سپیکٹرم-اثر تعلقات کے تجزیہ اور نیٹ ورک فارماکولوجی پر مبنی Cistanche Tubulosa میں فعال اجزاء کی اسکریننگ کے لیے ایک نئی حکمت عملی Ⅱ

3. نتائج اور مباحثہ

3.1 HPLC فنگر پرنٹس

3.1.1 طریقہ کی توثیق

HPLC طریقہ کی توثیق سے پتہ چلتا ہے کہ طریقہ کی درستگی، تولیدی صلاحیت، اور استحکام کے لیے متعلقہ معیاری انحراف (RSD) رشتہ دار چوٹی کے علاقے (n = 11) اور 0.77 فیصد کے لیے 2.85 فیصد سے کم تھا۔ متعلقہ برقرار رکھنے کے وقت کے لیے (n = 11)۔ ایک ہی نمونے کے حل کی درستگی 0 کی حد میں ظاہر ہوئی۔{8}}5–{{10}.77 فیصد متعلقہ وقت کے لیے اور 0.28– عام چوٹیوں کے متعلقہ علاقے کے لیے 2.70 فیصد۔ تجربے کی تولیدی صلاحیت 0 کی حد کے اندر تھی۔{24}}3–0.20 فیصد متعلقہ وقت کے لیے اور 0.23–2.59 فیصد عام چوٹیوں کے متعلقہ علاقے کے لیے۔ نمونہ کا استحکام نسبتا برقرار رکھنے کے وقت کے لیے 0.09–0.24 فیصد اور عام چوٹیوں کے متعلقہ علاقے کے لیے 0.75–2.85 فیصد تھا۔ ان نتائج نے اشارہ کیا کہ قائم شدہ فنگر پرنٹ مطمئن تھا۔ جینیپوسیڈک ایسڈ کے لیے لکیری تعلقات،echinacoside, ایکٹیوسائیڈ, tubuloside A، اورisoacteosideٹیبل S4 میں دکھایا گیا ہے۔ R مربع کی قدر 1 تھی۔{2}}، اچھی لکیریٹی کی نشاندہی کرتی ہے۔ نمونے کی وصولی کے نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ جینیپوسیڈک ایسڈ، ایکناکوسائیڈ، کی اوسط وصولیایکٹیوسائیڈ, tubuloside A، اورisoacteoside100.37 فیصد، 103.59 فیصد، 98.46 فیصد، 100.81 فیصد، اور 101.19 فیصد تھے، اور نمونے کی وصولی کے لیے RSD 2.68 فیصد سے کم تھا۔

Cistanche Active Components کے بارے میں مزید تفصیلات حاصل کرنے کے لیے یہاں کلک کریں۔

3.1.2 چوٹی کا علاقہ (PA) اور رشتہ دار برقرار رکھنے کا وقت (RRT)

C. tubulosa کے 11 بیچوں سے HMs، WEs، اور HRs کے حوالہ جاتی فنگر پرنٹس اور فنگر پرنٹس کو شکل 2 میں پیش کیا گیا ہے۔ گیارہ چوٹیاں، جو اچھی علیحدگی اور ریزولیوشن کی نمائش کرتی ہیں، HMs، WEs، اور HRs کے درمیان مشترکہ چوٹیوں کے طور پر شناخت کی گئیں۔ پانچ معیاری مرکبات کی شناخت geniposidic acid (A2) کے طور پر کی گئی تھی،echinacoside(A8),ایکٹیوسائیڈ (A9), tubulosideA (A10)، اورisoacteoside(A11)۔ معیاری مرکب،echinacoside، جو تمام کرومیٹوگرامس (اوسط برقرار رکھنے کا وقت 1286 منٹ) میں ایک مناسب چوٹی کے علاقے اور اچھی استحکام کے ساتھ موجود تھا، حوالہ چوٹی کے طور پر منتخب کیا گیا تھا اور باقی دس کے متعلقہ برقرار رکھنے کے اوقات (RRTs) کا حساب لگانے کے لیے استعمال کیا گیا تھا۔ عام چوٹیوں. ان مختلف شکلوں کے RRTs 0.16–1.51 کی حد میں ہیں۔ ان عام چوٹیوں کے PA اور گتانک کا تغیر (CV فیصد) ٹیبلز S5–S7 میں درج ہیں۔ اعداد و شمار سے، مختلف شکلوں میں PA کے لیے CV فیصد کی قدریں بالترتیب 25.78 فیصد -142.02 فیصد، 23.36 فیصد -150.38 فیصد، اور HMs، WEs اور HRs کے لیے بالترتیب 28.91 فیصد -112.78 فیصد ہیں۔ یہ نتائج ہر ایک کی حراستی میں اہم فرق کو ظاہر کرتے ہیں۔Cistanche tubulosaمختلف شکلوں کے درمیان مرکب۔ HMs، WEs، اور HRs کے فنگر پرنٹس کو شکل 3 میں دکھایا گیا ہے۔

شکل 2 معیاری نمونوں کے HPLC فنگر پرنٹس

3.1.3 HMs، WEs، اور HRs کے مشمولات

کے پانچ معیاری اجزاءC. tubulosaماپا گیا تھا. اہم اجزاء کے مشمولات ٹیبل 1 میں دکھائے گئے ہیں۔ HMs، WEs اور HRs کے درمیان موازنہ جدول 2 اور شکل 4 میں دکھایا گیا ہے۔ C. tubulosa میں PhGs حیاتیاتی طور پر فعال لیکن تھرموس حساس ہیں۔ پانی میں تحلیل ہونے والے حرارت سے حساس اجزاء کو ایک معقول طریقہ استعمال کرتے ہوئے مؤثر طریقے سے نکالا جا سکتا ہے۔ عام طور پر، Cistanche herba کو پانی کے ساتھ نکالا جاتا ہے اور پھر اسے مندرجہ ذیل کیمیائی تجزیہ کے لیے ایک مرتکز محلول میں بخارات بنا دیا جاتا ہے [26, 27, 30]۔ نکالنے اور ارتکاز کے بعد، سپرے خشک کرنے والی ٹیکنالوجی کا استعمال کیا گیا اور طریقہ کار کو پچھلے مضمون سے تبدیل کیا گیا۔ پانی کو تیزی سے مائع بھاپ سے ہٹا دیا گیا، اور پھر پودوں سے خام مال کے خشک نچوڑ حاصل کیے گئے۔ اس مرحلے میں، مالٹوڈیکسٹرین کو شامل کرنا ایک عام کیریئر سمجھا جاتا ہے تاکہ بازی کو بڑھایا جا سکے اور اسٹوریج کے وقت کو بڑھایا جا سکے۔ مینوفیکچرنگ کے عمل کی ایک سیریز کے ذریعے، جڑی بوٹیوں کے پودوں کو پھر اضافی اشیاء کے ساتھ فارمولہ دانے داروں میں دبایا گیا۔ ایکسپیئنٹس کو شامل کرنے کا یہ مرحلہ تجربے میں شامل نہیں تھا۔ عام طور پر، ہمارے پیداواری عمل میں اخراج، ارتکاز، اور سپرے خشک کرنا شامل ہے، جیسا کہ سیکشن 2.2 میں بیان کیا گیا ہے، فارمولہ گرینول کی پیداوار کے عمل کے متوازی طور پر۔ ان نیم تیار شدہ مصنوعات کو تیار کرنے کے لیے، مندرجہ بالا تین مراحل پر عمل کرنا ضروری ہے۔ WEs بنانے کے طریقہ کار میں ارتکاز اور سپرے کو خشک کرنا شامل ہے، جو آسانی سے تھرموس حساس اجزاء کے نقصان کا سبب بنتا ہے، لیکن HRs HMs کو نکالنے اور خشک کرنے کے بعد حاصل کیے جاتے ہیں۔ ہم حیران ہیں کہ کیا یہ ممکن ہے کہ فعال اجزاء HRs میں رہیں۔ ہمارے نتائج کے مطابق، verbascoside کا مواد HMs سے WEs اور HRs (اور بالترتیب) میں نمایاں طور پر کم ہو گیا ہے۔ حرارتی عمل کے دوران HPLC کے ذریعے چوٹی کے علاقے میں ہونے والی تبدیلیوں کی نگرانی کرکے ورباسکوسائیڈ کے تھرمل استحکام کی جانچ کی جاتی ہے۔ 4 گھنٹے تک گرم کرنے کے بعد، ورباسکوسائیڈ کا 41.6 فیصد رہ جاتا ہے۔ یہ اس بات کی نشاندہی کرتا ہے کہ ورباسکوسائڈ تھرموس حساس ہے [31]۔ WEs میں Isoacteoside، tubuloside A، اور echinacoside پیچیدہ پروسیسنگ کے طریقہ کار کے بعد مستحکم رہے۔ طویل مدتی خشک کرنے کے عمل کے دوران، PhGs کے جمع ہونے میں نمایاں کمی واقع ہوئی، جس کی وجہ ان تھرموس حساس اجزاء کے تھرمل انحطاط کو قرار دیا جا سکتا ہے [32]۔ دوسرے ہدف کے اجزاء کے لحاظ سے، HRs اور WEs میں verbascoside کے علاوہ کوئی خاص فرق نہیں تھا۔ اس فرق کے بارے میں ہماری سمجھ ہمیں مستقبل میں جڑی بوٹیوں کے ڈریگز کے لیے بہتر کوالٹی کے معیارات تیار کرنے اور انھیں مصنوعات میں آگے بڑھانے کے قابل بنائے گی۔

ٹیبل 1 C. tubulosa کے 11 بیچوں کے مشمولات

جدول 2 اہم اجزاء کے مشمولات کا موازنہ (n = 11)۔

,

شکل 4 مختلف شکلوں سے پانچ اجزاء کا مواد کا تعین (n = 11)۔ , ns: اہم نہیں۔

3.1.4 فنگر پرنٹ مماثلت کا تجزیہ

تین C. tubulosa گروپوں میں مماثلت کا جائزہ لیا گیا۔ جڑی بوٹیوں کے مادّے-پانی کا عرق، جڑی بوٹیوں کے مواد-جڑی بوٹیوں کی باقیات، اور پانی کے عرق-جڑی بوٹیوں کی باقیات کی مماثلت کی اقدار 0.943–0.994، 0.847–{ کی حدود میں تھیں۔ {9}}.995، اور 0.938–1۔{14}}، بالترتیب (ٹیبل 3)۔

ٹیبل 3 C. tubulosa کے 11 بیچوں کے لیے HM-WE، HM-HR، اور WE-HR کی مماثلتیں۔

3.2 اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی ٹیسٹ کے نتائج

C. tubulosa کی مختلف شکلوں کی اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمیوں کا تعین DPPH، , اور scavenging capacity asses کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا تھا، اور متعلقہ نتائج کو شکل 5 میں پیش کیا گیا ہے۔ C. tubulosa کے 11 بیچوں میں سے تین مختلف شکلوں کے لیے {2}}۔ تین اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی کے ٹیسٹوں میں، HMs اور WEs نے قریبی روک تھام کی سرگرمی کی نمائش کی، جبکہ HRs نے سب سے کمزور روکنا ظاہر کیا۔

سپرے سے خشک WEs کو کم ارتکاز میں بھی نمایاں سرگرمیاں دکھائی گئیں۔ ایک پچھلی رپورٹ نے اشارہ کیا کہ سپرے سے خشک ورنونیا امیگدالین WE نے 0.17 mg/mL [33] پر 50 فیصد سکیوینجنگ روکنا حاصل کیا۔ طویل نکالنے کے اوقات اور اعلی درجہ حرارت کا اطلاق ایک دو دھاری تلوار ہے۔ ایک طرف، نکالنے کے وقت میں اضافہ اور اسپرے خشک کرنے والے داخلی درجہ حرارت سے پیداوار اور کارکردگی بہتر ہوتی ہے۔ مزید یہ کہ نچوڑ مضبوط اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی اور ان پودوں کے مقابلے حیاتیاتی اجزاء کی زیادہ تعداد حاصل کرتے ہیں [34]۔ دوسری طرف، ضرورت سے زیادہ گرم داخلی ہوا بائیو ایکٹیو مرکبات کو کم کر دیتی ہے۔ اس طرح کے بلند ہوا کے داخلی درجہ حرارت کی وجہ سے اینٹی آکسیڈینٹ بائیڈنز پیلوسا ایکسٹریکٹ کی سرگرمی میں کمی واقع ہوئی اور اس کی وجہ فینولک مرکبات میں کمی [35] ہے۔ موجودہ نتائج مذکورہ رپورٹ کے مطابق ہیں۔ مثال کے طور پر، S6 میں WE نے HM اور HR دونوں کے مقابلے میں کمزور بنیاد پرست روک تھام کی صلاحیتوں کا مظاہرہ کیا۔ مزید برآں، S5 میں HR نے HM اور WE کے مقابلے میں مضبوط DPPH اور سپر آکسائیڈ anion کی صفائی کی صلاحیتوں کی نمائش کی۔ پی ایچ جی کی ساخت گلائکوسیڈک بانڈز اور ایسٹیل گروپس پر مشتمل ہوتی ہے جو انزیمیٹک عمل کے تحت آسانی سے ہائیڈرولائز ہوتے ہیں یا زیادہ درجہ حرارت پر گل جاتے ہیں۔ یہ ردعمل بڑے پیمانے پر پیداوار کے دوران کچھ اہم اجزاء میں کمی کا سبب بن سکتے ہیں۔ تاہم، بعض اجزاء کی ہائیڈولیسس یا آئسومرائزیشن دوسرے اجزاء کی ترکیب کو تیز کر سکتی ہے۔ Cistanches جڑی بوٹیوں پر کارروائی کرتے وقت اس طرح کی تبدیلیاں عام ہوتی ہیں [36–38]۔ پی ایچ جی پانی میں گھلنشیل ہونے کا مطلب یہ ہے کہ زیادہ تر حیاتیاتی اجزاء پانی نکالنے کے ذریعے استعمال کیے جا سکتے ہیں۔ یہ تنازعہ کہ فعال اجزاء کی اکثریت WEs میں رہتی ہے کئی دہائیوں سے برقرار ہے، لہذا یہ سمجھنا مناسب معلوم ہوتا ہے کہ گیلے بقایا مواد کو نکالنے کے بعد ضائع کیا جا سکتا ہے۔ تاہم، C. tubulosa کے HRs کو فضلہ سمجھنا غلط ہے۔ محققین نے بتایا کہ پی ایچ جی غیر مستحکم ہیں، اور وہ انزیمیٹک یا ہائیڈرولائٹک انحطاط کے لیے حساس ہیں [39]۔ ہائیڈرولائسز یا آئیسومرائزیشن ری ایکشنز جو پروسیسنگ کے دوران فائٹو میڈیسن کے اندر حیاتیاتی اجزاء میں کمی کا باعث بنتے ہیں ایک ہی وقت میں HRs کے استحصال کے نئے مواقع پیش کر سکتے ہیں۔ نکالنے کے روایتی طریقوں کو تبدیل کرکے، دواؤں کی باقیات کو زیادہ مؤثر طریقے سے تیار اور استعمال کیا جا سکتا ہے۔ پینیکس ginseng کی باقیات کو مونو شکر میں تبدیل کرنے کے لیے انزیمیٹک ہائیڈولیسس کی گئی۔ پولی سیکرائڈز اور ginsenosides کی پیداوار میں اضافہ ہوا، جیسے چینی، succinic acid، ginseng polysaccharides، اور ginsenosides [40]۔ Sophora flavescens کی باقیات کو الٹراسونک لہروں کے ذریعے ethyl acetate کے ساتھ دوبارہ نکالا جاتا ہے [41]۔ جڑی بوٹیوں کی باقیات کو استعمال کرنے کے لیے جدید ترین ٹیکنالوجیز کا خلاصہ ہوانگ ایٹ ال نے کیا ہے۔ [42]۔

پی ایل ایس آر اور بی سی اے کے نتائج کی بنیاد پر، اہم ترین چوٹیوں کی شناخت کے لیے ڈی پی پی ایچ، سپر آکسائیڈ اینیون، اور ہائیڈروکسیل ریڈیکل اسکیوینجنگ اسسیس کا استعمال کرتے ہوئے مختلف شکلوں کی سب سے اوپر کی پانچ چوٹیوں کی اسکریننگ کی گئی۔ نتائج وین چارٹ (شکل 7) میں بیان کیے گئے ہیں۔ A2، A6، A8، اور A10 وہ عام چوٹیاں ہیں جو HM، WE، اور HR (اعداد و شمار 7(a) اور 7(c)) کے ذریعے سپر آکسائیڈ اینیون اور ہائیڈروکسیل ریڈیکل سکیوینجنگ اسسیس میں مشترک ہیں، جبکہ HM، WE، اور HR شیئر کوئی DPPH پرکھ کی چوٹی نہیں ہے۔ دریں اثنا، BCA ماڈلز ظاہر کرتے ہیں کہ A1، A2، A3، اور A6 مشترکہ چوٹیاں ہیں جو HM، WE، اور HR (اعداد و شمار 7(d)–7(f)) کے ذریعے مشترکہ ہیں۔ خاص طور پر، وین ڈایاگرام میں اوورلیپس اس بات کی نشاندہی کرتے ہیں کہ بی سی اے ماڈل PLSR ماڈل سے زیادہ موزوں نظر آتا ہے، سابقہ ​​زیادہ تکرار کی نمائش کرتا ہے۔ BCA ماڈل کے گتانک اور اینٹی آکسیڈینٹ قابلیت IC50 اقدار کا تجزیہ RDA کے ذریعے کیا گیا۔ جیسا کہ شکل 8 میں دکھایا گیا RDA، A1، A3، اور A6 HM اور HR سے مثبت طور پر اینٹی آکسیڈینٹ اشاریہ جات سے متعلق ہے، سوائے اس کے کہ A3 کا تعلق ہائیڈروکسیل ریڈیکل سکیوینجنگ صلاحیت سے منفی طور پر ہے۔ WE سے A1 اور A6 کا DPPH اور سپر آکسائیڈ anion کے ساتھ مضبوط تعلق ہے۔ مختلف شکلوں سے نوٹ کی گئی A6 چوٹیاں DPPH، سپر آکسائیڈ اینون، اور ہائیڈروکسیل ریڈیکلز سے مضبوط ترین تعلق کو ظاہر کرتی ہیں۔ A1 اور A3 بھی اسی طرح کے کنکشن کی نمائش کرتے ہیں۔

تصویر 7

PLSR اور BCA ماڈل کے وین ڈایاگرام: (a) DPPH پرکھ۔ (ب) صفائی پرکھ۔ (c) اسکیوینگنگ پرکھ کا تجزیہ PLSR ماڈل کے ذریعہ کیا گیا تھا۔ (d) ڈی پی پی ایچ پرکھ۔ (e) صفائی پرکھ۔ (f) اسکیوینگنگ پرکھ کا تجزیہ BCA ماڈل کے ذریعہ کیا گیا۔ اوورلیپنگ سیکشن HM، WE، اور HR کے ذریعہ مشترکہ چوٹیوں کا شارڈ تھا۔

3.4 نیٹ ورک فارماکولوجی پر مبنی تجزیہ

3.4.1 سی ٹی نیٹ ورک کی تعمیر

جین کارڈز ڈیٹا بیس اور او ایم آئی ایم ڈیٹا بیس سے اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی سے متعلق کل 4359 اہداف حاصل کیے گئے تھے۔ ایک ہی وقت میں، فعال اجزاء کو TCMSP ڈیٹا بیس اور SwissTargetPrediction ڈیٹا بیس سے اسکرین کیا گیا تھا۔ پھر، یونی پورٹ ڈیٹا بیس کے ذریعے 198 اہداف کو اکٹھا کیا گیا اور معیاری بنایا گیا۔ فعال اجزاء اور اینٹی آکسیڈینٹ سے متعلق بیماریوں کے ذریعہ 159 ٹارگٹ جین مشترکہ تھے (شکل S1 دیکھیں)۔ سی ٹی نیٹ ورک مرکبات اور کلیدی جین کے اہداف (شکل 9) کے مابین ارتباط کو واضح کرنے کے لئے بنایا گیا تھا۔

شکل 9 CT نیٹ ورک۔ نیٹ ورک نے فعال اجزاء اور کلیدی جین کے اہداف کے درمیان ارتباط ظاہر کیا۔

3.4.2 پی پی آئی نیٹ ورک کی تعمیر اور کلیدی اہداف کی اسکریننگ

پی پی آئی کو STRING ڈیٹا بیس (شکل 10) کا استعمال کرتے ہوئے تصور کیا گیا تھا۔ نیٹ ورک میں 159 نوڈس اور 2528 کنارے شامل تھے۔ پورے تعامل کے نیٹ ورک میں، زیادہ ٹارگٹ پوائنٹس کے ساتھ جڑنے والے اجزاء یا نوڈس کلیدی جز یا ہدف جین ہو سکتے ہیں جو C. tubulosa میں اینٹی آکسیڈینٹ کردار ادا کرتا ہے۔ نتائج کو ڈاؤن لوڈ کیا گیا اور تصور کے لیے Cytoscape میں متعارف کرایا گیا۔ DC قدر جتنی زیادہ ہوگی، رنگ اتنا ہی گہرا ہوگا، اور مشترکہ اسکور کی قدر جتنی زیادہ ہوگی، کنارے اتنا ہی گاڑھا ہوگا۔ ہم نے پایا کہ RAC-alpha serine/threonine-protein kinase (AKT1)، interlukin-6 (IL6)، tumor necrosis factor (TNF)، اور vascular endothelial growth factor A (VEGFA) مرکزی طور پر واقع تھے (شکل 11)، اس بات کی نشاندہی کرتے ہوئے کہ وہ اہم اہداف تھے جب فعال اجزاء نے اینٹی آکسیڈینٹ اثر ڈالا۔ یہ اطلاع دی جاتی ہے کہ ایکناکوسائیڈ مائٹوجن ایکٹیویٹڈ پروٹین کناسز (MAPK) اور AKT اور ان کی فاسفوریلیٹ شکلوں کے ضابطے کے ذریعے مائٹوکونڈریل ڈیسفکشن کو کم کرتا ہے [43]۔ محققین نے قیاس کیا کہ C. tubulosa کے glycosides کا antidiabetic اثر PhGs کی اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی کی وجہ سے ہو سکتا ہے جو کہ IL-6 اور TNF- [44] جیسی proinflammatory cytokines کو کم کر کے۔ اس کے علاوہ، echinacoside angiogenesis [45] کو روکنے کے لیے VEGFA کے اظہار کو کم کرکے رحم کے کینسر کے خلیوں کی نشوونما کو روک سکتا ہے، جو ROS کے لیے ROS سسٹم سے قریبی تعلق رکھتا ہے VEGF سگنلنگ [46] کے اظہار کو اکساتا ہے۔

شکل 10 پی پی آئی نیٹ ورک۔

3.4.3 افزودگی تجزیہ اور CTP نیٹ ورک اسٹیبلشمنٹ

ممکنہ اینٹی آکسیڈینٹ مرکبات متعدد حیاتیاتی افعال پر کام کرتے ہیں، بشمول بی پی، سی سی، اور ایم ایف۔ شکل 12(a) میں، سب سے اوپر 10 راستے دکھائے گئے ہیں۔ پی پی آئی نیٹ ورک کے پیش گوئی کردہ اہداف نے بنیادی طور پر بہت سے حیاتیاتی عملوں کا جواب دیا، جیسے نامیاتی سائیکلک مرکبات، زینو بائیوٹک محرک، غیر نامیاتی مادہ، آکسیجن کی سطح، اور سیلولر اجزاء کی نقل و حرکت کا مثبت ضابطہ۔ سیلولر اجزاء کے تجزیہ سے پتہ چلتا ہے کہ جین بنیادی طور پر جھلی کے بیڑے، ایکسٹرا سیلولر میٹرکس، سیکرٹری گرینول لیمن، ٹرانسکرپشن ریگولیٹر کمپلیکس، اور سیل کے apical حصے سے متعلق تھے۔ یہ اہداف بہت سے سالماتی افعال میں بھی شامل ہیں، جن میں ڈی این اے بائنڈنگ ٹرانسکرپشن فیکٹر بائنڈنگ، پروٹین ہوموڈائمرائزیشن سرگرمی، پروٹین ڈومین مخصوص بائنڈنگ، اور سائٹوکائن ریسیپٹر بائنڈنگ شامل ہیں۔

شکل 12 افزودگی کا تجزیہ: (a) GO افزودگی کا تجزیہ۔ (b) KEGG افزودگی کا تجزیہ۔

ان بڑے حبس کے حیاتیاتی افعال کی چھان بین کے لیے، راستے کی افزودگی کا تجزیہ کیا گیا۔ KEGG افزودگی کے نتائج سے، ایک بلبلہ خاکہ تیار کیا گیا تھا تاکہ ٹاپ 20 راستے دکھائے۔ جگہ جتنی بڑی تھی، راستے میں زیادہ جینز شامل تھے۔ جیسا کہ شکل 12(b) میں دکھایا گیا ہے، C. tubulosa کے کلیدی راستے کینسر، لپڈ اور atherosclerosis کے راستے، ذیابیطس کی پیچیدگیوں میں AGE-RAGE سگنلنگ پاتھ وے، کیمیکل کارسنوجنیسیس — رسیپٹر ایکٹیویشن، اور MAPK سگنلنگ پاتھ وے سے متعلق تھے۔ اپوپٹوسس اور سیلولر ریڈوکس ہومیوسٹاسس پر C. tubulosa کے اثرات کی چھان بین کی گئی۔ اعداد و شمار بتاتے ہیں کہ C. tubulosa اینٹی کولون کینسر تھراپی کے لیے ایک امید افزا امیدوار ہو سکتا ہے [47]۔ C. deserticola کا عرق عمر رسیدہ لوگوں میں پایا جاتا ہے [48]۔

شکل 13 راستوں اور ان کے متعلقہ اہداف کے درمیان تعلق اور اوور لیپنگ ہدف کے جینز اور C. tubulosa کے حیاتیاتی طور پر فعال اجزاء کے درمیان تعلق کو واضح کرتا ہے۔ CTP نیٹ ورک کا ایک عالمی منظر تیار کیا گیا، جس میں 12 اجزاء، 159 اہداف اور 20 راستے شامل تھے۔ زیادہ تر اہداف امیدواروں کے فعال مرکبات کے ذریعہ شیئر کیے گئے تھے۔ اعلی انٹرکنیکشن ڈگریوں کے ساتھ یہ امیدوار فعال اجزاء CTP نیٹ ورک کے اعلی باہمی ربط کے لئے ذمہ دار تھے، خاص طور پر quercetin (ڈگری = 131)۔ زیادہ تر اہداف، جیسے کہ AKT1، IL6، TNF، اور VEGFA، کو کینسر کے راستوں سے وابستہ KEGG راستوں پر نقشہ بنایا گیا تھا۔

شکل 13 CTP نیٹ ورک۔

4. نتائج

اس مطالعہ میں، ہم نے بنیادی طور پر پیچیدہ حالات کی چھان بین کی جب HM، WE، اور HR کے درمیان سپیکٹرم-اثر تعلقات پر غور کیا گیا۔C. tubulosa. HPLC فنگر پرنٹس اورینٹیآکسیڈینٹ assessHs، WEs، اور HRs کے درمیان فرق کی نشاندہی کرنے کے لیے استعمال کیا گیا تھا۔C. tubulosa. HPLC فنگر پرنٹس کے مطابق، Hs، WEs، اور HRs کے 11 بیچوں میں 11 چوٹیاں عام تھیں۔ جینیپوسیڈک ایسڈ،echinacoside, verbascoside, tubuloside A، اورisoacteosideان چوٹیوں کے درمیان شناخت کیا گیا تھا۔ ان پانچ اجزاء کے مواد کا تعین کیا گیا تھا۔ اس کے علاوہ، کے اینٹی آکسائڈنٹ اثراتC. tubulosaHs، WEs، اور HRs پیچیدہ مینوفیکچرنگ حالات کی وجہ سے کیمیائی مرکبات میں تبدیلی کی وجہ سے مختلف ہوتے ہیں۔ متنوع شماریاتی ماڈلز کی بنیاد پر، سپیکٹرم-اثر تعلقات کے مطالعہ نے اشارہ کیا کہ چوٹی A6 تین اقسام میں سب سے فیصلہ کن جزو ہو سکتا ہے۔C. tubulosa. یہ مطالعہ نیٹ ورک فارماسولوجی پر مبنی تھا تاکہ ممکنہ میکانزم کو تلاش کیا جا سکے۔C. tubulosaپراینٹی آکسیڈیشنمرکبات کی اسکریننگ، اہم اہداف کی پیشین گوئی، نیٹ ورکس کی تعمیر، اور افزودگی کے تجزیہ کے ذریعے۔ ہمارے نتائج جڑی بوٹیوں کی باقیات اور اس کی صلاحیت کو ری سائیکل کرنے کے لیے ایک نظریاتی بنیاد فراہم کرتے ہیں۔C. tubulosaکے علاج میںاینٹی آکسیڈینٹ سے متعلق بیماریاں.