ڈیزل ایگزاسٹ ایکسپوژر زیبرا فش دماغوں میں نیوروڈیجنریشن میں ملوث نیٹ ورکس کے اظہار کو بدل دیتا ہے حصہ 2

پروٹین کے نمونے کی تیاری

پروٹین کے نمونے تیار کرنے کے لیے، 80 سے لے کر 100 اینستھیٹائزڈ لاروا (5 pdf) کے سروں کو احتیاط سے الگ کیا گیا تھا اور lysis بفر میں منتقل کرنے سے پہلے PBS سے دھویا گیا تھا جس میں 15% پری کولڈ TCA/acetone پر مشتمل تھا جس میں 0.07% beta-mercaptoethanol (ME) تھا۔ )اور پروٹیز انحیبیٹر کاکٹیل (کارخانہ دار کی ضرورت ہے) 500 ul کے کل حجم میں۔

حالیہ برسوں میں، یادداشت پر پروٹین کے نمونوں کے اثرات میں کافی دلچسپی رہی ہے۔ زیادہ سے زیادہ لوگ صحت کے لیے خوراک کی اہمیت کو سمجھنے لگے ہیں، خاص طور پر انسانی جسم میں پروٹین کا اہم کردار۔

پروٹین انسانی جسم کی بنیادی تعمیراتی مواد ہیں اور یہ انسانی جسم میں اہم کردار ادا کرتے ہیں۔ اس کی وجہ سے، پروٹین کے نمونے صحت اور خوبصورتی کے حصول میں بہت سے لوگوں کے لیے ایک اہم ذریعہ بن چکے ہیں۔ پٹھوں کی تعمیر اور جسم کا مجسمہ بنانے کے علاوہ، پروٹین کے نمونے کسی شخص کی یادداشت کو بھی بہتر بنا سکتے ہیں۔

کچھ سائنسدانوں نے پروٹین اور میموری کے درمیان تعلق کا مطالعہ کیا ہے۔ انہوں نے پایا کہ کافی پروٹین کا طویل مدتی استعمال جسمانی صحت کے تمام پہلوؤں خصوصاً یادداشت کے لیے فائدہ مند ہے۔ اس بات کے بڑھتے ہوئے ثبوت ہیں کہ غذائی پروٹین کی مقدار دماغی افعال اور یادداشت پر اہم اثر ڈالتی ہے۔

پروٹین انسانی دماغ میں نیوران کا ایک اہم جز ہے، اس لیے روزانہ پروٹین کی مقدار لوگوں کی یادداشت اور سوچنے کی صلاحیت پر اہم اثر ڈالتی ہے۔ طویل مدتی پروٹین کا استعمال نہ صرف جسم کی پروٹین کی ضروریات کو پورا کرتا ہے بلکہ دماغ کو فعال اور صحت مند رہنے میں بھی مدد کرتا ہے۔

اس کے علاوہ، پروٹین بھی جسم کو خون میں شکر کے توازن کو برقرار رکھنے اور ایک مستحکم موڈ کو برقرار رکھنے میں مدد کرسکتا ہے. یادداشت اور سوچنے کی مہارت کو برقرار رکھنے کے لیے یہ بہت ضروری ہے۔ لہذا، پروٹین کی معتدل مقدار انسانی جسم کے مختلف علمی افعال اور جذباتی حالتوں کو بہتر بنانے میں مدد کر سکتی ہے۔

مجموعی طور پر، پروٹین کے نمونوں اور یادداشت کے درمیان ایک مضبوط تعلق ہے۔ آپ کے پروٹین کی مقدار میں اضافہ آپ کے دماغ اور جسم کو صحت مند رکھنے، سوچنے کی صلاحیتوں اور یادداشت کو بہتر بنانے میں مدد کرتا ہے۔ جن لوگوں کو اپنی یادداشت کو بہتر بنانے کی ضرورت ہے، ان کے لیے مناسب مقدار میں پروٹین کا استعمال بہت ضروری ہے۔ صحت مند جسم اور دماغ کو تیز رکھنے کے لیے ہمیں پروٹین والی غذائیں مناسب طریقے سے کھائیں اور مناسب کھانوں پر توجہ دیں۔ یہ دیکھا جا سکتا ہے کہ ہمیں یادداشت کو بہتر بنانے کی ضرورت ہے، اور Cistanche deserticola نمایاں طور پر یادداشت کو بہتر بنا سکتا ہے، کیونکہ Cistanche deserticola میں اینٹی آکسیڈینٹ، اینٹی انفلامیٹری، اور اینٹی ایجنگ اثرات ہوتے ہیں، جو دماغ میں آکسیڈیشن اور سوزش کے رد عمل کو کم کرنے میں مدد کر سکتے ہیں، اس طرح دماغ کی حفاظت کرتا ہے۔ اعصابی نظام کی صحت. اس کے علاوہ، Cistanche deserticola اعصابی خلیوں کی نشوونما اور مرمت کو بھی فروغ دے سکتا ہے، اس طرح اعصابی نیٹ ورکس کے رابطے اور کام کو بڑھاتا ہے۔ یہ اثرات یادداشت، سیکھنے اور سوچنے کی رفتار کو بہتر بنانے میں مدد کر سکتے ہیں، اور ادراک کی خرابی اور نیوروڈیجنریٹیو بیماریوں کی نشوونما کو بھی روک سکتے ہیں۔

یادداشت کو بڑھانے کے لیے سپلیمنٹس جاننے پر کلک کریں۔

مختصر ہم آہنگی کے بعد، پروٹین کو 12 گھنٹے کے لیے 20 ڈگری پر، اس کے بعد سینٹرفیوگریشن 12،000 rpm پر 5 منٹ کے لیے 4 ڈگری پر کیا گیا۔ سپرناٹینٹ کو ہٹا دیا گیا تھا، اور پروٹین پیلٹ کو کولڈ ایسٹون کے ساتھ دو بار دھویا گیا تھا (جس میں 0 تھا۔{11}}7% ME اور پروٹیز انحیبیٹر کاک ٹیلز تھے۔) آخری پروٹین گولی کو 7.0 M یوریا پر مشتمل لیسیز بفر میں تحلیل کیا گیا تھا، اور 2.0 M thiourea by sonicationon ice.

گھلنشیل پروٹین کے نمونوں کو 15،000 rpm پر 10 منٹ کے لیے 4 ڈگری پر غیر حل پذیر ذرات کے لیے سینٹرفیوج کیا گیا، اور بریڈ فورڈ میتھڈ کا استعمال کرتے ہوئے حتمی پروٹین کے نمونوں کی حراستی کی پیمائش کی گئی۔

TMT پر مبنی ہائی تھرو پٹ پروٹومکس تجزیہ

ٹرپسن اور لیس-سی پروٹیز کے ترتیب وار اضافے سے نمونے کم، الکائیلیٹڈ اور ہضم ہوئے۔ اس کے بعد پیپٹائڈس کو مینوفیکچرر کی ہدایات کے مطابق 10-plexTMT isobaric ٹیگز کا استعمال کرتے ہوئے لیبل لگایا گیا تھا۔ لیبل لگائے گئے نمونوں کو ملایا گیا اور پھر ہائی پی ایچ ریورسڈ فیز کرومیٹوگرافی کا استعمال کرتے ہوئے ان کو ٹھیک کیا گیا۔

اس کے بعد انفرادی حصوں کا تجزیہ LC–MS/MS کے ذریعے آن لائن ریورسڈ فیز کرومیٹوگرافی اور ٹینڈم ماس سپیکٹرو میٹری آن تھرموفسشر فیوژن Lumos ماس سپیکٹرو میٹر کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا۔ ڈیٹا ہم وقت ساز پیشگی انتخاب پر مبنی MS3 طریقہ کا استعمال کرتے ہوئے حاصل کیا گیا، جیسا کہ پہلے بیان کیا گیا ہے۔ ڈیٹا بیس کی تلاش اور TMT رپورٹر آئن کی معلومات کو نکالنا MaxQuant سافٹ ویئر پلیٹ فارم (Cox and Mann 2008) کا استعمال کرتے ہوئے انجام دیا گیا۔

TMT ڈیٹا کراس نمونوں کا موازنہ MSSstats (Choiet al. 2014) کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا تھا۔ ٹرانسکرپٹومک تجزیہ تقریباً 80-100 سروں کو بے ہوشی والے ایمبریو (120 h) سے الگ تھلگ کیا گیا تھا، PBS سے دھویا گیا تھا، اور کل RNA نکالنے کا نشانہ بنایا گیا تھا۔ , USA) کارخانہ دار کی ہدایات کے بعد ریجنٹ۔

RNA کے معیار اور مقدار کا جائزہ NanoDrop2000 spectrophotometer (Thermo Scientific, MA) کے ذریعے کیا گیا اور مزید Agilent 2100 Bioanalyzer کے ذریعے 50 ng/ul اور RNA انٹیگریٹی نمبر (RIN) کی کم از کم ارتکاز کو یقینی بنانے کے لیے 8 کا استعمال کیا گیا۔ پروٹوکول: "TruSeqStranded Total RNA Library Prep Workflow with Ribo-Zero Gold،" اور نمونے درج ذیل شرائط پر ترتیب دیئے گئے تھے: "Paired End run,R1=75 سائیکل (antisense strand), Index=8 سائیکل، R2=75 سائیکل (سنس اسٹرینڈ)۔"

ڈیٹا کا تجزیہ

پروٹومک اور ٹرانسکرپٹومکس اسٹڈیز کے دونوں ڈیٹاسیٹس کو بیک وقت آن لائن ٹول میٹا اسکیپ کا استعمال کرتے ہوئے اپ لوڈ اور تجزیہ کیا گیا تھا، جو مختلف پرجاتیوں کے لیے جین کی تشریح کی اجازت دیتا ہے، بشمول ڈینیو ریریو (Zhou et al. 2019)۔ پروٹومک یا ٹرانسکرپٹومکس میں سے کسی ایک کی شراکت کا جائزہ لینے کے لیے، ڈیٹاسیٹ میں ڈیٹاسیٹ تھے۔ Ingenuity Pathways Analysis (IPA) سافٹ ویئر (Krämer et al. 2014) کے استعمال کے ذریعے تجزیہ کیا گیا۔

جین یا پروٹین کے شناخت کنندگان اور متعلقہ اظہاری اقدار پر مشتمل ڈیٹا سیٹ ایپلی کیشن میں اپ لوڈ کیے گئے تھے۔ ہر شناخت کنندہ کو Ingenuity کے نالج بیس میں اس کے متعلقہ آبجیکٹ کے ساتھ میپ کیا گیا تھا۔

1 کا ایکسپریشن الٹریشن کٹ آف۔{1}}فولڈ ان مالیکیولز کی شناخت کے لیے سیٹ کیا گیا تھا جن کے اظہار کو مختلف طریقے سے ریگولیٹ کیا گیا تھا۔ فنکشنل تجزیہ نے ان حیاتیاتی افعال اور/یا بیماریوں کی نشاندہی کی جو ڈیٹا سیٹ کے لیے سب سے اہم تھیں۔ ڈیٹاسیٹ کے مالیکیولز جو کٹ آف کرتے ہیں اور حیاتیاتی افعال سے وابستہ تھے تجزیہ کے لیے غور کیا گیا۔ Right-tailedFisher کے عین مطابق ٹیسٹ کا استعمال p-value کے حساب سے اس امکان کا تعین کرنے کے لیے کیا گیا تھا کہ اس ڈیٹا سیٹ کو تفویض کردہ ہر حیاتیاتی فعل اور/یا بیماری صرف موقع کی وجہ سے ہے۔

راستے کا تجزیہ

مخصوص راستوں میں پروٹوم اورٹرانسکرپٹوم پروفائل تبدیلیوں میں سے کسی کی شراکت کا جائزہ لینے کے لیے، دونوں ڈیٹاسیٹس کو IPA سافٹ ویئر (Krämer et al. 2014) پر اپ لوڈ کیا گیا تھا۔ اس کے بعد سب سے اہم تبدیل شدہ کینونیکل راستوں کا مزید جائزہ لیا گیا اور پی سی آر اور ویسٹرن بلوٹنگ کا استعمال کرتے ہوئے تشریح کی گئی جیسا کہ ذیل میں بیان کیا گیا ہے۔

مغربی دھبہ

کل 25 µg پروٹینز کو 12%NuPAGE (Novex, CA) پر لوڈ کیا گیا اور PVDFmembranes (Novex, CA) پر منتقل کیا گیا جیسا کہ بیان کیا گیا ہے (محمودیان ثانی et al. 2017; Rafee et al. 2019)۔ جھلیوں کو Tris-bufferedsaline میں 5% سکم دودھ اور 0.01% tween 20 (TBST بفر) کے ساتھ 30 منٹ کمرے کے درجہ حرارت کے ساتھ بلاک کیا گیا تھا اور پھر اسے رات بھر 4 ڈگری پر خرگوش پولی کلونل اینٹی Cyp1A1 (Abcam, CA) یا ماؤس-APHNal anti-APHD کے ساتھ روک دیا گیا تھا۔ Abcam, CA)، TBST بفر میں 1% سکم دودھ پر مشتمل ہے۔

ٹی بی ایس ٹی میں دھونے کے بعد، دھبوں کو ثانوی گدھے کے اینٹی خرگوش-ایچ آر پی (ابکیم، سی اے) یا بکرے کے اینٹی ماؤس-ایچ آر پی (سانتا کروز، سی اے) اینٹی باڈیز کے ساتھ 2 گھنٹے تک سینک دیا گیا، اس کے بعد پیئرس ™ ای سی ایل پلس ویسٹرن بلوٹنگ سبسٹریٹ کے ساتھ ترقی ہوئی۔ تھرمو فشر سائنٹیفک، USA)۔ بینڈز کو LI-COR سکینر کا استعمال کرتے ہوئے امیجنگ کے ذریعے تصور کیا گیا اور کثافت کی پیمائش (LI_COR بایوسینسز، NE) کے ذریعے تجزیہ کیا گیا۔

ریئل ٹائم پی سی آر

مینوفیکچرر کی ہدایات پر عمل کرتے ہوئے TRIzol reagent (Sigma Aldrich, Saint Louis, USA) کا استعمال کرتے ہوئے ٹوٹل RNA کو سروں سے الگ کیا گیا اور پھر NanoDrop 2000 spectrophotometer (Thermo Scientific, MA) کا استعمال کرتے ہوئے اس کی پیمائش کی گئی۔ iScript™ ریورس ٹرانسکرپشن سپرمکس (Bio-Rad, CA) کا استعمال کرتے ہوئے 1 ug کی رقم کو ریورس ٹرانسکرپٹ کیا گیا تھا، اور حقیقی وقت کا PCR SsoAdvancedUniversal SYBR Green supermix (Bio-Rad, CA) کا استعمال کرتے ہوئے انجام دیا گیا تھا، اور پرائمر درج ہیں۔ ضمنی جدول میں 1۔2−ΔΔCT طریقہ کا استعمال کرتے ہوئے متعلقہ اظہار کی سطحوں کا حساب لگایا گیا، اور شماریاتی T-ٹیسٹ کا استعمال اہم فرقوں کا اندازہ کرنے کے لیے کیا گیا۔

نتائج اور مباحثہ

پروٹومک اور ٹرانسکرپٹومک تجزیے بیماری کے عمل اور ماحولیاتی محرکات کے جواب میں مالیکیولر میکانزم کو سمجھنے کے لئے دو بڑے ٹولز ہیں (Duan et al. 2017; García-Estrada et al.2013; Jami et al. 2014a, b, 2015; al.2015; کو . یہاں، ہم نے ڈی ای پی کے سامنے آنے والے زیبرا فش ایمبریو کے سروں میں ٹرانسکرپٹومک اور پروٹومک دونوں سطحوں کا گہرا اظہار تجزیہ کیا۔

زیادہ تر دماغی بافتوں پر مشتمل سروں کو دوسرے ٹشوز کے اظہاری پروفائلز کو ختم کرنے کے لیے الگ تھلگ کیا گیا تھا کیونکہ ہم سی این ایس کے اندرونی پیتھولوجیکل راستوں کا تعین کرنے میں دلچسپی رکھتے ہیں۔

زیبرا فشمبریوس کے سروں کا ایکسپریشن پروفائل

پروفائل کے تجزیے سے 26،000 کوڈنگ جینز (Howe et al. 2013) میں سے 11,172 دریافت شدہ پروٹین اور 14,748 mRNA اہداف حاصل ہوئے۔ TMT کے لیبل والے نمونوں (ضمنی جدول 2) سے شناخت کیے گئے 11,172 پروٹینوں میں سے، 141 پروٹین کو نمایاں طور پر الگ کر دیا گیا، اور 607 کو کم کیا گیا (ضمنی جدول 3 اور تصویر 1a)۔ اسی طرح، RNA-seq تجزیہ (تصویر 1b اور سپلیمنٹری ٹیبل 5) میں پائے جانے والے 14,748 ٹرانسکرپٹس (ضمنی جدول 4) میں سے 367 ٹرانسکرپٹس کو ریگولیٹ کیا گیا، اور 149 کو کم کیا گیا۔
زیادہ تر معاملات میں، اپریگولیٹڈ پروٹومک اور ٹرانسکرومیٹک تجزیوں کے نتائج یکساں تھے۔ مثال کے طور پر، سب سے اوپر انتہائی اپریگولیٹڈ پروٹین جن میں سائٹوکوم P450 Cyp1a، Cyp1c1، Guaninenucleotide-binding protein subunit gamma، Annexin، Plexin B2b شارٹ آئسوفارم، Dehydrogenase/reductase (SDR فیملی) ممبر 13-جیسے 1-glandinepine کی طرح (گرفتار) بی، اور سلفوٹرانسفریز 6 بی 1۔

اسی طرح، سب سے زیادہ ٹرانسکرپٹومیکیو ریگولیشن والے جینوں میں سائٹوکوم P450 (Cyp1a)، کیموکائن (C–C motif) ligand 27a، aryl-hydrocarbonreceptor repressor A، cytochrome P450 (Cyp1b)، اور Rh فیملی C، پروٹین، گلائکوپروٹیروٹی پر مشتمل ہے، اور پروٹین پر مشتمل ہے۔ ہمیشہ انتہائی باہم مربوط نہیں تھے۔

مثال کے طور پر، Complexin 2، Spectrin alpha، Cardiac myosin light chain-1, SEC23 تعامل کرنے والا پروٹین، ATPsynthase membrane subunit EA، Cytochrome b، اور NAD پر منحصر پروٹین deacetylase سب سے اوپر والے انتہائی گھٹے ہوئے پروٹینز میں سے ہیں، جبکہ retinalouter segment membrane پروٹین کا حصہ۔ ، محلول کیریئر فیملی 5 (آئوڈائڈ ٹرانسپورٹر)، ایف بی جے مورین آسٹیوسارکوما وائرل آنکوجین ہومولوگ بی، کمپلیکن 4 سی، ایف او ایس لائیک اینٹیجن 1 اے، اوپسن 1، اور وی فوس نقل کی سب سے زیادہ کمی کو ظاہر کرتے ہیں (ٹیبلز 1 اور 2)۔

زیبرا فش پروٹین کو پہچاننے والی اینٹی باڈیز محدود ہیں، لیکن ہم نے مغربی بلٹ تجزیہ کا استعمال کرتے ہوئے ان تبدیلیوں کے نمونے کی تصدیق کی۔ Cyp1A پروٹین کی اپ گریجشن اور Complexin 2 (CPLX2) کی کمی کی تصدیق GAPDH کو بطور لوڈنگ کنٹرول (تصویر 2a) کے استعمال سے کی گئی۔ TAT اور UGT1B1 ٹرانسکرپشن کے اعلی درجے اور CHNRB اور TH2 کی نچلی سطحوں کی بھی تصدیق کی گئی qPCR نے ایلف الفا کو اندرونی کنٹرول کے طور پر استعمال کرتے ہوئے (تصویر 2b)۔

جین کی تشریح

کئی آن لائن بائیو انفارمیٹک ٹولز اور سافٹ ویئر ہیں جو مفید معلومات اونجین تشریح فراہم کر سکتے ہیں۔ ان میں، میٹا اسکیپ، ڈینیو ریریو (Zhouet al. 2019) کے لیے جین تشریح کی صلاحیت کے ساتھ، اس کام میں استعمال کیا گیا تھا۔

پروٹومک اور ٹرانسکرپٹومک اسٹڈیز کے لیے دونوں ڈیٹا سیٹ بیک وقت اس آن لائن ٹول کا استعمال کرتے ہوئے اپ لوڈ اور تجزیہ کیے گئے تھے۔ سافٹ ویئر میں پروٹومک اور ٹرانسکرپٹومک دونوں تبدیلیوں کے آؤٹ پٹ کو یکجا کرنے کے بعد، متعدد عمل جیسے کہ زینو بائیوٹک محرک کا ردعمل، زینو بائیوٹک کا میٹابولزم، پی آر سی 4 کے ذریعے ایکسپریشن ایکسپریشن 5 ریگجینیکیشن DEPe علاج (تصویر 3a) کے بعد پایا گیا تھا۔

اس تجزیے نے حیاتیاتی عمل کی دبی ہوئی سطحوں کا بھی مشورہ دیا جیسے کہ "بصری ادراک،" "فوٹو ٹرانسڈکشن،" اور "جی پروٹین کپلڈ ریسیپٹر انٹرنلائزیشن"۔ بصارت سے متعلق ایکسپریشن پروفائلز میں تبدیلیاں غیر متوقع نہیں تھیں کیونکہ ابتدائی نشوونما کے دوران DEPe علاج کے نتیجے میں آنکھیں چھوٹی ہوئیں (ڈیٹا نہیں دکھایا گیا)۔

زینو بائیوٹک میٹابولزم سگنلنگ

Xenobiotics، جو کہ غیر ملکی قدرتی یا مصنوعی کیمیائی مرکبات ہیں، سیلولر تناؤ کے ردعمل کو متحرک کر سکتے ہیں، جس سے تفریق، پھیلاؤ، apoptosis، یا necrosis کا باعث بنتا ہے۔ درحقیقت، جسم کو انزائمز اور ٹرانسپوٹرز کے اظہار کے ذریعے، جو ان کے خاتمے اور سم ربائی میں ملوث ہیں، کو زین بائیوٹکس، اور زہریلے اینڈوجینس مرکبات اور ان کے میٹابولائٹس سے فعال طور پر خود کو بچانے کی ضرورت ہے۔

ان انزائمز کو تین گروپوں میں درجہ بندی کیا گیا ہے: فیز آئی انزائمز (CYP, ALDH, FMO) جو کہ xenobiotics میں پولرٹی متعارف کراتے ہیں۔ فیز II انزائمز (UGT,GST, SULT) جو ہائیڈرو فیلک مالیکیولز جیسے سلفیٹ، گلوکورونک ایسڈ، اور گلوٹاتھیون کو زین بائیوٹکس سے جوڑنے کے ذریعے ہائیڈرو فیلیسیٹی کو متعارف کراتے ہیں؛ اور فیز III انزائمز (MDR1، OATP2، MRP) جو کہ Xenjubiotics کے دوران نقل و حمل کرتے ہیں خلیاتی علاقے میں۔

یہ انزائمز سگنلنگ جھرنوں کے ذریعے حوصلہ افزائی کرتے ہیں جن میں مخصوص رسیپٹرز (CAR, PXR, AHR) اور MAPK-ثالثی نقل کے عوامل (NRF2, MAF) (Omiecinski et al. 2011) شامل ہوتے ہیں۔

ایکٹیویٹرز کی غیر موجودگی میں، تشکیلاتی طور پر فعال ریسیپٹر (CAR) CCRP اور HSP90 کے ساتھ سائٹوپلازم آسا کمپلیکس میں واقع ہے۔ لیکن جب ایک ایکٹیویٹر موجود ہوتا ہے، تو CAR نیوکلیو میں منتقل ہوتا ہے اور RXR سے جڑ جاتا ہے تاکہ ایک ہیٹروڈائمر بنتا ہے اور مزید دہرائے جانے والے موٹف کی کئی اقسام، جیسے DR3، DR4، ER6، اور ER8 سے منسلک ہوتا ہے، اور جین ایکسپریشن ریگولیشن میں حصہ ڈالتا ہے (ضمنی جدول 2)۔

ہمارے پروٹومکس تجزیہ نے ایکسینو بائیوٹک میٹابولزم کو چالو کرنے کا انکشاف کیا۔ درحقیقت، CYP1A1، CYP3A7، HMOX1 (heme oxygenase 1) CAT (catalase)، اور CES1 (carboxylesterase 1) کی واضح اپ گریجولیشن فیز I میٹابولزم کی شمولیت کو ظاہر کرتی ہے، جبکہ UGT1A1 (UDP glucuronosyl STF1) کے بڑھتے ہوئے اظہار کو ظاہر کرتا ہے۔ glutathioneS-transferase pi 1) فیزII میٹابولزم کو چالو کرنے کی نشاندہی کرتا ہے۔

دلچسپ بات یہ ہے کہ SULT1A1 (sulfotransferasefamily 1A member 1) SULT1C2 (sulfotransferasefamily 1C member 2) اور SULT2B1 (sulfotransferase family 2B member 1) جیسے سلفیٹ کی منتقلی کی کمی سے پتہ چلتا ہے کہ 10000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000٪ اور گلوٹاتھیون ، لیکن سلفیٹ کنجوجیشن نہیں (تصویر 4)۔

ٹرانسکرپٹومک مطالعہ کے نتائج کافی مطابقت رکھتے ہیں، کیونکہ CYP1A، CYP1B، CYP3A7، GSTO1، GSTP1، اور UGT1A1 سبھی آر این اے کی سطح پر الگ الگ ہیں۔ تاہم، SULT2B1 آر این اے کی سطح پر اپ گریجشن کو ظاہر کرتا ہے (جبکہ پروٹین کی سطح پر کم نمائندگی کرتا ہے)۔

یہ دوسرے میکانزم کے ملوث ہونے کی وجہ سے ہو سکتا ہے جو DEPe کے ساتھ سلفیٹ ٹرانسفراز انزائم سوپون ٹریٹمنٹ کے انحطاط یا غیر فعال ہونے کا باعث بنتے ہیں۔ خاص طور پر حیران کن بات یہ ہے کہ xenobiotic میٹابولزم میں یہ تبدیلیاں مچھلی کے سروں (ممکنہ طور پر دماغ) میں ہوتی ہیں۔ ممالیہ جانوروں کے اعصابی نظام میں زینو بائیوٹک جینز کا اظہار بیان کیا گیا ہے، لیکن زیبرا فش کے دماغوں میں یہ ان کی پہلی رپورٹ ہے (McMillan and Tyndale 2018)۔

یہ نتائج شنکر اور ساتھی کارکنوں کے ذریعہ کئے گئے اسی طرح کے مطالعے سے مطابقت رکھتے ہیں جنہوں نے جنین کی نشوونما پر ماحولیاتی پولی سائکلک آرومیٹک ہائیڈرو کاربن (PAHs) کے مختلف گروپوں کے اثرات کی جانچ کی اور ٹرانسکرپٹوم پروفائل پر ہر علاج معالجے کے اثرات کا مزید جائزہ لیا۔

48 hpost-fertilization (hpf) ایمبریو کے پورے جسم پر، انہوں نے نقل اور پروٹین دونوں سطحوں پر Cyp1a کی اپ گریجولیشن کو xenobiotic AHR ایکٹیویشن اور ڈاؤن اسٹریم ٹرانسکرومک تبدیلیوں کا ابتدائی قابل اعتماد بائیو مارکر دکھایا (شنکر ایٹ ال۔ 2019)۔

NRF2-ثالثی آکسیڈیٹیو تناؤ کا ردعمل

آکسیڈیٹیو تناؤ اپوپٹوس اور نیکروسس کو متحرک کر سکتا ہے اور خیال کیا جاتا ہے کہ یہ نیوروڈیجنریشن میں ملوث ہے

نیوکلیئر فیکٹر-اریتھرایڈ 2-متعلقہ فیکٹر 2(Nrf2) پروموٹر اینٹی آکسیڈینٹ رسپانس عناصر (ARE) سے منسلک ہوتا ہے اور ان کی نقل کو فعال کرتا ہے۔ غیر فعال Nrf2 ایکٹین بائنڈنگ پروٹین کیپ 1 سے وابستہ ہے اور اسے سائٹوپلازم میں برقرار رکھا جاتا ہے۔

آکسیڈیٹیو تناؤ کی وجہ سے متحرک، Nrf2 پروٹین کناز C، فاسفیٹائیڈلینوسیٹول 3-کناز، اور MAP کناز کے راستوں کے جواب میں فاسفوریلیٹڈ ہے۔ فاسفوریلیٹڈ Nrf2 پھر نیوکلئس میں منتقل ہو سکتا ہے اور AREsto کو ٹرانس ایکٹیویٹ detoxifying اور antioxidant enzymes (ضمنی جدول 3) (Ma 2013) کو باندھ سکتا ہے۔

For more information:1950477648nn@gmail.com