قدرتی سکریپی کے مختلف دماغی خطوں میں مخصوص ٹول نما رسیپٹرز جین کا اظہار اور چمکیلی ردعمل حصہ 1

خلاصہ:

پرین کی بیماریاں دائمی اور مہلک نیوروڈیجینریٹو بیماریاں ہیں جن کی خصوصیت بیماری کے لیے مخصوص پرین پروٹین (PrPSc)، سپنجفارم تبدیلیاں، نیورونل نقصان، اور گلیوسس کا جمع ہونا ہے۔

پریون کی بیماری، جسے مندر میلے کی بیماری، موم کھانے کی بیماری، وغیرہ بھی کہا جاتا ہے، ایک شدید وائرل انفیکشن ہے جو prions کی وجہ سے ہوتا ہے۔ یہ بیماری بنیادی طور پر پرائینز پر مشتمل بغیر پکے ہوئے کھانے سے پھیلتی ہے۔ ایک بار پرائینز سے متاثر ہونے کے بعد، یہ دماغ کی سوزش اور اعصابی نظام کو نقصان پہنچا سکتا ہے، اور سر درد، الٹی، اور بخار جیسی علامات پیدا ہو سکتی ہیں۔

تاہم، جب ایسی صورت حال کا سامنا کرنا پڑتا ہے، تو ہم پرین کی بیماری کی وجہ سے اپنی یادداشت پر اعتماد نہیں کھو سکتے۔ زیادہ تر متاثرہ افراد علاج کے بعد اپنی یادداشت بحال اور بحال کر سکتے ہیں۔

بلاشبہ، احتیاطی نقطہ نظر سے، ہم prion انفیکشن سے بچنے کے لیے زیادہ پکا ہوا کھانا کھانے کی کوشش کر سکتے ہیں۔ اس کے ساتھ ہی، اگر آپ کو کوئی علامات محسوس ہوتی ہیں، تو آپ کو جلد از جلد ڈاکٹر سے ملنا چاہیے تاکہ بیماری کو مزید بگڑنے سے بچایا جا سکے۔

روزمرہ کی زندگی میں، ہم اپنی یادداشت کو بہتر بنانے کے لیے کچھ آسان یادداشت کی تربیت آزما سکتے ہیں، جیسے پڑھنا، فہرستیں مرتب کرنا، واقعات اور معلومات کو ترتیب دینا وغیرہ۔ ان تربیتوں میں زیادہ وقت اور توانائی کی ضرورت نہیں ہوتی، لیکن یہ صحت مند دماغ اور یادداشت کے موثر افعال کو برقرار رکھنے کے لیے بہت اہم ہیں۔

مختصراً، جب پرین بیماری جیسی بیماریوں کا سامنا کرنا پڑتا ہے، تو ہمیں اس کا مثبت انداز میں سامنا کرنا چاہیے، پیشہ ورانہ طبی علاج اور احتیاطی تدابیر اختیار کرنی چاہیے، اور اپنی جسمانی صحت اور موثر کام کو یقینی بنانے کے لیے روزانہ یادداشت کی مشقوں پر توجہ دینی چاہیے۔ یہ دیکھا جا سکتا ہے کہ ہمیں یادداشت کو بہتر بنانے کی ضرورت ہے، اور Cistanche یادداشت کو نمایاں طور پر بہتر بنا سکتا ہے کیونکہ Cistanche ایک روایتی چینی ادویاتی مواد ہے جس میں بہت سے منفرد اثرات ہیں، جن میں سے ایک یادداشت کو بہتر بنانا ہے۔ Cistanche کا اثر اس میں موجود مختلف فعال اجزاء سے آتا ہے، بشمول tannic acid، polysaccharides، flavonoid glycosides وغیرہ۔ یہ اجزاء مختلف طریقوں سے دماغی صحت کو فروغ دے سکتے ہیں۔

دماغی افعال کو بہتر بنانے کے طریقے جاننے پر کلک کریں۔

بڑھتے ہوئے شواہد سے پتہ چلتا ہے کہ نیورو انفلامیٹری ردعمل priondiseases کا ایک اہم جزو ہے اور neurodegeneration میں حصہ ڈالتا ہے۔

ٹول نما رسیپٹرز (TLRs) کو مرکزی اعصابی نظام میں پیدا ہونے والے فطری مدافعتی ردعمل کے اہم ثالثوں کی تجویز پیش کی گئی ہے جو کہ دیگر انسانی اعصابی امراض بشمول الزائمر کی بیماری، پارکنسنز کی بیماری، اور امیوٹروفک لیٹرل سکلیروسیس۔

تاہم، پرین کی بیماریوں میں TLRs کے کردار کے بارے میں بہت کم معلوم ہے، اور قدرتی سکریپی کے نیوروپیتھولوجی میں ان کی شمولیت کا مطالعہ نہیں کیا گیا ہے۔ ہم نے قدرتی سکریپی سے متاثرہ بھیڑوں میں چار جسمانی طور پر الگ دماغی خطوں میں بیضوی TLRs کے جین اظہار کا اندازہ کیا اور جین کے اظہار اور prion بیماری کے پیتھولوجیکل علامات کے مابین ممکنہ ارتباط کا جائزہ لیا۔

ہم نے اسکریپی سے متاثرہ بھیڑوں میں TLR اظہار میں اہم تبدیلیاں دیکھی ہیں جو مطالعہ کیے گئے ہر ایک خطے میں اسپنجیوسس، PrPSc جمع، اور گلیوسس کی ڈگری سے منسلک ہیں۔

قابل ذکر بات یہ ہے کہ نیوروپیتھولوجی کی شدت سے قطع نظر، TLR4 واحد جین تھا جو تمام خطوں میں اپ گریڈ کیا گیا تھا۔ ہپپوکیمپس میں، ہم نے متضاد TLR جین ایکسپریشن پروفائل سے وابستہ ہلکے نیوروپیتھولوجی کا مشاہدہ کیا اور ایک عجیب مائکروگلیئل مورفولوجی کی موجودگی کا مشاہدہ کیا، جسے rodmicroglia کہا جاتا ہے، یہاں پہلی بار سکریپی سے متاثرہ بھیڑوں کے دماغ میں بیان کیا گیا ہے۔

ان خصوصیات کا اتفاق ہپپوکیمپس کے جزوی نیورو پروٹیکشن کی تجویز کرتا ہے۔ آخر میں، قدرتی طور پر متاثرہ بھیڑوں کے مقابلے میں بڑے سائز کے ماؤس ماڈل (tg338 چوہوں) میں پائے جانے والے نتائج کے موازنہ سے TLRgene اظہار کے مختلف نمونوں کا انکشاف ہوا۔

مطلوبہ الفاظ: prion; سکریپی ٹول نما رسیپٹرز؛ neuroinflammation؛ مائکروگلیہ astrocytes

1. تعارف

ٹرانسمیسیبل اسپونجفارم انسیفالوپیتھیز (TSEs) یا prion بیماریاں، ایک مہلک اعصابی بیماریاں ہیں جن میں انسانوں میں Creutzfeldt–Jakob disease (CJD)، بھیڑوں اور بکریوں میں اسکریپی، مویشیوں میں بوائین اسپونگیفارم انسیفالوپیتھی (BSE)، اور chronicwaters کی بیماریاں شامل ہیں۔ CWD)۔

یہ TSEs میزبان انکوڈڈ پرین پروٹین (PrPC) کی ایک متعدی isoform، PrPSc میں تبدیلی کی طرف سے خصوصیت رکھتے ہیں، جو ترجیحی طور پر اعصابی نظام اور لمفورٹیکولر نظام (LRS) میں جمع ہوتا ہے، اور مرکزی اعصابی نظام (CNS) میں ایک سوزش مدافعتی ردعمل [1] ,2]۔پریون کی بیماریاں، جیسے سکریپی، قدرتی طور پر PrPSc کی زبانی نمائش سے حاصل کی جا سکتی ہیں۔

آنتوں کی رکاوٹ کو عبور کرنے اور لیمفائیڈ ٹشوز میں پرائمری ریپلیکشن سے گزرنے کے بعد، PrPSc ایک عمل کے ذریعے CNS تک پہنچتا ہے جسے نیورو انویژن کہا جاتا ہے۔ انفیکشن معدے کی جگہوں سے vagus اور splanchnic اعصاب کے ذریعے بالترتیب دماغی اور ریڑھ کی ہڈی تک پھیلتا ہے [3,4]۔

CNS تک پہنچنے پر، PrPSc کاڈل ٹوروسٹرل علاقوں سے پھیلتا ہے، یعنی روسٹرل برین اسٹیم کے ذریعے سیریبیلم، ڈائینسفالون، اور فرنٹالکورٹیکس [5]۔ PrPSc کا جسمانی طور پر دقیانوسی طور پر جمع ہونے سے پتہ چلتا ہے کہ اس کا پھیلاؤ نیورونل کنیکٹیویٹی اور/یا مختلف دماغی خطوں کی منتخب کمزوری سے ہوتا ہے۔

میزبان عوامل جیسے PrPSc جین ٹائپ، نسل، اور انفیکشن کی عمر PrPSc کے جمع ہونے کی شدت اور سپنجفارم گھاووں کی تقسیم میں حصہ ڈالتے ہیں۔

تاہم، میزبان – prion تعاملات کی مالیکیولر بنیاد جو PrPSc کے مخصوص دماغی خطوں کے لیے منتخب ہدف کا تعین کرتی ہے نامعلوم ہے اور یہ prion تناؤ کے رجحان کے سب سے زیادہ دلچسپ پہلوؤں میں سے ایک ہے۔

اصل میں، یہ فرض کیا گیا تھا کہ مدافعتی نظام نے ٹونیچرل رواداری کی وجہ سے PrPSc کا جواب نہیں دیا، لیکن وقتی مطالعہ نے طبی علامات اور نیورونل انحطاط [6-8] کے آغاز سے پہلے ہی مائکروگلیہ اور ایسٹروائٹس کے فوری ایکٹیویشن اور پھیلاؤ کا انکشاف کیا۔

مائیکروگلیہ اور ایسٹروسائٹس کا یہ ابتدائی ایکٹیویشن اور پھیلاؤ پرین ڈس آرڈرز کے روگجنن میں مرکزی کردار ادا کرتا دکھائی دیتا ہے، حالانکہ ان کی ایکٹیویشن میں شامل مالیکیولر میکانزم اور بیماری کے روگجنن میں رد عمل والے ایسٹروائٹس اور مائکروگلیہ دونوں کا قطعی کردار غیر واضح رہتا ہے [9,10]۔

مزید برآں، یہ بڑے پیمانے پر قبول کیا جاتا ہے کہ مائیکروگلی لینڈ ایسٹروگلیل ڈسٹری بیوشن اور فینوٹائپ دماغی خطوں اور پرجاتیوں [11–14] میں مختلف ہوتی ہیں، جو کہ ہر خطے کی اندرونی خصوصیات کو منسوب کرتی ہیں جو نیوروڈیجنریشن [10,15,16] کے خطرے کو متاثر کرتی ہیں۔

یہ رجحان خاص طور پر ابتدائی مرحلے میں واضح ہوتا ہے، جس کے دوران مائکروگلیہ اور ایسٹروگلیہ دونوں علاقے کے مخصوص انداز میں پرین انفیکشن کا جواب دیتے ہیں۔

تاہم، جیسے جیسے مرض بڑھتا ہے، ایک زیادہ عام نیورو انفلامیٹری ردعمل غالب ہونے لگتا ہے، جو کہ زیادہ تر علاقائی خصوصیات کو کمزور کر دیتا ہے کئی نیوروڈیجینریٹو عوارض میں، ان بیماریوں کے بڑھنے پر ان کے اثر کو واضح کرتے ہوئے [19-21]۔

تاہم، TLRsin prion بیماریوں کے کردار کے بارے میں ڈیٹا بہت کم ہے۔ TLRs کا جزوی طور پر حفاظتی کردار inprion pathology بیان کیا گیا ہے۔ خاص طور پر، یہ اطلاع دی گئی ہے کہ TLR2 [22] اور TLR4 [23] کا نقصان prion روگجنن کو تیز کرتا ہے، جبکہ TLR9 محرک ماؤس ماڈل [24,25] میں بیماری کے بڑھنے کو سست کر دیتا ہے۔

آج تک، prion کی بیماریوں میں TLRs کے زیادہ تر مطالعے وٹرو میں یا ماؤس ماڈلز [8,22,26-29] کے ذریعے کیے گئے ہیں، اور قدرتی طور پر متاثرہ جانوروں اور انسانوں میں ان کا کردار غیر یقینی ہے۔ ہمارے علم کے مطابق، ایک مطالعہ نوزائیدہ بچوں میں زبانی طور پر اسکریپی کے ساتھ ٹیکہ لگایا گیا تھا (یعنی، قدرتی طور پر، لیکن قدرتی طور پر متاثر نہیں، میزبان کا استعمال کرتے ہوئے) اور طبی بیماری کے مراحل میں خون میں TLR2 اور TLR4 اوور ایکسپریشن کی اطلاع دی گئی تھی [30]۔

دو مطالعات میں چھٹپٹ CJD (sCJD) [31,32] والے انسانوں میں TLR جین کے اظہار کو تبدیل کیا گیا ہے۔ مدافعتی ردعمل میں شامل جینوں کی بے ضابطگی میں sCJD MM1 مریضوں کے دماغی اور فرنٹل کورٹیکس میں TLR4 اور TLR7 mRNA اور sCJD VV2 مریضوں کے سیریبیلم میں TLR7 کا زیادہ اظہار شامل ہے۔

اس کے علاوہ، Areskeviciuteet al. [32] TLR4 کو سرفہرست 40 اپ اسٹریم ریگولیٹرز میں شامل کیا گیا ہے جس نے sCJD بمقابلہ کنٹرول دماغی نمونوں میں فرق ظاہر کرنے کی پیش گوئی کی ہے۔ ہم نے جانچا کہ قدرتی سکریپی انفیکشن کس طرح دماغ کے چار خطوں میں ovineTLRs اور کچھ سائٹوکائنز کی ٹرانسکرپشن لیول کو متاثر کرتا ہے۔ پچھلے نتائج [18]۔

مقداری پی سی آر (کیو پی سی آر) تجزیہ سے پتہ چلتا ہے کہ اسکریپی سے متاثرہ گروپ میں کنٹرول گروپ اور دماغی خطے پر منحصر ردعمل میں انجین اظہار میں تبدیلیاں آتی ہیں۔

دلچسپ بات یہ ہے کہ ہپپوکیمپس نے مخصوص ری ایکٹو مائیکروگلیہ مورفولوجی اور TLR ٹرانسکرپشن پیٹرن کے ساتھ انتہائی مخصوص زخموں کی پروفائل دکھائی۔ چوہوں کی اوور ایکسپریسنگ شیپ پی آر پی میں TLR جین کے اظہار پر تجرباتی ڈیٹا کی کمی کو دیکھتے ہوئے، ہم نے tg338 چوہوں کے ساتھ tg338 کے ساتھ تجربات بھی کئے۔

ہمارے نتائج جنگلی قسم کے چوہوں کا استعمال کرتے ہوئے پچھلے مطالعات کے ساتھ کچھ مماثلتوں کو ظاہر کرتے ہیں، لیکن قدرتی سکریپی کے نتائج سے متعلق اہم فرق۔

2. نتائج

2.1 قدرتی طور پر متاثرہ بھیڑوں کی سکریپی نیوروپیتھولوجی

ہم نے پہلے اس تحقیق میں شامل قدرتی طور پر متاثرہ بھیڑوں میں سکریپی نیوروپیتھولوجی کی تصدیق کی، جیسا کہ پہلے بیان کیا گیا ہے [33–36]۔ اسپونجیوسس، پی آر پی ایس سی جمع، اور ری ایکٹیگلیا کو متاثرہ اور کنٹرول بھیڑوں کے دماغوں کے چار خطوں میں جانچا گیا: میڈولا اوبلونگاٹا (Mo)، تھیلامس (Th)، ہپپوکیمپس (Hc)، اور فرنٹل کورٹیکس (Fc)۔

تمام قدرتی طور پر متاثرہ جانور بیماری کے طبی مرحلے میں تھے۔ تاہم، طبی حالت، طبی علامات کی تعدد اور شدت کی بنیاد پر، بھیڑوں کے درمیان مختلف ہوتی ہے، ابتدائی سے لے کر جدید طبی مراحل تک (ٹیبل 1)۔

شکل 1 PrPSc، GFAP، اور Iba1 کے لیے ویکیولیشن اور امیونوسٹیننگ کی تشخیص کے لیے نمائندہ مائیکرو فوٹوگرافس دکھاتا ہے، جو متاثرہ اور کنٹرول جانوروں میں سے ہر ایک منتخب خطوں میں لیے گئے ہیں۔

جیسا کہ توقع کی گئی ہے، کنٹرول بھیڑوں کے ٹشو سیکشنز میں ویکیولیشن یا PrPSc جمع ہونے کا کوئی ثبوت نہیں ملا۔ اس کے برعکس، سکریپی سے متاثرہ بھیڑوں میں، تمام نیورواناٹومک علاقوں میں اسپونجیوسس، PrPSc جمع، اور رد عمل والی گلیا (p < 0.05) ظاہر ہوا۔

ویکیولیشن کی شدت، پی آر پی ایس سی جمع، اور گلیوسس میڈولا اوبلونگاٹا سے فرنٹل پرانتستا تک کم ہوگئی۔ دلچسپ بات یہ ہے کہ تھیلامس اور ہپپوکیمپس کی قربت کے باوجود، تمام پیتھولوجیکل مارکروں کے سکور میں نمایاں فرق دیکھا گیا۔

ہپپوکیمپس اور فرنٹل پرانتستا میں پائے جانے والے بہت بکھرے ہوئے خلاء کے برعکس، میڈولا اوبلونگاٹا اور تھیلامس میں سپنجائیوسس کی سب سے بڑی ڈگری دیکھی گئی۔

انٹرا نیورونل ویکیولیشن میڈولا اوبلونگاٹا نیوکلئی میں وافر تھا، جیسا کہ وگس اعصاب کے ڈورسل موٹر نیوکلئس میں دکھایا گیا ہے، جب کہ تھیلامس اور فرنٹل پرانتستا (شکل 1A) میں نیوروپل سپنجیوسس غالب ہے۔ ہپپوکیمپس کے نیوروپل میں بہت کم ویکیولز پائے گئے تھے۔

تصویر 1. تھیمڈولا اوبلونگاٹا (Mo)، تھیلامس (Th)، ہپپوکیمپس (Hc)، اور ایف سی میں کنٹرول اور سکریپی سے متاثرہ بھیڑوں کے CNS میں سپنجیوسس، PrPScdeposition، microgliosis، اور astrogliosis کا نمائندہ نیوروپیتھولوجی اور امیونو ہسٹو کیمیکل تشخیص۔ .

گراف ہر پیرامیٹر کے تجزیہ کردہ نیم مقداری تشخیصی اقدار کو ظاہر کرتے ہیں۔ (A) Hematoxylin – eosin سٹیننگ نے CNS میں سکریپی سے متاثرہ بھیڑوں سے اسپونجیوسس کی تبدیلیاں ظاہر کیں، اور اسپونجیوسس انکنٹرول بھیڑوں کی عدم موجودگی۔ (B) سکریپی سے متاثرہ بھیڑوں کے دماغی خطوں میں L42 اینٹی باڈی کے ساتھ PrPSc کا پتہ لگانا۔

کنٹرول گروپ میں Noimmunolabelling کا پتہ چلا۔ (C) آئنائزڈ کیلشیم بائنڈنگ اڈاپٹر مالیکیول-1(Iba1) امیونوسٹیننگ نے سکریپی سے متاثرہ بمقابلہ کنٹرول بھیڑوں میں مائکروگلیئل ری ایکٹیویٹی میں اضافہ دکھایا۔

(D) Glial fibrillary acidic protein (GFAP) امیونوسٹیننگ جو کہ کنٹرول بھیڑوں کے مقابلے میں اسکریپی سے متاثرہ بھیڑوں کو بڑھاتا ہوا رد عمل آسٹروگلوسین دکھاتا ہے۔ (E) دماغی خطوں کے درمیان سپنجیوسس، PrPScdeposition، Iba1، اور GFAP کی شدت کا شماریاتی موازنہ۔

اسکور کی حد 0 (منفی) سے 5 (زیادہ سے زیادہ شدت) تک ہے۔ spongiosis، PrPSc، Iba1، اور GFAP میں نمایاں فرق طالب علم کے ٹی-ٹیسٹ یا Mann–Whitney U ٹیسٹ کو بالترتیب عام اور غیر عام طور پر تقسیم کیے جانے والے ڈیٹا کے لیے استعمال کر رہے تھے۔

دماغی علاقوں کے درمیان شماریاتی فرق کا تعین یکطرفہ تجزیے کے تغیرات (ANOVA) یا کرسکل – والس ٹیسٹ کے ذریعے بالترتیب عام اور غیر عام طور پر تقسیم شدہ ڈیٹا کے لیے کیا گیا تھا۔ * p < 0۔{4}}5، ** p <0.01۔ اسکیل بار=200 µm۔

تمام سکریپی سے متاثرہ بھیڑوں نے تجزیہ کیے گئے CNSعلاقوں میں بڑے پیمانے پر PrPSc جمع دکھایا، سوائے تین بھیڑوں کے جنہوں نے ابتدائی طبی علامات ظاہر کیں اور امیونو ہسٹو کیمسٹری (IHC) اور ویسٹرن بلاٹ (WB) کے نتائج سامنے والے پرانتستا (ٹیبل 1) کے ذریعہ پی آر پی ایس سی منفی تھے۔

PrPSc امیونوسٹیننگ کی شدت نے روسٹرال میں کمی کا ایک قودل کا انکشاف کیا، جیسا کہ سپنجائیوسس کے لیے مشاہدہ کیا جاتا ہے، میڈلولاوبلونگاٹا اور تھیلامس میں زیادہ سے زیادہ شدت کے ساتھ، دو خطوں میں خلا کی سب سے بڑی ڈگری، اور ہپپوکیمپس اور فرنٹل کورٹیکس میں کم شدت (FigureB1)۔

ہپپوکیمپس میں، PrPScimmunostaining نے ایک فوکل اور غیر مساوی تقسیم کو ظاہر کیا، جو کہ فرنٹل کورٹیکس سیکشنز میں مشاہدہ کیے جانے والے یکساں، بکھرے ہوئے پنکٹیٹ پیٹرن کے برعکس ہے۔

ہم نے PrPSc جمع کرنے کے چار بڑے مورفولوجیکل نمونوں کا مشاہدہ کیا، جیسا کہ پہلے بیان کیا گیا ہے [36]: دو انٹرا سیلولر پیٹرن، جس میں انٹرا نیورونل اور انٹراگلیئل (بشمول انٹرا ایسٹروسائٹک اور انٹرا مائکروگلیئل) جمع، اور دو سیل میمبرین/ایکسٹرا سیلولر پیٹرن، جن میں نیوروپیل اور سیلیلیو-اسس شامل ہیں۔ وابستہ جمع (شکل S1)۔

دماغ کے تمام علاقوں میں انٹرا نیورونل اور نیوروپل سے وابستہ نمونوں کا غلبہ ہے۔ قابل ذکر بات یہ ہے کہ انٹیگلیو اورگلیئل پیٹرن میڈولا اوبلونگاٹا اور تھیلامس کے مقابلے فرنٹل پرانتستا اور ہپپوکیمپس میں کافی حد تک کم یا غیر حاضر تھے۔

اسکریپی سے متاثرہ بھیڑوں کے دماغی نمونوں نے کلاسیکی اسکریپی سے وابستہ کلاسیکی تھری بینڈڈ PrPres پیٹرن کو ظاہر کیا، جس میں تقریباً 19 kDa (شکل 2) کے تھینن-گلائکوسلیٹڈ ٹکڑے کے مالیکیولر ماس کے ساتھ۔

ایک خاص حد تک تغیر پذیر ہونے کے باوجود، PrPres سگنل تمام دماغی خطوں میں طبی علامات کی شدت کے ساتھ بڑھ گیا اور دماغی دماغی علاقوں میں زیادہ پایا گیا۔

WB برائے PrPres تمام سکریپی سے متاثرہ بھیڑوں میں میڈولا اوبلونگاٹا اور تھیلامس میں مثبت تھا۔ اس کے برعکس، ہپپوکیمپس اور فرنٹل کورٹیکس کے نمونے تمام متاثرہ جانوروں میں PrPres کے لیے مثبت نہیں تھے۔

اگرچہ IHC تمام متاثرہ بھیڑوں کے ہپپو کیمپس میں PrPres کے لیے مثبت تھا، 4/13 WB کی طرف سے منفی تھے۔ فرنٹل پرانتستا میں، 3/13 بھیڑیں IHC کی طرف سے PrPres-negative تھیں، اور 4/13 WB کی طرف سے PrPres-منفی تھیں۔

ویکیولیشن اور پی آر پی ایس سی جمع کرنے کے علاوہ، گلیل سیلز کی ایکٹیویشن کو بڑے پیمانے پر پروٹین غلط فولڈنگ بیماریوں کے روگجنن میں ابتدائی واقعہ کے طور پر دستاویز کیا گیا ہے۔

رد عمل والی گلیا کی خصوصیت کے لیے، دماغ کے تمام علاقوں کو اینٹی جی ایف اےپینٹی باڈیز کا استعمال کرتے ہوئے آئی ایچ سی کا نشانہ بنایا گیا تاکہ ایسٹروائٹس کا پتہ لگایا جا سکے اور مائکروگلیہ کا پتہ لگانے کے لیے اینٹی آئی بی اے 1 اینٹی باڈیز۔

Iba1 امیونوسٹیننگ، جو آرام کرنے اور متحرک مائکروگلیہ دونوں کا پتہ لگاتا ہے [37]، دماغ کے تمام خطوں میں اسکریپی سے متاثرہ بمقابلہ کنٹرول بھیڑوں میں نمایاں طور پر اضافہ ہوا اور متاثرہ جانوروں میں دماغی خطوں کے درمیان مائکروگلیئل مورفولوجی میں نمایاں فرق کو ظاہر کیا گیا (شکل 1C)۔

مائکروگلیئل خلیوں کی ایکٹیویشن کی حیثیت تین اہم شکلوں کی بنیاد پر بیان کی گئی ہے: ریمیفائیڈ، ہائپر ٹرافک، اور امیبائڈ [38,39]۔ "سرویلنگ" یا نسبتاً غیر فعال حالت میں مائیکروگلیئل سیلز کی شکل میں ایک شکل ہوتی ہے، جس کی خصوصیت ایک چھوٹے سے خلیے کے جسم میں بہت سے باریک عمل کے ساتھ ہوتی ہے، جیسا کہ ہمارے کنٹرول والے جانوروں میں مشاہدہ کیا جاتا ہے۔

فعال حالت ایک امیبائیڈ مورفولوجی کی خصوصیت رکھتی ہے، جو عام طور پر فاگوسائٹک حالت کے ساتھ منسلک ہوتی ہے [38] اور کروی، غیر ریمیفائیڈ سیل باڈیز پر مشتمل ہوتی ہے۔ ہائپرٹروفک مورفولوجی مائکروگلیہ کی خصوصیت ہے جس میں ایک بڑے خلیے کے جسم اور چھوٹے، موٹے عمل ہوتے ہیں، اور اس کا تعلق سوزش کے ثالثوں کی پیداوار اور رہائی سے ہے [40,41]۔

امیبوڈ مورفولوجی سکریپی سے متاثرہ بھیڑوں کے میڈولا اوبلونگاٹا میں سب سے زیادہ پائی جاتی تھی۔ تھیلامس میں، امیبوڈ مورفولوجی کا مشاہدہ کیا گیا تھا لیکن غالب نہیں تھا: مختلف قسم کے بڑے اور پتلے عمل جو آپس میں مل جاتے ہیں، لمبے خلیوں کے جسموں سے پیدا ہونے والی موٹی پروسیسز، ہائپرٹروفک مائکروگلیہ کے مطابق ہوتی ہیں۔

فرنٹل پرانتستا اور ہپپوکیمپس میں پھیلنے والے مائکروگلیہ کی شکل میڈولا اوبلونگاٹا اور تھیلامس سے واضح طور پر مختلف ہے۔ دونوں خطوں میں، ہائپر ٹرافیڈ مائیکروگلیہ غالب اور امیبائڈ مائکروگلیہ عملی طور پر غیر حاضر تھے۔

قابل ذکر بات یہ ہے کہ ہپپوکیمپس کے Cornu Ammonis 3 (CA3) خطہ نے مائیکروگلیہ مورفولوجی کے سب سے بڑے فرق کو ظاہر کیا، جس میں ایک مائکروگلیئل پیٹرن کی نمائش کی گئی جسے راڈ مائیکروگلیہ کے نام سے جانا جاتا ہے جو دماغ کے کسی دوسرے علاقے میں نہیں دیکھا گیا۔

ہپپوکیمپس کی تشخیص میں دیکھے گئے ان نمایاں اختلافات نے ہمیں ذیلی فیلڈز CA1, 3, 4, اور سٹریٹم lacunose-molecular (SLM) کا تفصیلی معائنہ کرنے پر آمادہ کیا۔

شکل 2. کنٹرول اور قدرتی سکریپی سے متاثرہ بھیڑوں کے CNS میں PrPres کے مغربی دھبے کا پتہ لگانا۔ مناسب موازنہ کے لیے مساوی پروٹین کی مقدار بھری گئی، اور (A) میڈولا اوبلونگاٹا، (B) سے نمونوں کے تجزیہ کے لیے SHA31 مونوکلونل اینٹی باڈی کا استعمال کرتے ہوئے امیونو بلاٹس چلائے گئے۔ ) تھیلامس، (سی) ہپپوکیمپس، اور (ڈی) اسکریپی سے متاثرہ بھیڑوں سے فرنٹل کورٹیکس ابتدائی طبی علامات (نمونے 1–5) کے ساتھ اور جدید طبی علامات (نمونے 6–13) کے ساتھ۔ لائن 14 منفی کنٹرول اور لائن 15 غیر متاثرہ بھیڑوں کے دماغ کے ہوموجنیٹ کا ایک نمونہ دکھاتی ہے جو پی کے ہاضمے کا نشانہ نہیں ہے۔

GFAP امیونوسٹیننگ نے اسکریپی سے متاثرہ بمقابلہ کنٹرول بھیڑ (شکل 1D) میں نشان زدہ ایسٹروگلیوسس کا انکشاف کیا۔ مورفولوجیکل طور پر، متاثرہ بھیڑوں کے ایسٹروسائٹس مسلسل ہائپر ٹرافک سیل باڈیز اور عمل کو ظاہر کرتے ہیں، جو ری ایکٹو ایسٹروگلیوسس کی موجودگی کی تصدیق کرتے ہیں، جبکہ کنٹرول بھیڑوں نے غیر فعال حالت کی مخصوص سٹیلیٹ مورفولوجی کو ظاہر کیا۔

میڈولا اوبلونگاٹا اور تھیلامس میں، جی ایف اے پی امیونوسٹیننگ زیادہ شدید تھی، اوورلیپنگ عمل کی وجہ سے ایسٹروسائٹ نیٹ ورکس کی ظاہری شکل کے ساتھ۔ ہپپوکیمپس اور فرنٹل کورٹیکس میں، ایسٹروائٹس کو یکساں طور پر تقسیم کیا گیا تھا، جس میں الگ تھلگ ہائپرٹروفک سٹیلیٹ باڈیز موجود تھیں۔

For more information:1950477648nn@gmail.com