی حوصلہ افزائی کی اور ٹیومر میں دراندازی کرنے والے CD8 پلس انفیکٹر T خلیات [51] کی توسیع کا اشارہ کیا۔ لہذا، ٹی ایم ای میں سائٹوکائنز کی شناخت میں دلچسپی بڑھ رہی ہے تاکہ ٹیومر میں دراندازی کرنے والے سی ڈی 8 پلس ٹی سیلز کو ریگولیٹ کرنے میں ان کے افعال کو سمجھا جا سکے اور اس کا استعمال سی ڈی 8 پلس ٹی سیلز کی اینٹیٹیمر افادیت کو بحال کرنے کے لیے ٹی ایم ای کی حرکیات کو تبدیل کرنے کے لیے کیا جا سکتا ہے۔

چھوٹے مالیکیولر ویٹ سائٹوکائنز، جنہیں کیموکائنز بھی کہا جاتا ہے، ٹی سیل کی منتقلی میں ایک ریگولیٹری کردار رکھتی ہے۔ اثر ٹی سیل کی منتقلی اینٹیٹیمر ردعمل کے لئے ضروری ایک اہم قدم ہے۔ کیموکائنز TME میں ٹی خلیوں کی دراندازی کو منظم کرتی ہیں۔ ٹی سیل کی دراندازی اور کیموکائن ریسیپٹر CXCR3 اور ligands CXCL9، CXCL10، اور CXCL11 کے درمیان CD8 پلس T خلیات، Th1 خلیات، اور NK خلیوں کی بھرتی کرنے میں ٹیومر [52] میں اطلاع دی گئی ہے۔ میلانوماس میں ظاہر ہونے والی کیموکینز میں CCL2، CCL3، CCL4، CCL5، CCL19، CCL21، CXCL9، CXCL10، CXCL11، اور CXCL13 شامل ہیں، اور یہ لیمفوسائٹس کی دراندازی سے وابستہ ہیں [53]۔ دلچسپ بات یہ ہے کہ، CD8 ٹرانسکرپٹ کا اظہار CCL2، CCL4، CCL5، CCL19، CCL21، CXCL9، CXCL10، CXCL11، CXCL13، اور XCL2 کے لمفوسائٹس میں میلانوما ٹیومر میں دراندازی کے اعلی اظہار کے ساتھ مضبوطی سے وابستہ ہے [53]۔

CD8 پلس T خلیات کے اینٹیٹیمر ردعمل کو منظم کرنے میں سائٹوکائنز/کیموکائنز کے اہم کردار کو دیکھتے ہوئے، مختلف کینسروں میں سائٹوکائن پر مبنی تھراپی کا استعمال کیا گیا ہے۔ کینسر کے پہلے سائٹوکائن پر مبنی علاج میں سے ایک IL-2-پر مبنی تھراپی تھی۔ سیسٹیمیٹک IL-2 کا علاج میٹاسٹیٹک میلانوما اور رینل کینسر میں کینسر کے خلاف مدافعتی ردعمل پیدا کرنے کے لیے استعمال کیا گیا ہے۔ تاہم، سیسٹیمیٹک IL-2 (یعنی، aldesleukin) کا علاج زہریلا سے وابستہ ہے [54]۔ تاہم، کم خوراک IL-2-ماخوذ PEGylated IL-2 (یعنی، NKTR-214) نے قابل قبول زہریلے [54] کے ساتھ اینٹی ٹیومر افادیت کو ظاہر کیا۔ یہ ابھرتے ہوئے نتائج ٹی سیل ثالثی اینٹیٹیمر اثرات کو بہتر بنانے کے لیے سائٹوکائن پر مبنی کینسر تھراپی کے لیے ایک امید افزا علاج کے مستقبل کی تجویز کرتے ہیں۔

ٹیومر میں دراندازی کرنے والے CD8 پلس T خلیات کو ممکن بنانے کے لیے امیونو تھراپی

اہم تحقیق نے کینسر کے علاج کے لیے ٹیومر میں دراندازی کرنے والے CD8 پلس T خلیوں کے افعال کو بڑھانے اور بحال کرنے کے لیے مدافعتی طریقہ تلاش کرنے پر توجہ مرکوز کی ہے۔ ٹھوس ٹیومر میں سی ڈی 8 پلس ٹی سیل کی خرابی نسبتاً عام ہے اور اس لیے، سی ڈی 8 پلس ٹی سیل کی دراندازی کو بڑھانے اور اس کے افعال کو بحال کرنے کے لیے کئی طریقے تجویز کیے گئے ہیں۔ جانچے گئے کچھ طریقوں میں چیک پوائنٹ انحیبیٹر (سی پی آئی) اینٹی باڈیز، ٹی سیل کو-اسٹیمولیٹری مالیکیولز، ایگونسٹک اینٹی باڈیز، چیمریک اینٹیجن ریسیپٹر (CAR) -T خلیات، TCR سے منتقل شدہ T خلیات، اور TIL پر مبنی کینسر تھراپی شامل ہیں۔ تصویر 3)۔

کینسر کے علاج کے لیے ٹی سیل کو-انحیبیٹری محور کو نشانہ بنانا

T cell co-inhibitory molecules (PD1, PD-L1, اور CTLA-4) کا اظہار T سیل ایکٹیویشن، افعال اور بقا کو کم کرنے کے لیے بتایا جاتا ہے۔ اہم بات یہ ہے کہ ان coinhibitory molecules کی ناکہ بندی کئی کینسروں میں T سیل کے افعال کو دوبارہ پروگرام کرتی ہے [55]۔ تاہم، اس طرح کی ناکہ بندی نے بعض قسم کے ہیماتولوجیکل اور ٹھوس کینسر کے خلاف محدود فائدہ دکھایا ہے۔

ٹی سیل کو-انحیبیٹری مالیکیولز، CTLA-4، اور PD1، مرکزی اور پردیی رواداری کے اہم ریگولیٹرز ہیں۔ ٹی سیل پروجینٹرز بون میرو سے شروع ہوتے ہیں اور تھائمس میں نشوونما سے گزرتے ہیں، جہاں ٹی سی آر جین سیگمنٹس کے دوبارہ امتزاج کی وجہ سے ناپختہ T خلیے پھیلتے ہیں اور ٹی سی آر کی ایک رینج پیدا کرتے ہیں [56]۔ T خلیات جو خود اینٹیجنز سے منسلک ہو سکتے ہیں انہیں 'مرکزی رواداری' کہلانے والے عمل کے ذریعے خودکار سرگرمی کو روکنے کے لیے حذف کر دیا جاتا ہے۔ اگرچہ یہ آٹومیون ری ایکٹیویٹی کو روکنے کے لیے مفید ہے، لیکن یہ کینسر مخالف ردعمل کے لیے موزوں نہیں ہے [57]۔ CTLA-4 مرکزی رواداری میں نمایاں طور پر شامل ہے اور، T سیل کی نشوونما کے دوران، CTLA-4 اثر کرنے والے اور ریگولیٹری T خلیوں کو منظم کرتا ہے [58]۔ ایک طریقہ کار جس کے ذریعے CTLA-4 T سیل رواداری کو منظم کرتا ہے T سیل ایکٹیویشن کی حد کو بڑھانا ہے۔ خود پیپٹائڈ (s) کے خلاف T خلیات کی بڑھتی ہوئی ایکٹیویشن تھریشولڈ کے نتیجے میں کم از کم مدافعتی ردعمل میزبان استثنیٰ کے لیے سازگار ہے [58]۔ تاہم، CTLA-4 فنکشن ٹی سیل ہومیوسٹاسس کے لیے اہم ہے اور اس لیے، تسلی بخش علاج کے نتائج کے لیے CTLA-4 کا بہترین اظہار اہم ہے۔ CTLA-4 کا جینیاتی نقصان غیر کنٹرول شدہ T-cell کے پھیلاؤ کا باعث بنتا ہے، جو صحت کی پیچیدگیوں اور یہاں تک کہ موت کا باعث بنتا ہے [59]۔

ایک اور T cell co-inhibitory axis، PD1/PD-L1، بھی مرکزی رواداری کے ضابطے سے وابستہ ہے۔ یہ محور تھائموسائٹس کی تھیمک ڈبل نیگیٹو (DN) سے T سیلز کے ڈبل مثبت مرحلے (CD4 پلس CD8 plus ) میں منتقلی کو منظم کرتا ہے۔ اس منتقلی کو PD-1 کے نقصان سے فروغ دیا گیا ہے، یہ تجویز کرتا ہے کہ PD-1 T سیل کے ذخیرے کے ضابطے میں شامل ہے [60]۔ thymus سے پردیی، تلی اور لمفائیڈ اعضاء تک جاری ہونے والے Nïve T خلیات APCs کے ساتھ تعامل کرتے ہیں، جو غیر ملکی antigenic peptide (s) یا ٹیومر اینٹیجن (s) پیش کرتے ہیں۔ بعض اوقات، بے ہودہ T خلیات خود پیپٹائڈس کے خلاف رد عمل ظاہر کرتے ہیں کیونکہ کچھ TCR خود پروٹین کو پہچانتے ہیں [61]۔ اس طرح کے T سیل کی خودکار سرگرمی کو روکنے کے لیے، کئی شریک روکنے والے مالیکیولز T سیل ایکٹیویشن کو روکتے ہیں، جسے پیریفرل ٹولرنس کہا جاتا ہے [62]۔ یہ شریک روکنے والے مالیکیولز، بشمول CTLA-4 اور PD-1، مختلف مراحل میں ٹی سیل ایکٹیویشن کو منظم کرتے ہیں۔ CTLA-4 اور PD-1 بالترتیب CD4 پلس اور CD8 پلس T سیل فینوٹائپس کو الگ الگ ریگولیٹ کرتے ہیں [59]۔ CTLA-4 لیمفائیڈ ٹشوز میں ابتدائی مراحل میں ٹی سیل ایکٹیویشن کو ریگولیٹ کرتا ہے، جبکہ PD-1 ٹی سیل ایکٹیویشن کو پیریفرل ٹشوز میں دیر سے ایکٹیویشن کے مراحل پر کنٹرول کرتا ہے [63]۔

پردیی مدافعتی رواداری کے میکانزم میں سے ایک APCs پر PD-L1 اور T خلیوں پر PD-1 کے درمیان تعامل کے ذریعے بتایا جاتا ہے جو خود اینٹیجن (s) کے خلاف T سیل کے مدافعتی ردعمل کو کم کرتے ہیں [64]۔ دیگر پردیی رواداری کے طریقہ کار میں ٹی سیل کی تھکن اور ٹریگ سیل کی آبادی میں اضافہ [65] شامل ہیں۔ ٹیومر ماڈل میں اینٹی سی ٹی ایل اے-4 اینٹی باڈی کے ساتھ علاج نے ایفیکٹر ٹی سیل فنکشن کو چالو کیا، ٹریگ کی کمی کو فروغ دیا، اور اینٹی ٹیومر مدافعتی ردعمل اور ٹیومر ریگریشن کو بڑھایا [66,67]۔ اگرچہ CTLA-4 TME میں Tregs کو ختم کرتا ہے، اینٹی CTLA-4 پیریفرل سسٹم میں Treg کی کمی سے وابستہ نہیں ہے۔ ٹریگس کی پردیی کمی میزبان خلیوں میں ایف سی ریسیپٹر کی موجودگی سے بھی وابستہ ہے۔ لہذا، سوزش والے ٹیومر میں اینٹی CTLA-4 اینٹی باڈی پر مبنی امیونو تھراپی کی افادیت ممکنہ طور پر Fc گاما ریسیپٹر (Fc R) بائنڈنگ [68] پر منحصر ہے۔ مدافعتی رواداری میں PD-1 اور CTLA-4 کے تفریق ریگولیٹری کردار پر غور کرتے ہوئے، ان کی مشترکہ ناکہ بندی تجویز کی جاتی ہے کہ اثر کرنے والے: suppressor immune cell ratio [69] کو بڑھا کر ایک اہم اینٹیٹیمر ردعمل فراہم کرے۔

PD-1/PD-L1 T سیل کو-انحیبیٹری محور کی ناکہ بندی کو ٹیومر میں CD8 پلس T سیل کی دراندازی کو بڑھانے اور اینٹیٹیمر مدافعتی ردعمل کو بحال کرنے کا ہدف بنایا گیا ہے [70]۔ PD-1 مختلف کینسر کی اقسام [71–74] میں CD8 پلس T سیل انفیکٹر فنکشن کو فرق سے متاثر کرتا ہے۔ مثال کے طور پر، چھاتی کے کینسر کی کچھ ذیلی قسموں میں، CD8 پلس T خلیات پر PD{10}} اظہار سے قطع نظر، اثر کرنے والے کا فعل غیر تبدیل ہوتا ہے [74]۔ اس کے برعکس، میلانوما میں، CD8 پلس T خلیوں پر PD-1 کی موجودگی T سیل کے اثر کرنے والے فنکشن کو کم کر دیتی ہے [75,76]۔ اسی طرح، ایک اور ٹی سیل کو-انحیبیٹری مالیکیول، CTLA-4 کی ناکہ بندی، متعدد کینسروں میں ٹیومر میں دراندازی کرنے والے CD8 پلس T سیلز کے سائٹوٹوکسک فنکشن کو بحال کرکے ٹیومر ریگریشن کو مؤثر طریقے سے فروغ دیتی ہے [77,78]۔ CT26 بڑی آنت کے کینسر اور ID8-VEGF رحم کے کینسر کے جانوروں کے ماڈلز میں، PD-1 نے Foxp3 پلس Treg اور CD8 پلس T سیل فنکشن میں ایک ریگولیٹری کردار کا مظاہرہ کیا، جبکہ CTLA-4 اظہار میں اضافہ CD8 پلس T انفیکٹر سیلز کا ناکارہ ہونا۔ PD-1 پلس CTLA-4 پلس CD8 پلس T سیلز میں PD-1 پلس CD8 پلس کے مقابلے میں CD8 پلس T سیل کی خرابیاں، خاص طور پر ان کے پھیلاؤ اور سائٹوکائنز کو جاری کرنے کی خاصیت کو شدید طور پر روکا گیا تھا۔ یا CTLA4 پلس CD8 پلس T خلیات۔

یہ نتائج بتاتے ہیں کہ CD8 پلس T خلیات پر PD-1 اور CTLA-4 کا مشترکہ اوور ایکسپریشن کینسر کے علاج کے دوران CD8 پلس T سیل کی ثالثی کے خلاف مدافعتی ردعمل پر منفی اثر ڈالتا ہے [78]۔ پیدائشی مدافعتی نظام کے ارکان، DCs اور NK خلیات، اور انکولی مدافعتی نظام کے ارکان، T مددگار خلیات (CD4 پلس T سیل سبسیٹ)، ایک ٹیومر اینٹیجن کے لیے CD8 پلس T خلیات کے پرائمنگ میں سہولت فراہم کرتے ہیں۔ PD-1 اور CTLA-4 CD8 پلس T سیل پرائمنگ کو محدود کرتے ہیں اور اس طرح ٹیومر میں دراندازی کرنے والے CD8 پلس T خلیات کی تھکن کو بڑھاتے ہیں [79]۔ اس کے علاوہ، PD-1 اور CTLA-4 دوسرے پروٹینز کے ساتھ کراسسٹاک کر سکتے ہیں تاکہ CD8 پلس T خلیات کو غیر فعال کر سکے۔ ویسکولر اینڈوتھیلیل گروتھ فیکٹر (VEGF) اور سیمفورین ریسیپٹر، نیوروپیلن-1 (Nrp-1)، ٹیومر میں دراندازی کرنے والے CD8 پلس ٹی سیلز اور PD-1 یا CTLA{{ کے ساتھ مل کر زیادہ متاثر ہوتے ہیں۔ 22}}، ٹی سیل کے افعال کو بری طرح متاثر کرتا ہے [80]۔ انسانی پھیپھڑوں کے کینسر میں، Nrp-1 CD8 پلس PD-1 پلس خلیات (یعنی Nrp1 پلس PD-1 پلس CD8 پلس T خلیات) پر موجود ہوتا ہے اور ٹیومر کے خلیات پر سیمفورین 3A کے ساتھ تعامل کرتا ہے۔ سیمفورین 3A کے ساتھ Nrp-1 کے تعامل کے نتیجے میں CD8 پلس T سیل کی منتقلی اور سائٹوٹوکسیٹی میں کمی واقع ہوئی۔ B16F10 میلانوما ماڈل میں، CD8 پلس T خلیات، ظاہر کرنے والے Nrp1 اور PD-1 (یعنی Nrp1 plus PD-1 plus CD8 plus ) ٹیومر میں موجود ہیں اور ایک تھکی ہوئی حالت کو ظاہر کرتے ہیں، جیسا کہ اس کا ثبوت بلندی سے ہوتا ہے۔ LAG-3، ٹم-3، اور CTLA-4 کا اظہار [80]۔

ٹیومر میں CD8 پلس T خلیوں کی دراندازی کو بھی WNT/ -catenin سگنلنگ کے ذریعے منظم کیا جاتا ہے۔ انسانی میٹاسٹیٹک میلانومس میں، اندرونی WNT/-کیٹنین سگنلنگ کی اپ گریجولیشن ٹی سیل جین کے دستخط کی غیر موجودگی سے وابستہ ہے [81]۔ اسی طرح، آٹوچتھونس ماؤس میلانوما ماڈل میں، ٹیومر-اندرونی WNT/ -کیٹنین سگنلنگ میں اضافہ T سیل کی کمی اور اینٹی PD-1 یا اینٹی CTLA-4 تھراپی [81] کے خلاف مزاحمت۔

PD-1 کی ناکہ بندی نے کینسر کی کچھ اقسام کے لیے کلینک میں محدود افادیت ظاہر کی ہے۔ لہذا، چیک پوائنٹ روکنے والوں کے ذریعے ثالثی کی جانے والی مالیکیولر میکانزم کو مکمل طور پر سمجھنا CD8 پلس T سیل کے افعال کو بحال کرنے کے لیے نئی حکمت عملیوں کو تیار کرنے کی اجازت دے گا۔ اس طرح، دوسرے فارماسولوجیکل ایجنٹوں کو چیک پوائنٹ روکنے والوں کی افادیت کو بڑھانے کے لیے استعمال کیا گیا ہے۔ مثال کے طور پر، CT26 بڑی آنت کے کینسر، TSA mammary adenocarcinoma، اور MCA38 بڑی آنت کے کینسر کے ماؤس ماڈلز میں اکیلے PD-1 ناکہ بندی نے اہم علاج کے فوائد نہیں دکھائے۔ تاہم، PD-1 کے مشترکہ علاج اور انتہائی انٹرفیومیٹرک ٹول نما رسیپٹر 9 (TLR9) ایگونسٹ، SD101 کے انٹراٹومورل انجیکشن نے انٹراٹومورل CD8 پلس T خلیات [82] کے ذریعے قابل پیمائش اینٹیٹیمر ردعمل ظاہر کیا۔ لبلبے کے کینسر کے ماؤس ماڈل میں، TME میں TGF- نے gemcitabine اور anti-PD کے مشترکہ علاج کی افادیت کو روکا-1۔ تاہم، اس مشترکہ علاج نے انٹراٹومورل سائٹوٹوکسک سی ڈی 8 پلس ٹی سیلز میں اضافہ کیا اور ٹی جی ایف بلاک ہونے پر ٹیومر کا بوجھ کم کیا [83]۔ یو ایس فوڈ اینڈ ڈرگ ایڈمنسٹریشن (FDA) نے CTLA-4 (یعنی، Ipilimumab) PD1 (یعنی، nivolumab، pembrolizumab، اور cemiplimab)، اور PD-L1 (یعنی، atezolizumab، nivolumab، اور) کے خلاف روکنے والے اینٹی باڈیز کی منظوری دی ہے۔ durvalumab)۔ جدول 2 ٹھوس ٹیومر کے لیے کلینیکل ٹرائلز کی مثالیں فراہم کرتا ہے، ٹی سیل کو-انحیبیٹری یا شریک محرک پروٹین کو نشانہ بناتے ہیں۔

ٹی سیل کی تھکن دائمی بیماریوں کے دوران ایک مخصوص اینٹیجن کے جواب میں ٹی خلیوں کا غیر فعال یا جسمانی خاتمہ ہے، بشمول وائرل انفیکشن اور کینسر [84]۔ تھکن سے گزرنے والے ٹی خلیے اپنی پھیلاؤ کی صلاحیت اور اثر کرنے والے افعال سے محروم ہوجاتے ہیں، اور ان کی یادداشت پر سمجھوتہ کیا جاتا ہے [85]۔ ختم ہونے والے T خلیات کی خصوصیت شریک روکنے والے ریسیپٹرز کے بڑھتے ہوئے اظہار سے ہوتی ہے، بشمول PD-1، CTLA-4، لیمفوسائٹ ایکٹیویشن جین-3 (LAG3؛ CD223)، T سیل امیونوگلوبلین اور mucin ڈومین-1 {8}} (TIM-3), CD39, CD96, CD160, Ig اور ITIM ڈومینز کے ساتھ T cell immunoreceptor (TIGIT)، 2B4 (CD244)، اور B اور T لیمفوسائٹ اٹینیویٹر (BTLA) [85]۔

PD-1 اور دیگر مالیکیولز کے امیون چیک پوائنٹ انحیبیٹرز کا علاج معالجہ ختم ہونے والے T خلیات کو دوبارہ متحرک کرنے اور مختلف خرابیوں والے مریضوں کو طبی فائدہ فراہم کرنے کے قابل ہو سکتا ہے (ٹیبل 3) [86–107]۔ بدقسمتی سے، PD1-کی بنیاد پر چیک پوائنٹ کی ناکہ بندی کے نتائج تمام مریضوں کے لیے موثر نہیں ہوتے ہیں، اور ٹی سیل کی تھکن ہمیشہ اعلی درجے کی خرابی کے مریضوں میں الٹ نہیں ہوتی ہے [108]۔ حال ہی میں، ٹیومر-ری ایکٹیو TILs کی اطلاع ملی ہے جن میں PD-1 اور T سیل فیکٹر 1 (Tcf1) کے اظہار کے ساتھ ختم ہونے والے اور میموری سیل کے نشانات ہیں۔ پی ڈی 1 پلس ٹی سی ایف 1 پلس ٹی آئی ایل امیونو تھراپی سے متاثرہ پھیلاؤ [109] سے وابستہ ہیں۔ کینسر کے کچھ مریضوں میں، PD-1 کا اظہار فعال اور فعال CD8 پلس T خلیوں پر زیادہ ہوتا ہے۔ لہذا، اینٹی PD1 اینٹی باڈی پر مبنی امیونو تھراپی ان مریضوں میں ختم ہونے والے ٹی خلیوں کو دوبارہ زندہ کرنے کے لئے مؤثر نہیں ہے [110]۔

بیک وقت، syngeneic ماؤس ٹیومر ماڈلز میں ایک مطالعہ سے پتہ چلتا ہے کہ PD1 ناکہ بندی پر مبنی امیونو تھراپی غیر فعال PD-1 پلس CD38 پلس CD8 پلس T خلیات [111] کو بحال نہیں کر سکتی۔ تھکے ہوئے ٹی خلیوں کو دوبارہ زندہ کرنے کے لیے چوکی ناکہ بندی پر مبنی امیونو تھراپی کی ناکامی کا تعلق مزاحمت کے اندرونی اور بیرونی میکانزم سے ہو سکتا ہے۔ مختلف کینسروں میں ٹی سیل کے اخراج کا طریقہ کار مختلف ہوتا ہے۔ مثال کے طور پر، میلانوما (B16F10)، چھاتی (E0771)، اور پھیپھڑوں کے کارسنوما (LLC) سیل لائنوں میں ایک مطالعہ نے تجویز کیا کہ ہر ٹیومر میں ایک خصوصیت اور الگ TIL تھکن کے دستخط ہوتے ہیں [88]۔

ٹی سیل کی تھکن اور بحالی کے میدان میں پیش قدمی کے طور پر، ٹی سیل تھکن کے ماڈیولٹرز کی شناخت کے لیے ایک جسمانی لحاظ سے متعلقہ ہائی تھرو پٹ پرکھ کی اطلاع دی گئی ہے جس کا استعمال چھوٹے مالیکیولز کی اسکریننگ کے لیے کیا جا سکتا ہے جو لمفوسائٹک کوریومیننگائٹس وائرس میں ٹی سیل کی تھکن کو ریورس کر سکتے ہیں۔ ماڈل (LCMV) [112]۔ یہ خیال کیا جاتا ہے کہ چھوٹے مالیکیول اور چیک پوائنٹ انحیبیٹرز کے امتزاج کا استعمال کرتے ہوئے ایک عقلی نقطہ نظر کو کینسر امیونو تھراپی میں ختم ہونے والے CD8 پلس T خلیوں کو دوبارہ زندہ کرنے کے لئے استعمال کیا جاسکتا ہے۔

کینسر کے علاج میں ٹی سیل کے شریک محرک محور کو نشانہ بنانا

اینٹی پی ڈی-1 اور اینٹی سی ٹی ایل اے-4 ایجنٹوں کے ساتھ کلینیکل ٹرائلز کے علاوہ، ٹی سیل کو-محرک پروٹین کو نشانہ بنانے والے دیگر ٹرائلز جاری ہیں (ٹیبل 2)۔ T-cell co-stimulatory molecules کی مثالیں جن کو T-cell کے افعال کو بحال کرنے کے لیے نشانہ بنایا جا سکتا ہے وہ ہیں 4-1BB, OX40, CD40, CD27, CD70, inducible T-cell co-stimulator (ICOS), اور glucocorticoid-indused ٹیومر نیکروسس فیکٹر ریسیپٹر سے متعلق پروٹین (GITR) [113-115]۔ 4-1BB کی ایکٹیویشن، ایک TNFR فیملی ممبر، IFN- [116] کی شمولیت کے ذریعے CD8 پلس T خلیات کی سائٹوٹوکسٹی کو بڑھاتی ہے۔ ایگونسٹک مونوکلونل اینٹی باڈیز (mAbs) utomilumab (PF-05082566) اور sarilumab (BMS-663513) کے ساتھ کلینیکل ٹرائلز جو کہ 4-1BB کو چالو کرتے ہیں ایک سے زیادہ کینسر کے لیے جاری ہیں [117]۔ اگرچہ کلینیکل ٹرائلز نے مضبوط اینٹی ٹیومر ردعمل ظاہر کیا ہے، غیر مخصوص اہداف کے ساتھ Fc R تعامل کی وجہ سے کافی زہریلا بھی دیکھا گیا ہے۔

4-1BB ایگونسٹک ایم اے بی ایس کے ناقابل قبول زہریلے پن کو کم کرنے/قابو پانے کے لیے، ایک Fc فری ٹیومر ٹارگٹڈ 4-1BB-ایگونسٹک اینٹی باڈی استعمال کی گئی جس نے بہتر علاج کی افادیت فراہم کی [118]۔ OX40 فعال T خلیات کی سطح پر ایک اور T سیل شریک محرک مالیکیول ہے۔ OX40 اور اس کے ligand کے درمیان تعامل، OX40L، ٹی سیل کی توسیع اور ٹریگ دبانے کو فروغ دیتا ہے تاکہ اینٹیٹیمر ردعمل کو بڑھایا جا سکے [119]۔ CD8 پلس T سیل انفیکٹر فنکشن کے ریگولیشن میں OX40 کے مرکزی کردار کو دیکھتے ہوئے، ایک اینٹی OX40 ایگونسٹک ایم اے بی کینسر کے لیے کلینیکل ٹرائلز کے تحت ہے۔ 4-1BB اور OX40 agonistic mAbs کو بھی MEK inhibitor کی حوصلہ افزائی T-cell dysfunction کو بحال کرنے کا مظاہرہ کیا گیا ہے [120]۔ ایک اور T سیل شریک محرک محور، CD40LCD40، جانوروں کے ماڈلز میں MEK inhibitor-حوصلہ افزائی کینسر سیل کی موت کی حمایت میں بھی رپورٹ کیا گیا ہے۔ اتپریورتی KRas سے چلنے والے لبلبے کے کینسر کے جانوروں کے ماڈل میں، MEK inhibitor اور agonistic anti-CD40 mAb کے امتزاج نے مضبوط اینٹیٹیمر ردعمل ظاہر کیا [121]۔ CD27-CD70 کا محور T سیل ایکٹیویشن میں بھی اہم ہے، اور CD70 اور CD27 کا بڑھتا ہوا اظہار ہیماتولوجیکل اور ٹھوس کینسر دونوں میں رپورٹ کیا جاتا ہے [113,122]۔

پیپلیری تائرواڈ کینسر میں، ٹیومر کے خلیوں پر CD70 کا اظہار پایا گیا، جب کہ CD70 رسیپٹر، CD27 کا اظہار بنیادی طور پر انٹراٹومورل لیمفوسائٹس [123] پر تھا۔ جی آئی ٹی آر ایک اور شریک محرک مالیکیول ہے جو ٹی سیل ایکٹیویشن میں حصہ لیتا ہے۔ PD-1 اور GITR کی مشترکہ روک تھام نے CD8 پلس T خلیات [124] کے ذریعہ ٹی سیل ٹیومر کی دراندازی اور پائیدار اینٹی ٹیومر ردعمل میں اضافہ کیا۔ آئی سی او ایس ایک اضافی شریک محرک مالیکیول ہے جو متحرک ٹی خلیوں میں موجود ہے اور اسے کینسر میں بھی نشانہ بنایا گیا ہے [125]۔ دلچسپ بات یہ ہے کہ ICOS اپٹیمر اور CTLA-4 روکنا کے مشترکہ استعمال نے سائٹوٹوکسک T خلیات [126] کے ذریعہ مضبوط اینٹیٹیمر ردعمل کا مظاہرہ کیا۔ کینسر امیونو تھراپی میں ٹی سیل کے شریک محرک مالیکیولز کی اہمیت کو دیکھتے ہوئے، موجودہ آن امیونولوجی تحقیق نے ٹی سیل کے شریک محرک راستے کو متحرک کرنے کے لیے نئے علاج کی تلاش پر توجہ مرکوز کی ہے۔

کو-انحیبیٹری یا کوسٹیمولیٹری امیون ریسیپٹرز کی علاج کی افادیت کو جانچنے کے لیے کئی طبی مطالعات اور کلینیکل ٹرائلز جاری ہیں۔ تاہم، ایف ڈی اے نے ابھی تک صرف اینٹی PD1/PD-L1 اور اینٹی CTLA-4 اینٹی باڈی پر مبنی کینسر امیونو تھراپی کو کچھ اعلی درجے کی خرابیوں میں طبی استعمال کے لیے منظور کیا ہے۔ زیادہ تر امیونو تھراپیٹک ایجنٹ جو قیمتی مالیکیول کو نشانہ بناتے ہیں ابھی تک طبی طور پر منظور شدہ نہیں ہیں۔ کلینکس میں ایگونسٹک اینٹی باڈیز کے تاخیر سے استعمال کی کئی وجوہات ہو سکتی ہیں، بشمول روایتی دوائیولنٹ اینٹی باڈی فارمیٹ اور ٹریگز [127] پر شریک محرک مالیکیول۔

روایتی دوائیولنٹ اینٹی باڈی فارمیٹ میں، تفریق Fc گاما ریسیپٹرز (Fc R) ایک بڑی تشویش ہے۔ ایف سی آر انفیکٹر ٹی سیلز اور اینٹیٹیمر ردعمل [127] کی اینٹی باڈی کی حوصلہ افزائی سے ایکٹیویشن کو منظم کرتا ہے۔ مثال کے طور پر، 4-1BB ایگونسٹک اینٹی باڈی کی اینٹی ٹیومر سرگرمی کو حاصل کرنے کے لیے Fc R-dependent Treg depletion اور Fc R-independent 4-1BB اذیت [128] کی ضرورت ہوتی ہے۔ شریک محرک مالیکیولز کے خلاف ایگونسٹک اینٹی باڈیز کی ناکامی کی ایک بنیادی وجہ یہ ہے کہ ٹریگس کئی شریک محرک مالیکیولز کا اظہار کرتے ہیں [128]۔ ممکنہ طور پر، شریک محرک ایگونسٹک اینٹی باڈیز کینسر میں ایک مؤثر علاج کا آپشن ثابت ہو سکتی ہیں۔ تاہم، ان کے طبی اطلاق کے لیے ایک تفصیلی میکانکی سمجھ ضروری ہوگی۔

کینسر میں CAR-T سیل تھراپی

انجینئرڈ ٹی خلیوں کی گود لینے والی منتقلی نے کینسر کے کچھ مریضوں کو طبی فوائد دکھائے ہیں۔ ہیماتولوجیکل کینسر میں، ٹیومر خلیوں کو نشانہ بنانے والے سائٹوٹوکسک لیمفوسائٹس کی اپنانے والی منتقلی کامیاب رہی ہے [129]۔ TCRs کو ان کی بقا اور انفیکٹر فنکشن کو بہتر بنانے کے لیے جوڑ توڑ کیا جا سکتا ہے۔ لہذا، ٹیومر اینٹیجنز کے خلاف خصوصیت رکھنے والے CAR-T خلیات تیار کیے گئے ہیں اور انہوں نے ہیماتولوجیکل کینسر میں امید افزا نتائج دکھائے ہیں۔ تاہم، ٹھوس کینسر کے علاج کے لیے CAR-T خلیات ابھی تک ابتدائی مراحل میں ہیں، ابھی تک کوئی کامیابی نہیں ہوئی۔ ٹھوس ٹیومر کے خلاف ان کی ناکامی کی بنیادی وجہ یہ ہے کہ ٹی ایم ای کے اندر مدافعتی ماحول CD8 پلس ٹی سیل کی خرابی کو فروغ دے کر ٹیومر کی نشوونما کے حق میں ہے۔ TME میں CAR-T خلیوں کو غیر فعال بننے کے لئے دھکیل دیا جاتا ہے اور T سیل کو روکنے والے سطح کے مالیکیولز [130,131] کا اظہار کیا جاتا ہے۔ لہذا، TILs کی گود لینے والی منتقلی کو بہتر بنانے کی کوششیں بھی کی جا رہی ہیں جو مختلف خرابیوں میں نیواینٹیجن کو نشانہ بناتے ہیں [132]۔

ٹھوس ٹیومر میں CAR-T سیل تھراپی کی ناکامی کی دوسری وجوہات میں desmoplastic اجزاء (یعنی ریشے دار یا کنیکٹیو ٹشو) شامل ہیں، جو CAR-T خلیوں کو ٹیومر میں داخل ہونے سے روکتے ہیں۔ یہ اطلاع دی گئی ہے کہ ہلکا ہائپوتھرمیا ٹیومر میں ڈیسموپلاسٹک سالمیت کو ختم کرتا ہے۔ ہلکے ہائپر تھرمیا اور CAR-T سیل تھراپی کو شامل کرنے کے نتیجے میں انسانی میلانوما ٹیومر میں ٹی سیل کی دراندازی میں اضافہ ہوا [133]۔ ہلکے ہائپوتھرمیا کی طرح، سائٹوکائنز، اور کیموتھراپیٹک ایجنٹوں کو بھی مختلف ٹیومر کی CAR-T سیل کی دراندازی کو بہتر بنانے کے لیے استعمال کیا گیا ہے۔

مثال کے طور پر، کیموتھراپیٹک ایجنٹ ڈوکسوروبیسن کے ساتھ IL-12 کے مشترکہ علاج نے ٹیومر میں CD8 پلس T خلیات کی دراندازی کو بڑھایا، جس کے نتیجے میں مضبوط اینٹی کینسر اثرات مرتب ہوتے ہیں [134]۔ کینسر میں CAR-T سیل تھراپی کی افادیت کو بہتر بنانے کے لیے ایک اور نقطہ نظر CAR-T خلیوں کا مشترکہ استعمال ہو سکتا ہے اور ساتھ ہی T سیل کو روکنے والے مالیکیولز کی ناکہ بندی بھی ہو سکتی ہے۔ ٹھوس ٹیومر میں صرف CAR-T خلیوں کے استعمال کے لیے یا CPI کے ساتھ مل کر کئی کلینیکل ٹرائلز جاری ہیں۔ جدول 4 ٹھوس ٹیومر کے خلاف CAR-T خلیوں کے کلینیکل ٹرائلز کی مثالیں فراہم کرتا ہے۔ کئی موجودہ CAR-T کلینیکل ٹرائلز میں، گود لینے والی منتقلی کی وجہ سے منفی اثرات کی اطلاع ملی ہے۔ لہذا، کم منفی اثرات کے ساتھ CAR-T سیل پر مبنی امیونو تھراپی کے استعمال کے لیے نئے طریقے ضروری ہوں گے۔

TCR سے منتقل شدہ T خلیات کا استعمال کرتے ہوئے کینسر کا علاج

CAR-T cell therapy targets surface molecules of immune cells and cannot target intracellular peptide(s) presented by major histocompatibility complexes (MHCs). Therefore, to target intracellular peptides presented by MHCs, TCR-transduced T cells have been developed [135]. These cells are generated from patient T cells and are designed to encode the TCRαβ protein, which targets tumor or virus-infected cells [136]. The large-scale production of TCR-transduced cells is achieved using semiautomated devices and modular systems [136]. TCR-transduced T cells showed prolonged survival (i.e., >18 ماہ) اور اینٹیجن (زبانیں) کے ساتھ دوسرے تصادم کے بعد بھی ایکٹیویشن [137]۔

Several tumor antigens have been used to generate TCR-transduced T cells, including trophoblast glycoprotein (TPBG) in renal cancer [138], placenta-specific 1 (PLAC1) in breast cancer [139], nucleophosmin 1 (NPM1) in acute myeloid leukemia (AML) [140], NY-ESO-1 in synovial cell sarcoma, in patients with melanoma and common epithelial tumors [141], and MAGE-A4 in esophageal cancer [142], and effectively demonstrated antitumor responses in preclinical studies. Diffuse intrinsic pontine glioma is a lethal cancer prevalent in children. In >ہسٹون 3 ویریئنٹ 3 (H3.3) کی 27 پوزیشن پر پھیلے ہوئے اندرونی پونٹائن گلیوما کے 70 فیصد کیسز، لائسین (K) سے میتھیونین (M) میں امینو ایسڈ کا متبادل بتایا گیا ہے۔ دلچسپ بات یہ ہے کہ H3.3K27M اتپریورتن کے ساتھ مصنوعی پیپٹائڈس کے خلاف TCR سے منتقل شدہ T خلیات کو HLAA2 پلس H3.3K27M پلس گلیوما خلیات [143] کے علاج کے لیے تجویز کیا گیا تھا۔ میٹاسٹیٹک سائنوویئل سیل سارکوما، میلانوما، اور غذائی نالی کے کینسر [141,142] سمیت مختلف خرابی کے مریضوں میں ٹی سی آر سے منتقل شدہ ٹی سیل پر مبنی کینسر تھراپی کی علاج کی افادیت کی تصدیق کے لیے کلینیکل ٹرائلز جاری ہیں۔ ایک ساتھ لے کر، TCR سے منتقل شدہ T سیل تھراپی ایک طاقتور علاج کا آلہ ہے جس میں T سیل کی ثالثی اینٹیٹیمر ردعمل کو بہتر بنانے کی صلاحیت ہے۔

TILs کا استعمال کرتے ہوئے کینسر کا علاج

CAR اور TCR سے منتقلی T سیل پر مبنی کینسر کے امیونو تھراپیز سطح اور انٹرا سیلولر اینٹیجنز کو نشانہ بنانے کے لیے مفید ہیں۔ تاہم، TILs کی گود لینے والی منتقلی کی تجویز پیش کی گئی ہے جو خاص طور پر ٹیومر اینٹیجنز کو نشانہ بنا سکتی ہے [144]۔ TIL پر منحصر کینسر تھراپی میں، ابتدائی مرحلے میں ٹیومر میں تبدیل شدہ پروٹین کی شناخت شامل ہوتی ہے۔ اس کے بعد تبدیل شدہ پروٹین کو آٹولوگس اے پی سی، جیسے ڈی سی میں داخل کیا جاتا ہے۔ مزید اقدامات میں اینٹیجن سے بھری ہوئی اے پی سی کے ساتھ آٹولوگس TILs کی شریک ثقافت اور اینٹیجن مخصوص TILs کا انتخاب شامل ہے۔ ان کی توسیع اینٹیجن مخصوص TILs کے انتخاب کے بعد ہوتی ہے۔ توسیع شدہ ٹی خلیات عطیہ کرنے والے مریضوں میں منتقلی کے لیے استعمال کیے جاتے ہیں [132]۔ TIL پر مبنی امیونو تھراپی کی افادیت کو مختلف کینسروں میں سراہا گیا ہے، بشمول میٹاسٹیٹک میلانوما اور میٹاسٹیٹک ہیومن پیپیلوما وائرس (HPV) سے وابستہ کارسنوماس، ڈمبگرنتی اور چھاتی کے کینسر [145–148]۔

TIL پر مبنی کینسر امیونو تھراپی کی اینٹی ٹیومر افادیت کو قائم کرنے کے لیے کئی کلینیکل ٹرائلز چل رہے ہیں جن میں مختلف خرابی کے مریضوں میں کینسر کے دوسرے ایجنٹوں کے ساتھ مل کر، بشمول میٹاسٹیٹک سر اور گردن کے اسکواومس سیل کارسنوما (IDNCT03083873)، سروائیکل کارسنوما (IDNCT03083873) ، اناپلاسٹک تھائرائڈ کینسر، اوسٹیوسارکوما، یا دیگر ہڈیوں اور نرم بافتوں کا سارکوما (IDNCT03449108)۔ ایک ساتھ لے کر، TIL پر مبنی کینسر تھراپی میں مختلف ناقابل علاج ٹھوس مہلک بیماریوں کے اعلی درجے کے مرحلے کا علاج کرنے کی صلاحیت ہے۔

CD8 پلس T سیل فنکشن کے ابھرتے ہوئے ماڈیولر

ٹیومر کی CD8 پلس T سیل کی دراندازی میں پروٹین کنیز کا کردار

سی ڈی 8 پلس ٹی سیل انفیکٹر فنکشن کو مختلف عوامل سے ریگولیٹ کیا جاتا ہے، جیسے اینٹیجن ریسیپٹرز، شریک محرک مالیکیولز، سائٹوکائنز، اور پروٹین کنیزز [149]۔ دلچسپ بات یہ ہے کہ متعدد اپ اسٹریم MAPKs کو متعدد کینسروں [77,150,151] میں تبدیل یا اپ گریڈ ہونے کی اطلاع ملی ہے۔ تاہم، اپ اسٹریم اور ڈاون اسٹریم MAPKs کو روکنے کی کوششیں کامیاب نہیں ہوسکی ہیں کیونکہ اس کے نتیجے میں منشیات کے خلاف مزاحمت اور مدافعتی کمپارٹمنٹ کو دبانے پر ان کے اثرات ہیں۔ MAPK inhibitors کی ناکامی کی بنیادی وجہ CD8 پلس T سیل فنکشن اور بقا پر MAPK کی روک تھام کے اثرات کو نہ سمجھنا ہے۔ کئی مثالوں سے پتہ چلتا ہے کہ ٹی سیل بائیولوجی میں پروٹین کناسز کے کردار کو سمجھنے سے اینٹیٹیمر ردعمل کو بڑھانے کی حکمت عملی بنانے میں مدد ملے گی، شاید کسی اضافی ایجنٹ کے ساتھ۔ مثال کے طور پر، لیمفوسائٹ فنکشن سے وابستہ اینٹیجن-1 (LFA-1) TCR مشغولیت [152] پر ERK1/2 سگنلنگ کے ذریعے T سیل ایکٹیویشن میں ثالثی کرتا ہے۔

مزید برآں، انٹر سیلولر آسنجن مالیکیول-1 (ICAM-1) LFA-1 کے ساتھ ligation ERK1/2 سگنلنگ کو بڑھاتا ہے تاکہ CD8 پلس T سیل ایکٹیویشن [152] کو بہتر بنایا جا سکے۔ جون این ٹرمینل کناز (جے این کے)، ایک ایم اے پی کے، سی ڈی 4 پلس اور سی ڈی 8 پلس ٹی سیلز [153] کے ضابطے میں متضاد کردار رکھتا ہے۔ ویوو میں B16، ایک میلانوما سیل لائن، اور EL-4، ایک لیمفوما سیل لائن کا استعمال کرتے ہوئے ایک مطالعہ نے ظاہر کیا کہ JNK1-ناک آؤٹ چوہے ٹیومر کی نشوونما کے لیے حساس تھے، خاص طور پر CD8 پلس T سیل کی خرابی کی وجہ سے۔ 153]۔ BRAF پروٹو آنکوجین میں تغیرات، ایک سیرین/تھریونائن کناز، کا آنکوجینیسیس میں اہم کردار ہے۔ ایک مطالعہ سے پتہ چلتا ہے کہ BRAF روکنے والے کے ساتھ قلیل مدتی (3–7 دن) علاج کیے گئے میلانوما خلیات کو آٹولوگس CD8 پلس T خلیات (TILs) کے ذریعے مؤثر طریقے سے پہچانا گیا تھا۔ تاہم، BRAF inhibitor کے ساتھ طویل مدتی (14–21 دن) علاج کیے گئے میلانوما خلیات کو آٹولوگس CD8 پلس T خلیات (TILs) کے ذریعے کمزوری سے پہچانا گیا۔ یہ نتائج بتاتے ہیں کہ BRAF روکنا ٹیومر اینٹیجن کے اظہار کو مختلف طریقے سے ماڈیول کرتا ہے اور ٹیومر کی مزاحمت میں ثالثی کرتا ہے، شاید فنکشنل CD8 پلس T سیلز [154] کو کم کرکے۔ BRAF اور MEK inhibitors (بالترتیب dabrafenib اور trametinib) کا استعمال کرتے ہوئے ایک اور مطالعہ نے CD8 پلس T خلیات [77] پر ایک امتیازی اثر دکھایا۔ انسانی متحرک ٹی سیلز (ان وٹرو) میں Dabrafenib کا علاج، حوصلہ افزائی ERK فاسفوریلیشن (یعنی ایکٹیویشن)، اور CD8 پلس T سیل کے فنکشن کو دبانے نہیں دیتا۔

تاہم، trametinib کے علاج سے ERK فاسفوریلیشن، ٹی سیل کے پھیلاؤ، اور سائٹوکائن کے اظہار میں کمی آئی [77]۔ تاہم، PD-1 یا CTLA-4 کے لیے trametinib کو چیک پوائنٹ انحیبیٹرز کے ساتھ ملانے سے CD8 پلس T سیل کی دراندازی میں اضافہ ہوا اور CT26 ٹیومر ماڈل [77] میں مضبوط اینٹیٹیمر ردعمل کو فروغ دیا۔ ٹی سیل ایکٹیویشن کی بھی اطلاع ہے کہ وہ TCR-ZAP-70 پروٹین ٹائروسین کناز ثالثی بہاو سگنلنگ کو آمادہ کرتا ہے، جو ٹی سیل کی حرکت، آسنجن، اور سائٹوکائن کی پیداوار کو منظم کرتا ہے۔ Rasal1، ایک GTPase کو متحرک کرنے والا پروٹین، TCR-ZAP-70 بائنڈنگ پروٹین کے ساتھ جوڑتا ہے اور Ras-ERK پاتھ وے، ٹی سیل ایکٹیویشن، اور اینٹیٹیمر ردعمل کو روکتا ہے [155]۔ Rasal1 کا اظہار فعال T خلیوں پر ہوتا ہے، اور اس کے ناک ڈاؤن نے B16 میلانوما اور EL-4 لیمفوما ٹیومر میں CD8 پلس T سیل کی دراندازی کو متاثر کیا [155]۔ TCR کی ثالثی سے ایکٹیویشن ہونے پر، ٹیومر میں دراندازی کرنے والے CD8 پلس T خلیوں نے ERK اور پروٹین ٹائروسین کناز، ITK کا کم اظہار دکھایا۔ تاہم، splenic CD8 پلس T خلیات میں، ERK اور ITK kinase اظہار میں اس طرح کی کوئی تبدیلی نہیں تھی، جس سے یہ معلوم ہوتا ہے کہ ERK اور ITK کناز پردیی اور ٹیومر سے دراندازی کرنے والے CD8 پلس T خلیات [156] میں الگ الگ ریگولیٹ ہوتے ہیں۔ Sorafenib، ایک ملٹی کناز روکنے والا اور ہیپاٹو سیلولر کارسنوما (HCC) کے لیے پہلی لائن تھراپی، HCC والے مریضوں کو محدود فائدہ فراہم کر سکتا ہے۔ صرافینیب کے علاج کی کامیابی HCC [157] میں ERK کی ایکٹیویشن کی حیثیت سے وابستہ تھی۔

صرافینیب کے ساتھ علاج کیے گئے انسانی اور ماؤس HCC نمونوں کے تجزیوں نے ایک ہی ٹیومر کے اندر فعال ERK اور PD-1 کے دو متضاد فینوٹائپس کو ظاہر کیا۔ پہلی فینوٹائپ perKlowPD-1 plus تھی، جہاں CD8 پلس T خلیوں میں ٹیومر کی دراندازی بہت زیادہ تھی اور ان CD8 پلس T خلیوں میں PD-1 کا اظہار زیادہ تھا۔ دوسری فینوٹائپ، perKhighPD-1- میں PD1 کا کم اظہار تھا۔ دلچسپ بات یہ ہے کہ perKhighPD-1- فینوٹائپ کے مقابلے میں perKlowPD-1 پلس فینوٹائپ نے مجموعی طور پر اور بیماری سے پاک بقا کو ظاہر کیا۔ اہم بات یہ ہے کہ perKhighPD-1− phenotype میں PD کے کم اظہار کے ساتھ CD8 پلس T خلیات تھے-1، یہ تجویز کرتا ہے کہ ٹیومر میں دراندازی کرنے والے CD8 پلس T خلیوں پر PD-1 کی حیثیت ایک فیصلہ کن عنصر ہے۔ اینٹیٹیمر ردعمل کے لئے [158]۔ MAP2K (یا MEK) MAPK کا ایک اپ اسٹریم ریگولیٹر ہے۔ MEK کی ھدفانہ روک تھام نے ٹیومر کو دبانے کی حوصلہ افزائی کی اور عمر میں اضافہ اور CD8 پلس T خلیوں کی دراندازی۔ تاہم، MEK کی روک تھام نے لمف نوڈس میں ٹی سیل پرائمنگ کو کم کیا [151]۔ BALB/c چوہوں میں CT26 ٹیومر ماڈل میں، MEK inhibitor کے ساتھ اینٹی PD-L1 کی مشترکہ تھراپی نے مضبوط اور پائیدار اینٹیٹیمر افادیت ظاہر کی، بشمول کچھ چوہوں میں ٹیومر کی مکمل معافی [151]۔ MAP3K خاندان کا ایک اور رکن، Mixed Lineage Kinase-3 (MLK3)، کینسر کے خلیات کی موت [159] کے ضابطے میں ایک متضاد کردار رکھتا ہے اور ٹی سیل ایکٹیویشن اور سائٹوٹوکسٹی [160] کو روکتا ہے۔

مورین بریسٹ کینسر سیل لائن کا استعمال کرتے ہوئے، بلب/سی چوہوں میں 4T1 زینوگرافٹ ماڈل، MLK3 کی روک تھام کو سائٹوٹوکسک CD8 پلس T خلیات [160] کے ٹیومر کی دراندازی کو دلانے کے لیے دکھایا گیا تھا۔ MLK3 روکنا CD8 پلس T خلیوں پر CD70 اظہار کو بھی بڑھاتا ہے، جو ان خلیوں کے بڑھتے ہوئے apoptosis سے وابستہ ہے [161]۔ دلچسپ بات یہ ہے کہ Vivo ماڈل میں TNBC میں، MLK3 فارماسولوجیکل انحیبیٹر اور CD70 مخالف کے ساتھ مشترکہ علاج نے CD8 پلس T سیل کی بقا، ٹیومر کی دراندازی، اور اینٹیٹیمر افادیت [161] کو فروغ دیا۔ MAP4K4 MAPKs کا ایک اپ اسٹریم ریگولیٹر بھی ہے۔ MAP4K4 کے اپریگولیٹڈ ایکسپریشن نے T سیل ایکٹیویشن کے دوران LFA-1 کو روکا، جبکہ MAP4K4 کے خاتمے نے CD8 پلس T سیلز پر LFA-1 اظہار میں اضافہ کیا۔ T خلیوں پر LFA-1 کا اضافہ APCs کے ساتھ T سیل کے بڑھتے ہوئے تعامل سے وابستہ تھا، جس نے CD8 پلس T سیل انفیکٹر فنکشن [162] میں اضافہ کیا۔

ریسیپٹر ٹائروسین کناز (RTK) ریسیپٹر فیملی ممبر، ایپیڈرمل گروتھ فیکٹر ریسیپٹر (EGFR)، اپیٹیلیل کینسر کے خلیوں میں زیادہ متاثر ہوتا ہے۔ ایک مطالعہ یہ سمجھنے کے لیے کیا گیا کہ EGFR tyrosine kinase inhibitors (TKIs) NSCLC خلیات میں کس طرح اہم MHC-I کو متاثر کرتے ہیں یہ ظاہر ہوا کہ NSCLC میں EGFR کی روک تھام نے MHC-I کے جین اور سطحی پروٹین کے اظہار میں اضافہ کیا۔ T خلیات APCs پر MHC-I مالیکیول کے ذریعہ پیش کردہ ٹیومر اینٹیجنز کو پہچانتے ہیں اور اینٹیٹیمر ردعمل فراہم کرتے ہیں۔ ERK-MEK inhibitor، trametinib، MHC-I کو بڑھانے کے قابل تھا، جب کہ فاسفیٹائیڈیلینوسیٹول 3-کناز روکنے والا بیوپارلیسیب NSCLC میں MHC-I اظہار کو دلانے کے قابل نہیں تھا۔ یہ نتائج تجویز کرتے ہیں کہ MEKERK روکنا EGFR سے متحرک MHC-I اظہار [163] کو اکساتا ہے۔

Janus kinase/signal transducers and activators of transscription (JAK/STAT) سگنلنگ پاتھ وے سائٹوکائنز اور نمو کے عوامل کی ایک رینج کو منظم کرتا ہے۔ تاہم، TNBC میں JAK2 روکنے والوں نے کوئی افادیت نہیں دکھائی، شاید اس لیے کہ TNBC خلیات نے پلیٹلیٹ سے حاصل شدہ گروتھ فیکٹر ریسیپٹر بیٹا (PDGFR) ثالثی منشیات کے خلاف مزاحمت حاصل کی تھی۔ ایک واحد ایجنٹ کے طور پر JAK2 روکنے والے کی ناکامی پر قابو پانے کے لیے، PDGFR، JAK2، اور MEK1/2 inhibitors کے ساتھ ٹرپل کمبینیشن تھراپی نے ٹیومر میں دراندازی کرنے والے CD8 پلس T خلیوں میں نمایاں اضافہ کیا [164]۔ JAK/ STAT کے راستے کو سائٹوکائن-انڈیکیبل ایس ایچ2-پر مشتمل پروٹین (CISH) [165] سے کم کیا جاتا ہے۔ JAK/STAT سگنلنگ میں ڈاون ریگولیشن نے ٹیومر میں دراندازی کرنے والے CD8 پلس T سیلز [165,166] کی TCR ثالثی کو چالو کیا۔ دلچسپ بات یہ ہے کہ CISH کی شمولیت گرینولوسائٹ-میکروفیج کالونی محرک عنصر (GM-CSF) میں ثالثی DC کی ترقی، اور DC-ثالثی سائٹوٹوکسک T سیل ایکٹیویشن [165] میں شامل ہے۔ لہذا، یہ واضح ہے کہ پروٹین کناسز کا CD8 پلس T سیل ٹیومر کی دراندازی، بقا، اور اینٹیٹیمر ردعمل میں ایک اہم کردار ہے۔ لہٰذا، پروٹین کناسز کی صحیح تفہیم مختلف قسم کے کینسر کے انتظام کا باعث بن سکتی ہے۔

For more information:1950477648nn@gmail.com