الکحل کے لیے مخصوص ٹرانسکرپشنی ڈائنامکس آف میموری ری کنسولیڈیشن اور ری لیپس حصہ 2

الکحل کی یادداشت کی بازیافت نے آرک اور ای جی آر 1 کے ایم آر این اے اظہار میں تیز لیکن عارضی اپ گریجولیشن کو متحرک کیا، لیکن ڈی ایچ (تصویر 2C–E، I) میں Bdnf کا نہیں۔

جیسے جیسے وقت گزرتا ہے، لوگ رفتہ رفتہ بھولنے کے اسرار کی نئی سمجھ حاصل کرتے ہیں۔ اس عمل میں، ایک نئی ٹیکنالوجی میموری کی بازیافت آہستہ آہستہ ایک تحقیقی ہاٹ سپاٹ بن گئی ہے۔

تو کیا الکحل میموری کی بازیافت اور میموری کی کارکردگی کے درمیان کوئی تعلق ہے؟ آؤ اب ایک نظر ڈالیں! سب سے پہلے، ہمیں واضح ہونے کی ضرورت ہے: الکحل میموری کی بازیافت کوئی الگ ٹیکنالوجی نہیں ہے۔ یہ ایک ایسی ٹیکنالوجی ہے جو الکحل کے ذریعے دماغ کے نیوران کو متاثر کرتی ہے۔ یہ عمل دماغ میں کچھ "سونے والی" یادوں کو متحرک کر سکتا ہے، جس سے ہم ان یادوں کو تازہ کر سکتے ہیں۔

دوم، ہمیں یہ جاننے کی ضرورت ہے کہ یادداشت کو بہتر بنانا ہمیں مزید چیزوں کو "یاد رکھنے" کی اجازت نہیں دیتا بلکہ مختلف طریقوں سے یادوں کو دوبارہ حاصل کرنے اور دوبارہ تشکیل دینے کا عمل ہے۔ یہ عمل ہمیں اس علم کو بہتر طور پر مضبوط کرنے اور سمجھنے میں مدد دے سکتا ہے جو ہم نے سیکھا ہے، اس طرح ہماری یادداشت بہتر ہوتی ہے۔

لہذا، ہم یہ نتیجہ اخذ کر سکتے ہیں کہ الکحل میموری کی بازیافت اور میموری کی کارکردگی کے درمیان تعلق ہے۔ جب ہم شراب پینے کے بعد پچھلی یادوں کو دوبارہ نکالنے کے لیے اس ٹیکنالوجی کا استعمال کرتے ہیں، تو ہم ان یادوں کو دوبارہ مضبوط کرنے کے عمل سے گزر رہے ہوتے ہیں، اس طرح ہماری یادداشت ایک خاص حد تک بہتر ہوتی ہے۔

یقینا، ہمیں یہ بھی یاد رکھنا چاہیے کہ الکحل کی یادداشت کی بازیافت یادداشت کو بہتر بنانے کے لیے دیرپا اور قابل اعتماد تکنیک نہیں ہے۔ اگر ہم طویل عرصے تک بہترین یادداشت رکھنا چاہتے ہیں تو ہمیں روزانہ مطالعہ اور زندگی کے ذریعے یادداشت کی تربیت کی دیگر تکنیکوں کے ساتھ مل کر اپنی یادداشت کو مسلسل مضبوط اور بہتر کرنے کی ضرورت ہے۔

اس عمل میں، ہمیں اپنے سیکھنے کی حوصلہ افزائی اور یادداشت کی صلاحیت کو بہتر طور پر متحرک کرنے کے لیے ہر وقت ایک پرامید رویہ برقرار رکھنے کی ضرورت ہے۔ لہٰذا، آئیے ہم یادداشت کی تربیت کا فعال طور پر سامنا کریں، خود کو غیر متزلزل بنائیں، اور یادداشت کو مسلسل بہتر بنانے کے راستے پر ہمت سے آگے بڑھیں! یہ دیکھا جا سکتا ہے کہ ہمیں یادداشت کو بہتر بنانے کی ضرورت ہے، اور Cistanche deserticola نمایاں طور پر یادداشت کو بہتر بنا سکتا ہے، کیونکہ Cistanche deserticola نیورو ٹرانسمیٹر کے توازن کو بھی کنٹرول کر سکتا ہے، جیسے کہ acetylcholine کی سطح میں اضافہ اور ترقی کے عوامل۔ یہ مادے یادداشت اور سیکھنے کے لیے بہت اہم ہیں۔ اس کے علاوہ، گوشت خون کے بہاؤ کو بھی بہتر بنا سکتا ہے اور آکسیجن کی ترسیل کو فروغ دیتا ہے، جو اس بات کو یقینی بنا سکتا ہے کہ دماغ کو کافی غذائی اجزاء اور توانائی ملے، اس طرح دماغی قوت اور برداشت کو بہتر بنایا جا سکتا ہے۔

خاص طور پر، الکحل میموری کی بازیافت کے بعد آرک اور ای جی آر 1 ایم آر این اے کی سطح 30 منٹ تک پہنچ گئی، اور میموری کی بازیافت کے بعد 60 منٹ کے اندر بیس لائن لیول پر واپس آگئی، بالکل NoRetrieval گروپ کی طرح۔
ایم پی ایف سی میں، الکحل کی یادداشت کی بازیافت نے آرک اور ای جی آر 1 میں عارضی اپ گریجولیشن کا سبب بنتا ہے لیکن Bdnf mRNAexpression نہیں، DH (تصویر 2G، H، J) میں دکھائے جانے والے ایکسپریشن پیٹرن کی طرح۔

ڈی ہینڈ ایم پی ایف سی میں آرک اور ای جی آر 1 ایم آر این اے ایکسپریشن میں اضافہ ٹرانسکرپشن فیکٹر سی اے ایم پی رسپانس ایلیمنٹ بائنڈنگ پروٹین (سی آر ای بی) (فگر ایس 2) کے فاسفوریلیشن سے پہلے تھا، جو پہلے ان جینوں کے اظہار کو منظم کرنے کے لیے دکھایا گیا تھا [53]۔

ایک ساتھ، نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ الکحل سے متعلق یادوں کی بازیافت نے آرک اور ای جی آر 1 کے اظہار میں وقت پر منحصر اپ گریجولیشن کی حوصلہ افزائی کی لیکن ڈی ایچ اور ایم پی ایف سی میں بی ڈی این ایف کی نہیں، اس امکان کو بڑھایا کہ ان جینوں کا بدلا ہوا اظہار الکحل کی بحالی میں شامل ہوسکتا ہے۔ یادیں

الکحل سے وابستہ یادوں کی بازیافت ڈی ایچ میں اے آر سی پروٹین کی سطح کو بڑھاتی ہے۔

ARC کا Synaptic plasticity [54] اور نیورونل کمیونیکیشن [55] میں ایک اچھی طرح سے قائم کردار ہے، اور اس کو پہلے مختلف یادوں کی بحالی میں اپنا کردار ادا کرتے ہوئے دکھایا گیا تھا[5, 22, 46, 47]۔

سب سے زیادہ متعلقہ طور پر، ہم نے پہلے دکھایا تھا کہ الکحل میموری کی بازیافت نے امیگڈالینڈ اور ایم پی ایف سی میں اے آر سی پروٹین کی سطح میں اضافہ کیا [5]۔ اب ہم نے پوچھا کہ کیا ڈی ایچ میں اے آر سی پروٹین کی سطح میں بھی اضافہ ہوا تھا، آرک ایم آر این اے کی اپ گریجولیشن کو دیکھتے ہوئے جو الکحل میموری کی بازیافت (تصویر 2 سی) سے متاثر ہوا تھا۔

اس کے مطابق، چوہوں کو الکحل-سی پی پی کا اظہار کرنے کی تربیت دی گئی، جیسا کہ اوپر بیان کیا گیا ہے (فگر ایس 3 اے، بی)۔ سی پی پی ٹیسٹ کے ایک دن بعد، الکحل کی یادیں بازیافت کی گئیں، اور دماغ کے ٹشوز 60، 120، یا 360 منٹ بعد جمع کیے گئے۔

ہمیں معلوم ہوا کہ DH میں اے آر سی پروٹین کی سطح نے الکحل کے بعد میموری کی بازیافت میں 60 منٹ کا اضافہ کیا، اگلے گھنٹے کے اندر بنیادی سطح پر واپس آ گیا (شکل S3)۔ ایک ساتھ، یہ نتائج بتاتے ہیں کہ الکحل کی یادداشت کی بازیافت ڈی ایچ میں آرک ایم آر این اے اور اے آر سی پروٹین ایکسپریشن دونوں کو بڑھاتی ہے۔

ڈی ایچ میں اے آر سی اظہار کو کم کرنے سے الکحل میموری کی بحالی میں خلل پڑتا ہے۔

اگر الکحل میموری کی بازیافت کے بعد DH میں ARC اظہار کا اضافہ الکحل میموری کی بحالی کے لئے ضروری ہے، تو الکحل میموری کی بازیافت کے بعد اس کی کمی کو اس طرح کی یادداشت میں خلل ڈالنا چاہئے، جس کے نتیجے میں الکحل-CPP اظہار کا خاتمہ ہوتا ہے۔

الکحل میموری کی بحالی کے دوران DH میں ARC کی سطح کو کم کرنے کے لیے، ہم نے Arc mRNA [56] کے خلاف ہدایت کردہ antisenseoligodeoxynucleotides (AS-ODN) کا استعمال کیا۔ Arc AS-ODN کا استعمال کرتے ہوئے میموری کو یکجا کرنے اور بحالی سے متعلق دماغی علاقوں میں ARC کی ناک ڈاؤن کو پہلے کنسولیڈیشن میں خلل کے لیے دکھایا گیا تھا۔ ناپسندیدہ اور بھوک سے متعلق یادوں کی [46, 47, 56, 57] اور بحالی سے یادوں کو بحال کیا جاتا ہے [46, 47, 57]، نیز مورفین سے وابستہ میموری کی بحالی کو خراب کرنا [22]۔

یہ جانچنے کے لیے کہ آیا ARC ڈاؤن ریگولیشن الکحل کی یادداشت کی بحالی میں خلل ڈالتا ہے اور الکحل کی تلاش کو ختم کرتا ہے، ہم نے چوہوں کو الکحل-CPP دکھانے کے لیے تربیت دی (تصویر 3B، افراد کے ڈیٹا کے لیے تصویر S4 دیکھیں)۔

سی پی پی ٹیسٹ 1 کے بعد، چوہوں کو آرک AS-ODN یا کنٹرول سکیمبلڈ (SCR)-ODN کا انٹرا ہپپوکیمپلین فیوژن موصول ہوا۔ چونکہ AS-ODN نے انفیوژن کے 5 گھنٹے بعد ARC پروٹین کی سطح کو کم کر دیا [57] (Figure S5, AS-ODN کی توثیق)، الکحل کی یادداشت کو انفیوژن کے 4 بعد دوبارہ حاصل کیا گیا، جس سے ARC میں اضافے کی چوٹی کے قریب، بازیافت کے ایک گھنٹہ بعد ڈاؤن ریگولیشن ہونے کی اجازت دی گئی۔ پروٹین کی سطح الکحل میموری کی بازیافت (فگر S3C) کے ذریعہ پیدا ہوتی ہے۔

جب اگلے دن پلیس پریفرنس کا تجربہ کیا گیا تو ہم نے پایا کہ الکحل-سی پی پی ان چوہوں میں ختم کر دی گئی تھی جنہوں نے آرک AS-ODN حاصل کیا تھا، جبکہ SCRODN سے علاج شدہ چوہوں نے پھر بھی CPP (تصویر 3B) پیش کیا۔

اس طرح ہمارے نتائج یہ بتاتے ہیں کہ آرک AS-ODN کے انٹرا ہپپوکیمپل انفیوژن نے میموری کی بازیافت کی وجہ سے اے آر سی پروٹین کی سطح میں اضافے کو روک کر الکحل کی یادوں کی بحالی میں خلل ڈالا۔

مزید جانچنے کے لیے کہ آیا یہ میموری میں خلل خاص طور پر بعد از بازیافت ARC انڈکشن کی ناکہ بندی کی وجہ سے تھا، ہم نے آرک AS-ODN انفیوژن کے لیے نظریاتی 5–6h [9, 10] کے اندر دوسری بار پوائنٹ کا انتخاب کیا۔

یہ دیکھتے ہوئے کہ اے آر سی پروٹین کے اظہار میں اضافہ میموری کی بازیافت کے بعد 1 گھنٹہ تک پہنچ گیا اور میموری بازیافت کے بعد بیس لائن 2 گھنٹے پر واپس آگیا (جیسا کہ شکل S3C میں اشارہ کیا گیا ہے) ، ہم نے میموری بازیافت کے بعد اے آر سی پروٹین ایکسپریشن 3 گھنٹے کو نشانہ بنایا۔

اس طرح، ہم نے میموری کی بازیافت سے پہلے DH 2 h میں Arc ASODN یا کنٹرول SCR-ODN داخل کیا، جس سے 5 گھنٹے بعد ARC کی سطح کو کم کرنے کی توقع ہے، یعنی 3 بعد میموری کی بازیافت (فگر S5B)۔

ایک دن بعد کی گئی جگہ کی ترجیحی جانچ میں، ہم نے پایا کہ دونوں گروپ شراب-CPP (تصویر 3C) کو ظاہر کرتے رہے۔

ان نتائج سے ظاہر ہوتا ہے کہ اے آر سی کی سطح کو اس کی بازیافت پر منحصر شامل کرنے سے پہلے کی کمی الکحل کی یادوں کے جاری بحالی میں مداخلت نہیں کرتی ہے۔ مزید برآں، یہاں ہم یہ ظاہر کرتے ہیں کہ اے آر سی پر منحصر "تقسیم ونڈو" 3 گھنٹے کے بعد میموری کی بازیافت سے زیادہ نہیں رہتی ہے۔

"ری کنسولیڈیشن ونڈو"، یعنی میموری کی بازیافت کے بعد 5-6 گھنٹے سے زیادہ [9, 10]، بعد میں میموری کے اظہار کو متاثر نہیں کرے گا۔

اس مفروضے کو جانچنے کے لیے، ہم نے میموری کی بازیافت (تصویر 3D) کے بعد DH 4 h میں Arc AS-ODN یا SCRODN کو کنٹرول کیا، جس سے میموری کی بازیافت کے 9 گھنٹے بعد ARC پروٹین کے اظہار کو متاثر کرنے کی توقع ہے (یعنی، 5 گھنٹے بعد؛ شکل S5)۔

ایک دن بعد کی جانچ سے یہ بات سامنے آئی کہ دونوں گروپوں نے الکحل کے جوڑے والے ٹوکری کے لیے مضبوط ترجیحات کا مظاہرہ کیا۔ یہ نتائج بتاتے ہیں کہ میموری کی بازیافت کے کئی گھنٹے بعد اے آر سی پروٹین ایکسپریشن کو کم کرنا (یعنی اے آر سی پر منحصر ری کنسولیڈیشن ونڈو کے باہر) الکحل سی پی پی کے اظہار کی بنیادی یادوں کو متاثر نہیں کرتا ہے۔

ایک ساتھ مل کر، یہ نتائج بتاتے ہیں کہ الکحل کی یادوں کو دوبارہ مضبوط کرنے کے لیے الکحل کی یادداشت کی بازیافت کے فوراً بعد مشاہدہ کیے جانے والے ARC پروٹین ایکسپریشن کی ہپپوکیمپلو ریگولیشن کی ضرورت ہوتی ہے، کیونکہ ARCپروٹین کی سطح کی ان بازیافت سے حوصلہ افزائی میں اضافے کی روک تھام الکحل کی تلاش میں کمی کا باعث بنتی ہے، ممکنہ طور پر یادداشت کو تحلیل کرنے کے عمل میں خلل پڑتا ہے۔

بازیافت کے بعد، بھوک بڑھانے والی الکحل اور غیر الکحل سے وابستہ یادیں ایک جیسی آرک اور ای جی آر 1 ٹرانسکرپشنی حرکیات کا اشتراک کرتی ہیں۔

الکحل کی یادوں کو اکٹھا کرنے میں آرک اور ای جی آر 1 اظہار کو شامل کرنے والی ہماری دریافتیں پچھلے مطالعات کے مطابق ہیں جن میں یہ دکھایا گیا ہے کہ یہ آئی ای جی مختلف قسم کی میموری کی بحالی میں ملوث ہیں [19، 22، 46، 47، 57]۔

ہم نے فرض کیا کہ ان IEGs کی نقل اور ترجمہ الکحل کے لیے مخصوص نہیں ہے، بلکہ یہ دوبارہ متحرک یادوں کی پروسیسنگ کے لیے عام بنیادی میکانزم میں ایک کردار ادا کر سکتا ہے، بشمول بھوک کی یادیں [16]۔ اس امکان کو مزید دریافت کرنے کے لیے، یہ جانچا گیا کہ آیا اسی طرح کے سی پی پی پروٹوکول کے ذریعے غیر الکوحل، سوکروز سے وابستہ یادوں کی بازیافت آرک اور/یا Egr1mRNA اظہار کو بدل دے گی، جیسا کہ اس نے الکحل سے متعلق یادوں کے ساتھ کیا تھا۔

اس کے لیے، ہم نے سب سے پہلے چوہوں کو ایک sucrose-CPP طریقہ کار میں تربیت دی جو اوپر استعمال کیے گئے الکحل-CPP طریقہ کار کی طرح ہے، جس میں سی پی پی اپریٹس کے ایک ڈبے کو سوکروز کے چھروں کے رضاکارانہ استعمال کے ساتھ جوڑا جاتا ہے (تصویر 4A، تجرباتی ڈیزائن)۔

چار جوڑیوں کے بعد، چوہوں نے سوکروز سے وابستہ کمپارٹمنٹ (تصویر 4B) کے لیے ایک مضبوط ترجیح ظاہر کی۔ اگلا ، سوکروز سے وابستہ میموری کو سوکروز کے جوڑے والے ٹوکری میں دوبارہ نمائش کے ذریعہ بازیافت کیا گیا۔ یادداشت کی بازیافت کے 10، 30، یا 60 منٹ بعد بازیافت اور کوئی بازیافت کنٹرول گروپس سے دماغ کے ٹشوز جمع کیے گئے تھے۔ پھر ڈی ایچ اور ایم پی ایف سی میں آرک اور ای جی آر 1 ایم آر این اے کی سطح کا اندازہ کیا گیا۔

ہم نے پایا کہ سوکروز میموری کی بازیافت نے ڈی ایچ اور ایم پی ایف سی (تصویر 4 سی – ایف) دونوں میں آرک اور ای جی آر 1 ایم آر این اے اظہار کی تیز رفتار اور عارضی اپ گریجشن کا سبب بنی۔ جیسا کہ تصویر میں ڈیشڈ لائنوں سے دکھایا گیا ہے۔

4C–F، دماغ کے دونوں خطوں میں ایم آر این اے ایکسپریشن اپ گریجولیشن کے نمونے، جو سوکروز یادوں کی بازیافت سے متاثر ہوتے ہیں، الکحل کی یادداشت کی بازیافت پر مشاہدہ کیے گئے ان جینوں کے اپ گریجشن سے مشابہت رکھتے ہیں۔

اس طرح یہ نتائج تجویز کرتے ہیں کہ ڈی ایچ اور ایم پی ایف سی میں آرک اور ای جی آر 1 ایم آر این اے اظہار میں تیز رفتار اور عارضی اپ گریجولیشن الکحل اور سوکروز سے وابستہ یادوں دونوں کی بازیافت سے وابستہ ہے۔

میموری کی بازیافت کے لئے الکحل سے متعلق نقل کی حرکیات کی خصوصیت: ایک ٹرانسکرپٹومک تجزیہ

ہمارے اس کھوج کو دیکھتے ہوئے کہ الکحل اور غیر الکحل سے وابستہ دونوں یادوں کو بازیافت کرنے پر آرک اور ای جی آر 1 ٹرانسکرپشن کو تبدیل کیا گیا تھا، ہم نے اس کے بعد ڈی ایچ اور ایم پی ایف سی (تصویر 5 اے) کے آر این اے سیکنالائسز کرکے الکحل میموری کی بازیافت کے لئے مخصوص ٹرانسکرپٹومک دستخطوں کی شناخت کرنے کی کوشش کی۔ ڈیزائن)۔

اس مقصد کے لیے، الکحل سی پی پی کی تربیت (تصویر 5 بی) کے بعد، الکحل سے وابستہ یادیں بازیافت کی گئیں (بغیر بازیافت کنٹرول گروپ کے ساتھ)۔ TheDH اور mPFC کو 30 منٹ بعد جمع کیا گیا اور RNAseq تجزیہ (تصویر 5C، D) کے لیے کارروائی کی گئی۔

For more information:1950477648nn@gmail.com