آکسیڈیٹیو تناؤ، SIRT1، FOXO3a، اور Claudin-1 پر Tropisetron کا اثر STZ سے متاثرہ ذیابیطس چوہوں کے رینل ٹشو میں

edmund.chen@wecistanche.com

خلاصہ

Tropisetron ایک 5-HT3 ریسیپٹر مخالف ہے جو DN کے خلاف حفاظتی اثر ڈالتا ہے۔ اس مطالعے کا مقصد STZ-حوصلہ افزائی ذیابیطس چوہوں میں tropisetron کے renoprotective اثرات سے وابستہ ممکنہ مالیکیولر میکانزم کی چھان بین کرنا تھا۔ جانوروں کو 5 مساوی گروپوں میں تقسیم کیا گیا تھا۔ کنٹرول، tropisetron، diabetes، tropisetron Plus diabetes، اور glibenclamide plus diabetes (n=7)۔ ٹائپ 1 ذیابیطس میں شامل کرنے کے لیے، جانوروں کو STZ (55 mg/kg، ip) کا ایک انجکشن لگایا گیا تھا۔ ذیابیطس کے چوہوں کا علاج 2 ہفتوں تک tropisetron (3 mg/kg) اور glibenclamide (1 mg/kg) سے کیا گیا۔ کئے گئے تجزیہ کے مطابق، ذیابیطس کی وجہ سےگردوں dysfunction (گلومیرولر فلٹریشن کی شرح میں کمی اور پیشاب یوریا اور کریٹینائن کے ساتھ ساتھ پلازما یوریا اور کریٹینائن میں بلندی) اور اینٹی آکسیڈینٹ دفاعی نظام میں اسامانیتاوں (ٹی اے سی میں کمی اور ایم ڈی اے میں بلندی)، کنٹرول گروپ کے مقابلے، جسے ٹراپیسٹرون نے روکا تھا۔ علاج. ریورس ٹرانسکرپشن-کوانٹیٹیٹو پولیمریز چین ری ایکشن اور ویسٹرن بلوٹنگ تجزیہ نے یہ ظاہر کیا کہ SIRT1 جین ایکسپریشن میں کمی آئی ہے جبکہ FOXO3a اور NF-κB جین ایکسپریشن کے ساتھ ساتھ فاسفوریلیٹڈ FOXO3a/کل FOXO3a پروٹین کے تناسب اور کلوڈین کی سطح میں اضافہ ہوا ہے۔گردہکنٹرول گروپ کے مقابلے میں ذیابیطس کے چوہوں کا۔ اس کے ساتھ ساتھ، اس تحقیق کے نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ ٹراپیسٹرون کے علاج نے ان تبدیلیوں کو تبدیل کر دیا۔ اس کے علاوہ، ان تمام تبدیلیوں کا موازنہ ایک مثبت کنٹرول کے طور پر گلیبین کلیمائڈ کے ذریعہ تیار کردہ تبدیلیوں سے کیا گیا۔ لہذا، ٹراپیسٹرون میں بہتری آئیگردوں کا نقصانذیابیطس نیفروپیتھی کی وجہ سے ممکنہ طور پر آکسیڈیٹیو تناؤ کو دبانے اور SIRT1، FOXO3a، اور claudin-1 کی سطحوں میں ردوبدل کے ذریعے۔

مطلوبہ الفاظ:گردوں کو پہنچنے والے نقصان؛ گردوں کی تقریب؛ گردوں کی بیماری؛ گردہ؛ گردے کے ؤتکوں

CISTANCHE گردے/ گردوں کی خرابی کو بہتر کرے گا۔

تعارف

ذیابیطس نیفروپیتھی (DN) ایک مائیکرو ویسکولر بیماری ہے جس کی خصوصیت ضرورت سے زیادہ پروٹینوریا ہے جس کی بیماری 25-40 فیصد ہے (Chen et al. 2011; Ritz et al. 2010)۔ مورفولوجیکل اور فنکشنل تبدیلیاں بشمول گلوومیرولر ہائپر ٹرافی، ایکسٹرا سیلولر میٹرکس اور گلوومیرولوسکلروسیس کا زیادہ جمع ہونا، اور بالآخر، نقصانگردوں کی تقریبمیںگردہہائپرگلیسیمیا اور اس کے نتیجے میں گلوکوز میٹابولزم کی خرابی سے وابستہ ہیں (کنوار ایٹ ال۔ 2008؛ وکرم ایٹ ال۔ 2014)۔ لہذا، مؤثر انتظام یا علاج پر خصوصی توجہ دی گئی ہے جو ابتدائی مرحلے میں بیماری سے نمٹنے کے لئے ضروری ہوسکتا ہے. جمع ہونے والے شواہد اس بات کی نشاندہی کرتے ہیں کہ ہائپرگلیسیمیا کے براہ راست مسئلے کے طور پر رد عمل آکسیجن پرجاتیوں (ROS) کی پیداوار اور اس کے نتیجے میں، سوزش والی سائٹوکائنز کی پیداوار ذیابیطس کی پیچیدگیوں کی نشوونما میں اہم میکانزم ہیں (Beckman and Ames 1998; Giacco and Brownlee 2010; Jacco and Brownlee 2010; ؛ Kiritoshi et al. 2003)۔ یہ واضح ہے کہ پرو آکسیڈینٹ اور اینٹی آکسیڈینٹ دفاعی صلاحیت کے درمیان عدم توازن کے نتیجے میں آزاد ریڈیکل جمع ہوتے ہیں جو ڈی این اے سمیت سیلولر میکرو مالیکیولز کے ساتھ ساتھ پروٹین میں تبدیلی اور لپڈ پیرو آکسیڈیشن (Peluso and Raguzzini 2016) کو نقصان پہنچا سکتے ہیں۔

ممالیہ sirtuins NAD پلس پر منحصر deacetylases کا ایک خاندان ہے، بشمول سات ارکان (SIRT1-7)۔ ان میں، SIRT1، خاندان کا پہلا رکن، سب سے زیادہ وسیع پیمانے پر مطالعہ کیا گیا ہے (Dong et al. 2014)۔ حالیہ مطالعات سے یہ بات سامنے آئی ہے کہ SIRT1 سیل کی موت/لمبی عمر کے ضابطے میں اہم کردار ادا کرتا ہے نیز ممالیہ جانوروں میں ڈی این اے کو پہنچنے والے نقصان، سوزش اور اپوپٹوسس کو کم کرکے شدید اور دائمی تناؤ کے ردعمل میں (Hasegawa et al. 2013; Yun et al. 2012) )۔ کئی مطالعات ذیابیطس میں SIRT1 سرگرمی کی ROS کی حوصلہ افزائی کی کمی کی اعلی سطح کی نشاندہی کرتے ہیں۔گردے،Vivo اور in Vitro دونوں میں (Akhtar and Siragy 2019; Du et al. 2016; Kumar et al. 2014; Papadimitriou et al. 2015; Park et al. 2016; Shi and Huang 2018)۔

SIRT1 کئی پروٹینوں کو ریگولیٹ کر کے اپنی کارروائی کر سکتا ہے، جیسے کہ نیوکلیئر فیکٹر کپا بی (NF-κB) اور FOXO فیملی کے ٹرانسکرپشن عوامل (Brunet et al. 2004؛ Langley et al. 2002؛ Motta et al. 2004؛ Yeung et al. 2004)۔ حال ہی میں، یہ اطلاع دی گئی ہے کہ SIRT1 FOXOs (Kobayashi et al. 2005) میں حصہ ڈال کر گلوکوز میٹابولزم کو منظم کرتا ہے۔ FOXO3a ٹرانسکرپشن عوامل کے FOXO خاندان کا ایک ذیلی گروپ ہے جو آکسیڈیٹیو تناؤ (Accili and Arden 2004) کے دوران اہم کردار ادا کرتا ہے۔ FOXO3a کی تبدیلیاں فاسفوریلیشن اور ایسٹیلیشن سے ہوتی ہیں جو مختلف حالات میں بیک وقت ظاہر ہو سکتی ہیں۔ لٹریچر کے مطابق، SIRT1 FOXO3a کو ختم کر سکتا ہے، اس طرح اس کی ہر جگہ ہونے کی سطح کو بڑھاتا ہے اور تناؤ سے بچاتا ہے (Wang et al. 2017a)۔ ہائپرگلیسیمک حالات (Yun et al. 2012) کے دوران SIRT1 اور FOXO کے درمیان تعامل کے طریقہ کار کے بارے میں بہت کم معلومات ہیں۔ تاہم، یہ تجویز کیا گیا تھا کہ SIRT1 FOXO کی سرگرمی کو ممکنہ طور پر ان کے نیوکلیئر ٹرانسلوکیشن (Brunet et al. 2004) کے ذریعے تبدیل کرتا ہے اور جین کے ساتھ مخصوص نقل کو بھی کنٹرول کرتا ہے (Kobayashi et al. 2005)۔ لہذا، FOXO3a کی سائٹوپلازم سے نیوکلئس میں نقل مکانی بنیادی طور پر SIRT1 کی ڈیسیٹیلیشن سرگرمی کی وجہ سے ہوتی ہے، خاص طور پر آکسیڈیٹیو تناؤ کی حالت میں (Yun et al. 2012)۔

وانگ وغیرہ۔ رپورٹ کیا کہ ہائی گلوکوز کے علاج نے انسان میں SIRT1 اور FOXO3a پروٹین کے اظہار کو ماڈیول کیاگردہاپکلا خلیات (Wang et al. 2017b)۔ مزید یہ کہ، FOXO3a NF-κB سگنلنگ کے ایک مثبت ریگولیٹر کے طور پر کام کرتا ہے، جس میں اسے تناؤ کے حالات میں خلیے کی بقا کی حکمت عملیوں کو متاثر کرنے کے لیے استعمال کیا جا سکتا ہے (Li et al. 2012)۔ Claudin-1 ایک پوٹیٹیو پیریٹل اپیتھیلیل سیل (PEC) مخصوص مارکر ہے (Huby et al. 2009; Ohse et al. 2009; Rincon-Choles et al. 2006)، جو دونوں قربتوں میں SIRT1 اظہار کے ساتھ منفی طور پر منسلک ہے۔ tubules اور glomerular خطہ. یہ دکھایا گیا تھا کہ ذیابیطس میں SIRT1 ڈاؤن ریگولیشن کی تصدیق البومینوریا (گونگ ایٹ ال۔ 2017؛ ہاسیگاوا ایٹ ال۔ 2013) میں پوڈو سائیٹس میں ٹائٹ جنکشن پروٹین کلاڈن-1 کے اپ گریجولیشن سے ہوتی ہے۔ چونکہ آکسیڈیٹیو تناؤ، ایک سوزش والی سائٹوکائن، اور ان کے مالیکیولر ثالث ذیابیطس کے نقصان دہ اثر میں اہم موضوعات ہیں، اس لیے اینٹی آکسیڈینٹ اور سوزش کو روکنے والے ایجنٹ DN کے خلاف نئے علاج فراہم کر سکتے ہیں (Elmarakby and Sullivan 2012)۔

Tropisetron ایک حال ہی میں ابھرتا ہوا 5-HT3 ریسیپٹر مخالف ہے جس کی شناخت کیموتھراپی کے دوران اینٹی ومیٹک دوا کے طور پر ہوئی ہے (Barzegar-Fallah et al. 2015)۔ متعدد رپورٹس سے پتہ چلتا ہے کہ ٹراپیسٹرون اینٹی پاپٹوٹک، اینٹی ذیابیطس، اینٹی کینسر، اینٹی لیپیڈیمک، نیورو پروٹیکٹو، اور کارڈیو پروٹیکٹو اثرات پیش کرسکتا ہے جو ممکنہ طور پر اینٹی آکسیڈینٹ اور اینٹی سوزش میکانزم کے ذریعے ثالثی کر سکتے ہیں (امین زادہ 2017؛ اسدی ایٹ ال۔ 2016؛ باریٹ 2016؛ باریٹ 2017؛ 2016؛ 2017؛ اسدی وغیرہ۔ Barzegar-Fallah et al. 2014; Gholizadeh-Ghaleh Aziz et al. 2019; Rashidi and Bazi 2020)۔ کچھ مطالعات ہیں جو وٹرو اور ویوو دونوں میں ٹراپیسٹرون کے اینٹی آکسیڈیٹیو اثر کو ثابت کرتی ہیں، جیسے کہ PC12 خلیوں میں ہائپرگلیسیمیا سے متاثرہ آکسیڈیٹیو ڈسٹربنس پر ٹراپیسٹرون کا حفاظتی اثر (امین زادہ 2017)، نائٹریرجک کو کم کرکے مائٹوکونڈریل چوٹ میں بہتری۔ دماغ میں نظام کی سرگرمی (Haj Mirzaian et al. 2016)، یا چوہوں میں دماغی عمر بڑھنے کے خلاف آکسیڈیٹیو تناؤ کو کم کرنا (Mirshafa et al. 2020)۔

حال ہی میں، برزیگر فلاہ وغیرہ۔ انکشاف ہوا کہ ٹراپیسٹرون خون میں گلوکوز کو کم کرتا ہے اور یہ بھیگردوں کی تقریبجیسا کہ سیرم بلڈ یوریا نائٹروجن (BUN)، سیرم کریٹینائن کی سطح، اور پیشاب میں البومین کے اخراج میں کمی سے ثبوت ہے۔ ذیابیطس کے شکار جانوروں میں ٹراپیسٹرون (Barzegar-Fallah et al. 2015) کے ساتھ علاج میں بہتری آئی۔ تاہم، tropisetron اور اس کے مالیکیولر میکانزم کے ذریعے DN کی ماڈیولیشن کے بارے میں کوئی اور مضبوط ثبوت نہیں ہے۔ لہذا، اس مطالعے کا مقصد، پہلے جائزہ لینا ہے: سالماتی ثالثوں پر tropisetron کے اثرات بشمول SIRT1، NF-κB، اور FOXO3a، نیز claudin-1، جو کہ ایک پروٹین ہے جو سخت اپکلا جنکشن میں شامل ہوتا ہے میں اہم کردارگردوںذیابیطس نیفروپتی؛ دوسرا، tropisetron کے اثر کا موازنہ معیاری مارکیٹ کی اینٹی ذیابیطس دوائی، glibenclamide سے کرنا، تاکہ سونے کی معیاری اینٹی ذیابیطس دوائی کے طور پر زیادہ فائدہ مند اور محفوظ ایجنٹ تلاش کیا جا سکے۔

CISTANCHE گردے/ گردوں کی بیماری کو بہتر کرے گا۔

مواد اور طریقےیہ مطالعہ ارمیا یونیورسٹی آف میڈیکل سائنسز میں لیبارٹری اینیمل کیئر کے اصولوں کے مطابق کیا گیا۔ طبی اخلاقیات کمیٹی، وزارت صحت، ایران (IR.UMSU.REC.1397.291) کے رہنما خطوط کے مطابق جانوروں کے تجربات کے لیے EU کی ہدایت 2010/63/EU سے اخلاقی منظوری حاصل کی گئی تھی۔ پینتیس نر وِسٹار چوہوں (230–270 گرام وزن، 3–4 ماہ کی عمر) کو 5 گروپوں میں مختص کیا گیا تھا (ہر گروپ میں سات چوہے): 1. کنٹرول گروپ: چوہوں کو 2 ہفتوں تک نارمل نمکین ملا۔ 2. Tropisetron گروپ: چوہوں کو 2 ہفتوں تک tropisetron intraperitoneally موصول ہوا۔ 3. ذیابیطس گروپ: ذیابیطس چوہوں میں اسٹریپٹوزوٹوسن (STZ) انجیکشن کے ذریعہ پیدا کیا گیا تھا۔ 4. Tropisetron پلس ذیابیطس گروپ: چوہوں کو 3 mg/kg tropisetron (Gholizadeh-Ghaleh Aziz et al. 2019) intraperitoneally 2 ہفتوں تک ذیابیطس شامل کرنے کے بعد ملا۔ 5. Glibenclamide پلس ذیابیطس گروپ: چوہوں کو 1 mg/kg glibenclamide (Gholizadeh-Ghaleh Aziz et al. 2019) ذیابیطس شامل کرنے کے بعد 2 ہفتوں تک انٹراپریٹونلی طور پر ملا۔

ذیابیطس کی شمولیتStreptozotocin (50 mg/kg) چوہوں میں ذیابیطس پیدا کرنے کے لیے ایک خوراک میں انٹراپریٹونلی طور پر انجکشن لگایا گیا تھا۔ اس طریقہ کی بنیاد پر، قسم I ذیابیطس چوہوں میں انجیکشن کے 72 گھنٹے بعد پیدا ہوئی۔ روزہ دار چوہوں کی دم میں لینسیٹ کا استعمال کرتے ہوئے ایک معمولی چوٹ پیدا کرکے ذیابیطس کی تشخیص اور تصدیق کی گئی اور پھر خون کا ایک قطرہ گلوکوومیٹر کی پٹی پر رکھا گیا۔ پھر، اس کی پیمائش گلوکوومیٹر (بوہرنگر مینہیم انڈیاناپولس، IN) کے ذریعے کی گئی، اور خون میں گلوکوز کی سطح 300 ملی گرام/ڈی ایل سے زیادہ کو ذیابیطس کی شمولیت کا اشارہ سمجھا گیا۔ 2 ہفتے اور 24 گھنٹے کے بعد بے ہوشی کرنے سے پہلے، چوہوں کو ایک ایک کرکے میٹابولک پنجروں میں رکھا گیا، اور پیشاب جمع کیا گیا۔ اس کے بعد، یوریا اور کریٹینائن کے تجزیہ کے لیے پیشاب کے نمونوں کو −20 ڈگری پر محفوظ کیے گئے نمونوں کی شفاف سطح کے ساتھ فوراً سینٹرفیوج کیا گیا۔ اس کے بعد، چوہوں کا وزن کیا گیا اور کیٹامین (60 ملی گرام/کلوگرام) اور زائلازین (4 ملی گرام/کلوگرام) مرکب کے انٹراپریٹونیل انجیکشن کے ذریعے بے ہوشی کی گئی۔ پھر، پیٹ کی گہا کھول دیا گیا تھا؛ خون کو ایک تنگ سرنج کے ذریعے دل سے حاصل کیا گیا اور اسے ایتھیلینیڈیامینیٹیٹراسیٹک ایسڈ (EDTA) کے ساتھ ملایا گیا اور 20 منٹ کے لیے 4000×g پر سینٹرفیوج کیا گیا۔ اس کے بعد، یوریا، کریٹینائن، اور کل اینٹی آکسیڈینٹ صلاحیت (TAC) کی بعد میں پیمائش کے لیے حاصل شدہ پلازما کو −80 ڈگری پر محفوظ کیا گیا۔ دونوںگردےجانوروں میں سے ایکسائز کیا گیا تھا، ٹھنڈے جسمانی سیرم سے دھویا گیا تھا، اور وزن کیا گیا تھا۔ بائیںگردہریئل ٹائم پی سی آر طریقہ استعمال کرتے ہوئے SIRT1، NF-κB، اور FOXO3a کے اظہار کی سطح کو جانچنے کے لیے RNAase پر مشتمل حل میں Ultra Turrax (T10B، IKA، اور جرمنی) کے ذریعے ٹشوز کو ہم آہنگ کیا گیا تھا۔ ٹھیک ہے۔گردہMDA پیمائش اور مغربی دھبے کے تجزیہ کے لیے −80 ڈگری پر منجمد کیا گیا تھا (کل اور فاسفوریلیٹڈ FOXO3a اور claudin-1)۔

روزہ خون میں گلوکوزپروٹوکول کے اختتام پر، رات بھر کے روزے کے بعد (14 سے 18 گھنٹے)، دم کی نوک سے خون کے نمونے حاصل کیے گئے، اور پھر ڈیجیٹل گلوکوومیٹر (Elegance، CT-X10، Frankenberg، Germany) کے ذریعے گلوکوز کی سطح کی پیمائش کی گئی۔پیشاب اور پلازما یوریا اور کریٹینائناس مقصد کے لیے، پیشاب اور پلازما یوریا اور کریٹینائن کی سطح کو یوریا اور کریٹینائن کی پیمائش کے لیے مخصوص اقتصادی کٹس کے ذریعے ماپا جائے گا (بائیو ٹیکنیکل؛ ورگنہا، میناس گیریس، برازیل)۔گلومیرولر فلٹریشن کی شرحGlomerular فلٹریشن کی شرح (GFR) مجموعی طور پر بہترین انڈیکس ہے۔گردے کے افعال، جس کا اندازہ کریٹینائن کلیئرنس (GFR=[UCr × V]/SCr) کا حساب لگا کر اور پلازما اور پیشاب کریٹینائن کی تعداد اور پیشاب کے بہاؤ کی شرح یا حجم کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا تھا۔

Malondialdehyde اور کل اینٹی آکسیڈینٹ صلاحیتلیپڈ پیرو آکسیڈیشن کی آخری پیداوار کے طور پر MDA کا اندازہ تھائیوباربیٹورک ایسڈ (سگما-الڈرچ؛ USA) کے ساتھ رد عمل کے ذریعے کیا گیا تھا۔گردہمینوفیکچرر کے پروٹوکول کے مطابق نمونے (Esterbauer and Cheeseman 1990)۔ مختصراً، 0.3–0.4 جیگردے کے ٹشوبرف کے ٹھنڈے KCl (150 mM) میں ہم آہنگ کیا گیا اور پھر 10 منٹ کے لیے 3000×g پر سینٹرفیوج کیا گیا۔ اس کے بعد، 0.5 ملی لیٹر سپرنٹنٹ کو 3 ملی لیٹر فاسفورک ایسڈ (1 فیصد، v/v) کے ساتھ ملایا گیا، اور ورٹیکس مکسنگ کے بعد، 2 ملی لیٹر 6.7 g/l TBA کو نمونوں کے ساتھ جوڑ دیا گیا۔ نمونوں کو 100 ڈگری پر 45 منٹ تک گرم کیا گیا۔ برف پر ٹھنڈا ہونے کے بعد، n-butanol (3 ml) کو ملایا گیا اور مصنوعات کو مزید 10 منٹ کے لیے 3000×g پر سینٹرفیوج کیا گیا۔ پھر، سپیکٹرو فوٹومیٹری کے ذریعے مصنوعات کے جذب کو 532 nm پر سمجھا گیا۔ جذب کی سطح کا موازنہ معیاری وکر سے کیا گیا تھا۔ ٹی اے سی کی پیمائش ایک رینڈکس کل اینٹی آکسیڈینٹ سٹیٹس کٹ کے ذریعے کی گئی تھی، جس میں ABTS 2,2′-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonate) کو پیرو آکسیڈیز اور H2O2 کے ساتھ انکیوبیٹ کیا جاتا ہے جس کے نتیجے میں ریڈیکل کیٹیشن ABTS پلس کی پیداوار ہوتی ہے۔ . اس میں ایک مستحکم نیلا سبز رنگ ہے، جس کا اندازہ ایک 600-nm خودکار تجزیہ کار (Amini et al. 2020) کے ذریعے کیا جاتا ہے۔

CISTANCHE گردے/ گردوں کے درد کو بہتر کرے گا۔

پرائمر ڈیزائن اور ریئل ٹائم پی سی آرRNA کو سب سے پہلے متعلقہ کٹ (GENALL) کے ذریعے نکالا گیا تھا، اور کنڈینسڈ RNA کو معیار کے لحاظ سے (الیکٹروفورسس) اور مقداری طور پر (نینو ڈراپ) کا اندازہ لگایا گیا تھا تاکہ RNA نکالنے اور بعد میں آنے والی مالیکیولر تکنیکوں میں استعمال کو یقینی بنایا جا سکے۔ پھر، تمام نکالے گئے آر این اے نمونوں سے متعلقہ سی ڈی این اے کی ترکیب کی گئی۔ ٹارگٹ جینز کے پرائمر اور گلیسرالڈیہائیڈ ڈیہائیڈروجنیز (جی اے پی ڈی ایچ) جین بطور ہاؤس کیپنگ جین کی جانچ این سی بی آئی سائٹ پر جینرنر سافٹ ویئر (ضمنی جدول) کے ذریعے کی گئی۔ اس کے بعد، پی سی آر کٹ کے ذریعہ ترکیب شدہ پرائمر کا استعمال کرتے ہوئے جین کے اظہار کا تجزیہ کیا گیا، اس کے بعد اعداد و شمار کا شماریاتی تجزیہ کیا گیا۔

مغربی دھبہمغربی دھبے کا طریقہ FOXO3a (کل اور فاسفوریلیٹڈ) اور کلوڈین-1 پروٹین کی سطح کا تعین کرنے کے لیے استعمال کیا گیا تھا۔گردہ.الیکٹروفورسس جیل بنانے کے لیے دو حل کرنے والے اور اسٹیکنگ جیل استعمال کیے جاتے ہیں۔ حل کرنے والے جیل کو تیار کرنے اور اسے سانچے میں ڈالنے کے بعد، ایک گھنٹے کے بعد اور اسٹیکنگ کے بعد ایک اسٹیکنگ جیل شامل کیا گیا تھا۔ نمونے ایک خاص کنگھی کے ذریعے بنائے گئے کنویں میں بھرے گئے تھے۔ پھر انہیں SDS-PAGE کے ذریعے الگ کر دیا گیا۔ ایک گھنٹے کے اندر، تمام بھری ہوئی نمونوں کو PVDF جھلی میں منتقل کر دیا گیا۔ اس کے بعد، نمونوں کو 5 فیصد سکم دودھ بفر کے ساتھ بلاک کر دیا گیا جس میں 0.1 فیصد ٹوین 20 شامل ہیں اور پھر انہیں شیکر انکیوبیٹر میں 4 ڈگری پر راتوں رات پرائمری اینٹی باڈیز کے ساتھ انکیوبیٹ کیا گیا۔ اس کے بعد جھلیوں کو ہارسریڈش پیرو آکسیڈیس کنجوگیٹڈ سیکنڈری اینٹی باڈی سے لگایا گیا تھا۔ آخر میں، beta-actin کو مغربی دھبے کے تجزیہ کے لیے اندرونی معیار کے طور پر استعمال کیا گیا۔ آخر میں، داغے ہوئے نمونوں کے اثرات، ہدف پروٹین کی سطح پر منحصر ہے، ایک تاریک کمرے میں ریڈیو گرافی فلم پر جانچا گیا۔ ٹارگٹ پروٹینز کی مقدار درست کرنے کے لیے، فلم اسکین کے نتائج کا حساب ایکٹین کی سطح کے نسبت ایک کثافت میٹر کے ذریعے کیا گیا۔ مغربی بلوٹنگ اسسیس میں استعمال ہونے والی اینٹی باڈیز کو ضمنی جدول (کیٹلاگ نمبر اور کمپنیاں) میں دکھایا گیا ہے۔

شماریاتی تجزیہنتائج اوسط ± SEM کے طور پر پیش کیے گئے تھے۔ شماریاتی تجزیہ SPSS 16 کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا۔{1}}۔ گروپوں کے درمیان موازنہ کا تخمینہ ANOVA ٹیسٹ سے لگایا گیا جس کے بعد Tukey کے پوسٹ ہاک ٹیسٹ کے ذریعے کیا گیا۔ فرق P < 0.05="" پر="" شماریاتی="" طور="" پر="" اہم="" سمجھا="" گیا="">

نتائج

Tropisetron نے روزہ رکھنے والے خون میں گلوکوز (mg/dl)، گردے کے وزن (g) اور گردے کے انڈیکس (mg/g) کو کم کیا، جبکہ STZ سے متاثرہ ذیابیطس کے چوہوں میں جسمانی وزن (g) میں اضافہ ہوا۔اسی طرح اس کام میں پچھلے مطالعات کی طرح، ذیابیطس کے گروپوں نے کنٹرول گروپ کے مقابلے میں شدید (P < {{0}}۔{4}}01)="" ہائپرگلیسیمیا="" دکھایا۔="" tropisetron="" (p="">< 0.01)="" اور="" glibenclamide="" (p=""><0.05) کے="" 2="" ہفتوں="" تک="" استعمال="" نے="" stz="" سے="" متاثرہ="" ذیابیطس="" کے="" گروپوں="" میں="" خون="" میں="" گلوکوز="" کو="" نمایاں="" طور="" پر="" کم="" کیا،="" لیکن="" یہ="" کنٹرول="" گروپ="" (p=""><0.001) کے="" مقابلے="" میں="" اب="" بھی="" نمایاں="" طور="" پر="" زیادہ="" تھا۔="" )۔="" اس="" مطالعے="" کے="" آغاز="" میں="" گروپوں="" کے="" درمیان="" جسمانی="" وزن="" (bw)="" میں="" کوئی="" خاص="" فرق="" نہیں="" تھا="" (ڈیٹا="" نہیں="" دکھایا="" گیا)۔="" ذیابیطس="" کے="" چوہوں="" میں="" stz="" کے="" ذریعہ="" ذیابیطس="" کی="" شمولیت="" میں="" نمایاں="" کمی="" واقع="" ہوئی="" (p=""><0.001) آخر="" کار="">گردہوزن (KW) پہلے گروپوں میں اہم نہیں تھا۔ تاہم، ذیابیطس کے گروپ میں اس میں اضافہ ہوا اور مداخلت کے بعد کم ہوا۔گردہکنٹرول گروپ کے مقابلے T1DM میں انڈیکس (KW/BW) میں نمایاں اضافہ ہوا (P < {{0}}.001)۔="" دلچسپ="" بات="" یہ="" ہے="" کہ="" ٹراپیسٹرون="" اور="" گلیبین="" کلیمائیڈ="" کے="" 2="" ہفتوں="" کے="" بعد،="" ماڈیولڈ="" kw/bw="" (p=""><0.05) (ٹیبل="">

Tropisetron نے STZ حوصلہ افزائی ذیابیطس چوہوں میں بائیو کیمیکل تجزیہ کو بہتر بنایاجیسا کہ پچھلے مطالعات میں، ذیابیطس کے گروپ کے پلازما اور پیشاب میں یوریا کی سطح کنٹرول گروپ (P < {{0}}="" کے="" مقابلے="" میں="" نمایاں="" طور="" پر="" زیادہ="" تھی۔{4}}01)="" .="" ٹراپیسٹرون="" پلس="" ذیابیطس="" گروپ="" میں،="" پلازما="" (p="">< 0۔{10}}01)="" اور="" پیشاب="" (p="">< 0۔{20}}="" 5)="" یوریا="" کی="" سطح="" ذیابیطس="" کے="" گروپوں="" کے="" مقابلے="" میں="" نمایاں="" طور="" پر="" کم="" ہوگئی۔="" تاہم،="" یورین="" یوریا="" اب="" بھی="" کنٹرول="" گروپ="" (p=""><0.01) کے="" مقابلے="" میں="" نمایاں="" طور="" پر="" کم="" تھا۔="" ٹراپیسٹرون="" پلس="" ذیابیطس="" اور="" کنٹرول="" گروپس="" کے="" درمیان="" پلازما="" یوریا="" کی="" سطح="" میں="" کوئی="" خاص="" فرق="" نہیں="" ہے۔="" پلازما="" (p=""><0.001) اور="" پیشاب="" (p=""><0.05) کریٹینائن="" کی="" سطح="" نے="" ذیابیطس="" کے="" چوہوں="" میں="" کنٹرول="" گروپ="" کے="" مقابلے="" میں="" نمایاں="" اضافہ="" دکھایا۔="" ٹراپیسٹرون="" انتظامیہ="" نے="" ذیابیطس="" کے="" گروپ="" کے="" مقابلے="" میں="" پیشاب="" اور="" پلازما="" کریٹینائن="" کی="" سطح="" کو="" نمایاں="" طور="" پر="" کم="" کیا="" (p=""><0.001)۔ ذیابیطس="" والے="" جانوروں="" میں،="" کریٹینائن="" کلیئرنس،="" گلوومرولر="" فلٹریشن="" کی="" شرح="" کے="" اشارے="" کے="" طور="" پر،="" کنٹرول="" گروپ="" (p=""><0.05) کے="" مقابلے="" میں="" نمایاں="" طور="" پر="" کم="" تھی۔="" ٹراپیسٹرون="" کے="" علاج="" نے="" ذیابیطس="" گروپ="" (p=""><0.001) کے="" مقابلے="" میں="" کریٹینائن="" کلیئرنس="" میں="" نمایاں="" اضافہ="" کیا۔="" وہی="" نتائج="" گلیبین="" کلیمائڈ="" سے="" علاج="" شدہ="" گروپ="" میں="" حاصل="" کیے="" گئے="" تھے۔="" تاہم،="" گلوبین="" کلیمائڈ="" پلس="" ذیابیطس="" گروپ="" (پی=""><0.01) (ٹیبل="" 2)="" کے="" مقابلے="" ٹراپیسیٹرون="" سے="" علاج="" شدہ="" گروپ="" میں="" پلازما="" یوریا="" بہت="" کم="">

Tropisetron نے STZ حوصلہ افزائی ذیابیطس چوہوں میں پلازما TAC مواد اور MDA کی سطح کو کم کیاکنٹرول میں MDA کی سطح، tropisetron، ذیابیطس mellitus، tropisetron پلس ذیابیطس، اور glibenclamide plus diabetes group 8.65 ± 1۔{19}}1, 10.89 ± 1.6 35.54 ± بالترتیب 7.1، 18.76 ± 3.6، اور 16.89 ± 4.1 nmol/mg پروٹین۔ ہمارے مطالعہ نے، دوسروں کے ساتھ، ذیابیطس کے گروپ میں ایم ڈی اے کی اعلی ترین سطح کا مظاہرہ کیا ہے، جس میں کنٹرول گروپ (P < 0="" کے="" مقابلے="" میں="" نمایاں="" اضافہ="" ہوا="" ہے۔{26}}0="" 1)۔="" ذیابیطس="" گروپ="" (تصویر="" 1a)="" کے="" مقابلے="" ٹراپیسٹرون="" پلس="" ذیابیطس="" اور="" گلیبین="" کلیمائڈ="" پلس="" ذیابیطس="" گروپس="" میں="" ایم="" ڈی="" اے="" کی="" سطح="" میں="" نمایاں="" کمی="" (p="">< {{30}}۔{34}}1)="" ظاہر="" ہوئی۔="" کنٹرول="" میں="" tac="" کی="" سطحیں،="" tropisetron،="" ذیابیطس،="" tropisetron="" plus="" diabetes،="" اور="" glibenclamide="" plus="" diabetes="" کے="" گروپس="" 0.65="" ±="" 0="" تھے۔{{40}}3,="" {{44}="" }.76="" ±="" 0.06،="" 0.26="" ±="" 0.08،="" 0.45="" ±="" 0.06،="" اور="" 0.57="" ±="" 0.08="" nmol/ml،="" بالترتیب۔="" ذیابیطس="" گروپ="" میں="" tac="" کی="" سطح="" کنٹرول="" گروپ="" (p=""><0.001) کے="" مقابلے="" میں="" کم="" ہوئی،="" جیسا="" کہ="" پہلے="" دکھایا="" گیا="" ہے۔="" tropisetron="" اور="" glibenclamide="" دونوں="" انتظامیہ="" نے="" نمایاں="" طور="" پر="" (p=""><0.01) ذیابیطس="" کے="" جانوروں="" میں="" پلازما="" tac="" کی="" سطح="" کو="" ذیابیطس="" کے="" گروپ="" (تصویر="" 1b)="" کے="" مقابلے="" میں="">

Tropisetron نے SIRT1 میں اضافہ کیا اور FOXO3a اور NF-κB جین ایکسپریشنز میں کمی کی جین ایکسپریشنز کی جانچ ریئل ٹائم پی سی آر کے ذریعے کی گئی جس نے گروپوں کے درمیان فرق کے لیے اہم ثبوت فراہم کیا۔ اس کے مطابق، ذیابیطس کا تعلق SIRT1 جین اظہار (P < 0)="" میں="" نمایاں="" کمی="" (0.65="" ±="" 0۔{9}}8)="" سے="" تھا۔{16}}1۔="" )="" اور="" نمایاں="" اضافہ="" (p="">< 0۔{24}}01)="" foxo3a="" (1.98="" ±="" 0۔{33}}8)="" اور="" nf-κb="" (1.71)="" میں="" ±="" 0.14)="" کنٹرول="" گروپ="" کے="" مقابلے="" میں="" جین="" کا="" اظہار۔="" tropisetron="" کے="" علاج="" سے="" sirt1="" (0.88="" ±="" 0.3)="" میں="" اضافہ="" ہوا="" اور="" foxo3a="" (1.53="" ±="" 0.08)="" (p=""><0.05) اور="" nf-κb="" (1.27="" ±="" 0.03)="" (p=""><0.01) mrna="" کی="" سطح="" میں="" نمایاں="" طور="" پر="" کمی="" واقع="" ہوئی="" ہے۔="" 2a–c)۔="" اسی="" طرح="" کے="" نتائج="" ان="" جانوروں="" میں="" فراہم="" کیے="" گئے="" جن="" کا="" علاج="" معیاری="" دوائی="" گلیبین="" کلیمائیڈ="" سے="" کیا="">

Tropisetron نے FOXO3a اور claudin-1 پروٹین کے اظہار میں کمی کی۔FOXO3a (کل اور فاسفوریلیٹڈ) اور کلاڈن- 1 پروٹین ایکسپریشن کا جائزہ لینے کے لیے ٹراپیسٹرون اور گلیبین کلیمائڈ کے علاج کے بعد، ویسٹرن بلوٹنگ کا استعمال کیا گیاگردہمختلف گروپوں کے. ڈیٹا کا تجزیہ فاسفوریلیٹڈ FOXO3a/کل FOXO3a پروٹین کے تناسب (4.6 ± 0.17) اور کلاڈین-1 (3۔{9}}2 ± 0.16 میں نمایاں اضافہ ظاہر کرتا ہے۔ ) ذیابیطس کے گروپ میں پروٹین کی سطح کنٹرول کے مقابلے میں (P < 0۔{22}}01)۔="" tropisetron="" کی="" انتظامیہ="" نے="" فاسفوریلیٹڈ="" foxo3a/="" کل="" foxo3a="" پروٹین="" کے="" تناسب="" (2.14="" ±="" 0.31)="" اور="" کلاڈین-1="" (2.4="" ±="" 0.12)="" کی="" سطحوں="" میں="" واضح="" طور="" پر="" کمی="" کی="">گردہذیابیطس کے چوہوں کی (P < {{0}}۔{8}}1)۔="" گلیبین="" کلیمائڈ="" کے="" علاج="" نے="" فاسفوریلیٹڈ="" foxo3a/کل="" foxo3a="" پروٹین="" کے="" تناسب="" (2.57="" ±="" 0.5)="" (p="">< 0.001)="" اور="" کلاڈین-1="" (2.2="" ±="" 0.11)="" (p=""><0.5) دونوں="" کو="" نمایاں="" طور="" پر="" کم="" کیا۔="" )="" stz="" سے="" متاثرہ="" ذیابیطس="" چوہوں="" میں="" پروٹین="" کی="" سطح="" (تصویر="">

بحث موجودہ مطالعے کے نتائج درج ذیل حصوں میں دیے گئے ہیں: STZ-حوصلہ افزائی T1DM کا واحد انجیکشن شدید ہائپرگلیسیمیا، وزن میں کمی، اورگردہdysfunction، جو کنٹرول گروپ کے مقابلے میں GFR کے انڈیکس کے طور پر پلازما کریٹینائن اور یوریا میں نمایاں اضافہ اور کریٹینائن کلیئرنس میں واضح کمی سے ظاہر ہوتا ہے۔ STZ نے میں آکسیڈیٹیو توازن کو متاثر کیا۔گردہٹشو جو ایم ڈی اے میں اضافہ اور ٹی اے سی مواد کو کم کرکے ثابت ہوا تھا۔ مزید مالیکیولر تجزیہ سے پتہ چلتا ہے کہ ذیابیطس نے SIRT1 mRNA میں کمی کی اور NF-κB mRNA کے ساتھ ساتھ فاسفوریلیٹڈ FOXO3a/کل FOXO3a پروٹین کا تناسب اور کلوڈین-1 پروٹین کی سطح میں اضافہ کیا۔گردہنر چوہوں کی یوریا، کریٹینائن، کریٹینائن کی نمایاں بہتری

کلیئرنس، نیز SIRT1 mRNA، NF-κB mRNA، فاسفوریلیٹڈ FOXO3a/کل FOXO3a پروٹین کا تناسب، اور کلاؤڈین-1 پروٹین، جو کہ کنٹرول جانوروں کی طرح ہے، ٹراپیسٹرون پلس ذیابیطس گروپ میں دیکھا گیا۔ DN جس میں کئی خصوصیات ہیں جیسے میں رکاوٹگردوںساختی اور فعال سالمیت، میں اضافہگردہسائز، نیز گلومیرولر اور نلی نما ہائپر ٹرافی، اختتامی مرحلے کی ایک اہم وجہ ہے۔گردوں کی بیماری(Singh et al. 2018؛ Yaribeygi et al. 2018)۔ پروگریسو البومینوریا، GFR میں کمی، اور بلڈ پریشر کی بلندی ذیابیطس کے مریضوں میں دیکھی جانے والی سب سے واضح فعال علامات ہیں (الزہرانی ایٹ ال۔ 2020)۔ ڈی این کا سب سے قدیم نشان البومینوریا ہے جو شروع کرنے میں مرکزی خصوصیت کے طور پر ترقی پسند گلوومیرولر نقصان کی وجہ سے ہوتا ہے۔گردے کی چوٹ(Elsherbiny et al. 2018)۔ ہمارے نتائج سے مطابقت رکھتے ہوئے، پچھلے مطالعات نے اس بات پر روشنی ڈالی ہے کہ ڈی این کے ساتھ سیرم کریٹینائن اور یوریا میں اضافہ ہوتا ہے جو کہ اس کی خرابی کی تجویز کرتا ہے۔گردوں کے ٹشو(Sharma et al. 2006؛ Tang et al. 2018)۔

جمع ہونے والے شواہد اس بات کی نشاندہی کرتے ہیں کہ ہائپرگلیسیمیا کی وجہ سے آزاد ریڈیکلز کا پیدا ہونا ذیابیطس کے مائکرو واسکولر پیچیدگیوں بشمول DN کے آغاز اور بڑھنے کا ایک اہم واقعہ ہے۔ ROS کی ضرورت سے زیادہ پیداوار میکرو مالیکیولز، خلیات اور بافتوں کو متاثر کر کے آکسیڈیٹیو نقصان میں حصہ ڈالتی ہے اور اس کے نتیجے میں ناقابل واپسی توہین یا فعلی خلل پڑتا ہے (Kritoshi et al. 2003)۔

ایم ڈی اے لپڈ پیرو آکسیڈیشن کے مارکر کے طور پر جھلی کے غیر سیر شدہ فیٹی ایسڈز پر آزاد ریڈیکلز کے حملے سے شروع ہوتا ہے، جس نے ذیابیطس کی پیچیدگیوں میں حصہ ڈالا ہے (Pieme et al. 2017)۔ TAC کے ذریعہ کل اینٹی آکسیڈینٹ کی حیثیت کا اندازہ لگایا گیا تھا جو بہت سے پیتھولوجیکل حالات میں آکسیڈیٹیو تناؤ کا تعین کرنے کے لئے ایک بائیو مارکر ہے۔ اس طرح، ذیابیطس کے مریضوں میں ایم ڈی اے اور ٹی اے سی کی خرابیاں آزاد ریڈیکلز کی پیداوار کی عکاسی کرتی ہیں جو آکسیڈیٹیو تناؤ کی کیفیت پیدا کرتی ہیں (Peluso and Raguzzini 2016)۔ مستقل طور پر، اس مطالعہ کے نتائج نے ذیابیطس کے چوہے میں ایم ڈی اے میں اضافہ اور ٹی اے سی کی سطح میں کمی کو ظاہر کیا۔گردہ. اس حقیقت کو مدنظر رکھتے ہوئے ، آکسیڈیٹیو تناؤ کی کشندگی نے ذیابیطس کی پیچیدگیوں کو کم کیا۔گردوں کی چوٹ(الزہرانی وغیرہ۔ 2020؛ برزگر-فلاح وغیرہ۔ 2015)۔

Tropisetron، ایک 5-اینٹی آکسیڈینٹ اور سوزش مخالف سرگرمیوں کے ساتھ HT3 مخالف کے طور پر، کئی پیتھولوجیکل حالات جیسے ذیابیطس میں حفاظتی اثرات دکھاتا ہے (Barzegar-Fallah et al. 2015; Rashidi and Bazi 2020)۔ ٹراپیسٹرون کا نیفرو پروٹیکٹو اثر پہلے جانوروں کے تجربات میں بیان کیا گیا تھا۔ اس نقطہ نظر کے اندر، ٹراپیسٹرون نے خون میں گلوکوز میں اضافے کو روک کر ایک 5-HT3 رسیپٹر سے آزاد طریقے سے DN کو بہتر بنایا،گردوںMDA، CAT، SOD، Gpx، اور TNF- کی سطح اور پیشاب کی سائٹوکائن کے اخراج میں کمی اور البومینوریا (Barzegar-Fallah et al. 2015)۔

اس مسئلے کے مطابق، موجودہ تحقیقات میں، یہ ظاہر کرنے کے لیے شواہد فراہم کیے گئے ہیں کہ ٹراپیسٹرون نے ہائپرگلیسیمیا، وزن میں کمی، اور آکسیڈیٹیو تناؤ کی کیفیت کو ظاہر کیا ہے جو ایم ڈی اے میں کمی اور ٹی اے سی کے مواد میں اضافہ اور بہتری سے ظاہر ہوتا ہے۔گردہdysfunction (پلازما یوریا اور کریٹینائن میں نمایاں کمی)۔ پچھلے مطالعات (Amini et al. 2020) کے مطابق Glibenclamide کو معیاری دوا کے طور پر لاگو کیا گیا تھا۔ دلچسپ بات یہ ہے کہ گلیبین کلیمائڈ کے زیر انتظام اور ٹراپیسٹرون کے زیر انتظام گروپوں میں مذکورہ پیرامیٹرز میں کوئی خاص فرق نہیں دیکھا گیا۔گردہذیابیطس چوہوں کی. تاہم، DN میں tropisetron کے حفاظتی اثر کے پیچھے عین مطابق میکانزم ابھی تک نامعلوم ہیں۔ ہمارے بہترین علم کے مطابق، یہ ظاہر کرنے والا پہلا مطالعہ ہے کہ ٹراپیسٹرون نے SIRT1 جین کے اظہار میں اضافہ کیا اور فاسفوریلیٹڈ FOXO3a/کل FOXO3a پروٹین کے تناسب، NF-κB، اور کلاڈین- 1 پروٹین کی سطح کو کم کیا۔گردہذیابیطس والے جانوروں کی.

SIRT1 ایک کلاس III پروٹین ڈیسیٹیلیز ہے جو کئی اہم پروٹینوں کو فعال کرکے دباؤ والے حالات میں خلیات کی بقا میں شامل ہوتا ہے۔ یہ ROS جنریشن جیسے کہ NF-κB اور foxo ٹرانسکرپشن عوامل (Brunet et al. 2004; Sengupta et al. 2011) کے جواب میں جین کے اظہار کو ماڈیول کرنے کے لیے ایک ضروری عنصر ہے۔ فاکسو فیملی میں، FOXO3a کو آکسیڈیٹیو تناؤ کے دوران SOD اور CAT سمیت متعدد اینٹی آکسیڈینٹس کو بڑھا کر ایک اہم کردار سمجھا جاتا ہے۔

(Hasegawa et al. 2008؛ Kops et al. 2002). خاص طور پر، FOXO3a کے غیر فعال ہونے کا تعلق ہائپرگلیسیمیا کے حالات کے دوران CAT-حوصلہ افزائی آکسیڈیٹیو تناؤ کی کمی سے کیا گیا ہے (Wang et al. 2017b)۔ SIRT1 deacetylation کے ذریعے FOXO3a کی ایکٹیویشن کا انتظام کرتا ہے اور براہ راست یا بالواسطہ طور پر آکسیڈیٹیو تناؤ کے لیے سیل کے ردعمل کو ماڈیول کرتا ہے (Hori et al. 2013)۔ یہ اعلان کیا گیا تھا کہ SIRT1 اور FOXO3 ریگولیشن کے درمیان MnSODmediated antioxidant دفاعی نظام (Tanaka et al. 2009; Zhang et al. 2015) کے درمیان ایک فعال ایسوسی ایشن موجود ہے۔ اس کے مطابق، Zhang et al. (2015) نے یہ ظاہر کیا کہ icariin نے MnSOD اظہار کو اپ گریجولیشن کے ذریعے آنتوں کی اسکیمیا/ریپرفیوژن ثالثی SIRT1/FOXO3 سگنلنگ پاتھ وے کی وجہ سے پھیپھڑوں کی شدید چوٹ کی حفاظت کی۔ پچھلی رپورٹس نے یہ بھی اشارہ کیا ہے کہ SIRT1 کی اپ گریجشن سسپلٹین سے متاثرہ نیفروپیتھی کو ختم کرتی ہے،گردوںاسکیمک / ریپرفیوژن انجری، اور ذیابیطس نیفروپیتھی (فنک اور شنیلمین 2013؛ گو ایٹ ال۔ 2016؛ کم ایٹ ال۔ 2011)۔ خاص طور پر، SIRT1 کی ذیابیطس کی حوصلہ افزائی میں کمی جو پیتھوفزیولوجیکل تبدیلیوں کو چلاتی ہے۔گردوںزہریلا (Wang et al. 2017b)۔ Hasegawa et al. (2013) نے یہ ظاہر کیا کہ قربت والے نلیوں میں SIRT1 میں کمی نے DN کی شروعات کو متحرک کیا اور اس کے نتیجے میں البومینوریا پیدا ہوا۔ لائن میں، اس تحقیق کے نتائج میں کمی آئیگردوںذیابیطس کے گروپ میں SIRT1 جین کا اظہار۔ لہذا، SIRT1 کی ایکٹیویشن کی مزاحمت کی وجہ سےگردوںنلی نما خلیات سے سیلولر تناؤ (Kume et al. 2013)۔ مجموعی طور پر، SIRT1 ایکٹیویٹرز نے ذیابیطس کے علاج کے لیے دلچسپ امیدواروں کے طور پر قابل ذکر توجہ حاصل کی ہے (Song et al. 2018)

مزید یہ کہ موجودہ تحقیق نے ذیابیطس کے مریضوں میں اشتعال انگیز ردعمل بھی ظاہر کیا۔گردےجیسا کہ NF-κB بلندی کا ثبوت ہے۔ یہ مدافعتی ردعمل اور سوزش سے منسلک ایک لازمی ریگولیٹری عنصر ہے (Hayden and Ghosh 2012)۔ اس تحقیق کے نتائج سے مطابقت رکھتے ہوئے، متعدد مطالعات میں بتایا گیا ہے کہ NF-κB کو چالو کرنا اور اس کی جوہری نقل مکانی تجرباتی اور انسانی DN دونوں میں بڑھ جاتی ہے (Alzahrani et al. 2020; Kuhad and Chopra 2009)۔ اس کے علاوہ، SIRT1 کی بلندی NF-κB کو غیر فعال کرنے میں معاون ہے تاکہ ذیابیطس میں چوٹ سے پوڈوسائٹس کو بچایا جا سکے۔گردہ(Liu et al. 2014)۔ دلچسپ بات یہ ہے کہ، SIRT1 اوور ایکسپریشن ہائپرگلیسیمک چوہوں میں سخت اپیتھیلیل جنکشن، یعنی کلاؤڈین-1 میں پروٹین کے اظہار کو کم کرتا ہے، جو پروٹینوریا کی سطح کے ساتھ تعلق رکھتا ہے۔ پوڈو سائیٹس میں چالو کلاڈن-1 گلوومیرولر بیریئر فنکشن کو Synaptopodin یا podocin اظہار کو کم کرنے کے ذریعے بگاڑتا ہے جس کے نتیجے میں البومینوریا ہوتا ہے (Hasegawa et al. 2013)۔ ان نتائج کو ذیابیطس کے چوہوں کے گردوں میں بھی منظور کیا گیا تھا۔

یہاں، پہلی بار یہ ظاہر کیا گیا کہ ذیابیطس کے حالات میں، ٹراپیسٹرون انتظامیہ نے SIRT1 جین کے اظہار کو بڑھایا اور ساتھ ہی فاسفوریلیٹڈ FOXO3a/کل FOXO3a پروٹین کے تناسب، NF-κB، اور claudin-1 پروٹین کی سطح کو کم کیا۔ لہذا، یہ بہت منطقی ہے کہ SIRT1 میں اس طرح کی سرگرمی اور اس کے نتیجے میں فاسفوریلیٹڈ FOXO3a/کل FOXO3a پروٹین کے تناسب میں کمی، NF-κB، اور claudin-1، جزوی طور پر، بہتری کے لیے ذمہ دار ہو سکتی ہے۔ ذیابیطسگردے کی تقریب. محققین نے اطلاع دی کہ DN میں ٹراپیسٹرون کے حفاظتی اثرات 5-HT3 ریسیپٹر سے آزاد دکھائی دیتے ہیں کیونکہ گرینیسیٹرون، ایک اور منتخب 5-HT3 ریسیپٹر بلاکر، DN کی حفاظت میں ناکام رہا۔ یہ اعلان کیا گیا تھا کہ ٹراپیسٹرون کے اینٹی آکسیڈیٹیو اور اینٹی سوزش میکانزم کا اس میں اہم کردار ہوسکتا ہے۔گردوں کے ٹشوذیابیطس میں تحفظ (Barzegar-Fallah et al. 2015)۔ حال ہی میں، ہماری لیبارٹری نے مشاہدہ کیا کہ tropisetron کے علاج سے انسولین کے اخراج میں اضافہ ہوا اور GLUT2 جین کے اظہار کے ساتھ ساتھ UCP2/ZnT8 پاتھ وے (Naderi et al. 2020) کو بلند کرکے خون میں گلوکوز کی سطح میں کمی آئی۔ Tropisetron ایک بلاکر کے طور پر 5-HT3 ریسیپٹر نے لبلبے کی انسولین پیدا کرنے والی بیٹا سیل لائن سے انسولین کے اخراج میں اضافہ کیا جس کے نتیجے میں ہائپوگلیسیمیا ہوا (Heimes et al. 2009)۔ لہذا، ایسا لگتا ہے کہ انسولین کی رہائی اور اس کے نتیجے میں گلوکوز ہومیوسٹاسس کو ماڈیول کرنے میں اینٹی آکسیڈیٹیو اور اینٹی سوزش ردعمل شامل ہوسکتا ہے۔گردہتحفظ

موجودہ نتائج کے مطابق، tropisetron نے چوہوں میں سنسنی میں SIRT1 جین کے اظہار کو بڑھا کر آکسیڈیٹیو نقصان کو پلٹا دیا (Mirshafa et al. 2020)۔ اس کے علاوہ، جگر کی چوٹ، TNF-، اور IL-6 پروٹین کی سطح ذیابیطس کے چوہوں کے جگر میں ٹراپیسیٹرون کے ساتھ علاج کے بعد دیکھی گئی (امینی ایٹ ال۔ 2020؛ غلیزادہ-غلیح عزیز ایٹ ال۔ 2019)۔ اس کے علاوہ، موجودہ تحقیق میں، tropisetron نے ایک معیاری دوا، glibenclamide کے لیے اسی طرح کا ردعمل ظاہر کیا۔ اس کے مطابق، glibenclamide کی نمائش نے SIRT1 میں اضافہ کیا اور ذیابیطس کے مریضوں میں فاسفوریلیٹڈ FOXO3a/کل FOXO3a پروٹین کے تناسب، NF-κB، اور claudin-1 کی سطح میں کمی واقع ہوئی۔گردےموجودہ مطالعہ میں. Glibenclamide ایک قائم شدہ دوا ہے جو ATP-sensitive K پلس چینلز کو روک کر ذیابیطس کے مریضوں کے علاج میں بڑے پیمانے پر استعمال ہوتی رہی ہے۔ چونکہ DN (Akbar et al. 2013; Elmalí et al. 2004; Nakamura et al. 2000) میں glibenclamide اثر کے حوالے سے کچھ متضاد نتائج سامنے آئے ہیں، شاید خوراک یا علاج کی مدت کی وجہ سے، اس واقعہ نے ایک متعارف کرانے کی ترغیب فراہم کی۔ ذیابیطس کے مریضوں کے لیے ایک محفوظ اور موثر ایجنٹ کے طور پر کم ضمنی اثرات کے ساتھ نئی دوا

مجموعی طور پر، tropisetron مؤثر طریقے سے بہتر بناتا ہےگردوں کی تقریبDN میں شاید SIRT1، فاسفوریلیٹڈ FOXO3a/کل FOXO3a پروٹین کے تناسب، NF-κB، اور claudin-1 کے اظہار کو تبدیل کر کے۔ اس مطالعہ میں اس موضوع کی حمایت میں کچھ حدود تھیں۔ مثال کے طور پر، مورفولوجیکل اسٹڈیز کو موجودہ تحقیقات کو درست ثابت کرنے کے لیے مزید شواہد فراہم کرنے کی کوشش کرنی چاہیے۔ اس کے علاوہ، محققین نے عین مطابق سگنلنگ پاتھ وے میکانزم کی توثیق کرنے کے لیے مالیکیول انحیبیٹرز کا استعمال نہیں کیا۔

نتیجہ

آخر میں، اس مطالعہ کے نتائج نے STZ-حوصلہ افزائی T1DM میں tropisetron کے نیفرو پروٹیکٹو اثر کو ظاہر کیا۔ اس تحقیقات کے قابل ذکر نتائج نے اشارہ کیا کہ ٹراپیسٹرون کے نیفرو پروٹیکٹو اثر میں ممکنہ طور پر SIRT1، FOXO3a، NF-κB، اور claudin-1 کے اظہار میں تبدیلیاں شامل ہیں۔ یہ اعداد و شمار اس علاقے میں مزید تحقیق کے لیے محرک ہوسکتے ہیں۔