کاشت شدہ Cistanche Deserticola YC Ma سے پانی کے نچوڑ بطور پولی سیکرائیڈ معاون مدافعتی ردعمل کو فروغ دیتے ہیں۔

رابطہ:joanna.jia@wecistanche.com/ واٹس ایپ: 008618081934791

Shuangshuang Feng a,1, Xiumei Yang a, Xiang Weng a,1, Bin Wang b, Ailian Zhang a,*

خلاصہ

ایتھنوفارماکولوجیکل مطابقت:ہربل پولی سیکرائڈز نے زبردست نمائش کی ہے۔مدافعتی- صلاحیت کو بڑھانا۔ مؤثر ویکسین تیار کرنے کے لیے معاونین ایک اہم ذریعہ ہیں۔ ہمارے پچھلے مطالعہ میں، ایک پانی میں گھلنشیل پولی سیکرائڈ جنگلی سے نکالا گیا تھا۔Cistanche deserticola YC Maقوی immunostimulatory سرگرمی دکھایا.

مطالعہ کا مقصد:اس مطالعہ میں،مدافعتیپروفائلز اور کاشت کے پانی کے عرق کی افادیتCistanche deserticola YC MaOvalbumin (OVA) کے خلاف ICR چوہوں پر (AECCD) کی تحقیقات کی گئیں۔ وٹرو تجربات میں، AECCD کے ذریعہ ممکنہ DC ایکٹیویشن میکانزم کا جائزہ لیا گیا۔

مواد اور طریقے: اے ای سی سی ڈیگرم پانی کا استعمال کرتے ہوئے نکالا گیا جس کے بعد ایتھنول کے ذریعہ خام پولی سیکرائڈز کو تیز کردیا گیا۔ چوہوں کو سب سے پہلے OVA (10 ug فی ماؤس) اکیلے یا OVA (10 ug فی ماؤس) کے ساتھ بالترتیب AECCD (200، 400، اور 800 ug فی ماؤس) کی مختلف خوراکوں پر مشتمل 1 اور 14 دنوں میں حفاظتی ٹیکے لگائے گئے اور اس کی شدت اور حرکیات اس کے بعد اینٹی باڈیز اور سیل ثالثی ردعمل کا جائزہ لیا گیا۔

نتائج: اے ای سی سی ڈیملے جلے Th1/Th2 جوابات کے ساتھ بھرپور اور طویل مدتی IgG جوابات اور Th سے وابستہ سائٹوکائنز (CD4 پلس IL-4، CD4 پلس IFN-، اور CD8 پلس IFN-) کی اپ ریگولیٹڈ لیولز۔ مزید یہ کہ اے ای سی سی ڈی نے مضبوط سیلولر کی حوصلہ افزائی کی۔مدافعتیاسپلینوسائٹ پھیلاؤ میں اضافے کے ساتھ ساتھ چالو T سیل کے ردعمل کی خصوصیت۔ خاص طور پر، AECCD نے ڈینڈرٹک سیلز (DCs) کی پختگی کو نمایاں طور پر بڑھایا اور Tregs کو روکا۔ وٹرو تجربات میں، ابتدائی ٹیسٹوں نے اشارہ کیا کہ اے ای سی سی ڈی نے فینوٹائپک میچوریشن، سائٹوکائن سیکشن، اور آلوسٹیمولیٹری سرگرمی کو فروغ دے کر ڈی سی ایکٹیویشن کی حوصلہ افزائی کی۔ ٹول نما رسیپٹر 4 (TLR4) DCs کے لیے AECCD کو براہ راست باندھنے کے لیے ایک ضروری رسیپٹر تھا۔ NF-κB کے روکنے والوں نے CD40، CD80، CD86، اور MHC-II کے اظہار کی سطح کو کم کیا اور DCs کے ذریعے IFN-، TNF-، اور IL-6 کی پیداوار کو کم کیا۔

نتیجہ:آخر میں، ان نتائج نے تجویز کیا کہاے ای سی سی ڈیطاقتور اور پائیدار اینٹیجن مخصوص کو نکال سکتا ہے۔مدافعتیDC ایکٹیویشن کے ذریعے ردعمل، جو TLR4-متعلقہ NF-κB پاتھ وے کے ذریعے میچوریشن مارکروں اور سائٹوکائن ایکسپریشن کے ریگولیشن میں شامل تھا۔ مطالعہ سے پتہ چلتا ہے کہ AECCD ایک ممکنہ امیونوموڈولیٹر ہے۔

Cistanche herbaبہتر کرتا ہےقوت مدافعت.

1. تعارف

بہت سے مطالعات نے تجویز کیا ہے کہ معاون ادویات مختلف متعدی بیماریوں جیسے HIV، COVID-19، انفلوئنزا، اور پاؤں اور منہ کی بیماری کے خلاف ویکسین کی افادیت کو بڑھا سکتے ہیں (Cao et al., 2020; Giuseppe et al., 2018) )۔ معاونین مدافعتی ردعمل کی مختلف اقسام اور وسعتوں کو آمادہ کر سکتے ہیں، لہذا ایک مناسب طور پر منتخب کردہ معاون مدافعتی ردعمل کو آمادہ کر سکتا ہے۔مدافعتیدیئے گئے پیتھوجین یا اینٹیجن کے لیے درکار ردعمل (ریڈ ایٹ ال۔، 2013)۔ قدرتی جڑی بوٹیوں کے عرق طویل عرصے سے روزمرہ کی زندگی یا صحت کی دیکھ بھال میں بڑے پیمانے پر استعمال ہوتے رہے ہیں۔ بہت سے معاملات میں، روایتی چینی ادویات (TCM) اور اس کے فعال اجزاء، خاص طور پر متعدد TCM پولی سیکرائڈز سے ماخوذ معاون، نے ویکسین کی افادیت کو نمایاں طور پر بہتر کیا۔ TCM پولی سیکرائڈز (Advax™، Astragalus polysaccharide، Ginseng polysaccharide، Lycium barbarum polysaccharide، اور Ganoderma lucidum polysaccharide) کے دیگر ملحقوں کے مقابلے میں کئی فوائد تھے، جیسے کہ بہتر حفاظت، بایو مطابقت، مضبوطمدافعتیاضافہ، اور کم رد عمل (لی اور وانگ، 2015؛ Schijns et al.، 2020)۔ TCM پولی سیکرائڈ پر مبنی مرکبات اور فارمولیشنز، لہذا، ضمنی امیدواروں کے طور پر صلاحیت رکھتے ہیں۔

Cistanche deserticola YC Ma(چینی میں روکونگرونگ) ایک روایتی چینی دوا ہے جو چینی فارماکوپیا میں درج ہے اور اسے چین میں سینکڑوں سالوں سے ٹانک فوڈ کے طور پر استعمال کیا جا رہا ہے (چینی فارماکوپیا کمیشن، 1992)۔ جدید فارماسولوجیکل اسٹڈیز نے اس کے متعدد فارماسولوجیکل اور امیونوموڈولیٹری ایپلی کیشنز کو دکھایا ہے (ڈونگ ایٹ ال۔، 2007؛ فو ایٹ ال۔، 2017)۔ ہمارے پچھلے مطالعے میں، جنگلی Cistanche deserticola YC Ma سے اخذ کردہ خام پولی سیکرائڈز نے اینٹیجن سے متعلق مخصوص مزاحیہ اور سیلولر ردعمل کو فروغ دیا اور ڈینڈرٹک سیلز (DCs) کی پختگی کو منظم کیا (Zhang et al.، 2018؛ Zhao et al.، 2019)۔ تاہم، جنگلی Cistanche deserticola YC Ma کو ضرورت سے زیادہ دریافت کیا گیا ہے اور اسے خطرے سے دوچار پرجاتیوں کے طور پر درج کیا گیا ہے۔Cistanche deserticola YC Maبڑے پیمانے پر لگایا گیا ہے اور بڑے پیمانے پر TCM وسائل کی ترقی اور استعمال میں استعمال ہوتا ہے۔ تاہم، کاشت شدہ Cistanche deserticola YC Ma کی ضمنی صلاحیت ابھی تک واضح نہیں ہے۔

DCs متعدی بیماریوں کے خلاف ضروری ریگولیٹرز ہیں۔ DCs کے چالو ہونے کے بعد، DCs پر سطح کے مالیکیولز اور پرو سوزش والی سائٹوکائنز متعلقہ ریسیپٹرز کے ساتھ تعامل کرتے ہیں تاکہ T خلیات کو چالو کیا جا سکے اور اینٹیجن سے متعلق مخصوص ردعمل اور سائٹوکائنز کی پیداوار کو اپنانے کی ہدایت کی جا سکے۔مدافعتیجوابات (بینچریو اور اسٹین مین، 1998)۔ یہ اطلاع دی گئی ہے کہ DCs پر ٹول نما رسیپٹر 4 (TLR4) ایک اہم پولی سیکرائڈ ریسیپٹر کے طور پر کام کرتا ہے (Park et al., 2014; Qi et al., 2016)۔ درحقیقت، بہت سے پولی سیکرائڈز DCs پر TLR4 کے ساتھ براہ راست یا بالواسطہ تعامل کر سکتے ہیں تاکہ نیچے کی دھارے والے نیوکلیئر فیکٹر-کپا B (NF-κB) کو چالو کیا جا سکے، جو کہ IFN-، TNF-، اور IL جیسے مختلف پروانفلامیٹری جینز کے اظہار کو آمادہ کر سکتا ہے۔ }} اور پیتھوجینز کو ختم کرنے کے لیے اشتعال انگیز ردعمل (Tian et al.، 2019؛ Zhou et al.، 2017؛ Zhu et al.، 2013)۔ لہذا، DCs اور NF-κB کا بیماری کے علاج کے ممکنہ اہداف کے طور پر بڑے پیمانے پر مطالعہ کیا گیا ہے۔

مطالعہ میں، ان ویوو (ICR چوہوں) کی حکمت عملی کے ساتھ، ہم نے سب سے پہلے کاشت شدہ پانی کے عرقوں کے مدافعتی اثرات کا جائزہ لیا۔Cistanche deserticola YC Ma(AECCD) مختلف خوراکوں (کم، درمیانے اور زیادہ) کے ساتھ OVA کے خلاف مدافعتی ردعمل پیدا کرنے کے لیے اور DCs کو چالو کرنے کے لیے ان وٹرو طریقے کی وضاحت کرتا ہے اور ڈاون اسٹریم ریسیپٹر سے متعلق راستے۔ ماؤس ماڈل کے ساتھ، ہم نے انکشاف کیا کہ AECCD نے IgG ٹائٹرز اور سیلولر کے ساتھ طویل مدتی اینٹی باڈی ردعمل کو فروغ دیا۔مدافعتیجواب. اہم بات یہ ہے کہ اے ای سی سی ڈی نے Th سے وابستہ سائٹوکائنز کی حوصلہ افزائی کی، خاص طور پر IFN- پروڈکشن، جس کی وجہ سے انفیکشنز کے خلاف Th1 ردعمل ہوا۔ شامل کرنے کا اثر ایک بہتر ڈی سی پختگی اور ٹریگز میں کمی کے ساتھ قریب سے منسلک تھا۔ میکانکی طور پر،اے ای سی سی ڈیTLR4-متعلقہ NF-κB پاتھ وے کے ذریعے DC ایکٹیویشن کو فروغ دیا۔ خلاصہ طور پر، مطالعہ نے انکولی ردعمل کو فروغ دینے میں AECCD کی قوی معاون سرگرمی کی تصدیق کی۔ اس مطالعہ نے AECCD پولی سیکرائڈ ایڈوینٹس کی ترقی کی بنیاد رکھی۔

2. مواد اور طریقہ

2.1 ری ایجنٹس

Ovalbumin (OVA)، 3-(4، 5-dimethylthiazol-2-yl)-2، 5-diphenyltetrazolium bromide (MTT)، polymyxin B (PMB)، concanavalin A (ConA)، lipopolysaccharide (LPS)، mitomycin C اور 3,3′,5,5′-Tetramethylbenzidine (TMB) سگما (USA) سے حاصل کیے گئے تھے۔ فیٹل بووائن سیرم (FBS) بائیولوجیکل انڈسٹریز سے خریدا گیا تھا۔ سیل کاؤنٹنگ کٹ-8 (CCK-8) Biosharp (چین) سے خریدی گئی تھی۔ بکری مخالف ماؤس IgG/IgG1/IgG2a-HRP کنجوگیٹس سدرن بائیوٹیک (USA) سے تھے۔ انجیکشن ایلم کا تعلق تھرمو سائنٹیفک پیئرس (USA) سے تھا۔ GM-CSF کا تعلق Peprotech (USA) سے تھا۔ فلوروسینٹلی لیبل والی اینٹی باڈیز (اینٹی CD3-PE، اینٹی CD4-APC، اینٹی CD8a-FITC، اینٹی CD44-PE، اینٹی CD62L-PE، اینٹی MHCII -FITC/Percp-cy5.5, anti-IL-4-PE, anti-IFN– -PE, anti-CD86-APC, anti-CD40-FITC/PE, اینٹی- CD11c-PE/FITC، اینٹی CD80-APC)، Golgistop، Cytofix/Cytoperm، اور Perm/Wash بفر سبھی BD بایو سائنس (USA) سے تھے۔ ریگولیٹری ٹی سیل سٹیننگ کٹ eBiosciences (USA) سے تھی۔ TAK-242 کا تعلق MedchemExpress (شنگھائی، چین) سے تھا۔ پی ڈی ٹی سی کا تعلق بیو ٹائم بائیو ٹیکنالوجی (چین) سے تھا۔ ملٹی اینالائٹ فلو پرکھ کٹ Biolegend (USA) سے تھی۔

2.2 AECCD کی تیاری

C. deserticola (ایک واؤچر نمونہ نمبر CD10041602) کی شناخت پروفیسر جیانگ ہی نے کی۔اے ای سی سی ڈیپانی نکالنے، ایتھنول کی بارش، اور کچھ معمولی ترمیم کے ساتھ ڈیپروٹینائزیشن کے طریقہ کار سے حاصل کیا گیا تھا (Zhang et al.، 2018)۔ مختصراً، کاشت شدہ C. deserticola کو پہلے کئی بار پانی سے نکالا گیا اور پھر 1:4 کے حجم کے تناسب کے مطابق ایتھنول ڈال کر خام پولی سیکرائڈز کو راتوں رات تیز کر دیا گیا۔ پھر حاصل کردہ خام پولی سیکرائڈز کو سیواگ طریقہ (Liu et al.، 2012) کے ذریعہ غیر فعال کیا گیا۔ چینی کی کل مقدار 76.82 فیصد پائی گئی جو اینتھرون سلفورک ایسڈ طریقہ (Dubois et al.، 1951) کے ساتھ تھی۔

cistanche مردانہ فوائدمیںقوت مدافعت

2.3۔ اورکت سپیکٹروسکوپک تجزیہ

نامیاتی فنکشنل گروپس کا تجزیہ کرنے کے مقصد کے لیے،اے ای سی سی ڈیKBr کے ساتھ اورکت (IR) سپیکٹرا پیمائش کے لیے چھروں میں دبایا گیا تھا۔ نمونوں کے IR سپیکٹرا کا تعین 4000–400 cm− 1 کے اندر کیا گیا تھا۔

2.4 Vivo تجربات میں

2.4.1 جانوروں کے حفاظتی ٹیکے

سنکیانگ میڈیکل یونیورسٹی (ارومکی، چین) کی خواتین C57BL/6 چوہوں اور ICR چوہوں (6 ہفتے پرانے) کو 3 دن کے لیے ہم آہنگ کیا گیا۔ تمام تجرباتی طریقہ کار سنکیانگ یونیورسٹی (BRGE-AE001) میں حیاتیاتی وسائل اور جینیاتی انجینئرنگ کی سنکیانگ کلی لیبارٹری کی جانوروں کے تجربات کی اخلاقیات پر کمیٹی کے ضوابط کی تعمیل میں کیے گئے تھے۔

چوہوں کو اکیلے OVA یا OVA کے ساتھ AECCD کے مختلف ارتکاز کے ساتھ حفاظتی ٹیکے لگائے گئے تھے اور 14 ویں دن کو مختلف گروپس کے مطابق اس طرح بڑھایا گیا تھا (ہر گروپ میں 6 چوہے): کنٹرول گروپ (0.9 فیصد NaCl)، OVA گروپ ( 10 ug OVA)اے ای سی سی ڈی-H گروپ (AECCD 800 ug)، OVA/ AECCD-L گروپ (10 ug OVA، AECCD 200 ug)، OVA/AECCD-M گروپ (10 ug OVA، AECCD 400 ug)، OVA/AECCD -H گروپ (10 ug OVA، AECCD 800 ug)، اور OVA/Alum گروپ (10 ug OVA، Alum100 ug)۔ 0.9 فیصد NaCl کے 100 μL میں ویکسین فارمولیشنز کو ہر ماؤس کی پچھلی جلد میں دو مختلف سائٹس (ہر سائٹ پر 50 μL) پر انجکشن لگایا گیا تھا۔ ویکسینیشن کے بعد، خون کے نمونے retro-orbital plexus سے جمع کیے گئے، اور IgG کا پتہ لگانے کے مزید تجزیے کے لیے سیرا کو −80 ◦C پر حاصل کر کے محفوظ کیا گیا۔ اسی ویکسینیشن پروٹوکول کے بعد اسپلینوسائٹ پھیلاؤ اور سائٹوکائن، ٹی سیل سب سیٹس، ڈی سی سرفیس مارکر اور ٹریگس کا پتہ لگایا گیا۔

2.4.2 اینٹی باڈی تجزیہ

OVA کے خلاف سیرم میں IgG ٹائٹرز کا تعین ELISA نے 14، 28، 42 اور 56 دنوں کو پہلے بیان کردہ بنیادی ویکسینیشن کے بعد کیا تھا (Zhang et al.، 2018)۔ IgG1 اور IgG2a کی پیمائش 21 ویں دن کی گئی۔ 450 nm/630 nm پر جذب ریڈر (Bio-Rad, USA) کا استعمال کرکے حاصل کیا گیا۔ اینٹی باڈی ردعمل کے نتائج کا اظہار IgG ٹائٹرز کے طور پر کیا جاتا ہے اور IgG1 اور IgG2a آاسوٹائپس کو اسی جذب کے طور پر ظاہر کیا جاتا ہے۔

2.4.3 Splenocyte پھیلاؤ پرکھ

چوہوں میں Splenocyte کے پھیلاؤ پرکھ کو مینوفیکچرر کی ہدایات کے مطابق CCK-8 پرکھ کٹ کے ساتھ انجام دیا گیا تھا۔ پہلے امیونائزیشن کے بعد 21 ویں دن، سپلینوسائٹس کو حفاظتی ٹیکوں والے چوہوں کی تلی سے الگ کر دیا گیا تھا اور اریتھروسائٹس کو پیسنے کے بعد لیس کیا گیا تھا۔ Splenocytes (1 × 106 خلیات/کنویں) کو OVA (10 ug/mL)، OVA323-339 (10 ug/mL)، ConA (10 ug/mL)، اور LPS (10 ug/mL) کے ساتھ متحرک کیا گیا تھا۔ دو دن اور خالی خلیوں کو کنٹرول کے طور پر استعمال کیا گیا تھا۔ پھیلاؤ کی سرگرمی کو محرک انڈیکس (SI) کے طور پر ظاہر کیا گیا تھا، جو 570/630 nm کی طول موج کے تحت ایک محرک سیل سے غیر محرک سیل کے جذب تناسب کا حساب لگایا گیا تھا۔

تصویر 1. AECCD کا FTIR سپیکٹرا۔

2.5 وٹرو تجربات میں

2.5.1 ڈی سی کی تخلیق، سیل کی عملداری، اور اینڈوٹوکسن کی سطح

C57BL/6 چوہوں کے بون میرو سے اخذ کردہ DCs پہلے بیان کردہ طریقہ کے مطابق حاصل کیے گئے تھے (Inaba et al.، 1992)۔ مختصراً، خلیات کو RPMI-1640 مکمل میڈیم (20 ng/mL GM-CSF اور 5 ng/mL IL-4) کے ساتھ کلچر کیا گیا تھا۔ چھ دن کے بعد، تمام معطل شدہ خلیات کو بعد کے اسسیس کے لیے نادان ڈی سی کے طور پر جمع کیا گیا۔ غیر منسلک خلیوں میں CD11c پلس DCs کا فیصد بہاؤ سائٹوومیٹری کے ذریعہ 94 فیصد مقرر کیا گیا تھا۔

AECCD پر چوہوں سے DCs اور splenocytes کی سیل کی قابل عملیت کا پتہ کارخانہ دار کی ہدایات کے مطابق CCK-8 کٹ کے ذریعے لگایا گیا۔ DCS اور splenocytes سے خلیات حاصل کیے گئے اور پھر ان کی مختلف ارتکاز کے ساتھ حوصلہ افزائی کی گئی۔اے ای سی سی ڈی(0، 10، 100، 400، 800، اور 1600 ug/mL)۔ سیل کی عملداری کا اظہار علاج شدہ گروپ کے جذب اور کنٹرول گروپ کے جذب کے تناسب کے طور پر کیا گیا تھا) × 100 فیصد۔

AECCD میں اینڈوٹوکسین کے اثر کو خارج کرنے کے مقصد کے لیے، AECCD (100، 200 اور 400 ug/mL) اور LPS (100 ng/mL) کو PMB (100 ug/mL) کے ساتھ 60 منٹ تک پہلے سے علاج کرنے کے بعد، DCs (5 × 105 خلیات / ایم ایل) کو 12 گھنٹے کے لئے پہلے سے تیار شدہ AECCD (100، 200 اور 400 ug/mL) اور LPS کے ساتھ انکیوبیٹ کیا گیا تھا۔ مندرجہ بالا علاج کے بعد، CD40، CD86، CD80، اور MHCII کی سطحوں کا جائزہ لیا گیا۔

2.5.2 ڈی سی فینوٹائپ کا تجزیہ

وٹرو تجربات کے ذریعے ڈی سی میچوریشن کا اندازہ لگانے کے لیے قیمتی مالیکیولز کی سطحوں کا تعین کیا گیا تھا۔ چھٹے دن، ڈی سی کے ساتھ سلوک کیا گیا۔اے ای سی سی ڈی(20، 100، 200 اور 400 ug/mL) یا LPS (100 ng/mL) 12 گھنٹے کے لیے۔ اس کے بعد، DCs کو سطح کے انووں سے داغ دیا گیا تھا اور بہاؤ سائٹوومیٹری کے ذریعہ تجزیہ کیا گیا تھا۔

2.5.3 وٹرو میں ڈی سی کے ذریعہ سائٹوکائن کی پیداوار

سیل کلچر سپرنٹنٹ کو CBA طریقہ کے ساتھ ELISA کٹ یا ملٹی اینالائٹ فلو پرکھ کٹ کا استعمال کرکے سائٹوکائنز کی سطح کی پیمائش کرنے کے لیے جمع کیا گیا تھا۔ تمام تجرباتی اقدامات کارخانہ دار کی ہدایات کے مطابق انجام دیئے گئے تھے۔

2.5.4 اللوجینک مکسڈ لیمفوسائٹ رد عمل (MLR)

BALB/c چوہوں سے Splenocytes کو RPMI-1640 میڈیم (Zhang et al.، 2018) میں غیر محفوظ طریقے سے حاصل کیا گیا تھا۔ بالغ C57BL/6 DCs (کی مختلف ارتکاز کی موجودگی میں پختہاے ای سی سی ڈییا LPS) کو 50 ug/mL Mitomycin C کے ساتھ 37 ◦C پر 60 منٹ کے لیے پہلے سے علاج کیا گیا۔ دھونے کے بعد، DCs کو 2 دن کے لیے 1:5 یا 1:10 کے تناسب کے مطابق splenocytes کے ساتھ ملایا گیا۔ سیل کے پھیلاؤ کا تعین MTT پرکھ کے ذریعہ کیا گیا تھا۔

تصویر 2. سیرم میں OVA مخصوص اینٹی باڈی ٹائٹرز اور آئی جی جی آئیسو ٹائپس۔ ELISA کے ساتھ اینٹی باڈیز کے لیے پرائمری اور بوسٹر امیونائزیشن کے بعد سیرم کے نمونے جمع کیے گئے تھے۔

2.6۔ شماریاتی تجزیہ

ڈیٹا کو اوسط ± SD کے طور پر ظاہر کیا جاتا ہے۔ شماریاتی فرق کی اہم سطح کا تعین یک طرفہ ANOVA اور Tukey کے متعدد موازنہ ٹیسٹ سے کیا گیا تھا۔ P < 0.05="" کو="" شماریاتی="" لحاظ="" سے="" اہم="" سمجھا="" جاتا="">

3. نتائج

3.1 FTIR سپیکٹروسکوپی

کی اہم جذب چوٹیوںاے ای سی سی ڈیتصویر 1 میں 3342.95 cm− 1 پر O–H اسٹریچنگ وائبریشن کے مساوی گلائکوسیڈک ڈھانچے کی خصوصیت سے جذب کرنے والی چوٹیاں تھیں۔ 2933.54 cm− 1 پر موجود بینڈ میں C–H اسٹریچنگ وائبریشن کی خصوصیت کمزور جذب تھی۔ 1657.39 cm− 1 کی چوٹی O–H لچکدار کمپن سے منسوب تھی۔ 1411 پر جذب۔ 1018.38 cm− 1 کی چوٹیوں نے CO اور C–O–C گلائکوسیڈک بینڈ وائبریشنز کا بھی اشارہ کیا۔

3.2 OVA مخصوص سیرم اینٹی باڈی ردعمل

حفاظتی ٹیکوں والے چوہوں سے سیرا کا OVA کے خلاف پیدا شدہ اینٹی باڈیز (IgG، IgG1، اور IgG2a) کی موجودگی کو جانچنے کے لیے ٹیسٹ کیا گیا۔ جیسا کہ تصویر 2A میں دکھایا گیا ہے، چوہوں میں IgG ٹائٹرز OVA/ کے ساتھ حفاظتی ٹیکے لگائے گئے ہیں۔اے ای سی سی ڈی-M elicited higher total IgG (titers: 220,000, 250,000 and 250,000) relative to those of OVA group (titers: 100,000, 100,000 and 120,000), and was close to Alum group (titers: 250,000, 250,000 and 270,000) on Days 28, 42 and 56 after primary vaccination. OVA/AECCD-M/H significantly enhanced IgG1 levels compared to the OVA group (P < 0.05) and the difference between OVA/AECCD-M/H group and Alum group was not significant (P>{{0}}.05)۔ OVA/AECCD-M/H نے OVA گروپ اور ایلم گروپ (تصویر 2B اور C) (P <0.05) کے="" مقابلے="" میں="" نمایاں="" طور="" پر="" igg2a="" کی="" سطح="" کو="" بڑھایا="" ہے۔="" igg2a="" کی="" بڑھتی="" ہوئی="" سطح="" ایک="" بیماری="" کو="" روک="" سکتی="" ہے="" جس="" میں="" igg2a="" کی="" ضرورت="" ہوتی="">مدافعتیجواب.

3.3 سیلولر مدافعتی ردعمل

OVA یا OVA323-339 کے ساتھ بحالی کے تحت MTT پرکھ کے ذریعے Spleen lymphocyte کے پھیلاؤ کی جانچ کی گئی۔ پھیلاؤ کے تجزیہ سے معلوم ہوا کہ OVA/اے ای سی سی ڈی-M دونوں نے OVA گروپ کی نسبت OVA، OVA323-339، Con A یا LPS کی نمائش کے بعد اسپلینوسائٹ کے پھیلاؤ میں واضح طور پر اضافہ کیا۔ OVA اور OVA323-339 نے ایلم گروپ (تصویر 3) (P < 0.01)="" کے="" مقابلے="" میں="" زیادہ="" پھیلاؤ="" کے="" ردعمل="" کو="" نمایاں="" طور="" پر="" بہتر="">

تصویر 3. Vivo میں AECCD کے علاج پر اسپلینوسائٹ کا پھیلاؤ

3.4 لمف نوڈس اور تلی کو نکالنے میں ٹی سیل ذیلی سیٹوں کو چالو کرنا

حفاظتی ٹیکے لگانے والے چوہوں کے لمف نوڈس اور تلی کو ابتدائی ویکسینیشن کے بعد 21 دن کو ٹی سیل سب سیٹس کا پتہ لگانے کے لیے کاٹا گیا تھا۔ OVA/AECCD-M گروپ میں لمف نوڈس سے T سیل سب سیٹس (CD4 plus , CD8 plus , CD44 پلس T خلیات) کا فیصد OVA گروپ اور ایلم گروپ (تصویر 4A–D) (P) سے نمایاں طور پر زیادہ تھا۔ < 0۔{13}}5)۔="" تلی="" میں="" ٹی="" سیل="" سب="" سیٹس="" (cd4="" پلس،="" cd8="" پلس،="" cd44="" پلس،="" اور="" cd62l="" پلس="" t="" خلیات)="" کی="" فیصد="" ova="" گروپ="" (تصویر="" 4e–j)="" (p=""><0.05) کے="" مقابلے="" میں="" نمایاں="" طور="" پر="" زیادہ="" تھی۔="" ان="" نتائج="" نے="" اس="" بات="" کا="" اشارہ="">اے ای سی سی ڈیسیل ثالثی کو فروغ دیا گیا۔مدافعتیجواب.

3.5 سائٹوکائنز Vivo میں restimulated splenocytes کے ذریعے چھپتی ہیں۔

حفاظتی ٹیکے لگانے والے چوہوں کی تلی سے Th1/Th2 سائٹوکائنز کا تعین پہلی ویکسینیشن کے بعد 21 دن کو انٹرا سیلولر سٹیننگ کے ذریعے کیا گیا تھا۔ OVA/AECCD-M گروپ میں CD4 پلس IL-4، CD4 پلس IFN-، اور CD8 پلس IFN- کی سطحیں OVA گروپ اور ایلم گروپ (P< 0.05,="" fig.="" 5).="" the="" differences="" indicated="" that="">اے ای سی سی ڈیTh1/th2 ردعمل کو متحرک کر سکتا ہے، خاص طور پر T-cell کی ثالثی۔مدافعتیجواب.

3.6۔ ویوو میں ڈی سی میچوریشن اور ٹریگز

ڈی سی ایکٹیویشن انکولی استثنیٰ کو شروع کر سکتا ہے۔ کے اثراتاے ای سی سی ڈیحفاظتی ٹیکے لگانے والے چوہوں میں ڈی سی کی پختگی کا اندازہ پہلے حفاظتی ٹیکوں کے بعد 3 دن کو کیا گیا۔ OVA/AECCD-M نے CD40، CD80، CD86، اور MHCII کی اعلی ترین سطحوں کو DCs پر OVA گروپ اور OVA/AECCD-M گروپ کے درمیان فرق کی حوصلہ افزائی کی۔ اور پھٹکڑی کا گروپ اہم تھا (تصویر 6A–D) (P <0.05)۔ ova/aeccd-m="" گروپ="" میں="" cd4="" پلس="" cd25="" پلس="" foxp3="" پلس="" tregs="" کی="" فریکوئنسی="" ova="" گروپ="" (تصویر="" 6e)="" (p=""><0.05) سے="" ڈرامائی="" طور="" پر="" کم="" تھی۔="" ان="" اعداد="" و="" شمار="" نے="" تجویز="" کیا="" کہ="" aeccd="" dcs="" کو="" چالو="" کر="" سکتا="" ہے="" اور="" treg="" فریکوئنسی="" کو="" کم="" کر="" سکتا="">

3.7 سائٹوٹوکسیٹی اور اینڈوٹوکسین آلودگی کے اسیس

کے مختلف ارتکاز کے ساتھ علاج کے بعداے ای سی سی ڈی2 دن تک، DCs اور چوہوں کے splenocytes کے خلیات CCK-8 کٹ کے ساتھ ممکنہ سائٹوٹوکسائٹی کا تعین کرنے کے لیے استعمال کیے گئے۔ کنٹرول گروپس (تصویر 7A–B) (P > 0۔{7}}5) کے مقابلے DCs اور splenocytes کے سیل کی عملداری میں کوئی خاص روکا ہوا پھیلاؤ ردعمل نہیں تھا۔ ان نتائج نے ظاہر کیا کہ 10–1600 ug/mL کے ارتکاز پر AECCD نے کنٹرول (P > 0.05) کے مقابلے DCs اور splenocytes میں کوئی خاص سائٹوٹوکسیٹی نہیں دکھائی۔ اس طرح، بعد کے تجربات میں AECCD کا ارتکاز 1600 ug/mL سے کم رکھا گیا تھا۔ ڈی سی ایکٹیویشن پر اے ای سی سی ڈی کے اثرات میں اینڈوٹوکسین آلودگی کی مداخلت کو خارج کرنے کے لیے، پی ایم بی، ایک اینٹی بائیوٹک جسے اس کے ایل پی ایس-غیرجانبدار اثر کی وجہ سے وسیع پیمانے پر تسلیم کیا جاتا ہے، کو اینڈوٹوکسین آلودگی کو خارج کرنے کے لیے استعمال کیا گیا تھا (موریسن اور جیکبز، 1976)۔ جیسا کہ تصویر 7C–F، CD40، CD80، CD86 یا MHC-II اظہار کی سطحوں میں AECCD سے علاج شدہ DCs میں PMB کی موجودگی میں کوئی خاص تبدیلی نہیں دکھائی گئی (P > 0.05)۔ تاہم، CD40، CD80 CD86، اور MHC-II اظہار کی سطحوں میں ڈرامائی کمی PMB (P <0.001) کی="" موجودگی="" میں="" lps="" سے="" علاج="" شدہ="" dcs="" میں="" دیکھی="" گئی۔="" ان="" نتائج="" نے="" ظاہر="" کیا="" کہ="" aeccd="" اینڈوٹوکسین="" آلودگی="" سے="" پاک="">

3.8۔ فینو ٹائپک میچوریشن اور وٹرو میں DCs کی فنکشنل ایکٹیویشن

اوپر امیونائزیشن کے تجربات کی بنیاد پر، وٹرو میں AECCD کے ساتھ علاج کے بعد DCs کی فینوٹائپک پختگی کو مزید دریافت کیا گیا۔ دن 6 پر، سطح کے مالیکیولز کا تجزیہ کرنے کے لیے ناپختہ DCs کو AECCD یا LPS کے دیے گئے ارتکاز کے ساتھ متحرک کیا گیا۔اے ای سی سی ڈیخوراک پر منحصر انداز میں CD40، CD80 CD86، اور MHC II کے فیصد میں نمایاں اضافہ کی طرف سے حوصلہ افزائی سیل کی پختگی کی خصوصیت (P <0.001، تصویر="" 8a–d)۔="" 100="" ng/ml="" lps="" کے="" ساتھ="" محرک="" کے="" بعد="" dcs="" کی="" اسی="" طرح="" کی="" فینوٹائپک="" پختگی="" بھی="" دیکھی="" گئی۔="" تجزیہ="" کے="" اعداد="" و="" شمار="" سے="" پتہ="" چلتا="" ہے="" کہ="" aeccd="" نے="" dc="" کی="" پختگی="" کو="" بہتر="" بنایا="" ہے۔="" مندرجہ="" بالا="" نتائج="" سے،="" aeccd="" نے="" dcs="" کی="" فینوٹائپک="" پختگی="" کو="" بڑھایا۔="" وٹرو="" میں="" dc="" فنکشن="" پر="" aeccd="" کے="" اثر="" کا="" مشاہدہ="" کرنے="" کے="" لیے،="" 1:5="" یا="" 1:10="" کے="" dc-splenocyte="" تناسب="" پر="" mlr="" میں="" allogenic="" t="" سیل="" کے="" پھیلاؤ="" کو="" متحرک="" کرنے="" کے="" لیے="" aeccd="" سے="" علاج="" شدہ="" dcs="" کی="" صلاحیت="" کی="" چھان="" بین="" کی="" گئی۔="" aeccd="" کے="" مختلف="" ارتکاز="" کے="" ساتھ="" علاج="" کیے="" جانے="" والے="" dcs="" نے="" غیر="" علاج="" شدہ="" dcs="" (تصویر="" 8e–f)="" (p)="" کے="" مقابلے="" میں="" نمایاں="" ٹی="" سیل="" پھیلاؤ="" کو="" متاثر="">< 0.001).="" dc="" maturation="" could="" induce="" the="" production="" of="" cytokines.="" next,="" the="" supernatants="" of="" dcs="" treated="" with="" aeccd="" or="" lps="" were="" detected="" by="" elisa="" kit.="" the="" levels="" of="" il-12="" and="" tnf-α="" in="" the="" supernatants="" of="" dcs="" were="" dramatically="" increased="" in="" a="" dose-dependent="" manner="" (p="" <="" 0.001,="" fig.="">

3.9 TLR4، DCs پر AECCD کے لیے ایک رسیپٹر

DCs جھلی ریسیپٹرز کے ذریعہ سیلولر سگنلنگ شروع کر سکتے ہیں۔ AECCD سے علاج شدہ DC میچوریشن میں حصہ لینے میں TLR4 کے کردار کا تعین کرنے کے لیے، TLR4 inhibitor TAK-242 کے ساتھ پری ٹریٹمنٹ کے بعد، DCs کو دی گئی حراستی کے ساتھ متحرک کیا گیا تھا۔AECCD،اور پھر ڈی سی کی ایکٹیویشن سٹیٹس کو فلو سائٹو میٹر کے ذریعے جانچا گیا۔ کلچر سپرنٹنٹس میں سائٹوکائنز کے اظہار کی سطح کا تجزیہ ملٹی اینالائٹ فلو پرکھ کٹ کے ذریعے کیا گیا۔ AECCD کی طرف سے حوصلہ افزائی CD40، CD80، CD86، اور MHC-II کی اپ گریجشن کو TLR4 کے راستے مسدود کرنے سے نمایاں طور پر روکا گیا تھا (P< 0.01,="" fig.="" 9a–d).="" moreover,="" compared="" to="" untreated="" control,="" blocking="" tlr4="" with="" tak-242="" had="" a="" more="" significant="" inhibition="" effect="" on="" the="" production="" of="" ifn-γ,="" tnf-α,="" and="" il-6="" (p="" <="" 0.01,="" fig.="">

3.10 AECCD کے ذریعے TLR4-متعلقہ NF-κB راستے کے ذریعے DC ایکٹیویشن

اس بات کی جانچ کرنے کے لیے کہ آیا AECCD سے علاج شدہ DCs کے سطحی مالیکیولز اور سائٹوکائنز کے اظہار کو NF-κB کے ذریعے ریگولیٹ کیا گیا تھا جب NF-κB inhibitor PDTC کے ساتھ پہلے سے علاج کیے گئے نادان DCs کو AECCD کے ساتھ 12 گھنٹے تک متحرک کیا گیا تھا، کاسٹیمولیٹری مالیکیولز اور سائٹوکائنز کے اظہار کی سطح کی پیمائش کی گئی تھی۔ بہاؤ cytometer. CD40، CD80 CD86، اور MHC-II کی سطحیںاے ای سی سی ڈیغیر علاج شدہ کنٹرول کے مقابلے میں NF-κB کے راستوں کو متعلقہ انحیبیٹرز (P < 0۔{7}}01،="" تصویر="" 10a–d)="" کے="" ساتھ="" مسدود="" کرنے="" سے="" نمایاں="" طور="" پر="" کم="" کیا="" گیا="" تھا۔="" اس="" کے="" ساتھ="" ہی،="" ifn-،="" tnf-،="" اور="" il-6="" کے="" اظہار="" کو="" بھی="" pdtc="" (p=""><0.05، تصویر="" 10e–g)="" نے="" نمایاں="" طور="" پر="" روکا="">

4. بحث

فی الحال، TCM سے مختلف پولی سیکرائڈز کی تحقیقات انسانی اور جانوروں کی ویکسین کے معاون کے طور پر کی گئی تھیں (Sun et al.، 2018; Rey-Ladino et al.، 2011)۔ اس مطالعہ میں،مدافعتی- AECCD کے ماڈیولنگ اثرات اور DCs کے بنیادی ایکٹیویشن میکانزم کی جانچ Vivo اور in Vitro میں تجربات کی ایک سیریز کے ذریعے کی گئی تاکہ OVA کے خلاف مدافعتی مدافعتی ردعمل اور DCs کی ایکٹیویشن کی حیثیت کا جائزہ لیا جا سکے۔ Vivo تجربات میں اشارہ کیا کہ AECCD نے نمایاں طور پر OVA مخصوص IgG اور IgG آاسوٹائپس کی پیداوار کو فروغ دیا، splenocyte کے پھیلاؤ میں اضافہ، اور حوصلہ افزائی T سیل ایکٹیویشن اور cytokines (IL-4/IFN-)۔ اس کے علاوہ،اے ای سی سی ڈیڈی سی کی پختگی میں بہتری اور کم ہونے والے ٹریگز کی نمائش۔ ان نتائج نے تجویز کیا کہ اے ای سی سی ڈی کے کام کو ایک موثر معاون کے طور پر ڈی سی پختگی کو فروغ دینے اور ٹریگز کو روک کر محسوس کیا گیا تھا۔ ان وٹرو تجربات نے اشارہ کیا کہ AECCD نے TLR4-متعلقہ NF-κB راستے کے ذریعے DCs، سائٹوکائن سیکشن، اور allostimulatory سرگرمی کی فینوٹائپک میچوریشن کو فروغ دیا۔ ان تجرباتی نتائج نے اشارہ کیا کہ AECCD میں قوت مدافعت بڑھانے والے محرک کے طور پر نمایاں صلاحیت موجود ہے۔

ہر معاون منفرد ہےمدافعتیمختلف اینٹیجنز کے خلاف خصوصیات، جو اس بات کی نشاندہی کرتی ہیں کہ ملحقہ مختلف بیماریوں میں استعمال کی صلاحیت رکھتے ہیں۔ سب سے پہلے، OVA کے ساتھ AECCD کی شریک انتظامیہ کی متعلقہ خصوصیات کو چوہوں میں مدافعتی ردعمل پر ان کے اثرات کا تعین کرکے جانچا گیا۔ بہت سے مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ مدافعتی محرک سرگرمیاں ایک خاص حد کے اندر خوراک کے براہ راست متناسب تھیں (لی ایٹ ال۔، 2020؛ ریڈ ایٹ ال۔، 2020؛ ژانگ ایٹ ال۔ اسی طرح، مطالعہ میں، اینٹی باڈی اور آئسو ٹائپ کے تجزیے سے یہ بات سامنے آئی کہ AECCD نے ایک مخصوص خوراک کی حد میں OVA- مخصوص IgG، IgG1، اور IgG2a ردعمل کو بڑھایا اور AECCD کی درمیانی خوراک بہترین خوراک تھی۔ بعد کے تجربات میں، ہم نے بنیادی طور پر ایک بہترین درمیانی خوراک پر AECCD کے محرک اثر کی چھان بین کی۔ کی درمیانی خوراکاے ای سی سی ڈیحفاظتی ٹیکوں والے چوہوں میں splenocyte کے پھیلاؤ کے ردعمل میں نمایاں اضافہ ہوا، جس سے ظاہر ہوتا ہے کہ AECCD نے سیلولر کو فروغ دیا۔مدافعتیOVA کے خلاف ردعمل۔ ان نتائج نے تجویز کیا کہ AECCD نے مزاحیہ اور سیلولر مدافعتی ردعمل دونوں کو بڑھایا، جو کہ ضمنی صلاحیت سے وابستہ تھے۔

cistancheجائزےکے بارے میںقوت مدافعت

واضح شدہ کافی ٹی سیل سرگرمی بیماری کے خاتمے کے لیے سازگار ہو سکتی ہے۔ ایک کے دورانمدافعتیردعمل، فعال T خلیات ثانوی لمفائیڈ ٹشوز تک پہنچ سکتے ہیں، بشمول تلی اور لمف نوڈس (اسٹین مین، 2012)۔ کی درمیانی خوراکاے ای سی سی ڈیمؤثر طریقے سے ویکسین کی افادیت کو بہتر بناتا ہے کیونکہ یہ CD4، CD8، CD44، اور CD62L T سیل کے ردعمل کو لمف نوڈس اور تلی کو نکالنے میں نمایاں طور پر بڑھا سکتا ہے۔ فعال CD8 T خلیوں نے IFN- کو خفیہ کرکے پیتھوجین کے خاتمے میں ثالثی کی۔ پھیلے ہوئے CD4 T خلیوں کو Th1 خلیوں اور Th1 خلیوں میں فرق کیا گیا تھا۔ Th1 خلیوں نے Th1 cytokine کو lymphocyte کے پھیلاؤ کو متحرک کرنے کے لیے اور Th2 خلیوں نے Th2 cytokine کو اینٹی باڈی کی پیداوار کو بڑھانے کے لیے خفیہ کیا (Seder et al.، 2008)۔ مطالعہ میں، CD4 پلس IL-4، CD4 پلس IFN-، اور CD8 پلس IFN- کی سطحوں کو AECCD نے درمیانی مقدار میں بڑھایا۔ AECCD نے ایک متوازن Th1/Th2 جواب دیا اور ہدایت کی۔مدافعتیسائٹوکائن نیٹ ورک کو تبدیل کرکے جواب۔

ایک معاون کو مخصوص استثنیٰ پیدا کرنا چاہیے اور متعدد پوائنٹس پر DCs کی حیثیت کو ریگولیٹ کرکے مدافعتی ردعمل کے نتائج کو کنٹرول کرنا چاہیے (Carrera Silva et al.، 2013)۔ DCs پر سطح کے مالیکیولز کا اظہار DC کی پختگی کا اندازہ کرنے کے لیے ایک اہم اشارے ہے اور عام طور پر T lymphocyte تفریق (Steinman، 2012) سے منسلک ہوتا ہے۔ اس مطالعہ میں، AECCD نے قیمتی مالیکیولز کے اظہار کو بڑھایا اور DC کی پختگی کو سہولت فراہم کی جب اسے OVA کے خلاف ایک معاون کے طور پر استعمال کیا گیا۔ یہ ان طریقوں میں سے ایک ہو سکتا ہے جس سے AECCD نے مزاحیہ اور سیلولر کو فروغ دیا۔مدافعتیجوابات اسی دوران،اے ای سی سی ڈیCD4 plus CD25 plus Foxp3 plus Tregs کی فریکوئنسی میں بھی کمی آئی، جس نے ویکسینیشن کے بعد متوازن قوت مدافعت فراہم کی۔ ہمارے نتائج نے حالیہ نتائج کی تائید کی کہ TCM سے مختلف پولی سیکرائڈز DC میچوریشن کے ریگولیٹر تھے (Bo et al.، 2019؛ Li et al.، 2015؛ Zhu et al.، 2016)۔

انکولی کو چالو کرنامدافعتیپولی سیکرائڈ ایڈوینٹس کے جوابات بنیادی طور پر DCs کے مخصوص ریسیپٹرز (Akira، 2004) کے ذریعے ان کی پہچان کے ذریعے ثالثی کرتے ہیں۔ TLR4-متعلقہ راستوں کے ذریعے فعال ہونے والے DCs انفیکشن کے خلاف اہم ثالث کے طور پر مختلف امیونو موڈیولٹرز کو خارج کر سکتے ہیں (اکیرا، 2007)۔ لہذا، بعد کے تجربات میں، ہم نے ابتدائی طور پر وٹرو میں DCs پر AECCD کے محرک اثر کے مالیکیولر میکانزم کی کھوج کی۔ AECCD کی cytotoxicity کا مشاہدہ کرنے کے لیے، سب سے پہلے چوہوں سے DCs اور splenocytes کے خلیے کی عملداری کا تعین کیا گیا تھا۔ 10–1600 ug/mL پر AECCD نے DCs اور splenocytes کے لیے کوئی cytotoxicity ظاہر نہیں کی۔ LPS آلودگی کو مسترد کرنے کے لیے، ہم نے PMB کے ساتھ AECCD کا پہلے سے علاج کیا۔ AECCD سے علاج شدہ DCs میں CD40، CD80 CD86، اور MHC-II کے اظہار کی سطح میں کمی نہیں آئی، لیکن PMB نے LPS سے علاج شدہ DCs میں قیمتی مالیکیولز کے اظہار کو مؤثر طریقے سے روک دیا۔ اس نے یہ ظاہر کیا کہ AECCD اینڈوٹوکسین آلودگی سے پاک تھا۔ اگلا، DCs کی ایکٹیویشن کی حیثیت کو مزید دریافت کیا گیا۔ ایل پی ایس سے علاج شدہ ڈی سی کی طرح، خوراک پر منحصر انداز میں،اے ای سی سی ڈی-علاج شدہ DCs نے CD40، CD80 CD86، اور MHC II کی سطحوں کے ساتھ ساتھ پرو سوزش والی سائٹوکائن کی پیداوار میں اضافہ کیا، جو DCs کی فنکشنل میچوریشن کا ایک پیرامیٹر تھا۔ ایم ایل آر میں، ایلوجینک ٹی سیلز کے پھیلاؤ کی صلاحیت کا اندازہ AECCD سے علاج شدہ DCs میں کیا گیا۔ AECCD ایلوجینک ٹی خلیوں کو پرائم اور چالو کر سکتا ہے۔ DCs کو پہلے Mitomycin C کے ساتھ پہلے سے علاج کیا گیا تھا اور پھر اس ری ایجنٹ کو ہٹانے کے لیے اچھی طرح سے دھویا گیا تھا، اس لیے DCs پر AECCD کے اثرات مائٹوجینک سرگرمی سے منسوب ہونے کا امکان نہیں تھا۔ تجرباتی اعداد و شمار سے پتہ چلتا ہے کہ DCs فینوٹائپک میچوریشن اور فنکشنل ایکٹیویشن کو AECCD کے محرک سے منسوب کیا جا سکتا ہے۔

TCM پولی سیکرائڈز کی ایک بڑی تعداد TLR4 کے ذریعے DCs کی پختگی کو متحرک کرسکتی ہے۔ NF-κB TLR کے رکن کے طور پر4-متعلقہ بہاوی راستہ DCs کی فینوٹائپک اور فنکشنل میچوریشن کو منظم کرنے اور اس میں شامل مختلف جینوں کے اظہار کو دلانے میں اہم کردار ادا کرتا ہے۔مدافعتیجوابات (Qi et al.، 2016؛ Re and Strominger، 2001؛ Wei et al.، 2016؛ Zhu et al.، 2013)۔ وٹرو تجربات کے ذریعے، ہم نے پایا کہ AECCD نے DC کی پختگی کو فروغ دیا اور TAK-242 (TLR4 inhibitor) اور PDTC (NF-κB inhibitor) نے CD40، CD80، CD86، اور MHC کے اظہار کی سطح کو کم کیا۔ -II اور IFN-، TNF-، اور IL-6 کے سراو کی سطح AECCD-علاج شدہ DCs پر، ان نتائج نے اشارہ کیا کہ TLR4 اور NF-κB AECCD کی حوصلہ افزائی DC ایکٹیویشن اور سائٹوکائن سراو میں شامل تھے۔ یہ نتائج پہلے رپورٹ شدہ مطالعات کے مطابق تھے کیونکہاے ای سی سی ڈیDCs پر ایک معاون بہتر اینٹیجن کو نشانہ بنانے کے طور پر۔

خلاصہ طور پر، ہمارے نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ AECCD نے پائیدار اور Th1/Th2 ردعمل کی حوصلہ افزائی کی، خاص طور پر T-cell کی ثالثی۔مدافعتیOVA کے خلاف ردعمل AECCD نے TLR4-ثالثی والے NF-κB راستے کے ذریعے DCs کو چالو کیا، اس طرح امیونو موڈیولٹرز اور اللوجینک ٹی سیل پھیلاؤ کی پیداوار میں اضافہ ہوا۔ AECCD کو ویکسین کی تیاری میں ایک مؤثر معاون کے طور پر استعمال کیا جا سکتا ہے۔ تاہم، اس بات کا تعین کرنے کے لیے ایک درست جزو کا تجزیہ کیا جائے گا کہ کون سا جزو اس میں ہے۔اے ای سی سی ڈیفعال DCs اس بارے میں میکانزم پر توجہ مرکوز کرتے ہوئے کہ AECCD کس طرح مدافعتی صلاحیت کو بڑھاتا ہے، بشمول ضمنی فارمولیشنز کی اصلاح اور ویکسین ایڈمنسٹریشن کے راستے، ہم مزید امیونو موڈیولیٹری اجزاء اور AECCD کے مخصوص ضمنی خصوصیات کو متعدی بیماریوں کے خلاف مؤثر ویکسین معاونوں کو ڈیزائن کرنے کے مقصد کے لیے مزید دریافت کریں گے۔

cistancheبہتر کریںقوت مدافعت