نوجوان کتوں کے ڈیسپلاسٹک گردوں میں نیورونل نائٹرک آکسائیڈ سنتھیس اور رینن کا اظہار

خلاصہ:

گردے میں رینن اور نیورونل نائٹرک آکسائیڈ ترکیب رینن-انجیوٹینسن اور ٹیوبولوگلومیرولر فیڈ بیک سسٹم کو کنٹرول کرتے ہیں۔ موجودہ مطالعہ میں رینن اور نیورونل نائٹرک آکسائڈ سنتھیس کے اظہار کی تحقیقات کی گئیں۔dysplastic گردےتین نوجوان کتوں کی. Renin-immunoreactivity، جو کے juxtaglomerular اور tubular خلیات میں پایا جاتا ہے۔dysplastic گردے، نوجوان کتوں کے عام گردوں میں اس سے مختلف نہیں تھا۔ عام گردوں میں میکولا ڈینسا کے خلیات نے نیورونل نائٹرک آکسائیڈ سنتھیس - امیونوری ایکٹیویٹی کو ظاہر کیا، لیکن ڈیسپلاسٹک گردوں میں کوئی ظاہری سگنل نہیں دکھائے۔ اس مشاہدے کا پیتھولوجیکل میکانزم کے ساتھ تعلق ہوسکتا ہے۔گردے خرابنوجوان کتوں میں.

مطلوبہ الفاظ: دائمی گردے کی بیماری, dysplastic گردے، امیونو ہسٹو کیمسٹری، نیورونل نائٹرک آکسائیڈ سنتھیس، رینن

مزید معلومات کے لیے رابطہ کریں:joanna.jia@wecistanche.com

گردے کی تقریب کو بہتر بنانے کے لیے cistanche

گردے خرابکبھی کبھار نوجوان کتوں میں ہوتا ہے. ایسے معاملات میں، ہسٹولوجیکل امتحان اکثر ظاہر کرتا ہےdysplastic گردےگھاووں تاہم، pathophysiological میکانزم جو میں پائے جاتے ہیںdysplastic گردےکتوں کی تعداد غیر واضح ہے۔ حال ہی میں، ہم نے cyclooxygenase (COX)-2 کی کشندگی کا مظاہرہ کیادائمی گردے کی بیماریوںکے ساتھ نوجوان کتوں میںdysplastic گردےامیونو ہسٹو کیمیکل تجزیہ کا استعمال کرتے ہوئے [19]۔

COX-2 inducible inflammatory enzyme ہے جو کہ جنین اور نوزائیدہ مراحل میں گردے کی عام نشوونما کے لیے ضروری ہے [12, 15]۔ پیدائش کے بعد، COX-2 جزوی طور پر گردے میں ظاہر ہوتا ہے اور موٹے چڑھتے اعضاء [1, 4, 22] کے میکولا ڈینسا (MD) کے محدود علاقے میں مرتکز ہوتا ہے۔ MD ایک خصوصی خطہ ہے جو گلوومیرولس کے عروقی قطب سے متصل ہے۔ یہ رینن کے اخراج اور ٹیوبلوگلومیرولر فیڈ بیک (TGF) سسٹم کو کنٹرول کرتا ہے۔ MD خلیات میں ظاہر ہونے والا COX-2 ان میکانزم کو منظم کرتا ہے [6, 8]۔ COX-2 کے علاوہ، نیورونل نائٹرک آکسائیڈ سنتھیس (nNOS)، جس کا اظہار MD خلیات میں بھی ہوتا ہے، TGF نظام کا پرنسپل ریگولیٹر کے طور پر جانا جاتا ہے [3, 18]۔ یہ دو مالیکیولز، جو MD میں مشترکہ طور پر ظاہر ہوتے ہیں، ایک دوسرے کے ساتھ تعامل کے لیے جانا جاتا ہے [2، 5، 9]۔ موجودہ مطالعہ میں، ہم نے رینن اور این این او ایس کے اظہار کی تحقیقات کی۔dysplastic گردےامیونو ہسٹو کیمسٹری کے ذریعے اس بات کا تعین کرنے کے لیے کہ آیا COX-2 in کی کشندگیdysplastic گردےنوجوان کتوں میں renin-angiotensin نظام اور TGF نظام میں خلل پیدا کرتا ہے۔

کے فارملین فکسڈ پیرافین بلاکسdysplastic گردےنوجوان کتوں سے (n{{{1{19}}}}}}، نوجوان کتوں کے نارمل گردے (n=3)، اور بالغ کتوں کے نارمل گردے (n=4) تھے۔ وہی جو ہمارے پچھلے مطالعہ میں استعمال کیا گیا تھا، جس میں طبی تاریخ اور ٹشو کی تیاری کو پہلے بیان کیا جا چکا ہے [19]۔ اس مطالعہ کو کاگوشیما یونیورسٹی، جاپان (VM15020) کی کمیٹی برائے جانوروں کے تجربات نے منظور کیا۔ سیکشنز کو 3-µm موٹائی کے ساتھ تیار کیا گیا تھا، اور renin اور nNOS کے لیے امیونو ہسٹو کیمیکل تجزیہ درج ذیل پروٹوکول کے مطابق کیا گیا تھا: (1) deparaffinization؛ (2) این این او ایس کے لیے 10 ایم ایم سائٹریٹ بفر (پی ایچ 6.0) میں مائکروویو ہیٹنگ کے ذریعے اینٹیجن کی بازیافت؛ (3) 3 فیصد H2O2 کے ساتھ 30 منٹ تک انکیوبیشن؛ (4) رینن کے لیے 3 فیصد بوائین سیرم البومین (سگما-الڈرچ، سینٹ لوئس، MO، USA) یا 0.25 فیصد کیسین (Sigma-Aldrich) NNOS کے لیے، 30 منٹ کے لیے فاسفیٹ بفرڈ نمکین میں ملا کر بلاک کرنا؛ (5) رات بھر 4 ڈگری پر 1:3 کے ساتھ انکیوبیشن،000 خرگوش کے اینٹی ریکومبیننٹ رینن پولی کلونل اینٹی سیرم (ڈاکٹر موراکامی، یونیورسٹی آف سوکوبا، جاپان کے ذریعہ فراہم کردہ) یا 1:3،{{31} }} خرگوش کے اینٹی این این او ایس پولی کلونل اینٹی سیرم (کیمین کیمیکل، این آربر، ایم آئی، یو ایس اے) کو مسدود کرنے والے محلول میں کم کرنا؛ (6) کمرے کے درجہ حرارت پر 30 منٹ کے لیے پیرو آکسیڈیز پولیمر کنجوگیٹڈ یونیورسل اینٹی باڈی (اینٹی ماؤس امیونوگلوبلین (آئی جی) جی اور اینٹی خرگوش آئی جی جی؛ سادہ داغ MAX-PO [MULTI]؛ Nichirei Biosciences, Tokyo, Japan) ; اور (7) 3,3ʹ-diaminobenzidine نظام (3,3ʹ-diaminobenzidine بفر ٹیبلٹ؛ مرک، Darmstadt، Germany) کا استعمال کرتے ہوئے مدافعتی سگنل کا پتہ لگانا۔ منفی کنٹرول والے حصوں کے لیے، پرائمری اینٹی باڈی کی جگہ عام خرگوش آئی جی جی (لیب وژن، فریمونٹ، سی اے، یو ایس اے) استعمال کیا جاتا تھا۔

رینن امیونوری ایکٹیویٹی کے لئے بے ترتیب مورفومیٹرک تجزیہ پہلے بیان کردہ طریقہ [20] کے مطابق کیا گیا تھا۔ مختصراً، رینن انڈیکس کی تعریف رینن-مثبت شریانوں کی کل تعداد اور گلوومیرولی کی کل تعداد کے تناسب کے طور پر کی گئی تھی اور اس کا اظہار فی 100 گلوومیرولی پر کیا گیا تھا۔ SPSS ورژن 24 (IBM SPSS Statistics, Armonk, NY, USA) کے ساتھ بونفرونی کے متعدد موازنہ کے طریقہ کار کا استعمال کرتے ہوئے گروپوں کے درمیان اختلافات کا تجزیہ کیا گیا۔

ہسٹوپیتھولوجیکل تشخیص پکٹ اور لیوس [14] کے ذریعہ کینائن رینل ڈیسپلاسیا کے مائکروسکوپک معیار کے مطابق کی گئی تھی۔ تینوں کیسز کے ہسٹولوجی سیکشنز نے متضاد تفریق پیش کی، جو کہ جنین/ نادان گلوومیرولی کے ساتھ گھاووں کی موجودگی کی نشاندہی کرتا ہے۔ متغیر کی شدت کی ثانوی تبدیلیاں جیسے نلی نما نقصان، انٹرسٹیشل فبروسس، اور سکلیروٹک گلومیرولی بالغ گردوں کے ٹشوز کے اندر دیکھی گئیں۔

میںdysplastic گردے، رینن امیونوری ایکٹیویٹی سگنل جوکسٹاگلومیرولر سیل (JGCs) (تصویر 1A) میں دیکھے گئے ، اور نلی نما خلیے ڈسٹل نیفرون (تصویر 1B) میں واقع تھے۔ کچھ گلوومیرولی میں، چند خلیوں نے عروقی قطبوں کے قریب رینن مثبت سگنل دکھائے (تصویر 1A)۔ نوجوان کنٹرول گردوں میں، MD خلیات سمیت JGCs اور ڈسٹل ٹیوبلز دونوں میں رینن سگنلز کا بھی پتہ چلا۔ بالغوں کے کنٹرول گردوں میں، رینن مثبت سگنل JGCs تک محدود تھے۔ اعدادوشمار کے مطابق، dysplastic گردوں میں renin-positive علاقوں کی تعداد میں نوجوان اور بالغ گردوں میں کوئی خاص فرق نہیں دکھایا گیا۔

رینن کی پیداوار کا محرک COX-2 سگنلنگ میں ایک کردار ادا کرنے کے لیے جانا جاتا ہے، اور پچھلے مطالعات نے یہ ثابت کیا ہے کہ COX-2 inhibitor کے استعمال کے بعد یا COX کے ناک آؤٹ میں پلازما رینن کی سرگرمی اور ارتکاز میں کمی واقع ہوئی تھی۔ -2 جین [10، 11]۔ کے طور پرdysplastic گردےموجودہ مطالعہ میں جانچے گئے رینل COX کا کوئی اظہار نہیں دکھایا گیا-2 [19]، JGCs میں رینن کے امیونوسگنلز میں کمی کو ابتدائی طور پر dysplastic گردوں میں ممکنہ جسمانی اسامانیتا کے طور پر شبہ کیا گیا تھا۔ تاہم، موجودہ امیونو ہسٹو کیمیکل تجزیہ اس مفروضے کی تصدیق نہیں کر سکا، اور JGCs میں رینن کی کوئی واضح کمی تجویز نہیں کی گئی۔ اگرچہ نلی نما رینن کے جسمانی کردار کو پہلے واضح نہیں کیا گیا تھا، سوڈیم کی رینل ہینڈلنگ نلی نما رینن کا ممکنہ کردار ہو سکتا ہے، کیونکہ چوہوں میں کم نمک والی خوراک کھانے کے بعد رینن کے اظہار میں اضافہ ڈسٹل نیفرون میں ہوا تھا۔ [16]، اور موجودہ مطالعے میں جانچے گئے کتوں کے dysplastic گردوں نے اس نلی نما فعل کو برقرار رکھا ہوگا۔

COX-2 TGF نظام کے ضابطے میں بھی اہم ہے، جو گلوومیرولر فلٹریشن کی شرح کو برقرار رکھنے کے لیے اہم ہے۔ چوہوں میں مائکروپنکچر طریقہ استعمال کرنے والے ایک مطالعہ نے COX-2 inhibitor [2] کے ساتھ علاج کے بعد TGF ردعمل کو دبانے کا مظاہرہ کیا۔ TGF کا جوابdysplastic گردےرینل COX-2 اظہار کی کمی کی وجہ سے کم ہو سکتا ہے۔ تاہم، اس سے پہلے کوئی متعلقہ نتائج کی اطلاع نہیں دی گئی ہے۔ گردے میں، nNOS کا اظہار MD خلیات میں ہوتا ہے اور TGF نظام کو منظم کرنے میں مدد کرتا ہے [18]۔

موجودہ nNOS تجزیہ میں، تمام معاملات کے MD علاقوں میں کوئی واضح سگنل نہیں پایا گیا (تصویر 2)۔ این این او ایس کی اس کمی کو ایٹیوپیتھوجینک واقعہ سمجھا جاتا تھا۔dysplastic گردےکے بعد ایک حاصل شدہ کے بجائےگردے خرابمقدمات کی. دراصل، OLETF (Otsuka Long-Evans Tokushima Fatty) چوہوں کا استعمال کرتے ہوئے ہماری پچھلی تحقیق، ٹائپ 2 ذیابیطس کے ماڈل کے طور پر، یہ ظاہر کرتی ہے کہ ذیابیطس نیفروپیتھی کے بعد کے مرحلے میں MD اور اس کے آس پاس کے نلی نما خلیوں میں NNOS زیادہ متاثر ہوا تھا [21]۔ TGF نظام کے ضابطے میں، nNOS کا فنکشن اسی طرح کا ہے اور COX-2 کے ساتھ تعامل کرتا ہے۔ کچھ مطالعات نے تجویز کیا ہے کہ nNOS سگنلنگ پاتھ وے کے اوپری حصے میں ہے اور COX کے اظہار کو متحرک کرتا ہے-2 [5, 9]۔ دوسری طرف، دیگر مطالعات نے اس کے برعکس تجویز کیا ہے کہ COX-2 اس وقت NOS [2, 13] کے اوپری حصے میں ہے۔ سگنلنگ پاتھ وے میں فرق سے قطع نظر، MD خلیات میں nNOS-immunosignals کی کمی رینل COX-2 اظہار کی کمی کو متحرک کر سکتی ہے۔dysplastic گردے.

چند نلیوں نے دو صورتوں میں nNOS کے لیے مثبت اشارے دکھائے۔ بقیہ صورت میں، بہت سی خستہ حال اور چپٹی ہوئی نلیاں، غالباً ڈسٹل نیفرون میں، واضح مثبت اشارے دکھاتے ہیں (تصویر 3)۔ اس صورت میں، نمایاں nNOS- مثبت tubules کے ساتھ،

گردوں کے ؤتکوں کی ترقی سب سے زیادہ نادان تھا. نوجوان اور بالغ عام گردوں میں، nNOS-مثبت سگنل موٹے چڑھتے ہوئے اعضاء میں دیکھے گئے، خاص طور پر MD خلیات میں (تصویر 4)۔ گردے کی نشوونما کے دوران nNOS کی تقسیم میں تبدیلی آتی ہے۔ خنزیر کے گردے تیار کرنے میں، این این او ایس بڑے پیمانے پر تقسیم ہوتا ہے اور اس کا مشاہدہ موٹی چڑھتے ہوئے اعضاء کے کچھ حصوں میں ہوتا ہے جو میکولا ڈینسا [17] کی طرف جاتا ہے۔ چوہوں میں، ترقی پذیر ڈسٹل ٹیوب میں nNOS کی موجودگی کا سامنا S-شکل والے جسم میں نیفروجنسیس کے ابتدائی مراحل سے ہی ہوتا ہے [7]۔ اگرچہ کتے کے گردے تیار کرنے میں nNOS کی تقسیم کی پہلے تحقیق نہیں کی گئی تھی، لیکن اس بات کا امکان موجود ہے کہ نلیوں میں نمایاں nNOS سگنلز انتہائی ناپختہ نلیوں کا ثبوت ہو سکتے ہیں۔dysplastic گردےخراب شدہ بالغ نلیوں کے بجائے۔

آخر میں، میں renin اور nNOS اظہارdysplastic گردےموجودہ مطالعے میں تین نوجوان کتوں میں سے امیونو ہسٹو کیمیکل طور پر تفتیش کی گئی۔ اس نے مستقل رینن اظہار کے ساتھ MD خلیوں میں nNOS کے بگاڑ کو ظاہر کیا۔ MD خلیوں میں nNOS اظہار کی کمی گردوں کے TGF نظام کو کم کر سکتی ہے، اور یہ پیتھولوجیکل میکانزم میں سے ایک ہو سکتا ہے۔گردے خرابکے ساتھ نوجوان کتوں میںdysplastic گردے.

مفادات کے ممکنہ تصادم

مصنفین کے پاس ظاہر کرنے کے لیے کچھ نہیں ہے۔

اعتراف

اس کام کے ایک حصے کو سائنسی تحقیق کے لیے گرانٹ ان ایڈ (گرانٹ نمبر 19K06385) نے جاپان سوسائٹی فار دی پروموشن آف سائنس سے تعاون کیا۔

مصنف

Akira YABUKI1,2)*، Yu FURUSAWA2) Noriaki MIYOSHI3) Kazuyuki TANIGUCHI4)اور Osamu YAMATO1)

1)ویٹرنری کلینکل پیتھالوجی کی لیبارٹری، ویٹرنری میڈیسن کی جوائنٹ فیکلٹی، کاگوشیما یونیورسٹی، کاگوشیما 890-0065، جاپان

2)کاگوشیما یونیورسٹی ویٹرنری ٹیچنگ ہسپتال، جوائنٹ فیکلٹی آف ویٹرنری میڈیسن، کاگوشیما یونیورسٹی، 1-21-24 کوریموٹو، کاگوشیما 890-0065، جاپان

3) لیبارٹری آف ویٹرنری ہسٹوپیتھولوجی، جوائنٹ فیکلٹی آف ویٹرنری میڈیسن، کاگوشیما یونیورسٹی، کاگوشیما 890-0065، جاپان

4) لیبارٹری آف ویٹرنری اناٹومی، فیکلٹی آف ایگریکلچر، ایویٹ یونیورسٹی، موریوکا 020-8550، جاپان

حوالہ جات

1. Adegboyega, PA اور Ololade, O. 2004. عام گردوں میں cyclooxygenase-2 کا امیونو ہسٹو کیمیکل اظہار۔ اپل امیونو ہسٹو کیم۔ مول مورفول 12:71–74۔ [میڈ لائن] [کراس ریف]

2. آراؤجو، ایم. اور ویلچ، ڈبلیو جے 2009۔ سائکلو آکسیجنیس 2 انحبیشن ٹیوبولوگلومیرولر فیڈ بیک کو دباتا ہے: تھروم باکسین ریسیپٹرز اور نائٹرک آکسائیڈ کے کردار۔ ایم۔ جے فزیول۔ رینل فزیول۔ 296: F790–F794۔ [میڈ لائن] [کراس ریف]

3. بلانٹز، آر سی، ڈینگ، اے.، لورٹی، ایم.، مونگر، کے.، ویلن، وی.، گبائی، ایف بی اور تھامسن، ایس سی 2002۔ گلومیرولر الٹرا فلٹریشن کے ضابطے میں نائٹرک آکسائیڈ کا پیچیدہ کردار۔ کڈنی انٹ۔ 61: 782–785۔ [میڈ لائن] [کراس ریف]

4. کیمپین، وی.، تھیلیگ، ایف.، پیلیج، اے.، بریئر، ایم. اور بچمن، ایس. 2003. رینل پروسٹاگلینڈن ترکیب کے لیے کلیدی انزائمز: چوہا گردے (چوہا، ماؤس) میں سائٹ کے لیے مخصوص اظہار۔ ایم۔ جے فزیول۔ رینل فزیول۔ 285: F19–F32۔ [میڈ لائن] [کراس ریف]

5. چینگ، ایچ ایف، ژانگ، ایم زیڈ اور ہیرس، آر سی 2006۔ نائٹرک آکسائیڈ ap38- منحصر راستے کے ذریعے کلچرڈ CTAL خلیوں میں سائکلو آکسیجنز-2 کو متحرک کرتا ہے۔ ایم۔ جے فزیول۔ رینل فزیول۔ 290: F1391–F1397۔ [میڈ لائن] [کراس ریف]

6. ڈینگ، اے.، ویڈ، ایل ایم اور بلانٹز، آر سی 2004. ٹیوبولوگلومیرولر فیڈ بیک کا وقتی موافقت: COX-2 کے اثرات۔ کڈنی انٹ۔ 66: 2348–2353[میڈ لائن] [کراس ریف]

7. فشر، ای.، شنرمین، جے.، بریگز، جے پی، کریز، ڈبلیو.، رونکو، پی ایم اور بچمن، ایس. 1995. چوہے کے گردوں کے جوکسٹاگلومیرولر اپریٹس میں NO سنتھیس اور رینن کی اونٹوجنی۔ ایم۔ جے فزیول۔ 268: F1164–F1176۔ [میڈ لائن]

8. ہاؤ، سی ایم اور بریئر، ایم ڈی 2008۔ گردے میں پروسٹگینڈن کا فزیالوجیکل ریگولیشن۔ انو Rev. Physiol. 70: 357–377۔ [میڈ لائن] [کراس ریف]

9. Ichihara, A., Imig, JD, Inscho, EW and Navar, LG 1998. Cyclooxygenase-2 tubular flow-dependent afferent arteriolar ٹون میں حصہ لیتا ہے: neuronal NOS کے ساتھ تعامل۔ ایم۔ جے فزیول۔ 275: F605–F612۔ [میڈ لائن]

10. Kim, SM, Chen, L., Mizel, D., Huang, YG, Briggs, JP and Schnermann, J. 2007. کم پلازما رینن اور شعوری COX-2-کی کمی میں شدید محرکات کے لیے رینن کے خفیہ ردعمل میں کمی چوہوں. ایم۔ جے فزیول۔ رینل فزیول۔ 292: F415 F422۔ [میڈ لائن] [کراس ریف]

11. Matzdorf, C., Kurtz, A. اور Höcherl, K. 2007. COX-2 سرگرمی رینن کے اظہار کی سطح کا تعین کرتی ہے لیکن چوہوں کے گردوں میں رینن کے اظہار کے شدید اپ گریجولیشن کے لیے ناگزیر ہے۔ ایم۔ جے فزیول۔ رینل فزیول۔ 292: F1782–F1790۔ [میڈ لائن] [کراس ریف]

12. Norwood, VF, Morham, SG and Smithies, O. 2000. cyclooxygenase-2 null چوہوں میں بعد از پیدائش کی نشوونما اور گردوں کی ڈیسپلیسیا کی ترقی۔ کڈنی انٹ۔ 58: 2291–2300۔ [میڈ لائن] [کراس ریف]

13. پیلیج، اے، میزیل، ڈی، مدینہ، سی، پاسومارتھی، اے، ہوانگ، وائی جی، بچمن، ایس، بریگز، جے پی، شنرمین، جے بی اور یانگ، ٹی 2004۔ این این او ایس اظہار کی روک تھام میکولا ڈینس از COX-2-ماخوذ پروسٹگینڈن E2۔ ایم۔ جے فزیول۔ رینل فزیول۔ 287: F152–F159۔ [میڈ لائن] [کراس ریف]

14. Picut، CA اور Lewis، RM 1987. کینائن رینل ڈیسپلاسیا کی مائکروسکوپک خصوصیات۔ ڈاکٹر پاتھول۔ 24: 156–163۔ [میڈ لائن] [کراس ریف]

15. سیٹا، ایف، چنگ، اے ڈی، ٹرنر، پی وی، میوبرن، جے ڈی، یو، وائی، اور فنک، سی ڈی 2009۔ COX-2 ناک ڈاؤن چوہوں کی گردوں اور قلبی خصوصیات۔ ایم۔ جے فزیول۔ ریگول عدد۔ کمپ فزیول 296: R1751–R1760۔ [میڈ لائن] [کراس ریف]

16. Shao, W., Seth, DM, Prieto, MC, Kobori, H. and Navar, LG 2013. کم نمک والی خوراک کے ذریعے renin-angiotensin نظام کو چالو کرنے سے چوہوں میں intratubular angiotensinogen اور angiotensin II میں اضافہ نہیں ہوتا ہے۔ ایم۔ جے فزیول۔ رینل فزیول۔ 304: F505 F514۔ [میڈ لائن] [کراس ریف]

17. Solhaug, MJ, Ballèvre, LD, Guignard, JP, Granger, JP اور Adelman, RD 1996. ترقی پذیر گردے میں نائٹرک آکسائیڈ۔ پیڈیاٹر نیفرول۔ 10: 529–539۔ [میڈ لائن] [کراس ریف]

18. Wilcox، CS 1998. ٹیوبولوگلومیرولر فیڈ بیک میں میکولا ڈینسا NOS کا کردار۔ کرر رائے۔ نیفرول۔ ہائپرٹین. 7: 443–449۔ [میڈ لائن] [کراس ریف]

19. Yabuki, A., Miyazaki, A., Ichii, O., Kohyama, M., Sawa, M. اور Yamato, O. 2016. نوجوان کتوں میں گردے کی دائمی بیماری میں cyclooxygenase-2 کا کم اظہار۔ Res. ڈاکٹر سائنس 109: 71–73۔ [میڈ لائن] [کراس ریف]

20. Yabuki, A., Suzuki, S., Matsumoto, M., Taniguchi, K. and Nishinakagawa, H. 2002. Ren-1 رینن کے مخصوص پتہ لگانے کا ایک آسان طریقہ۔ کڈنی انٹ۔ 62: 2294–2299۔ [میڈ لائن] [کراس ریف]

21. Yabuki, A., Tahara, T., Taniguchi, K., Matsumoto, M. and Suzuki, S. 2006. قسم 2 ذیابیطس OLETF چوہوں کی ذیابیطس نیفروپیتھی میں نیورونل نائٹرک آکسائیڈ سنتھیس اور سائکلو آکسیجنز-2۔ ختم انیم 55:17-25 [کراس ریف]۔ [میڈ لائن]

22. Zhang, MZ, Wang, JL, Cheng, HF, Harris, RC اور McKanna, JA 1997. Cyclooxygenase-2 in rat nephron develop. ایم۔ جے فزیول۔

23: F994–F1002۔ [میڈ لائن]