ایک ہیٹرولوجس AZD1222 پرائمنگ اور BNT162b2 بوسٹنگ ریگیمین ہومولوجس BNT162b2 ریگیمین کے مقابلے میں زیادہ مؤثر طریقے سے اینٹی باڈیز کو بے اثر کرتی ہے، لیکن میموری ٹی سیلز کو نہیں

خلاصہ

پس منظر: SARS-CoV-2-مخصوص مدافعتی ردعمل کے تقابلی تجزیوں کی ضرورت ہے جو متنوع پرائم بوسٹ رجیموں کے ذریعے حاصل کیے گئے ہیں تاکہ COVID کے کنٹرول کے لیے موثر رجیم قائم کیے جا سکیں-19۔ طریقہ: اس ممکنہ مشاہداتی ہم آہنگی کے مطالعے میں، ہم جنس BNT162b2/BNT162b2 یا AZD162b2/BNT162b2 کے عمر سے مماثل گروپوں میں سپائیک-مخصوص امیونوگلوبلین G (IgG) اور غیر جانبدار اینٹی باڈیز (nAbs) کے ساتھ ساتھ / BNT162b2 ویکسینیشن، اور پہلے جنگلی قسم کے SARS-CoV-2 انفیکشن/ویکسینیشن کا جائزہ لیا گیا۔ نتائج: ویکسین والے گروپوں میں ویکسین کی دوسری خوراک کے بعد اور پہلے انفیکشن/ویکسینیشن گروپ میں پہلی خوراک کے بعد اعلیٰ مدافعتی ردعمل حاصل کیے گئے۔ اینٹی اسپائک IgG اور nAb کے چوٹی ٹائٹرز AZD1222/BNT162b2 ویکسینیشن اور پہلے کے انفیکشن/ویکسینیشن گروپس میں BNT162b2/BNT162b2 یا AZD1222/AZD1222 گروپوں کی نسبت نمایاں طور پر زیادہ تھے۔ تاہم، BNT162b2/BNT162b2 ویکسینیشن گروپ میں انٹرفیرون-سی پیدا کرنے والے CD4 پلس T خلیات کی فریکوئنسی سب سے زیادہ تھی۔ پولی فنکشنل ٹی سیلز کے تجزیے میں بھی اسی طرح کے نتائج دیکھے گئے۔ جب ڈیلٹا ویرینٹ کے خلاف این اے بی اور سی ڈی 4 پلس ٹی سیل ردعمل کا تجزیہ کیا گیا تو، پہلے کے انفیکشن/ویکسینیشن گروپ نے دوسرے ہم جنس یا ہیٹرولوگس ویکسینیشن ریگیمینز کے گروپوں کے مقابلے میں زیادہ ردعمل ظاہر کیا۔ نتیجہ: nAbs مؤثر طریقے سے heterologous AZD1222/BNT162b2 ویکسینیشن کے ساتھ ساتھ پیشگی انفیکشن/ویکسینیشن کے ذریعے حاصل کیے جاتے ہیں، جب کہ اسپائیک کے لیے مخصوص CD4 پلس T-سیل کے ردعمل کو مؤثر طریقے سے ہومولوجس BNT162b2 ویکسینیشن کے ذریعے حاصل کیا جاتا ہے۔ مختلف قسم کی شناخت کرنے والی قوت مدافعت پیشگی انفیکشن/- ویکسینیشن کے ذریعے دیگر ہم جنس یا ہیٹرولوگس ویکسینیشن ریگیمینز کے مقابلے میں زیادہ مؤثر طریقے سے پیدا ہوتی ہے۔

cistanche tubulosa - مدافعتی نظام کو بہتر بنائیں

1. تعارف

سیویئر ایکیوٹ ریسپائریٹری سنڈروم کورونا وائرس 2 (SARS-CoV-2) دسمبر 2019 میں اپنے ظہور کے بعد سے عالمی سطح پر پھیل رہا ہے، اور کورونا وائرس بیماری 2019 (COVID-19) کے خلاف موثر ویکسینز کی تیاری میں تیزی آئی ہے۔ ] اس کوشش کی کامیابی نسبتاً تیزی سے دیکھی گئی، اور متعدد ویکسینز نے سپائیک (S) پروٹین کو بطور ویکسین اینٹیجن استعمال کرتے ہوئے علامتی COVID-19 کو روکنے میں کامیابی سے حفاظت اور کارکردگی کا مظاہرہ کیا۔ خاص طور پر، mRNA پر مبنی ویکسین BNT162b2 (Comirnaty، Pfifizer-BioNTech) اور اڈینو وائرس ویکٹر پر مبنی ویکسین AZD1222 (Vaxzevria، AstraZeneca) کو ابتدائی طور پر منظور کیا گیا تھا اور بڑے پیمانے پر دو خوراکوں کے پرائم مین بوسٹ کے طور پر استعمال کیا گیا تھا۔ BNT162b2 کی دو خوراکوں میں 95 فیصد (95 فیصد اعتماد کا وقفہ [CI]، 90–98 فیصد) علامتی COVID-19 [2] کے خلاف افادیت تھی، اور AZD1222 کی دو خوراکوں میں 70 فیصد (95 فیصد CI، 55–81) فیصد ) افادیت [3]۔ دلچسپ بات یہ ہے کہ لائسنس یافتہ COVID-19 ویکسینز کی ہیٹرولوگس پرائم بوسٹ ریگیمینز نے کافی دلچسپی حاصل کی اور بعد میں مدافعتی اور حفاظت کے حوالے سے ناکافی ڈیٹا کے باوجود کئی ممالک میں ان کا آغاز کیا گیا۔ AZD1222 حوصلہ افزائی مضبوط S-specific immunoglobulin G (IgG) اینٹی باڈی (Ab) ٹائٹرز، اینٹی باڈی (nAb) ردعمل کو بے اثر کرنے، اور انٹرفیرون-c پلس (IFN-c پلس) T خلیات [4 ،5]۔ تاہم، کچھ مطالعات نے ہم جنس BNT162b2/BNT162b2 ویکسینیشن [6–8] کے مقابلے ہیٹرولوگس AZD1222/BNT162b2 ویکسینیشن کی افادیت کا جائزہ لیا ہے، اور ان مطالعات میں S-مخصوص T-cell ردعمل کی جامع تشخیص کا فقدان تھا۔ اس کے مطابق، آیا ہیٹرولوگس AZD1222/BNT162b2 ویکسینیشن کے نتیجے میں قوی کراس ویریئنٹ nAb یا T-سیل ردعمل واضح نہیں ہے۔ ہیٹرولوگس پرائمنگ بوسٹنگ کی ایک اور مثال ان افراد میں دیکھی جا سکتی ہے جو SARS-CoV-2 سے متاثر ہوئے تھے اور بعد میں وائرس کے خلاف ویکسین لگائی گئی تھی۔ متعدد مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ مخصوص پابند Ab اور nAb کی سطحیں ان افراد میں اعلی سطح پر پائی جاتی ہیں جن میں پہلے انفیکشن اور ویکسینیشن ہوتی ہے، حالانکہ کوئی تقابلی تجزیہ نہیں کیا گیا تھا [9,10]۔ پہلے سے SARS-CoV-2 انفیکشن والے صحت کی دیکھ بھال کرنے والے کارکنوں میں mRNA ویکسین کی ایک خوراک کے جواب میں ان لوگوں کے مقابلے میں زیادہ Ab titers ہوتے ہیں جو پہلے متاثر نہیں ہوئے تھے [11]۔ مزید برآں، پہلے سے انفیکشن والے افراد بغیر کسی خوراک کے پرائم ڈوز کے بعد S-مخصوص T-cell کے بہتر ردعمل اور Ab-secreting میموری Bcell کے ردعمل ظاہر کرتے ہیں [12]۔ موجودہ مطالعے میں، ہم نے S-specific بائنڈنگ Ab، nAb، اور S-specific- CDs4 Plus کے ساتھ ساتھ موازنہ کے ساتھ ایک ممکنہ مشاہداتی گروہ میں ہومولوجس اور ہیٹرولوگس پرائم بوسٹ ریگیمینز کی مزاحیہ اور سیلولر امیونوجنیسیٹی کا جامع طور پر جائزہ لیا۔ . ہم نے ان شرکاء میں مدافعتی نتائج کا بھی جائزہ لیا جو جنگلی قسم کے SARS-CoV-2 سے متاثر ہوئے تھے اور جنہوں نے COVID-19 ویکسین حاصل کی تھیں تاکہ یہ معلوم کیا جا سکے کہ آیا پہلے انفیکشن اور ویکسینیشن مؤثر طریقے سے ڈیلٹا ویرینٹ کے خلاف مدافعتی ردعمل پیدا کرتی ہے۔

مردوں کے لئے cistanche فوائد - مدافعتی نظام کو مضبوط

2. طریقے

2.1 مطالعہ ڈیزائن

COVID-19 ویکسینیشن کے لیے مدافعتی ردعمل کا مطالعہ کرنے کے لیے مارچ 2021 میں ایک ملٹی سینٹر ممکنہ گروپ قائم کیا گیا تھا۔ اس گروپ کے شرکاء کو صحت کی دیکھ بھال کرنے والے کارکنوں میں رضاکارانہ طور پر بھرتی کیا گیا تھا اور ابتدائی طور پر BNT162b2 کی دو خوراکیں 3-ہفتے کے وقفے پر یا AZD1222 ایک 12-ہفتے کے وقفے پر حاصل کرنے کے لیے مقرر کیا گیا تھا۔ تاہم، AZD1222 کے ساتھ اہم ٹیکے لگائے گئے افراد کے ایک حصے نے مئی اور جون 2021 کے درمیان BNT162b2 کی بوسٹر خوراک حاصل کی اور انہیں AZD1222/BNT162b2 ویکسینیشن گروپ میں شامل کیا گیا۔ کوہورٹ کے شرکاء میں، وہ لوگ جنہیں پہلے جنگلی قسم کا SARSCoV-2 انفیکشن تھا اور انہیں BNT162b2 یا AZD1222 موصول ہوا تھا، ان کو پہلے کے انفیکشن/ویکسینیشن گروپ کے طور پر شامل کیا گیا تھا۔ اس مطالعہ میں تجزیہ کردہ تمام ویکسین وصول کنندگان گروپوں کے درمیان عمر کے مطابق تھے۔ پیریفرل خون کے نمونے کوہورٹ کے تمام شرکاء سے ہر ٹائم پوائنٹ (T) پر جمع کیے گئے تھے: پہلی ویکسین کی خوراک سے پہلے اور 3 ہفتے بعد (بالترتیب T1 اور T2)، 1st BNT162b2 خوراک کے 5 ہفتے بعد، یا 1st کے 11 ہفتے بعد۔ AZD1222 خوراک (T3)، اور پہلی ویکسین کی خوراک (T4) کے 14 ہفتے بعد۔ اسٹڈی پروٹوکول کی ایک اسکیمیٹک نمائندگی تصویر 1 میں فراہم کی گئی ہے۔ موازنہ کے لیے، SARSCoV-2 ڈیلٹا ویرینٹ سے متاثرہ غیر ویکسین شدہ مریضوں سے صحت یاب ہونے والے نمونے حاصل کیے گئے تھے جس کی تصدیق ریئل ٹائم ریورس ٹرانسکرپشن پولیمریز چین ری ایکشن کے ذریعے سیگین آلپلیکس { {38}}nCoV Assay کٹ (Seegene, Korea) اور Illumina BTSeq SARS-CoV-2 مکمل جینوم سیکوینسنگ کٹ (Celemics Inc, Korea) MiSeq سیکوینسر (150-bp پیئرڈ اینڈ موڈ؛ ایلومینا، سان ڈیاگو، CA، USA)۔ ڈیلٹا ویرینٹ کی تصدیق کے لیے IGV 2.10 سافٹ ویئر کا استعمال کرتے ہوئے BTseq کے ذریعے حاصل کردہ بنیادی ترتیب کا موازنہ NCBI حوالہ ترتیب NC_045512.2 سے کیا گیا۔ اس مطالعہ کو ہر شریک انسٹی ٹیوٹ کے ادارہ جاتی جائزہ بورڈ نے منظور کیا تھا اور ہیلسنکی کے اعلامیہ کے اصولوں کے مطابق کیا گیا تھا۔ تمام شرکاء نے اندراج سے پہلے تحریری باخبر رضامندی فراہم کی۔

2.2 مطالعہ کے شرکاء

اس گروہ میں 22 شرکاء شامل تھے جنہوں نے ہم جنس BNT162b2/BNT162b2 ویکسینیشن حاصل کی (مطلب عمر، 38۔{6}} سال؛ 31.8 فیصد مرد)، 20 شرکاء جنہوں نے ہم جنس AZD1222/AZD1222 ویکسینیشن حاصل کی (یعنی عمر 93 فیصد، 93 فیصد مرد)۔ ، اور 9 شرکاء جنہوں نے heterologous AZD1222/ BNT162b2 ویکسینیشن حاصل کی (مطلب عمر، 38.2 سال؛ 33.3 فیصد مرد)۔ جنگلی قسم کے SARS-CoV-2 انفیکشن والے 11 شرکاء میں سے (مطلب عمر، 38.5 سال؛ 27.3 فیصد مرد)، 2 اور 9 کو بالترتیب BNT162b2/BNT162b2 اور AZD1222/AZD1222 کے ساتھ ٹیکے لگائے گئے۔ مختلف ٹیکے لگائے گئے گروپوں کی آبادیات ضمنی جدول 2 میں فراہم کی گئی ہیں۔ جنگلی قسم کے SARS-CoV-2 انفیکشن والے تمام شرکاء کو غیر علامتی یا ہلکے COVID-19 کا تجربہ ہوا، اور ان میں سے 3 کو نمونیا تھا۔ COVID-19 کی تصدیق سے لے کر پہلی ویکسینیشن تک کا درمیانی وقت 121.5 (انٹرکوارٹائل رینج [IQR]، 102.3–252.5) ​​دن تھا۔ پہلے جنگلی قسم کے SARS-CoV-2 انفیکشن اور ویکسینیشن والے شرکاء کی آبادیات ضمنی جدول 1 میں فراہم کی گئی ہیں۔ صحت یابی کے نمونے SARS سے متاثر 17 مریضوں (جس کی اوسط عمر، 53 سال؛ 52.9 فیصد مرد) سے حاصل کیے گئے تھے۔ -CoV-2 ڈیلٹا ویرینٹ اور اعتدال پسند سے لے کر نازک COVID-19 کے لیے ہسپتال میں داخل (اعتدال پسند، 17.6 فیصد؛ شدید، 35.3 فیصد؛ شدید بیمار، 47.1 فیصد)۔ COVID{70} سے متعلقہ علامات کے آغاز سے نمونے لینے تک کا درمیانی وقت 24 (IQR، 22–32) دن تھا۔ SARS-CoV-2 ڈیلٹا کنویلیسنٹ شرکاء کی ڈیموگرافکس ضمنی جدول 2 اور جدول 3 میں فراہم کی گئی ہیں۔

2.3 بائنڈنگ اینٹی باڈیز

SARS-CoV-2 S-specific binding Abs کا تجزیہ تجارتی امیونواسے کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا۔ Elecsys اینٹی ایس پروٹین پرکھ (Roche Diagnostics, Germany) ایک الیکٹرو کیمیلومینیسینس امیونوسے ہے جو کوباس e411 تجزیہ کار (Roche Diagnostics، جرمنی) پر SARS-CoV-2 مخصوص اینٹی باڈیز کا پتہ لگانے کے لیے استعمال کیا جاتا ہے، جس کی پیمائش کی حد { سے ہے {8}}.4 U/mL سے 250 U/mL (2500 U/mL تک آن بورڈ 1:10 dilution کے ساتھ، اور 12,500 U/mL تک آن بورڈ 1:50 dilution کے ساتھ) ایس پروٹین کے ریکومبیننٹ ریسیپٹر بائنڈنگ ڈومین کو ڈبل اینٹیجن سینڈوچ اصول کے ساتھ استعمال کیا گیا تھا۔ ریجنٹ میں موجود اینٹی جینز بنیادی طور پر اینٹی SARSCoV-2 IgG کو پکڑتے ہیں۔ Elecsys اینٹی نیوکلیو کیپسڈ پروٹین پرکھ (Roche Diagnostics، Germany) کا استعمال سابقہ ​​SARS-CoV-2 انفیکشن کا پتہ لگانے کے لیے کیا گیا تھا، جس کا کٹ آف انڈیکس 1.0 تھا۔

cistanche سپلیمنٹ کے فوائد - قوت مدافعت میں اضافہ

2.4 تختی میں کمی کو غیر جانبدار کرنے کا پرکھ

جنگلی قسم کے SARS-CoV- 2 وائرسز (BetaCoV/Korea/KCDC03/2020) اور ڈیلٹا ویرینٹ سٹرین YS117 (GenBank الحاق نمبر MZ798798 اور GISAID نمبر ایکسیس {8}}ISL_3411836) پلازما کے نمونوں کا استعمال کرتے ہوئے انجام دیا گیا۔ یہ وائرس سیول، کوریا میں ایویسن بایومیڈیکل ریسرچ سینٹر میں بائیو سیفٹی لیول 3 لیبارٹری میں ویرو ای 6 سیلز پر اگایا گیا تھا۔ غیر فعال پلازما کے نمونے (135 lL) غیر فعال پلازما کے نمونوں کو 2- گنا سیریلی طور پر پتلا کیا گیا (1:40 سے 1:1280) اور 50 فیصد ٹشو کلچر متعدی خوراک (TCID50) کے 100 گنا برابر حجم میں شامل کیا گیا۔ وائرس. 100 بار TCID50 پر مشتمل الگ تھلگ کنویں کی پلیٹوں میں 60 منٹ کے لیے 37 C پر انکیوبیٹ کیے گئے تھے۔ وائرس پلازما کے مرکب کو CO2 انکیوبیٹر میں 37 C پر 60 منٹ تک انکیوبیٹ کیا گیا تھا۔ اس کے بعد وائرس پلازما کے مرکب کو ویرو ای 6 سیلز میں شامل کیا گیا جس میں 1x105 سیلز/کنویں کے ساتھ کنویں پلیٹ میں سیڈ کیا گیا اور 37 C پر 1 گھنٹے تک انکیوبیٹ کیا گیا۔ DMEM میں 2 فیصد فیٹل بوائن سیرم (FBS) پر مشتمل اوورلے میڈیا اور 1 فیصد آگر کو E6 خلیوں میں شامل کیا گیا اور CO2 انکیوبیٹر میں 37 C میں 3 دن تک انکیوبیٹ کیا گیا۔ ایک تختی بننے کے بعد، 10 فیصد فارملڈہائڈ محلول اور 0.33 فیصد غیر جانبدار سرخ فاسفیٹ بفرڈ نمکین (PBS) کو سیل کلچر کی تہہ کو ٹھیک کرنے اور داغدار کرنے کے لیے استعمال کیا گیا۔ ہر نمونے کو غیر جانبدار بنانے کا تعین کسی قابل مشاہدہ سائٹوپیتھک اثر کے بغیر سب سے زیادہ پلازما کم کرنے والے کنویں کی نشاندہی کرکے کیا گیا تھا۔ 50 فیصد نیوٹرلائزیشن ڈوز (ND50) کا اظہار پلازما کی باہمی کمزوری کے طور پر کیا گیا، جس کے نتیجے میں مثبت وائرس کنٹرول کے مقابلے میں تختی کی تعداد میں 50 فیصد کمی واقع ہوئی۔ Spearman – Kärber طریقہ ND50 ٹائٹرز کا حساب لگانے کے لیے استعمال کیا گیا تھا۔ ڈبلیو ایچ او کے بین الاقوامی معیار کے سیرا (NIBSC 20–136؛ nAb ٹائٹر: 1000 IU/mL) کے مقابلے میں، nAb ٹائٹرز کو بین الاقوامی یونٹس فی ملی لیٹر (IU/mL) میں تبدیل کیا گیا۔

تصویر 1. ویکسین وصول کرنے والے گروہوں کی منصوبہ بندی کی نمائندگی۔ SARS-CoV-2 اسپائیک مخصوص بائنڈنگ اینٹی باڈیز، اینٹی باڈیز کو غیرجانبدار کرنے، اور COVID-19 کے لیے ویکسین لگائے گئے افراد کے پیریفرل خون کے نمونوں میں ٹی سیل کے ردعمل کا پتہ لگانے کے لیے مطالعہ کی اسکیم۔ مطالعہ میں BNT162b2/BNT162b2 (n=22)، AZD1222/AZD1222 (n=20)، AZD1222/BNT162b2 (n=9)، اور سابقہ ​​جنگلی قسم کے SARS-CoV{20 شامل ہیں }} انفیکشن/ویکسینیشن (n=11) گروپس۔ پہلے جنگلی قسم کے SARS-CoV-2 انفیکشن/ویکسینیشن میں، 2 اور 9 کو بالترتیب BNT162b2/BNT162b2 اور AZD1222/AZD1222 کے ساتھ ٹیکے لگائے گئے تھے۔ SARS-CoV-2 انفیکشن کی تاریخ کی تصدیق ایک مثبت اینٹی SARS-CoV-2 نیوکلیو کیپسڈ اینٹی باڈی ٹیسٹ سے ہوئی۔ ٹی، ٹائم پوائنٹ؛ ہفتے، ہفتے.

2.5 ٹی سیل اسیسز

پیریفرل بلڈ مونو نیوکلیئر سیلز (PBMCs) کو لیوکوسیپ ٹیوبوں (گرینر بائیو ون) کا استعمال کرتے ہوئے کثافت گریڈینٹ سینٹرفیوگریشن کے ذریعے الگ تھلگ کیا گیا تھا جس میں لیمفوسائٹ سیپریشن میڈیم تھا۔ بریک آف کے ساتھ 15 منٹ کے لیے 800 گرام پر سینٹرفیوگریشن کے بعد، PBMCs پر مشتمل افزودہ سیل فریکشن کی کٹائی کی گئی اور 20 ملی لیٹر PBS سے دھویا گیا۔ 10 منٹ کے لیے 300 گرام پر سینٹرفیوگریشن کے بعد، سیل گولی کو گنتی کے لیے 10 ملی لیٹر پی بی ایس میں دوبارہ معطل کر دیا گیا۔ 10 منٹ کے لیے 300 گرام پر سینٹرفیوگریشن کے بعد، استعمال تک سیلز کو FBS میں 10 فیصد ڈائمتھائل سلفوکسائیڈ کے ساتھ 180 C پر کریوپریزر کیا گیا۔ IFN-c، interleukin-2 (IL-2)، اور ٹیومر نیکروسس فیکٹر (TNF) کے انٹرا سیلولر سائٹوکائن سٹیننگ (ICS) کے لیے، ہم نے 11 سے اوور لیپنگ 15-میر پیپٹائڈس کے پیپٹائڈ پولز کا استعمال کیا۔ SARS-CoV-2 ووہان ایس پروٹین (AA 304–338, 421–475, 492–519, 683–707, 741–770, 785–802, اور 885–173) کے مدافعتی حصوں کو ڈھانپنے والے امینو ایسڈز بائیوٹیک)۔ ووہان اور ڈیلٹا تناؤ کے خلاف ٹی سیل ردعمل کا موازنہ کرنے کے لیے، ہم نے ایس پیپٹائڈ پولز کے دو مختلف سیٹ استعمال کیے جن میں ووہان اور ڈیلٹا (B.1.617.2 نسب) تناؤ (Miltenyi Biotec) کے درمیان S تسلسل کے غیر محفوظ علاقوں پر مشتمل ہے۔ PBMCs کو پگھلانے اور انہیں رات بھر آرام کرنے کے بعد، 1  106 PBMCs کو 1 mg/mL کے آخری ارتکاز میں پیپٹائڈ پولز اور اینٹی ہیومن CD28/CD49d (1 mg/mL؛ BD بایو سائنسز) کے ساتھ 1 گھنٹے کے لیے متحرک کیا گیا۔ {45}}RPMI میں اچھی پلیٹ-1640 میڈیا جس میں 1 فیصد پینسلن – سٹریپٹومائسن، 2 ایم ایم ایل-گلوٹامین، اور 10 فیصد ایف بی ایس ہوتا ہے۔ 5 فیصد CO2 میں 37 C پر brefeldin A اور monensin (BD Biosciences) کے اضافے کے بعد PBMC کلچر کو مزید 5 گھنٹے تک انکیوبیٹ کیا گیا۔ محرک کے بعد، خلیوں کو PBS سے دھویا گیا اور کمرے کے درجہ حرارت پر 20 منٹ کے لیے Live/Dead-Aqua (Invitrogen) سے داغ دیا گیا، اس کے بعد کمرے کے درجہ حرارت پر 20 منٹ کے لیے سطح Abs کا کاک ٹیل، بشمول اینٹی CD14- BV510، اینٹی سی ڈی19-BV510، اینٹی سی ڈی4- BV650، اینٹی سی ڈی3-BV786، اور اینٹی سی ڈی8-APC-Cy7 (BD بایو سائنس)۔ سیلز کو Foxp3/Transcription Factor Staining Buffer Set (eBioscience) کا استعمال کرتے ہوئے طے کیا گیا تھا اور پھر انٹرا سیلولر Abs کے کاک ٹیل کے ساتھ داغ دیا گیا تھا، بشمول اینٹی TNF-FITC، اینٹی IL-2-PE (eBioscience)، اور اینٹی بائیو سائنس۔ IFN-c-APC (BD Biosciences) کمرے کے درجہ حرارت پر 20 منٹ کے لیے۔ داغ لگنے کے مکمل ہونے پر، خلیوں کا تجزیہ FACSDiva (BD بایوسینسز) کے ساتھ LSR II کے آلے پر کیا گیا، اور FlowJo سافٹ ویئر (FlowJo LLC) میں ڈیٹا کا تجزیہ کیا گیا۔

cistanche پلانٹ میں مدافعتی نظام میں اضافہ

2.6۔ شماریاتی تجزیہ

لکیری پیمانے پر تیار کردہ ڈیٹا کو اوسط ± معیاری انحراف کے طور پر ظاہر کیا گیا تھا۔ لوگارتھمک پیمانوں میں پلاٹ کردہ ڈیٹا کو جیومیٹرک اوسط ± جیومیٹرک معیاری انحراف کے طور پر ظاہر کیا گیا تھا۔ Mann–Whitney U یا Wilcoxon ٹیسٹ بالترتیب غیر جوڑا یا جوڑا موازنہ کے لیے لگائے گئے تھے۔ اعداد و شمار کے تجزیوں کو {{0}}ٹیلڈ کیا گیا، P < 0.05 کے ساتھ اہم سمجھا گیا۔ تمام تجزیے R سٹوڈیو یا GraphPad Prism v9.0 میں کیے گئے تھے۔

3. نتائج

3.1 مدافعتی ردعمل کی حرکیات مختلف ویکسینیشن ریگیمینز کے ذریعے حاصل کی گئی ہیں۔

سب سے پہلے، ہم نے مختلف رجیموں کے ساتھ ویکسینیشن کے بعد اینٹی ایس آئی جی جی ٹائٹرز کی جانچ کی۔ جیسا کہ توقع کی گئی ہے، پہلی خوراک نے اینٹی ایس آئی جی جی ٹائٹرز (T2) میں نمایاں اضافہ کیا، اور دوسری خوراک نے ہومولوجس BNT162b2/BNT162b2 (T3) اور AZD1222/AZD1222 ویکسینیشن (T4) اور ہیٹرولوگس/AZD2222 میں اینٹی ایس آئی جی جی ٹائٹرز میں نمایاں اضافہ کیا۔ BNT162b2 ویکسینیشن (T4) گروپس (تصویر 2A)۔ پہلے کے انفیکشن/ویکسینیشن گروپ میں، پہلی خوراک نے اینٹی ایس آئی جی جی ٹائٹرز (T3) کو زیادہ سے زیادہ بڑھایا، لیکن دوسری خوراک نے اینٹی ایس آئی جی جی ٹائٹرز (T4) میں مزید اضافہ نہیں کیا۔ ہم نے SARSCoV-2 ووہان جنگلی قسم کے ایس پروٹین کی ترتیب کو ڈھکنے والے پیپٹائڈ پولز کے ساتھ براہ راست سابق ویوو محرک کے بعد S-مخصوص CD4 پلس T-سیل ردعمل کا بھی جائزہ لیا۔ ICS کی بنیاد پر، پہلی خوراک نے CD4 پلس T خلیات کے درمیان IFN-c پیدا کرنے والے خلیوں کی فریکوئنسی میں نمایاں اضافہ کیا، اور دوسری خوراک نے BNT162b2/BNT162b2 (T3) اور AZD1222/BNT162b2 ویکسینیشن (T4) گروپوں میں تعدد میں مزید نمایاں اضافہ کیا۔ (تصویر 2 بی)۔ AZD1222/AZD1222 اور پہلے کے انفیکشن/ویکسینیشن گروپس میں، پہلی خوراک نے CD4 پلس T خلیوں کے درمیان IFN-c پلس سیلز کی فریکوئنسی میں نمایاں اضافہ کیا، لیکن دوسری خوراک نے تعدد میں مزید اضافہ نہیں کیا۔

3.2 مختلف طرز عمل کے درمیان Ab titers کا موازنہ

اگلا، ہم نے مختلف ویکسینیشن رجیموں میں بائنڈنگ Ab کے چوٹی ٹائٹرز کا موازنہ کیا۔ چوٹی ٹائٹرز کے طور پر، ہم نے BNT162b2/BNT162b2، AZD1222/AZD1222، اور AZD1222/BNT162b2 ویکسینیشن گروپس میں دوسری خوراک کے بعد اور پہلے انفیکشن/ویکسینیشن گروپ میں پہلی خوراک کے بعد اینٹی ایس آئی جی جی ٹائٹرز کا انتخاب کیا۔ اینٹی ایس آئی جی جی کے چوٹی ٹائٹرز AZD1222/BNT162b2 ویکسینیشن گروپ میں BNT162b2/BNT162b2 یا AZD1222/AZD1222 ویکسینیشن گروپس (تصویر 3A) کے مقابلے میں نمایاں طور پر زیادہ تھے۔ اسی طرح، BNT162b2/BNT162b2 یا AZD1222/AZD1222 ویکسینیشن گروپوں کے مقابلے میں پہلے کے انفیکشن/ویکسینیشن گروپ میں اینٹی ایس آئی جی جی کے چوٹی کے ٹائٹرز نمایاں طور پر زیادہ تھے۔ AZD1222/BNT162b2 اور پہلے کے انفیکشن/- ویکسینیشن گروپوں کے درمیان اینٹی ایس آئی جی جی ٹائٹرز میں کوئی فرق نہیں تھا۔ ہم نے nAb ٹائٹرز کا بھی پِیک ٹائم پوائنٹس پر جائزہ لیا: BNT162b2/BNT162b2، AZD1222/AZD1222، اور AZD1222/BNT162b2 ویکسینیشن گروپس میں دوسری خوراک کے بعد اور پہلے انفیکشن/ویکسینیشن گروپ میں پہلی خوراک کے بعد۔ قابل ذکر بات یہ ہے کہ AZD1222/BNT162b2 ویکسینیشن گروپ میں nAb ٹائٹرز BNT162b2/BNT162b2 یا AZD1222/AZD1222 ویکسینیشن گروپس (تصویر 3B) کے مقابلے میں نمایاں طور پر زیادہ تھے۔ اس کے علاوہ، nAb ٹائٹرز BNT162b2/BNT162b2 یا AZD1222/AZD1222 ویکسینیشن گروپوں کی نسبت پہلے کے انفیکشن/ویکسینیشن گروپ میں نمایاں طور پر زیادہ تھے۔ AZD1222/BNT162b2 اور پہلے کے انفیکشن/ویکسینیشن گروپس کے درمیان nAb ٹائٹرز میں کوئی فرق نہیں تھا۔ ویکسینیشن کے متنوع نظاموں کے ذریعے حاصل ہونے والے مزاحیہ ردعمل کی سطح کو فیصد کی درجہ بندی کی بنیاد پر مضبوط، اعتدال پسند، اور کوئی بھی/کمزور جواب دہندگان میں تقسیم نہیں کیا گیا۔ مضبوط جواب دہندگان کا تناسب پہلے کے انفیکشن/ویکسینیشن گروپ میں سب سے زیادہ تھا، اس کے بعد AZD1222/BNT162b2 ویکسینیشن گروپ اینٹی S IgG (تصویر 3C) اور nAb (تصویر 3D) کے تجزیہ سے متعلق تھا۔ ایک ساتھ مل کر، یہ نتائج بتاتے ہیں کہ ہیٹرولوگس پرائمنگ اور بوسٹنگ، بشمول AZD1222/BNT162b2 ویکسینیشن اور پیشگی انفیکشن/ویکسینیشن، ہوموولوجس پرائمنگ اور بوسٹنگ کے مقابلے مزاحیہ ردعمل پیدا کرنے میں زیادہ کارگر ہے۔

3.3 مختلف طرز عمل کے درمیان S- مخصوص CD4 پلس T- سیل ردعمل کا موازنہ

ہم نے مختلف ویکسینیشن ریگیمینز کے درمیان S-مخصوص CD4 پلس T-سیل کے ردعمل کا بھی پیک ٹائم پوائنٹس پر موازنہ کیا: BNT162b2/BNT162b2 میں دوسری خوراک کے بعد، AZD1222/AZD1222، اور AZD1222/BNT162b2 ویکسینیشن گروپوں میں اور پہلی خوراک کے بعد۔ انفیکشن / ویکسینیشن گروپ اینٹی ایس آئی جی جی اور این اے بی ٹائٹرز کے برعکس، سی ڈی 4 پلس ٹی سیلز کے درمیان IFN-c پلس سیلز کی فریکوئنسی BNT162b2/BNT162b2 ویکسینیشن گروپ (تصویر 4A) میں سب سے زیادہ تھی۔ BNT162b2/BNT162b2 ویکسینیشن گروپ میں مضبوط جواب دہندگان کا تناسب بھی سب سے زیادہ تھا، اس کے بعد پہلے انفیکشن/ویکسینیشن گروپ (تصویر 4B)۔ یہ نتائج ظاہر کرتے ہیں کہ BNT162b2 کے دوسرے ہم جنس فروغ کے ساتھ حفاظتی ٹیکوں سے میموری ٹی سیل کے ردعمل کو دوسری ہیٹرولوگس بوسٹ ویکسینیشن یا قدرتی SARS-CoV-2 انفیکشن کے بعد پہلی خوراک کی ویکسینیشن کے مقابلے میں زیادہ مؤثر طریقے سے حاصل ہوتا ہے۔ اس کے برعکس، heterologous prime-boost regimens میں مزاحیہ مدافعتی ردعمل کی اعلی سطح پیدا ہونے کا امکان زیادہ ہوتا ہے۔ ہم نے پولی فنکشنل CD4 پلس T خلیوں کی نسبتہ تعدد کا بھی تجزیہ کیا جو بیک وقت متعدد سائٹوکائنز (یعنی IFN-c، IL-2، ​​اور/یا TNF) تیار کرتے ہیں۔ BNT162b2/BNT162b2 ویکسینیشن گروپ نے AZD1222/AZD1222 یا AZD1222/BNT162b2 vaccination گروپس (AZD1222/BNT162b2 vaccination گروپس) کے مقابلے S-مخصوص CD4 پلس T خلیوں میں 2 سائٹوکائنز پیدا کرنے والے پولی فنکشنل سیلز کی نمایاں طور پر زیادہ تعدد کی نمائش کی۔ BNT162b2/BNT162b2 ویکسینیشن اور پہلے کے انفیکشن/ویکسینیشن گروپوں کے درمیان تعدد میں کوئی فرق نہیں تھا۔ پولی فنکشنل سیلز کی فریکوئنسی AZD1222/BNT162b2 ویکسینیشن گروپ میں AZD1222/AZD1222 ویکسینیشن گروپ کے مقابلے میں نمایاں طور پر زیادہ تھی۔ S اوورلیپنگ پیپٹائڈ پولز کے جواب میں سائٹوکائن کی پیداوار کے لحاظ سے سنگل، ڈبل، اور ٹرپل پازیٹو CD4 پلس T سیلز کی نمائندگی کرنے والے پائی گراف نے بھی BNT162b2/BNT162b2 ویکسینیشن میں ڈبل یا ٹرپل پازیٹو سیلز کی نسبتاً زیادہ تعدد کی نشاندہی کی اور اس سے پہلے انفیکشن/- ویکسینیشن گروپس (تصویر 4D)۔

3.4 مختلف رجیموں میں ڈیلٹا ویرینٹ کے خلاف مدافعتی ردعمل

آخر میں، ہم نے ڈیلٹا ویرینٹ کے خلاف مدافعتی ردعمل کا تجزیہ کیا۔ اس تجزیے میں، ہم نے مقابلے کے لیے ایسے افراد کو شامل کیا جو SARS-CoV-2 ڈیلٹا انفیکشن سے صحت یاب ہوئے تھے۔ ڈیلٹا مختلف قسم کے مخصوص nAb ٹائٹرز پہلے کے انفیکشن/ویکسینیشن گروپ میں BNT162b2/BNT162b2، AZD1222/AZD1222، یا AZD1222/BNT162b2 ویکسینیشن گروپوں کے مقابلے میں نمایاں طور پر زیادہ تھے، اور یہ ڈیلٹا 5 کے انفرادی افراد سے بھی زیادہ تھے۔ . ہم نے ڈیلٹا ویرینٹ کے ایس پروٹین کے خلاف سی ڈی 4 پلس ٹی سیل ردعمل کی بھی جانچ کی۔ اس تجزیے میں، ہم نے ووہان اور ڈیلٹا سٹرین کے درمیان S تسلسل کے غیر محفوظ علاقوں پر مشتمل ایس پیپٹائڈ پول کے دو مختلف سیٹوں کا استعمال کرتے ہوئے براہ راست ایکس ویوو محرک کے بعد IFN-c کا ICS کیا اور ڈیلٹا مخصوص IFN-c پلس کی فریکوئنسی کے تناسب کا حساب لگایا۔ ووہان S-مخصوص IFN-c پلس سیلز کی فریکوئنسی تک سیلز۔ جیسا کہ توقع کی گئی تھی، ڈیلٹا صحت یاب ہونے والے افراد میں تناسب سب سے زیادہ تھا۔ دلچسپ بات یہ ہے کہ BNT162b2/BNT162b2 ویکسینیشن گروپ (تصویر 5B) کے مقابلے پہلے کے انفیکشن/ویکسینیشن گروپ میں تناسب زیادہ تھا، حالانکہ ووہان S-مخصوص CD4 پلس T-سیل کے ردعمل BNT162b2/BNT162b2 ویکسینیشن گروپ میں سب سے زیادہ تھے۔ 4A)۔ ایک ساتھ لیا جائے تو، یہ نتائج بتاتے ہیں کہ nAb اور CD4 پلس T-سیل کے ردعمل جو ڈیلٹا کی مختلف حالتوں کو پہچانتے ہیں وہ ہومولوجس یا ہیٹرولوگس ویکسینیشن ریگیمینز کے مقابلے پہلے کے انفیکشن/ویکسینیشن کے ذریعے زیادہ موثر طریقے سے پیدا ہوتے ہیں۔

تصویر 2. اینٹی باڈی اور ٹی سیل ردعمل متنوع پرائم بوسٹ ریگیمینز کے ذریعے حاصل کیے گئے ہیں۔ ویکسینیشن سے پہلے کے 14 ہفتوں کے بعد پہلی ویکسینیشن کے نمونے لینے کے شیڈول کے مطابق طول بلد مدافعتی ردعمل۔ (A) SARS-CoV-2 سپائیک مخصوص بائنڈنگ اینٹی باڈیز کی پیمائش BNT162b2/BNT162b2 (n=22), AZD1222/AZD1222 (n=20), AZD1222/ BNT162b2 (n{n{) میں کی گئی تھی۔ 20})، اور پہلے انفیکشن/ویکسینیشن (n=6) گروپس۔ (B) SARS-CoV-2 spike-specific CD4 plus T-cell کے ردعمل کی پیمائش BNT162b2/BNT162b2 (n=19), AZD1222/AZD1222 (n=18), AZD1222/BNT1622 میں کی گئی تھی۔ (n=9)، اور پہلے انفیکشن/ویکسینیشن (n=7) گروپس۔ ڈیٹا کو جیومیٹرک اوسط ± جیومیٹرک SD (A) یا اوسط ± SD (B) کے طور پر پیش کیا جاتا ہے۔ ہر گروپ کے اندر ٹائم پوائنٹس کے درمیان شماریاتی تجزیے Wilcoxon سائنڈ رینک ٹیسٹ کا استعمال کرتے ہوئے کیے گئے۔ ns، اہم نہیں؛ *P < 0۔{45}}5، **P < 0.01، ***P < 0.001، ****P < 0.0001۔

تصویر 3. چوٹی کے اوقات میں مزاحیہ مدافعتی ردعمل۔ (A) SARS-CoV-2 سپائیک مخصوص بائنڈنگ اینٹی باڈیز کا موازنہ BNT162b2/BNT162b2 (n=22), AZD1222/ AZD1222 (n=20), AZD1222/BNT162b2 (n{n{) کے درمیان کیا گیا۔ 15}})، اور قبل از وقت انفیکشن/ویکسینیشن (n=6) گروپس۔ (B) نیوٹرلائزنگ اینٹی باڈیز کا موازنہ BNT162b2/BNT162b2 (n=22)، AZD1222/AZD1222 (n=20)، AZD1222/BNT162b2 (n=9)، اور پہلے انفیکشن/ویکسینیشن ( n=11) چوٹی ٹائم پوائنٹس پر گروپس۔ پِک ٹائم پوائنٹس کا انتخاب اس طرح کیا گیا تھا: BNT162b2/BNT162b2، AZD1222/AZD1222، اور AZD1222/BNT162b2 ویکسینیشن گروپس میں دوسری خوراک کے بعد اور پہلے انفیکشن/ویکسینیشن گروپ میں پہلی خوراک کے بعد۔ ڈیٹا کو جیومیٹرک اوسط ± جیومیٹرک SD کے طور پر پیش کیا جاتا ہے اور مان-وٹنی ٹیسٹ کا استعمال کرتے ہوئے اہمیت کے لیے تجزیہ کیا جاتا ہے۔ (C اور D) مزاحیہ مدافعتی ردعمل کی مختلف سطحوں کے ساتھ شرکاء کی فیصد۔ جواب دہندگان کی قسم کی مقدار (مضبوط، اعتدال پسند، اور کوئی نہیں/کمزور) ہر گروپ میں ویکسین وصول کرنے والوں کی تعداد کے ایک حصے کے طور پر ظاہر کی جاتی ہے۔ جواب دہندگان کی اقسام کا تعین تمام ٹیکے لگائے گئے شرکاء کے حساب سے پرسنٹائل سکور سے کیا گیا تھا۔ ns، اہم نہیں؛ *P < {{40}}۔{44}}5، **P < 0.01، ***P <0.001، ****P <0.0001۔

4. بحث

فی الحال مجاز mRNA ویکسینز اور اڈینو وائرس ویکٹر ویکسینز نے COVID-19 کی روک تھام میں قابل ذکر افادیت ظاہر کی ہے۔ تاہم، ہیٹرولوگس پرائم بوسٹ ویکسینیشن کو مدافعتی صلاحیت کو بہتر بنانے اور وقفے وقفے سے سپلائی کی کمی کو کم کرنے پر غور کیا گیا ہے [13]۔ اس کے علاوہ، AZD1222 ویکسینیشن سے وابستہ جان لیوا وینس تھرومبوسس، خاص طور پر کم عمر خواتین [14,15] میں شدید منفی واقعات کی شناخت کے بعد اڈینو وائرس ویکٹر ویکسین کے ساتھ حفاظتی مسائل اٹھائے گئے ہیں۔ یہ ان لوگوں کے لیے ہیٹرولوگس mRNA بوسٹر امیونائزیشن کا باعث بنے ہیں جنہوں نے پہلے ہی AZD1222 کی پہلی خوراک حاصل کر لی تھی۔ اگرچہ کارکردگی کا کوئی ڈیٹا دستیاب نہیں تھا، لیکن بہت سے قومی صحت کے حکام نے مجاز COVID-19 ویکسینز کے متضاد طرز عمل اپنائے۔ اس طرح، متنوع پرائم بوسٹ ویکسینیشن ریگیمینز کے ذریعے حاصل ہونے والے مزاحیہ اور سیلولر مدافعتی ردعمل کا تقابلی مطالعہ معلوماتی ہے اور حقیقی دنیا کے چیلنجوں کو بہتر طور پر سمجھنے میں معاون ہے۔ موجودہ مطالعے میں، ہم نے ہیٹرولوگس پرائم بوسٹ ویکسینیشن (ضمنی جدول 4) کے ذریعہ مزاحیہ اور سیلولر استثنیٰ کی تفریق شامل کرنے کا مظاہرہ کیا۔ مخصوص بائنڈنگ Ab لیولز اور نیوٹرلائزیشن ٹائٹرز دونوں کے بالکل برعکس، جو AZD1222/BNT162b2 ویکسینیشن گروپ میں سب سے زیادہ تھے، S-specific CD4 پلس T-cell کے جوابات BNT162b2/BNT162b2 ویکسینیشن گروپ میں سب سے زیادہ تھے، نہ کہ v6bcin2222/BNT162b2 ویکسینیشن گروپ میں۔ گروپ AZD1222/BNT162b2-ٹیکے لگائے گئے شرکاء میں S-specific CD4 پلس T سیل ردعمل کی نسبتاً کم سطح غیر متوقع تھی اور اب بھی ان افراد کو شدید SARS-CoV-2 انفیکشن کے خطرے میں ڈال سکتی ہے۔ ہماری تلاشیں شمٹ اور ساتھیوں کی رپورٹ کردہ ان سے مختلف ہیں، جنہوں نے تجویز کیا کہ ہیٹرولوگس BNT162b2 کو فروغ دینے پر، AZD1222-پرائمڈ افراد [7] میں این اے بی ٹائٹرز اور ٹی سیل کے ردعمل میں نمایاں اضافہ ہوا ہے۔ تاہم، CD4 پلس T خلیوں کے درمیان CD69 پلس IFN-c پلس خلیوں کی مطلق تعدد میں صرف معمولی اضافہ ہوا تھا، اور اس مطالعے نے S-مخصوص T-cell ردعمل کی کثیر فعلیت کے گہرائی سے تجزیوں کو روک دیا۔ ان افراد کے لیے جو پہلے متاثر ہوئے تھے، ویکسین کی پہلی خوراک بوسٹر امیونائزیشن کے طور پر کام کر سکتی ہے اور قوی طور پر مزاحیہ اور سیلولر ردعمل پیدا کر سکتی ہے [16,17]۔ جیسا کہ nAb ٹائٹر کو SARS-CoV-2 انفیکشن کے خلاف تحفظ کا ایک اہم ارتباط سمجھا جاتا ہے [18]، ہمارے نتائج انفیکشن سے حاصل شدہ قوت مدافعت میں فائدہ مند فروغ کی حالیہ دریافت کے ساتھ اچھی طرح سے فٹ ہیں، > ویکسین وصول کرنے والوں میں پہلی خوراک کے بعد 90 فیصد جن کو پچھلا SARS-CoV-2 انفیکشن تھا [19]۔ مزید برآں، مطالعہ کے شرکاء میں ڈیلٹا ویریئنٹ کے خلاف nAb ردعمل کے کافی حد تک فرار ہونے کے باوجود، ہم نے پہلے جنگلی قسم کے SARS-CoV{57}} انفیکشن اور ویکسینیشن تاہم، heterologous AZD1222/BNT162b2 ویکسینیشن گروپ کے مطابق، پہلے انفیکشن والے جن لوگوں کو ویکسین لگائی گئی تھی ان کا S-specific CD4 پلس T-سیل کا ردعمل ان افراد کے مقابلے میں کمزور تھا جو پہلے انفیکشن کے بغیر ہومولوس BNT162b2/BNT162b2 ویکسینیشن والے تھے۔ خاص طور پر، ہمارے نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ BNT162b2 کی دو خوراکیں S-specific CD4 پلس T-سیل ردعمل کی قابل اعتماد اور مضبوط شمولیت کا باعث بنتی ہیں، جو کہ دیگر پرائم بوسٹ ویکسینیشن ریگیمینز سے نمایاں طور پر زیادہ ہیں۔ یہ نتائج چار مختلف COVID-19 ویکسینز [20] پر ایک حالیہ رپورٹ سے مطابقت رکھتے ہیں، جب کہ ہمارے تجزیے میں ہیٹرولوگس پرائم بوسٹ ریگیمینز اور پیشگی انفیکشن اور ویکسینیشن سے ہائبرڈ استثنیٰ شامل ہے۔ اس کے مطابق، mRNA ویکسین پلیٹ فارمز کو مضبوط میموری CD4 پلس T سیل ردعمل پیدا کرنے کی ان کی صلاحیت کے لیے منتخب کیا جا سکتا ہے۔ چونکہ دنیا بھر میں ویکسینیشن کے بعد پیش رفت کے انفیکشن کے واقعات میں اضافہ ہوتا ہے، شدید COVID-19 سے حفاظتی قوت مدافعت میں دلچسپی بڑھ رہی ہے۔ جیسا کہ SARS-CoV-2 کی نئی قسمیں ابھرتی رہتی ہیں اور مزاحیہ مدافعتی دفاع سے بچتی ہیں، سیلولر امیونٹی، جو کہ T سیلز کے ذریعے پہچانے جانے والے SARS-CoV-2 ایپیٹوپس کے وسیع اسپیکٹرم کو نشانہ بناتی ہے، مستحکم حفاظتی استثنیٰ فراہم کر سکتی ہے [21 ]، اگرچہ ویکسین ثالثی تحفظ میں سیلولر ردعمل کے تعین کنندگان کی ابھی تک درست وضاحت نہیں کی گئی ہے۔ لہٰذا، کیا ہیٹرولوگس AZD1222/BNT162b2 ویکسینیشن کی بڑھتی ہوئی مزاحیہ مدافعت مستقل طور پر بہتر تحفظ میں ترجمہ کرتی ہے، یہ واضح نہیں ہے، اور اس کے لیے مزید مطالعہ کی ضرورت ہے۔ اس کے علاوہ، کیا وہ لوگ جنہوں نے ویکسینیشن کے بعد Tcell کے خراب ردعمل پیدا کیے ہیں، جیسے کہ AZD1222 کے ساتھ پرائمر والے، T-cell ویکسین فارمولیشنز سے فائدہ اٹھا سکتے ہیں، اس کی تحقیقات کی ضرورت ہے [22]۔ انفیکشن سے پیدا ہونے والی اور ویکسین سے پیدا ہونے والی قوت مدافعت قدرتی طور پر وقت کے ساتھ ساتھ ختم ہو جاتی ہے۔ تاہم، ایسا لگتا ہے کہ زیادہ تحفظ ان افراد کو دیا گیا ہے جو پہلے SARS-CoV سے متاثر ہو چکے تھے-2 [23]۔ ویکسین شدہ افراد میں، Omicron ویریئنٹ کے ساتھ پیش رفت انفیکشن ڈیلٹا ویرینٹ [24] کے انفیکشن کے مقابلے میں چھوٹے nAb ردعمل کو اکساتا ہے، اور انفیکشن اور مختلف تناؤ کے ساتھ ویکسینیشن کے ذریعے دی جانے والی ہائبرڈ استثنیٰ کے ممکنہ نتائج کے بارے میں نسبتاً کم معلوم ہے۔ بہر حال، ہمارے مطالعے میں پہلے سے متاثرہ اور ٹیکے لگائے گئے شرکاء میں پولی فنکشنل S- مخصوص T خلیات کی موجودگی اس آبادی میں شدید COVID-19 کے خلاف تحفظ میں سست کمی کے ساتھ مطابقت رکھتی ہے اور SARS کے دوبارہ انفیکشن کے بعد بیماری کی شدت کو تبدیل کرنے میں معاون ثابت ہو سکتی ہے۔ -CoV{100} مختلف قسمیں [25,26]۔ موجودہ مطالعہ میں کئی حدود ہیں۔ سب سے پہلے، گروپ میں نمونے کے چھوٹے سائز مضبوط شماریاتی تجزیہ کو مشکل بناتے ہیں۔ لہذا، ہمارے نتائج کو بڑے گروہوں میں مزید توثیق کرنے کی ضرورت ہوگی۔ دوسرا، ہم مزاحیہ اور سیلولر مدافعتی ردعمل کے استحکام اور کم ہونے کا تعین کرنے کے لئے بعد کے وقت کے پوائنٹس پر نمونوں کی جانچ کرنے کے قابل نہیں تھے۔ تیسرا، ہمارے نتائج غالب ایپیٹوپس سے باہر ذیلی ٹی سیل ایپیٹوپس کے اثرات کو کم کر سکتے ہیں۔ چوتھا، ہم نے صرف گردش کرنے والی لیمفوسائٹس کا مطالعہ کیا، اور ویکسینیشن کے بعد لمف نوڈس کو نکالنے کے مستقبل کے مطالعے کے لیے یہاں مشاہدہ کیے گئے امتیازی ردعمل کے بنیادی میکانزم کو سمجھنے کی ضرورت ہو سکتی ہے۔ خلاصہ یہ کہ، موجودہ مطالعہ جس میں براہ راست، عمر سے مماثل موازنہ کیا گیا ہے، SARS-CoV{106}} اینٹیجن ایکسپوژرز کے تناظر میں ہیٹرولوگس پرائمنگ اور بوسٹنگ کی غیر متناسب مزاحیہ اور سیلولر امیونوجنیسیٹی پر روشنی ڈالتا ہے۔ ہماری تلاشیں اس بات پر روشنی ڈالتی ہیں کہ کس طرح انفرادی امیونولوجیکل تجربہ COVID{107} ویکسینیشن کے بعد پیدا ہونے والے مدافعتی ردعمل کو تشکیل دیتا ہے۔ اضافی حقیقی دنیا کی تاثیر کا ڈیٹا اور لیبارٹری کی تحقیقات ابھرتی ہوئی SARS-CoV{110}} مختلف حالتوں سے تحفظ کے لیے سب سے مناسب ویکسینیشن حکمت عملی کے بارے میں مزید مطلع کریں گی، جس میں اگلی نسل کے ویکسین پلیٹ فارمز کی ترقی کے مضمرات ہیں۔

تصویر 4. چوٹی کے اوقات میں سیلولر مدافعتی ردعمل۔ (A) CD4 پلس T خلیات کے درمیان سپائیک مخصوص IFN-c پلس سیلز کی تعدد کا موازنہ BNT162b2/BNT162b2 (n=19)، AZD1222/AZD1222 (n=18)، AZD1222/BNT162b2 (n) کے درمیان کیا گیا تھا۔ n=9)، اور قبل از وقت انفیکشن/ویکسینیشن (n=7) گروپس۔ پِک ٹائم پوائنٹس کا انتخاب اس طرح کیا گیا تھا: BNT162b2/BNT162b2، AZD1222/AZD1222، اور AZD1222/BNT162b2 ویکسینیشن گروپس میں دوسری خوراک کے بعد اور پہلے انفیکشن/ویکسینیشن گروپ میں پہلی خوراک کے بعد۔ (B) سیلولر مدافعتی ردعمل کی مختلف سطحوں کے ساتھ شرکاء کی فیصد۔ جواب دہندگان کی قسم کی مقدار (مضبوط، اعتدال پسند، اور کوئی نہیں/کمزور) ہر گروپ میں ویکسین وصول کرنے والوں کی تعداد کے ایک حصے کے طور پر ظاہر کی جاتی ہے۔ جواب دہندگان کی اقسام کا تعین تمام ٹیکے لگائے گئے شرکاء کے حساب سے پرسنٹائل سکور سے کیا گیا تھا۔ (C) پولی فنکشنل اسپائیک مخصوص CD4 پلس T سیلز کی تعدد جو IFN-c، IL-2، یا TNF کا کوئی بھی مجموعہ تیار کرتے ہیں (D) سپائیک مخصوص CD4 پلس T خلیوں کا حصہ سائٹوکائنز کی دی گئی تعداد کے لیے مثبت ہے۔ ڈیٹا کو اوسط ± SD کے طور پر پیش کیا جاتا ہے۔ مان-وٹنی ٹیسٹ (A اور C) کا استعمال کرتے ہوئے اہمیت کا تجزیہ کیا گیا۔ ns، اہم نہیں؛ *P < 0۔{35}}5، **P < 0۔{39}}1، ***P <0.001، ****P <0.0001

اس کے علاوہ، روایتی چینی ادویات جزوcistanche جڑی بوٹیقوت مدافعت کو بھی بڑھا سکتا ہے، استثنیٰ کو بڑھانے میں Cistanche deserticola کا طریقہ کار

cistanche سپلیمنٹ کے فوائد - مدافعتی نظام کو مضبوط کرنے کا طریقہ

Cistanche Enhance Immunity مصنوعات دیکھنے کے لیے یہاں کلک کریں۔

【مزید پوچھیں】 ای میل:cindy.xue@wecistanche.com / واٹس ایپ: 0086 18599088692 / وی چیٹ: 18599088692

Cistanche tubulosaپولی سیکرائڈز T اور B لیمفوسائٹس کے پھیلاؤ کو فروغ دے سکتے ہیں، لیکن B lymphocytes کے پھیلاؤ کا اثر T lymphocytes کے مقابلے میں نمایاں طور پر مضبوط ہے۔ Cistanche deserticola polysaccharides lymphocytes سے cytokine IL22 کے اخراج کو فروغ دیتے ہیں، جو splenic lymphocyte کے پھیلاؤ کو فروغ دینے سے متعلق ہے۔ Cistanche deserticola میکروفیجز کو چالو کر سکتا ہے اور مدافعتی نظام کو منظم کر سکتا ہے۔ Cistanche deserticola polysaccharides، echinaside، اور piloside انسانی lymphocytes کی تشکیل اور سرگرمی پر اہم اثرات مرتب کرتے ہیں۔ یہ لیمفوسائٹس کے پھیلاؤ کے ردعمل کو بڑھا سکتا ہے، اس طرح جسم کے مدافعتی کام کو بڑھاتا ہے۔

cistanche اقتباس

کے فعال اجزاءCistanche tubulosaکل گلائکوسائیڈز 60Coy ریڈی ایشن کو پہنچنے والے نقصان کے بعد سیل کی بحالی پر نمایاں اثر ڈالتے ہیں، اور تابکاری کے نقصان کے خلاف مدافعتی فنکشن کو بھی بڑھا سکتے ہیں۔

Cistanche tubulosa کا عرق نہ صرف پیدائشی قوت مدافعت کی کمی کو پورا کر سکتا ہے بلکہ حاصل شدہ قوت مدافعت کو بھی بڑھا سکتا ہے۔

تصویر 5. ڈیلٹا کے خلاف مختلف قسم کے مدافعتی ردعمل متنوع پرائم بوسٹ ریگیمینز کے ذریعے حاصل کیے گئے ہیں۔ (A) BNT162b2/BNT162b2 (n {{10}})، AZD1222/AZD1222 (n {{) میں SARS-CoV-2 ڈیلٹا ویرینٹ کے لیے پلازما کے نمونوں کا تجزیہ کیا گیا تھا 13}})، AZD1222/BNT162b2 (n=9)، قبل از وقت انفیکشن/ویکسینیشن (n=11)، اور ڈیلٹا کنولیسنٹ (n {{20}}) گروپس۔ ڈیلٹا نیوٹرلائزنگ اینٹی باڈیز کا گروپوں کے درمیان مندرجہ ذیل پوائنٹس پر موازنہ کیا گیا: BNT162b2/BNT162b2، AZD1222/AZD1222، اور AZD1222/BNT162b2 ویکسینیشن گروپوں میں دوسری خوراک کے بعد اور پہلے انفیکشن/ویکسینیشن گروپ میں پہلی خوراک کے بعد۔ (B) BNT162b2/BNT162b2 (BNT162b2{37}) میں ووہان اور ڈیلٹا اسٹرین کے درمیان اسپائک سیکوینس کے غیر محفوظ شدہ علاقوں پر مشتمل ایس پیپٹائڈ پول کے دو مختلف سیٹوں کا استعمال کرتے ہوئے براہ راست سابق ویوو محرک کے بعد IFN-c کے لیے انٹرا سیلولر سٹیننگ کے ذریعے PBMCs کا تجزیہ کیا گیا۔ })، AZD1222/AZD1222 (n {{40}})، AZD1222/BNT162b2 (n=9)، قبل از وقت انفیکشن/ویکسینیشن (n=7)، اور ڈیلٹا کنولیسنٹ ( n=17) گروپس۔ ڈیلٹا اسپائک کے خلاف IFN-c-پیدا کرنے والے CD4 پلس T خلیات کی فریکوئنسی کا تناسب IFN-c پیدا کرنے والے CD4 پلس T سیلز کی ووہان اسپائک کے خلاف ہر گروپ میں شمار کیا گیا تھا۔ ڈیٹا کو جیومیٹرک اوسط ± جیومیٹرک SD (A) یا اوسط ± SD (B) کے طور پر پیش کیا جاتا ہے اور مان-وٹنی ٹیسٹ کا استعمال کرتے ہوئے اہمیت کے لیے تجزیہ کیا جاتا ہے۔ ns، اہم نہیں؛ *P < 0.05، **P <0.01، ***P <0.001، ****P <0.0001۔

حوالہ جات

[1] بوک کے، ستار ایس، گراہم بی ایس، وغیرہ۔ تیز رفتار COVID-19 ویکسین کی ترقی: سنگ میل، سبق، اور امکانات۔ استثنیٰ 2021؛ 54:1636–51۔ https://doi. org/10.1016/j.immuni.2021.07.017۔

[2] پولاک ایف پی، تھامس ایس جے، کیچن این، وغیرہ۔ BNT162b2 mRNA Covid-19 ویکسین کی حفاظت اور افادیت۔ این انگل جے میڈ 2020؛ 383:2603–15۔ https://doi.org/ 10.1056/NEJMoa2034577۔

[3] Falsey AR، Sobieszczyk ME، Hirsch I، et al. AZD1222 (ChAdOx1 nCoV-19) Covid-19 ویکسین کی فیز 3 حفاظت اور افادیت۔ این انگل جے میڈ 2021؛ 385:2348–60۔ https://doi.org/10.1056/NEJMoa2105290۔

[4] بوروبیا AM، Carcas AJ، Pérez-Olmeda M، et al. ChAdOx1-S-primed شرکاء (CombiVacS) میں BNT162b2 بوسٹر کی امیونوجنیسیٹی اور رد عمل: ایک ملٹی سینٹر، اوپن لیبل، بے ترتیب، کنٹرول شدہ، مرحلہ 2 ٹرائل۔ لینسیٹ 2021؛ 398:121–30۔ https://doi.org/10.1016/S0140-6736(21) 01420-3۔

[5] Barros-Martins J, Hammerschmidt SI, Cossmann A, et al. heterologous اور homologous ChAdOx1 nCoV-19/BNT162b2 ویکسینیشن کے بعد SARS-CoV-2 مختلف حالتوں کے خلاف مدافعتی ردعمل۔ نیٹ میڈ 2021؛ 27:1525-9۔ https://doi.org/ 10.1038/s41591-021-01449-9۔

[6] ہلس ڈی، شوارز ٹی، ٹوبر لاؤ پی، وغیرہ۔ ChAdOx1 nCoV-19 اور BNT162b2 کے ساتھ ہومولوجس اور ہیٹرولوگس پرائم بوسٹ امیونائزیشن کی حفاظت، رد عمل، اور امیونوجنیسیٹی: ایک ممکنہ ہم آہنگ مطالعہ۔ دی لینسیٹ ریسپر میڈ 2021؛ 9:1255–65۔ https://doi.org/10.1016/S2213-2600(21)00357- X۔

[7] شمٹ ٹی، کلیمس وی، شوب ڈی، وغیرہ۔ heterologous ChAdOx1 nCoV-19/mRNA ویکسینیشن کی امیونوجنیسیٹی اور رد عمل۔ نیٹ میڈ 2021؛ 27:1530-5۔ https://doi.org/10.1038/s41591-021-01464-w

[8] Liu X، Shaw RH، Stuart ASV، et al. ایڈینو وائرل ویکٹرڈ اور mRNA COVID-19 ویکسین (Com-COV) کے ساتھ ہیٹرولوگس بمقابلہ ہومولوگس پرائم بوسٹ شیڈولز کی حفاظت اور امیونوجنیسیٹی: ایک نابینا، بے ترتیب، غیر کمتری کا ٹرائل۔ لینسیٹ 2021؛ 398:856–69۔ https://doi.org/10.1016/S0140- 6736(21)01694-9۔

[9] کرامر ایف، سریواستو کے، الشمری ایچ، وغیرہ۔ SARS-CoV-2 mRNA ویکسین کی ایک خوراک کے بعد سیرو پازیٹو افراد میں اینٹی باڈی ردعمل۔ این انگل جے میڈ 2021؛ 384:1372–4۔ https://doi.org/10.1056/NEJMc2101667۔

[10] بریڈلی ٹی، گرنڈبرگ ای، سیلوارنگن آر، وغیرہ۔ SARS-CoV-2 mRNA ویکسین کی ایک خوراک کے بعد اینٹی باڈی ردعمل۔ این انگل جے میڈ 2021؛ 384:1959–61۔ https://doi.org/10.1056/NEJMc2102051۔

[11] سعادت ایس، رختیگران تہرانی زیڈ، لوگو جے، وغیرہ۔ صحت کی دیکھ بھال کرنے والے کارکنوں میں ایک ویکسین کی خوراک کے بعد اینٹی باڈی ٹائٹرز کو بائنڈنگ اور نیوٹرلائزیشن جو پہلے SARS-CoV سے متاثر ہوئے تھے-2۔ JAMA 2021؛ 325:1467-9۔ https://doi.org/ 10.1001/jama.2021.3341۔

[12] Reynolds CJ، Pade C، Gibbons JM، et al. پہلے SARS-CoV-2 انفیکشن ویکسین کی پہلی خوراک کے بعد مختلف حالتوں میں B اور T سیل کے ردعمل کو بچاتا ہے۔ سائنس 2021؛ 372:1418-23۔ https://doi.org/10.1126/science.abh1282۔

[13] Ledford H. کیا کووڈ ویکسین کا اختلاط مدافعتی ردعمل کو بڑھاتا ہے؟ فطرت 2021؛ 590:375-6۔ https://doi.org/10.1038/d41586-021-00315-5۔

[14] Schultz NH، Sorvoll IH، Michelsen AE، et al. Thrombosis اور Thrombocytopenia ChAdOx1 nCoV-19 ویکسینیشن کے بعد۔ این انگل جے میڈ 2021؛ 384:2124–30۔ https://doi.org/10.1056/NEJMoa2104882۔

[15] Greinacher A، Thiele T، Warkentin TE، et al. ChAdOx1 nCov-19 ویکسینیشن کے بعد تھرومبوٹک تھرومبوسائٹوپینیا۔ این انگل جے میڈ 2021؛ 384:2092–101۔ https://doi.org/10.1056/NEJMoa2104840۔

[16] مازونی اے، دی لاریا این، میگی ایل، وغیرہ۔ پہلی خوراک والی mRNA ویکسینیشن COVID-19 سے صحت یاب ہونے والے مضامین میں SARS-CoV-2 میں امیونولوجیکل میموری کو دوبارہ فعال کرنے کے لیے کافی ہے۔ J Clin Invest 2021;131:e149150۔

[17] Samanovic MI، Cornelius AR، Grey-Gaillard SL، et al. SARS-CoV-2- تجربہ کار افراد میں BNT162b2 mRNA ویکسین کی خوراک کی ایک خوراک کے بعد مضبوط مدافعتی ردعمل کا مشاہدہ کیا جاتا ہے۔ سائنس ٹرانسل میڈ 2022؛14:eabi8961.. https://doi.org/ 10.1126/scitranslmed.abi8961۔

[18] Khoury DS, Cromer D, Reynaldi A, et al. اینٹی باڈی کی سطح کو بے اثر کرنا علامتی SARS-CoV-2 انفیکشن سے مدافعتی تحفظ کی انتہائی پیش گوئی کرتا ہے۔ نیٹ میڈ 2021؛ 27:1205–11۔ https://doi.org/10.1038/s41591-021-01377-8۔

[19] ہال V، Foulkes S، Insalata F، et al. کووڈ- 19 ویکسینیشن اور پچھلے انفیکشن کے بعد SARS-CoV-2 کے خلاف تحفظ۔ این انگل جے میڈ 2022؛ 386:1207–20۔ https://doi.org/10.1056/NEJMoa2118691۔

[20] Zhang Z، Mateus J، Coelho CH، et al. چار COVID-19 ویکسینز کے لیے مزاحیہ اور سیلولر امیون میموری۔ سیل 2022؛ 185:2434–51۔ https://doi.org/10.1016/ j.cell.2022.05.022۔

[21] وردھنا ایس، بالڈو ایل، موریس ڈبلیو جی، وغیرہ۔ صحت عامہ کی حکمت عملیوں کو مطلع کرنے کے لیے COVID-19 پر ٹی سیل ردعمل کو سمجھنا ضروری ہے۔ Sci Immunol 2022;7:eabo1303.. https://doi.org/10.1126/sciimmunol.abo1303۔

[22] Moss P. SARS-CoV کے خلاف T سیل مدافعتی ردعمل-2۔ نیٹ امیونول 2022؛ 23:186-93۔ https://doi.org/10.1038/s41590-021-01122-w

[23] گولڈ برگ وائی، مینڈل ایم، بار آن وائی ایم، وغیرہ۔ SARS-CoV سے قدرتی اور ہائبرڈ قوت مدافعت کا تحفظ اور انحطاط-2.N انگریزی۔ جے میڈ 2022؛ 386:2201–12۔ https://doi. org/10.1056/NEJMoa2118946۔

[24] Rossler A, Knabl L, von Laer D, et al. SARS-CoV-2 Omicron انفیکشن سے بازیابی کے بعد نیوٹرلائزیشن پروفائل۔ این انگل جے میڈ 2022؛ 386:1764–6۔ https://doi. org/10.1056/NEJMc2201607۔

[25] Guerrera G, Picozza M, D'Orso S, et al. BNT162b2 ویکسینیشن سٹیم سیل میموری فینوٹائپ کے ساتھ پائیدار SARS-CoV-2-مخصوص T خلیات کی حوصلہ افزائی کرتی ہے۔ Sci Immunol 2021;6(eabl5344)۔ https://doi.org/10.1126/sciimmunol.abl5344۔

[26] گولڈبلاٹ D. SARS-CoV-2: ہرڈ امیونٹی سے ہائبرڈ امیونٹی تک۔ Nat Rev Immunol 2022؛ 22:333–4۔ https://doi.org/10.1038/s41577-022-00725-0۔