جوانی اور صحت مند جلد کو برقرار رکھنے کے لیے کیا کھائیں یہ فیصلہ کرنا مشکل مسائل ہیں۔

مزید معلومات کے لیے رابطہ کریں۔

خلاصہ:جلد کی بڑھتی عمر پر خوراک کا اثر ایک دلچسپ تحقیقی موضوع بن چکا ہے۔ پچھلے مطالعات میں زیادہ تر سمندری جانداروں سے حاصل ہونے والے کولیجن پیپٹائڈس کے فائدہ مند اثرات پر توجہ مرکوز کی گئی ہے جب اسے زبانی طور پر دیا جاتا ہے، جب کہ پولٹری سے اخذ کردہ کولیجن پیپٹائڈس کے فائدہ مند اثرات کو عمر رسیدہ جلد پر شاذ و نادر ہی رپورٹ کیا گیا ہے۔ اس مطالعہ میں، کولیجن پیپٹائڈس کو چکن کی ہڈی سے انزیمیٹک ہائیڈولیسس کے ذریعے تیار کیا گیا تھا، اور D-galactose کے ساتھ مل کر UV کی وجہ سے جلد کی عمر بڑھنے کے خاتمے پر زبانی طور پر زیر انتظام کولیجن پیپٹائڈس کے اثر اور طریقہ کار کی تحقیقات کی گئیں۔ نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ چکن کی ہڈی کے کولیجن میں کولیجن کی مخصوص خصوصیات ہوتی ہیں، اور چکن کی ہڈی کے کولیجن پیپٹائڈس (CPs) بنیادی طور پر چھوٹے مالیکیولر پیپٹائڈز تھے جن کا مالیکیولر وزن<3000 da.="">cistanche زندگی کی توسیعVivo کے تجربات سے پتہ چلتا ہے کہ CPs کا عمر بڑھنے والی جلد پر ایک اہم راحت بخش اثر ہوتا ہے، جس کی نشاندہی بڑھتی ہوئی جلد کی ساخت اور ساخت میں تبدیلی، جلد کے اینٹی آکسیڈینٹ کی سطح میں بہتری، اور سوزش کی روک تھام سے ہوتی ہے۔ ریلیفنگ اثر مثبت طور پر CPs کی خوراک کے ساتھ منسلک کیا گیا تھا. مزید تحقیقات سے پتہ چلتا ہے کہ CPs پہلے جلد کے آکسیکرن کی سطح کو کم کرتے ہیں، کلیدی ٹرانسکرپشن فیکٹر AP-1 (c-Jun اور c-Fos) کے اظہار کو روکتے ہیں، پھر کولیجن کی ترکیب کو فروغ دینے کے لیے TGF-/Smad سگنلنگ پاتھ وے کو چالو کرتے ہیں۔ ، کولیجن کے انحطاط کو روکنے کے لیے MMP-1/3 کے اظہار کو روکتا ہے، اور چوہوں میں جلد کی عمر کو کم کرنے کے لیے جلد کی سوزش کو روکتا ہے۔ مزید برآں، سکن ٹرانسکرپٹوم نے پایا کہ CPs کی زبانی انتظامیہ کے بعد چالو ہونے والے lysosomes جلد کی عمر بڑھانے میں CPs کے لیے ایک اہم راستہ ہو سکتا ہے، اور مزید تحقیق کے لائق ہے۔ ان نتائج نے تجویز کیا کہ CPs کو ایک فعال اینٹی ایجنگ غذائی اجزاء کے طور پر استعمال کیا جاسکتا ہے۔

مزید جاننے کے لیے براہ کرم یہاں کلک کریں۔

مطلوبہ الفاظ:کولیجن پیپٹائڈس؛ مخالف عمر؛ جلد کی نقل؛ کولیجن کی ترکیب؛ lysosomes

1. تعارف

صحت کا دور، صحت مند غذا کی درست طریقے سے پیروی، جلد کی عمر بڑھانے میں غذائیت کے کردار کا تعین، اور یہ فیصلہ کرنا کہ جوان اور صحت مند جلد کو برقرار رکھنے کے لیے کیا کھایا جائے مشکل مسائل ہیں۔ جلد جسم کا سب سے بڑا عضو ہے، جو ایپیڈرمس، ڈرمیس اور ذیلی پرت پر مشتمل ہے۔ یہ جسم کو بیرونی عوامل سے بچانے میں رکاوٹ کا کام کرتا ہے اور صحت اور خوبصورتی میں بھی کردار ادا کرتا ہے[1]۔ جلد کی عمر بڑھنا ایک پیچیدہ عمل ہے، جسے تاریخی عمر اور تصویر کی عمر میں تقسیم کیا جاتا ہے اور یہ اندرونی اور بیرونی دونوں عوامل سے متاثر ہوتا ہے۔ اہم خصوصیات میں خلیے میں میکرو مالیکولر نقصان کا جمع ہونا، اسٹیم سیل کے فنکشن کا زوال (ٹشو کی تجدید کو فروغ دینا)، اور جلد کی جسمانی سالمیت کا بتدریج نقصان [2] شامل ہیں۔ اہم مالیکیولر میکانزم جو جلد کی عمر بڑھنے کا سبب بنتے ہیں ان میں بنیادی طور پر آکسیڈیٹیو تناؤ، ٹیلومیر شارٹننگ، ڈی این اے کو پہنچنے والے نقصان، جینیاتی تغیر، مائیکرو-آر این اے ریگولیشن، ایڈوانسڈ گلائیکیشن اینڈ پروڈکٹ جمع، اور سوزش کی عمر [3] شامل ہیں۔ فوٹو ایجنگ جلد کا ایپیڈرمل ہائپرپالسیا، خشک ہونا، اور الٹرا وایلیٹ تابکاری کے ذریعہ ایکسٹرا سیلولر میٹرکس انحطاط ہے۔cistanche nzفوٹو ایجنگ کی بنیادی وجہ الٹرا وائلٹ شعاعوں سے پیدا ہونے والی ری ایکٹیو آکسیجن اسپیسز (ROS) ہے جو میٹرکس میٹالوپروٹیناسز (MMPs) اور ٹائپ-I پرو کولیجن کے اظہار میں ثالثی کرتی ہے جیسے کہ mitogen-activated protein kinase (MAPK) سگنلنگ۔ راستہ، اس طرح جلد میں ایکسٹرا سیلولر میٹرکس (ECM) کے انحطاط اور fibroblasts کے apoptosis کا باعث بنتا ہے [4]۔ حالیہ برسوں میں، جلد کی صحت کو برقرار رکھنا اور عمر بڑھنے میں تاخیر مقبول ہو گئی ہے، اور قدرتی اجزاء جیسے بائیو ایکٹیو پیپٹائڈز اور پولیفینول کو اینٹی آکسیڈینٹ اور اینٹی ایجنگ افعال کے ساتھ تلاش کرنا ایک تحقیقی مرکز بن گیا ہے [5]۔

تاہم، کولیجن کا سالماتی وزن بڑا ہوتا ہے اور اسے براہ راست جذب اور استعمال میں لانا مشکل ہوتا ہے، جب کہ کولیجن ہائیڈولیسس کے بعد چھوٹے مالیکیولر کولیجن پیپٹائڈس میں مضبوط حیاتیاتی سرگرمی اور جذب کی شرح زیادہ ہوتی ہے [6]۔ دریں اثنا، خوراک، ادویات، ٹشو انجینئرنگ، کاسمیٹکس، اور دیگر شعبوں میں کولیجن کے وسیع اطلاق نے کم مالیکیولر وزن، زیادہ جذب کرنے کی کارکردگی، اور مضبوط حیاتیاتی سرگرمی کے ساتھ کولیجن پیپٹائڈس کو فعال خوراک اور طبی تحقیق میں ایک نیا پسندیدہ بنا دیا ہے۔ }}]۔ کولیجن پیپٹائڈز چھوٹے ہوتے ہیں، جن میں 2-20 امینو ایسڈ کی باقیات ہوتی ہیں جو کولیجن ہائیڈولیسس کے بعد حاصل ہوتی ہیں۔ ان کے ممکنہ سوزش اور اینٹی آکسیڈینٹ افعال اور مدافعتی ضابطے اور جلد کے فائبرو بلاسٹس پر اینٹی آکسیڈیشن اور پھیلاؤ کے اثرات کی وجہ سے انہیں جلد کی عمر بڑھنے کے علاج کے لیے بطور غذائی ضمیمہ استعمال کیا جاتا ہے [10]۔

Cistanche بڑھاپے کو روک سکتا ہے۔

زبانی انتظامیہ کے بعد، کولیجن پیپٹائڈز چھوٹے پیپٹائڈس کی شکل میں جذب ہوتے ہیں اور تیزی سے خون میں منتقل ہوتے ہیں، اور آخر کار، گردوں، جلد، جوڑوں، اور دیگر بافتوں کو ذخیرہ کرنے اور استعمال کرنے کے لیے۔ 14 دنوں کے بعد، چوہوں کی جلد میں ریڈیو ایکٹیویٹی کی سطح بلند رہی جن کو C14-لیبل والے کولیجن پیپٹائڈس کے ساتھ گیویج کیا گیا تھا۔ کولیجن پیپٹائڈز تقریباً مکمل طور پر جسم کے ذریعے جذب اور استعمال کیے جا سکتے ہیں، جبکہ کولیجن کے جذب اور استعمال کی شرح صرف 50-60 فیصد [6,11-13] ہے۔ حالیہ برسوں میں، مچھلی کی جلد، مچھلی کے پیمانے، گائے کی ہڈی، گائے کی جلد، اور سور کی جلد سے حاصل ہونے والے کولیجن ہائیڈرولیسیٹ کے بارے میں بڑے پیمانے پر اطلاع دی گئی ہے کہ جلد کی عمر کو کم کرنے پر فائدہ مند اثرات مرتب ہوتے ہیں اور محققین کی طرف سے کافی توجہ حاصل کی گئی ہے۔ مثال کے طور پر، سلور کارپ کی جلد سے الگ تھلگ کولیجن پیپٹائڈس پرو کولیجن کی ترکیب کو فروغ دیتے ہیں اور AP-1، MMP-1، اور MMP-3 پروٹین کے اظہار کو TGF-/Smad کو چالو کرکے روکتے ہیں۔ کولیجن انحطاط اور فوٹو ایجڈ جلد کے خلیوں کی مرمت [14]۔ بوائین کولیجن پیپٹائڈس کی زبانی انتظامیہ جلد کی نرمی کو بہتر بنا سکتی ہے، کولیجن کے مواد اور اینٹی آکسیڈینٹ انزائم کی سرگرمی کو بڑھا سکتی ہے، کولیجن فائبر کی مرمت کر سکتی ہے، اور عمر رسیدہ چوہوں میں جلد کے کولیجن تناسب کو معمول پر لا سکتی ہے [15]۔ تاہم، مختلف ذرائع سے کولیجن پیپٹائڈس کے مختلف اثرات ہوتے ہیں۔ کولیجن پیپٹائڈس کی زبانی انتظامیہ کے بعد خون میں انتہائی فعال پیپٹائڈس کی مقدار اور ساخت کا انحصار کولیجن کے ماخذ پر ہوتا ہے[10]۔ مرغیوں کی جلد سے نکالے گئے کولیجن پیپٹائڈ کا حفاظتی اثر UVA سے متاثرہ فائبروبلاسٹ چوٹ کے خلاف سور، گائے یا تلپیا کی جلد سے نکالے گئے کولیجن پیپٹائڈ سے بہتر تھا، اور اس کا اثر کولیجن سے ماخوذ ٹریپپٹائڈ (Gly-Pro) کے برابر تھا۔ -ہائپ)[16]۔ مذہبی عقائد اور بیماری کے خدشات (جیسے پاگل گائے کی بیماری) نے لوگوں کو آہستہ آہستہ کولیجن اور اس کی مصنوعات کی نشوونما کی سمت کو زمینی ممالیہ جانوروں سے پولٹری اور سمندری جانداروں کی طرف منتقل کیا ہے [17]۔ پولٹری پروسیسنگ کے اہم ضمنی پروڈکٹ کے طور پر، چکن کی ہڈی کولیجن مصنوعات کا ایک امید افزا ذریعہ ہے۔ یہ نہ صرف وسائل کے ضیاع اور ماحولیاتی آلودگی کو کم کرتا ہے بلکہ ضمنی مصنوعات کے موثر استعمال کی بھی اجازت دیتا ہے۔ لہذا، اس مطالعے میں، ہم نے چکن کی ہڈیوں کے کولیجن پیپٹائڈس کو خام مال کے طور پر استعمال کیا، جس میں جلد کی عمر بڑھنے کے لیے D-galactose اور UV کے ساتھ عریاں چوہوں کا علاج کیا جاتا ہے، جیسا کہ جلد کی عمر کو کم کرنے پر کولیجن پیپٹائڈ کی زبانی انتظامیہ کے اثر کا اندازہ کرنے کے لیے ماڈل۔ چوہوں اور متعلقہ میکانزم کا تعین کریں۔

2. مواد اور طریقہ

2.1 مواد، کیمیکل، اور جانور

یونان زرعی یونیورسٹی (کنمنگ، چین) کے چکن فارمز نے خرچ شدہ مرغیاں فراہم کیں، جنہیں مرغیوں کی ہڈیوں کا کھانا حاصل کرنے کے لیے الگ، خشک اور کچل دیا گیا۔ Su-peroxide dismutase (SOD)، catalase (CAT)، اور glutathione peroxidase (GSH-PX) کٹس Soleibao Biotechnology Co., Ltd. (Beijing, China) سے خریدی گئیں۔ Hydroxyproline (HYP)، interleukin-1 (IL-1)، میٹرکس میٹالوپروٹینیز-1/3 (MMP-1/3)، ٹائپ I پرو کولیجن، اور ہائیلورونک ایسڈ( HA) انزائم سے منسلک امیونوسے (ELISA) کٹس نانجنگ جیانچینگ بائیو انجینیئرنگ انسٹی ٹیوٹ (نانجنگ، چین) سے خریدی گئیں۔ صحت مند خواتین BALB/C بغیر بالوں والے چوہے (18± 2g، چھ ہفتے پرانے) Nanjing Junke Bioengineering Corporation, Ltd.(Nanjing, China) سے پرمٹ نمبر کے ساتھ خریدے گئے تھے: SCXK(SU)2016-0010۔ Pepsin اور papain علاء الدین بائیو کیمیکل ٹیکنالوجی کمپنی لمیٹڈ (شنگھائی، چین) سے خریدے گئے تھے اور دیگر کیمیکل تجزیاتی درجے کے تھے۔ تمام چوہوں کو یونان صوبے کی لیبارٹری اینیمل کیئر کے ضوابط کے بعد سنبھالا گیا اور یونان زرعی یونیورسٹی کے جانوروں کی دیکھ بھال اور استعمال کمیٹی (منظوری ID: YAUACUC01) سے منظور شدہ۔

2.2 کولیجن کی تیاری اور امینو ایسڈ کی ترکیب

چکن کی ہڈیوں کے کولیجن کے اخراج اور امینو ایسڈ کی ترکیب نے لیوٹ ال کے بیان کردہ طریقہ پر عمل کیا۔ [18] معمولی ترمیم کے ساتھ۔ چکن کی ہڈیوں کے پاؤڈر کو ہلایا گیا اور اسے 0 میں بھگو دیا گیا۔ 1/10 (m/o) کا تناسب۔ ہر قدم پر، نمونے کا علاج 36 گھنٹے کے لیے کیا گیا، اور ہڈیوں کے پاؤڈر کو پھولنے اور ہڈیوں کے پاؤڈر سے غیر کولیجن پروٹین، چربی اور معدنیات کو نکالنے کے لیے ہر 6 گھنٹے میں بھگونے والے محلول کو تبدیل کیا گیا۔ نمونے کو ہر قدم کے بعد غیر جانبداری کے لیے خالص پانی سے دھویا گیا۔ پہلے سے علاج شدہ چکن کی ہڈیوں کے کھانے کو 0.5 M گلیشیئل ایسٹک ایسڈ کے ساتھ ملایا گیا تھا جس میں 0.1 فیصد (w/v) پیپسن 1:10 (wo/v) کے ٹھوس سے مائع تناسب پر تھا اور اسے 4 ڈگری پر مسلسل ہلایا اور نکالا گیا تھا۔ 48 ح. اس کے بعد اسے فلٹر کیا گیا، اور فلٹریٹ کو 15،000×g پر 15 منٹ کے لیے 4 ڈگری پر سینٹرفیوج کیا گیا۔cistanche عضو تناسل کا سائزسپرناٹینٹ کو NaOH محلول کے ساتھ 75-7.8 میں ایڈجسٹ کیا گیا تھا، اور NaCl کو 1.5 M کے آخری ارتکاز میں شامل کیا گیا تھا۔ نمکین نکالنے کے لیے مرکب کو 4C پر 12 گھنٹے تک بغیر کسی رکاوٹ کے رکھنے کے بعد، کولیجن پریپیٹیٹ کو سینٹرفیوج کیا گیا تھا۔ 15 پر،000×g 15 منٹ کے لیے 4 ڈگری پر، پھر 0.5 M ایسٹک ایسڈ کے ساتھ تحلیل کیا جاتا ہے، خالص پانی میں ڈائلائز کیا جاتا ہے، منجمد خشک کیا جاتا ہے، اور تیار شدہ پروڈکٹ چکن بون کولیجن تھی۔

چکن کی ہڈیوں کے کولیجن کی امینو ایسڈ کی ساخت کا تعین Sykam S433D امینو ایسڈ خودکار تجزیہ کار (میونخ، جرمنی) کے ذریعے کیا گیا تھا۔ جانچنے کے لیے کولیجن کے نمونے کی ایک خاص مقدار کو سیل بند ٹیوب میں لیا گیا، 10mL6 M HCl کے ساتھ شامل کیا گیا، اور 24 گھنٹے کے لیے 110 ڈگری پر ہائیڈولائز کیا گیا۔ ہائیڈرولائزیٹ کو نائٹروجن اڑانے کے ذریعے مرتکز کیا گیا تھا اور 20 ملی لیٹر سائٹرک ایسڈ بفر میں دوبارہ تحلیل کیا گیا تھا۔ 0.22 μm مائکروپورس جھلی کے ساتھ مائکرو فلٹریشن کے بعد، امینو ایسڈ سپیکٹرم تجزیہ کے لئے 20 μL ہائیڈرولائزیٹ لیا گیا۔ نمونے میں امینو ایسڈ کے مواد کو فیصد میں ظاہر کیا گیا تھا۔

2.3۔ کولیجن پیپٹائڈس (CPs) کی تیاری اور سالماتی وزن کی تقسیم

ہمارے سابقہ ​​اصلاحی عمل کے نتائج کے مطابق، CPs کو 1:40(بڑے تناسب) کے انزائم ٹو سبسٹریٹ تناسب پر papain کا ​​استعمال کرتے ہوئے تیار کیا گیا تھا۔ پی ایچ کو 7 میں ایڈجسٹ کرنے کے بعد اور 5 گھنٹے کے لیے 63 ڈگری پر انزیمیٹک ہائیڈولیسس کے بعد، انزائم کو ابلتے ہوئے پانی کے غسل میں 15 منٹ تک غیر فعال کر دیا گیا۔ انزائم ہائیڈرولائزیٹ کو ڈیسلٹ کیا گیا اور لائوفائیلائز کیا گیا، 0.1 فیصد فارمک ایسڈ محلول میں دوبارہ تحلیل کیا گیا، اور سپرناٹینٹ حاصل کرنے کے لیے سینٹری فیوج کیا گیا۔ AQ Exactive HF Orbitrap High-Resolution Mass Spectrometer-OE-HF(Thermo Fisher, Waltham, MA, USA), الیکٹرو سپرے آئنائزیشن (ESI) سے لیس، 350-1800 کے مکمل اسکین موڈ میں کولیجن ہائیڈرولائزیٹ کا تجزیہ کرنے کے لیے استعمال کیا گیا تھا۔ m/z، اور نتائج کو پروٹوم ڈسکوور کا استعمال کرتے ہوئے بازیافت اور تجزیہ کیا گیا۔

2.1 سافٹ ویئر

2.4.جانوروں کا ٹیسٹ

مادہ BALB/کرسی کے بغیر چوہوں (n {{0}}) کو ایک کمرے میں درجہ حرارت (24±1 ڈگری)، نمی (60± 5 فیصد)، اور 12 کے کنٹرول شدہ حالات میں رکھا گیا تھا۔ ایک ہفتے کے لیے دن رات کا چکر۔ انہیں خوراک اور پانی تک اشتھاراتی رسائی فراہم کی گئی۔ موافقت کے ایک ہفتے کے بعد، چوہوں کو تصادفی طور پر درج ذیل پانچ گروپوں میں تقسیم کیا گیا (n =11 فی گروپ):(i)۔ عمومی گروپ (N): UV unexposed; روزانہ 0.4 ملی لیٹر نمکین کی زبانی انتظامیہ۔ (ii) ماڈل گروپ(M):UVexposed plus D-galactose (0.2 mL); روزانہ 0.4 ملی لیٹر نمکین کی زبانی انتظامیہ۔ (میں). کم خوراک کولیجن پیپٹائڈس گروپ (LCPs): UVexposed plus D-galactose (0.2mL)؛ زبانی

روزانہ 0.4 mL CPs (dose:200 mg kg-1 body weight) کی انتظامیہ۔ (iv) درمیانی خوراک کولیجن پیپٹائڈس گروپ (MCPs): UV بے نقاب پلس D-galactose؛ زبانی

روزانہ 0.4 ملی لیٹر سی پیز (خوراک: 500 ملی گرام: کلوگرام-1 جسمانی وزن) کی انتظامیہ۔

(v) ہائی ڈوز کولیجن پیپٹائڈس گروپ (HCPs): UV بے نقاب پلس D-galactose؛ روزانہ 0.4 mL CPs کی زبانی انتظامیہ (خوراک: 1000 mg·kg-1 جسمانی وزن)۔

D-galactose کا علاج ماؤس کی گردن کے پچھلے حصے میں 10 فیصد D-galactose محلول کے 0.2 mL کے subcutaneous انجیکشن کے ذریعے کیا گیا تھا (خوراک: 1۔{21}}g/ کلو-1جسمانی وزن) روزانہ۔ UV شعاع ریزی 40 W UVA-340 LAMP (O-panel, Cleveland, USA, peak wavelength: 340 nm) کے ساتھ کی گئی تھی، چراغ اور چوہوں کے پچھلے حصے کے درمیان فاصلہ 30 سینٹی میٹر (230 m J/) تھا۔ cm-)، اور شعاع ریزی سات ہفتوں (49 دن) تک ہر دن 30 منٹ تک جاری رہی۔ تابکاری کی شدت کو UVA365-ریڈیومیٹر (Xinbao Keyi Electronic Technology Co., Ltd., Xi'an, China) سے ماپا گیا۔ D-galactose اور UV علاج کے ایک گھنٹہ بعد، چوہوں کو ہر روز زبانی طور پر 0.4 mL CPs کا انتظام کیا جاتا تھا۔ آخری شعاع ریزی کے بعد، چوہوں کو بے ہوشی کی گئی، وزن کیا گیا، اور بعد کے تجزیے کے لیے ٹشوز کے نمونے لیے گئے۔

2.5. جلد کی نمی، ضعف انڈیکس، اور جسمانی وزن میں اضافہ

جلد کی نمی کا تعین ISO 1442 کے ذریعے کیا گیا تھا، اور visceral index کا حساب درج ذیل مساوات کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا تھا: visceral index(g/kg)=visceral weight/body weight.

2.6. جلد کا آکسیڈیٹیو تناؤ، HA، اور HYP مواد

ٹشو ہوموجینائزر (TGrinder OSE-Y30، Tiangen Biochemical Technology Co., Ltd., Beijing, China) کے ساتھ آئس غسل میں جلد کے نمونوں کو عام نمکین (w/w) کی نو گنا مقدار کے ساتھ ہم آہنگ کیا گیا اور پھر 2000 میں سینٹری فیوج کیا گیا۔ ×g اور 4 ڈگری 10 منٹ کے لیے۔ سپر آکسائیڈ ڈسمیوٹیز (SOD)، catalase (CAT)، glutathione peroxidase (GSH-PX)، اور جمع شدہ سپرنٹنٹ میں ہائیلورونک ایسڈ (HA) اور ہائیڈروکسائپرولین (HYP) کی سرگرمیوں کا تعین ہدایات میں بیان کردہ طریقہ کے مطابق کیا گیا تھا۔ متعلقہ کٹس کے مطابق۔

2.7۔ جلد کی ہسٹولوجیکل

ماؤس کی جلد کے نمونے 24 گھنٹے کے لیے 4 فیصد پیرافارمیلڈہائیڈ محلول میں طے کیے گئے تھے، پانی کی کمی، پیرافین میں سرایت اور کٹے ہوئے تھے۔ جلد کے حصوں کو ہیماتوکسیلین اور eosin (HE) سے داغ دیا گیا تھا اور ECLIPSE CI-E فارورڈ فلوروسینس مائکروسکوپ (نیکون، جاپان) کے ساتھ مشاہدہ کیا گیا تھا۔ جلد کے ایپیڈرمس اور ڈرمس کی موٹائی کا اندازہ Halcon 13 کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا۔{5}}.1.1 سافٹ ویئر (MVTec، میونخ، جرمنی)۔

2.8. سکن ٹرانسکرپٹوم کی ترتیب

2.8.1 آر این اے نکالنا، لائبریری کی تعمیر، اور ٹرانسکروم کی ترتیب

مینوفیکچرر کی ہدایات کے مطابق RNeasy Mini Kit (Tiangen Biochemical Technology Co., Ltd., Beijing, China) کا استعمال کرتے ہوئے چوہوں کی جلد سے کل RNA نکالا گیا تھا۔ RNA کی پاکیزگی اور ارتکاز کو kaiaoK5500Spectrophoto-meter (Kaio, بیجنگ، چین) کا استعمال کرتے ہوئے چیک کیا گیا تھا۔ RNA کی سالمیت کا اندازہ RNA Nano 6000 Assay Kit اور Bioanalyzer 2100 سسٹم (Agilent Technologies, Santa Clara, CA, USA) کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا۔ ہر نمونے کی نقل کی ترتیب کا تجزیہ بائیو لنکر ٹیکنالوجی کمپنی لمیٹڈ (کنمنگ، چین) نے کیا تھا۔cistanche پاؤڈرمختصراً، صنعت کار کی ہدایات کے مطابق انڈیکس کوڈ شدہ نمونوں کی کلسٹرنگ HiSeq PE کلسٹر کٹ v4-cBot-HS (Illumina) کا استعمال کرتے ہوئے cBot کلسٹر جنریشن سسٹم پر کی گئی۔ کلسٹر جنریشن کے بعد، لائبریریوں کو ایک Illumina پلیٹ فارم پر ترتیب دیا گیا، اور 150 bp پیئر اینڈ ریڈز تیار کیے گئے۔

2.8.2 آر این اے سیکوینسنگ ڈیٹا کا بائیو انفارمیٹکس تجزیہ

جین اونٹولوجی (جی او) اور کیوٹو انسائیکلوپیڈیا آف جینز اینڈ جینومس (کی ای جی جی) آر لینگویج کلسٹر اینالائزر پیکج کا استعمال کرتے ہوئے تفریق شدہ جینز (ڈی ای جی) کی افزودگی کا تجزیہ کیا گیا۔ جب p-value 0.05 سے کم تھی، تو GO اور KEGG کے ذریعے افزودہ آئٹمز اور راستے اہم سمجھے جاتے تھے۔

2.8.3 ریورس ٹرانسکرپٹیس پولیمریز چین ری ایکشن (qRT-PCR)

QRT-PCR انجام دیا گیا جیسا کہ پہلے بیان کیا گیا ہے [19]۔

2.9.Wester1 بلاٹ

پارک ایٹ ال کے بیان کردہ طریقہ کے مطابق۔ [20]، ویسٹرن بلاٹ (WB) تجزیہ چوہوں میں جلد کی عمر بڑھنے سے متعلق پروٹین کے اظہار کی مقدار درست کرنے کے لیے کیا گیا۔ ہر ٹریٹمنٹ گروپ میں سکن لائسیٹ کی پروٹین کی مقدار کو BCA کٹ کا استعمال کرتے ہوئے درست کیا گیا، جسے SDS-PAGE (10 فیصد ایکریلامائڈ جیل) سے الگ کیا گیا، PVDF جھلی میں منتقل کیا گیا، 5 فیصد سکم دودھ کے ساتھ بلاک کیا گیا، اور مناسب مقدار میں پرائمری کے ساتھ انکیوبیٹ کیا گیا۔ اینٹی باڈیز (TGF-b1,c-Fos, c-Jun, Samd2/3، اور -actin) راتوں رات 4 ڈگری پر۔ TBST کے ساتھ دھونے کے بعد، نمونوں کو ثانوی اینٹی باڈیز کے ساتھ ملایا گیا اور کمرے کے درجہ حرارت پر 1 گھنٹے تک انکیوبیٹ کیا گیا۔ ChemiDoc XRS plus chemiluminescence gel imager (BioRAD, Hercules, CA, USA) کو مخصوص پروٹین کا پتہ لگانے کے لیے استعمال کیا گیا تھا۔ Image ]سافٹ ویئر کا استعمال ہر ٹریٹمنٹ گروپ میں ٹارگٹ پروٹین کے اظہار کی مقدار درست کرنے کے لیے کیا گیا تھا، اور نتائج کی نمائندگی کثافت کی قدروں کے ذریعے کی گئی تھی جو کہ ایکٹین پروٹین کو نارمل کر دی گئی تھی۔

2.10۔ایلیسا

MMP-1، MMP-3، Type I pro-collagen، اور IL-1 کی جلد کے لیسز سیال میں اظہار کی سطحوں کا تعین انزائم سے منسلک امیونوسے سے کیا گیا تھا۔ پرکھ کٹ کے ساتھ فراہم کردہ ہدایات کے مطابق کی گئی تھی۔

2.11۔ شماریاتی تجزیہ

تمام نتائج کا تجزیہ SPSS 21 (IBM Inc., Armonk, NY, USA) سافٹ ویئر کا استعمال کرتے ہوئے تغیر (ANOVA) کے یک طرفہ تجزیہ اور ڈنکن کے متعدد رینج ٹیسٹ کے ذریعے کیا گیا، جس میں اہمیت کی سطح p مقرر کی گئی ہے۔<0.05. originpro="" 2017="" (originlab,="" northampton,="" ma,="" usa)was="" used="" to="" plot="" the="" data.="" all="" data="" were="" expressed="" as="" the="" mean="" ±standard="" deviation="">

3. نتائج اور مباحثہ

3.1. کولیجن کی امینو ایسڈ کی ترکیب

چکن کی ہڈیوں کے کولیجن کی امینو ایسڈ کی ترکیب ٹیبل 1 میں دکھائی گئی ہے۔ نمونوں میں گلی اہم امینو ایسڈ تھا، جو کل امینو ایسڈز کا تقریباً ایک تہائی (2786 فیصد) تھا، اور Hyp تھا کولیجن میں خصوصی امینو ایسڈ، 9.83 فیصد کے لئے اکاؤنٹنگ. کولیجن مالیکیولز کی اہم خصوصیات بار بار Gly-XY تسلسل اور تین سی چینز پر مشتمل منفرد ٹرپل ہیلیکل ڈھانچہ تھیں۔ Gly کل امینو ایسڈز کا تقریباً ایک تہائی حصہ بناتا ہے، X اور Y اکثر پرولین اور ہائیڈروکسائپرولین ہوتے ہیں، یا کوئی باقیات ہو سکتے ہیں [21]۔ نمونے کی امینو ایسڈ کی ساخت چکن کی ہڈی کے کولیجن سے ملتی جلتی تھی جو پچھلے مطالعات میں بتائی گئی تھی اور اس میں کولیجن [22] کی مخصوص خصوصیات تھیں۔

3.2 CPs کے سالماتی وزن کی تقسیم

Molecular weight distribution reflects the degree of collagen hydrolysis. The molecular weight of the CPs was mainly below 3000 Da(Figure 1), accounting for about 87.61%of all collagen hydrolysates, indicating that almost all of the CPs were small peptides. Many studies claim that collagen peptides with a lower molecular weight have better biological activity [23]. For example, Song et al. [24]. reported that lower molecular weight (200-1000 Da,65%)silver carp skin collagen peptides repaired UV-induced aging skin in mice more effectively than similar peptides with a higher molecular weight(>1000 دا، 72 فیصد)۔ تاہم، جرمن گیلیٹا کمپنی نے کئی طبی مطالعات کے ذریعے یہ ظاہر کیا کہ کولیجن پیپٹائڈس کا اثر بنیادی طور پر کولیجن پیپٹائڈس کے مالیکیولر وزن کے بجائے انسانی کولیجن کے انحطاط کے بعد کولیجن پیپٹائڈس کی خصوصیات کے ساتھ اس کی مماثلت کی ڈگری سے طے ہوتا ہے۔ انہوں نے پایا کہ VERISOL⑧ جس کا اوسط مالیکیولر وزن 2000 Da ہے جلد کے فائبرو بلاسٹس پر سب سے زیادہ محرک اثر رکھتا ہے، جب کہ FortigelTM جس کا اوسط مالیکیولر وزن 3000 Da ہے، کارٹلیج کی مرمت پر خاص اثر ڈالتا ہے [25-27]۔

3.3 جلد کی عمر کو کم کرنے پر زبانی CPs کا اثر

3.3.1 جسمانی وزن اور اعضاء کا اشاریہ

جسمانی وزن کا انڈیکس اور آرگن انڈیکس اہم ہیں اور چوہوں کی صحت کی حالت کو ظاہر کرتے ہیں۔ ٹیسٹ کی مدت (ٹیبل 2) کے دوران ہر گروپ میں چوہوں کا وزن عام طور پر بڑھ گیا۔ M گروپ کا اوسط وزن N گروپ کے مقابلے میں کم تھا، اور CP ٹریٹمنٹ گروپوں کا M گروپ سے زیادہ تھا، جو تجویز کرتا ہے کہ CPs کے چوہوں پر کوئی مضر اثرات نہیں ہوتے۔ پچھلی رپورٹس میں، کولیجن پیپٹائڈ سے علاج شدہ چوہوں کی خوراک زیادہ تر 100-1000 mg/kg.bw·d کے درمیان تھی، اور tilapia collagen peptides کی محفوظ خوراک 4.07 g/kg.bw·d [{{6} }]cistanche سالسا اقتباس Similarly, the growth of skin-aged mice after gavage with tilapia scale collagen peptides (dose: 500 and 1000 mg/kg.bw·d)was also similar to our results [29]. The spleen plays an important role in humoral and cellular immunity, thus, the spleen index is often used to evaluate immune system function. The liver index was used to evaluate the toxicity of the tested sample. In these tests, the liver and spleen indices in the M group were lower than those in the N group, and both recovered after treatment with CPs, but there was no significant difference across the treatment groups(p>0.05)۔ نتائج پچھلے مطالعات سے ملتے جلتے تھے [30]، جس سے ظاہر ہوتا ہے کہ CPs محفوظ ہیں اور چوہوں کی قوت مدافعت کو قدرے بہتر بنا سکتے ہیں۔

3.3.2 جلد کی ساخت

UV اور D-galactose ٹریٹمنٹ (M گروپ) نے جلد میں نمی، HA، اور Hyp کے مواد کو نمایاں طور پر کم کیا، گروپ کے مقابلے میں، بالترتیب 13.36 فیصد، 24.08 فیصد، اور 15.83 فیصد (p)<0.05)(table 2).the="" contents="" of="" moisture,="" ha,="" and="" hyp="" in="" the="" skin="" were="" significantly="" higher="" in="" mice="" after="" the="" oral="" administration="" of="" cps="" compared="" to="" the="" contents="" of="" those="" in="" the="" mice="" of="" the="" m="" group=""><0.05). among="" the="" dose="" groups,="" the="" contents="" of="" the="" three="" skin="" components="" were="" significantly="" different="" between="" the="" lcp="" and="" hcp="" groups="" and="" were="" dependent="" on="" the="" dose="" of="" intake="" of="" cps.="" the="" hcp="" group="" had="" even="" higher="" contents="" than="" the="" n="" group,="" and="" ha="" and="" hyp="" were="" significantly="" different="" between="" the="" two="" groups="" (p=""><>

جلد کی نمی کے مواد میں تبدیلی جھریوں اور جلد کے جھرنے کا سبب بنتی ہے اور یہ میٹرکس اجزاء جیسے کہ جلد کے کولیجن اور HA[31] سے متاثر ہوتی ہے۔ Hydroxyproline کولیجن میں ایک مستحکم، بھرپور، اور خاص امینو ایسڈ ہے، اور اس کا مواد بالواسطہ طور پر جلد میں کولیجن کے مواد کے ساتھ ساتھ جلد کی عمر بڑھنے کی عکاسی کر سکتا ہے۔ مزید برآں، HA، جس کا جلد ECM میں بہت زیادہ اظہار کیا جاتا ہے، جلد کے پانی کے توازن، آسموٹک دباؤ، نمی کو برقرار رکھنے، اور لچک کو پانی ذخیرہ کرنے کے نظام اور جلد کے ساختی جزو کے طور پر کنٹرول کرنے میں اہم کردار ادا کرتا ہے [32]۔ اس تحقیق میں، جلد میں نمی، HYP، اور HA کے مواد میں CP کے استعمال کے بعد نمایاں اضافہ ہوا، جس کا تعلق CPs کے ذریعے کولیجن اور HA کی ترکیب کے فروغ سے ہو سکتا ہے۔ مزید یہ کہ HYP اور HA میں اضافے سے نمی کی مقدار میں اضافہ ہوا۔

3.3.3 جلد کی ہسٹولوجیکل تبدیلیاں

سات ہفتوں کے مسلسل علاج کے بعد چوہوں کی پچھلی جلد میں ہسٹولوجیکل تبدیلیاں تصویر 2 میں دکھائی گئی ہیں۔ M گروپ کی عمر بڑھنے والی جلد نے N گروپ کی جلد کے مقابلے میں کھردری سطح، موٹی ایپیڈرمس، پتلی جلد اور ویرل خلیوں کی خصوصیات ظاہر کیں۔ تاہم، CPs کی زبانی انتظامیہ کے بعد چوہوں کی عمر بڑھنے والی جلد کی حالت بہتر ہوئی، N گروپ کے چوہوں کی طرح ایک ہموار، منظم اور مکمل ڈھانچہ برقرار رکھا۔ اس طرح، جلد کی جلد نمایاں طور پر پتلی تھی، اور Epidermis M گروپ میں N گروپ کے مقابلے میں نمایاں طور پر موٹی تھی (p<0.05). the="" change="" in="" skin="" dermis="" and="" epidermal="" thickness="" was="" significantly="" better="" after="" treatment="" with=""><0.05), and="" the="" effect="" was="" more="" obvious="" with="" the="" increase="" in="" the="" dose="" of="" cps="" (figure="" 2).="" the="" effect="" of="" oral="" cps="" on="" the="" histological="" structure="" of="" aging="" skin="" was="" similar="" to="" that="" reported="" previously[4,28,31].="" the="" increase="" in="" the="" thickness="" of="" the="" epidermis="" might="" be="" an="" adaptive="" change="" to="" protect="" the="" skin="" from="" external="" stimuli,="" loss="" of="" skin="" moisture,="" and="" uv="" damage,="" possibly="" due="" to="" the="" increase="" in="" uv-activated="" epidermal="" growth="" factor="" receptor="" (egfr)="" that="" induces="" keratinocyte="" proliferation="" and="" epidermal="" hyperplasia[4].="" however,="" the="" mechanism="" by="" which="" oral="" cps="" alleviate="" the="" increase="" in="" epidermal="" thickness="" remains="" unclear.="" the="" dermis="" imparts="" elasticity="" and="" strength="" to="" the="" skin,="" and="" the="" degradation="" of="" ecm="" and="" the="" reduction="" in="" the="" ability="" to="" repair="" fibroblasts="" are="" the="" main="" causes="" of="" dermal="" thinning="" in="" aging="" skin.="" dermal="" thickness="" increased="" after="" the="" treatment="" with="" cps,="" which="" might="" be="" due="" to="" the="" removal="" of="" ros="" from="" the="" skin="" and="" inhibition="" of="" the="" increase="" of="" mmps="" by="" cps.="" this,="" in="" turn,="" inhibited="" the="" degradation="" of="" skin="" collagen="" and="" elastin="" (figure="" 3),="" the="" entry="" of="" cps="" into="" the="" skin,="" and="" their="" participation="" in="" the="" synthesis="" of="" collagen="" and="" ha="" [6],="" which="" was="" confirmed="" by="" the="" increase="" in="" the="" content="" of="" hyp="" and="" ha="" in="" the="" skin="" (table="">

3.3.4 جلد کا اینٹی آکسیڈینٹ اور سوزش کی سطح

اینٹی آکسیڈینٹ انزائمز کی سرگرمی کا تعین جسم میں اینٹی آکسیڈینٹ کی سطح کا اندازہ کرنے کے لیے سب سے عام استعمال شدہ طریقہ ہے [28]۔ جیسا کہ شکل 3 میں دکھایا گیا ہے، M گروپ میں CAT، SOD، GSH-Px، اور MDA مواد کی سرگرمیاں N گروپ کے مقابلے نمایاں طور پر کم تھیں۔<0.05). administering="" cps="" effectively="" inhibited="" the="" decrease="" of="" cat,="" sod,="" gsh-px="" activities,="" and="" the="" mda="" content="" in="" the="" skin="" of="" mice,="" compared="" to="" those="" in="" the="" mice="" skin="" of="" the="" m="" group,and="" was="" positively="" correlated="" with="" the="" dose="" of="" cps;="" there="" were="" significant="" differences="" among="" the="" different="" dose="" groups=""><0.05). when="" ros,="" accumulated="" by="" skin="" oxidative="" stress,="" exceed="" the="" antioxidant="" defense="" ability="" of="" the="" body,="" they="" destroy="" the="" ecm,="" which="" is="" the="" key="" cause="" of="" skin="" aging.="" ros="" can="" cause="" the="" oxidation="" of="" lipids="" and="" proteins="" in="" the="" skin,="" resulting="" in="" fibroblast="" degeneration="" and="" changes="" in="" the="" skin.="" ros="" activates="" the="" mapk="" signaling="" pathway="" and="" the="" ap-1="" protein="" to="" upregulate="" the="" expression="" of="" mmps="" and="" promote="" the="" degradation="" of="" matrix="" collagen="" [21].="" although="" the="" antioxidant="" enzymes="" and="" antioxidants="" in="" the="" body="" can="" remove="" ros="" to="" protect="" the="" skin="" from="" damage,="" when="" the="" content="" of="" rosexceeds="" the="" defense="" (antioxidant)="" ability="" of="" the="" body="" or="" the="" body's="" defense="" ability="" declines,="" it="" causes="" oxidative="" stress="" and="" skin="">

مزید برآں، ROS کی وجہ سے سیلولر سوزشی ردعمل بھی جلد کی عمر بڑھنے میں حصہ ڈالتا ہے۔ UV اور D-galactose ٹریٹمنٹ (M گروپ) کے بعد، چوہوں کی جلد میں IL-1 کے مواد میں N گروپ (شکل 3D) کے مقابلے میں نمایاں اضافہ ہوا، جس سے ظاہر ہوتا ہے کہ جلد نے ایک اہم سوزشی ردعمل ظاہر کیا۔ (ص<0.05). the="" cps="" significantly="" reduced="" the="" content="" of="" il-1α="" in="" the="" skin="" in="" a="" dose-dependent="" manner,="" compared="" to="" that="" in="" the="" skin="" of="" mice="" in="" the="" m="" group.="" there="" was="" a="" significant="" difference="" between="" hcps="" and="" lcps=""><0.05), indicating="" that="" cps="" alleviated="" skin="" inflammation.="" the="" o2="" produced="" by="" ultraviolet="" irradiation="" stimulated="" the="" expression="" of="" mmp-1="" in="" dermal="" fibroblasts="" through="" the="" secretion="" of="" il-1α="" and="" il-6,="" thereby="" disrupting="" the="" ecm="" [33].="" therefore,="" this="" study="" suggested="" that="" cps="" significantly="" increased="" the="" activity="" of="" skin="" antioxidant="" enzymes="" and="" inhibited="" inflammatory="" responses,="" which="" might="" be="" important="" in="" delaying="" skin="" aging="" in="">

3.4. جلد کی بڑھتی ہوئی عمر کو کم کرنے میں غذائی CPs کے عمل کا طریقہ کار

3.4.1.RNA-Seq ڈیٹا کا تجزیہ اور توثیق

Analysis techniques, such as PCA, HCA, gene GO enrichment, and KEGG pathway enrichment were used to analyze the transcriptome data. Based on the PCA analysis (Figure 4A)and hierarchical clustering analysis (heat map)of 4303 differential genes with average channel strength greater than 100, the relative expression levels of total DEGs between the two treatment groups are shown to provide an overview of the changes in gene expression(Figure 4B).The M group and the HCP group were significantly separated, and the expression patterns of most DEGs in the M and HCP groups were opposite, indicating that there were significant differences between the mouse skin after HCP treatment and the M group(Figure 4A,B).Pairwise comparisons showed that after feeding HCPs, 4303 genes were significantly expressed in the mice's skin, including 1790 upregulated genes and 2513 downregulated genes(Foldchange>2,p<0.05)(figure 4c).among="" the="" six="" genes="" associated="" with="" skin="" aging="" quantified="" by="" qrt-pcr,="" five="" genes(including="" fos,="" jun,="" cxcl1,="" and="" egr1)were="" downregulated,="" and="" one="" gene="" was="" upregulated(figure="" 4d),="" which="" was="" consistent="" with="" the="" overall="" trend="" of="" transcriptomic="" data.="" the="" rna="" expression="" levels="" of="" fos,="" jun,="" and="" cxcll="" were="" significantly="" upregulated="" in="" damaged="" skin="" compared="" to="" that="" in="" intact="" skin="" [34],="" and="" inhibition="" of="" egr1="" expression="" alleviated="" skin="" inflammation="" [35].="" these="" results="" reflected="" the="" reliability="" of="" transcriptome="" sequencing="" data,="" and="" oral="" cps="" effectively="" alleviated="" skin="">

افزودگی کا تجزیہ اور KEGG ڈیٹا بیس کی افزودگی کے تجزیہ نے DEGs کے حیاتیاتی افعال کی مزید تفتیش کے لیے مدد فراہم کی۔ GO تجزیہ سے پتہ چلتا ہے کہ ڈی ای جیز حیاتیاتی عمل میں نمایاں طور پر افزودہ تھے جیسے ڈی این اے کی نقل، ہیموپوائسز کا ضابطہ، ہائیڈرولیز سرگرمی کا ضابطہ، اور سائٹوکائن کی پیداوار؛ سیل کے اجزاء میں، جس میں lytic vacuole اور lysosome شامل تھے، کولیجن پر مشتمل اور دیگر متعلقہ جین نمایاں طور پر افزودہ تھے۔ مالیکیولر فنکشن کے لحاظ سے، رسیپٹر-لیگینڈ کی سرگرمی، سائٹوکائن کی سرگرمی، اور دیگر متعلقہ جین نمایاں طور پر افزودہ تھے (شکل 5)۔ DEGs کے ذریعے نمایاں طور پر تبدیل کیے گئے پہلے 20 سگنل راستوں کا KEGG افزودگی کا تجزیہ تصویر 5 میں دکھایا گیا ہے۔ سائٹوکائن ریسیپٹر تعامل، لائزوزوم، نیورو ایکٹیو لیگنڈ ریسیپٹر تعامل، سیل سائیکل، سیسٹیمیٹک لیوپس ایریٹیمیٹوسس، اور ٹی جی پی وے<0.05)were closely="" related="" to="" aging,="" especially="" cytokine-receptor="" interactions,="" lysosomes,="" and="" tgf-βsignaling.="" an="" important="" feature="" of="" cellular="" senescence="" is="" the="" accumulation="" of="" damaged="" organelles="" and="" protein="" aggregates.="" lysosomes="" play="" an="" important="" role="" in="" degrading="" damaged="" organelles="" and="" protein="" aggregates="" in="" senescent="" cells="" [36].="" cytokine-receptor="" interaction="" is="" the="" main="" pathway="" of="" enrichment="" in="" the="" skin="" after="" being="" affected="" by="" various="" factors="" such="" as="" inflammation="" [37],="" sulfur="" mustard="" exposure="" [38],="" and="" terahertz="" pulse="" [39].="" cytokines,="" as="" small="" molecular="" proteins="" synthesized="" and="" secreted="" by="" various="" tissue="" cells,="" maintain="" skin="" homeostasis="" by="" controlling="" the="" balance="" between="" keratinocyte="" proliferation,="" differentiation,="" and="" apoptosis="" through="" complex="" interactions="" with="" growth="" factors="" [40].="" the="" tgf-β="" signaling="" pathway="" is="" also="" important="" for="" regulating="" skin="" aging="" [14].="" gene="" functional="" enrichment="" analysis="" showed="" that="" tgf-β="" was="" highly="" expressed="" during="" cytokine-receptor="" interaction="" and="" in="" the="" tgf-β="" signaling="" pathway.="" tgf-β="" is="" a="" major="" pro-fibrotic="" cytokine="" that="" regulates="" cell="" differentiation="" and="" proliferation="" while="" inducing="" extracellular="" matrix="" protein="" synthesis="" [41.="" therefore,="" we="" verified="" the="" tgf-β="" signaling="" pathway="" and="" some="">

3.4.2 جلد کی عمر کو کم کرنے میں CPs کے عمل کے طریقہ کار کی تصدیق

زبانی CPs کے ذریعہ جلد کی عمر بڑھنے کو کم کرنے میں TGF- سگنلنگ پاتھ وے اور سائٹوکائن-رسیپٹر کے تعامل کے کردار کی توثیق کرنے کے لیے، TGF- سگنلنگ پاتھ وے میں TGF- اور ٹرانسکرپشن فیکٹر Smad2/3 کی تصدیق کے لیے WB تجزیہ کیا گیا، نیز کلیدی ٹرانسکرپشن فیکٹر AP-1(c-Fos اور c-Jun) جو سائٹوکائنز کو منظم کرتا ہے۔ MMP-1، MMP-3، Type I pro-collagen، اور I-1 کے مواد کا تعین ELISA نے کیا تھا۔ WB تجزیہ کے نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ گروپ M میں TGF-، Smad2، اور Smad3 کا اظہار گروپ N(p) کے مقابلے میں نمایاں طور پر کم تھا۔<0.05). the="" expression="" levels="" of="" tgf-β="" and="" smad3="" were="" significantly="" higher="" in="" mice="" after="" the="" oral="" administration="" of="" cps="" compared="" to="" their="" levels="" in="" group="" m="" mice;="" additionally,="" smad2="" also="" increased="" significantly=""><0.05), except="" for="" in="" the="" lcps="" in="" a="" dose-dependent="" manner="" (figure="" 6).="" on="" the="" contrary,="" the="" expression="" of="" c-fos="" and="" c-jun="" in="" the="" m="" group="" was="" significantly="" higher="" than="" that="" in="" the="" n="" group.="" the="" expression="" of="" c-fos="" and="" c-jun="" in="" the="" cp="" group="" was="" significantly="" lower="" than="" that="" in="" the="" m="" group,="" except="" for="" the="" expression="" of="" c-jun="" in="" the="" lcp=""><0.05), and="" the="" change="" was="" dose-dependent.="" these="" results="" indicated="" that="" the="" tgf-β="" signaling="" pathway="" was="" activated="" and="" ap-1="" was="" inhibited="" after="" feeding="">

اے پی-1 پروٹین جون اور فوس فیملی پروٹینز کا ایک ڈائمرک کمپلیکس ہے اور جلد کی سوزش اور سائٹوکائن اظہار کا ایک اہم ریگولیٹر ہے۔ عام طور پر، c-Jun اور c-Fos پر مشتمل کمپلیکس جلد میں سب سے زیادہ نقل کی سرگرمی کو ظاہر کرتا ہے [41, A42]۔ عمر رسیدہ جلد کے خلیوں میں تیار ہونے والا ROS پہلے AP-1 پروٹین کو متحرک کرتا ہے اور پھر نیچے کی دھارے والی سائٹوکائنز (جیسے IL-1)، MMPs، اور TGF- سگنلنگ پاتھ وے کو ٹرانسکرپشن اور ٹرانسکرپشن کے ذریعے منظم کرتا ہے، اس طرح جلد کی عمر بڑھنے میں سہولت ہوتی ہے۔ ،44]۔ TGF-/Smad سگنلنگ ری ایکشن کلاسیکی کولیجن کی ترکیب کا راستہ ہے، اور Smad ٹرانسکرپشن فیکٹر اس سگنل کی نقل و حمل کے راستے کا مرکز ہے۔ TGF- رسیپٹر سے منسلک ہو کر ڈاؤن اسٹریم Smad2 اور Smad3 کے فاسفوریلیشن اور ایکٹیویشن کو متحرک کرتا ہے، اس طرح COLI کی ترکیب میں اضافہ ہوتا ہے [14]۔

مزید برآں، ELISA کے نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ M گروپ کی جلد میں MMP-1، MMP-3، اور IL-l کا مواد N گروپ کی نسبت نمایاں طور پر زیادہ تھا، اور قسم کا مواد I پرو کولیجن نمایاں طور پر کم تھا (p<0.05). however,="" the="" contents="" of="" mmp-1,="" mmp-3,="" and="" il-1α(figure="" 3d)in="" the="" skin="" after="" oral="" administration="" of="" cps="" were="" significantly="" lower="" than="" those="" in="" the="" m="" group="" (p=""><0.05); type="" i="" pro-collagen="" increased="" significantly,="" and="" all="" the="" changes="" were="" dose-dependent="" with="" cps="" (figure="" 7).="" mmps="" are="" involved="" in="" the="" decomposition="" of="" skin="" collagen,="" il-1α="" shows="" the="" level="" of="" inflammation="" of="" the="" skin,="" and="" type="" i="" pro-collagen="" reflects="" the="" synthesis="" of="" skin="" collagen.="" accumulating="" evidence="" suggests="" that="" the="" role="" of="" the="" jun/ap-1="" protein="" pathway="" has="" also="" been="" proposed="" to="" regulate="" skin="" inflammation="" [40].="" the="" elisa="" results="" showed="" that="" the="" combined="" treatment="" of="" uv="" and="" d-galactose="" caused="" skin="" collagen="" degradation,="" decreased="" collagen="" synthesis,="" and="" caused="" skin="" inflammation,="" leading="" to="" skin="" aging.="" however,="" these="" changes="" were="" reversed="" after="" the="" oral="" administration="" of="">

مندرجہ بالا راستوں کے علاوہ، اس مطالعے میں، سی پی کے علاج کے بعد اپ ریگولیٹڈ جینز کو لائزوسوم پاتھ وے میں نمایاں طور پر افزودہ کیا گیا تھا، جس سے یہ ظاہر ہوتا ہے کہ سی پی ٹریٹمنٹ نے جلد میں لائزوزوم کو چالو کیا (شکل 5)۔ پچھلے مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ چالو شدہ لائزوزوم واضح مجموعے ہیں اور عمر بڑھنے کے دوران سنسنی اعصابی خلیہ خلیوں کی فعالیت کو بلند کرتے ہیں [45]۔ ان کے علاوہ، lysosomes کے بڑھتے ہوئے فنکشن سے سیل ڈورمینسی کو روکنے کے لیے انٹرا سیلولر ROS کے ارتکاز کو کم کیا جا سکتا ہے۔ اسی طرح، lysosome فنکشن میں کوئی کمی انٹرا سیلولر ROSconcentration کو بڑھا سکتی ہے جو بالآخر سیل ڈورمینسی کو فروغ دیتی ہے [46]۔ اگرچہ ہم نے اس مقالے میں منظم طریقے سے اس کی تصدیق نہیں کی ہے، لیکن ان نتائج اور پچھلی رپورٹس سے یہ ظاہر ہوتا ہے کہ lysosomal فنکشن کو چالو کرنا CPs کے لیے جلد کی عمر بڑھنے کو کم کرنے کا بنیادی طریقہ ہو سکتا ہے، اور ہم اس کی تصدیق کرنے کا مقصد جاری رکھیں گے۔

لہذا، اس مطالعہ سے پتہ چلتا ہے کہ غذائی CPs خوراک پر منحصر انداز میں UV اور D-galactose کی طرف سے حوصلہ افزائی جلد کی عمر کو کم کر سکتا ہے. CPs جلد کے آکسیڈیشن کی سطح کو کم کرکے، اہم ٹرانسکرپشن عوامل AP-1(c-Jun اور c-Fos) کے اظہار کو روک کر، کولیجن کی ترکیب کو فروغ دینے کے لیے TGF- /Smad سگنلنگ پاتھ وے کو چالو کرتے ہوئے، اس کے اظہار کو روکتے ہوئے جلد کی عمر کو کم کرتے ہیں۔ MMP-1 اور MMP-3 (جو کولیجن کے انحطاط کو روکتا ہے)، اور جلد کی عمر کو کم کرنے کے لیے جلد کی سوزش کو روکتا ہے (شکل 8)۔ اس کے علاوہ، موجودہ میں ہمارے نتائج

4. نتائج

خلاصہ طور پر، اس تحقیق نے اس بات کی تصدیق کی کہ چکن کی ہڈیوں کے کولیجن پیپٹائڈس کی غذائی ضمیمہ بالائے بنفشی شعاعوں اور D-galactose کی وجہ سے جلد کی بڑھتی عمر کو ایک سے زیادہ راستوں کے ذریعے نمایاں طور پر کم کر سکتی ہے، جس میں کولیجن کے حامی ترکیب کو فروغ دینا، کولیجن کے انحطاط کو روکنا، جلد کی سطح کو بہتر بنانا، اور کولیجن کی سطح کو بہتر بنانا شامل ہے۔ سوزش؛ CPs کے ساتھ خاتمہ خوراک پر منحصر تھا۔ ایک تفصیلی تحقیقات سے پتہ چلتا ہے کہ CPs پہلے جلد کے آکسیڈیشن کی سطح کو کم کرتے ہیں، کلیدی ٹرانسکرپشن عنصر AP-1(c-Jun اور c-Fos) کے اظہار کو روکتے ہیں، اور پھر فروغ دینے کے لیے TGF-/Smad سگنلنگ پاتھ وے کو چالو کرتے ہیں۔ کولیجن کی ترکیب، کولیجن کے انحطاط کو روکنے کے لیے MMP-1 اور MMP-3 کے اظہار کو روکتا ہے، اور چوہوں میں جلد کی عمر کو کم کرنے کے لیے جلد کی سوزش کو روکتا ہے۔ اس کے علاوہ، lysosomes کی ایکٹیویشن بھی CPs کے لیے جلد کی بڑھتی عمر کو کم کرنے کا اہم راستہ ہو سکتا ہے، جو کہ تحقیق اور تصدیق کے قابل ہے۔ یہ نتائج جلد کی عمر کو کم کرنے کے لیے کولیجن پیپٹائڈس کے نفاذ کے لیے ایک نظریاتی بنیاد فراہم کرتے ہیں اور فنکشنل فوڈز میں جانوروں کی ضمنی مصنوعات کے جامع استعمال کے لیے دائرہ کار کو وسیع کرتے ہیں۔

مصنف کی شراکتیں: CC ڈیزائن، ماپا، اور مخطوطہ لکھا؛ ZXand HT نے مخطوطہ کو ڈیزائن اور اس پر نظر ثانی کی۔ YL فراہم کردہ طریقہ کار کی رہنمائی؛ CGand YW نے مخطوطہ کا جائزہ لیا۔ تمام مصنفین نے مخطوطہ کے شائع شدہ ورژن کو پڑھا اور اس سے اتفاق کیا ہے۔

یہ مضمون غذائی اجزاء 2022, 14, 1622 سے لیا گیا ہے۔ https://doi.org/10.3390/nu14081622 https://www.mdpi.com/journal/nutrients