Cistanche نظامی Lupus Erythematosus کی وجہ سے گردے کے انفیکشن کو بہتر بناتا ہے۔

رابطہ:joanna.jia@wecistanche.com/ واٹس ایپ: 008618081934791

حصہ 1 کے لیے، براہ کرم یہاں کلک کریں۔

بحث

جوہری اینٹیجنز کے خلاف رواداری کا وقفہ اس کی پہچان ہے۔نظامی lupuserythematosus، اور B خلیوں کے علاوہ، خودکار T خلیات اس کے روگجنن میں مرکزی کردار ادا کرتے ہیں۔ تاہم، (آٹو) اینٹیجن مخصوص کا پتہ لگانے کے طور پرسی ڈی 4^پلس T خلیات اب بھی خودکار قوت مدافعت کی تحقیق میں ایک بڑا چیلنج ہیں، آج تک، جوہری اینٹیجن-ری ایکٹو CD4 کے بارے میں حقیقت میں بہت کم معلوم ہے۔^پلسٹی سیلز میںنظامیlupuserythematosus.

حال ہی میں، اینٹیجن مخصوص CD4 کا پتہ لگانے اور ان کی گنتی کے لیے نئے طریقے^پلسٹی سیلز تیار کیے گئے ہیں۔ ٹی سیل لائبریری اپروچ ٹی سیلز کی پہلے پولی کلونل توسیع سے فائدہ اٹھاتی ہے تاکہ نایاب اینٹیجن مخصوص ٹی سیل کلون کا پتہ چل سکے۔ یہ حکمت عملی اعلیٰ حساسیت پیش کرتی ہے اور محدود مقدار میں خلیوں کے ساتھ کام کرنے کی اجازت دیتی ہے۔ اس تکنیک کا استعمال کرتے ہوئے، ہم فعال مریضوں میں 5 کینونیکل نیوکلیئر اینٹیجنز کے خلاف رد عمل والے T خلیات کا مظاہرہ کرنے کے قابل تھے۔نظامیlupuserythematosus. لائبریری کی بنیاد پر پتہ لگانے کے نقصانات یہ ہیں کہ محنت کی ضرورت ہونے کے علاوہ، یہ کہ توسیع کے دوران کچھ کلون کا بڑھنا یا نقصان، مرحلے کو خارج نہیں کیا جا سکتا اور خلیات کے فینوٹائپک تجزیہ کے لیے محدود اختیارات ہیں۔

معیاری ساتھی سائٹومیٹری قابل شناخت واقعات کی تعداد سے محدود ہے، جو عام طور پر 0.01 فیصد سے زیادہ تعدد والی آبادی کے نمونوں کے تجزیے کو محدود کرتی ہے۔ ٹی سیل لائبریری کا استعمال کرتے ہوئے ہمارے مشاہدے سے پتہ چلتا ہے کہ گردش کرنے والی خود کار طریقے سے CD4 کی فریکوئنسی^پلسبیماری کے بھڑک اٹھنے والے مریضوں میں ایک خاص آٹو اینٹیجن کے لئے T خلیات ایک ملین خلیوں میں w20 خلیات تھے، جو 0.002 فیصد کی تعدد کی نمائندگی کرتے ہیں؛ لہذا، آٹونٹجن مخصوص CD4 کا پتہ لگانا^پلسمعیاری، غیر ہیرا پھیری والے ساتھی سائٹومیٹری کا استعمال کرتے ہوئے T خلیات تقریباً ناممکن ہیں۔ Bacher et al. CD4 کی پہلے سے افزودگی متعارف کرائی^پلسٹی خلیات جو ساتھی سائٹومیٹری پر حصول سے پہلے مخصوص اینٹیجنز پر رد عمل ظاہر کرتے ہیں، جسے ARTE طریقہ کہا جاتا ہے۔ جوہری اینٹیجن مخصوص CD4 کا پتہ لگانے کے لیے اس نقطہ نظر کو اپنانا^پلسٹی سیلز، ہم اپنے نتائج کی تصدیق کرنے اور جوہری اینٹیجن – رد عمل CD4 کی توسیع کا مظاہرہ کرنے کے قابل تھے۔^پلسٹی سیلز فعال ہیں۔نظامیlupuserythematosus. خاص طور پر، ٹرانستھائیریٹن اور سی۔ البیکنز کے ساتھ رد عمل ظاہر کرنے والے ٹی خلیوں کی تعدد صحت مند کنٹرولوں اور مریضوں کے درمیان لاتعلق تھی۔نظامیlupuserythematosusبیماری کی مختلف سرگرمیوں کے ساتھ۔ لہذا، کی توسیع کا مشاہدہ کیاخودکارT خلیاتیہ ممکنہ طور پر عام hyperreactivity کے غیر فعال ہونے کا نتیجہ نہیں ہے۔نظامیlupuserythematosusلیکن اینٹیجن مخصوص ٹی خلیوں کی توسیع سے۔

دینظامی lupus erythematosusکو متاثر کرتا ہے۔گردہ، لہذا cistanche حفاظت کے لئے استعمال کیا جاتا ہےگردے.

پچھلی رپورٹس پہلے ہی کے وجود کا مظاہرہ کر چکی ہیں۔خودکارٹی خلیاتمیںنظامیlupuserythematosus، بنیادی طور پر پھیلاؤ، سائٹوکائن کی پیداوار، یا ایکٹیویشن مارکر کو اپ گریجولیشن کا استعمال کرتے ہوئے، اگرچہ ان خلیات کی واضح آبادی کا تعین کرنے کے قابل نہ ہوں۔ نیوکلیئر اینٹیجن سے متعلق مخصوص ٹی سیلز کی تعدد کے بارے میں بہترین ثبوت U1 چھوٹے رائبونیوکلیوپروٹین کے خلاف رد عمل کے لیے موجود ہیں، جو کہ مخلوط مربوط بافتوں کی بیماری میں ایک خصوصیت آٹو اینٹیجن ہدف ہے اور یہ صرف مریضوں کے ایک حصے میں پایا جاتا ہے۔نظامیlupuserythematosus. U1 چھوٹا نیوکلیئر رائبونیوکلیوپروٹین- رد عمل CD4^پلسT خلیوں کا تعین محدود dilution اور Enzyme-linked Immuno Spot Assay (ELISPOT) کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا تھا اور یہ بتایا گیا تھا کہ یہ بالترتیب (40 سے 250) 106 T خلیات اور (20 سے 60) 106 PBMCs کی فریکوئنسی پر پائے جاتے ہیں، جو اسی طرح کی ہے۔ ہمارے مطالعہ میں خودکار خلیوں کی تعدد کے طور پر وسعت۔ ہمارے کام میں، ہم نے کئی خصوصیات کے خلاف رد عمل کی تحقیقات کی۔نظامیlupuserythematosus- وابستہ جوہری اینٹیجنز۔ دلچسپ بات یہ ہے کہ اگرچہ فعال LN والے تمام مریضوں نے اینٹی نیوکلیئر اینٹیجن – ری ایکٹیو CD4 کی بڑھتی ہوئی تعدد ظاہر کی۔^پلسٹی سیلز، مریض اپنے ٹارگٹ پورٹ فولیو میں مختلف تھے، اور رد عمل کا مقصد غیر فعال مریضوں کے مقابلے اینٹیجنز کے وسیع تر سیٹ کے خلاف تھا۔نظامیlupuserythematosus. اس کی حیاتیاتی اہمیت فی الحال نامعلوم ہے۔ مختلف CD4^پلسٹی سیل ری ایکٹیویٹیز مختلف ری ایکٹیویٹیز کے بعض طبی مظاہر کے ساتھ منسلک ہو سکتی ہیں جو بیماری کے روگجنن کے لیے بے کار ہو سکتی ہیں۔

دیگر خود کار قوت مدافعت کی بیماریوں کی طرح، ہم بھی خود کار طریقے سے CD4 کے وجود کو ظاہر کرنے کے قابل تھے۔^پلسصحت مند افراد میں ٹی خلیات، اگرچہ فعال سیسٹیمیٹک لیوپس ایریٹیمیٹوسس والے مریضوں کے مقابلے میں بہت کم تعدد پر ہوتے ہیں۔ اینٹیجن محرک کے ساتھ یا اس کے بغیر متحرک خلیوں کی تعداد کا موازنہ کرکے یہ خلیے ناقابل شناخت تھے، حتیٰ کہ T-cell لائبریریوں یا ARTE طریقوں جیسی انتہائی حساس تکنیکوں کے ساتھ۔ تاہم، سنگل سیل کلوننگ کے ذریعے، ہم یہ ظاہر کرنے کے قابل تھے کہ "پس منظر" سگنل میں واقعتا autoantigen مخصوص CD4 موجود تھا۔^پلسٹی خلیات. کون سے مخصوص واقعات رواداری کے ٹوٹنے اور تعدد میں اضافے کا باعث بنتے ہیں۔خودکارT خلیاتقیاس آرائی رہتی ہے اس کے باوجود، ہمارے اعداد و شمار سے پتہ چلتا ہے کہ خودکار کلون کی توسیع نظامی lupus erythematosus کے روگجنن میں ایک کردار ادا کرتی ہے۔

گردش کرنے والا جوہری اینٹیجن – رد عمل CD4^پلسT خلیات بنیادی طور پر IFN-g اور کچھ حد تک IL-17 اور IL-10 تیار کرتے ہیں۔ یہ سائٹوکائن پروفائل آٹو اینٹی باڈی پروڈکشن کے ساتھ کمزور/کوئی تعلق نہیں بتاتا ہے کہ نیوکلیئر اینٹیجن – ری ایکٹو CD4 کا کردار^پلسT خلیات بی سیل مدد کے خصوصی فراہم کنندہ نہیں ہوسکتے ہیں۔ IFN-g کو LN کے روگجنن میں ناگزیر دکھایا گیا ہے۔ Th1 خلیوں کو میں بھرتی کیا گیا ہے۔متاثرہ گردہٹشو میںنظامی lupuserythematosusجوہری اینٹیجن – رد عمل والے T خلیات پر حملہ کرنے کے لیے اہم امیدوار بناتے ہیں۔گردے، جہاں ان کا سامنا ہر جگہ موجود کوگنیٹ آٹوانٹیجن سے ہوگا۔ پیشاب کے ٹی خلیوں کو پہلے بیان کیا گیا ہے کہ وہ بیماری کی سرگرمی کی عکاسی کریں اور LN20,33 میں انٹرارینل خلیوں کی فینوٹائپ کی عکاسی کریں۔ اس طرح، ہم نے پیشاب کے ٹی خلیوں کو بطور پراکسی استعمال کیا۔گردہٹی خلیات. پیشاب کے ٹی خلیوں نے ایک محدود TCR تغیر کا انکشاف کیا ، جو مشاہدات کے مطابق ہے۔گردہبایپسی، جو کہ میں بعض ٹی سیل کلون کی افزودگی کا اشارہ کرتی ہے۔متاثرہگردہٹشو. پیشاب کے ٹی خلیوں میں، ہم جوہری اینٹیجن – رد عمل والے ٹی خلیوں کا پتہ لگانے کے قابل تھے، اور ان کی فریکوئنسی گردش ٹی خلیوں کے مقابلے میں افزودہ تھی۔ اس کے نتیجے میں، ایسا لگتا ہے کہ جوہری اینٹیجن – رد عمل والے خلیے براہ راست مقامی اعضاء کے نقصان کے پھیلاؤ میں حصہ لیتے ہیں۔

خلاصہ طور پر، ہم یہاں یہ ظاہر کرتے ہیں کہ جوہری اینٹیجن – رد عمل CD4^پلسT خلیات غیر فعال توسیع کر رہے ہیںنظامیlupuserythematosus; وہ فینوٹائپ طور پر بنیادی طور پر IFN-g – Th1 T خلیات پیدا کرتے ہیں اور حملہ کرتے ہیں۔متاثرہہدف کے اعضاء جیسےگردہ.

Cistanche کو انفیکشن سے بچ سکتا ہے۔گردہکیوجہ سےنظامیlupuserythematosus.

طریقے

ضمنی مواد میں تفصیلی طریقے دیے گئے ہیں۔

مضامین اور خون اور پیشاب کے نمونے۔

خون کے نمونے 17 صحت مند افراد سے حاصل کیے گئے جن میں سے 12 غیر فعال تھے۔نظامیlupus erythematosus(نظامیlupuserythematosusDAI سکور<10), and="" 20="" patients="" with="" active="">نظامیlupuserythematosus(نظامیlupuserythematosusDAI score >10)۔ اس کے علاوہ ایکٹیو والے 12 مریضوں سے پیشاب کے نمونے حاصل کیے گئے۔نظامیlupuserythematosusاور ایل این۔ تمام مضامین نے Charité – Universitätsmedizin Berlin (EA 1/342/12, EA 1/098/07, اور EA 1/036/16) میں ادارہ جاتی جائزہ بورڈ اور اخلاقیات کے حکام کی طرف سے حاصل کردہ اخلاقی منظوری کی بنیاد پر اپنی باخبر رضامندی دی تھی۔ )۔ PBMCs اور پیشاب کے خلیوں کو FicollHypaque کثافت میلان کا استعمال کرتے ہوئے تیار کیا گیا تھا۔

اینٹی باڈیز اور فالو سائٹومیٹری

تجربات پر منحصر ہے، درج ذیل مونوکلونل اینٹی باڈیز کے مختلف مجموعوں میں اینٹیجن سے محرک خلیوں پر سطح کے کئی مالیکیولز داغے گئے تھے: اینٹی CD3، -CD4، -CD8، -CD14، -CD20، -CD69، اور -CD154؛ زندہ اور مردہ خلیوں میں امتیاز کرنے کے لیے، LIVE/DEAD Aqua kit (Life Technologies Ltd.پیس سسٹمکlupuserythematosus، UK) استعمال کیا گیا تھا۔

انٹرا سیلولر سیل کمپارٹمنٹ پر داغ لگانے کے لیے، سیلز کو 2 فیصد (v/v) پیرافارمیلڈہائیڈ کے ساتھ کمرے کے درجہ حرارت پر 15 منٹ کے لیے فکس کیا گیا اور BD FACS پرمیابیلائزنگ سلوشن 2 (BD بایوسینسز، سان ہوزے، CA) کے ساتھ پارمیبلائز کیا گیا۔ درج ذیل اینٹیجنز کو ایک معیاری پروٹوکول کا استعمال کرتے ہوئے انٹرا سیلولر طور پر داغ دیا گیا تھا: CD154, IFN-g, IL-2, IL-4, IL-10, اور IL-17۔

نمونے BD FACSCanto II پر حاصل کیے گئے تھے اور BD LSRFortessa (BD Biosciences) BD FACSDiva سافٹ ویئر (BD Biosciences) کا استعمال کرتے ہوئے Flow Cytometry Core Facility Deutsches Rheuma-Forschungszentrum Berlin میں cytometers کی پیروی کرتے ہیں۔ FlowJo سافٹ ویئر (FlowJo v10, Three Star, Ashland, VA) کا استعمال کرتے ہوئے فلو سائٹومیٹری ڈیٹا کا تجزیہ کیا گیا۔

اینٹیجن اور اینٹیجن پول کی تیاری

ہم نے CD4 کو متحرک کرنے کے لیے درج ذیل اینٹیجنز کا استعمال کیا۔^پلسٹی سیل لائبریری پرکھ میں ٹی سیلز: {{0}}.5 ملی گرام/ملی گرام انسانی SNRPD1 (SmD1) ریکومبیننٹ پروٹین (Biorbyt Ltd.، Cambridge, UK)، 50 ng/ml انسانی SNRP70 (RNP70) ریکومبیننٹ پروٹین (Abcam Plc.، کیمبرج، UK)، 0.5 mg/ml قدرتی انسانی ہسٹون پروٹین (Abcam Plc.)، 0.5 mg/ml انسانی SS -A/Ro ریکومبیننٹ پروٹین (مہربانی سے Euroimmun AG، Lübeck، Germany کی طرف سے فراہم کردہ)، 0.5 mg/ml انسانی SS-B/La ریکومبیننٹ پروٹین (مہربانی سے Orgentec Diagnostika GmbH، مینز، جرمنی)، 1 mg/ml SEB (Sigma-Aldrich Chemie GmbH، Steinheim، Germany)، 1 mg/ml PepTivator Candida albicans MP65 (Miltenyi Biotec GmbH، Bergisch Gladbach، Germany)، اور 0.5 mg/ml انسانی transthyretin recombinant protein (ATGen, South Korea )۔

پیریفرل اور یورینری ٹی سیل لائبریریاں ایمپلیفائیڈ پیریفرل اور یورینری ٹی سیل لائبریریوں کو تیار کرنے کے لیے پروٹوکول کو اپنایا گیا تھا جیسا کہ پہلے بیان کیا گیا ہے۔^پلسٹی خلیات یا 500 سے 2000 پیشاب کی CD4^پلسٹی خلیوں کو اینٹی ہیومن سی ڈی 4 کا استعمال کرتے ہوئے الگ تھلگ کیا گیا تھا۔^پلسMicroBeads (Miltenyi Biotec GmbH) کارخانہ دار کی ہدایات کے مطابق۔ سی ڈی 4 کی پاکیزگی^پلسسی ڈی 3 کی بنیاد پر فالو سائٹومیٹری کا استعمال کرتے ہوئے ٹی سیل فریکشن کو معمول کے مطابق چیک کیا گیا۔^پلسسی ڈی 4^پلس expression, where the purity always reached >پردیی خون اور پیشاب کے نمونوں کے لیے بالترتیب 99 فیصد اور 70 فیصد سے 75 فیصد۔ متوازی طور پر، اینٹیجن پیش کرنے والے خلیات PBMCs سے CD3 خلیات کو جمع کرکے انسانی مخالف CD3 MicroBeads (Miltenyi Biotec GmbH) اور کریوپریزر کے ساتھ کمی کے بعد تیار کیے گئے تھے۔ ثقافت کے 1 سے 2 ہفتوں کے بعد، ایمپلیفائیڈ CD4 کے حصے^پلسT خلیات کو 96-کنویں پلیٹوں میں تقسیم کیا گیا تھا، اس کا انحصار اینٹیجنز کی تعداد پر کیا جانا ہے۔ اینٹیجنز کے ساتھ محرک سے پہلے، خلیوں کو کم از کم 4 دن تک آرام دیا گیا تھا۔ محرک کے دن، اینٹیجن پیش کرنے والے خلیوں کو پگھلا کر ٹی سیل کلچر میں کم از کم 1 اینٹیجن پیش کرنے والے سیل کے 100 CD4 کے تناسب میں تقسیم کیا گیا۔^پلسٹی خلیات. سی ڈی 4^پلسمنفی کنٹرول (غیر محرک خلیات) اور مثبت کنٹرول (SEB کے ساتھ متحرک خلیات) کے لیے ٹی سیل لائبریریوں کو ہمیشہ تجربات میں شامل کیا جاتا تھا۔ سی ڈی 4^پلس ٹی خلیوں کو 4 دن تک اینٹیجن کے ساتھ متحرک کیا گیا تھا، اور ایک معیاری [3 H]-thymidine پروٹوکول کا استعمال کرتے ہوئے پھیلاؤ کا تعین کیا گیا تھا۔

ایمپلیفائیڈ ٹی سیل دھماکوں نے انتہائی متضاد سکنٹیلیشن CPM کے ذریعہ دکھائے جانے والے اینٹی جینز کے لئے مختلف ردعمل ظاہر کیا۔ اس طرح، ڈونر کے لیے مخصوص زیڈ سکور کے طور پر طے شدہ پھیلاؤ کی حد کو معمول پر لانا ضروری تھا۔ z سکور کو غیر محرک مائیکرو کلچرز کے میڈین CPM سے اوپر 75ویں اور 25ویں پرسنٹائل کے 5 فرق کے طور پر شمار کیا گیا۔ SEB کے ساتھ متحرک مائیکرو کلچرز میں خلیات ایک مثبت کنٹرول کے طور پر کام کرتے ہیں۔ قابل غور بات یہ ہے کہ SEB محرک انڈیکس کے ساتھ مائیکرو کلچرز<5 for="" peripheral="" blood="" samples,="" or="" 4="" for="" urinary="" samples,="" were="" excluded="" because="" it="" indicated="" poor="" cell="" viability.="" enumeration="" of="" the="" precursor="" frequency="" of="" antigen-specific="">^پلسپوسن کی تقسیم کے مطابق منفی مائیکرو کلچرز کی تعداد کا استعمال کرتے ہوئے ٹی خلیوں کا حساب لگایا گیا اور فی 1 ملین خلیوں کا اظہار کیا گیا، جیسا کہ پہلے بیان کیا گیا ہے۔ Poisson کی تقسیم کا استعمال اس امکان پر مبنی ہے کہ کم از کم 1CD4^پلسٹی سیل ٹی سیل لائبریریوں کے ایک مائکروکلچر میں موجود ہوتا ہے جب اینٹیجن مخصوص محرک کے بعد تابکار سگنل کا پتہ چلا تھا۔

پیریفرل اور پیشاب کے ARTE طریقے ہم نے اس پروٹوکول کی پیروی کی جو CD154 MicroBead Kit (Miltenyi Biotec GmbH) استعمال کرتی ہے۔ مختصراً، خلیات کو 7 گھنٹے تک اینٹیجنز کے ساتھ متحرک کیا گیا اور پھر مینوفیکچرر کی ہدایات کے مطابق اینٹی ہیومن سی ڈی154-بایوٹین اینٹی باڈیز اور اینٹی بایوٹین مائکروبیڈز کا لیبل لگایا گیا۔ CD154-اظہار کرنے والے خلیوں کو افزودہ کرنے کے لیے لیبل والے سیلز کو کیلیبریٹڈ MS کالمز (Miltenyi Biotec GmbH) پر لوڈ کیا گیا تھا۔ carboxyfluorescein diacetate N-succinimidyl ester (Sigma-Aldrich Chemie GmbH) والے خلیوں کی لیبلنگ ایک معیاری پروٹوکول کے بعد کی گئی تھی۔

Cistanche بہتر ہوتا ہے۔گردہافعال.

سنگل سیل کلون کی تخلیق

سنگل سیل کلون اینٹیجن رد عمل والے خلیوں سے تیار کیے گئے تھے ، جو ARTE پروٹوکول کے بعد CD154 اظہار کے ذریعہ افزودہ ہوئے تھے۔ CD154-اظہار کرنے والے خلیوں کو ایک 30-mm تیاری کے فلٹر (Miltenyi Biotec GmbH) کے ساتھ فلٹر کیا گیا تھا اور 20 فیصد (v/v) کولڈ فاسفیٹ بفرڈ نمکین کے 1 ملی لیٹر میں دوبارہ معطل کیا گیا تھا، 0.5 فیصد بوائین سیرم البومین، اور 2mM ethylenediaminetetraacetic ایسڈ۔ خلیات CD154 کے لیے الگ الگ الگ سیل تھے۔^پلسسی ڈی 69^پلسفینو ٹائپ، اور سنگل ترتیب شدہ سیلز کو فیڈر سیلز کی موجودگی میں 96-کنویں پلیٹوں کے سنگل کنویں میں کلچر کیا گیا تھا۔ سیل ثقافتوں کو 3 سے 4 دن تک برقرار رکھا گیا جب تک کہ کئی کلون نظر نہ آئیں۔ بحالی سے ایک دن پہلے، اینٹیجن پیش کرنے والے خلیوں کو پگھلا کر ٹی سیل کلچر میں تقسیم کیا گیا

کم از کم 1 اینٹیجن پیش کرنے والا سیل 100 CD4 تک^پلسٹی خلیات. خلیوں کو 1 mg/ml antigen کے ساتھ متحرک کیا گیا تھا، اور غیر محرک کلون منفی کنٹرول کے طور پر کام کرتے تھے۔

اگلی نسل کی ترتیب پر مبنی TCR ذخیرے کا تجزیہ

جینومک ڈی این اے کو پیریفرل CD4 سے الگ تھلگ کیا گیا تھا۔^پلسAllPrep DNA/RNA مائیکرو کٹ (کیجین، وینلو، نیدرلینڈز) کا استعمال کرتے ہوئے T خلیات اور پیشاب کے خلیات۔ جیسا کہ پہلے بیان کیا گیا ہے پروٹوکول کے بعد دوبارہ کمبائنڈ TCR-b لوکس کو بڑھا دیا گیا تھا۔ IMSEQ کا استعمال کرتے ہوئے ریڈز پر کارروائی کی گئی، اور مساوی کلون ٹائپس کو کلسٹر کیا گیا اور مزید تجزیہ کیا گیا۔

شماریات

گراف پیڈ پرزم سافٹ ویئر (پرزم 8، گراف پیڈ سافٹ ویئر انکارپوریٹڈ، لا جولا، سی اے) کے ساتھ شماریاتی ٹیسٹ کیے گئے۔ متعدد موازنہ کے لیے بونفیرونی ایڈجسٹمنٹ کا اطلاق کیا گیا۔ Mann-Whitney U ٹیسٹ اور Wilcoxon سائنڈ رینک ٹیسٹ بالترتیب آزاد اور منحصر ڈیٹا سیٹ کے ساتھ تجربات میں استعمال کیے گئے۔ متعدد موازنہوں کے لیے بونفیرونی ایڈجسٹمنٹ کے بعد، اہم P اقدار کا حساب درست کیا گیا کیونکہ یہ منصوبہ بند موازنہ کی تعداد پر مبنی ہے۔ پی اقدار<0.01 were="" considered="" statistically="" significant="" with="" the="" following="" indication:="" *p="" <="" 0.01,="" **p="" <="" 0.005,="" and="" ***p="" <="" 0.0005.="" correlation="" analyses="" were="" performed="" using="" spearman="" rank="" correlations="" by="" showing="" the="" absolute="">نظامیlupuserythematosusخلیات کی تعداد اور بیماری کی سرگرمی کے درمیان ارتباط کی بہتر تفہیم فراہم کرنے کے لیے درجہ بندی کی اقدار کے بجائے DAI اقدار۔ ارتباط کے تجزیہ کے لیے، P قدریں۔<0.5 were="" considered="" statistically="" significant="" with="" the="" following="" indication:="" *p="" <="" 0.05,="" **p="" <="" 0.01,="" and="" ***p="" <="" 0.001.="" when="" background="" frequencies="" were="" higher="" than="" the="" frequencies="" of="" nuclear="" antigen–reactive="">^پلسT خلیات، پس منظر کے بغیر تعدد کو صفر کے طور پر بیان کیا گیا تھا۔ ڈیٹا سیٹ پر لاگ(x þ 1) تبدیلی لاگو کی گئی تھی جب اس میں صفر کی قدریں شامل تھیں۔ ضمنی مریض کا ڈیٹا اور شماریاتی ڈیٹا سپلیمنٹری ٹیبلز S1 اور S2 میں دستیاب ہیں۔

نیوکلیئر اینٹیجن – ری ایکٹیو CD4^پلسخلیات فعال طور پر پھیلتے ہیںنظامیlupuserythematosus، انفیکٹر سائٹوکائنز تیار کرتے ہیں ، اور انفیکشن کو متاثر کرتے ہیں۔گردے, cistanche حفاظت کر سکتے ہیںگردے.

انکشاف

تمام مصنفین نے مسابقتی دلچسپیوں کا اعلان نہیں کیا۔

اعترافات

ہم Flflow cytometry اور سیل چھانٹنے میں مدد کے لیے Toralf Kaiser اور Jenny Kirsch (Flow Cytometry and Cell Sorting Facility, Deutsches Rheuma-Forschungszentrum Berlin) کا شکریہ ادا کرتے ہیں۔ ان مطالعات کے لیے سپورٹ Deutsche Forschungsgemeinschaft کی طرف سے Sonderforschungsbereich 650 کے اندر GR اور Deutsche Gesellschaft für Nephrologie اور Charité-Universitätsmedizin Berlin اور Berlin Institute of Health کے لیے کلینکل سائنٹسٹ پروگرام کی گرانٹس کے ذریعے فراہم کی گئی تھی۔

سپلیمنٹری میٹریل سپلیمنٹری فائل (پی ڈی ایف)

شکل S1۔ خودکار ایٹمی اینٹیجن مخصوص CD4^پلسٹی سیلز کو ٹی سیل لائبریری کے طریقہ کار سے پتہ چلا۔ شکل S2۔ سی ڈی 154^پلسسی ڈی 69^پلسسی ڈی 4^پلسصحت مند افراد سے جوہری اینٹیجن کے ساتھ محرک کے بعد الگ تھلگ T خلیات بونا فائی اینٹیجن مخصوص CD4 ہیں۔^پلسٹی خلیات.

شکل S3۔ سائٹوکائن پیدا کرنے والی خودکار CD4 کی تعدد^پلسٹی خلیوں کا موازنہ اینٹی نیوکلیئر اینٹی باڈیز (اینٹی اے این اے) (اے) کے ٹائٹر اور اینٹی ڈبل اسٹرینڈ ڈی این اے اینٹی باڈیز (اینٹی ڈی ایس ڈی این اے) (بی) کے ساتھ کیا گیا۔

شکل S4۔ نیوکلیئر اینٹیجن ری ایکٹیو CD4^پلسفعال کے پیشاب میں ٹی خلیوں کا پتہ چلانظامیlupuserythematosusLN کے ساتھ مریضوں.

ٹیبل S1۔ کلینیکل ڈیٹا۔

ٹیبل S2۔ درمیانی قدروں کا خلاصہ۔

ضمنی طریقے۔

ایک بارگردہجوہری اینٹیجن – رد عمل CD4 کی وجہ سے متاثر ہوتا ہے۔^پلسخلیات فعال طور پر پھیل رہے ہیں۔نظامیlupuserythematosus, theگردہفنکشن تباہ ہو جاتا ہے، cistanche کو بہتر بنانے کے لیے استعمال کیا جاتا ہے۔گردہفنکشن

حوالہ جات

1. Casciola-Rosen LA, Anhalt G, Rosen A. Autoantigens کو نشانہ بنایا گیانظامی lupuserythematosusapoptotic keratinocytes پر سطحی ڈھانچے کی دو آبادیوں میں کلسٹرڈ ہیں۔ جے ایکس پی میڈ۔ 1994؛ 179: 1317–1330۔

2. Arbuckle MR، McClain MT، Rubertone MV، et al. کے کلینیکل آغاز سے پہلے آٹو اینٹی باڈیز کی ترقینظامیlupuserythematosus. این انگل جے میڈ۔ 2003؛ 349:1526-1533۔

3. Suarez-Fueyo A, Bradley SJ, Tsokos GC۔ ٹی سیلز میںنظامیlupuserythematosus. کرر اوپین امیونول۔ 2016؛ 43:32–38۔

4. کرو MK، DelGiudice-Asch G، Zehetbauer JB، et al. مریضوں میں رائبوسومل P2 پروٹین کی وجہ سے آٹو اینٹیجن مخصوص ٹی سیل پھیلاؤنظامیlupuserythematosus. جے کلین انویسٹ۔ 1994؛ 94:345–352۔

5. Engler JB، Undeutsch R، Kloke L، et al. خود کار طریقے سے CD4 کا نقاب ہٹانا^پلسٹی سیلز میں CD25 ریگولیٹری ٹی سیلز کی کمی کے ذریعےنظامیlupuserythematosus. این ریم ڈس۔ 2011؛70:2176–2183۔

اور وغیرہ.