مائکروبیل خمیر کی تفتیش اور بایو ایکٹیویٹیٹیشنز کو جامع بیکٹیریا کے ابال کے عمل کے عمل میں

باب 2 حسی تشخیص تناؤ کے زیادہ سے زیادہ تناسب کا تعین کرتا ہے۔

 

اس مطالعے میں ، سیب کو خام مال کے طور پر استعمال کیا جاتا تھا ، اور ایسپرگیلس اوریزا ، خمیر ، اسٹریپٹوکوکس تھرمو فیلس ، لیکٹو بیکیلس ایسڈو فیلس اور لیکٹو بیکیلس بلغاریکس کو مختلف تناسب میں شامل کیا گیا تھا ، اور انزائم حاصل کرنے کے لئے مخلوط اور خمیر کیا گیا تھا۔ انزائمز کا حسی جائزہ لیا گیا ، اور چاروں تناؤ کا زیادہ سے زیادہ تناسب اسکور کے مطابق طے کیا گیا ، تاکہ اعلی معیار کے ایپل انزائمز حاصل کی جاسکیں۔

بیکٹیریا کے ابال سے کہیں زیادہ اینٹی آکسیکرن طاقت کے ساتھ نئی جڑی بوٹیاں

 

 

2.1 مواد اور طریقے

 

2.1.1 تجرباتی مواد

اس لیبارٹری میں محفوظ کردہ ایسپرگیلس اوریزا ، خمیر ، اسٹریپٹوکوکس تھرمو فیلس ، اور لیکٹو بیکیلس بلغاریکس۔ سیب ، اور فرسٹ گریڈ ریڈ فوجی مارکیٹ سے خریدا گیا۔

 

2.1.2 ثقافت میڈیم

(1) ایسپرگیلس اوریزے کلچر میڈیم
آلو میڈیم (PDA): 20 ٪ آلو 1L ، گلوکوز 20 جی ، KH2PO 4 3 G ، MGSO4 · 7H2O 1.5G ، وٹانیب B1 ٹریس 8mg ، ایگر 20 جی ، قدرتی پییچ ، آٹوکلیو 25 منٹ کے لئے 115 ڈگری پر۔ (2) خمیر کلچر میڈیم 10 ڈگری بی مالٹ ایکسٹریکٹ ایگر میڈیم: خمیر شدہ بیئر (بغیر ہپس کے) کے خام مال کو 10 برلن میں گھٹا دیں ، 5 جی/ایل ایگر ، تحلیل اور ڈسپینس ، اور 15 منٹ کے لئے 121 ڈگری پر آٹوکلیو شامل کریں۔

(3) تھرمو فیلک اسٹریپٹوکوکس کلچر میڈیم
خمیر نکالنے میں 1 ٪ ، گلوکوز 1.5 ٪ ، گائے کے گوشت کا نچوڑ 0. 3 ٪ ، پیپٹون 0. 5 ٪ ، کاکو {7}}. 25 منٹ۔

(4) بلغاریہ لیکٹو بیکیلس کلچر میڈیم
خمیر نکالنے میں 1 ٪ ، گلوکوز 1.5 ٪ ، گائے کے گوشت کا نچوڑ 0. 3 ٪ ، پیپٹون 0. 5 ٪ ، کاکو {7}}. 25 منٹ۔

 

2.1.3 اہم آلات

تجربے میں استعمال ہونے والے اہم آلات اور ان کے ماڈل ٹیبل 2.1 میں دکھائے گئے ہیں۔

 

TAB.2.1 اہم آلات کے نام ، ماڈل اور مینوفیکچررز

 

سات افراد کو تشخیصی ٹیم کے نمائندوں کے طور پر منتخب کیا گیا۔ اسی ماحول اور حالات کے تحت ، انہوں نے انزائم کی حسی تشخیص اسکور کی ، جس میں انزائم کا رنگ ، بو اور ذائقہ بھی شامل ہے۔ اسکور کو چار سطحوں میں تقسیم کیا گیا تھا: {{0}} پوائنٹس (8 0} سمیت) میں بہت اچھا ، 70-80 پوائنٹس پر نسبتا good اچھا (جس میں 7 0} سے زیادہ شامل ہے) ، 60-70}} میں قابل قبول ہے (بشمول 6 0}) 6 0 پوائنٹس۔ کل اسکور 100 پوائنٹس ہے ، جو تینوں قسموں کے اسکور کو شامل کرکے حاصل کیا جاتا ہے۔ مخصوص تناسب یہ ہیں: رنگین اکاؤنٹ 30 ٪ ، بو کی بو 25 ٪ ہے ، اور ذائقہ 45 ٪ [51] ہے۔ (7) خامروں کی حسی تشخیص پر ایسپرجیلس اوریزا ٹیکہ لگانے کے مختلف تناسب کا اثر۔ عام طور پر ، دہی میں تھرمو فیلک اسٹریپٹوکوکس اور بلغاریہ لیکٹو بیکیلس کی ٹیکہ لگانے کی مقدار 2 ٪ {-3 ٪ ہے۔ جب تناؤ کا تناسب 1: 1 یا 2: 1 ہوتا ہے تو ، خمیر شدہ دودھ کا معیار اور ذائقہ بہترین ہوتا ہے۔ عام طور پر استعمال ہونے والا تناسب 1: 1 [52] ہے۔ اس تجربے نے خمیر ، تھرمو فیلک اسٹریپٹوکوکس ، اور بلغاریہ لیکٹو بیکیلس کی ٹیکہ لگانے کی مقدار کو 3.0 ٪ کے طور پر منتخب کیا۔ عمل کے دیگر حالات کو تبدیل کیے بغیر ، ایسپرگیلس اوریزے کی ٹیکہ لگانے کی مقدار کو بالترتیب 0.5 ٪ ، 1.0 ٪ ، 1.5 ٪ ، 2.0 ٪ ، 2.5 ٪ ، اور 3.0 ٪ میں تبدیل کردیا گیا۔ ابال کے 30 دن کے بعد ، گودا اور تمام خامروں پر مشتمل ابال مائع کو انزائم سپرنٹنٹ حاصل کرنے کے لئے نمونہ اور فلٹر کیا گیا تھا۔ انزائم سپرنٹنٹینٹ کو حسی تشخیص کے تجرباتی نمونے کے طور پر لیا گیا تھا۔

 

()) خامروں کی حسی تشخیص پر خمیر ٹیکہ لگانے کی مقدار کے مختلف تناسب کا اثر اسپرگیلس اوریزا کی ٹیکہ لگانے کی مقدار 2 تھی۔ 0 ٪ ، اور تھرمو فیلک اسٹریپٹوکوکس اور بلغاریہ لییکٹوباسیلس کی ٹیکہ لگانے والی مقدار 3 تھی۔ عمل کی دیگر شرائط کو تبدیل کیے بغیر ، خمیر کی ٹیکہ لگانے کی مقدار کو 0 میں تبدیل کردیا گیا۔ ابال کے 30 دن کے بعد ، گودا اور تمام خامروں پر مشتمل ابال مائع کو انزائم سپرنٹنٹ حاصل کرنے کے لئے نمونہ اور فلٹر کیا گیا تھا۔ انزائم سپرنٹنٹینٹ کو حسی تشخیص کے تجرباتی نمونے کے طور پر لیا گیا تھا۔

()) خامروں کی حسی تشخیص پر تھرمو فیلک اسٹریپٹوکوکس ٹیکہ لگانے کے مختلف تناسب کا اثر اسپرگیلس اوریزا کی ٹیکہ لگانے کی مقدار 2 تھی۔ 0 ٪ ، خمیر کی ٹیکہ کی مقدار 1 تھی۔ ic 0} ٪ ، اور لیکٹوباسیل کی مقدار کی مقدار تھی۔ عمل کے دیگر حالات کو تبدیل کیے بغیر ، تھرمو فیلک اسٹریپٹوکوکس کی ٹیکہ لگانے کی مقدار کو 0. 5 ٪ ، 1. {{1 {14}}}} ٪ ، 1.5 ٪ ، 2 میں تبدیل کردیا گیا۔ ابال کے 3 0 دن کے بعد ، گودا اور تمام خامروں پر مشتمل ابال مائع حاصل کرنے کے لئے نمونے لئے گئے ، اور انزائم سپرنٹنٹ کو فلٹر کیا گیا تھا۔ انزائم سپرنٹنٹینٹ کو حسی تشخیص کے تجرباتی نمونے کے طور پر لیا گیا تھا۔ . اسٹریپٹوکوکس 1.5 ٪ تھا۔ عمل کے دیگر حالات کو تبدیل کیے بغیر ، لیکٹو بیکیلس بلغاریکس کی ٹیکہ لگانے کی مقدار کو بالترتیب 0.5 ٪ ، 1.0 ٪ ، 1.5 ٪ ، 2.0 ٪ ، 2.5 ٪ ، اور 3.0 ٪ میں تبدیل کردیا گیا۔ ابال کے 30 دن کے بعد ، گودا اور تمام خامروں پر مشتمل ابال مائع کو انزائم سپرنٹنٹ حاصل کرنے کے لئے نمونہ اور فلٹر کیا گیا تھا۔ انزائم سپرنٹنٹینٹ کو حسی تشخیص کے تجرباتی نمونے کے طور پر لیا گیا تھا۔

(11) بیکٹیریل تناؤ تناسب کا آرتھوگونل ڈیزائن
واحد عنصر کے تجربے کی بنیاد پر ، چار عوامل کا انتخاب کیا گیا: ایسپرگیلس اوریزا ٹیکہ لگانے والی رقم (A) ، خمیر ٹیکہ لگانے کی رقم (B) ، تھرمو فیلک اسٹریپٹوکوکس ٹیکہ لگانے والی رقم (C) اور بلغاریہ لیکٹو بیکیلس ٹیکہ لگانے والی رقم (D)۔ آرتھوگونل تجربے کے لئے ہر عنصر کو 3 سطحوں پر منتخب کیا گیا تھا۔

 

شکل 2.1 پلیٹ یا سلیٹ پر بیکٹیریا کی نمو کی شکل کا ڈایاگرام

 

ٹیب .2.2 ایک ماہ کے بعد واحد تناؤ کے ابال کی حسی تشخیص۔

جدول 2.2 میں تجرباتی نتائج سے ، ہم دیکھ سکتے ہیں کہ انزائم مائع کے معیار کو بہتر بنانے کے ل different مختلف تناؤ اچھے ہیں ، لیکن ان کے اثرات مختلف ہیں۔ اگر ہم چاروں تناؤ کو ملا اور خمیر کرتے ہیں تو ، کیا یہ اعلی معیار کے خامروں کے حصول کے لئے زیادہ سازگار ہوگا؟ تو ہم نے مندرجہ ذیل تحقیق کی۔

 

2.2.3 مختلف Aspergillus oryzae ٹیکہ لگانے کا اثر انزائم حسی تشخیص پر مقدار

 

خمیر ، تھرمو فیلک اسٹریپٹوکوکس ، اور بلغاریہ لیکٹو بیکیلس کی ٹیکہ لگانے والی مقدار سب 3 تھے۔ 0 ٪۔ عمل کے دیگر حالات کو تبدیل کیے بغیر ، ایسپرگیلس اوریزے کی ٹیکہ لگانے کی مقدار کو تبدیل کردیا گیا۔ ابال کے 30 دن کے بعد ، انزائم سپرنٹنٹنٹ کا حسی تشخیص اسکور شکل 2.2 میں دکھایا گیا ہے۔

 

 

انجیر .2.2 حسی تشخیص پر Aspergillus oryzae ٹیکہ لگانے والی رقم کے منحنی خطوط کا اثر۔

 

جیسا کہ شکل 2.2 میں دکھایا گیا ہے ، جب خمیر کی ٹیکہ لگانے والی مقدار ، تھرمو فیلک اسٹریپٹوکوکس اور بلغاریہ لیکٹو بیکیلس 3 ہے۔ 0 ٪ کے ساتھ ، جب اسپرجیلس اوریزے کی ٹیکہ لگانے کی مقدار 0. 5 ٪ ~ 2. 0} ٪ ہے۔ ٹیکہ لگانے والی رقم کی۔ جب ٹیکہ لگانے کی رقم 2 ہوتی ہے۔ 0 ٪ ~ 3. لہذا ، تجربے سے پتہ چلتا ہے کہ جب Aspergillus Oryzae کی ٹیکہ لگانے کی مقدار 2 ہے۔ 0 ٪ ، حسی تشخیص اسکور سب سے زیادہ ہے ، اور انزائم کا رنگ ، ذائقہ اور بو سب سے زیادہ ہے۔

 

2.2.4 مختلف خمیر ٹیکہ لگانے کا اثر خامروں کی حسی تشخیص پر

 

aspergillus oryzae کی ٹیکہ لگانے کی مقدار 2 تھی۔ 0 ٪ ، اور اسٹریپٹوکوکس تھرمو فیلس اور لیکٹو بیکیلس بلغاریکس کی ٹیکہ لگانے کی مقدار 3 تھی۔ 0 ٪۔ عمل کے دیگر حالات کو تبدیل کیے بغیر ، خمیر کی ٹیکہ لگانے کی مقدار کو تبدیل کردیا گیا۔ 30 دن کے ابال کے بعد انزائم سپرنٹنٹنٹ کے حسی تشخیصی اسکور کو شکل 2.3 میں دکھایا گیا ہے۔

 

 

اعداد و شمار 2.3 حسی تشخیص پر خمیر ٹیکہ لگانے والی رقم کے منحنی خطوط کا اثر۔

جیسا کہ شکل 2.3 میں دکھایا گیا ہے ، جب ایسپرگیلس اوریزا کی ٹیکہ لگانے والی مقدار 2 ہے۔ 0 ٪ ، اور اسٹریپٹوکوکس تھرمو فیلس اور لیکٹو بیکیلس بلغاریکس کی ٹیکہ لگانے کی مقدار 3 ہے۔ 0 ٪ ، جب 0 ٪ ہے۔ انزائم حسی تشخیص اسکور ٹیکہ لگانے کی رقم میں اضافے کے ساتھ بڑھتا ہے ، اور جب ٹیکہ لگانے کی رقم 1 کے درمیان ہوتی ہے۔ ٹیکہ لگانے کی مقدار 2 تک پہنچنے کے بعد۔ لہذا ، تجربے سے پتہ چلتا ہے کہ جب خمیر کی ٹیکہ لگانے کی مقدار 1 ہوتی ہے۔ 0 ٪ ، حسی تشخیص اسکور سب سے زیادہ ہوتا ہے ، اور انزائم رنگ ، ذائقہ اور بو کی سب سے زیادہ جامع تشخیص ہوتا ہے۔

 

 

 

2.2.5 مختلف تھرمو فیلک کا اثر

 

انزائم کی حسی تشخیص پر اسٹریپٹوکوکس ٹیکہ لگانے کی رقم ایسپرگیلس اوریائزے کی ٹیکہ لگانے کی مقدار 2 ہے۔ 0 ٪ ، خمیر کی ٹیکہ لگانے کی مقدار 1 ہے۔ عمل کے دیگر حالات کو تبدیل کیے بغیر ، تھرمو فیلک اسٹریپٹوکوکس کی ٹیکہ لگانے کی مقدار کو تبدیل کردیا گیا ہے۔ 30 دن کے ابال کے بعد انزائم سپرنٹنٹ کا حسی تشخیص اسکور شکل 2.4 میں دکھایا گیا ہے۔

انجیر .2.4 حسی تشخیص پر اسٹریپٹوکوکس تھرمو فیلس ٹیکہ لگانے کی مقدار کے وکر کا اثر۔

جیسا کہ شکل 2.4 میں دکھایا گیا ہے ، جب ایسپرگیلس اوریزا کی ٹیکہ لگانے والی مقدار 2 ہے۔ 0 ٪ ، خمیر کی ٹیکہ لگانے کی مقدار 1 ہے۔ 0 ٪ ، اور لیکٹو بیکیلس بلغاریکس کی ٹیکہ لگانے والی مقدار 3 ہے۔ انزائم حسی تشخیص اسکور جتنا زیادہ ہوتا ہے ، جب ٹیکہ لگانے کی رقم 1.5 ٪ اور 3 کے درمیان ہوتی ہے۔ 0 ٪ ، حسی تشخیص اسکور ٹیکہ لگانے کی رقم میں اضافے کے ساتھ آہستہ آہستہ رجحان کو ظاہر کرتا ہے۔ لہذا ، تجربے نے یہ نتیجہ اخذ کیا کہ جب تھرمو فیلک اسٹریپٹوکوکس کی ٹیکہ لگانے کی مقدار 1.5 ٪ تھی تو ، حسی تشخیص اسکور سب سے زیادہ تھا ، اور انزائم کے رنگ ، ذائقہ اور بو کی جامع تشخیص سب سے زیادہ تھی۔

 

انجیر 2.5 حسی تشخیص پر لیکٹو بیکیلس بلغاریکس ٹیکہ لگانے کی رقم کے منحنی خطوط کا اثر۔

جیسا کہ شکل 2.5 میں دکھایا گیا ہے ، جب ایسپرگیلس اوریزا کی ٹیکہ لگانے کی مقدار 2 ہے۔ 0 ٪ ، خمیر کی ٹیکہ لگانے کی مقدار 1 ہے۔ 0 ٪ ، اور تھرمو فیلک اسٹریپٹوکوکس کی ٹیکہ لگانے کی مقدار 1.5 ٪ ہے ، جب خمیر کی inoculation مقدار {{{{ہے {{8 {8 {، جب خمیر کی inoculation مقدار {8 {ہوتی ہے۔ 1. 0 ٪ ، انزائم کا حسی تشخیص اسکور اتنا ہی زیادہ ہوتا ہے ، جب ٹیکہ لگانے کی رقم 1 کے درمیان ہوتی ہے۔ لہذا ، تجربے سے پتہ چلتا ہے کہ جب لیکٹو بیکیلس بلغاریکس کی ٹیکہ لگانے کی مقدار 1 ہے۔ 0 ٪ ، حسی تشخیص اسکور سب سے زیادہ ہے ، اور انزائم کے رنگ ، ذائقہ اور بو کی جامع تشخیص سب سے زیادہ ہے۔

2.2.7 تناؤ تناسب کا آرتھوگونل ڈیزائن

آخر کار مخلوط تناؤ کے ابال کے ذریعہ مائکروبیل انزائمز کی تیاری کے لئے زیادہ سے زیادہ تناؤ کے فارمولے کا تعین کرنے کے ل as ، ایسپرگیلس اوریائزے (اے) ، خمیر کی ٹیکہ لگانے والی رقم (بی) ، تھرمو فیلک اسٹریپٹوکوکس ٹیکہ لگانے والی رقم (سی) اور بلغاریہ لیکٹو بیکیلس انوکولیشن کی مقدار (ڈی) کو سیٹ کیا گیا تھا۔ واحد عنصر کے تجربے کے مطابق سطح کے تین معقول حالات پائے گئے ، اور ایک آرتھوگونل تجرباتی جدول ڈیزائن کیا گیا تھا۔ دیگر ماحولیاتی حالات کو کوئی تبدیلی نہیں رکھی گئی تھی ، اور مذکورہ حسی تشخیص کے جامع اسکور کو مائکروبیل انزائمز کے زیادہ سے زیادہ تناؤ کے فارمولے کا تعین کرنے کے لئے اچھے یا برے اشارے کے طور پر استعمال کیا گیا تھا۔ آرتھوگونل تجربے کے لئے تیار کردہ عنصر کی سطح کی جدول کو ٹیبل 2.3 میں دکھایا گیا ہے۔

 

 

 

جیسا کہ جدول 2.4 میں دکھایا گیا ہے ، خامروں کی حسی تشخیص کو متاثر کرنے والا مرکزی عنصر اسپرگیلس اوریازے کی ٹیکہ لگانے کی مقدار ہے ، اس کے بعد اسٹریپٹوکوکس تھرمو فیلس ، پھر لیکٹو بیکیلس بلغاریکس ، اور آخر میں خمیر ہے۔ جب ایسپرگیلس اوریزا کی ٹیکہ لگانے کی مقدار 1.5 ٪ ہے تو ، خمیر کی ٹیکہ لگانے کی مقدار 1 ہے۔ 0 ٪ ، اسٹریپٹوکوکس تھرمو فیلس کی ٹیکہ لگانے کی مقدار 1 ہے۔ مخلوط ابال کے ذریعہ تیار کردہ انزائم سب سے زیادہ ہے۔

 

2.2.8 توثیق کا امتحان

آرتھوگونل ٹیسٹ کے تجزیہ کے نتائج کے مطابق ، توثیق کا امتحان لیا گیا۔ اسپرگیلس اوریزے کی ٹیکہ لگانے کی مقدار 1.5 ٪ تھی ، خمیر کی ٹیکہ لگانے کی مقدار 1 تھی۔ 0 ٪ ، اسٹریپٹوکوکس تھرمو فیلس کی ٹیکہ لگانے کی مقدار 1 تھی۔ 0 ٪ ، اور لیکٹو بیکیلس بلغارکس کی inoculation کی مقدار 1 تھی۔ {{{{{{{. عمل کی دوسری شرائط میں کوئی تبدیلی نہیں ہوئی۔ حاصل کردہ انزائم مائع کا حسی تشخیص اسکور 92.3 تھا ، جو مذکورہ بالا ٹیسٹ میں کسی بھی گروپ سے بہتر تھا۔ لہذا ، مذکورہ بالا مجموعہ ابال ایجنٹ کے بہترین تناسب کے طور پر استعمال ہوتا ہے۔

بیکٹیریا کے ابال سے کہیں زیادہ اینٹی آکسیکرن طاقت کے ساتھ نئی جڑی بوٹیاں

 

2.3 اس باب کا خلاصہ

اس باب میں مخلوط ابال کے ذریعہ مائکروبیل انزائمز کی تیاری کے لئے مشترکہ تناؤ کے زیادہ سے زیادہ تناسب کا مطالعہ کیا گیا ہے۔ حسی تشخیصی اسکور کو بطور اشارے لے کر ، تناسب جو اعلی ترین حسی تشخیص اسکور کو حاصل کرسکتا ہے اس کا انتخاب کیا گیا ہے۔
سب سے پہلے ، ایک ہی تناؤ ٹیکہ لگانے کا تجربہ کیا گیا۔ ایپل کے انزائم کو قدرتی طور پر ایک مہینے کے لئے خمیر کیا گیا تھا ، اس کو اعلی درجہ حرارت اور زیادہ دباؤ سے جراثیم سے پاک کیا گیا تھا ، اور پھر اسپرگیلس اوریزا ، خمیر ، تھرمو فیلک اسٹریپٹوکوکس ، اور بلغاریہ لیکٹو بیکیلس کے ساتھ ٹیکہ لگایا گیا تھا۔ تجرباتی نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ جب ان چاروں تناؤ کو تنہا ٹیکہ لگایا گیا تھا تو انزائم کی حسی تشخیص خالی کنٹرول گروپ کے مقابلے میں زیادہ تھی۔ دوم ، ایک ہی عنصر کے تجربے کے ذریعے ، عمل میں سے کسی ایک کی ٹیکہ کی مقدار کو دوسرے عمل کی شرائط کو تبدیل کیے بغیر تبدیل کردیا گیا تھا ، اور چاروں تناؤ کے مابین مختلف ٹیکہ لگانے والی مقدار اور واحد عنصر کی شرائط کے تحت حسی تشخیص کے ساتھ تعلقات کو حاصل کیا گیا تھا۔ آخر میں ، واحد عنصر کے تجربے کے نتائج کی بنیاد پر ، ایک آرتھوگونل تجربہ زیادہ سے زیادہ تناؤ کے تناسب کو حاصل کرنے کے لئے ڈیزائن کیا گیا تھا ، یعنی ، جب ایسپرگیلس اوریازے کی ٹیکہ لگانے والی مقدار 1.5 ٪ تھی ، خمیر کی ٹیکہ کی مقدار 1 تھی۔ اور in 3}} ٪ ، تھرموفیلک اسٹریٹکوکوکس کی inoculation مقدار 1 تھی۔ لیکٹو بیکیلس بلغاریکس 1 تھا۔ 0 ٪ ، انزائم کا حسی تشخیص اسکور سب سے زیادہ تھا ، زیادہ سے زیادہ 92.3 پوائنٹس کے ساتھ۔