نیورو پروٹیکشن کا اینڈوجینس میکانزم کیا ہے؟

رابطہ:joanna.jia@wecistanche.com/ واٹس ایپ: 008618081934791

cistanche فوائد neuroprotection کے ساتھ مدد کر سکتے ہیں

Sara Marmolejo-Martinez-Artesero 1، Caty Casas 1,† اور David Romeo-Guitart1,2,*

1 شعبہ سیل بیالوجی، فزیالوجی، اور امیونولوجی، انسٹی ٹیوٹ ڈی نیورو سائنسز (INc)،

Universitat Autonoma de Barcelona (UAB), Bellaterra, 08193 Barcelona, ​​Spain; Sara.Marmolejo@uab.cat

2 لیبارٹری "دماغ کی نشوونما اور افعال کا ہارمونل ریگولیشن"—ٹیم 8، انسٹی ٹیوٹ نیکر اینفینٹس-مالیڈس (INEM)، INSERM U1151، Université Paris Descartes، Sorbonne Paris Cité،

75015 پیرس، فرانس

* خط و کتابت: david.romeo-guitart@inserm.fr; ٹیلی فون: پلس 33-01-40-61-53-57 † 29 جون 2020 کو انتقال ہوا۔

خلاصہ: پوسٹ مائٹوٹک خلیات، جیسے نیوران، کو زندگی بھر زندہ رہنا چاہیے۔ اس وجہ سے، حیاتیات/خلیات خود مرمت کے طریقہ کار کے ساتھ تیار ہوئے ہیں جو انہیں طویل زندگی گزارنے کی اجازت دیتے ہیں۔ پچھلے سالوں کے دوران نیورو پروٹیکٹرز کی دریافت کے ورک فلو نے پیتھوفزیولوجیکل میکانزم کو روکنے پر توجہ مرکوز کی ہے جو نیوروڈیجنریشن میں نیورونل نقصان کا باعث بنتے ہیں۔ بدقسمتی سے، ان مطالعات سے صرف چند حکمت عملی ہی نیوروڈیجنریشن کو کم کرنے یا روکنے میں کامیاب رہی۔ ایسے زبردست ثبوت موجود ہیں جو یہ ظاہر کرتے ہیں کہ خود شفا یابی کے طریقہ کار کی توثیق کرنا جو حیاتیات/خلیوں کے پاس اینڈوجینس ہے، جسے عام طور پر سیلولر لچک کہا جاتا ہے، نیوران کو بازو بنا سکتا ہے اور ان کی خود شفا یابی کو فروغ دے سکتا ہے۔ اگرچہ ان میکانزم کو بڑھانے پر ابھی تک خاطر خواہ توجہ نہیں دی گئی ہے، لیکن یہ راستے نیورونل موت کو روکنے اور نیوروڈیجنریشن کو کم کرنے کے لیے نئے علاج کے راستے کھولتے ہیں۔ یہاں، ہم تحفظ کے بنیادی اینڈوجینس میکانزم کو اجاگر کرتے ہیں اور نیوروڈیجنریشن کے دوران نیوران کی بقا کو فروغ دینے میں ان کے کردار کی وضاحت کرتے ہیں۔

مطلوبہ الفاظ: autophagy; سیلولر لچک؛ endogenous میکانزم؛ نیورو پروٹیکشن؛ نیورونل بقا؛ پروٹین کے ردعمل کو ظاہر کیا

1. Neurodegenerative عمل

ترقی یافتہ ممالک میں متوقع عمر بڑھنے کے ساتھ، الزائمر کی بیماری (AD)، پارکنسنز کی بیماری (PD) یا ہنٹنگٹن کی بیماری (HD)، یا ہمارے اعصابی نظام کی کارکردگی میں عمر سے متعلق کمی جیسی نیوروڈیجینریٹیو بیماریوں کی تعدد میں اضافے کا امکان ہے۔ اگرچہ شواہد کی کئی سطریں ہیں جو اس بات کی نشاندہی کرتی ہیں کہ ان پیتھالوجیز میں نیورونل، ایسٹروگلیل اور مائکروگلیئل اجزاء ہوتے ہیں، لیکن روزمرہ کے افعال میں کمی ترقی پسند نیورونل نقصان کی وجہ سے ہوتی ہے۔ ان کے کم ٹرن اوور کی وجہ سے، نیوران پوسٹ مائٹوٹک خلیات ہیں جنہیں زندگی بھر زندہ رہنا چاہیے۔ اس وجہ سے، انہیں بیرونی اور اندرونی توہین سے نمٹنے کے لئے ایک طاقتور اندرونی حفاظتی مشینری کی ضرورت ہے، جو ان کی موت کا سبب بنے گی۔ یہ بیرونی/اندرونی خطرات تکلیف دہ چوٹیں یا ایکسائٹوٹوکسک مرکبات، ری ایکٹیو آکسیجن اسپیسز (ROS)، پروٹین کے مجموعے اور دیگر زہریلے مالیکیولز ہیں۔ خوش قسمتی سے، خلیوں میں اندرونی مشینری ہوتی ہے جو لچک کے میکانزم کو چالو کرکے یا تخلیق نو کے راستوں کو فروغ دے کر موت کو روکتی ہے۔ جب کہ نوجوان نیوران ان خود کو ٹھیک کرنے والے حفاظتی میکانزم کا صحیح کام کرتے ہیں، عمر بڑھنے سے ان میں خلل پڑتا ہے، جس سے نیوران غیر محفوظ رہ جاتے ہیں۔ اسی سمت میں، نیوروڈیجینریٹیو بیماریوں میں بھی ان خود کو شفا بخشنے والے میکانزم کی غیر فعالیت کو بیان کیا گیا ہے۔

پچھلی دہائیوں کے دوران، ناول اور موثر نیورو پروٹیکٹو علاج کے حصول میں بہت زیادہ کوششیں کی گئی ہیں۔ تاہم، ان کا مقصد پیتھو فزیولوجیکل میکانزم کو نشانہ بنانا ہے، جو آخر میں نیورونل ڈیمیز کی سرعت میں بدل جاتا ہے۔ لہذا، کیوں نہ ان میکانزم کو فروغ دیا جائے جو نیوران قدرتی طور پر ایک مؤثر نیورو پروٹیکٹو اپروچ حاصل کرنے کے لیے رکھتے ہیں؟

یہ حفاظتی نیٹ ورک مختلف سیلولر پراسیسز (یعنی انفولڈ پروٹین ریسپانس (UPR)، آٹوفجی وغیرہ) کے کراس اسٹالک سے چلتا ہے، لیکن وہ ایک ہی عمل میں بدل جاتے ہیں: سیل کو تناؤ کے مطابق ڈھالنے اور زندہ رہنے کی اجازت دیتا ہے [1–3] . حال ہی میں، ہم نے نیورو پروٹیکٹینٹس کو دریافت کرنے کے لیے ایک نئے استدلال پر غور کیا ہے: اس بات کو سمجھیں کہ دو مختلف اعصابی چوٹوں کے بعد مخالف فینوٹائپس، بقا یا موت کے ساتھ کون سے مالیکیولر میکانزم نیورون مشغول ہوتے ہیں، جو صحت اور نیوروڈیجنریشن/عمر بڑھنے کے ساتھ مماثلت رکھتے ہیں۔ ایسا کرنے کے لیے، ہم نے Vivo پر مبنی پیریفرل نرو انجری کے دو ماڈلز استعمال کیے جو تحفظ کے اینڈوجینس میکانزم کی فعالیت یا غیر فعالی کی نقل کرتے ہیں۔ وہ یا تو motoneuron (MN) کی موت (root avulsion (RA)) یا بقا (distal axotomy (DA)) کو بھڑکاتے ہیں، جو سوما – چوٹ کے فاصلے پر منحصر ہے [2]۔ ان ماڈلز کی مدد سے اور سسٹمز بیالوجی پر مبنی اپروچ کا استعمال کرتے ہوئے، ہم نے تصدیق کی کہ RA کے بعد MNs کی موت نیوروڈیجینریٹیو بیماریوں میں مشاہدہ کیے جانے والے نیورونل نقصان کے ساتھ مماثلت رکھتی ہے، اور ہم نے یہ بھی بتایا کہ MNs کے ذریعے اعصابی چوٹ کے بعد زندہ رہنے کے لیے کون سے طریقہ کار استعمال کیے جاتے ہیں۔ [2]۔ انحطاطی عمل ہیں اپوپٹوس، نیکروسس، اینوکیز، اینڈوپلاسمک ریٹیکولم (ER) تناؤ، نیوکلیولر تناؤ، سائٹوسکیلیٹل ری آرنجمنٹس، اور مائٹوکونڈریل dysfunction، جبکہ بقا کے محرکات ہیں: ایک درست UPR، گرمی کے جھٹکے کا ردعمل، آٹوفیجک کوئٹ وے- پروٹیزوم سسٹم، چیپیرون سسٹمز، ای آر سے وابستہ انحطاطی مشینری اور اینٹی آکسیڈینٹ دفاع (ٹیبل 1)۔ دلچسپ بات یہ ہے کہ ان تمام میکانزم کو برسوں پہلے الگ الگ بیان کیا گیا ہے اور انہیں پری کنڈیشنگ انجری (نیچے ملاحظہ کریں) کہا جاتا ہے۔

جدول 1. کے ہر اینڈوجینس میکانزم کے لیے شامل پروٹینوں کا خلاصہنیورو پروٹیکشنبشمول مالیکیولر میکانزم جس کے ذریعے ان کے اثرات میں ثالثی کی جاتی ہے۔

ہم نے یہ ظاہر کیا ہے کہ ان اینڈوجینس میکانزم کو بڑھانانیورو پروٹیکشنفارماسولوجیکل علاج کے ذریعے MN کو موت کے حامی مختلف منظرناموں میں زندہ رہنے کی اجازت ملتی ہے، مختلف پرجاتیوں سے لے کر ترقی کے مختلف مراحل تک [23,54,55]۔

2. اینڈوجینس میکانزم کا پہلا ثبوت: پری کنڈیشنگ

تحفظ کے اینڈوجینس میکانزم کے فینوٹائپک اثرات 40 سال پہلے بیان کیے گئے تھے۔ 1986 میں۔ مری وغیرہ۔ نے بیان کیا کہ ذیلی جسمانی تناؤ، جسے پیشگی شرط کی چوٹ بھی کہا جاتا ہے، دل میں بافتوں کی بحالی کو بڑھاتا ہے [56]۔ یہاں سے، یہ شفا یابی کے طریقہ کار دماغ اور ریڑھ کی ہڈی (SC) [57] میں بھی دیکھے گئے۔ مثال کے طور پر، یہ سیلولر ردعمل اعصابی چوٹ کے بعد یا دل کی تخلیق نو کے دوران دیکھے جاتے ہیں، جہاں بالترتیب ROS یا extracellular vesicles کی پیداوار، فعال بحالی کو آگے بڑھاتی ہے [58-60]۔ حیرت انگیز طور پر، ایک مخصوص عضو کی پری کنڈیشنگ دوسروں کو چوٹ سے تحفظ فراہم کرتی ہے [61]۔ ان اثرات کے لیے کئی مخصوص اثرات ذمہ دار ہیں۔ پیشگی حالت میں چوٹ لگنے کے بعد، مختلف ثالثوں (نائٹرک آکسائیڈ یا ROS) کی پیداوار سگنلنگ پاتھ ویز فاسفیٹائیڈیلینوسیٹول 3-کناز (PI3K)/پروٹین کناز بی (AKT)، پروٹین کناز C (PKC) اور دیگر سگنلنگ پاتھ ویز کو چالو کرے گی۔ ٹرانسکرپشن عوامل کو ماڈیول کرے گا جیسے Hypoxia-inducible factor 1-alpha (Hif1- ) یا NF-kB۔ ان کے نتیجے میں نائٹرک آکسائیڈ سنتھیسز (iNOS)، ہیٹ شاک پروٹینز (HSPs)، اور cyclooxygenase-2 (COX-2) کی پیداوار ہو گی، جنہیں "اینڈ ایفیکٹرز" کے طور پر بیان کیا گیا ہے، اور ان کو فروغ ملے گا۔ مستقبل کی توہین کے خلاف ٹشو کے اندر حفاظتی اثر [61]۔ ایک ساتھ، یہ مطالعات بتاتے ہیں کہ جانداروں/خلیوں میں endogenous حفاظتی میکانزم ہوتے ہیں، اور ان کو بڑھانا ایک مؤثر علاج کی حکمت عملی ہو سکتی ہے۔

3. نیورو پروٹیکشن کے اینڈوجینس میکانزم

3.1 فائن ٹیوننگ آٹوفجی

نیوران کو ہومیوسٹاسس کو برقرار رکھنے کے لیے انٹرا سیلولر مواد کی مسلسل ری سائیکلنگ کی ضرورت ہوتی ہے۔ میکرو آٹوفیجی کو بعد میں آٹوفجی کہا جاتا ہے، یوکرائیوٹک خلیوں میں ایک انتہائی مربوط مالیکیولر نیٹ ورک ہے جو لائسوسومل انحطاط کے ذریعے سائٹوپلاسمک مواد کو ری سائیکل کرنے کی کوشش کرتا ہے۔ اگرچہ یہ انحطاط کا طریقہ کار ابتدائی طور پر صرف بھوک کے تحت دیکھا گیا تھا، حالیہ مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ خلیوں میں پروٹین ہومیوسٹاسس کو منظم کرنے کے لیے آٹوفجی کی بنیادی سطح ہوتی ہے۔ یہ بنیادی سطحیں عام حالات میں محوری دیکھ بھال اور نیوران کی بقا کے لیے ضروری ہیں [62,63]۔ ایک فنکشنل آٹوفیجک فلوکس ایک ایسا عمل ہے جو مختلف آٹوفیجی سے متعلق (ATG) جینز، کنیز اور دیگر ریگولیٹری پروٹینز کے ذریعے انتہائی مربوط ہے۔ وہ سب مل کر سائٹوسولک بوجھ کو کم کرنے کے لیے لائزوزوم کے ساتھ آٹوفاگوزوم کے درست آغاز، نیوکلیشن، لمبا، بندش، اور فیوژن کو ترتیب دینے کے لیے کام کرتے ہیں [64]۔ عمر بڑھنے کے دوران ہپپوکیمپس میں آٹوفجی کا کم بہاؤ دیکھا جاتا ہے، جب کہ اس کی سطحوں کا دوبارہ قیام نئی یادوں کی تشکیل میں سہولت فراہم کرتا ہے [65]۔ نیوران میں خراب یا غیر فعال آٹوفجی کا تعلق نیوروڈیجنریشن سے ہے، جب کہ آٹوفجی کو چالو کرنے سے پیدا ہوتا ہے۔نیورو پروٹیکشن[5,54]۔ امیوٹروفک لیٹرل سکلیروسیس (ALS) [66,67] میں ابتدائی اور لمبا ہونے کے مراحل سے متعلق پروٹینوں میں تبدیلی دیکھی گئی ہے، اور آٹوفجی کے محرکات، جیسے کہ ریپامائسن، ایکسرٹنیورو پروٹیکشندماغی اسکیمیا کے بعد، تکلیف دہ دماغی چوٹ (TBI)، اور AD [68-70]۔ ATG5 یا ATG7 کا نیوران مخصوص ناک آؤٹ (KO) نیوروڈیجنریشن، سائٹوپلاسمک انکلوژن باڈیز کے جمع ہونے، اور نیوران [62,71] کی موت کا سبب بنتا ہے، جبکہ PD [4] کے ماڈل میں ان کا زیادہ اظہار فائدہ مند ہے۔ آخر میں، p62، جو آٹوفاگوسوم میں چارج کا انتظام کرتا ہے اور آٹوفاگوسم کی تشکیل کے آخری مراحل میں کلیدی کردار ادا کرتا ہے، فلائی ماڈلز میں نیورو پروٹیکٹو ہے جس کی خصوصیت پروٹین ایگریگیٹس سے ہوتی ہے، جو کہ نیوروڈیجینریٹیو بیماریوں کا خاصہ ہے [6]۔

متعدد مطالعات میں نیوروڈیجنریشن کے دوران آٹوفیگوسوم اور آٹولیسومز کے جمع ہونے کو دکھایا گیا ہے، یہ تجویز کیا گیا ہے کہ آٹوفیجی زیادہ متحرک ہے اور اعصابی موت کو متحرک کرسکتی ہے۔ سائٹوپلازم کے اندر آٹوفیجک عملوں کا غیر معمولی جمع ہونا زیادہ فعال آٹوفجی [72] کے بجائے لیسوسومل dysfunction کی وجہ سے ہوسکتا ہے۔ ٹی بی آئی کے بعد آٹوفجی کو مناسب طریقے سے شروع کیا جاتا ہے، لیکن لیسوسومل ڈسکشن کی وجہ سے آٹوفیگوسوم کو ختم نہیں کیا جاتا ہے، جس کی وجہ سے غیر حل شدہ آٹوفیجی ہوتی ہے جو نیورونل موت کو فروغ دیتی ہے [73]۔ یہ غیر فعال لیسوسومل راستے ریڑھ کی ہڈی کی چوٹ (SCI) کے بعد بھی دیکھے جاتے ہیں، فنکشنل ریکوری میں رکاوٹ بنتے ہیں [74]۔ آٹوفاگوسوم کی کلیئرنس میں اسی طرح کی رکاوٹ نیوروڈیجینریٹیو بیماریوں (یعنی AD کے انسانی دماغ) میں بھی بیان کی گئی ہے [75]۔ ان تمام شواہد کے انضمام سے پتہ چلتا ہے کہ آٹوفجی کے حل کو بڑھانے سے تحفظ حاصل ہو سکتا ہے۔ پلاٹ نے حال ہی میں نیوروڈیجنریشن [76] کو روکنے کے لیے لائسوسومل پروٹین کے کام کو بہتر بنانے کے علاج کے راستے پر روشنی ڈالی۔ ٹرانسکرپشن فیکٹر ای بی (ٹی ایف ای بی) کے اوور ایکسپریشن، جو لائزوسوم بائیو جینیسس اور فنکشن کے لیے ضروری ٹرانسکرپشن نیٹ ورک کو ماڈیول کرتا ہے، نے PD [7] کے چوہے کے ماڈل اور AD چوہوں کے ماڈل [8] میں نیورو پروٹیکٹو اثرات کو فروغ دیا ہے۔

آٹوفیجی کو شامل کرنا اتنا اچھا نہیں ہے جتنا ہم چاہتے ہیں۔ اگرچہ یہ ایک اصولی حفاظتی طریقہ کار ہے، لیکن اس کی مشینری یا اوور ایکٹیویشن سیل کی موت کو آسان بنا سکتی ہے [77,78]۔ انسانی prions کی نمائش کے بعد آٹوفجی کی روک تھام اعصابی نقصان کو کم کرتی ہے، جس سے یہ ظاہر ہوتا ہے کہ آٹوفجی کی شمولیت بھی موت کو آگے بڑھاتی ہے [79]، اور آٹوفجی کی ابتداء میں کمی SC hemisection کے بعد فعال بحالی کو فروغ دیتی ہے، apoptosis کو روکتی ہے اور نوزائیدہ اور بالغ چوہوں میں اسکیمیا کے بعد اہرام کی موت کو کم کرتی ہے۔ [80-82]۔ اگر ہم axotomized نیوران پر توجہ مرکوز کرتے ہیں تو، آٹوفجی کو روکنا روبرو اسپائنل کے لیے نیورو پروٹیکٹو ہے [80]، جبکہ ATG5 کی سطح میں اضافہ ریڑھ کی ہڈی کے MNs کی حفاظت کرتا ہے [5]۔ تنازعہ کو شامل کرتے ہوئے، کیموتھراپی کے ذریعے علاج کیے جانے والے کینسر کے خلیے علاج سے متاثرہ اپوپٹوٹک موت پر قابو پانے کے لیے آٹوفجی کو چالو کرتے ہیں، جبکہ MN پر منحصر آٹوفجی اپوپٹوسس کو روکتا ہے [54]۔ اس کے علاوہ، ATGs نیورونل موت کو بھی متحرک کرتے ہیں۔ ATG5 اپنی خود بخود حامی صلاحیتوں کو کھو دیتا ہے جب کلیو ہو جاتا ہے، اپنی سرگرمی کو سیل ڈیتھ [83–85] کی طرف لے جاتا ہے۔ بیکلن 1 کے عام حالات میں اینٹی اپوپٹوٹک اثرات ہوتے ہیں، لیکن سی ٹرمینس پر اس کا کلیویج خلیوں کو اپوپٹوٹک سگنلز کے لیے حساس بناتا ہے [9]۔ لہذا، دونوں سیلولر عملوں کے درمیان ایک کراسسٹالک ہے، اور خلیے ان کو ری ڈائریکٹ کر سکتے ہیں تاکہ ان کی توہین سے نمٹنے کے لیے ان کے زندہ رہنے کے امکانات بڑھ جائیں [83]۔

تو، اس کے لئے کیا ضروری ہےنیورو پروٹیکشن? آٹوفجی کو بڑھانا یا مسدود کرنا؟ فائن ٹیوننگ جواب ہے [86]۔ فائن ٹیونڈ آٹوفجی کی شمولیت سے فائدہ مند اثرات مرتب ہوتے ہیں (i) غیر فعال پروٹین/آرگنیلز کو ہٹا کر، (ii) خلیے کو نئی صورتحال کے مطابق ڈھالنے کی اجازت دے کر، اور (iii) نقصان دہ اثرات جیسے سوزش یا اپوپٹوٹک انڈیوسرز [87، 88]، جو نیورونل انتقال میں ثالثی کرتا ہے۔ تاہم، اس آٹوفیجی کو وقت کی ایک بہت ہی مخصوص ونڈو میں چالو کیا جانا چاہیے، ضرورت سے زیادہ انحطاط سے بچنا جو سیل کی موت کو اکساتی ہے۔

آخر میں، آٹوفیجی میں غیر کیننیکل/ڈیگریڈیٹیو افعال بھی ہوتے ہیں، جیسے کہ اشتعال انگیز ردعمل کی ماڈلن، نئی یادوں کی تشکیل [65]، Synaptic ہومیوسٹاسس کی دیکھ بھال [89]، اور سیل کے اندر کارگو کی نقل و حمل [90] . لہذا، اس کو مکمل طور پر بلاک کرنے سے اعصابی نظام اور/یا نیوران کو ناقابل واپسی نقصان پہنچے گا۔

cistanche deserticola فوائد: نیورو پروٹیکشن میں مدد کر سکتے ہیں۔

3.2 انفولڈ پروٹین رسپانس کے سیکسی حصے سے نمٹنا

نیوران غلط فولڈ پروٹین اور مجموعوں کے لیے انتہائی حساس ہوتے ہیں۔ ER سیلولر پروٹیوسٹاسس کے لیے ذمہ دار ہے، جو کہ پروٹین کی ترکیب، فولڈنگ اور چھانٹی ہے۔ اس کی فٹنس میں کوئی بھی تبدیلی غلط فولڈ پروٹینز کے جمع ہونے، ER تناؤ کو دلانے اور ER-اوورلوڈ رسپانس (ERO)، ER سے وابستہ انحطاط (ERAD) کے راستے، یا UPR کو متحرک کرنے کا باعث بنے گی، جو کہ ایک انتہائی محفوظ سیلولر ردعمل ہے۔ ER اور UPR کی تقسیم اور مورفولوجی میں تبدیلیاں نیوروڈیجینریٹیو بیماریوں میں دیکھی گئی ہیں [91-93] اور جب اعصابی چوٹ کے بعد نیوران الگ تھلگ ہوتا ہے [16,94]۔ بائنڈنگ امیونوگلوبلین پروٹین (BIP)، جسے GRP78 بھی کہا جاتا ہے، ایک ER-resident chaperone ہے جو UPR کا مرکزی سینسر ہے۔ غیر فعال حالت میں، BIP تین مادوں کا پابند رہتا ہے۔

Jor UPR اثر کرنے والے: RNA-activated protein kinase-like ER kinase (PERK) جو C/EBP ہومولوگس پروٹین (CHOP)، inositol کی ضرورت والی پروٹین-1 الفا (IRE1)، جو ایکس باکس بائنڈنگ پروٹین کو تقسیم کرتا ہے 1 (Xbp1) mRNA، اور فعال کرنے والا ٹرانسکرپشن فیکٹر-6 الفا (ATF6) [95,96]۔ جب BIP غلط فولڈ پروٹین کا پتہ لگاتا ہے، تو یہ ٹرانسڈیوسرز متحرک ہو جاتے ہیں اور مخصوص پروٹینز (یعنی چیپیرونز، ٹرانسکرپشن فیکٹرز) کے جین اظہار میں تبدیلیاں لاتے ہیں جس کا مقصد جین کے اظہار کو ماڈیول کر کے پروٹین کو درست طریقے سے فولڈ کرنے کی سیل کی صلاحیت کو بڑھانا، غلط فولڈ کی کلیئرنس کو بڑھانا ہے۔ پروٹین کی کلیئرنس، یا پروٹین کی ترکیب کو روکنا، سیل کو تناؤ کے مطابق ڈھالنے اور زندہ رہنے کی اجازت دیتا ہے [97]۔ تصور کے ثبوت کے طور پر، ڈوپامائن نیورونز میں بی آئی پی اوور ایکسپریشن ان کی بقا کو بڑھاتا ہے، جبکہ اس کی کمی نیگرل ڈوپامائن نیورونز کی موت کا باعث بنتی ہے [10]۔ اس کے علاوہ، بی آئی پی پلس / - چوہے پرین روگجنن کے تیز پھیلاؤ کو ظاہر کرتے ہیں [98]۔ مجموعی طور پر، UPR ماڈیولیشن نیوروڈیجنریشن [94] پر حفاظتی اثرات مرتب کر سکتی ہے، جیسا کہ ہمارے گروپ نے حال ہی میں جائزہ لیا ہے [99]۔ یو پی آر ایکٹیویشن نیوروڈیجینریٹیو بیماریوں میں ایک ابتدائی واقعہ ہے، اور اس کی درست ترمیم پیتھالوجی کی ترقی پر فائدہ مند اثرات مرتب کرتی ہے [100,101]۔ اگرچہ UPR سیل کے تحفظ کے ایک اینڈوجینس میکانزم کے طور پر کام کر سکتا ہے، لیکن اس کی (زیادہ) ایکٹیویشن اپوپٹوسس کو فروغ دیتی ہے [102] (یعنی، PERK محور میں پرو یا اینٹی اپوپٹوٹک صلاحیتیں ہیں [91])۔ اس کے علاوہ، حالیہ شواہد سے پتہ چلتا ہے کہ ER کی مختلف ہنگامہ آرائیاں UPR کی 3 شاخوں کو الگ الگ طور پر چالو کریں گی، جس سے یہ ظاہر ہوتا ہے کہ ان کی مربوط کو ایکٹیویشن ہمیشہ موجود نہیں ہوتی ہے۔

لہذا، سیل کے پاس مخصوص توہین کا جواب دینے کے لیے ایک مخصوص پروگرام ہے۔ مثال کے طور پر، CHOP بلاکیج یا Xbp1 اوور ایکسپریشن اعصابی چوٹ کے بعد نیوران کی بقا کو بڑھاتا ہے، جس سے ظاہر ہوتا ہے کہ نیوران کی موت میں ہر شاخ کے مختلف کردار ہوتے ہیں [16]۔

cistanche in hindi herba neuroprotection میں مدد کر سکتا ہے۔

دماغی چوٹ کے بعد PERK کی ابتدائی ایکٹیویشننیورو پروٹیکشن، جبکہ اس راستے کے ذریعے مسلسل سگنلنگ سیل کے نقصان کو بڑھاتا ہے [11]۔ اوور ایکسپریشن یا فارماسولوجیکل PERK ایکٹیویشن ٹاؤ پیتھالوجی کو کم کرتا ہے [12]، جبکہ اس کی مستقل ایکٹیویشن کو روکنے سے نیورونل موت میں کمی آتی ہے [13] اور عمر سے متعلق یادداشت میں کمی [14] بہتر ہوتی ہے۔ ایسٹروائٹس میں PERK کی روک تھام ویوو ماڈل میں پرین بیماری میں نیورونل نقصان میں تاخیر کرتی ہے۔ دلچسپ بات یہ ہے کہ ایسٹروائٹس میں PERK ایکٹیویشن سیکروم کو پریشان کرتا ہے، اس کے synaptogenic فنکشن کو تبدیل کرتا ہے اور Synaptic نقصان کا سبب بنتا ہے [15]۔ انہی مصنفین نے بیان کیا کہ PERK کے اس نقصان دہ اثر میں شامل مرکزی بہاو میکانزم ایکسٹرا سیلولر میٹرکس سیل آسنجن راستے ہیں، جو UPR کو anoikis کے ساتھ جوڑتے ہیں (نیچے دیکھیں، سیکشن 3.4)۔ ٹرانسکرپشن فیکٹر 5 (ATF5) کی سطح کو چالو کرنا براہ راست PERK/eukaryotic Translation initiation factor 2a (eIF2a) کے فعال ہونے پر منحصر ہے۔ اے ٹی ایف 5 کو براہ راست ان نیورانز سے جوڑا گیا ہے جو انسانی مرگی میں موت کے لیے زیادہ لچکدار ہوتے ہیں [26]۔ تاہم، ان اثرات کے بعد کے نتائج اتنے واضح نہیں ہیں۔ اے ٹی ایف 5 دو اینٹی اپوپٹوٹک اثر کرنے والوں (نیچے دیکھیں)، بی سیل لیمفوما 2 (بی سی ایل-2) اور حوصلہ افزائی مائیلوڈ لیوکیمیا سیل تفریق پروٹین (Mcl-1) [103] کے اظہار کو اکساتا ہے، جو روکے گا۔ apoptosis. اے ٹی ایف 5 نان نیورونل ٹشوز میں ریپامائسن (ایم ٹی او آر) کے میکانکی ہدف کو بھی ماڈیول کرتا ہے، جو یو پی آر اور آٹوفجی کو باہم مربوط کرنے والا آٹوفجی کا بنیادی ماڈیولیٹر ہے۔

IRE1 کو چالو کرنے سے جگر کی خرابی میں بہتری آتی ہے [17]، اور اس کا بہاو اثر Xpb1 دل کے تحفظ کو فروغ دیتا ہے [18]،نیورو پروٹیکشنAD میں، PD میں، اور فالج کے بعد [19-21]۔ حیرت انگیز طور پر، ذیابیطس اور اسکیمیا سے متاثرہ ریٹینوپیتھی میں ایک مطالعہ سے پتہ چلتا ہے کہ UPR کے حفاظتی اثرات Xbp1 [22] کے ذریعے ثالثی کرتے ہیں۔ بہر حال، IRE1 برانچ کی دائمی ایکٹیویشن ٹیومر نیکروسس فیکٹر-a (TNF-) ریسیپٹر سے وابستہ فیکٹر 2 (TRAF2) کے فاسفوریلیشن کا باعث بنے گی، مختلف طریقوں سے اپوپٹوٹک سیل کی موت کو متحرک کرے گی [104–106]۔ Ire1 کا ایکٹوپک اوور ایکسپریشن PD ڈروسوفلا ماڈل [107] میں آٹوفجی پر منحصر نیورونل موت کا باعث بنے گا۔ لہذا، ایک مخصوص ونڈو کے دوران IRE1 -Xbp1 کی ایڈجسٹ شدہ ماڈیولیشن تحفظ فراہم کر سکتی ہے [108]۔

ہم نے حال ہی میں بیان کیا ہے کہ NeuroHeal فارماسولوجیکل ٹریٹمنٹ یا sirtuin1 (SIRT1) اوور ایکسپریشن اعصابی چوٹ کے بعد MN کی بقا کو اکساتا ہے، اور IRE1 فاسفوریلیشن کو کم کرتے ہوئے کلیویڈ ATF6 کی موجودگی کو بڑھاتا ہے [23]۔ ATF6 کی فارماکولوجیکل ایکٹیویشن مختلف اسکیمیا ماڈلز میں پروٹوسٹاسس کو چالو کرکے تحفظ فراہم کرتی ہے [24]، اور اس ٹرانسکرپشن عنصر کی رکاوٹ کے مضر اثرات ہوتے ہیں۔ تفصیل سے، ATF6 اینٹی آکسیڈینٹ ردعمل سے متعلق پروٹین کے اظہار کو ماڈیول کرتا ہے، ROS ہارمیسس کو ماڈیول کرتا ہے [109]۔ ATF6 کا زبردستی اظہار فالج کے بعد عملی نتائج کو بہتر بناتا ہے، اور مصنفین تجویز کرتے ہیں کہ اس اثر کو آٹوفجی کی شمولیت سے ثالثی کیا جا سکتا ہے [25]۔

تو، علاج کے لحاظ سے کیا دلچسپ ہے، چالو کرنا، یا UPR کو کم کرنا؟ UPR کی مخصوص شاخوں کو چالو کرنا اہم نکتہ ہے۔ UPR کی درست سرگرمی سیل کو پروٹیوسٹاسس کو بحال کرنے میں مدد دے کر حفاظتی اثرات کو فروغ دے سکتی ہے۔ بہر حال، اس تصور کو احتیاط کے ساتھ لیا جانا چاہئے کیونکہ اگر تناؤ برقرار رہتا ہے اور پروٹیوسٹاسس بحال نہیں ہوتا ہے، تو UPR نیورونل اپوپٹوس کو متحرک کرتا ہے جو PERK یا IRE1 برانچ [110] کے ذریعے ثالثی کرتا ہے۔ اس کے علاوہ، UPR آٹوفجی اور اس کے برعکس بھی منسلک ہے۔ BIP آٹوفیجک ردعمل میں ثالثی کرتا ہے، نیورونل بقا کو فروغ دیتا ہے [111]۔ آخر میں، UPR کی 3 شاخیں ATG کی نقل کو ماڈیول کرتی ہیں [112]، جو دونوں سیلولر عمل کے درمیان ایک پیچیدہ ربط کی تجویز کرتی ہیں۔

3.3 "آج نہیں" اپوپٹوسس

اپوپٹوس ایک کیسپیس پر منحصر پروگرامڈ سیل ڈیتھ (PCD) ہے جو سیل پلازما میمبرین اور آرگنیلز [113] کی سالمیت کو برقرار رکھتا ہے۔ اس کی بے ضابطگی بہت سے کینسر، نیوروڈیجینریٹو یا سوزش کی پیتھالوجیز کی وجہ ہے۔ کیسپیس سے متاثرہ موت ایک انتہائی کنٹرول شدہ عمل ہے جسے حتمی سیل کی موت کا سبب بننے کے لیے متعدد کھلاڑیوں کے مربوط عمل کی ضرورت ہوتی ہے [114]۔ Apoptosis جیسے موت کے نشانات امیوٹروفک لیٹرل سکلیروسیس (ALS) چوہوں کے ماڈلز، AD، یا PD میں پائے جاتے ہیں، حالانکہ یہ واضح نہیں ہے کہ آیا یہ نیورونل انتقال کا حتمی انجام دینے والا ہے [115]۔ ارتقاء کے دوران، خلیات نے اپنی موت کو غیرضروری ہونے پر روکنے یا قبل از وقت پی سی ڈی سے بچنے کے لیے کئی میکانزم تیار کیے ہیں۔ خلیے صرف ایک موثر اپوپٹوٹک موت کو متحرک کرتے ہیں جب پرو یا اینٹی اپوپٹوسس مشینری کے درمیان توازن انہیں موت کی طرف دھکیلتا ہے۔ ہمارے ان ویوو ماڈلز کی بنیاد پر، ہم نے مشاہدہ کیا کہ RA اپوپٹوٹک پاتھ ویز کو اکساتا ہے بلکہ اپوپٹوٹک مخالف بھی، اور ان کا توازن ایک متبادل اور نامعلوم موت کا باعث بنتا ہے جو کلاسیکی اپوپٹوسس نہیں ہے [2]۔ فیلڈ میں آخری اشاعتیں بتاتی ہیں کہ کیسپیسز بھی خلیے کی موت کو فروغ دیے بغیر اعصابی نظام کو دوبارہ تشکیل دے کر کام کرتے ہیں [116]، اور ان کی سرگرمی اس کی ذیلی خلیاتی پوزیشن پر منحصر ہے۔ لہٰذا، کیسپیسز کی فعال شکلیں جو نیوروڈیجنریٹیو ٹشوز میں پائی جاتی ہیں ان کا غیر موت سے متعلق کردار ہو سکتا ہے اور نیورون کی حتمی موت دوسرے مہلک میکانزم کے ذریعے ہوتی ہے۔

اپوپٹوسس کو اینٹی اپوپٹوٹک راستے سے روکا جا سکتا ہے، جو تین پروٹین فیملیز کے ذریعے چلتے ہیں: FLICE- inhibitory proteins, Bcl-2، اور inhibitors of Apoptosis Proteins (IAPs)۔ IAPs کوشش کرتے ہیں۔نیورو پروٹیکشناسکیمیا ماڈل میں [27] یا نوزائیدہ مراحل کے دوران اعصابی چوٹ کے بعد MNs کی موت سے بچیں [28]۔ IAPs کو جوانی کے دوران axotomy کے بعد نیورونل موت کی رکاوٹ کے لئے ذمہ دار ہونے کی تجویز ہے [29]۔ اسی سمت میں، X-linked-IAP (XIAP) کی ایک پوسٹ ٹرانسلیشنل ترمیم، جو اس کے اینٹی کیسپیس 3 فنکشن کو روکتی ہے، کو PD روگجنن [117] میں معاون کے طور پر بیان کیا گیا ہے۔

اسکیمک پیشگی شرط، جو جزوی طور پر اسکیمیا کے نقصان دہ اثرات کو کم کرتی ہے، IAPs کے ذریعے کام کرتی ہے اور کیسپیس کاسکیڈ ایکٹیویشن [30] کے بعد خلیوں کو زندہ رہنے کے قابل بناتی ہے۔ IAPs نوزائیدہ axotomy [28] کے بعد MNs پر گلیل سیل سے ماخوذ نیوروٹروفک فیکٹر (GDNF) کے بقا کے حامی اثر میں بھی ثالثی کرتے ہیں۔ دوسرے مالیکیولر راستے جو پرو اپوپٹوٹک پروٹین کو ماڈیول کرکے سیل کی موت سے بچتے ہیں وہ ہیں ایکسٹرا سیلولر سگنل ریگولیٹڈ کنیز (ERK) اور AKT۔ اس لحاظ سے، اے کے ٹی کے راستے کو اپوپٹوسس کو روک کر بقا کے حامی کھلاڑی کے طور پر بیان کیا گیا ہے [31]۔ AKT اپوپٹوسس انڈیسر p53 کو اس کے انحطاط کو فروغ دے کر روکتا ہے اور اس وجہ سے اس کی اپوپٹوٹک صلاحیتوں کو روکتا ہے [32–34]۔ بصورت دیگر، کیسپیسز AKT کو اس کے کلیویج سے روک سکتے ہیں، جو سیل کی بقا اور موت کی ایک اچھی ساخت کی نشاندہی کرتا ہے [118]۔ دوسری طرف، AKT کی سرگرمی فورک ہیڈ باکس پروٹین O (FOXO) ٹرانسکرپشن عوامل کو فاسفوریلیٹ کرتی ہے۔ ان کا تعلق اپوپٹوسس [119] سے ہے اور ان کی تبدیلی سیل کی بقا کو بڑھاتی ہے [35]۔ FOXOs کا AKT پر منحصر فاسفوریلیشن نیوکلئس میں اس کے داخلے سے گریز کرتا ہے، پرو اپوپٹوٹک جینوں کی شمولیت کو روکتا ہے جیسے Bcl-2- انٹرایکٹنگ ثالث برائے سیل ڈیتھ (BIM) یا Bcl-2 انیس کلوڈالٹن-انٹریکٹنگ۔ پروٹین 3 (Bnip3) [119–121]۔ دوسری طرف، FOXO کی پوسٹ ٹرانزیکشنل تبدیلیاں سیل کے اندر اپنے ٹرانسکرپشن نیٹ ورک کو ٹھیک کرتی ہیں، اسے اپوپٹوسس [54,121–123] کی بجائے آٹوفیجی انڈکشن کی طرف لے جاتی ہیں۔ لہذا، FOXO فیملی کی مخصوص ماڈیولیشن apoptosis [54,124] کو روک کر نیورونل بقا کو فروغ دینے کا ایک نیا راستہ ہے۔

آخر میں، نیورونل سرگرمی این ایم ڈی اے پر منحصر اینٹی اپوپٹوٹک جینز کی اپ گریجشن [125,126] کے ذریعہ اینٹی اپوپٹوسس کو فروغ دینے والا بھی ہے۔ ان میں سے کچھ اپریگولیٹڈ جینز مائٹوکونڈریا کو تناؤ کے خلاف زیادہ مزاحم بننے دیتے ہیں [126]، جس سے خلیے کو توہین سے بچنے میں مدد ملتی ہے۔

3.4 اینٹی انوکیز کے ذریعہ دوبارہ منسلک کرنا

سیل اور ایکسٹرا سیلولر میٹرکس (ECM) کے درمیان تعامل بافتوں کے اندر اس کے درست فنکشنل انضمام کے لیے ضروری ہے۔ جب اس کراسسٹالک کو ٹال دیا جاتا ہے، تو خلیہ ایک PCD کے ذریعے مر جاتا ہے جسے anoikis کہتے ہیں، جو apoptosis کے ساتھ راستے بانٹتا ہے۔ دلچسپ بات یہ ہے کہ اندرونی اینوکیس پروگراموں کا ٹوٹنا ٹیومر کے خلیوں کو نقصان پہنچاتا ہے، جس سے انہیں بچنے کے لیے کافی سیلولر لچک ملتی ہے اور وہ مرے بغیر دوسرے ٹشوز سے دوبارہ جڑ جاتے ہیں [127,128]۔ ان تعاملات کے بڑے اثر کرنے والے انٹیگرین پروٹین ہیں، جو اور ذیلی یونٹس کے امتزاج سے بنتے ہیں۔ یہ مجموعہ ligand کی خصوصیت اور انٹرا سیلولر سگنلنگ کا تعین کرے گا۔ ای سی ایم سگنلز انٹیگرینز کے ذریعے نیوران میں منتقل ہوتے ہیں، جو سیل کی شکل، بقا، حرکت، پھیلاؤ، نشوونما، نیورونل کنیکٹیویٹی، اور synaptic پلاسٹکٹی [129] کے لیے ضروری ہیں۔ انٹیگرینز نمو کے عوامل [130] کے انٹرا سیلولر سگنلنگ کے لیے بھی اہم ہیں، جو کہ موت کے حامی میکانزم کو روک کر نیورونل بقا کے معروف ماڈیولر ہیں۔ سیل-ای سی ایم کے تعامل کے لیے 1 انٹیگرین سبونائٹ ضروری ہے، اور اس کی رکاوٹ اینوکیز [36] اور نیورونل اپوپٹوسس [131] کو متحرک کرنے کے لیے کافی ہے۔ اس کے علاوہ، اس ذیلی یونٹ کی انٹرا سیلولر سگنلنگ کا تعلق ریٹینل گینگلیئن خلیوں کی بقا سے ہے [132]، اور ان کے نقائص نیوروڈیجینریٹو عوارض میں موجود ہیں [133]۔

بہر حال، خلیات نے موت کا مقابلہ کرنے کے لیے اینٹی اینوائیکس سبروٹینز تیار کی ہیں، جو ٹائروسین کنیز، چھوٹے GTPases [128]، NF-kB [134]، PI3K/AKT، proto-oncogene tyrosine-protein kinase (Src) یا ERK axes سے شروع ہوتے ہیں۔ ، اور آٹوفجی کے ذریعہ [135,136]۔ NF-kB اینٹی اپوپٹوٹک پروٹین جیسے Bcl-2 اور IAP- 1 [135] کو متحرک کرکے اینٹی anoikis کو ماڈیول کرتا ہے، اسی دوران سیل کی بقا میں PI3K/AKT کا کردار وسیع پیمانے پر دستاویزی ہے اور بقا میں تعاون کرتا ہے۔ مختلف خلیوں کی [36,37]۔ ای سی ایم لاتعلقی آٹوفجی کو بھی آمادہ کرتی ہے، جو کہ ایک خود حفاظتی طریقہ کار ہے جو اپوپٹوس کو بائی پاس کرتا ہے [135]۔ شواہد کے یہ ٹکڑے دوبارہ خود حفاظتی میکانزم کے درمیان ایک پیچیدہ نیٹ ورک کی تجویز کرتے ہیں۔

Anoikis میٹرکس میٹالوپروٹینیس (MMP) کے اضافے کی وجہ سے TBI کے بعد نیورونل موت میں بھی موجود ہے جو ECM پروٹین کو تباہ کرتا ہے [137]۔ MMPs کے اظہار اور سطحوں میں نیورو ٹراما کے بعد ترمیم کی جاتی ہے، اور ان کے محوری انحطاط، چمکیلی داغ کی تشکیل، اور Synaptic دوبارہ تشکیل دینے میں مختلف کردار ہوتے ہیں۔ نیورونل بقا کے بارے میں، ایم ایم پی 9 کی روک تھام دماغی اسکیمیا میں لیمینین انحطاط کو کم کرکے حفاظتی اثرات مرتب کرتی ہے [38]۔ ایم ایم پیز نیوروڈیجنریشن [138] میں بھی ملوث ہیں۔ حالیہ مطالعات میں بتایا گیا ہے کہ MMP9 کی روک تھام موٹر یونٹ میں ALS چوہوں کے ماڈل [39,40] اور AD ماڈلز [41] میں حفاظتی اثرات رکھتی ہے۔ لہذا، مخصوص MMPs کو روکنے کے علاج بالواسطہ طور پر اینٹی اینوکیز پروگرام کو نیوران کے اندر برقرار رکھیں گے جو اس کی بقا میں سہولت فراہم کرتے ہیں۔

3.5 سائٹوسکلٹن اور موٹر ٹرانسپورٹرز

نیورونل سائٹوسکلٹن تین مختلف ساختی کمپلیکس پر مشتمل ہے: مائیکرو ٹیوبلز (MTs)، انٹرمیڈیٹ فلیمینٹس (IF)، اور ایکٹین مائیکرو فلیمینٹس۔ ان کے مختلف سیلولر افعال ہیں: MT نیورائٹ اور ڈینڈرائٹ ڈائنامکس کو منظم کرتا ہے [139]، ایکٹین سیل مورفولوجی کا انچارج ہے [140]، اور IF میکانکی استحکام کو سائٹوسکلٹن کی ساخت میں چلاتا ہے [141]۔ ساختی کمپلیکس میں نقائص نیوروڈیجینریٹو بیماریوں میں، پیریفرل نیوروپتھیز میں، Synaptic dysfunction میں دیکھے جاتے ہیں، اور ریڑھ کی ہڈی کے بالغ ہونے کا باعث بنتے ہیں [141-146]۔

MTs کا متحرک ایک انتہائی کنٹرول شدہ عمل ہے، اور اس کا عدم توازن نیوران کی بقا یا ایکسون کی کارکردگی [142] کے لیے تباہ کن نتائج کا باعث بن سکتا ہے، جبکہ اس کا استحکام نیورونل موت کو روکتا ہے [147] اور مرکزی اعصابی نظام میں محوری نمو کو تیز کرتا ہے [148]۔ مزید تفصیل میں، سائٹوسکیلیٹل ڈھانچے ریلوے ہیں، جبکہ کائنسین اور ڈائنین موٹر پروٹین وہ ٹرینیں ہیں جو بالترتیب اینٹروگریڈ یا ریٹروگریڈ ٹرانسپورٹ کے ذریعے کارگو کو منتقل کرتی ہیں۔ اس لیے نیوران کی بقا کے لیے موٹر کمپلیکس بھی ضروری ہیں۔ کائنسین خاندان کائنسین-1 (تاریخی طور پر KIF5c کا نام دیا گیا ہے) اور کائنسین-3 (KIF1A, KIF1B، اور KIF1B ) ممبران [149] سے تشکیل پاتا ہے۔ KIF5c MNs [150] میں افزودہ ہے، اور اس کا جینیاتی خاتمہ MN بیماریوں اور فالج سے منسلک ہے [149,151]۔ یہ حال ہی میں ALS [152] کے روگجنن میں مضمر ہے۔ MTs کے ساتھ اس کے تعامل کی خرابی محوری تنزلی اور اس کے نتیجے میں نیورونل موت کا باعث بنتی ہے [153]۔ KIF5c میں خلل مائٹوکونڈریل ڈائنامکس کی خرابی کا باعث بنتا ہے، جس کے نتیجے میں محرکات پر منحصر نیورونل بقا یا موت واقع ہوتی ہے۔ مزید برآں، KIF5c مائٹوکونڈریل فنکشن کو بہتر بناتا ہے، سیلولر ہیلتھ میں تبدیل ہوتا ہے (نیچے دیکھیں، سیکشن 3.6۔) [42]، اور اس کی ماڈیولیشن کو فروغ مل سکتا ہے۔نیورو پروٹیکشن. پروٹین کے مجموعے، جیسے کہ amyloid-، KIF5a کے استحکام پر نقصان دہ اثر ڈالتے ہیں، جس کی وجہ سے مائٹوکونڈریل حرکت اور اچھی طرح سے کام کرنے میں رکاوٹ پیدا ہوتی ہے [154]۔

ریٹروگریڈ پروٹین بھی استعمال کرتے ہیں۔نیورو پروٹیکشن. وہ ڈائنائنز ہیں اور مختلف پروٹینوں کے ذریعے بنائے گئے ملٹی پروٹین کمپلیکس ہیں، جس میں p150glue (dynactin1/DCNT1) سب سے زیادہ پرچر ذیلی یونٹ ہیں۔ ایک غیر فعال ڈائنیکٹین سبونائٹ 1 (DCTN1) کو ALS چوہوں کے ماڈل کے طور پر استعمال کیا گیا ہے، اور اس کا تغیر ایک خراب محوری نقل و حمل کا سبب بنتا ہے جو چوہوں [155,156] میں ALS نما فینوٹائپ کا باعث بنتا ہے۔ KO چوہے عمر پر منحصر MN موت کو ظاہر کرتے ہیں، جس کے ساتھ آٹوفیجی بلاکیج ہوتا ہے [157]۔ ڈی سی ٹی این 1 کا نیورونل جسم کے اندر آٹوفیجک ویکیولز کی نقل و حمل میں واضح کردار ہے، اور اس کی خرابی دور دراز کے محوروں میں ایمفیزوم جمع ہونے کا سبب بنتی ہے، جس سے AD جیسا فینوٹائپ ہوتا ہے [158]۔ ڈائنین اڈاپٹر راب-انٹریکٹنگ لائسوسومل پروٹین (RILP) آٹوفاگوسم بائیوجنسیس، نقل و حمل میں اہم کردار ادا کرتا ہے اور اس کی روک تھام آٹوفیجک عمل کے جمع ہونے کا سبب بنتی ہے [44]۔ مجموعی طور پر، یہ دیکھا گیا ہے کہ MT dysfunction، kinesin اور dynein aberrant localization کے ساتھ، lysosomal dysfunction کا باعث بنتا ہے، جو AD [159] میں آٹوفاگوسوم جمع اور presynaptic dystrophy کو اکساتا ہے۔ آسٹیو کلاسٹس میں ڈی سی ٹی این 1 کا زیادہ اظہار اپوپٹوٹک موت کو روکتا ہے، یہ تجویز کرتا ہے کہ سیل کی دیگر اقسام اور ٹشوز میں سیلولر موت سے بچنے میں موٹر پروٹین کا بھی کردار ہوتا ہے [43]۔

خلاصہ طور پر، محوری نقل و حمل میں کمی بہت سے نیوروڈیجینریٹو بیماریوں میں اور اعصابی نظام کی چوٹ کے بعد موجود ہے۔ اس خرابی کے نتیجے میں MT ڈھانچے اور/یا مالیکیولر موٹرز میں تبدیلیاں آئیں گی جو محوری نقل و حمل کے لیے درکار ہیں [5]۔ نیوران کے معمول کے کام کے لیے مناسب محوری نقل و حمل اہم ہے، اور اس عمل میں خرابیاں نیورونل کی موت میں معاون ہیں۔ سیل کی نقل و حمل کی مشینری کو بڑھانا، یا تو سائٹوسکلٹن کو مستحکم کرکے یا موٹر پروٹین کی سطح/سرگرمی کو بڑھا کر، نیورون کے اندر ایک درست آٹوفجی فلوکس کو دوبارہ قائم کرکے نیورو پروٹیکٹو ہونے کا مظاہرہ کیا گیا ہے [5]۔

3.6۔ مائٹوکونڈریل ویل فنکشن

نیوران کا کام توانائی اور کیلشیم (Ca2 plus ) توازن پر منحصر ہے، اس لیے مائٹوکونڈریا کی کارکردگی ان کے لیے اہم ہے۔ مائٹوکونڈریا جامد آرگنیلز نہیں ہیں۔ وہ سیل کے اندر شکل، سائز، نمبر، یا لوکلائزیشن کو تبدیل کرتے ہیں اور سیلولر ڈیمانڈ کے مطابق ڈھالنے کے لیے فیوز یا تقسیم کرنے کی صلاحیت رکھتے ہیں۔ وہ الیکٹران ٹرانسپورٹ چین (ETC) کے ذریعے ٹرائی کاربو آکسیلک ایسڈ سائیکل (TCA) اور آکسیڈیٹیو فاسفوریلیشن (OXPHOS) کے ذریعے توانائی پیدا کرتے ہیں۔ OXPHOS ایکٹیویشن ROS کی طرف لے جائے گا، جس میں جسمانی سطحوں [160] اور محوری تخلیق نو [60] پر افعال کی ایک وسیع رینج (تفرق، آٹوفیجی، مدافعتی ردعمل) ہے۔ بہر حال، سپرا فزیولوجیکل سطحوں پر، ROS نقصان دہ ہیں کیونکہ وہ لپڈس، ڈی این اے اور پروٹین کو نقصان پہنچاتے ہیں۔ یہ تبدیلیاں نیوروڈیجینریٹیو بیماریوں، SCI، اور TBI سے منسلک ہیں۔ مائٹوکونڈریا نیورونل بقا کے بنیادی ریگولیٹر کے طور پر بھی کام کرتا ہے ان راستوں میں ان کی شمولیت کے ذریعے جو نیورونل موت کو ماڈیول کرتے ہیں۔

مائٹوکونڈریا کو سیل کے ارد گرد سائٹوسکلٹن، موٹر پروٹینز اور مناسب اڈاپٹرز کے ذریعے منتقل کیا جاتا ہے۔ نیوران میں، وہ بنیادی طور پر MTs پر اڈاپٹر Miro اور Milton/trafficking kinesin-binding protein 1 (TRAK) پروٹین [161] کے ذریعے منتقل کیے جاتے ہیں۔ نیوران کے اندر مائٹوکونڈریا کی یہ حرکتیں Synapses کے اندر زیادہ سے زیادہ تندرستی برقرار رکھنے، توانائی پیدا کرنے، Ca2 plus کو بفر کرنے، وغیرہ کے لیے ضروری ہیں۔ [162]۔ مائٹوکونڈریا اکثر ER کے قریب ہوتا ہے، مائٹوکونڈریا سے وابستہ ER جھلیوں، یا mitochondria سے وابستہ جھلیوں (MAMs) کی تشکیل کرتا ہے۔ یہ جھلی کے مائیکرو ڈومینز الٹنے والے ٹیتھرز ہیں جو مختلف قسم کے سیلولر عمل کو باہم منظم اور متاثر کرتے ہیں، یعنی لپڈز کی ترکیب/ٹرانسپورٹ، Ca2 پلس ڈائنامکس/سگنلنگ، آٹوفیجی، مائٹوکونڈریل شکل اور سائز، اپوپٹوس، اور توانائی کی میٹابولزم [163]۔ AD، PD، اور ALS [164] جیسے اعصابی عوارض میں MAMs کو تبدیل کیا جاتا ہے۔ مائٹوکونڈریا اے ٹی جیز کے مرکز کے طور پر کام کرتا ہے، آٹوفاگوسومز کی تشکیل کے لیے جھلیوں کی فراہمی، اور آٹوفیجک فلوکس [165] کو ماڈیول کرتا ہے۔ مائٹوکونڈریا بھی UPR(mt) کا شکار ہے، اور فعال راستے پر منحصر ہے، یہ کیڑے اور چوہوں میں طویل عمر کے ساتھ منسلک کیا گیا ہے [166]، لیکن اس کا زیادہ فعال ہونا نیوروڈیجنریشن [167] کا سبب بنتا ہے۔

مائٹوکونڈریا کی خرابی مائٹوکونڈریا کی ناکافی تعداد، ان کو ضروری ذیلی ذخائر فراہم کرنے میں ناکامی، یا ان کی الیکٹران ٹرانسپورٹ اور اے ٹی پی ترکیب کی مشینری میں خرابی سے پیدا ہوتی ہے۔ ROS کی اعلی سطح اور متعلقہ رد عمل پرجاتیوں (RNS) کو خارج کرنے والے انزائمز اور اینٹی آکسیڈینٹ [168] کے ذریعہ بے اثر کیا جاسکتا ہے۔ ان انزائمز اور بعض مائٹوکونڈریل سانس کے کمپلیکس میں تبدیلیاں نیوروڈیجینریٹیو بیماریوں جیسے کہ ALS اور PD [169] میں دیکھی گئی ہیں۔ مائٹوکونڈریل نمبر اور فنکشن میں گڑبڑ سیلولر ہومیوسٹاسس کو بری طرح متاثر کرتی ہے اور بیماری کے آغاز کو متحرک کرتی ہے۔ لہذا، خلیات mitochondrial biogenesis اور کلیئرنس کے مخالف عمل کے درمیان ایک متحرک توازن برقرار رکھنے کی کوشش کرتے ہیں۔ غیر فعال مائٹوکونڈریا کا جمع ہونا اور/یا اس کے بایوجنسیس کا نقصان سیل کی موت کو جنم دیتا ہے۔ نیوروڈیجنریشن کو روکنے کے لیے حالیہ علاج کے طریقوں کا مقصد NAD پلس [170]، ایپی جینیٹک مارکس [171]، یا دماغ میں سیروٹونن کے محور کو ماڈیول کر کے مائٹوکونڈریل بائیو جینیسس کو بڑھانا ہے [172]۔ مائٹوفیگی کے ذریعے غیر فعال مائٹوکونڈریل کلیئرنس بھی حاصل کرتی ہے۔نیورو پروٹیکشن. PTEN-Induced kinase 1 (PINK1) کا اوور ایکسپریشن، جو کہ mitophagy کے عمل کو شروع کرنے کے لیے ضروری ہے، HD [45] کے فلائی ماڈل میں نیورونل بقا کو بڑھاتا ہے۔ اس کے علاوہ، NAD پلس ضمیمہ PD [173] کے پنک1-میوٹنٹ ماڈل میں نیوروٹوکسائٹی کو کم کرتا ہے۔

مائٹوکونڈریا فنکشن ROS اور سیلولر اینٹی آکسیڈینٹ ردعمل کے ساتھ کراس لنک ہے۔ اس طرح، ٹرانسکرپشن فیکٹر نیوکلیئر فیکٹر اریتھرایڈ سے ماخوذ فیکٹر 2-متعلقہ فیکٹر 2 (Nrf2) آکسیڈیٹیو تناؤ اور نیوروئنفلامیشن کا مقابلہ کرنے کے لیے سائٹو پروٹیکٹو اور ڈیٹوکسفائنگ جینز کے اظہار کو منظم کرتا ہے، جس کا مقصد اعصابی نقصان کو کم کرنا ہے۔ لہذا، یہ نیوروڈیجینریٹیو بیماریوں [174-176] میں بیماری کے بڑھنے میں تاخیر کرنے کے لئے ایک مؤثر ہیرا پھیری ہوسکتی ہے۔ ROS کے محرک کے تحت، Nrf2 کیلچ جیسے ECH سے وابستہ پروٹین (Keap1) سے الگ ہوجاتا ہے، اس طرح اینٹی آکسیڈینٹ انزائمز [177] کے اظہار کو منظم کرتا ہے۔ یہ بیان کیا گیا ہے کہ Keap1 p62 [178] کے ہر جگہ ثالثی کرتا ہے۔ جب Keap1 کو کم کیا جاتا ہے، p62 خلیوں میں جمع ہوتا ہے اور سائٹوٹوکسٹی کا سبب بنتا ہے، جب کہ اس کا زیادہ اظہار آٹوفجی پاتھ وے کے ذریعے p62 کے انحطاط کو فروغ دیتا ہے۔ دوسری طرف، p62 Nrf2 کو آٹوفجی پاتھ وے کے ذریعے فعال کرتا ہے تاکہ p62-Keap1-Nrf2-اینٹی آکسیڈینٹ ریسپانسیو عنصر (ARE) کا راستہ بن سکے اور ROS [179] کی وجہ سے ہونے والے آکسیڈیٹیو نقصان کا مقابلہ کرے۔ ] مزید یہ کہ، Nrf2 مائٹوکونڈریل بایوجنسیس کے ضابطے میں شامل ریگولیٹری لوپس بناتا ہے۔ Nrf2 peroxisome proliferator-activated receptor-gamma coactivator 1-alpha (PGC-1 ) اور نیوکلیئر ریسپریٹری فیکٹر (NRF1) کے اظہار کو بڑھاتا ہے، جو براہ راست mtDNA ٹرانسکرپشن کے ضابطے میں شامل ہیں۔ آخر میں، Nrf2 PINK1 کے اظہار کو منظم کرتا ہے، جو mitophagy induction [180] میں کلیدی کردار ادا کرتا ہے، تجویز کرتا ہے کہ سیل کی اینٹی آکسیڈینٹ صلاحیت مائٹوکونڈریا کی حالت پر بھی اثر انداز ہوتی ہے۔

نیوروڈیجینریٹو بیماریوں کا تعلق Nrf2 راستے کی روک تھام اور آٹوفیجی کی خرابی دونوں سے ہے، جو ROS، سینسنٹ آرگنیلز اور غلط فولڈ پروٹینز [181,182] کے جمع ہونے کا باعث بنتا ہے۔ نیوروڈیجینریٹو امراض کا تعلق بہت سارے پروٹین ایگریگیٹس اور ROS سے ہوتا ہے، جو p62-Keap1-Nrf2 مثبت تاثرات کے محور کو اکساتا ہے، جو نیوران [183,184] میں ایک حفاظتی طریقہ کار ہے۔ AD جانوروں کے ماڈلز اور AD مریضوں کے دماغوں میں Nrf2 اظہار کم ہے [185]۔ Nrf2 ARE کا پابند جلد ہی بیماری کے بڑھنے کے دوران ہوتا ہے، جو ROS کی پیداوار میں اضافے کے مساوی ہے [186]۔ ROS جنریشن اور A-ثالثی ROS-حوصلہ افزائی زہریلا [187,188] کو کم کرکے Nrf2 نیورو پروٹیکٹینٹس۔ ایچ ڈی میں، مائٹوکونڈریل کمپلیکس II کی خرابی ہے، جس کی وجہ سے ROS [48] میں اضافہ ہوتا ہے۔ ایچ ڈی کے ابتدائی مرحلے میں، این آر ایف 2 ایگونسٹ کے ساتھ علاج کیپ1–این آر ایف 2–اے آر ای کے ذریعے ایسٹروائٹس اور مائیکروگلیا [189] میں اہم سائٹو پروٹیکٹو جینز میں اضافہ ہوتا ہے۔ Astrocytes میں چھوٹے مالیکیولز کے ذریعے Keap1–Nrf2–ARE راستے کو چالو کرنے سے نیورانوں کی غیر ایکزائٹوٹوکسک گلوٹامیٹ زہریلا [46–48] کے خلاف مزاحمت تیز ہوتی ہے۔ تبدیل شدہ مائٹوکونڈریا فنکشن، بائیوجنسیس، اور مائٹوفگی PD میں اہم پیتھولوجیکل خصوصیات ہیں، اور Nrf2 ایک اہم ٹرانسکرپشن عنصر ہے جو مائٹوکونڈریل کوالٹی کنٹرول اور ہومیوسٹاسس کو منظم کرتا ہے [190]۔ PD میں، Nrf2–ARE سسٹم [191,192] کی ایکٹیویشن ہوتی ہے اور اس کی فارماسولوجیکل ایکٹیویشن PD کی ترقی کو روکتی ہے [49,50]۔ Nrf2 ایکٹیویشن ROS اور سیل ڈیتھ کے خلاف حفاظتی کردار ادا کرتی ہے جو سپر آکسائیڈ ڈسمیوٹیز 1 (SOD1) اتپریورتی پروٹین کی وجہ سے ہوتی ہے۔ اس کے علاوہ، astrocyte Nrf2 اوور ایکسپریشن SC MNs کی بقا کو بڑھاتا ہے اور SOD1 ٹرانسجینک چوہوں میں عمر بڑھاتا ہے [51,52]۔ اس کے علاوہ، آٹوفجی کے تناظر میں p62 اور Keap1–Nrf2 راستے کے درمیان کراسسٹالک ROS کو ہٹانے، آکسیڈیٹیو نقصان کو روکنے، اور دماغی اسکیمیا ریپرفیوژن انجری کے دوران ER تناؤ کو ماڈیول کرنے میں اہم کردار ادا کر سکتا ہے [53]۔

آخر میں، مائٹوکونڈریا نیورونل بقا کو چلاتا ہے، کیونکہ وہ اندرونی اور بیرونی موت کے آغاز کو محسوس کرتے ہیں، جو سگنلنگ جھرنوں کو متحرک کرتے ہیں جو مائٹوکونڈریا میں اکٹھے ہوتے ہیں اور پھر ایک یا زیادہ سیل موت کے راستوں میں دوبارہ تبدیل ہو جاتے ہیں جو مختلف قسم کے خلیوں کی موت کا باعث بنتے ہیں (جیسے اندرونی apoptosis) ) [193]۔

AD میں cistanche پلانٹ

4. نظامی ماڈلن کو ہدف بنانا

4.1 کیلوری کی پابندی

کیلورک پابندی (CR) مختلف جانداروں میں عمر بڑھاتی ہے اور کئی اعضاء پر حفاظتی اثرات مرتب کرتی ہے۔ CR پورے حیاتیات کو متاثر کرتا ہے: نظامی ماحول سے لے کر مختلف ذیلی خلوی آبادیوں تک۔ 2010 میں، کرومر اور معاونین نے تجویز کیا کہ CR کے فوائد SIRT1-انحصار آٹوفجی [194] پر منحصر ہیں۔ دوسری طرف، اس بات کی نشاندہی کی گئی ہے کہ CR PD بیماری میں Ghrelin-AMPK محور کے ذریعے نیورو پروٹیکٹو ہے، جس میں AMPK آٹوفجی کا ایک اہم محرک ہے [195]۔ طویل مدتی CR کو برقرار رکھنے کے واضح ناممکن کو دیکھتے ہوئے، ناول CR "mimetics" (CRM) کو دریافت کرنے کے لیے علاج کی دلچسپی پیدا کی گئی، جو کہ حیاتیات میں CR کے جسمانی اثرات کی نقل کرتے ہیں [196]۔ CR اور CR-mimetics دونوں نے آٹوفیجی انڈکشن [197] کے ذریعے علمی فعل کو بہتر بنا کر AD چوہے کے ماڈلز میں افادیت کی جانچ کی ہے، اس لیے وہ نیوروڈیجنریشن کے علاج کے لیے نئے علاج کے راستے ہیں۔

4.2 ورزش

جسمانی ورزش پیتھوفزیولوجیکل حالات جیسے نیوروپیتھک درد کو کم کرنے یا فالج کے ماڈلز میں فعال نتائج کو بہتر بنانے کی صلاحیت کی وجہ سے دلچسپی حاصل کر رہی ہے [198]۔ یہ سوزش کے رد عمل کی روک تھام اور اینٹی آکسیڈینٹ توازن کو بڑھانے کے ذریعہ PD کی ترقی کو بھی سست کرتا ہے [199]۔ یہ بیان کیا گیا ہے کہ ورزش نیوروٹروفک عوامل [200,201] کی endogenous سطح کو بڑھا کر کام کرتی ہے۔ مزید برآں، یہ پٹھوں کے ہارمون کے اخراج کو موڈیلیٹ کرتا ہے، دماغ میں حفاظتی اثرات کو فروغ دیتا ہے، نیوروجنسیس، اور دماغی عمر کو کم کرتا ہے [202]۔ درحقیقت، حال ہی میں یہ بیان کیا گیا ہے کہ ایک ہی ہارمون، ایریسن، ہڈیوں کی تشکیل میں کردار ادا کرتا ہے [203]، جس سے ظاہر ہوتا ہے کہ ورزش پورے جسم پر اثر انداز ہوتی ہے۔

5. موثر نیورو پروٹیکٹنٹ تلاش کرنا: وہاں کیا ہے اور ہم کہاں جاتے ہیں۔

نیوروڈیجینریٹیو بیماریوں کی عام خصوصیات یو پی آر کی غیر درست سرگرمی، آٹوفیجک عمل کا جمع ہونا، مائٹوکونڈریل اچھی طرح سے کام کرنے میں ناکامی، اور دیگر ہیں۔ مجموعی طور پر، وہ نیوران کو مغلوب کریں گے، ان کے انتقال کو اکسائیں گے۔ ایک مؤثر نیورو پروٹیکٹنٹ کو عمر بڑھنے/توہین کے خلاف مکمل لچک کے ساتھ سیل کو بڑھا کر ان میکانزم کو درست کرنا چاہیے۔ ہمیں سیل کے اندر مالیکیولر نیٹ ورک کو مکمل طور پر تبدیل کرنے کی ضرورت ہے، اسے افعال کی مکمل بحالی کی طرف دھکیلنا ہے۔ منظور شدہ ادویات جیسے ALS [204] کے لیے Riluzole، یا کلینیکل ٹرائلز جاری ہیں، جیسے ALS [204] کے لیے Rapamycin، Spermidine، اور AD [205,206] کے لیے DH، ان میں سے صرف ایک انحطاطی عمل کو نشانہ بناتا ہے، اور نیورون اس سے مغلوب ہو جاتا ہے۔ دوسرے اگرچہ ان سے فائدہ مند اثرات مرتب ہو سکتے ہیں، ہم صرف ایک ہدف کے بجائے مختلف مالیکیولر راستوں — ملٹی ٹارگٹ تھراپی — کی توثیق کرنے کے لیے ایک جینیاتی یا فارماسولوجیکل اپروچ تلاش کرنے کی تجویز پیش کرتے ہیں۔

بعض پروٹینوں جیسے SIRT1، BIP، اور/یا ATG5 کا مخصوص حد سے زیادہ اظہار اعصابی چوٹ کے بعد اعصابی بقا کو آسان بناتا ہے اورنیورو پروٹیکشنneurodegenerative بیماریوں میں. وہ بنیادی طور پر UPR یا آٹوفیجی نیٹ ورکس کو ٹھیک بناتے ہیں۔ ٹرانسجینک چوہوں یا وائرل ویکٹرز کے استعمال سے SIRT1 ایکٹیویشن نے مختلف نیوروڈیجینریٹیو بیماریوں جیسے ALS، AD، اور HD [207–209] اور اعصابی چوٹ کے بعد بھی تحفظ کا مظاہرہ کیا [55]۔ SIRT1 deacetylase سرگرمی تحفظ کے مختلف اینڈوجینس میکانزم کی توثیق کرتی ہے: آٹوفیجی، PERK کو کم کرکے UPR کو ماڈیول کرتی ہے، اور ATF6 کلیویج کو بڑھاتی ہے [23,210]، اینٹی اپوپٹوٹک اثرات رکھتی ہے، اور AKT کی سرگرمی کو anoikis کو روکنے کے لیے ماڈیول کرتی ہے [211,212]۔ لہذا، اس کی درست ترمیم سیلولر لچک کو بڑھا سکتی ہے۔ ہمارے حالیہ مطالعے سے، ہم یہ نتیجہ اخذ کرتے ہیں کہ SIRT1 deacetylase سرگرمی کو ماڈیول کرنا مالیکیولر نیٹ ورک کے لیے سیلولر لچک [54,55] حاصل کرنے کے لیے ایک ضروری نوڈ ہے۔ آخر میں، بی آئی پی اوور ایکسپریشن مجموعوں کے خلاف تحفظ فراہم کرتا ہے اور آٹوفجی اور مائٹوفگی [99] کو آمادہ کرتا ہے، اس لیے اس کی ماڈیولیشن مختلف نیورو پروٹیکٹو راستوں کو کلسٹر کرنے کے لیے بھی ایک مؤثر طریقہ ہے۔

6. اختتامی ریمارکس

کے endogenous میکانزم کو فروغ دینانیورو پروٹیکشننیوروڈیجنریٹیو بیماریوں کے علاج یا نیورو ٹراما کے بعد ٹشو ہومیوسٹاسس کو برقرار رکھنے کے لیے دلچسپ علاج کے راستے کھولتا ہے۔ اگرچہ آج کل یہ ایک غیر دریافت شدہ فیلڈ ہے، لیکن یہ کسی ٹھوس پیتھو فزیولوجیکل ہال مارک کو مسدود کرنے سے زیادہ موثر بایومیڈیکل نتائج کو فروغ دے سکتا ہے۔ لہذا، جینیاتی، فارماسولوجیکل، یا سیسٹیمیٹک ماڈیولیشن تھراپیوں کے ذریعہ ان کی توثیق پیتھالوجی کی ترقی میں تاخیر اور فعال بحالی کو بڑھا سکتی ہے۔ بہترین علاج کی حکمت عملی میں مکمل نیٹ ورک کو دوبارہ ماڈل بنانے اور تحفظ حاصل کرنے کے لیے تحفظ کے اینڈوجینس میکانزم کی ٹھوس ترمیم شامل ہونی چاہیے۔

مصنف کی شراکتیں: DR-G. اور SM-M.-A. مخطوطہ لکھا اور CC نے ایک تنقیدی جائزہ لیا۔ تمام مصنفین نے مخطوطہ کے شائع شدہ ورژن کو پڑھا اور اس سے اتفاق کیا ہے۔

فنڈنگ: اس تحقیق کو کوئی بیرونی فنڈنگ ​​نہیں ملی۔

ڈیٹا کی دستیابی کا بیان: اس مطالعے میں کوئی نیا ڈیٹا تخلیق یا تجزیہ نہیں کیا گیا۔ ڈیٹا شیئرنگ اس مضمون پر لاگو نہیں ہے۔

مفادات کے تصادم: مصنفین مفادات کے تصادم کا اعلان نہیں کرتے ہیں۔