Alox15 کو حذف کرنا گردے کی خرابی کو بہتر بناتا ہے اور گردے میں PGD2 میں اضافے سے Fbrosis کو روکتا ہے۔
Mar 12, 2022
CISTANCHE گردے/ گردوں کے انفیکشن کو بہتر بنائے گا۔
تعارف
پولی ان سیچوریٹڈ فیٹی ایسڈز (PUFA) اور ان کے میٹابولائٹس کئی اعضاء میں سوزش اور اس کے حل سے جڑے ہوئے ہیں [1]۔ Oxylipins، جو PUFA کے آکسیکرن سے تیار ہوتے ہیں، PUFA کی حیاتیاتی سرگرمی کے لیے لپڈ ثالث کے طور پر اہم ہیں [1، 2]۔ oxylipins کی بایو سنتھیسس کئی خامروں کے ذریعے ثالثی کی جاتی ہے، جیسے lipoxygenase (LOX)، cyclooxygenase (COX)، اور cytochrome P450 (CYP) [3]۔ یہ انزائمز کئی لپڈ میٹابولائٹس تیار کرتے ہیں، جیسے پروسٹاگلینڈنز، لیوکوٹریئنز، اور لیپوکسینز، جو کہ سوزش کے ضابطے میں بہت زیادہ ملوث ہوتے ہیں [1، 4]۔ مثال کے طور پر، ALOX15، LOX کی ایک بڑی ذیلی قسم، اس کے میٹابولائٹس کے ذریعے پروانفلامیٹری اور سوزش مخالف خصوصیات کا دوہرا پہلو رکھتا ہے [5]: ALOX15 انتہائی eosinophils، bronchoalveolar epithelial خلیات، اور alveolar macrophages میں غیر پیتھولوجیکل حالات میں ظاہر ہوتا ہے [5] ]، اور دمہ کی شدت کو فروغ دیتا ہے [7]، پھیپھڑوں کی چوٹ [8]، اور دل کی ناکامی [9]، جبکہ یہ گٹھیا [10] اور اسکیمک دماغ [11] میں سوزش کا مقابلہ کرتا ہے۔ مزید برآں، لپڈ ثالث اور ان کے خامرے عضو تناسل کے ساتھ ساتھ سوزش کو بھی متاثر کرتے ہیں۔ مخصوص لپڈ ثالث پھیپھڑوں [12]، جگر [13]، اور دل [14] فائبروسس کے روگجنن میں ملوث ہیں۔ اسی طرح، مندرجہ بالا ALOX15 بھی فائبروسس کے روگجنن جیسے ڈرمل فائبروسس [15] سے منسلک ہے۔
عام دائمی بیماریوں میں سے ایک دائمی ہے۔ گردے کی بیماری(CKD)، جو مجموعی طور پر تمام مراحل میں عام آبادی کا تقریباً 8-16 فیصد متاثر کرتا ہے [16]۔ اگرچہ CKD روگجنن پیچیدہ ہے اور بنیادی بیماری کے لحاظ سے مختلف ہوتا ہے۔گردہٹشو عام طور پر غیر فعال ہو جاتا ہے، جس کے نتیجے میں اختتامی مرحلے کی طرف جاتا ہے۔گردے خرابدائمی سوزش اور اس کے نتیجے میں فائبروسس [17] کی وجہ سے۔ جیسا کہ ذکر کیا گیا ہے، PUFAs سے ماخوذ لپڈ ثالث مضبوطی سے سوزش اور اس کے نتیجے میں ہونے والے فبروسس سے جڑے ہوئے ہیں۔ مثال کے طور پر، lipoxins اور resolvins renal fibrosis [18, 19] کو روکتے ہیں، لیکن ان اثرات کا ابھی تک CKD ماڈل میں معائنہ نہیں کیا گیا ہے۔گردے کی تقریب.مزید برآں، CKD میں جامع لپڈومک پروفائلزگردہٹشوز اب بھی غیر رپورٹ شدہ ہیں. اس طرح، CKD روگجنن میں لپڈ میٹابولک انزائمز اور ان کی مصنوعات کے کردار کو اچھی طرح سے سمجھا نہیں گیا ہے۔اس مطالعے کا مقصد فیٹی ایسڈ میٹابولائزنگ انزائمز اور ان کی مصنوعات کی شمولیت کو واضح کرنا تھا۔گردوں5/6 nephrectomized (Nx) CKD ماڈل چوہوں کی خرابی۔ اس تحقیق سے انکشاف ہوا ہے کہ CKD میں Alox15 کی نقل اور پروٹین کے اظہار کی سطح دونوں میں اضافہ ہوا ہے۔گردے، اور Alox15-/- چوہوں میں بہتری کا مظاہرہ کیا گیا۔گردہCKD ماڈل میں dysfunction اور fibrosis. مزید یہ کہ، PGD2، جو CKD میں لپڈ میٹابولائٹ میں اضافہ ہوتا ہے۔گردےAlox15-/- چوہوں کے، قریبی نلی نما کلچرڈ خلیوں میں اپیٹیلیل-میسینچیمل ٹرانزیشن (EMT) کو روکتا ہے۔ لہذا، Alox15 روکنا اور/یا PGD2 انتظامیہ CKD اور fibrosis کا ایک نیا علاج کا ہدف ہو سکتا ہے۔
مطلوبہ الفاظ:دائمی گردے کی بیماری؛ Lipoxygenase؛ ALOX15; ثالثی لپیڈومکس؛ Polyunsaturated فیٹی ایسڈ؛ گردوں
CISTANCHE کڈنی/رینل فنکشن کو بہتر کرے گا۔
مواد اور طریقے
جانور اور تجرباتاس مطالعہ میں 8-ہفتہ پرانے نر C57BL/6 J چوہوں (CLEA Japan) کا استعمال کیا گیا، جو تمام تجربات کرنے سے پہلے 1 ہفتے کے لیے موافق تھے۔ مزید برآں، Alox15-/- چوہوں کو C57BL/6 J پس منظر (جیکسن لیبارٹری) میں پیدا کیا گیا تھا، اور 5/6 Nx ماڈل پچھلے مطالعے کے مطابق قائم کیا گیا تھا [20]۔ کی تشخیص کے لیے ہم نے خون کے نمونے جمع کیے ہیں۔گردوں کی تقریباورگردہ5/6 Nx کے بعد 8 ہفتوں میں امیونو بلوٹنگ اور پولیمریز چین کے رد عمل کے لیے ٹشو کے نمونے، اور 5/6 Nx کے بعد 40 ہفتوں میں ہسٹولوجیکل تجزیہ کے لیے۔ تمام تجربات TMDU کے جانوروں کی تحقیق کے رہنما خطوط کے مطابق تھے، اور TMDU کی جانوروں کی دیکھ بھال اور استعمال کمیٹی نے ہمارے مطالعاتی پروٹوکول کو منظوری دی (منظوری نمبر: A2019-117C4)۔
LC–MS/MS پر مبنی ثالثی لیپیڈومکسہم نے LC-MS/MS تجزیہ کیا جیسا کہ پہلے بیان کیا گیا ہے [21، 22]۔ طریقہ کار کی تفصیلات ضمنی طریقوں میں بیان کی گئی ہیں،دیگر تجرباتی طریقےہم نے دیگر تجرباتی طریقوں کو ضمنی طریقوں میں بیان کیا۔
نتائج
Alox15 کی mRNA کی سطح 5/6 Nx گردے میں بڑھ گئی ہے۔CKD میں آکسیلیپین انزائمز کی مقداری تبدیلیاںگردہC57BL/6 چوہوں کو شیم آپریشن یا 5/6 Nx پر لاگو کرکے تفتیش کی گئی جیسا کہ پہلے بیان کیا گیا ہے [20]۔ گردے (Alox15, Alox5, Ptgs1 (COX1), Ptgs2 (COX2), Cyp4a12 اور Cyp2c44 [23, 24] میں ظاہر ہونے والے بڑے آکسیلیپین انزائمز کے اظہار کا تجزیہ کرنے کے لیے، ہم نے نکالاگردہنمونے انزائمز میں، 5/6 Nx میں Alox15گردےشرم میں اس کے مقابلے میں نمایاں طور پر بلند mRNA لیول (P=0.0004) تھا۔گردے(تصویر 1)۔ اس کے برعکس، اس CKD ماڈل میں دیگر بڑے خامروں کی mRNA کی سطح میں کوئی خاص تبدیلی نہیں آئی۔
Alox15 کے پروٹین کی سطح کو گردوں کے قریبی نلی نما خلیوں میں بڑھایا گیا تھا۔5/6 Nx میںگردے، ALOX15 پروٹین کی سطحوں میں بھی اضافہ کیا گیا تھا (P=0.0078)، جیسا کہ نقل کی سطح میں اضافہ (تصویر 2a) کی توقع ہے۔ اس بات کا تعین کرنے کے لیے کہ کون سی سیل اقسام نے CKD میں Alox15 پروٹین کی سطح کو بڑھایا ہے۔گردہ،ہم نے سیٹو ہائبرڈائزیشن کے ذریعہ Alox15 mRNA کے لوکلائزیشن کی جانچ کی۔ ایم آر این اے کی حالت ہائبرڈائزیشن میں انکشاف ہوا کہ ایلوکس 15 کے اعلی اظہار کی سطح کو مقامی طور پر مقامی کیا گیا تھا۔گردوں5/6 Nx ماڈل میں نلی نما خلیات، لیکن گلومیرولی میں نہیں (تصویر 2b)۔ ہسٹولوجیکل خصوصیات نے تجویز کیا کہ Alox15 mRNA کا قربت کے نلیوں میں سختی سے اظہار کیا گیا تھا۔
Alox15-/- چوہے 5/6 Nx ماڈل میں گردوں کے نقصان اور فائبروسس کے خلاف مزاحم تھے۔5/6 Nx CKD میںگردے، ALOX15 کی نقل اور پروٹین کے اظہار کی سطح کو بلند کیا گیا تھا۔ لہذا، ہم نے تحقیقات کی کہ آیا اور کیسے ALOX15 CKD کے لحاظ سے کردار ادا کرتا ہے۔گردہdysfunction اور رینل فبروسس. اس مقصد کے لیے، Alox15-/- چوہوں کو 5/6 Nx CKD ماڈل پر لگایا گیا۔ دلچسپ بات یہ ہے کہ سیرم کری اور بلڈ یوریا نائٹروجن (BUN) کی سطح Alox15-/- 5/6 Nx چوہوں میں کم تھی۔
جنگلی قسم (WT) چوہوں (تصویر 3a) کے مقابلے میں، یہ بتاتا ہے کہ Alox15 کی کمی نے CKD روگجنن میں حفاظتی اثر دکھایا۔ اس کے مطابق، NGAL (aگردوں کا نقصانمارکر) WT چوہوں (تصویر 3b) کے مقابلے Alox15-/- چوہوں میں پروٹین کا اظہار دبایا گیا تھا۔ اس کے علاوہ، Alox15-/- ماؤسگردےکم Col1a1, Fn اور Acta2 (SMA) mRNA کی سطح (تصویر 3c) کو دکھایا، اور fibronectin اور SMA پروٹین اظہار (تصویر 3d) میں بھی کمی دکھائی۔ مزید یہ کہ Alox15-/- ماؤسگردےواضح طور پر دبی ہوئی انٹرسٹیشل فبروٹک تبدیلیوں کو ظاہر کیا گیا ہے جو میسن کے ٹرائکروم سٹیننگ (تصویر 3e) میں دکھائی گئی ہیں۔ لہذا، Alox15 کو حذف کرنے سے بہتری آتی ہے۔گردہCKD جانوروں کے ماڈل میں dysfunction اور fibrosis.
ثالثی لپڈومکس نے Alox15-/- CKD گردوں میں PUFA میٹابولزم کو تبدیل کیاجیسا کہ اس مقالے کے تعارفی حصے میں ذکر کیا گیا ہے، Alox15 کے حیاتیاتی اثرات کا تعلق Alox15 کے ذریعہ تیار کردہ لپڈ میڈیٹرز سے ہے۔ CKD میں Alox15 کے ذریعہ تیار کردہ لپڈ میٹابولائٹس کے پروفائل کو واضح کرنے کے لئےگردہ،ہم نے شیم اور 5/6 Nx کی جانچ کی اور موازنہ کیا۔گردہWT چوہوں اور Alox15-/- CKD چوہوں کے درمیان لپڈ ثالثی پروفائلز کا تعین کرنے کے لیے LC-MS/MS-based ثالث لیپیڈومکس کے ذریعے نمونے (ضمنی جدول 1)۔ جدول 1 لپڈ میٹابولائٹس دکھاتا ہے جو 5/6 Nx حالت میں Alox15 plus/plus اور Alox15-/- چوہوں کے درمیان نمایاں طور پر مختلف تھے۔ اس کے علاوہ، ہم نے لپڈ ثالثوں کے راستے کے نقشے بنائے جن کے ذیلی ذخیرے اور ان کے میٹابولائزنگ انزائمز (تصویر 4) کی درجہ بندی کے ساتھ۔ ایلوکس15-سے ماخوذ PUFA میٹابولائٹس جیسے کہ 14-HDoHE، 17-HDoHE، اور 15-HEPA [5, 25–27] کو CKD ماڈلز میں نمایاں طور پر بڑھایا گیا تھا جو آپس میں جڑے ہوئے تھے۔ میں ALOX15 اظہار کی بڑھتی ہوئی سطح تکگردے (P=0.0018, 0.0008,<0.0001, respectively),="" and="" their="" elevations="" under="" ckd="" conditions="" were="" completely="" suppressed="" in="" alox15−/−="" mice="" (fig. 5).="" besides="" 14-hdohe,="" 17-hdohe,="" and="" 15-hepa,="" the="" levels="" of="" 18-hepa,="" 10-hdohe,="" 11-hdohe,="" 13-hdohe,="" 16-hdohe,="" and="" dgla="" were="" also="" significantly="" decreased="" in="" alox15−/−="" ckd="">گردےWT CKD گردوں کے مقابلے میں، جبکہ Alox15−/− CKD گردوں میں صرف PGD2 میں نمایاں اضافہ ہوا تھا (تصویر 6)۔
PGD2 نے مہذب گردے کے خلیوں میں EMT کو دبا دیا۔لپڈ میٹابولائٹس کے اثرات جو کہ Alox15 plus/plus اور Alox15−/− چوہوں کے درمیان 5/6 Nx حالت میں نمایاں طور پر مختلف تھے ان لپڈز کو NRK-52ای سیلز کے ذریعے جانچا گیا جو پرو فائبروٹک سائٹوکائن TGF کے ذریعے چالو ہوئے تھے۔ - 1۔ ثقافت میں ان لپڈس کے اثرات کا تعین کرنے کے لیے ہم نے TGF- 1 کے جواب میں Cola1a اور Acta2 (SMA) کے mRNA اظہار کا اندازہ کیا (تصویر 7a)۔ ان میں سے، PGD2 نے TGF- 1 کے جواب میں NRK-52E خلیات پر ایک طاقتور اینٹی فبروٹک اثر دیا ہے۔ COL1A1 اور SMA اظہار پر PGD2 کا دبانے والا اثر بالترتیب 7.12 μM اور 6.48 μM کے EC50 کے ساتھ خوراک پر منحصر تھا (تصویر 7b)۔ مزید برآں، ہم نے HK-2 خلیات میں وہی تجربات کیے، جو عام بالغ انسان سے لافانی قربت والے ٹیوبول اپیتھیلیل خلیات ہیں۔گردے،اور اسی طرح کا نتیجہ پایا، یعنی COL1A1 اور SMA روکنا خوراک پر منحصر انداز میں، PGD2 (تصویر 7c) کے ساتھ علاج کے جواب میں۔ لہذا، Alox15-/- CKD میں PGD2 کی سطح میں اضافہ ہوا۔گردےCKD میں antifibrotic اثرات میں حصہ ڈال سکتا ہے۔
CISTANCHE گردے/ گردوں کے درد کو بہتر کرے گا۔
15-PGDH، ایک اہم PGD2-میٹابولائزنگ انزائم، Alox15-/- CKD گردوں میں کم ہو گیا تھا۔میں PGD2 میں اضافے کے طریقہ کار کو واضح کرنے کے لیےگردےAlox15-/- CKD ماڈل چوہوں کے، ہم نے PGD2 سنتھیس کی mRNA سطح کی پیمائش کی۔ PGD2 synthase (PGDS) کے دو isoforms ہیں: lipocalin PGDS (L-PGDS) اور hematopoietic PGDS (H-PGDS) [28]۔ L-PGDS اور H-PGDS دونوں سطحوں کو 5/6 Nx حالات میں نمایاں طور پر بڑھایا گیا تھا جب ان کے مقابلے میں شرمناک حالات میںگردےWT چوہوں کا (تصویر 8a، دونوں P<0.0001) indicating="" that="" increased="" pgd2="" in="" ckd="" is="" due="" to="" increased="" pgd2="" synthases.="" conversely,="" the="" increase="" in="" l-pgds="" and="" h-pgds="" under="" 5/6="" nx="" conditions="" was="" significantly="" inhibited="" in="" alox15−/−="" mice="" (fig. 8a)="" indicating="" that="" the="" increase="" in="" pgd2="" in="" alox15−/−="" ckd="" model="" mice="" was="" not="" due="" to="" increased="" production="" by="" pgds.="" then,="" we="" examined="" mrna="" levels="" of="" cox-1="" and="" cox-2="" as="" more="" upstream="" synthases="" of="" the="" prostaglandin-producing="" pathway.="" we="" also="" measured="" mrna="" levels="" of="" 15-pgdh="" and="">1C18، جو بڑے PGD2-میٹابولائزنگ انزائمز کے طور پر جانا جاتا ہے [29, 30]۔ جبکہ COX-1، COX-2، اور AKR1C18 کے mRNA کی سطح میں کوئی تبدیلی نہیں کی گئی تھی، CKD میں 15-PGDH کی mRNA کی سطح نمایاں طور پر کم ہو گئی تھی۔گردےAlox15−/− چوہوں کا جب WT چوہوں کے مقابلے میں (تصویر 8b، P=0.0325)، جو ممکنہ طور پر CKD میں PGD2 میں اضافے کا باعث بنتا ہے۔گردےAlox15-/- چوہوں کا۔
بحث
اس مطالعہ نے یہ ظاہر کیا کہ CKD میںگردہنمونے، Alox15 کی نقل اور پروٹین کی سطح دونوں میں اضافہ کیا گیا تھا، اورگردہAlox15-/- چوہوں میں dysfunction اور fibrosis کو بہتر کیا گیا۔ اس کے علاوہ، LC-MS/MS-based ثالثی لیپیڈومکس نے انکشاف کیا کہ Alox15-/- CKD ماؤسگردےWT چوہوں کے مقابلے میں PGD 2 کی سطح میں نمایاں اضافہ ہوا تھا۔ PGD2 نے NRK-52E اور HK-2 خلیوں کے EMT کو روکا؛ لہذا، PGD2 میں اضافہ Alox15-/- چوہوں کی مزاحمت میں حصہ ڈال سکتا ہے۔گردوں کی چوٹاور فائبروسس. کے درمیان تعلقگردوں کی بیماریاور انسانی سیرم یا پلازما پر لپڈومکس کا استعمال کرتے ہوئے لپڈ پروفائلز کی بڑے پیمانے پر چھان بین کی گئی ہے [31-33]، لیکن نہیںگردہٹشو. اسی طرح، اگرچہ CKD جانوروں کے ماڈلز کا استعمال کرتے ہوئے lipidomics کے بارے میں رپورٹس بہت کم ہیں [34–36]، ان تمام مطالعات نے CKD جانوروں کے نمونوں سے پلازما کے نمونوں پر لیپیڈومکس کا مظاہرہ کیا۔ تاہم، پر کوئی جامع lipidomicsگردہCKD ماڈل کے ٹشوز کی اطلاع ابھی تک موصول ہوئی ہے۔ بافتوں پر براہ راست لیپڈومکس بھی مؤثر ہے، ساتھ ساتھ پلازما کے نمونے، فعال میٹابولائٹس کی شناخت میں. مزید برآں، ٹشوز میں میٹابولائٹ تبدیلیوں کے ساتھ ساتھ خون کے نمونے بھی عضو کے لحاظ سے کافی مختلف ہوتے ہیں [20]۔ موجودہ مطالعہ میں، ہم نے PUFA سے ماخوذ لپڈ ثالثوں کے پروفائل کا اچھی طرح سے تجزیہ کیا۔گردہCKD جانوروں کے ماڈل کے ٹشوز۔
اس مطالعہ نے ALOX15 پر توجہ مرکوز کی، جو PUFAs کو میٹابولائز کرنے والے بڑے خامروں میں سے ایک ہے۔ اس مطالعہ میں، CKD میں ALOX15 کے پروٹین اور mRNA اظہار کی سطح دونوں میں واضح طور پر اضافہ کیا گیا تھا۔گردے. ہم نے CKD میں ALOX15 اظہار کے لیے ذمہ دار سیل اقسام پر توجہ دی۔گردے،اور سیٹو ہائبرڈائزیشن کے ذریعے، ہمیں ALOX15 mRNA میں اضافہ ہوا اظہار ملاگردوں5/6 Nx ماڈل میں نلی نما خلیات۔
ALOX15 دائمی بیماریوں میں ملوث ہے، جیسے atherosclerosis، اور جانوروں کی بیماریوں کے ماڈلز میں اس کا حذف ان بیماریوں کو بہتر بناتا ہے [5]۔ ALOX15 کے ساتھ ایسوسی ایشن کے بارے میںگردوں کی بیماریاسٹریپٹوزوٹوسن کی حوصلہ افزائی ذیابیطس نیفروپیتھی ماڈل [37] کے ذریعہ گلومیرولر چوٹ کے تحت ایلوکس 15-/- چوہوں میں پروٹینوریا میں کمی واقع ہوئی ہے۔ تاہم، یہ ذیابیطس mellitus ماؤس ماڈل میں کوئی کمی نہیں دکھاتی ہے۔گردے کی تقریب; اس طرح، طریقہ کار کہ کس طرح ALOX15 معذور افراد سے وابستہ ہے۔گردے کی تقریبCKD ماڈل میں غیر واضح رہا ہے. موجودہ مطالعہ میں، 5/6 Nx ماؤس ماڈل کا استعمال کرتے ہوئے، ہم نے پایا کہ ALOX15 کو حذف کرنے میں بہتری آئی ہے۔گردہdysfunction اورگردوںCKD ماڈل میں فائبروسس۔ آج تک، صرف IL-4 اور IL-13 monocytes میں ریگولیٹری عوامل کے طور پر جانا جاتا ہے جو ALOX15 کے اظہار کو براہ راست بڑھاتے ہیں [5]۔ تاہم، یہ واضح نہیں ہے کہ ALOX15 میں کیا اضافہ ہوتا ہے۔گردوںنلی نما خلیات. CKD [38، 39] میں پلازما اور گردوں میں مختلف قسم کے سائٹوکائنز اور یوریمک ٹاکسن کو بڑھایا جاتا ہے۔ ان میں، ALOX15 کے نئے ریگولیٹرز ہو سکتے ہیں۔ CKD میں ALOX15 کے بڑے ریگولیٹری عوامل کو واضح کرنے کے لیے مزید مطالعات کی ضرورت ہے۔ 5/6 Nx ماڈل میں Alox15 کے حذف ہونے کو اس کے renoprotective اثر سے جوڑنے والے مخصوص مداخلت کرنے والے آکسیلیپینز کی نشاندہی کرنے کے لیے ہمارے مطالعے میں، ہم نے پایا کہ PGD2 مزاحمت میں ملوث ہو سکتا ہے۔گردوں کا نقصانALOX15 کے حذف ہونے کی وجہ سے۔ عام فہم کے طور پر، PGD2، COX-1 اور بنانے کے لیے
CCOX-2 arachidonic ایسڈ سے PGG2 تیار کرتا ہے، جو پھر PGH2 میں تبدیل ہو جاتا ہے۔ جب PGH2 کو PGD2 synthase (PGDS) کے ذریعے میٹابولائز کیا جاتا ہے، تو PGD2 تیار ہوتا ہے [28]۔ PGDS کے دو جینیاتی طور پر الگ الگ آئسفارمز ہیں، یعنی lipocalintype PGDS (L-PGDS) اور hematopoietic-type PGDS (H-PGDS) [28]۔ اگرچہ PGD2 کو Alox15-/- CKD ماؤس میں بڑھایا گیا تھا۔گردےAlox15-/- CKD ماؤس میں نہ تو L-PGDS اور نہ ہی H-PGDS میں اضافہ کیا گیا تھا۔گردے، WT CKD ماؤس میں PGDS میں بڑے اضافے کے باوجودگردے(تصویر 8a)۔ مزید برآں، ہم نے یہ بھی انکشاف کیا کہ Alox15−/− CKD ماؤس گردوں (تصویر 8b) میں نہ تو COX-1 اور نہ ہی COX-2 میں اضافہ ہوا ہے۔ یہ نتائج بتاتے ہیں کہ Alox15-/- CKD ماؤس گردوں میں PGD 2 میں اضافہ ترکیب میں اضافے کی وجہ سے نہیں تھا بلکہ سبسٹریٹ کی بڑھتی ہوئی دستیابی یا انحطاط کو روکنے کی وجہ سے تھا، اور حقیقت میں، ہم نے {{ میں کمی کا انکشاف کیا ہے۔ 7} PGDH، Alox15−/− CKD ماؤس گردوں میں PGD2 میٹابولائزنگ انزائمز [29] میں سے ایک (تصویر 8b)۔ اس وجہ کو واضح کرنے کے لیے مزید تحقیقات کی ضرورت ہے کہ کیوں Alox15 کو حذف کرنے سے 15-PGDH میں کمی واقع ہوتی ہے۔
جیسا کہ اوپر ذکر کیا گیا ہے، PGD2 مزاحمت میں شامل ہوسکتا ہے۔گردوں کی چوٹALOX15 کے نقصان کی وجہ سے۔ اس مطالعہ میں، PGD2 نے NRK-52E اور HK-2 خلیوں میں TGF- 1 کے ذریعے EMT کو روکا، جو قربت والے نلی نما خلیوں کی نمائندگی کرتا ہے۔ پی جی ڈی 2 دو مختلف جی پروٹین کپلڈ ریسیپٹرز سے منسلک ہے، یعنی ڈی پی 1 اور ڈی پی 2، جن کے افعال مختلف ہیں [28]۔ تاہم، ہمارے ان وٹرو تجربات میں، PGD2 4 سے 32 μM تک کے ارتکاز پر موثر تھا، جو نسبتاً زیادہ ہیں، اس بات پر غور کرتے ہوئے کہ DP1 اور DP2 کی Ki قدریں بالترتیب 1.7 nM اور 2.4 nM ہیں [28]۔ یہ نتیجہ اس بات کی نشاندہی کرتا ہے کہ PGD2 antifibrotic اثرات مرتب کر سکتا ہے G پروٹین کے جوڑے والے رسیپٹرز کے ذریعے نہیں بلکہ دوسرے راستوں جیسے PPAR کے ذریعے، جس کے ذریعے 15-d-PGJ2، ایک نیچے کی طرف PGD2 میٹابولائٹ، اپنے اثرات کو استعمال کرنے کے لیے جانا جاتا ہے [28]۔ اس مطالعہ میں، جو لپڈ میٹابولک انزائمز اور ان کے میٹابولائٹس پر توجہ مرکوز کرتا ہے، ALOX15 روکنا اور/یا PGD2 انتظامیہ CKD کے لیے ایک امید افزا علاج کا ہدف ہو سکتا ہے۔ بدقسمتی سے، کوئی ALOX15 مخصوص روکنے والا تیار نہیں کیا گیا ہے جو کلینیکل پریکٹس میں استعمال کیا جا سکتا ہے [40، 41]۔ فیٹی ایسڈ میٹابولائزنگ انزائمز، جو مختلف میٹابولائٹس کو متاثر کرتے ہیں، کی روک تھام کے بجائے، PGD2 جیسے ڈاون اسٹریم فنکشنل میٹابولائٹس کا علاج کا ہدف بنانا، ایک نیا مثالی CKD تھراپی ہو سکتا ہے۔
CISTANCHE گردے/ رینل ڈائیلاسز کو بہتر کرے گا۔
