ڈائامین آکسیڈیس ناک آؤٹ چوہے زبانی طور پر یا ذیلی طور پر زیر انتظام ہسٹامائن کے لئے انتہائی حساس نہیں ہیں

خلاصہ

1. مقصد

exogenous histamine کے غیر فعال ہونے میں endogenous diamine oxidase (DAO) کی شراکت کا جائزہ لینے کے لیے، ہسٹامین کی بڑھتی ہوئی حساسیت کے ساتھ ماؤس سٹرین تلاش کرنے کے لیے، اور ہسٹامائن چیلنج ماڈل میں rhDAO کی افادیت کو جانچنے کے لیے۔

2. طریقے

ڈائمین آکسیڈیز ناک آؤٹ (KO) چوہوں کو -adrenergic blocker propranolol کے ساتھ مل کر زبانی اور subcutaneously ہسٹامائن کے ساتھ چیلنج کیا گیا، دو histamine-N-methyltransferase (HNMT) inhibitors methoprene اور tacrine کے ساتھ، فولک ایسڈ اور مائیکل ایسڈ کے ساتھ۔ دوبارہ پیدا ہونے والے انسانی ڈی اے او کے ساتھ۔ بنیادی جسمانی درجہ حرارت کو ایک ذیلی طور پر لگائے گئے مائکروچپ کا استعمال کرتے ہوئے ماپا گیا تھا اور ہسٹامائن پلازما کی سطح کو یکساں وقت کے ساتھ حل شدہ فلوروسینس پرکھ کا استعمال کرتے ہوئے مقدار میں طے کیا گیا تھا۔

3. نتائج

بنیادی جسمانی درجہ حرارت اور پلازما ہسٹامائن کی سطح وائلڈ ٹائپ (WT) اور DAO KO چوہوں کے درمیان زبانی اور subcutaneous histamine چیلنج کے بعد شدید گردے کی چوٹ یا HNMT inhibitors کی انتظامیہ کے بغیر نمایاں طور پر مختلف نہیں تھی۔ ریکومبیننٹ انسانی DAO کے ساتھ علاج نے بنیادی جسمانی درجہ حرارت میں کمی کے لیے منحنی خطوط (AUC) کے نیچے 63 فیصد (p=0.002) اور کلینکل سکور میں 88 فیصد (p) کی کمی کی۔<0.001). The AUC of the histamine concentration was reduced by 81%.

4. نتائج

خارجی ہسٹامین کا غیر فعال ہونا انزیمیٹک انحطاط اور گردے کی فلٹریشن کی وجہ سے نہیں ہوتا ہے۔ ریکومبیننٹ ہیومن ڈی اے او کے ساتھ علاج نے ہسٹامین سے متاثرہ بنیادی جسم کے درجہ حرارت میں کمی اور ہسٹامائن کی تعداد میں کمی کی اور شدید طبی علامات کی نشوونما کو روکا۔

مطلوبہ الفاظ

امائن آکسیڈیز (تانبے پر مشتمل) · ہسٹامین این میتھل ٹرانسفریز · شدید گردے کی چوٹ · میٹابولزم · ٹیکرائن · میٹوپرین · جسمانی درجہ حرارت

Cistanche سپلیمنٹ خریدنے کے لیے یہاں کلک کریں۔

تعارف

انسانوں میں تمام ہسٹامین کا 95 فیصد سے زیادہ ماسٹ سیلز اور بیسوفیلز میں ذخیرہ ہوتا ہے۔ بہت سے ستنداریوں کے لیے بھی ایسا ہی ہوتا ہے۔ انسانوں میں ماسٹ سیل کی کثافت معدے، جلد اور پھیپھڑوں میں سب سے زیادہ ہوتی ہے [1]، اور نتیجتاً، یہ اعضاء مستول سیل ایکٹیویشن کی واضح شمولیت کے ساتھ بیماریوں میں ہسٹامین سے متاثرہ علامات ظاہر کرتے ہیں۔ شدید تنزلی کے بعد ہسٹامین کی مقامی انٹرسٹیشل ارتکاز 10–1000 µMs تک پہنچ سکتی ہے [2, 3، آن لائن وسائل دیکھیں]۔ انسانوں میں، کتوں اور خنزیروں کی طرح، عام پلازما ہسٹامائن کی مقدار 1 ng/ml (9 nM) سے کم ہوتی ہے اور علامات چند نینوگرام فی ملی لیٹر [4–7] پر ظاہر ہونا شروع ہوتی ہیں۔ بڑھتی ہوئی دل کی دھڑکن کے ساتھ اہم ہائپوٹینشن کی پیمائش 5 ng/ml سے کی جا سکتی ہے اور جب سطح 10 ng/ml سے بڑھ جاتی ہے تو برونکوسپسم، کارڈیک اریتھمیا، شدید ہائپوٹینشن، اور کورونری سپاسم کی نشوونما جان لیوا ملٹی سسٹم dysfunction کا باعث بن سکتی ہے [8, 9]۔ ہسٹامائن نہ صرف واسوڈیلیشن، عروقی پارگمیتا میں اضافہ، ہائپوکسیا، اور عروقی ورم کی نشوونما میں ملوث ہے بلکہ مدافعتی اثر کرنے والے خلیوں کی بھرتی، پختگی، اور ایکٹیویشن کے ذریعے انکولی مدافعتی نظام کو متاثر کرنے والی سوزش کی حامی شمولیت کو بھی ظاہر کرتا ہے۔ مزید برآں، یہ ڈینڈریٹک خلیات، قدرتی قاتل خلیات، اور گرینولوسائٹس [10، 11] کے ساتھ بات چیت کرکے پیدائشی مدافعتی نظام میں ایک کردار ادا کرتا ہے۔

چوہوں اور چوہوں میں بیس لائن ہسٹامائن کی تعداد 20 اور 100 ng/ml کے درمیان ہوتی ہے جب قابل اعتماد طریقوں سے ماپا جاتا ہے اور اس وجہ سے انسانوں میں پائے جانے والے سے کئی گنا زیادہ ہوتا ہے [6, 7]۔ یہ واضح نہیں ہے کہ آیا ہسٹامین کی یہ اعلی سطحیں کوئی جسمانی کردار ادا کرتی ہیں۔ چوہا 3000–4000 اور 400–500 mg/kg کے مختلف ماؤس سٹرین میں 50 فیصد (LD50) کی مہلک خوراک کے ساتھ ہسٹامائن کے خلاف بدنامی کے خلاف مزاحم ہیں، بالترتیب زبانی اور نس کے استعمال کے بعد [12، 13]۔ 20 جی ماؤس میں 400 ملی گرام/کلوگرام کے بولس ایڈمنسٹریشن کے بعد چوٹی پلازما ہسٹامین کا ارتکاز تقریباً 8 ملی گرام/ملی لیٹر ہو گا جس کا پلازما حجم 1 ملی لیٹر ہے۔ جب انسانوں میں اینفیلیکسس کو ایک کنٹرول شدہ تتییا کے ڈنک کے چیلنج کے ذریعے آمادہ کیا گیا تو، 140 این جی/ ملی لیٹر کی ہسٹامین کی تعداد شدید جان لیوا ہائپوٹینشن سے وابستہ تھی [14]۔ ہسٹامین میٹابولائز اور غیر فعال کیسے ہوتا ہے؟

ہسٹامین 13 فیصد کا مطلب ہے کہ پلازما پروٹین بائنڈنگ کرتا ہے اور گردوں میں آزادانہ طور پر فلٹر ہوتا ہے [15]۔ گلوومیرولر فلٹریشن ریٹ (GFR) نظریاتی طور پر صحت مند رضاکاروں میں پائے جانے والے 3-4 منٹ کی نصف زندگی میں 15-20 فیصد حصہ ڈال سکتا ہے [5، آن لائن وسائل دیکھیں]۔ 100 ملی لیٹر/منٹ کے عام جی ایف آر اور 3000 ملی لیٹر کے پلازما والیوم پر ہسٹامین کی نصف زندگی 20 منٹ ہوگی۔ چوہوں میں، 10 µl/min/g کے عام GFR کے نتیجے میں ہسٹامائن کی نصف زندگی 3 منٹ ہوگی [16، آن لائن وسائل دیکھیں]۔ بہر حال، ہسٹامائن گردے میں ایک اعلی نکالنے کی شرح کو ظاہر کرتا ہے، جی ایف آر کی بنیاد پر شرح سے زیادہ ہے، اور اس نکالنے کو آرگینک کیٹیشن ٹرانسپورٹر 2 (OCT2) کے ذریعے قریبی نلی نما خلیات میں اٹھانے اور دوبارہ جذب کرنے سے منسوب کیا جاتا ہے، جس کے بعد انزیمیٹک غیر فعال ہونا [17، دیکھیں۔ نیچے]۔ انسانوں میں، 1 فیصد سے بھی کم انجکشن شدہ تابکار ہسٹامائن پہلے 6 گھنٹے کے اندر پیشاب میں پایا گیا تھا [18]۔ انسانوں میں ہسٹامین کے اخراج کی کم شرح، جو کتوں اور بلیوں میں بھی دیکھی جاتی ہے، دوسروں نے اس کی تصدیق کی ہے [19]۔ چوہوں اور چوہوں کے بافتوں میں، 50 فیصد سے زیادہ انجکشن شدہ ریڈیو ایکٹیویٹی گردوں میں پائی جاتی ہے، اور 2 فیصد سے بھی کم ہسٹامائن کے طور پر 30 منٹ کے اندر اندر داخل ہونے کے بعد [20]۔ چوہوں میں ہائی ڈوز ہسٹامائن انتظامیہ کے بعد گردے بھی سب سے زیادہ ریڈیو ایکٹیویٹی والے عضو تھے [21]۔ OCT2 ٹرانسپورٹر کا انسانی اور چوہا گردوں میں بہت زیادہ اظہار کیا جاتا ہے اور یہ پلازما کے ڈبے سے ہسٹامین نکالنے اور پرائمری پیشاب فلٹریٹ میں ہسٹامائن کو قربت والے نلی نما خلیوں میں دوبارہ جذب کرنے کے لیے ذمہ دار ہو سکتا ہے [22، نیچے دیکھیں]۔

ماسٹ سیلز یا پلازما سے اینڈوتھیلیل سیلز سے دور دوسرے کمپارٹمنٹس میں رہائی کے بعد بیچوالا سیال سے ایکسٹرا سیلولر ہسٹامائن کی تیز رفتار نقل و حمل ہسٹامین کو غیر فعال کرنے کا ایک اور امکان ہے۔ یہ اینڈوتھیلیل نائٹرک آکسائڈ سنتھیس (NOS) سگنلنگ اور ہسٹامائن ریسیپٹرز [23-25] کے پابند ہونے کے ذریعے ثالثی شدید ہائپوٹینشن اور عروقی رساو کی شمولیت کو روک سکتا ہے۔ تاہم، سیسٹیمیٹک گردش سے اینڈوتھیلیل یا پیرنچیمل خلیوں میں ہسٹامائن کی نقل و حمل کی شرحوں کا مطالعہ کرنے والے ویوو جانوروں کا کوئی ڈیٹا دستیاب نہیں ہے۔ کئی ان وٹرو مطالعات میں، ہسٹامائن کو کم وابستگی، اعلیٰ صلاحیت والے OCT2، اور OCT3 [22، 26، 27] کا استعمال کرتے ہوئے دو طرفہ طور پر منتقل کیا جاتا ہے۔ ہسٹامین چوہے OCT2 اور OCT3 ٹرانسپورٹر کے لیے ایک بہترین سبسٹریٹ ہے، جو کہ مساوی انسانی OCT پروٹین کے مقابلے میں اعلیٰ نقل و حمل کی صلاحیتوں کو ظاہر کرتا ہے [26]۔

Herba Cistanche

جب چوہوں میں تابکار ہسٹامین کی کم ارتکاز کا استعمال کیا جاتا ہے تو، میتھیلیشن بذریعہ ہسٹامین-این-میتھل ٹرانسفریز (HNMT) غیر فعال ہونے کا بڑا راستہ معلوم ہوتا ہے۔ ہسٹامائن کی زیادہ مقدار کے ساتھ چیلنج کرنے والے چوہوں، تاہم، میٹابولزم کو امیڈازول ایسٹک ایسڈ (IMAA) اور رائبوسائیڈ کنجوگیٹس میں منتقل کرتے ہیں، جس میں صرف تھوڑی مقدار میں میتھلیٹیڈ ڈیریویٹوز کا پتہ چلا ہے [28-30]۔ HNMT ناک آؤٹ چوہوں میں بیس لائن سیرم ہسٹامائن کی تعداد میں پانچ گنا اضافہ ان اعداد و شمار کی حمایت کرتا ہے [31]۔ امیڈازولاسیٹک ایسڈ ہسٹامین آکسیڈیشن کے ذریعے ڈائمین آکسیڈیز (DAO) کے ذریعے imidazole acetaldehyde کو جاری کرتا ہے، جو بنیادی طور پر جگر میں IMAA اور riboside مشتقات میں تبدیل ہوتا ہے۔ DAO کے ذریعے ہسٹامائن کا آکسیکرن چوہوں میں زبانی چیلنج کے بعد ہسٹامائن کیٹابولزم میں زیادہ کردار ادا کرتا دکھائی دیتا ہے، جو کہ چوہوں میں DAO اظہار صرف معدے میں زیادہ ہوتا ہے اس بات پر حیرت کی بات نہیں ہے [30]۔ جب زبانی ہسٹامین چیلنج انسانوں میں DAO کے ذریعے آکسیڈیٹیو ڈیمینیشن انجام دیا جاتا ہے تو IMAA کے ساتھ مرکزی پیشاب کی میٹابولائٹ کے طور پر غالب کیٹابولک راستہ ہوتا ہے [18]۔

Diamine oxidase ایک تانبے پر مشتمل amine oxidase ہے اور دو خامروں میں سے ایک ہے جو ہسٹامین کو غیر فعال کرنے کی صلاحیت رکھتا ہے [32]۔ منتخب ٹشوز میں، بنیادی طور پر چھوٹی آنت اور گردے کے قربت والے نلی نما خلیات، DAO غیر متعین انٹرا سیلولر گرینولر ڈھانچے میں واقع ہے اور ایکسٹرا سیلولر طور پر ہیپران سلفیٹ پروٹیوگلائکنز سے منسلک ہے، جبکہ HNMT صرف سائٹوپلازم میں موجود ہے [33, 34]۔ HNMT کا اظہار پورے جسم میں وسیع ہے، مرکزی اعصابی نظام، مثانے، دل، گردے، جگر، پھیپھڑوں اور ایڈیپوز ٹشو میں اعلی سطح کے ساتھ۔

امینوگوانائڈائن کا استعمال کرتے ہوئے ڈی اے او کی روک تھام کے بعد، بھیڑوں نے ہسٹامین زہریلا ہونے کی وسیع طبی علامات ظاہر کیں جو کہ ہسٹامائن چیلنج کے بعد امینوگوانیڈائن پری ٹریٹمنٹ کے بغیر کنٹرول کے مقابلے میں ہیں [35]۔ خنزیروں میں اسی طرح کے تجربے کے نتیجے میں جانوروں میں شدید بیماری اور اموات ہوئیں جن کا پہلے سے امینوگوانائیڈائن کے ساتھ علاج کیا گیا تھا اور اس کے بعد زبانی ہسٹامین کے ساتھ چیلنج کیا گیا تھا [36]۔ DAO کی روک تھام کے ساتھ خنزیروں میں میڈین پلازما ہسٹامین کی تعداد میں 20-گنا اضافہ ہوا۔ امینوگوانائڈائن کے ساتھ چوہوں کے علاج کے بعد زبانی ہسٹامین چیلنج نے پیشاب کی IMAA میں اضافہ کیا اور ہسٹامائن کی حراستی کو تقریبا پانچ گنا کم کر دیا [37]۔ ان اعداد و شمار نے اشارہ کیا کہ DAO زبانی طور پر زیر انتظام ہسٹامائن کے انحطاط میں ایک اہم کردار ادا کرتا ہے۔

چوہوں میں، امینوگوانیڈائن کے علاج نے نس میں ہسٹامائن چیلنج [30] کے بعد آنت میں ہسٹامین کی تعداد میں مضبوطی سے اضافہ کیا۔ تاہم، aminoguanidine کوئی مخصوص DAO inhibitor نہیں ہے، لیکن NOS کے تینوں خامروں کو بھی روکتا ہے اور خون کے ہسٹامائن کی ٹشوز میں نقل و حمل کو روکتا دکھائی دیتا ہے [38، 39]۔ ہسٹامائن ریسیپٹر 2 مخالف، بوریامائڈ کی انتظامیہ نے چوہوں میں گردشی جھٹکے کے ماڈل میں اموات میں اضافہ کے ساتھ نقصان دہ اثرات ظاہر کیے۔ تاہم، ایک ہی وقت میں، یہ شائع کیا گیا تھا کہ burimamide ایک طاقتور DAO inhibitor ہے [40، 41]. کتوں میں، burimamide نے اوسطاً پلازما ہسٹامائن کی حراستی میں 17-گنا اضافہ کیا اور درمیانی شریان کے دباؤ میں زبردست کمی کی [42]۔ یہ اثر ممکنہ مستول سیل ایکٹیویشن کی وجہ سے سمجھا جاتا تھا۔

اسی طرح، HNMT کے کردار کا مطالعہ میتھیل ہسٹامائن کو بطور HNMT روکنے والے کے طور پر کیا گیا تھا، لیکن میتھیل-ہسٹامائن بھی DAO کے لیے ایک بہترین ذیلی جگہ ہے [43]۔ Amodiaquine اور quinacrine قوی HNMT inhibitors ہیں [44–46] لیکن DAO کو بھی روکتے ہیں جس میں تقریباً 500 nM [47، غیر مطبوعہ ڈیٹا] کے 50 فیصد (IC50) کی روک تھام کے ارتکاز کے ساتھ۔ لہذا، انابیٹرز کا استعمال کرتے ہوئے اخذ کردہ ڈیٹا، جو اکثر زیادہ ارتکاز میں استعمال ہوتے ہیں، احتیاط کے ساتھ تشریح کی جانی چاہیے، کیونکہ معلوم اور نامعلوم آف ٹارگٹ اثرات کا امکان ہے اور یہ vivo اسٹڈیز کی جسمانی مطابقت کو نمایاں طور پر بگاڑ سکتے ہیں۔

میٹابولک مطالعہ ہسٹامین کے انحطاط میں دو خامروں کی اہمیت کا کچھ اشارہ فراہم کر سکتا ہے، لیکن ہسٹامائن کے کیٹابولزم کو جسمانی یا پیتھو فزیولوجیکل اثرات سے الگ کیا جا سکتا ہے۔ کمپارٹمنٹل ہسٹامائن کی تعداد اہم ہوسکتی ہے اور میٹابولزم بہاو ہوسکتا ہے۔

لہذا، ہم نے DAO ناک آؤٹ (KO) ماؤس کو exogenous histamine کے انحطاط میں DAO کے کردار کا مطالعہ کرنے کے لیے استعمال کرنے کا فیصلہ کیا۔ دوسرا کلیدی مقصد ہسٹامائن کی بڑھتی ہوئی حساسیت کے ساتھ ماؤس ماڈل تیار کرنا تھا تاکہ ہمیں مختلف جینیاتی اتپریورتی تناؤ میں ہسٹامائن کے کردار کا بہتر مطالعہ کرنے اور ہسٹامائن چیلنج ماڈل میں دوبارہ پیدا ہونے والے انسانی ڈی اے او کی افادیت کو جانچنے کے قابل بنایا جا سکے۔

Cistanche کیپسول

مواد اور طریقے

جانوروں کے ماڈل

تجربات 10–18-ہفتوں پرانے C57BL6/J Aoc1tm1b(EUCOMM)Hmgu (DAO) KO چوہوں اور جنگلی قسم کے (WT) لیٹر میٹس کا استعمال کرتے ہوئے کیے گئے۔ Heterozygous برانن یورپی ماؤس اتپریورتی آرکائیو، میونخ، جرمنی کے ذریعہ فراہم کیے گئے تھے، اور سیوڈو پریگننٹ C57BL6/N چوہوں میں لگائے گئے تھے۔ Heterozygous C57BL6/J اولاد والے چوہوں کی تصدیق PCR (آن لائن وسائل دیکھیں) کا استعمال کرتے ہوئے کی گئی تھی اور مزید جانوروں کے پروٹوکول GZ 66 کے ذریعے بائیو میڈیکل ریسرچ، میڈیکل یونیورسٹی آف ویانا میں DAO KO چوہوں کی افزائش کے لیے استعمال کیا گیا تھا۔{42}}9/{ {14}WF/V/3b/2016۔ تمام جانوروں کے تجربات پروٹوکول GZ 66 کے مطابق کیے گئے۔{44}}9/0258- V/3b/2019۔ تجرباتی پروٹوکول کی منظوری آسٹریا کی وزارت تعلیم، سائنس اور تحقیق نے دی تھی۔ جانوروں کو 12:12 گھنٹے دن رات کے چکر میں 22 ڈگری پر پانی اور کھانے کی اشتہا کے ساتھ رکھا گیا تھا۔ غیر جارحانہ درجہ حرارت کی پیمائش کے لیے، ایک ٹرانسپونڈر (IPTT-300, BioMedic Data Systems Inc., USA) کو چھوٹے آئسو فلورین اینستھیزیا کا استعمال کرتے ہوئے تجربے سے 2 ہفتے پہلے ذیلی طور پر لگایا گیا تھا۔ ٹرانسپونڈر ایک سیکنڈ کے اندر تین بار درجہ حرارت کی پیمائش کرتا ہے اور ان پیمائشوں کا اوسط ایک ریڈر کا استعمال کرتے ہوئے پنجرے کے باہر سے ریکارڈ کیا جاتا ہے۔ اس اوسط قدر کو پھر مزید حساب کے لیے استعمال کیا جاتا ہے۔ یہ subcutaneous ٹرانسپونڈر جانوروں کی ضرورت سے زیادہ ہیرا پھیری سے بچنے اور ملاشی کے درجہ حرارت کی تحقیقات کے بار بار داخل ہونے سے چوٹ کو روکنے کے لیے استعمال کیے جاتے ہیں [48]۔ چوہا سمیت کئی جانوروں کی انواع میں، ہسٹامائن انتظامیہ کو جسم کے درجہ حرارت کو کم کرنے کے لیے دکھایا گیا ہے اور اسے ہسٹامائن کے اثرات کے لیے جدید ترین ریڈ آؤٹ سمجھا جاتا ہے [49، 50]۔ مشاہداتی مدت کے دوران، طبی علامات کا تجزیہ ایک تجربہ کار ویٹرنریرین نے شائع شدہ انتہائی حساسیت کے اسکور [51] کے مطابق کیا تھا۔ اسکور 0 (کوئی علامات نہیں) سے لے کر 1 (سر اور ناک کو رگڑنا اور کھرچنا)، 2 (سانس کی شرح میں اضافہ اور/یا سرگرمی میں کمی، منہ اور آنکھوں کے گرد سوجن)، 3 (مزدوری سانس، دم کے گرد سائانوسس) اور منہ، گھرگھراہٹ) اور 4 (اچھالنے یا تھرتھراہٹ اور آکشیپ کے بعد کوئی سرگرمی نہیں)۔ 5 کا اسکور موت کو ظاہر کرتا ہے۔ تمام چیلنج تجربات صبح 9:00 سے 11:00 بجے کے درمیان شروع کیے گئے تھے تاکہ دن کے وقت پر منحصر تغیرات سے بچ سکیں [52]۔

عام تجرباتی سیٹ اپ

تمام مادے 5 ملی لیٹر / کلوگرام کے حجم میں لگائے گئے تھے۔ Propranolol (P0884، Sigma-Aldrich، Austria) کو نمکین میں تحلیل کیا گیا تھا اور ہسٹامین کے لیے حساسیت کو بڑھانے کے لیے ہسٹامائن چیلنج سے 20 منٹ قبل 2 ملی گرام/کلوگرام کے ارتکاز پر انٹراپریٹونلی (آئی پی) لگایا گیا تھا [53]۔ ہسٹامین ڈائی ہائڈروکلورائڈ (H7250، سگما-الڈرچ، آسٹریا) کو ڈبل ڈسٹلڈ (dd) H2O میں تحلیل کیا گیا اور مزید نمکین میں گھلایا گیا۔ تمام بیان کردہ ہسٹامین ارتکاز ہسٹامائن بیس (111.15 ڈالٹن) کا حوالہ دیتے ہیں۔

1. ہسٹامین کی زبانی اور ذیلی انتظامیہ

چوہوں کو مجموعی طور پر 60 منٹ تک روزہ رکھا گیا۔ 40 منٹ کے روزے کے بعد، propranolol کا انتظام کیا گیا اور 20 منٹ بعد ہسٹامائن 30 mg/kg per os (po) کے ساتھ زبانی گیویج کا استعمال کرتے ہوئے لگایا گیا۔ subcutaneous (sc) چیلنج ماڈل چوہوں کے لیے یا تو ہسٹامائن 50 ملی گرام/کلو گرام بغیر پروپرانولول کے یا 5 ملی گرام/کلوگرام پروپرانولول کے ساتھ ملی۔ پلازما ہسٹامین کی تعداد کے تعین کے لیے چوہوں کے ایک ذیلی سیٹ کو 10 ملی گرام/کلوگرام زائلازین اور 100 ملی گرام/کلو کیٹامین کا استعمال کرتے ہوئے ہسٹامائن چیلنج کے بعد مختلف اوقات میں اینستھیٹائز کیا گیا۔ سائٹریٹ پلازما کارڈیک پنکچر کا استعمال کرتے ہوئے اینستھیٹائزڈ چوہوں سے جمع کیا گیا تھا۔ ایک سے پانچ چوہے فی ٹائم پوائنٹ اور جین ٹائپ استعمال کیے گئے۔

2. ہم آہنگ ہسٹامین-این-میتھل ٹرانسفریز (HNMT) روکنا

Metoprine (M338835، ٹورنٹو ریسرچ کیمیکلز، کینیڈا) کو 10 فیصد لیکٹک ایسڈ (L1875، سگما-الڈرچ، آسٹریا) میں تحلیل کیا گیا، مزید نمکین میں حل کیا گیا اور 5 ملی گرام/کلو گرام ہسٹامین کے ساتھ چیلنج سے پہلے 3 ملی گرام/کلوگرام 1 گھنٹہ پر آئی پی کا انتظام کیا گیا۔ Tacrine (A79922, Sigma-Aldrich, Austria) کو ddH2O میں تحلیل کیا گیا، مزید نمکین میں گھلایا گیا، اور اس کے بعد 10 mg/kg ip 1 h سے پہلے 25 mg/kg histamine sc اور 2 mg/kg propranolol لگایا گیا۔ 2 mg/kg Tacrine ip کا ارتکاز 30 mg/kg histamine po کے ساتھ 2 mg/kg propranolol کے ساتھ ملا کر استعمال کیا گیا۔

معیاری Cistanche

3. ہسٹامین چیلنج سے پہلے شدید گردے کی چوٹ (AKI) کی شمولیت

Folic acid (F7876, Sigma-Aldrich, Austria) was reconstituted in ddH2O, further diluted in saline, and applied i.p. at a concentration of 100 mg/kg 48 h before challenge with 5 mg/kg s.c. histamine and 2 mg/kg propranolol. The degree of acute kidney injury was estimated using plasma creatinine values. As a cut-off for inclusion, a creatinine value of at least threefold above the mean baseline value was used as described [54]. Baseline plasma creatinine concentrations of 0.11 and 0.17 mg/dl were measured in two mice and therefore an inclusion cut-off of>42 mg/dl کا انتخاب کیا گیا۔ کارڈیک پنکچر کے ذریعے تیار کردہ سائٹریٹ پلازما کوباس تجزیہ کار (کوباس C311 تجزیہ کار، روچے، سوئٹزرلینڈ) کا استعمال کرتے ہوئے کریٹینائن کی پیمائش کے لیے استعمال کیا گیا تھا۔ شدید گردے کی چوٹ میں propranolol کے ساتھ sc histamine چیلنج کے دوران مختلف ٹائم پوائنٹس پر پلازما ہسٹامائن کی تعداد کا تعین کرنے کے لیے، فی ٹائم پوائنٹ دو سے چار چوہوں کو بے ہوشی کی گئی، اور دل کے پنکچر کے ذریعے سائٹریٹ پلازما جمع کیا گیا۔

4. ہسٹامین انتظامیہ کے بعد ڈی اے او ریسکیو

ریکومبیننٹ ہیومن (آر ایچ) ڈی اے او کو تبدیل شدہ ہیپرین بائنڈنگ موٹف کے ساتھ (گلوڈوواکز ایٹ ال میں بیان کیا گیا ہے۔ 5 mg/kg sc histamine کے ساتھ چیلنج سے پہلے منٹ۔

پلازما میں ہسٹامین اور ڈی اے او کی تعداد کے تعین کے لیے، چوہوں کا علاج 4 ملی گرام/کلوگرام ڈی اے او یا بفر iv 60 منٹ پہلے چیلنج سے 5 ملی گرام/کلوگرام ایس سی ہسٹامائن کے ساتھ 2 ملی گرام/کلوگرام پروپرانولول کے ساتھ کیا گیا۔ چوہوں کو مختلف ٹائم پوائنٹس پر بے ہوشی کی گئی۔ سائٹریٹ پلازما کو کارڈیک پنکچر کا استعمال کرتے ہوئے دو سے تین چوہوں سے فی ٹائم پوائنٹ جمع کیا گیا تھا۔ خون 3.8 فیصد سوڈیم سائٹریٹ میں جمع کیا گیا تھا اور ایک حصے کو فوری طور پر diminazene-aceturate (D7770, Sigma-Aldrich, Austria) کے ساتھ ملایا گیا تھا جس کے نتیجے میں rhDAO کے ذریعے ہسٹامین کے انحطاط کو روکنے کے لیے 10 µM کی حتمی حراستی تھی۔

جین کے اظہار کا تجزیہ

ٹشو کے نمونے مائع نائٹروجن میں جھٹکے سے منجمد کیے گئے تھے اور کل آر این اے فیورپریپ ٹشو ٹوٹل آر این اے کٹ (FATRK001، Favorgen، Taiwan) کا استعمال کرتے ہوئے ٹشو کی ہم آہنگی کے بعد لائسنگ ٹیوبوں (لائسنگ میٹرکس ای، ایم پی بایومیڈیکلز، جرمنی) کا استعمال کرتے ہوئے حاصل کیا گیا تھا۔ پرسیلیس 24 (برٹن انسٹرومینٹس، فرانس) پر۔ ریورس ٹرانسکرپشن کو OneScript Plus cDNA سنتھیسس کٹ (G236، ABM Good، Canada) کا استعمال کرتے ہوئے انجام دیا گیا۔ مقداری PCR BrightGreen Express 2× Mastermix (MasterMix-EL, ABM Good, Canada) کے لیے استعمال کیا گیا تھا۔ DAO، HNMT، اور histidine decarboxylase (HDC) کے لیے Exon اسپیننگ پرائمر کو Primer3 سافٹ ویئر (آن لائن ریسورس ٹیبل 1) کا استعمال کرتے ہوئے ڈیزائن کیا گیا تھا۔ ہاؤس کیپنگ جین RPLP0 کو معمول پر لانے کے لیے استعمال کیا گیا تھا [56]۔

مغربی دھبہ

مغربی دھبے کے تجزیے کے لیے، منجمد بافتوں کے نمونے 20 mM K-phosphate بفر (pH 7.2) میں لائزنگ ٹیوبز (Lysing Matrix E tubes, MP Biomedicals, Germany) کا استعمال کرتے ہوئے Precellys 24 (Bertin Instruments, France) پر لگائے گئے تھے۔ . پروٹین کی کل تعداد کا تعین QuantiPro BCA Assay Kit (QPBCA-1KT، سگما، آسٹریا) کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا تھا۔ Polyacrylamide جیل الیکٹروفورسس کے لیے 40 µg کل پروٹین اور 40 ng recombinant murine DAO (جو EG، ​​یونیورسٹی آف نیچرل ریسورسز اینڈ لائف سائنسز، ویانا، آسٹریا کے ذریعہ فراہم کیا گیا ہے، [57] میں بیان کردہ طریقوں کا استعمال کرتے ہوئے) کو 12 فیصد Tris–glycine جیل (Tris–glycine gel) کا استعمال کرتے ہوئے الگ کیا گیا تھا۔ 4561043، Bio-Rad، USA)۔ ایک مونوکلونل ABP1 اینٹی باڈی (sc-515908, Santa Cruz, USA) DAO کا پتہ لگانے کے لیے 0.4 µg/ml کے ارتکاز میں استعمال کیا گیا تھا، اور ایک مونوکلونل GAPDH اینٹی باڈی (2118، سیل سگنل ٹیکنالوجی، USA) کو لوڈنگ کے طور پر استعمال کیا گیا تھا۔ 1:2000 کے کم ہونے پر کنٹرول کریں۔ مونوکلونل اینٹی ماؤس IgG-HRP اینٹی باڈی (A2554، سگما ایلڈرچ، آسٹریا) اور اینٹی خرگوش IgG-HRP اینٹی باڈی (A0545، سگما ایلڈرچ، آسٹریا) کو 1:40,000 کی کمی پر پتہ لگانے والے اینٹی باڈیز کے طور پر استعمال کیا گیا۔ کیمیڈاک امیجنگ سسٹم (17001401، بائیو ریڈ، USA) پر کلیریٹی میکس ویسٹرن ای سی ایل سبسٹریٹ (1705062، بائیو راڈ، USA) کا استعمال کرتے ہوئے تصاویر حاصل کی گئیں۔

Cistanche tubulosa

DAO سرگرمی کی پیمائش

مختلف ٹشو ہوموجینیٹس کی ڈائیمین آکسیڈیز کی سرگرمی اور میتھوپرین اور ٹاکرائن کی روک تھام کی پیمائش کی گئی جیسا کہ بیان کیا گیا ہے [58]۔ منجمد ٹشو کے نمونوں کو 20 ایم ایم کے فاسفیٹ بفر (پی ایچ 7.2) میں پریسیلیس 24 پر لائسنگ ٹیوبوں کا استعمال کرتے ہوئے لائز کیا گیا تھا۔ کوانٹی پرو بی سی اے اسے کٹ کا استعمال کرتے ہوئے کل پروٹین کی مقدار کا تعین کیا گیا تھا اور مختلف ٹشوز کے 500 µg کل پروٹین کے نچوڑ کے ساتھ inc20 منٹ کے ساتھ ortho-aminobenzaldehyde (oABA) اور یا تو ddH2O یا 200 µM cadaverine (CAD)۔ ڈیلٹا-1-پائپریڈائن، DAO کی طرف سے deamination کے بعد CAD کا آٹو سائیکلائزیشن پروڈکٹ، oABA کے ساتھ گاڑھا ہو کر ایک فلوروفور بناتا ہے، جس کی پیمائش EX440/30 اور EM620/40 nm پر کی جا سکتی ہے۔ DAO کی روک تھام کے تعین کے لیے، rhDAO کو 30 منٹ کے لیے مختلف ارتکاز میں میتھوپرین اور ٹاکرائن کے ساتھ پہلے سے انکیوبیٹ کیا گیا اور جیسا کہ اوپر بیان کیا گیا ہے ماپا گیا۔

DAO کی سرگرمی کے تعین کے لیے، 200 µg/ml کے پروٹین کی حراستی کے ساتھ ٹشو ہوموجنیٹس کو HRP (حتمی ارتکاز 1.2 µg/ml، P6782، سگما-الڈرچ، آسٹریا) اور امینوگوانیڈائن (حتمی ارتکاز 10 µ6ma4M، Sigma-Aldrich) کے ساتھ ملایا گیا۔ ، آسٹریا) یا کے فاسفیٹ بفر (پی ایچ 7.2) کو شامل کیا گیا اور 37 ڈگری پر 15 منٹ تک انکیوبیٹ کیا گیا۔ Amplex red™ (حتمی ارتکاز 100 µM, A12222, Thermo Scientific, USA) کو شامل کیا گیا اور 200 µM فائنل پوٹریسین ارتکاز (51799، سگما-الڈرچ، آسٹریا) کے اضافے کے ذریعے رد عمل شروع کیا گیا۔ پوٹاشیم فاسفیٹ بفر (پی ایچ 7.2) کو منفی کنٹرول کے طور پر استعمال کیا گیا تھا۔ نمونے 37 ڈگری پر لگائے گئے تھے اور EX550 اور EM590 nm کا استعمال کرتے ہوئے ہر 10 منٹ میں 120 منٹ کے لئے ماپا گیا تھا۔ DAO-مخصوص سگنل کا حساب K-phosphate بفر والے نمونوں سے aminoguanidine، ایک طاقتور اور ناقابل واپسی DAO inhibitor کے ساتھ نمونوں کو گھٹا کر کیا گیا۔

iv Rhoda حاصل کرنے والے چوہوں میں پلازما DAO سرگرمی کی پیمائش کے لیے پروفیسر Quaroni (Cornell University, Ithaca, NY) کے ذریعہ فراہم کردہ ہائبرڈوما سیل لائن کلون اینٹی DAO 8/119 سے مونوکلونل اینٹی باڈی کا استعمال کرتے ہوئے ایک ہائبرڈ پرکھ اور Amplex red™ استعمال کیا گیا تھا۔ ہائی پروٹین بائنڈنگ بلیک فلوروسینس پلیٹس (475,515، تھرمو سائنٹیفک Nunc، ڈنمارک) کو 50 ایم ایم کاربونیٹ-بائکاربونیٹ بفر میں 100 µl کے 5 µg/ml اینٹی DAO 8/119 کے ساتھ لیپت کیا گیا تھا۔ C3041، سگما-الڈرچ، آسٹریا)، رات بھر 4 ڈگری پر انکیوبیٹ کیا گیا اور اس کے بعد کمرے کے درجہ حرارت پر 50 منٹ کے لیے 120 µl 1 فیصد BSA (A4503، سگما-الڈرچ، آسٹریا) کے ساتھ بلاک کر دیا گیا۔ 100 μl پلازما کے نمونوں اور معیارات کو مسدود کرنے کے بعد، PBS میں پہلے پتلا 1:10 شامل کیا گیا تھا اور کمرے کے درجہ حرارت پر 1 گھنٹہ تک انکیوبیٹ کیا گیا تھا۔ اس کے بعد پی بی ایس میں 0.1 فیصد بی ایس اے کے ساتھ 90 µl ہارسریڈش پیرو آکسیڈیز (حتمی ارتکاز 1.2 µg/ml) اور Amplex red™ (حتمی ارتکاز 100 µM) شامل کیے گئے اور 10 µl پوٹریسکائن (حتمی حراستی µM µ0 یا پی بی ایس) شامل کرکے رد عمل شروع کیا گیا۔ فلوروسینس EX550 اور EM590 nm کا استعمال کرتے ہوئے 120 منٹ کے لئے ہر 5 منٹ پر 37 ڈگری پر ماپا گیا۔ پی بی ایس میں دھونے کا حل 0.1 فیصد ٹوین-20 (P1379، سگما-الڈرچ، آسٹریا) تھا۔ ماؤس پلازما میں 3–30 ng/ml rhDAO کا ایک معیاری وکر تیار کیا گیا تھا۔ تمام پیمائشیں ڈپلیکیٹ میں کی گئیں۔

ہسٹامائن کی پیمائش

سائٹریٹ پلازما جس میں 10 µM diminazene-aceturate (D7770، Sigma-Aldrich، Austria) ہسٹامین یکساں وقت سے حل شدہ فلوروسینس (HTRF) ڈائنامک کٹ (62HTMDPET، Cisbio, France) کا استعمال کرتے ہوئے ہسٹامین کی تعداد کی پیمائش کرنے کے لیے استعمال کیا گیا تھا۔ کٹ کو مینوفیکچرر کی فراہم کردہ ہدایات کے مطابق استعمال کیا گیا تھا۔ C57Bl/6J چوہوں کے پولڈ پلازما میں ہسٹامائن کا معیاری وکر مقدار درست کرنے کے لیے استعمال کیا گیا تھا۔ تمام ہسٹامائن کی تعداد ہسٹامائن کی بنیاد کا حوالہ دیتی ہے اور تمام پیمائشیں ڈپلیکیٹ میں کی گئیں۔

شماریاتی تجزیہ

گراف پیڈ پرزم ورژن 8.4 کا استعمال کرتے ہوئے شماریاتی تجزیے کیے گئے۔{2}}۔ (GraphPad Software Inc. San Diego). ٹشو ہوموجنیٹس میں ڈی اے او کی سرگرمی میں فرق کے لیے شماریاتی اہمیت کا حساب گیزر – گرین ہاؤس اصلاح کے ساتھ بار بار کیے جانے والے انووا کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا۔ ایک تجربے کے دوران انفرادی بنیادی جسمانی درجہ حرارت کی پیمائش اور کلینیکل اسکورز سے منحنی خطوط (AUC) کے نیچے والے حصے کا موازنہ ویلچ کی اصلاح کے بغیر دو طرفہ، غیر جوڑا ٹی-ٹیسٹ کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا۔ گروپوں کے درمیان پلازما ہسٹامائن کی تعداد کا موازنہ دو طرفہ انووا سے کیا گیا۔ مختلف جین ٹائپس کے ساتھ چوہوں کے درمیان چیلنج کے بعد پلازما ہسٹامین کی تعداد کے موازنہ کے لیے، گردے کی شدید چوٹ کے ساتھ اور بغیر اور DAO یا بفر حاصل کرنے کے بعد، ڈیٹا کو وقفوں میں گروپ کیا گیا تاکہ انفرادی ذیلی گروپس (جینوٹائپس: 5، 1{{ 14}}، 20، 30، 40، 45، 60 منٹ؛ گردے کی شدید چوٹ: 0، 10–15، 20–30، 40–45 اور 60 منٹ؛ DAO: 0، 10، 30 اور 45 منٹ)۔ 100 ملی گرام/کلو گرام فولک ایسڈ کے ساتھ اور اس کے بغیر علاج کیے گئے چوہوں سے پلازما کریٹینائن کی تعداد میں فرق کو جانچنے کے لیے ایک دو طرفہ، غیر جوڑ والا ٹی ٹیسٹ استعمال کیا گیا۔ شماریاتی اہمیت کو پی کے طور پر بیان کیا گیا تھا۔<0.05 in all tests.

Cistanche اقتباس

نتیجہ

DAO KO چوہوں کو بنیادی طور پر WT چوہوں سے الگ نہیں کیا جا سکتا تھا جو exogenous oral اور subcu�cutaneous histamine چیلنجز کا استعمال کرتے ہیں۔ ہسٹامائن کے غیر فعال ہونے میں HNMT کی شمولیت جس کی وجہ سے علامات میں کمی واقع ہوتی ہے، ٹاپولوجی بہترین طور پر اعتدال پسند ہے لیکن فارماسولوجی کی روک تھام کے نتائج کو ابتدائی سمجھا جا سکتا ہے۔ میتھوپرین کے ساتھ HNMT کی روک تھام کا استعمال کرتے ہوئے ڈیٹا نے ہسٹامین کی غیر فعال ہونے میں اینڈوجینس ڈی اے او کی شمولیت کی طرف رجحان ظاہر کیا۔ گردے گردش سے ہسٹامائن کے تیزی سے اخراج میں ملوث ہیں، لیکن سات گنا بلند 509 ڈائامین آکسیڈیز ناک آؤٹ چوہے زبانی طور پر یا ذیلی طور پر دیے جانے کے لیے انتہائی حساس نہیں ہیں… 1 3 ہسٹامین کی تعداد میں مرکزی درجہ حرارت کا استعمال کرتے ہوئے ماپا مبالغہ آمیز فینوٹائپ میں ترجمہ نہیں کیا گیا۔ فینوٹائپیکل ریڈ آؤٹ کے طور پر نقصان۔ ریکومبیننٹ ہیومن یا ماؤس DAO کا استعمال مختلف جانوروں کے ماڈلز میں ہسٹامین کے ملوث ہونے کی حمایت یا برخاست کرنے میں مدد کر سکتا ہے جس میں مشتبہ مستول سیل انحطاط کے ساتھ تیز رفتار اور بڑے پیمانے پر ہسٹامین کا اخراج ہوتا ہے، یا ہسٹائڈائن ڈیکربوکسیلیس انزائم کی بہتر شمولیت کے ساتھ تازہ ترکیب کی رہائی ہوتی ہے۔ ہسٹامائن گھنٹوں سے زیادہ DAO اور HNMT جین دونوں کی غیر فعال کاپیوں کے ساتھ حقیقی ڈبل KO ماؤس کی افزائش، اگر قابل عمل ہے، تو مطالعہ کے قابل ہو سکتا ہے۔ DAO یا HNMT کے واحد KO چوہے واضح فینوٹائپس نہیں دکھاتے ہیں۔ اسی طرح، ہسٹامائن کے دو اہم ٹرانسپورٹرز، OCT2 اور OCT3 کی شمولیت کی جانچ کرنا، ہسٹامائن کی حوصلہ افزائی سے پیدا ہونے والی فینوٹائپیکل تبدیلیوں میں ہمیں چوہوں میں ہسٹامائن کی ثالثی علامات کی نشوونما کے پیچھے میکانزم کی بہتر تفہیم حاصل کرنے کی اجازت دے سکتا ہے۔ اس کے نتیجے میں ممکنہ طور پر انسانوں میں بھی۔ اس کی دریافت کے بعد سے 100 سال سے زیادہ عرصے تک اہم تحقیقی کوششوں کے باوجود ہمارے پاس ہسٹامائن کیٹابولزم کی صحیح سمجھ حاصل کرنے سے پہلے کچھ راستہ باقی ہے۔

حوالہ جات

1. Boehm T, Ristl R, Joseph S, et al. انڈولنٹ سیسٹیمیٹک ماسٹوسائٹوسس والے مریض میں ماسٹ سیل ایکٹیویشن کے شدید واقعہ کے دوران میٹابولوم اور لپڈوم کی خرابی۔ جے الرجی کلین امیونول۔ 2021۔ https://doi.org/10.1016/j.jaci.2021.03.043۔ 2. پیکارڈ کے اے، خان ایم ایم۔ Th1/th پر ہسٹامائن کے اثرات

2 سائٹوکائن بیلنس۔ انٹ امیونو فارماکول۔ 2003؛ 3:909-20۔ https://doi.org/ 10.1016/S1567-5769(02)00235-7۔

3. Hesterberg R، Sattler J، Lorenz W، et al. انسانی بافتوں میں ہسٹامائن کا مواد، ڈائیمین آکسیڈیز سرگرمی اور ہسٹامائن میتھل ٹرانسفریز سرگرمی: حقیقت یا افسانہ؟ ایجنٹوں کی کارروائیاں۔ 1984؛ 14:325– 34۔ https://doi.org/10.1007/BF01973821۔

4. Dyer J, Warren K, Merlin S, et al. پلازما ہسٹامین کی پیمائش: ایک بہتر طریقہ اور عام اقدار کی وضاحت۔ جے الرجی کلین امیونول۔ 1982؛ 70:82-7۔ https://doi.org/10.1016/ 0091-6749(82)90233-0۔

5. پولاک I، مرڈوک آر ڈی، لیسوف ایم ایچ۔ پلازما ہسٹامین اور عام، ایٹوپک، اور چھپاکی کے مضامین میں انفیوزڈ ہسٹامائن کے لیے طبی رواداری۔ ایجنٹوں کی کارروائیاں۔ 1991؛ 32:359-65۔ https://doi.org/10۔ 1007/BF01980899۔

6. لیو جے، وانگ ایل، ہو ڈبلیو، وغیرہ۔ مختلف ممالیہ جانوروں میں پلازما ہسٹامائن کے تعین کے لیے UHPLC–MS/MS طریقہ کار کی ترقی۔ J Chromatogr B. 2014;971:35–42۔ https://doi.org/10.1016/j.jchromb.2014.08.043۔

7. Xu Y، Kang T، Dou D، et al. انجیکشن کے ذریعہ پیدا ہونے والے anaphylactoid رد عمل کے لئے جانوروں کے ماڈل کی تشخیص اور اصلاح۔ ایشین پی اے سی جے الرجی امیونول۔ 2015؛ 33:330–8۔ https://doi.org/ 10.12932/AP0619.33.4.2015۔

8. مینٹز ایل، نوواک این۔ ہسٹامائن اور ہسٹامائن عدم رواداری۔ ایم جے کلین نیوٹر۔ 2007؛ 85:1185-96۔ https://doi.org/10.1093/ajcn/85.5۔ 1185.

9. Ginsburg R، Bristow MR، Kantrowitz N، et al. کلینیکل کورونری شریان کے اینٹھن کی ہسٹامین اشتعال انگیزی: مختلف انجائنا پیکٹوریس کے روگجنن سے متعلق مضمرات۔ ایم ہارٹ جے 1981؛ 102:819-22۔ https://doi.org/10.1016/0002-8703(81) 90030-2۔

10. O'Mahony L, Akdis M, Akdis CA. ہسٹامین اور ہسٹامائن ریسیپٹرز کے ذریعے مدافعتی ردعمل اور سوزش کا ضابطہ۔ جے الرجی کلین امیونول۔ 2011؛ ​​128:1153–62۔ https://doi. org/10.1016/j.jaci.2011.06.051.

11. Thurmond RL، Gelfand EW، Dunford PJ. الرجک سوزش میں ہسٹامین H1 اور H4 رسیپٹرز کا کردار: نئی اینٹی ہسٹامائنز کی تلاش۔ نیٹ ریو ڈرگ ڈسکو۔ 2008؛ 7:41–53۔ https://doi.org/10.1038/nrd2465۔

12. Pericin C، Thomann P. چوہوں کے مختلف تناؤ میں کلیوکوئنول، ہسٹامین، اور کلوروفارم کی شدید زہریلا کا موازنہ۔ میں: چیمبرز پی ایل، گونزیل پی، ایڈیٹرز۔ کچھ ہدف والے اعضاء پر زہریلے عمل کا طریقہ کار۔ برلن: اسپرنگر؛ 1979. صفحہ 371–3۔

13. Lamanna C، Ross HE. مہلک زہریلی خوراک کا ماؤس کے جسمانی وزن سے تعلق۔ ٹاکسیکول ایپل فارماکول۔ 1968؛ 13:307-15۔ https://doi.org/10.1016/0041-008X(68)90104-X

14. وین ڈیر لنڈن پی، ہیک سی، پورٹ مین جے، وغیرہ۔ 138 مریضوں میں کیڑے کے ڈنک کا چیلنج: انفیلیکسس کی طبی شدت اور ماسٹ سیل ایکٹیویشن کے درمیان تعلق۔ جے الرجی کلین امیونول۔ 1992؛ 90:110-8۔ https://doi.org/10.1016/S0091-6749(06) 80017-5۔

15. ولیمز ڈبلیو آر، شیل ڈی جے۔ پلازما پروٹین سے واسو ایکٹیو ثالثوں کی وٹرو نقل مکانی: نیورومسکلر بلاک کرنے والی دوائیوں پر سیوڈو الرجک رد عمل کا ایک ممکنہ طریقہ کار۔ بی آر جے انیستھ۔ 1992؛ 69:508-10۔ https://doi.org/10.1093/bja/69.5.508۔

16. ساساکی Y، Iwama R، Sato T، et al. ایک آسان مساوات کا استعمال کرتے ہوئے ہوش والے چوہوں میں گلوومیرولر فلٹریشن کی شرح کا تخمینہ۔ فیزیول ریپ. 2014؛ 2:e12135۔ https://doi.org/10.14814/phy2.12135۔

17. Helander CG، Lindell SE، Westling H. C14-کا رینل ہٹانا انسان میں خون سے ہسٹامین کا لیبل لگا ہوا ہے۔ اسکینڈ جے کلین لیب انویسٹیگ۔ 1965۔ https://doi.org/10.1080/00365516509083360۔

18. سجاستد اے، سجاد ÖV۔ انسان میں زبانی طور پر زیر انتظام l4C-ہسٹامین کا کیٹابولزم۔ ایکٹا فارماکول ٹاکسیکول۔ 1974؛ 34:33–45۔ https://doi.org/10.1111/j۔{9}}.1974.tb02011.x

19. Schayer RW. مختلف پرجاتیوں میں ہسٹامین کا میٹابولزم۔ بی آر جے فارم کیموتھ۔ 1956؛ 11:472–3۔ https://doi.org/10.1111/j۔ 1476-5381.1956.tb00020.x

20. Snyder SH، Axelord J، Bauer H. جانوروں کے ٹشوز میں C14-Histamine کی قسمت۔ J Pharmacol Exp Ther. 1964؛ 144:373-9۔

21. روز بی، براؤن جے ایس ایل۔ چوہے میں نس کے ذریعے انجیکشن ہسٹامائن کی تقسیم اور غائب ہونے کی شرح۔ ایم جے فزیول۔ 1938؛ 124:412-20۔ https://doi.org/10.1152/ajplegacy.1938.124.2۔ 412.

22. Koepsell H, Lips K, Volk C. Polyspecifc نامیاتی کیشن ٹرانسپورٹرز: ساخت، فنکشن، جسمانی کردار، اور بائیو فارماسیوٹیکل اثرات۔ فارم ریس 2007؛ 24:1227-51۔ https://doi.org/ 10.1007/s11095-007-9254-z۔

23. Lantoine F، Iouzalen L، Devynck MA، et al. ہسٹامین کے ذریعے متحرک انسانی اینڈوتھیلیل خلیوں میں نائٹرک آکسائیڈ کی پیداوار کے لیے Ca2 پلس آمد کی ضرورت ہوتی ہے۔ بائیو کیم۔ 1998؛ 330:695-9۔ https://doi.org/10.1042/ bj3300695۔

24. میکلیس سی ایم، سمان ایم، اینڈو کے، وغیرہ۔ RhoA اور ROCK ہسٹامین کی وجہ سے عروقی رساو اور anaphylactic جھٹکا میں ثالثی کرتے ہیں۔ نیٹ کمیون۔ 2015؛ 6:6725۔ https://doi.org/10.1038/ncomms7725۔

25. Ashina K، Tsubosaka Y، Nakamura T، et al. ہسٹامین Vivo میں خون کے بہاؤ اور اینڈوتھیلیل رکاوٹ میں رکاوٹ کو بڑھا کر ویسکولر ہائپرپرمیبلٹی کو اکساتا ہے۔ پلس ون۔ 2015؛ 10:e0132367۔ https://doi.org/10.1371/journal.pone.0132367۔

26. Schömig E، Lazar A، Gründemann D. Extraneuronal monoamine ٹرانسپورٹر اور نامیاتی کیشن ٹرانسپورٹرز 1 اور 2: نقل و حمل کی کارکردگی کا جائزہ۔ میں: Sitte HH، Freissmuth M، ایڈیٹرز۔ نیورو ٹرانسمیٹر ٹرانسپورٹرز۔ برلن: اسپرنگر؛ 2006. صفحہ 151–80۔

27. Ohtsu H. مستول خلیوں پر الرجی سگنل کی تحقیق میں پیشرفت: امیونولوجیکل اور کارڈیو ویسکولر بیماری میں ہسٹامین کا کردار اور سیل میں ہسٹامائن کی نقل و حمل کا نظام۔ جے فارماکول سائنس۔ 2008؛ 106:347-53۔ https://doi.org/10.1254/jphs.FM0070294۔

28. کرجالا SA، Turnquest B، Schayer RW. تابکار ہسٹامائن کے پیشاب کی میٹابولائٹس۔ جے بائیول کیم۔ 1956؛ 219:9-12۔ https://doi. org/10.1016/S0021-9258(18)65762-X.

29. Schayer RW. Vivo میں ہسٹامائن کی جسمانی مقدار کا کیٹابولزم۔ فزیول Rev. 1959؛ 39:116-26۔ https://doi.org/10.1152/ physrev.1959.39.1.116۔

30. ریلی ایم اے، شیئر آر ڈبلیو۔ ہسٹامین کیٹابولزم اور اس کی روک تھام پر ویوو مطالعات میں۔ بی آر جے فارماکول۔ 1970؛ 38:478-89۔ https://doi. org/10.1111/j۔{7}}.1970.tb10590.x

31. ناگنوما ایف، ناکامورا ٹی، یوشیکاوا ٹی، وغیرہ۔ Histamine N-methyltransferase جارحیت اور نیند کے جاگنے کے چکر کو منظم کرتا ہے۔ سائنس کا نمائندہ 2017؛ 7:15899۔ https://doi.org/10.1038/s41598-017-16019-8۔

32. McGrath AP, Hilmer KM, Collyer CA, et al. انسانی ڈائیمین آکسیڈیس کی ساخت اور روکنا۔ بائیو کیمسٹری۔ 2009؛ 48:9810–22۔ https://doi.org/10.1021/bi9014192۔

33. Schwelberger HG. کنفوکل لیزر اسکیننگ فلوروسینس مائیکروسکوپی کے ذریعہ ممالیہ ڈائمین آکسیڈیس کے ٹشو اور ذیلی سیلولر لوکلائزیشن کا تجزیہ۔ Infamm Res. 1998؛ 47:60-1۔ https://doi.org/ 10.1007/s000110050273۔

34. نشیبوری ایم، طہارا اے، سواد کے، وغیرہ۔ بوائین مرکزی اعصابی نظام میں ہسٹامین N-methyltransferase کی نیورونل اور ویسکولر لوکلائزیشن۔ Eur J Neurosci. 2000؛ 12:415-24۔ https://doi.org/ 10.1046/j۔{8}}.2000.00914.x

35. سجاستاد او وی۔ بھیڑوں کی ہسٹامین کو منہ سے دی جانے والی حساسیت کی امینوگوانیڈائن کے ذریعے امکان۔ اینڈوجینس ہسٹامین کے پیشاب کے اخراج پر امینو گوانیڈائن کا اثر۔ Exp Physiol. 1967؛ 52:319-30۔ https://doi.org/10.1113/expphysiol.1967.sp001 918۔

36. سیٹلر J، Häfner D، Klotter HJ، et al. ایک وبائی امراض کے طور پر خوراک کی حوصلہ افزائی ہسٹامائنز: زبانی ہسٹامائن انتظامیہ کے بعد پلازما ہسٹامائن کی بلندی اور ہیموڈینامک تبدیلیاں اور ڈائمین آکسیڈیس (DAO) کی ناکہ بندی۔ ایجنٹوں کی کارروائیاں۔ 1988؛ 23:361–5۔ https://doi.org/10.1007/BF02142588۔

37. Bowman MA، Simell OG، Peck AB، et al. امینوگوانائڈائن انتظامیہ کے فارماکوکینیٹکس اور ذیابیطس کی فریکوئنسی پر اثرات نونوبیز ذیابیطس چوہوں میں۔ J Pharmacol Exp Ther. 1996؛ 279:790-4۔

38. Matejovic M، Krouzecky A، Martinkova V، et al. طویل مدتی ہائپر ڈائنامک پورسائن بیکٹیریمیا کے دوران منتخب inducible نائٹرک آکسائڈ سنتھیس روکنا۔ جھٹکا 2004؛ 21:458-65۔ https://doi. org/10.1097/00024382-200405000-00010۔

39. ایلڈرٹن ڈبلیو کے، کوپر سی ای، نولس آر جی۔ نائٹرک آکسائیڈ ترکیبیں: ساخت، فعل، اور روکنا۔ بائیو کیم جے 2001؛ 357:593–615۔ https://doi.org/10.1042/bj3570593۔

40. Altura BM، Halevy S. گردشی جھٹکے میں ہسٹامین H1- اور H2- رسیپٹر مخالف کے فائدہ مند اور نقصان دہ اعمال۔ پی این اے ایس۔ 1978؛75:2941–4۔ https://doi.org/10.1073/pnas.75.6.2941۔

41. تھامس LL، Bochner BS، Lichtenstein LM. H-2 مخالفوں کے ذریعہ انسانی پولیمورفونوکلیئر لیوکوائٹ سے ماخوذ ہسٹامینیز سرگرمی کی روک تھام۔ بائیو کیم فارماکول۔ 1978؛ 27:2562-5۔ https:// doi.org/10.1016/0006-2952(78)90327-1۔

42. تھرمن ایم، لورینز ڈبلیو، شمل اے، وغیرہ۔ دوران خون کے نظام پر H1-اور H2-رسیپٹر مخالفوں کا اثر اور کتوں میں اینڈوجینس پلازما ہسٹامین کی ارتکاز۔ ایجنٹوں کی کارروائیاں۔ 1977؛ 7:97–101۔ https://doi.org/10.1007/BF01964888۔

43. ایلمور بی او، بولنگر جے اے، ڈولی ڈی ایم۔ انسانی گردے کی ڈائیمین آکسیڈیز: ہیٹرولوگس اظہار، طہارت، اور خصوصیت۔ J Biol Inorg Chem. 2002؛ 7:565-79۔ https://doi.org/10۔ 1007/s00775-001-0331-1۔

44. Duch DS, Bowers SW, Nichol CA. ہسٹامین این میتھائل ٹرانسفراز کے ڈائیمینوپائریمائڈائن انحبیٹرز کے ذریعہ دماغی ہسٹامائن کی سطح میں اضافہ۔ بائیو کیم فارماکول۔ 1978؛ 27:1507-9۔ https://doi. org/10.1016/0006-2952(78)90109-0۔

45. Horton JR، Sawada K، Nishibori M، et al. متنوع ادویات کے ذریعہ ہسٹامین N-methyltransferase کی روک تھام کے لئے ساختی بنیاد۔ جے مول بائیول۔ 2005؛ 353:334-44۔ https://doi.org/10.1016/j.jmb.2005۔ 08.040.

46. ​​Horton JR، Sawada K، Nishibori M، et al. انسانی ہسٹامین میتھل ٹرانسفریز کی دو پولیمورفک شکلیں: ساختی، تھرمل، اور متحرک موازنہ۔ ساخت. 2001؛ 9:837–49۔ https:// doi.org/10.1016/S0969-2126(01)00643-8۔

47. Duch DS، Bacchi CJ، Edelstein MP، et al. وٹرو اور ویوو میں ہسٹامین میٹابولزم کے روکنے والے: اینٹی ٹریپینوسومل سرگرمی کے ساتھ ارتباط۔ بائیو کیم فارماکول۔ 1984؛ 33:1547-53۔ https:// doi.org/10.1016/0006-2952(84)90426-X.

48. Hox V، Desai A، Bandara G، et al. ایسٹروجن مادہ چوہوں میں انفیلیکسس کی شدت کو بڑھاتا ہے جس سے انڈوتھیلیل نائٹرک آکسائیڈ سنتھیس ایکسپریشن اور نائٹرک آکسائیڈ کی پیداوار بڑھ جاتی ہے۔ جے الرجی کلین امیونول۔ 2015؛ 135:729-736.e5۔ https://doi.org/ 10.1016/j.jaci.2014.11.003۔

49. Packman EW، Rossi GV، Harrisson JWE. جسم کے درجہ حرارت پر ہسٹامین اور اینٹی ہسٹامائنز کا اثر۔ جے فارم فارماکول۔ 1953؛ 5:301-10۔ https://doi.org/10.1111/j۔{7}}.1953.tb139 90.x

50. مورس ایس سی، پرکنز سی، پوٹر سی، وغیرہ۔ چوہوں میں IgE ثالثی انفیلیکسس کی منشیات کی روک تھام کو بہتر بنانا۔ جے الرجی کلین امیونول۔ 2021؛ 149:671–84۔ https://doi.org/10.1016/j.jaci.2021.06.022۔

51. Li XM، Serebrisky D، Lee SY، et al. مونگ پھلی کے انفیلیکسس کا ایک مورین ماڈل: مونگ پھلی کے ایک بڑے الرجین کے T- اور B- سیل کے ردعمل انسانی ردعمل کی نقل کرتے ہیں۔ جے الرجی کلین امیونول۔ 2000؛ 106:150-8۔ https://doi.org/10.1067/mai.2000.107395۔

52. Hasegawa A، Watanabe M، Osada H، et al. IgE-، ہسٹامین-، اور مختلف ماؤس اسٹرین میں پلیٹلیٹ کو چالو کرنے والے عنصر کی ثالثی نظامی انفیلیکسس میں دن کے وقت پر منحصر تغیرات پر گلوکوکورٹیکوائڈز کا اثر۔ بائیو کیم بائیو فیز ریس کمیون۔ 2018؛495:2184–8۔ https://doi.org/10.1016/j.bbrc.2017.12.099۔

53. Fishel CW، Szentivanyi A، Talmage DW. نیوروہومرس کے ذریعہ ہسٹامین اور سیروٹونن کے لئے چوہوں کی حساسیت اور غیر حساسیت۔ جے امیونول۔ 1962؛ 89:8-18۔

54. Stallons LJ، Whitaker RM، Schnellmann RG. فولک ایسڈ کی وجہ سے گردے کی شدید چوٹ اور ابتدائی فبروسس میں مائٹوکونڈریل بایوجنسیس کو دبایا گیا۔ ٹاکسیکول لیٹ۔ 2014؛ 224:326–32۔ https://doi. org/10.1016/j.toxlet.2013.11.014.

55. Gludovacz E، Schuetzenberger K، Resch M، et al. ہیپرین بائنڈنگ موٹف ہیومن ڈائیمین آکسیڈیس کے تغیرات ایک فرسٹ ان کلاس ہسٹامائن ڈیگریجنگ بائیو فارماسیوٹیکل کی ترقی کی اجازت دیتے ہیں۔ ایلیف۔ 2021؛ 10:e68542۔ https://doi.org/10.7554/eLife۔ 68542۔

56. Eissa N، Kermarrec L، Hussein H، et al. مقداری ریئل ٹائم پی سی آر کا استعمال کرتے ہوئے ماؤس 2 میں میسنجر آر این اے کو معمول پر لانے کے لیے حوالہ جینز کی مناسبیت، سائنس کا نمائندہ 2017؛ 7:42427۔ https://doi.org/10۔ 1038/srep42427۔

57. Gludovacz E، Maresch D، Bonta M، et al. چینی ہیمسٹر اووری (CHO) خلیوں میں پیدا ہونے والے ریکومبیننٹ ہیومن ڈائیمین آکسیڈیس (rhDAO) کی خصوصیت۔ جے بائیو ٹیکنالوجی۔ 2016؛ 227:120-30۔ https://doi.org/10.1016/j.jbiotec.2016.04.002۔

58. Boehm T، Karer M، Gludovacz E، et al. قدرتی سبسٹریٹس سے حاصل کردہ نئے دریافت شدہ فلوروفورس کا استعمال کرتے ہوئے پیچیدہ میٹرکس میں ڈائیمین آکسیڈیز سرگرمی کی سادہ، حساس اور مخصوص مقدار۔ Infamm Res. 2020؛ 69:937–50۔ https://doi.org/10۔ 1007/s00011-020-01359-5۔

59. Matsumura Y, Tan EM, Vaughan JH. فارماکولوجک بیٹا ایڈرینجک ناکہ بندی کے ساتھ چوہوں میں ہسٹامین اور سیسٹیمیٹک انفیلیکسس کے لئے انتہائی حساسیت: نیوکلیوٹائڈس کے ذریعہ تحفظ۔ جے الرجی کلین امیونول۔ 1976؛ 58:387-94۔ https://doi.org/10.1016/0091- 6749(76)90119-6۔

60. ہنٹر اے جے، مرے ٹی کے، جونز جے اے، وغیرہ۔ Vivo اور in Vitro میں tetrahydroaminoacridine کی cholinergic فارماکولوجی۔ بی آر جے فارماکول۔ 1989؛ 98:79–86۔ https://doi.org/10.1111/j۔{7}}۔ 1989.tb16865.x

61. Rabe M، Schaefer F. گردے کی بیماری کے غیر ٹرانسجینک ماؤس ماڈل۔ نیفرون 2016؛ 133:53–61۔ https://doi.org/10.1159/00044 5171۔

62. Miyamoto Y، Nakano S، Kaneko M، et al. کھلی دل کی سرجری میں ایک نئے مصنوعی پروٹیز روکنے والے کی کلینیکل تشخیص۔ پلازما سیروٹونن اور ہسٹامین کی رہائی اور خون کے تحفظ پر اثر۔ ASAIO 1992؛38:M395-8۔ https://doi.org/10.1097/00002480- 199207000-00063۔

63. ریس آنکولوجی — پریزیشن آنکولوجی۔ https://www.raceoncology com/. 23 نومبر 2021 کو رسائی ہوئی۔

64. Myers JW, Von Hof DD, Kuhn JG, et al. بیسنٹرین انفیوژن کے ساتھ منسلک انفیلیکٹائڈ رد عمل۔ تحقیقاتی نئی ادویات۔ 1983؛ 1:85-8۔ https://doi.org/10.1007/BF00180195۔

65. ریلی ایم اے، شیئر آر ڈبلیو۔ Vivo میں ہسٹامین کیٹابولزم پر مزید مطالعات۔ بی آر جے فارماکول۔ 1971؛ 43:349-58۔

66. Malinski T, Taha Z, Grunfeld S, et al. شہ رگ کی دیوار میں نائٹرک آکسائیڈ کا پھیلاؤ پورفرینک مائیکرو سینسرز کے ذریعہ حالت میں نگرانی کی جاتی ہے۔ بائیو کیم بائیو فیز ریس کمیون۔ 1993؛ 193:1076-82۔ https://doi. org/10.1006/bbrc.1993.1735.

67. Ginsburg M, Wajda I, Waelsch H. Transglutaminase and histamine incorporation in vivo. بائیو کیم فارماکول۔ 1963؛ 12:251-64۔ https://doi.org/10.1016/0006-2952(63)90148-5۔

68. Vowinckel J، Stahlberg S، Paulmann N، et al. گلوٹامین کی باقیات کی ہسٹامینیلیشن ایک ناول پوسٹ ٹرانسلیشنل ترمیم ہے جو G-پروٹین سگنلنگ میں شامل ہے۔ FEBS Lett. 2012؛586:3819–24۔ https://doi.org/10.1016/j.febslet.2012.09.027۔

69. McNally W, Roth M, Young R, et al. نس یا زبانی خوراک کے بعد چوہوں میں ٹیکرائن ٹشو کی تقسیم کا مقداری پورے جسم کا آٹوراڈیوگرافک تعین۔ فارم ریس 1989؛ 6:924– 32۔ https://doi.org/10.1023/A:1015933210803۔

70. کمنگ پی، رینر پی بی، ونسنٹ ایس آر۔ چوہے کے دماغ میں ہسٹامین-این-میتھل ٹرانسفریز کی روک تھام 9-امائنو-1،2,3،4-ٹیٹراہائیڈروآکریڈائن (THA) کے ذریعے۔ بائیو کیم فارماکول۔ 1990؛ 40:1345-50۔ https://doi.org/10۔ 1016/0006-2952(90)90402-7۔

71. Cavallito JC، Nichol CA، Brenckman WD، et al. dihydrofolate reductase کے لپڈ میں گھلنشیل روکنے والے۔ I. حرکیات، بافتوں کی تقسیم، اور چوہے، کتے اور انسان میں پائریمیتھامین، میتھوپرین، اور ایٹورفین کے تحول کی حد۔ ڈرگ میٹاب ڈسپوز۔ 1978؛ 6:329–37۔

72. Nishibori M، Oishi R، Itoh Y، et al. 9-Amino-1, 2, 3, 4-Tetrahydroacridine ہسٹامین N-methyltransferase کا ایک طاقتور روکنا ہے۔ جے پی این جے فارماکول۔ 1991؛ 55:539-46۔ https://doi.org/10.1254/jjp.55۔ 539.

73. ہاف ایل بی، کھنڈیلوال جے کے، گرین جے پی۔ میتھوپرین کے ذریعہ دماغی ہسٹامین میٹابولزم کی روک تھام۔ بائیو کیم فارماکول۔ 1986؛ 35:307–10۔ https://doi.org/10.1016/0006-2952(86)90530-7۔

74. Kaneko H, Koshi S, Hiraoka T, et al. ڈائمین آکسیڈیس کے ذریعے گردے کی پوسٹ اسکیمک ریپرفیوژن چوٹ کی روک تھام۔ بائیوکیم بایوفیس ایکٹا۔ 1998؛ 1407: 193-9۔ https://doi.org/10.1016/S0925- 4439(98)00039-8۔

75. کوشی S، Inoue M، Obayashi H، et al. ڈائمین آکسیڈیس کے ذریعہ چھوٹی آنت کی پوسٹ اسکیمک ریپرفیوژن چوٹ کی روک تھام۔ بائیوکیم بایوفیس ایکٹا۔ 1991؛ 1075:231-6۔ https://doi.org/10.1016/ 0304-4165(91)90271-H

Matthias Karer1 · Marlene Rager‑Resch1 · Teresa Haider2 · Karin Petroczi1 · Elisabeth Gludovacz3 · Nicole Borth3 · Bernd Jilma1 · Thomas Boehm1

1 کلینکل فارماکولوجی کا شعبہ، میڈیکل یونیورسٹی ویانا، واہرنگر گوئرٹیل 18-20، 1090 ویانا، آسٹریا

2 ڈیپارٹمنٹ آف نیوروفیسولوجی، سینٹر فار برین ریسرچ، میڈیکل یونیورسٹی ویانا، ویانا، آسٹریا

3 ڈیپارٹمنٹ آف بائیو ٹیکنالوجی، یونیورسٹی آف نیچرل ریسورسز اینڈ لائف سائنسز، ویانا، آسٹریا