Cistanoside Of Cistanche Herba Ameliorates Hypoxia سے متاثرہ مردانہ تولیدی نقصان آکسیڈیٹیو تناؤ کو دبانے کے ذریعے-Ⅱ

وٹرو میں ہائپوکسیا سے متاثرہ GC-1 سیل کی قابل عملیت پر Cis کے اثرات۔

یہ جانچنے کے لیے کہ آیا Cis ​​GC{{0}} سیل کی عملداری پر ہائپوکسیا کے روکنے والے اثرات کو روک سکتا ہے، ایک CCK-8 پرکھ کی گئی۔ GC-1 خلیوں کا علاج مختلف ذیلی قسموں (Cis-A, B, C, H) اور ارتکاز کی حدود (0۔{12}}2 μM, 0.2 μM, 72 گھنٹے کے لیے Cis ​​کا 2 μM)۔ DMSO گروپ کے ساتھ ماڈل گروپ کا موازنہ ظاہر کرتا ہے کہ DMSO نے براہ راست GC{{10}} سیل کی عملداری کو فروغ نہیں دیا (شکل 2A)۔ تاہم، سیل کی قابل عملیاں نمایاں طور پر بحال ہوئیں (P < 0.05) Cis علاج کے ساتھ۔ ماڈل گروپ کے مقابلے میں، Cis-A، Cis-B، Cis-C، اور Cis-H سبھی نے GC-1 سیل کی عملداری کو ہائپوکسیا کی وجہ سے ہونے والے نقصان پر کچھ حفاظتی اثرات دکھائے، اور Cis-B نے سب سے اہم دکھایا۔ اثر (شکل 2A)۔ 0.2 μM پر Cis کے حفاظتی اثرات 0.02 μM پر Cis کے حفاظتی اثرات سے نمایاں طور پر زیادہ تھے، جبکہ 2 μM اور 0.2 μM کے درمیان فرق واضح نہیں تھا، جس سے ظاہر ہوتا ہے کہ بحال CIS کی طرف سے حوصلہ افزائی کردہ GC-1 سیل کی عملداری نے 0 سے ارتکاز کی حد میں خوراک پر منحصر اضافہ ظاہر کیا۔{32}}.2 μM (شکل 2A)۔ لہذا، تجرباتی ضروریات کے مطابق، 0.2 μM Cis کو مندرجہ ذیل وٹرو تجربات میں بہترین ارتکاز کے طور پر منتخب کیا گیا تھا۔ مزید تصدیق کرنے کے لیے کہ آیا جراثیم کے خلیے واقعی Cis، FCM، اور Ki-67 کے ذریعے محفوظ کیے گئے تھے تاکہ Cis کے ساتھ علاج کے بعد GC-1 خلیوں کے پھیلاؤ کی تبدیلی کا اندازہ لگایا جا سکے۔ سی آئی ایس کے علاج پر، G1 مرحلے میں GC-1 خلیوں کا تناسب کم ہو گیا تھا۔ اس کے برعکس، زیادہ خلیے ایس مرحلے میں داخل ہوئے، جس سے یہ تجویز کیا گیا کہ سیس ٹریٹمنٹ جراثیم کے خلیوں کے پھیلاؤ کے انڈیکس میں اضافہ کر سکتا ہے (P <0.01؛ شکل 2B)۔ GC-1 سیل سائیکل کے اعدادوشمار کو شکل 2Bb میں دکھایا گیا ہے۔ Ki-67 کے داغدار نتائج نے یہ بھی ظاہر کیا کہ Cis-A، Cis-B، Cis-C، اور Cis-H علاج نے ہائپوکسیا سے متاثرہ GC کے Ki-67-مثبت سیل تناسب کو نمایاں طور پر بہتر بنایا ہے{{54} } وٹرو میں خلیات (شکل 2C)۔

جنسی فعل کو بہتر بنانے کے لیے نیچرل سیسٹینچ ٹیبلوسا PHGS75% ECH 30% ACT 12%

سی آئی ایس کا طریقہ کار جراثیم کے خلیوں کو وٹرو میں ہائپوکسیا سے بچاتا ہے۔

یہ جانچنے کے لیے کہ آیا GC-1 خلیوں پر Cis کے حفاظتی اثرات ضرورت سے زیادہ ROS کو ہٹانے سے متعلق تھے، فلوروسینٹ ڈائی DCFH-DA کا استعمال ہر گروپ میں ROS کی سطحوں کا پتہ لگانے کے لیے کیا گیا تھا۔ جیسا کہ اعداد و شمار 3A، اور 3B میں دکھایا گیا ہے، DMSO کے ساتھ علاج نے ماڈل گروپ کے مقابلے میں انٹرا سیلولر ROS مواد یا LPO کی سطح کو تبدیل نہیں کیا۔ تاہم، GC-1 سیلز میں ROS کی سطح Cis-علاج شدہ گروپس (شکل 3A) میں واضح طور پر کم ہوئی تھی۔ مزید برآں، CIS (شکل 3B) کے تابع GC-1 خلیوں میں بھی LPO میں کمی دیکھی گئی۔

اس طریقہ کار کو مزید دریافت کرنے کے لیے جس کے ذریعے سی آئی ایس جراثیم کے خلیوں کو ہائپوکسک چوٹ سے بچاتا ہے، اپوپٹوسس کا اندازہ کرنے کے لیے ٹونیل سٹیننگ، اور ویسٹرن بلٹ کے تجزیے کیے گئے۔ TUNEL سٹیننگ (شکل 3C) نے ماڈل اور DMSO گروپوں میں اہم apoptosis دکھایا۔ تاہم، Cis علاج کے ساتھ کم apoptotic خلیات کا مشاہدہ کیا گیا، جس سے ظاہر ہوتا ہے کہ Cis کے علاج نے GC-1 سیل اپوپٹوسس کو کم کیا۔ مزید برآں، PARP، Caspase-3، Bax، اور Bcl-2 کا اظہار مالیکیولر میکانزم کی تصدیق کے لیے ناپا گیا۔ جیسا کہ شکل 3D میں پیش کیا گیا ہے، Caspase-3 اور PARP کو ​​ہائپوکسیا کے تحت GC-1 خلیوں میں چالو کیا گیا تھا، اور یہ ایکٹیویشن Cis علاج کے ذریعے روکا گیا تھا۔ اس کے علاوہ، ماڈل گروپ میں Bax/Bcl-2 کا تناسب کنٹرول گروپ کی نسبت زیادہ تھا، اور Cis علاج نے Bax/Bcl-2 (شکل 3D) کا تناسب کم کر دیا۔ ان اعداد و شمار نے اشارہ کیا کہ سی آئی ایس میں ہائپوکسیا سے متاثرہ آکسیڈینٹ نقصان کو کم کرنے کی ممکنہ صلاحیت ہے، اور یہ حفاظتی اثر ROS کے جمع ہونے کو کم کرکے اور Caspaserelated apoptosis پاتھ وے ایکٹیویشن کو روک کر حاصل کیا جا سکتا ہے۔

OS کو روکنے والے انزیمیٹک میکانزم میں آزاد ریڈیکل اسکیوینجرز جیسے گلوٹاتھیون ریڈکٹیس (GR)، glutathione peroxidase (GPx)، اور سپر آکسائیڈ ڈسمیوٹیز (SOD) [23] شامل ہیں۔ OS کو روکنے والا انزیمیٹک میکانزم خلیوں اور بافتوں میں آکسیڈیٹیو نقصان کو روکنے میں اہم کردار ادا کرتا ہے [23]۔ GC-1 خلیات میں ہائپوکسیا سے متاثرہ OS کی Cis روک تھام کے ممکنہ طریقہ کار کو مزید درست کرنے کے لیے، GR، GPx اور SOD کی سرگرمیوں کی پیمائش کی گئی۔ نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ کنٹرول گروپس کے مقابلے میں GR، GPx، اور SOD سرگرمیاں نمایاں طور پر (P < 0 01، شکل 3E) ہائپوکسیا کے تحت کم ہوئیں، اور Cis علاج نے نمایاں طور پر ان کی سرگرمیوں کو بحال کیا۔ ہائپوکسیا (P <0.05، شکل 3E) کے سامنے آنے والے GC-1 خلیات، تجویز کرتے ہیں کہ یہ مرکبات طاقتور اینڈوجینس اینٹی آکسیڈینٹ نظام کو چالو کر سکتے ہیں۔

CISTANCHE TUBULOSA for motion Sperm Production PHGS75% ECH 30% ACT 12%

ہائپوبارک ہائپوکسیا سے متاثرہ چوہوں میں پنروتپادن پر سی آئی ایس کے اثرات۔

نر چوہوں پر ہائپوبارک ہائپوکسیا کے اثرات کا تعین کرنے کے لیے، ہم نے سب سے پہلے ہائپوبارک ہائپوکسیا سے متاثرہ چوہوں میں خصیوں کی مورفولوجیکل تبدیلیوں کا تجربہ کیا۔ ایچ ای سٹیننگ کے نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ کنٹرول گروپ میں، مختلف مراحل میں نارمل اسپرمیٹوجینک خلیات تہہ خانے کی جھلی سے لیمن تک منظم انداز میں ترتیب دیے گئے تھے، اور بالغ نطفہ ٹیوبول لیمنس (شکل 4A) میں دکھائی دے رہے تھے۔ کنٹرول کے مقابلے میں، ماڈل گروپ میں ورشن کے ٹشو کی پیتھولوجیکل تبدیلیاں دیکھی گئیں، ورشن کے اپکلا خلیوں کی تہہ خانے کی جھلی کو ڈھیلے طریقے سے ترتیب دیا گیا تھا، اسپرمیٹوجینک اپکلا انتہائی پتلا تھا، اور جراثیم کے خلیوں کی سطح اور تعداد میں واضح طور پر کمی واقع ہوئی تھی (شکل 4A) . تاہم، Cis کے ساتھ علاج نے Vivo (شکل 4A) میں ہائپوبارک ہائپوکسیا سے متاثرہ ورشن کے نقصان کی ہسٹولوجی کو نمایاں طور پر بہتر کیا۔ ہم نے جسمانی وزن، ٹیسٹس کا وزن، ایپیڈیڈیمس وزن، اور سیمینل ویسیکل غدود کا وزن بھی ناپا، جس کی وجہ سے تولیدی اعضاء کا اشاریہ (تولیدی اعضاء/جسمانی وزن کا تناسب) کا حساب لگایا گیا۔ جیسا کہ شکل 4B-D میں دکھایا گیا ہے، کنٹرول گروپ کے مقابلے ماڈل گروپ (P < 0.01) میں تولیدی اعضاء کا انڈیکس (ٹیسٹس، ایپیڈیڈیمس، اور سیمینل ویسیکل گلینڈ) نمایاں طور پر کم تھا۔ تاہم، چوہوں کے تولیدی اعضاء کے اشاریہ پر ہائپوبارک ہائپوکسیا کا اثر Cis علاج (شکل 4B-D) کے ساتھ الٹ گیا۔

اس کے بعد، اکروسوم انزائم کی سرگرمی اور مرد چوہے کے سپرم کی زندہ نطفہ کی شرح کو بھی خصیوں کے فنکشن کے نقصان کو واضح کرنے کے لیے ماپا گیا۔ جیسا کہ شکل 4E، 4F میں دکھایا گیا ہے، ماڈل گروپ کے چوہوں میں ایکروسوم انزائم کی سرگرمی اور سپرم کی حرکت پذیری کنٹرول گروپ کے مقابلے میں کم تھی (P < 0۔{5}}1)۔ تاہم، ماڈل گروپ میں چوہوں کے مقابلے میں، 8 ملی گرام/کلوگرام/ڈی سی آئی ایس (پی <0.05) (شکل 4D) کے ساتھ علاج کیے گئے چوہوں میں ایکروسوم انزائم کی سرگرمی بحال ہوئی۔ مزید یہ کہ جیسا کہ شکل 4F میں دکھایا گیا ہے، Cis کے ساتھ بھی علاجزندہ نطفہ کی شرح میں اضافہ; 8 mg/kg/d Cis کے ساتھ علاج کیے گئے چوہوں نے زندہ سپرم کی شرح میں نمایاں اضافہ دکھایا (55.83 ± 6۔{5}}%3, P < 0۔{17}}5; 69۔ {8}} ± 2.29%, P < 0.01; 52.33 ± 3.40%, P <0.05; اور 53.67 ± 2.25%, P <0.05) جب ماڈل چوہوں (43.83 ±) 4 کے ساتھ موازنہ کیا جائے۔ .

ایک ساتھ لے کر، ان نتائج نے تجویز کیا کہ ہائپوبارک ہائپوکسک ماحول نے خصیوں کی شکل میں تبدیلیاں، تولیدی اعضاء کے وزن میں کمی، اور نر چوہوں میں خصیوں کے فنکشن کو نقصان پہنچایا، اور سی آئی ایس تولیدی اعضاء کو ہائپوکسیا سے متاثر ہونے والے نقصان سے مؤثر طریقے سے بچا سکتا ہے۔

ہائپوبارک ہائپوکسیا سے متاثرہ چوہوں کے خصیوں میں OS پر Cis کے اثرات۔

چوہوں کے خصیوں میں ROS اور LPO کی سطح کو ہائپوبارک ہائپوکسیا سے متاثرہ OS پر Cis کے اثرات کا تجزیہ کرنے کے لیے ماپا گیا۔ ROS تجزیہ سے پتہ چلتا ہے کہ کنٹرول گروپ کے مقابلے میں، ماڈل گروپ میں ٹیسٹس میں ROS کی سطح میں نمایاں اضافہ ہوا تھا (P < 0۔{4}}1 شکل 5A)۔ اس کے برعکس، نارموکسک حالات (شکل 5B) کے مقابلے میں ہائپوبارک ہائپوکسیا کے تحت خصیوں (P < 0.01) میں LPO ڈرامائی طور پر بلند ہوا تھا۔ تاہم، Cis علاج نے مندرجہ بالا تبدیلیوں (P <0.05) کو تبدیل کیا، جس میں Cis-B نے دوسرے Cis ​​(شکل 5A، 5B) کے مقابلے میں بہتر اثرات مرتب کیے۔ ایسا لگتا ہے کہ سی آئی ایس ویوو میں ہائپوبارک ہائپوکسک حالات میں OS کو کم کرکے خصیوں کی حفاظت کرتا ہے۔

مزید برآں، اس طریقہ کار کا مزید جائزہ لینے کے لیے اپوپٹوس کے تجزیے کیے گئے جس کے ذریعے سی آئی ایس نے ہائپوبارک ہائپوکسیا سے متاثرہ ورشن کے فنکشن کی چوٹ سے حفاظت کی۔ TUNEL سٹیننگ (شکل 5C) کے نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ کنٹرول گروپ کے مقابلے ماڈل گروپ میں اہم اپوپٹوسس موجود تھا۔ تاہم، Cis (8 mg/kg/d) علاج کے بعد، کم apoptotic خلیات واقع ہوئے (P < 0.05) (شکل 5C)۔ مغربی دھبے کے اعداد و شمار نے یہ بھی ظاہر کیا کہ ہائپوکسیا اور ہائپوبارک علاج کے نتیجے میں Caspase-3 اور PARP کو ​​چالو کیا گیا اور خصیوں کے بافتوں میں Bax/Bcl-2 تناسب میں اضافہ ہوا، جو apoptosis میں اضافے کی نشاندہی کرتا ہے (شکل 5D)۔ اس کے علاوہ، مختلف اقسامسی آئی ایس کا علاجخصیوں کے بافتوں میں apoptosis کو نمایاں طور پر کم کیا گیا (شکل 5D)۔ اسی طرح، ورشن کے ٹشو کے IHC تجزیہ نے اسی طرح کے نتائج دکھائے (ضمنی شکل 1)۔

ہائپوبارک ہائپوکسیا کے ذریعہ شروع ہونے والے سی آئی ایس کم شدہ OS کے طریقہ کار کی توثیق کرنے کے لئے، ہم نے ٹیسٹیکولر ٹشو میں GR، GPx، اور SOD کی سرگرمیوں کا مزید تجربہ کیا۔ جیسا کہ شکل 5E میں دکھایا گیا ہے، کنٹرول گروپ کے مقابلے میں، ہائپوبارک ہائپوکسیا کے علاج نے GR، GPx، اور SOD سرگرمیوں کو نمایاں طور پر کم کیا (P < 0۔{4}}1)۔ تاہم، سی آئی ایس کے علاج نے ہائپوبارک ہائپوکسیا (P <0.05) کے ساتھ علاج کیے جانے والے چوہوں میں خصیوں کے ٹشوز کی انزائم سرگرمیوں (GR، GPx، اور SOD) کو بحال کیا۔ آخر میں، ایسا لگتا ہے کہ سی آئی ایس ہائپوبارک ہائپوکسیا کے حالات میں ایک طاقتور اینڈوجینس اینٹی آکسیڈینٹ انزائم ڈیفنس میکانزم کو چالو کرکے خصیوں کی حفاظت کرتا ہے۔

جنسی فعل کو بہتر بنانے کے لیے نیچرل سیسٹینچ ٹیبلوسا PHGS75% ECH 30% ACT 12%

بحث

اونچائی والے علاقوں میں، ہائپوبارک ہائپوکسیا انسانوں میں متعدد نظاموں کو متاثر کرنے کے لیے جانا جاتا ہے، بشمول مردانہ تولیدی نظام [4، 20]۔ حالیہ تجرباتی تحقیقات اس طریقہ کار کو سمجھنے کے لیے تیار ہیں کہ ہائپوبارک ہائپوکسیا کس طرح مردانہ تولیدی نظام کو متاثر کرتا ہے۔ اس مطالعہ میں، ہائپوکسیا سے متاثرہ تولیدی نقصان پر Cistanches Herba سے Cis ​​اقتباس کے علاج کے اثر کی تحقیقات کی گئیں۔ نتائج نے ظاہر کیا کہ سی آئی ایس مردانہ تولیدی نظام کو ہائپوکسیا سے متاثرہ ROS جمع اور OS کو کم کرکے اینڈوجینس اینٹی آکسیڈینٹ انزائمز کی سرگرمی کو بڑھا کر ہائپوکسک نقصان سے بچا سکتا ہے۔

ROS آکسیجن سے ماخوذ فری ریڈیکلز ہیں جو انسانی فزیالوجی اور پیتھالوجی میں اہم کردار ادا کرتے ہیں۔ ROS کی کم خوراکیں ضروری ہیں۔سپرم کی صلاحیت، ایکروسوم رد عمل، اور سپرمیٹوزوا-آوسیٹ فیوژن [24، 25]۔ تاہم، ROS کا زیادہ جمع ہونا اکثر جراثیم کے خلیوں اور سٹرومل خلیوں کو نقصان پہنچاتا ہے، جس کے نتیجے میں مردانہ بانجھ پن ہوتا ہے [26]۔ ROS آسانی سے سیل کی جھلیوں، نیوکلک ایسڈز، پروٹینز، انزائمز اور دیگر حیاتیاتی میکرو مالیکیولز کو پیرو آکسیڈیشن کے ذریعے نقصان پہنچا سکتا ہے۔ مزید برآں، جب وہ اینٹی آکسیڈینٹ لے جانے کی صلاحیت سے تجاوز کرتے ہیں تو وہ ممکنہ سیلولر اور ڈی این اے کو بھی نقصان پہنچاتے ہیں۔ جمع شدہ شواہد مردانہ زرخیزی کے روگجنن میں ROS کے اہم کردار کی حمایت کرتے ہیں [27، 28]۔ ROS کی پیداوار کو آکسیجن تناؤ کے ذریعے منظم کیا جاتا ہے۔ ہائپوکسک حالات کے تحت، ماحول میں دستیاب آکسیجن کم ہو جاتی ہے اور خون کی واسکاسیٹی بڑھ جاتی ہے، اس طرح جسم میں آکسیجن پر منحصر بہت سے میٹابولک عمل متاثر ہوتے ہیں [29، 30]۔ تاہم، اونچائی پر کم ہوا کا دباؤ کمزور وینس کی واپسی اور خون کے بہاؤ کے ذریعے حیاتیات کے تمام خلیوں تک پہنچانے والی آکسیجن کی مقدار میں کمی کا سبب بنتا ہے، جو اعضاء اور خلیوں کے ہائپوکسیا کو مزید بڑھاتا ہے [29، 30]۔ اس طرح، اونچائی پر نمائش ہائپوکسک جسمانی ردعمل کی ایک سیریز کو جنم دیتی ہے، بشمول ROS کی پیداوار اور جمع، جب آکسیجن کی طلب عروقی سپلائی سے زیادہ ہو جاتی ہے۔ جیسا کہ پہلے ذکر کیا گیا ہے، ROS کے جمع ہونے سے مختلف قسم کے انٹرا سیلولر اثرات مرتب ہوتے ہیں، جن میں سب سے اہم خلیات میں OS کا سبب بننا ہے۔

OS سے مراد آکسیڈیشن اور کمی کے رد عمل کے درمیان عدم توازن ہے، جس کے نتیجے میں اضافی آکسیڈینٹس یا مالیکیولز پیدا ہوتے ہیں جو دوسرے ری ایکٹنٹ سے الیکٹران کو قبول کرتے ہیں، جس کے نتیجے میں ROS [31، 32] پیدا ہوتا ہے۔ OS کو اچھی طرح سے سمجھا جاتا ہے کہ وہ endogenous اور exogenous عوامل کی ایک سیریز سے متحرک ہو سکتا ہے، بشمول اونچائی کی نمائش۔ Spermatozoa وہ خلیات ہیں جو OS کے لیے خاص طور پر حساس ہوتے ہیں کیونکہ ان کے خلیات کی مرمت کے نظام کی کمی اور پولی انسیچوریٹڈ فیٹی ایسڈز کے اعلی پلازما جھلی کے مواد کی وجہ سے [33]۔ ورشن اور ایپیڈیڈیمل ٹشوز بھی اس سے مستثنیٰ نہیں ہیں، کیونکہ ہائپوکسیا کا شکار چوہوں میں گول اسپرمیٹائڈس میں شدید OS کی موجودگی دیکھی گئی ہے [4]۔ OS DNA کے استحکام کو متاثر کرتا ہے، اس طرح گیمیٹ جینیاتی مواد [34-36] کی سالمیت کو خطرے میں ڈالتا ہے۔ تاہم، مردانہ گیمیٹس میں ڈی این اے کو پہنچنے والے نقصان کی ایک اعلی سطح کی تصدیق کی گئی ہے جو اپوپٹوس سگنلنگ کو چالو کرنے کا باعث بنتی ہے، جس کے نتیجے میں ایپیڈیڈیمل سپرم کی گنتی میں کمی اور عیب دار خلیوں کی فیصد میں اضافہ ہوتا ہے [28، 37]۔ موجودہ مطالعہ میں، ہائپوکسیا نے اپوپٹوسس اور سیل سائیکل گرفتاری کی شمولیت کے ذریعے GC-1 خلیوں کی عملداری کو نمایاں طور پر کم کیا۔ زیادہ اہم بات یہ ہے کہ ہائپوکسیا محرک کے بعد ایف سی ایم تجزیہ کے ذریعہ نمایاں طور پر بڑھی ہوئی ROS کی سطحیں دکھائی گئیں، جس میں اپوپٹوسس کی شرح میں اضافہ اور Caspase-3، PARP، اور Bax/Bcl-2 تناسب کے اعلی ایکٹیویشن کے ساتھ، یہ ظاہر کرتا ہے کہ ROS فعال ہو سکتا ہے۔ ہائپوکسیا سے متاثرہ زرخیزی کے نقصان کے دوران کیسپیس سگنلنگ پاتھ وے کو چالو کرکے اپوپٹوس۔ موجودہ نتائج نے یہ ظاہر کیا کہ ہائپوکسیا کی وجہ سے زیادہ سے زیادہ ROS جمع ہوتا ہے، جس سے تولیدی خلیوں کو آکسیڈیٹیو نقصان ہوتا ہے۔ اس طرح، نئے اینٹی آکسیڈنٹس کی نشاندہی کرنا معنی خیز ہے جو ہائپوکسیا سے متاثرہ زرخیزی کی چوٹ کو کم کرنے کے لیے ایک مؤثر طریقہ کار کے طور پر کام کر سکتے ہیں۔

OS کے خلاف حفاظت کے لیے، جسم میں ایک پیچیدہ اینٹی آکسیڈینٹ نظام موجود ہے، جو بنیادی طور پر انزیمیٹک عوامل پر مشتمل ہوتا ہے۔ جسمانی حالات کے تحت، ROS مواد اور اینٹی آکسیڈینٹ نظام ایک خاص توازن برقرار رکھتے ہیں۔ تاہم، ROS کی زیادہ پیداوار سپرم اینٹی آکسیڈینٹ سسٹم کو ختم کر دیتی ہے، جس سے OS ہوتا ہے، جو سپرم DNA کو نقصان پہنچاتا ہے اور اس کے نتیجے میں زرخیزی اور حمل کی شرح کم ہوتی ہے [23]۔ اس طرح، مردانہ تولیدی نظام میں سیلولر سطح پر ROS کی زیادہ پیداوار اور متعلقہ مضر اثرات سے نمٹنے کے لیے، مختلف اینٹی آکسیڈینٹ حکمت عملیوں کا تجربہ کیا گیا ہے [23]۔ فی الحال، اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی کے ساتھ مرکبات کے استعمال سے متعلق ادب اورسپرم کی تقریب میں بہتریوسیع ہے. اہم بات یہ ہے کہ زیادہ تر رپورٹیں زبانی اینٹی آکسیڈینٹ کے استعمال کے بعد سپرم کے پیرامیٹرز میں بہتری کی وضاحت کرتی ہیں، بشمولسپرم کی حراستی میں بہتریاور حرکت پذیری یا ڈی این اے کے نقصان میں کمی [38]۔ اس طرح، یورولوجسٹ کی بڑھتی ہوئی تعداد OS سے متعلقہ مسائل کی وجہ سے بانجھ پن کے لیے زبانی اینٹی آکسیڈنٹ تجویز کر رہی ہے [39]۔ ان اینٹی آکسیڈینٹس میں بنیادی طور پر کارنیٹائنز، وٹامنز، زنک، میلاٹونن اور قدرتی مرکبات شامل ہیں [23، 40]۔ فی الحال، منشیات نکالنے کی ٹیکنالوجی کی ترقی کے ساتھ، TCM کے عرقوں کی بڑھتی ہوئی تعداد پر بھی مردانہ بانجھ پن کو کم کرنے پر غور کیا جا رہا ہے کیونکہ یہ اینٹی آکسیڈنٹس OS [41] کے تباہ کن اثرات کو کم کر سکتے ہیں۔ Yüce A. et al. 2013 میں رپورٹ کیا گیا کہ دار چینی خصیوں اور سپرم کے معیار میں آکسیڈیٹیو اور اینٹی آکسیڈینٹ توازن پر فائدہ مند اثرات رکھتی ہے [42]۔ Zhang L et al. نے ظاہر کیا کہ کرکومین مریضوں میں سپرم کی حرکت کو نمایاں طور پر بہتر بناتا ہے اور H2O2 کو کم کرتا ہے [43]۔ اس کے علاوہ، مختلف قسم کے دیگر پودوں کے نچوڑ جیسے بلو بیری، کروکس سیٹیوس، انار کے بیج، اور سبز چائے کو بھی اینٹی آکسیڈینٹ میکانزم کے ذریعے تولیدی نظام کی حفاظت کے لیے دکھایا گیا ہے [27, 44-47]۔ Cistanches Herba ایک اہم TCM ہے جو کہ دیگر حالات کے علاوہ بانجھ پن کے علاج کے لیے سازگار حفاظتی پروفائل اور وسیع طبی افعال رکھتا ہے [13]۔ جدید فارماسولوجیکل مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ Cistanches Herba مختلف سرگرمیاں رکھتا ہے، جیسے اینٹی آکسیڈیٹیو، اینٹی سوزش، ہیپاٹوپروٹیکٹو، اور اینٹی نیوروڈیجنریٹیو بیماری کی سرگرمیاں [13، 48]۔ لہذا، Cistanches Herba کے نچوڑ، کسر، یا مرکبات میں بانجھ پن کے علاج کے لیے ممکنہ اینٹی آکسیڈینٹ خصوصیات ہو سکتی ہیں۔

پودوں میں فعال مادے جو زرخیزی کو بہتر بناتے ہیں ان میں مختلف کیمیائی گروپس شامل ہیں جیسے PhGs، saponins، oxygenated volatile compounds، اور alkaloids [41]۔ PhGs کے فارماسولوجیکل سرگرمی کے مطالعے نے یہ ثابت کیا ہے کہ PhGs بائیو ایکٹیویٹی کی ایک وسیع رینج کی نمائش کرتے ہیں، جیسے اینٹی آکسیڈیشن، اینٹی ریڈی ایشن نیورو پروٹیکشن، اور جنسی فعل میں اضافہ [49، 50]۔ ان سرگرمیوں میں، اینٹی آکسیڈیشن آہستہ آہستہ توجہ مبذول کر رہی ہے۔ پی ایچ جی کے کچھ واحد اجزاء یا حصے مختلف کیمیکلز کے ذریعہ جراثیم سیل اپوپٹوسس کو روکنے کے لئے رپورٹ کیے گئے ہیں، اور وٹرو میں ان کی اینٹی آکسیڈیشن صلاحیتوں کو بھی جانوروں کے متعدد ماڈلز [51، 52] میں ویوو میں ظاہر کیا گیا ہے۔ یہ نتائج بتاتے ہیں کہ PhGs کے لیے ایک پرکشش امیدوار ہو سکتا ہے۔مردانہ بانجھ پن کا علاج. Cis ایک فعال PhG ہے جسے Cistanches Herba سے الگ کیا جا سکتا ہے۔ موجودہ مطالعے میں، ہم نے ہائپوکسیا سے علاج شدہ خلیوں یا چوہے کے ماڈل پر Cis کے اثرات کی کھوج کی اور بنیادی مالیکیولر میکانزم کی چھان بین کی۔ CIS نے ہائپوکسیا کی حوصلہ افزائی کی قابل عملیت میں کمی اور GC-1 خلیوں میں apoptosis میں اضافے پر حفاظتی سرگرمیوں کی نمائش کی، اور اس نے Vivo میں چوہوں کے تولیدی نظام میں ہائپوکسیا کی وجہ سے ہونے والے نقصان پر حفاظتی اثر بھی دکھایا۔ نارموکسک گروپس کے مقابلے میں ہائپوکسیا کے تحت GR، GPx، اور SOD کی سرگرمیوں میں نمایاں کمی دیکھی گئی، جبکہ GR، GPx، اور SOD کی مخصوص سرگرمیوں میں ٹیسٹس یا GC-1 خلیوں میں نمایاں طور پر اضافہ ہوا جو Cis کے ساتھ علاج کیا گیا۔ ایسا لگتا ہے کہ سی آئی ایس اینٹی آکسیڈینٹ انزائمز کی سرگرمیوں کو بڑھا کر ہائپوکسک حالات میں خصیوں اور GC-1 خلیوں کی حفاظت کرتا ہے۔

انزائم اینٹی آکسیڈنٹس بنیادی طور پر سپر آکسائیڈ اینیون کو صاف کرکے کام کرتے ہیں، اس طرح بانجھ پن کو روکنے کے لیے لپڈ پیرو آکسائیڈیشن اور ڈی این اے کو پہنچنے والے نقصان کو روکتے ہیں۔ انزیمیٹک اینٹی آکسیڈینٹ میکانزم آکسیڈیٹیو نقصان کو روکنے میں اہم کردار ادا کرتے ہیں [23]۔ OS کے خلاف انزیمیٹک میکانزم میں فری ریڈیکل اسکیوینجرز اور گلوٹاتھیون پر منحصر انزائمز شامل ہیں جن میں GR، GPx، اور SOD [12] شامل ہیں۔ اینٹی آکسیڈینٹ انزائمز کو اچھی طرح سے سمجھا جاتا ہے کہ وہ مردانہ تولیدی نظام کے لیے ضروری ہیں۔ موجودہ مطالعہ میں، ہائپوبارک ہائپوکسیا کے تحت کم اینٹی آکسیڈینٹ انزائم سرگرمیوں کا اثر ماڈل گروپ میں ROS اور LPO میں اضافہ کے ساتھ تھا، جو پچھلی رپورٹس کے مطابق ہے [12]۔ تاہم، سی آئی ایس انتظامیہ نے GC-1 کے خلیوں اور چوہوں کے ٹیسٹس میں اینٹی آکسیڈینٹ انزائم کی سرگرمیوں کی بحالی کا باعث بنا، جس سے ہائپوبارک ہائپوکسیا کی وجہ سے ہونے والے نقصان کو روکنے کے لیے Cistanches Herba کے انتظام کے لیے حکمت عملی تیار کرنا ممکن ہوا، جیسا کہ پہلے تجویز کیا گیا تھا۔ اگرچہ موجودہ نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ سی آئی ایس کے ساتھ علاج سے چوہوں میں ہائپوکسیا سے متاثرہ جراثیمی خلیوں کے نقصان میں جزوی طور پر کمی واقع ہوئی ہے، لیکن اس کے تولیدی حفاظتی اثرات کی مکمل تصویر کو کھولنے کے لیے مزید تحقیقات کی ضرورت ہے۔ مثال کے طور پر، سی آئی ایس کا مخصوص طریقہ کار اینٹی آکسیڈینٹ انزائمز کی سرگرمی کو متاثر کرتا ہے۔ اس کے علاوہ، ایک سوال یہ بھی ہے کہ آیا کوئی دوسرا میکانزم بھی مناسب ہو سکتا ہے کیونکہ Cis صرف جزوی طور پر ہائپوکسیا کی وجہ سے تولیدی نقصان سے ٹھیک ہوا ہے۔ آخر میں، کیا جراثیم کے خلیوں پر Cis کا براہ راست نمو کو فروغ دینے والا اثر ہے اس پر بھی غور کیا جانا چاہیے۔

نطفہ کی سرگرمی کو برقرار رکھنے کے لیے نیچرل سیسٹینچ ٹیبلوسا PHGS75% ECH 30% ACT 12%

نتائج

عام طور پر، اس مطالعے کے نتائج ہائپوکسیا سے متاثرہ مردانہ تولیدی نقصان کے علاج کے لیے اینٹی آکسیڈینٹ کے طور پر سی آئی ایس کی صلاحیت پر زور دیتے ہیں۔ سی آئی ایس اینٹی آکسیڈینٹ انزائم کی سرگرمی کو بحال کرکے، ROS کی حوصلہ افزائی OS کو کم کرکے، بیک وقت خلیے کی عملداری کو بڑھا کر، اور apoptosis کو کم کرکے ہائپوکسیا سے متاثرہ مردانہ تولیدی نقصان سے بچا سکتا ہے۔ اہم بات یہ ہے کہ، اس تحقیق میں زیر مطالعہ Cis ذیلی قسمیں (Cis-A، Cis-B، Cis-C، اور Cis-H) نے نظام تولید پر ایک خاص حفاظتی اثر دکھایا، اور Cis-B نے سب سے اہم اثر دکھایا۔ لہذا، ہم قیاس کرتے ہیں کہ سی آئی ایس کے لئے ایک اچھا امیدوار اینٹی آکسیڈینٹ ہوسکتا ہے۔ہائپوکسیا سے متاثرہ مردانہ تولیدی نقصان کا علاج، اگرچہ عین بنیادی میکانزم کو مزید تفتیش کی ضرورت ہے۔