Vivo میں اسکیمیا چوہے کے گردے مائٹوکونڈریا میں کارڈیولپین آکسیڈیشن کو دلاتا ہے۔

سادہ خلاصہ

Mitochondrial cardiolipin ایک منفرد فاسفولیپڈ ہے جو ATP کی ترکیب میں اہم کردار ادا کرتا ہے۔ یہ دیکھا گیا ہے کہ اسکیمیا/ریپرفیوژن دل یا دماغ کے بافتوں میں کارڈیولپینز کو نقصان پہنچاتا ہے۔ تاہم، اسکیمیا/ریپرفیوژن کے بعد گردے کے کارڈیولپینز اور متعلقہ نقصان کے بارے میں بہت کم ڈیٹا پایا گیا ہے۔ ریپرفیوژن کے دوران آکسیڈیٹیو تناؤ کلیدی کردار ادا کرتا ہے۔ تاہم، اسکیمیا کے دوران بھی، cardiolipins کو آکسائڈائز کیا جا سکتا ہے. لہذا، ہم نے Vivo میں رینل اسکیمیا کے دوران کارڈیولپین آکسیکرن کا جائزہ لینا تھا۔ Vivo میں رینل اسکیمیا نر Wistar چوہوں میں 30–60-منٹ کی مدت کے لیے پیدا ہوا تھا۔ اس کے بعد ہم نے گردے کے مائٹوکونڈریا کو الگ تھلگ کیا، لپڈز کو نکالا، اور کرومیٹوگرافک اور ماس اسپیکٹرو میٹرک طریقوں کو لاگو کرکے کارڈیولپین کا تجزیہ کیا۔ نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ ویوو اسکیمیا میں 30 منٹ کے بعد بھی، غالب کارڈیولپین پرجاتیوں کی مقدار تقریباً نصف میں کم ہو گئی، اور اسکیمیا کے وقت کو بڑھاتے وقت اس میں مزید کمی واقع ہوئی۔ کارڈیولپین کو آٹھ اضافی آکسیجن ایٹموں کے ساتھ آکسائڈائز کیا گیا تھا، جس سے ایک سے زیادہ isomeric شکلوں کے ساتھ آٹھ مختلف انواع پیدا ہوتی ہیں۔ اس سے پتہ چلتا ہے کہ اسکیمیا کے بعد بھی، کارڈیولپین کی سطح کو تبدیل کر دیا جاتا ہے، اور بہت سے کارڈیولپین آکسیڈیشن مصنوعات تیار کی جاتی ہیں، جو ممکنہ طور پر زیادہ نقصان دہ لپڈ سگنلنگ مالیکیولز میں تبدیل ہو سکتی ہیں جو مائٹوکونڈریا کو زیادہ نقصان پہنچا سکتے ہیں۔

خلاصہ

Cardiolipin ایک mitochondrial phospholipid ہے جو mitochondrial bioenergetics میں اہم کردار ادا کرتا ہے۔ کارڈیولپین کو آکسیڈیٹیو تناؤ جیسے حالات میں آکسائڈائز کیا جاتا ہے جو اسکیمیا/ریپرفیوژن کے دوران ہوتا ہے۔ تاہم، یہ معلوم ہے کہ اسکیمیا کے دوران بھی، بہت سے رد عمل آکسیجن پرجاتیوں کو پیدا کیا جاتا ہے. ہمارا مقصد کارڈیولپین آکسیڈیشن پر ان ویوو اسکیمیا کے اثر کا تجزیہ کرنا ہے۔ بالغ نر ویسٹار چوہوں کو بے ہوشی کی گئی تھی۔ ir پیٹ کھول دیا گیا تھا، اور مائیکرو واسکولر کلپس 30، 40، یا 60 منٹ کے لیے گردوں کی شریانوں پر رکھی گئی تھیں، جس سے اسکیمیا ہوتا ہے۔ اسکیمیا کے بعد، گردوں کی کٹائی کی گئی تھی، مائٹوکونڈریا کو الگ تھلگ کیا گیا تھا، اور ٹیٹرالین اولیول کارڈیولپین اور اس کی آکسیڈیشن مصنوعات کے کرومیٹوگرافک اور بڑے پیمانے پر سپیکٹرو میٹرک تجزیہ کے لیے لپڈز نکالے گئے تھے۔ کرومیٹوگرافک اور بڑے پیمانے پر سپیکٹرو میٹرک تجزیہ سے پتہ چلا کہ ٹیٹرالین اولیوئل کارڈیولپین میں بالترتیب 30 منٹ، 40 منٹ، اور 60 منٹ رینل اسکیمیا کے بعد 47 فیصد، 68 فیصد، اور 74 فیصد کمی ہوئی ہے (p <0.05)۔ چوہے کے گردے کے مائٹوکونڈریا میں آٹھ مختلف کارڈیولپین آکسیجن کے ساتھ آٹھ اضافی آکسیجن کی نشاندہی کی گئی۔ کل 40 منٹ اسکیمیا کی وجہ سے اوسطاً 6۔{13}}تمام آکسیڈائزڈ کارڈیولپین شکلوں میں گنا اضافہ ہوا۔ ہم اس بات کا ثبوت پیش کرتے ہیں کہ صرف ویوو میں رینل اسکیمیا چوہے کے گردے کے مائٹوکونڈریا میں ٹیٹرالین اولیوئل کارڈیولپین آکسیڈیشن اور کمی کو اکساتا ہے۔

مطلوبہ الفاظ

cardiolipin؛ اسکیمیا؛ آکسیکرن مائٹوکونڈریا؛ گردہ؛ اوکسیڈیٹیو تناؤ.

Cistanche کیا ہے جاننے کے لیے یہاں کلک کریں۔

تعارف

Cardiolipin (CL) ایک منفرد فاسفولیپڈ ہے جو بنیادی طور پر mitochondrial membranes اور بیکٹیریل پلازما جھلیوں میں پایا جاتا ہے [1]۔ مائٹوکونڈریا میں، زیادہ تر CL اندرونی جھلی (IMM) میں واقع ہوتا ہے، جو کل IMM فاسفولیپڈ مواد کا تقریباً 20 فیصد بناتا ہے [2]۔ اس فاسفولیپڈ کی ساخت dimeric ہے اور اس میں چار فیٹی ایسیل چینز شامل ہیں، جو مختلف قسم کے زوال پذیر تیزاب کے امتزاج اور کارڈیولپین مالیکیولر پرجاتیوں کو جنم دیتی ہیں۔ اگرچہ ممالیہ کے بافتوں میں سی ایل کی بہت سی انواع پائی جاتی ہیں، لیکن ایک نوع ہے، ٹیٹرالینولی-سی ایل، جو کہ سب سے زیادہ پائی جاتی ہے [3,4]۔ مثال کے طور پر، اس CL پرجاتیوں میں انسانوں، چوہوں اور مویشیوں کے دلوں میں موجود تمام کارڈیولپینز کا تقریباً 80 فیصد ہوتا ہے۔ یہ دیکھا گیا ہے کہ لینولک ایسڈ کارڈیولپینز میں سب سے زیادہ وافر مقدار میں فیٹی ایسڈ ہے جو جگر، گردے، پٹھوں اور تلی کے ؤتکوں میں پایا جاتا ہے [5,6]۔ کارڈیولپین کی یہ منفرد ساخت اسے مائٹوکونڈریا کے اندر خاص خصوصیات اور افعال دیتی ہے۔ CL mitochondrial membrane morphology، bioenergetics، metabolite transport، mitophagy، مدافعتی ردعمل، اور apoptosis [7-10] میں حصہ لیتا ہے۔ شاید کارڈیو لیپنز کے سب سے اہم کاموں میں سے ایک ان کا مائٹوکونڈریل سانس کی زنجیر کے کمپلیکس کے ساتھ تعامل ہے — کارڈیولپین ان کے استحکام اور آکسیڈیٹیو فاسفوریلیشن سسٹم کے بہترین کام کے لیے ضروری ہے۔ پچھلے مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ پیچیدہ I، پیچیدہ II، پیچیدہ III، سائٹوکوم سی، اور اڈینوسین ٹرائی فاسفیٹ (ATP) ترکیب [10-15] کے زیادہ سے زیادہ کام کرنے کے لیے کارڈیولپین ضروری ہے۔ یہ بھی ثابت کیا گیا ہے کہ کارڈیولپین آکسیڈیٹیو فاسفوریلیشن کی کارکردگی کو کم از کم 35 فیصد تک بڑھا سکتا ہے [16]۔ اس طرح، کارڈیولپین کو ہونے والا کوئی بھی نقصان مائٹوکونڈریل dysfunction اور مزید پیتھولوجیکل جھرنوں کا سبب بن سکتا ہے۔ بارتھ سنڈروم، قلبی اور نیوروڈیجینریٹو امراض، اور مایوکارڈیل اسکیمیا/ریپرفیوژن [3,17–20] جیسی پیتھالوجیز کے دوران کارڈیو لیپین کی ساخت اور مقدار میں تبدیلیاں دیکھی گئی ہیں۔

کارڈیولپین میں ساختی تبدیلیاں بنیادی طور پر آکسیڈیٹیو تناؤ کے دوران ہو سکتی ہیں جب کارڈیولپین کو رد عمل آکسیجن پرجاتیوں (ROS) کے حملے کے ذریعے آکسائڈائز کیا جاتا ہے۔ مائٹوکونڈریا کو ROS کی پیداوار کا ایک اہم ذریعہ سمجھا جاتا ہے۔ لہذا، کارڈیولپین کے محل وقوع کے ساتھ ساتھ پولی ان سیچوریٹڈ فیٹی ایسڈز کی زیادہ تعداد پر غور کرتے ہوئے، CL آکسیڈیشن کے لیے انتہائی حساس ہو جاتا ہے [21,22]۔ جسمانی حالات کے تحت، ROS کی پیداوار اور صفائی کو انتہائی کنٹرول کیا جاتا ہے۔ تاہم، یہ دیکھا گیا ہے کہ ROS کی پیداوار مختلف پیتھولوجیکل حالات جیسے کہ اسکیمیا/ریپرفیوژن، عمر بڑھنے، اور تنزلی کی بیماریوں کے تحت بڑھتی ہے [23]۔ یہ دکھایا گیا ہے کہ مایوکارڈیل اسکیمیا/ریپرفیوژن چوہے کے دل کے مائٹوکونڈریا میں کارڈیولپین کے نمایاں نقصان کا سبب بنتا ہے اور I، III اور IV الیکٹران ٹرانسپورٹ چین کمپلیکس [11–13] میں سرگرمی کم کرتا ہے۔ اسکیمیا کی مختصر مدت اینٹی آکسیڈینٹ نظام کو تبدیل نہیں کرسکتی ہے۔ تاہم، طویل اسکیمیا (مثلاً 60 منٹ ہارٹ اسکیمیا) الیکٹران ٹرانسپورٹ چین کو نقصان پہنچاتا ہے اور ROS کی پیداوار کو بڑھاتا ہے یہاں تک کہ جب 1,5 فیصد آکسیجن رہ جائے [23,24]۔ اسکیمیا کے دوران بڑھتی ہوئی ROS نسل پہلے سے ہی لپڈ پیرو آکسائیڈز کی تشکیل کے ساتھ سی ایل میں پولی ان سیچوریٹڈ فیٹی ایسڈز کے آکسیڈیشن کو آکسائڈ کر سکتی ہے اور مائٹوکونڈریا کو مزید نقصان پہنچا سکتی ہے۔

مایوکارڈیل اسکیمیا/ریپرفیوژن [18,19,25,26] کے بعد کارڈیولپین تبدیلیوں کا تجزیہ کرتے ہوئے کافی تحقیق کی گئی ہے۔ تاہم، گردے کے مائٹوکونڈریا میں کارڈیولپین پر گردے کی اسکیمیا/ریپرفیوژن کے مضمرات کے بارے میں کافی معلومات نہیں ہیں۔ چونکہ گردے کی اسکیمیا کے دوران کارڈیولپین کی تبدیلیوں کے بارے میں کوئی ڈیٹا موجود نہیں ہے، اس لیے اس تحقیق کا مقصد گردے کے مائٹوکونڈریا میں ویوو اسکیمیا میں گرم ہونے کے بعد کارڈیولپین کی کوالٹی اور مقداری تبدیلیوں کا جائزہ لینا ہے۔ یہ مطالعہ ظاہر کرتا ہے کہ Vivo میں گردے کی اسکیمیا سی ایل کے پیرو آکسیڈیشن کا سبب بنتا ہے۔ پولی انسیچوریٹڈ فیٹی ایسڈز کے ساتھ منسلک آٹھ اضافی آکسیجن ایٹموں پر مشتمل کارڈیولپین کی کئی سالماتی انواع کی شناخت الٹرا پرفارمنس مائع کرومیٹوگرافی-ماس اسپیکٹومیٹری (UPLC-MS) طریقہ کے ذریعے کی گئی۔

Cistanche کے اثرات

مواد اور طریقے

1. Vivo ماڈل میں جانور اور تجرباتی اسکیمیا

موجودہ مطالعہ میں استعمال ہونے والے تجرباتی طریقہ کار کو لتھوانیائی کمیٹی آف گڈ لیبارٹری اینیمل یوز پریکٹس (نمبر G{{0}}، 2021-03- 02) کے مطابق انجام دیا گیا تھا۔ 200–250 گرام وزنی بالغ نر چوہوں کو معیاری لیبارٹری کے حالات میں رکھا گیا تھا، قدرتی روشنی اور تاریک سائیکل پر رکھا گیا تھا، اور انہیں خوراک اور پانی تک مفت رسائی حاصل تھی۔ تجربے سے پہلے جانوروں کو لیبارٹری کے حالات کے مطابق بنایا گیا تھا۔ پینٹوباربیٹل اور کیٹامین کو اینستھیزیا کرنے کے لیے استعمال کیا گیا۔ Vivo میں رینل اسکیمیا (37 ◦C) دلانے کے لیے چوہوں کی گردوں کی شریانوں پر عروقی کلپس رکھے گئے تھے۔ اسکیمیا کی تصدیق ~ 2 منٹ کے اندر گردے کا رنگ سرخ سے جامنی رنگ میں تبدیل ہوتے دیکھ کر ہوا۔ اسکیمیا کے اختتام پر (30 منٹ، 40 منٹ، یا 60 منٹ)، کلپس کو اتار دیا گیا، اور گردے کو ہٹا دیا گیا اور سردی (0–4 ◦C) 0.9 فیصد KCl محلول میں خون سے پاک دھویا گیا۔ اس کے بعد، گردے کے ٹشو کو مائٹوکونڈریا کی تنہائی کے لیے استعمال کیا گیا۔ شام سے چلنے والے چوہوں (کنٹرول گروپ) نے ویسکولر کلپس لگانے کے علاوہ ایک جیسی جراحی کے طریقہ کار سے گزرا۔

2. گردے مائٹوکونڈریا کی تنہائی

گردے کے ٹشو کو چھوٹے چھوٹے ٹکڑوں میں کاٹا گیا تھا اور 250 ایم ایم سوکروز، 10 ایم ایم ٹریس ایچ سی ایل، اور 1 ایم ایم ایتھیلینیڈیامینیٹیٹراسیٹک ایسڈ (ای ڈی ٹی اے) (پی ایچ 7.3) پر مشتمل الگ تھلگ میڈیم میں ہم آہنگ کیا گیا تھا۔ سائٹوسولک اور مائٹوکونڈریل فرکشن کو ڈیفرینشل سینٹرفیوگریشن کے ذریعے الگ کیا گیا تھا (5 منٹ 750× g پر اور 10 منٹ 10،000× g، دو بار)، اور گولی کو الگ تھلگ میڈیم میں معطل کر دیا گیا تھا۔ گولی کا استعمال بائیوریٹ طریقہ، مائٹوکونڈریل فنکشن کا تعین، اور فاسفولیپڈ نکالنے کے ذریعے پروٹین کے تعین کے لیے کیا گیا تھا۔

3. مائٹوکونڈریل فنکشن کا تعین

مائٹوکونڈریل فنکشن مائٹوکونڈریا کو اسکیمک نقصان کی تصدیق کے لئے طے کیا گیا تھا۔ یہ 2 mL انکیوبیشن میڈیم (150 mM KCl، 10 mM Tris میں Oroboros{{0}}k پولی گراف سسٹم کے ساتھ مائٹوکونڈریل سانس (آکسیجن کی کھپت) کی پیمائش کرکے کیا گیا تھا۔ ·Cl، 5 mM KH2PO4، 1 mM MgCl2 × 6H2O) pH 7.3 اور 37 ◦C پر۔ اسٹیٹ II (V0) سانس کی پیمائش 5 ایم ایم گلوٹامیٹ اور 5 ایم ایم میلیٹ کی موجودگی میں پیچیدہ I پر منحصر سبسٹریٹس کے طور پر کی گئی۔ ریاست III (V3) سانس کی پیمائش 2 mM اڈینوسین ڈائی فاسفیٹ (ADP) شامل کرکے کی گئی۔ مائٹوکونڈریل بیرونی جھلی کی پارگمیتا کا اندازہ 32 µM سائٹوکوم c (V3 پلس cytc) شامل کرکے کیا گیا۔ 0.12 ایم ایم کاربوکسیٹریکٹائلوسائیڈ (Vcat) شامل کرکے سانس کو روکا گیا، اور سانس کی شرح میں تبدیلیوں کا اندازہ لگایا گیا، جس نے مائٹوکونڈریل اندرونی جھلی کے پارگمیتا میں تبدیلی کی نشاندہی کی۔ ریئل ٹائم ڈیٹا کا حصول اور ڈیٹا تجزیہ Datlab 5 سافٹ ویئر (Oroboros Instruments, Insbruck, Austria) کے ساتھ کیا گیا۔ آکسیجن کی کھپت کی شرح کو pmol/s/0.25 mg mitochondrial پروٹین کے طور پر ظاہر کیا گیا تھا۔ کنٹرول اور اسکیمک (30، 40، 60 منٹ) گروپوں میں مائٹوکونڈریل سانس کے اصل منحنی خطوط کو شکل 1 میں دکھایا گیا ہے۔

شکل 1. کنٹرول اور اسکیمیا گروپس میں گردے کے مائٹوکونڈریا میں آکسیجن کی کھپت۔ منحنی خطوط میں، نیلے رنگ کا نشان آکسیجن کے ارتکاز (nmol/mL) کی نمائندگی کرتا ہے، اور سرخ نشان آکسیجن کے بہاؤ کی نمائندگی کرتا ہے (pmol/s/0.25 mg mitochondrial پروٹین)۔ Vg: مائٹوکونڈریا (مکس) اور سبسٹریٹس کے 0.5 mg/mL کی موجودگی میں سانس کی شرح، 5 mM گلوٹامیٹ، اور 5 mM میلیٹ؛ V3: 2 mM ADP شامل کرنے کے بعد زیادہ سے زیادہ سانس لینے کی شرح؛ V3 پلس سائٹ: 32 uM سائٹوکوم c شامل کرنے کے بعد سانس کی شرح؛ Vcat: 0.12 ایم ایم کاربوکسائل ٹریکائلوسائیڈ شامل کرنے کے بعد سانس کی شرح۔ یہ مشاہدہ کیا گیا ہے کہ کنٹرول کے مقابلے تمام اسکیمیا گروپس میں مائٹوکونڈریل تنفس کم ہو گیا تھا۔

Cistanche tubulosa

4. گردے مائٹوکونڈریا سے فاسفولیپڈز کا اخراج

گردے کے مائٹوکونڈریا سے فاسفولیپڈ نکالنے کو فولچ کے ترمیم شدہ طریقہ [27] کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا تھا۔ کل 500 µL مائٹوکونڈریل سسپنشن کو 1 ملی لیٹر ڈیونائزڈ پانی، 2 ملی لیٹر میتھانول، اور 4 ایم ایل کلوروفارم (1:2:4 والیوم) کے ساتھ ملایا گیا۔ اس مرکب کو کمرے کے درجہ حرارت پر 2000×g کی رفتار سے پانچ منٹ کے لیے سینٹرفیوج کیا گیا۔ نچلے کلوروفارم کا مرحلہ – جس میں لپڈز تھے – برآمد کیا گیا تھا اور شیشے کی شیشی میں N2 ندی کے نیچے بخارات بن گیا تھا۔ بقیہ اوپری مرحلے کو اضافی 2 ملی لیٹر کلوروفارم کے ساتھ ملایا گیا اور دوبارہ سینٹرفیوج کیا گیا۔ اس کے بعد نچلے حصے کو برآمد کرکے شیشے کی شیشی میں شامل کیا گیا۔ مرکب سے زیادہ سے زیادہ لپڈ مواد کو بازیافت کرنے کے لیے یہ آخری مرحلہ دو بار دہرایا گیا۔ ایک N2 ندی کے نیچے ارتکاز کے بعد، گولی کو 100 µL کلوروفارم اور 500 µL isopropanol (1:5 والیوم) میں دوبارہ معطل کیا گیا اور تجزیہ سے پہلے 45 µm سرنج فلٹر کے ذریعے فلٹر کیا گیا۔

5. کارڈیولپین سٹینڈرڈ کا آکسیکرن

Cardiolipin standard (cardiolipin sodium salt from bovine heart, >97 فیصد (TLC)) لائوفیلائزڈ پاؤڈر، سگما الڈرچ، سینٹ لوئس، MO، USA) کو ایک طریقہ استعمال کرتے ہوئے آکسائڈائز کیا گیا تھا جس کی بنیاد کاگن اور ٹیورینا (28,29] کے ذریعہ رپورٹ کیا گیا تھا۔ کارڈیولپین معیار کو فاسفیٹ بفر (K2HPO{{) میں تحلیل کیا گیا تھا۔ 4}} mM، KHPO4 50 mM، ڈبل ڈسٹلڈ H2O؛ pH 7.4) اور بھنور۔ مرکب کو 3 منٹ کے لیے الٹراسونک غسل میں رکھا گیا تاکہ لپڈ ویسیکلز بن سکیں۔ مرکب کو سائٹوکوم c (30 uM) سے علاج کیا گیا HO، (400 uM) پانی کے غسل میں 37 سینٹی گریڈ پر ایک گھنٹے کے لیے۔ انکیوبیشن کی مدت کے دوران HO کو ہر 15 منٹ (کل چار بار) میں شامل کیا جاتا تھا۔ اس کے بعد لپڈس کو کلوروفارم/میتھانول سالوینٹ میں پہلے بیان کردہ طریقہ استعمال کرتے ہوئے نکالا جاتا تھا۔

6. کارڈیولپین کی علیحدگی اور تشخیص

ہمارے معیاری اور مائٹوکونڈریل نمونوں سے کارڈیولپین کی علیحدگی اور تجزیہ انتہائی موثر مائع کرومیٹری - ماس اسپیکٹومیٹری (UPLC-MS) کے ذریعے کیا گیا تھا جس میں واٹر ایکویٹی UPLC کرومیٹوگراف کے ساتھ Xevo TQD (ٹرپل کواڈروپول) ماس اسپیکٹروائزیشن کے ساتھ الیکٹرو اسپیکٹرو میٹر) کا استعمال کیا گیا تھا۔ UPLC تجزیہ کے لیے، ایکویٹی UPLC BEH C18 1.7 µm کالم استعمال کیا گیا تھا۔ جو طریقہ استعمال کیا گیا تھا وہ ریورس فیز آئن پیئر ہائی پرفارمنس مائع کرومیٹوگرافی-ٹینڈم ماس اسپیکٹومیٹری (HPLC-MS/MS) طریقہ پر مبنی تھا جسے Kim et al نے بیان کیا تھا۔ [30]۔ گریڈیئنٹ ایلیوشن میں دو ایلیوینٹس کا استعمال کیا گیا: ایلیوینٹ اے (450 ملی لیٹر ایسٹونیٹرائل، 50 ملی لیٹر پانی، 2.5 ملی لیٹر ٹرائیتھیلامین، 2.5 ملی لیٹر گلیشیل ایسٹک ایسڈ) اور ایلیوئنٹ بی (450 ملی لیٹر آئسوپروپانول، 50 ملی لیٹر پانی، 2.5 ملی لیٹر ٹرائیتھیلامین، 2.5 ملی لیٹر)۔ ایلیوشن گریڈینٹ ٹیبل 1 میں دکھایا گیا ہے۔

7. شماریاتی تجزیہ

مقداری اعداد و شمار کو بطور ذریعہ پیش کیا جاتا ہے ± معیاری غلطی۔ شماریاتی تجزیہ اور گرافک ویژولائزیشن SigmaPlot v14{1}} سافٹ ویئر پیکج (Systat Software Inc., Chicago, IL, USA) کا استعمال کرتے ہوئے انجام دی گئی۔ گروپ کے ذرائع کے موازنہ کے لیے، یک طرفہ انووا کا اطلاق کیا گیا، جس کے بعد جوڑے کے لحاظ سے متعدد موازنہ کے طریقہ کار کے لیے ڈن کا پوسٹ ہاک ٹیسٹ ہوا۔ مزید برآں، طالب علم/ویلچ کا ٹی-ٹیسٹ ہر جوڑے کے اوسط موازنہ کے لیے استعمال کیا جاتا تھا اگر Shapiro-Wilk نارملٹی ٹیسٹ پاس کیا گیا تھا۔ مان – وٹنی سم رینک ٹیسٹ دوسری صورت میں استعمال کیا گیا تھا۔ p اقدار < 0.05 کو شماریاتی لحاظ سے اہم سمجھا جاتا تھا۔

Cistanche کیپسول

بحث

اسکیمیا اور ریفرفیوژن ایک سنگین طبی مسئلہ ہے جو متاثرہ اعضاء اور بافتوں کو نقصان پہنچاتا ہے۔ اس چوٹ کے مالیکیولر میکانزم میں مائٹوکونڈریا میں ری ایکٹو آکسیجن پرجاتیوں کی نسل میں اضافہ اور کارڈیولپین پیرو آکسیڈیشن اور کمی شامل ہے، جس کے نتیجے میں مائٹوکونڈریل آکسیڈیٹیو فاسفوریلیشن اور مائٹوکونڈریل اور سیلولر سالمیت [21,32,33] متاثر ہوتی ہے۔ مائٹوکونڈریل نقصان پہلے سے ہی اسکیمیا کے دوران ہوتا ہے، اور اگرچہ آکسیجن کی سطح کم ہو جاتی ہے، لیکن رد عمل آکسیجن کی نسلیں اب بھی اس سطح پر پیدا ہوتی ہیں جو کارڈیولپین کو آکسائڈائز کرنے اور ختم کرنے کے لیے کافی ہوتی ہیں [34]۔ اسکیمیا ریپرفیوژن کے دوران کارڈیولپین پیرو آکسیڈیشن کا زیادہ تر دل کے مائٹوکونڈریا میں تجزیہ کیا گیا ہے۔ تاہم، اس تحقیق کا فقدان ہے جو گردوں کے مائٹوکونڈریا میں کارڈیولپین پر کی گئی ہے۔

یہ مطالعہ پہلی بار ظاہر کرتا ہے کہ tetralin oleoyl cardiolipin میں Vivo kidney ischemia کے دوران چوہے کے گردے کے مائٹوکونڈریا میں آکسیڈیٹیو تبدیلی اور ختم ہو جاتی ہے۔ پہلے مرحلے میں، وٹرو آکسیڈیشن کے لیے ایک معیاری tetralin oleoyl cardiolipin استعمال کیا گیا تھا جو cytochrome c اور ہائیڈروجن پیرو آکسائیڈ کا استعمال کرتے ہوئے کارڈیولپین آکسیڈیشن مصنوعات کے تجزیہ کے لیے استعمال کیا گیا تھا۔ چونکہ کارڈیولپین مائٹوکونڈریا میں سائٹوکوم سی کے ساتھ قریبی تعامل کرتا ہے، اس لیے کارڈیولپین کو سائٹوکوم سی پیرو آکسیڈیز [35] کے ذریعے آسانی سے آکسائڈائز کیا جا سکتا ہے۔ مزید برآں، الوری وغیرہ۔ نے ظاہر کیا کہ ماؤس ہارٹ اسکیمیا اور ریپرفیوژن کے دوران، الیکٹران ٹرانسپورٹ چین کے دور دراز حصے کی روک تھام، بنیادی طور پر IV کمپلیکس، سائٹوکوم سی پیرو آکسیڈیز سرگرمی کو جنم دیتی ہے، جو کہ ہائیڈروجن پیرو آکسائیڈ کے ساتھ مل کر کارڈیولپین کو آسانی سے آکسائڈائز کر سکتی ہے [36]۔ UPLC-MS کا استعمال کرتے ہوئے، آٹھ کارڈیولپین آکسیڈیشن پروڈکٹس کا جائزہ لیا گیا جن میں ایک سے آٹھ اضافی آکسیجن ایٹم لینولک ایسڈ سے منسلک تھے۔ ماس سپیکٹرومیٹری کے نتائج کی بنیاد پر، ایک ہی لینولک ایسڈ پر ہائیڈرو آکسائیڈز یا ہائیڈروپرو آکسائیڈز کی شکل میں چار تک آکسیجن ایٹم مل سکتے ہیں۔ اسی طرح کے نتائج Kim et al کے ذریعہ بھی شائع کیے گئے تھے۔ تاہم، مختلف آکسیڈائزنگ ایجنٹ استعمال کیے گئے، خاص طور پر ہوا/2,2'-azobis-2-methyl-propanimidamide، dihydrochloride (AAPH)/photosensitizer، اور روشنی۔ مزید برآں، اسی طرح کے نتائج ہیلمر ایٹ ال کے ذریعہ بھی شائع کیے گئے تھے، جنہوں نے فینٹن ردعمل کا اطلاق کیا۔ مصنفین نے اضافی دو اور چار آکسیجن ایٹموں کے ساتھ کارڈیولپین آکسیڈیشن مصنوعات کو تفصیل سے بیان کیا۔ اگرچہ ہیلمر وغیرہ۔ نے ظاہر کیا کہ کارڈیولپین پر آکسیجن کے آٹھ ایٹموں کا پتہ چلا، باقی کارڈیو لیپین فارموں کے بارے میں مزید تفصیلات فراہم نہیں کی گئیں [30,37]۔ آئن کے ٹکڑے کرنے کے نمونے اس مطالعے میں بیان کیے گئے نمونوں سے ملتے جلتے تھے، جو یہ ظاہر کر سکتے ہیں کہ سائٹوکوم سی اور ہائیڈروجن پیرو آکسائیڈ کے ساتھ کارڈیو لیپین آکسیکرن آکسیڈیشن کے انہی نمونوں کی پیروی کرتے ہیں۔ معیاری کارڈیولپین کی آکسیڈیشن مصنوعات میں، غالب شکل دو اضافی آکسیجن ایٹموں کے ساتھ کارڈیولپین تھی — کارڈیو لیپن ہائیڈروپر آکسائیڈ، جسے ہیلمر ایٹ ال نے بھی دیکھا تھا۔ [37]۔ تاہم، ہمارے مطالعے سے پتہ چلتا ہے کہ ویوو سیٹنگ میں، آکسیڈائزڈ کارڈیولپین شکلوں کی نسبتاً مقدار مختلف ہو سکتی ہے کیونکہ سب سے زیادہ وافر شکلیں کارڈیولپین تھیں جن میں کنٹرول میں اضافی پانچ اور چار آکسیجن ایٹم ہوتے ہیں اور اسکیمک چوہے کے گردے مائٹوکونڈریا ہوتے ہیں۔ اس سے ظاہر ہوتا ہے کہ کارڈیولپین ہائیڈروپر آکسائیڈ اب بھی رد عمل کا شکار ہو سکتی ہے اور Vivo میں مزید آکسیڈیشن سے گزرتی ہے، جس سے کچھ زیادہ مستحکم آکسیڈائزڈ کارڈیولپین شکلیں پیدا ہوتی ہیں۔

تجربات کے اگلے سیٹ میں، ہم نے Vivo اسکیمیا میں 30-60 منٹ کے بعد چوہے کے گردے کارڈیولپین کی مقداری اور معیاری تبدیلیوں کا تجزیہ کیا۔ سب سے پہلے، یہ طے کیا گیا تھا کہ چوہے کے گردے مائٹوکونڈریا میں tetralin oleoyl cardiolipin اور trilinoleoyl-monooleoyl cardiolipin کی سطح تقریباً ایک جیسی ہے، جو ان دونوں کو غالب بناتی ہے۔ ویوو اسکیمیا کے 30 منٹ کے بعد، دونوں کارڈیو لیپین پرجاتیوں کی سطح نصف میں کم ہو جاتی ہے۔ تاہم، صرف 30 منٹ اور 40 منٹ کے بعد اسکیمیا ٹیٹرالین اولیوئل کارڈیولپین کے لیے نمایاں کمی ہے۔ Petrosillo et al. اسکیمک چوہے کے دلوں میں کارڈیولپین پیرو آکسیڈیشن کا تجزیہ کیا اور یہ ظاہر کیا کہ اسکیمیا کے 30 منٹ کی وجہ سے کارڈیولپین کے مواد میں 28 فیصد کمی واقع ہوئی ہے [33]۔ اسی طرح کے نتائج Lesnefsky et al نے حاصل کیے تھے۔ اسکیمک حالات میں خرگوش کے دل کے مائٹوکونڈریا کا تجزیہ کرتے وقت۔ کل 30 منٹ اسکیمیا کی وجہ سے سبسارکولیمل مائٹوکونڈریا میں کارڈیولپین اور سائٹوکوم سی مواد میں معمولی کمی واقع ہوئی۔ تاہم، انٹرفیبرلر مائٹوکونڈریا [25] میں کارڈیولپین یا سائٹوکوم سی مواد میں کوئی تبدیلی نہیں دیکھی گئی۔ چن اور لیسنیفسکی نے اسکیمیا کے اس ماڈل کی مزید تفتیش کی اور پایا کہ اسکیمیا کے 30 اور 45 منٹ کے بعد، ہائیڈروجن پیرو آکسائیڈ کی پیداوار میں نمایاں اضافہ ہوا، جس کا مطلب ہے کہ کارڈیولپین کو اسکیمک حالات میں آسانی سے آکسیڈیٹ کیا جا سکتا ہے [38]۔ یہ بھی دکھایا گیا ہے کہ وٹرو میں 20 منٹ کے گرم رینل اسکیمیا نے بھی مائٹوکونڈریل آکسیڈیٹیو فاسفوریلیشن سسٹم کو نمایاں نقصان پہنچایا اور ساتھ ہی پروپوپٹوٹک عنصر کی سرگرمی میں اضافہ [39]۔ تاہم، یہ تجربات ایکس ویوو/ان وٹرو میں کیے گئے تھے، اور اب تک، صرف اسکیمیا کے دوران، خاص طور پر گردوں میں کارڈیولپین تبدیلیوں کے بارے میں کوئی معلومات فراہم کرنے کے لیے ویوو میں بہت سے تجربات نہیں کیے گئے ہیں۔ کم وغیرہ۔ دم گھٹنے کی وجہ سے دل کا دورہ پڑنے کے بعد چوہے کے دماغ اور دل میں کارڈیولپین کے مواد کا تجزیہ کیا اور دریافت کیا کہ tetralin oleoyl cardiolipin صرف چوہے کے دل میں تھوڑا سا ختم ہو جاتا ہے، لیکن دماغ میں نہیں، کارڈیک گرفت کے 30 منٹ بعد [40]۔ لیو وغیرہ۔ Vivo میں چوہے کے گردے کی اسکیمیا کی 45 منٹ کی حوصلہ افزائی کی اور دریافت کیا کہ گردے کی کیپلیری اینڈوتھیلیل سیل مائٹوکونڈریا کرسٹائی جھلیوں کے نقصان کے ساتھ سوجن ہو گیا تھا جسے کارڈیولپین ٹارگٹڈ پیپٹائڈ SS-31 کے ذریعے کم کیا گیا تھا۔ اگرچہ مصنفین نے کارڈیولپین کا تجزیہ نہیں کیا، لیکن ان کے نتائج بتاتے ہیں کہ کارڈیولپین کے نقصان سے مائٹوکونڈریا میں مورفولوجیکل تبدیلیاں آ سکتی ہیں [41]۔

اسکیمیا کے دوران کارڈیولپین آکسیڈیشن مصنوعات کے بارے میں زیادہ معلومات نہیں ہیں، خاص طور پر ویوو میں اسکیمیا میں۔ اس مطالعہ سے پتہ چلتا ہے کہ Vivo میں چوہے کے گردے کی اسکیمیا آٹھ اضافی آکسیجن ایٹموں کے ساتھ ٹیٹرالین اولیوئل کارڈیولپین آکسیڈیشن کا باعث بنتی ہے، جس سے آٹھ آکسیڈیشن مصنوعات بنتی ہیں۔ Lesnefsky et al. کے ذریعہ یہ دکھایا گیا تھا کہ 25 منٹ کی عمر میں چوہے کے دل کی اسکیمیا نے 1496 ڈالٹن کارڈیولپین (اضافی تین آکسیجن ایٹموں کے ساتھ) سبسارکولیمل اور انٹرفیبرلر مائٹوکونڈریا میں نمایاں اضافہ کیا۔ دلچسپ بات یہ ہے کہ اسکیمیا کے 25 منٹ کے بعد چوہے کے دل کے مائٹوکونڈریا میں اس کارڈیولپین پرجاتیوں کی مقدار اسکیمیا کے 25 منٹ کے مقابلے میں زیادہ تھی اور اس کے بعد 30 منٹ ریپرفیوژن [26]۔ ہمارے مطالعے سے پتہ چلتا ہے کہ یہ آکسائڈائزڈ کارڈیولپین پرجاتیوں میں 30 منٹ کے بعد ویوو چوہے کے گردے کی اسکیمیا میں نمایاں اضافہ ہوتا ہے۔ تاہم، اسکیمیا کے 60 منٹ کے بعد یہ سطح کو کنٹرول کرنے کے لیے تقریباً کم ہو جاتا ہے۔ اس طرح کا رجحان دوسرے کارڈیولپین آکسائڈز کے ساتھ دیکھا گیا جن میں اضافی چار، پانچ، چھ، سات، اور آٹھ آکسیجن ایٹم تھے۔ ہم یہ قیاس کرتے ہیں کہ اسکیمیا کا طویل وقت فاسفولیپیسس کے ذریعہ مختلف لائسوکارڈیولپین پرجاتیوں اور لینولک ایسڈ پیرو آکسائیڈز [42,43] میں آکسیڈائزڈ کارڈیولپین ہائیڈولیسس کو متحرک کرسکتا ہے۔ درحقیقت، Smaalen et al. سب نارمتھرمک (28 ◦C) اسکیمک پرفیوژن کے ساتھ کلینیکل کڈنی ٹرانسپلانٹیشن ڈیزائن کا پورسائن ماڈل استعمال کیا ہے اور یہ ظاہر کیا ہے کہ خنزیروں میں گردے کی اسکیمیا monolysocardiolipin (trilinoleoyl cardiolipin) [44] کی نمایاں بلندی کا سبب بنتا ہے۔ اس طرح کے monolysocardiolipins اب مائٹوکونڈریل اندرونی جھلی کے گھماؤ کو شامل کرنے کے لئے موزوں نہیں ہیں، اور نہ ہی وہ مائٹوکونڈریل پروٹینز یا مقامی کارڈیولپین کے ساتھ منسلک ہوتے ہیں، جو آکسیڈیٹیو فاسفوریلیشن کی سرگرمی میں کمی اور سائٹوکوم سی [45] کی رہائی کا سبب بنتے ہیں۔ پیراڈیز وغیرہ۔ نے دکھایا ہے کہ کارڈیولپین کے نقصان سے کمپلیکس I، III، اور IV کی سرگرمی میں کمی واقع ہوئی، جو کہ exogenous cardiolipin کے ساتھ بحال ہوئی، لیکن monolysocardiolipin یا oxidated cardiolipin [11-13] کے ساتھ نہیں۔

Cistanche اقتباس

نتائج

اس مطالعہ سے پتہ چلتا ہے کہ صرف Vivo میں گردے کی اسکیمیا چوہے کے گردے کے مائٹوکونڈریا میں شدید کارڈیولپین آکسیڈیشن اور کمی کا سبب بنتا ہے۔ ممکنہ میٹابولائٹس (جیسے monolysocardiolipin، مفت linoleic acid peroxides، اور 4-hydroxynonenal) کا جائزہ لینے کے لیے مزید مطالعات کی ضرورت ہے جو آکسیڈائزڈ کارڈیولپین کے کیٹابولزم سے باہر آ سکتے ہیں اور سیل سگنلنگ میں حصہ لے سکتے ہیں جو گردوں کے خلیوں کی موت کا باعث بن سکتے ہیں۔ مزید برآں، اسکیمیا کے دوران کارڈیولپین آکسیڈیشن اور کمی کی روک تھام گردوں کو اس بڑھتے ہوئے نقصان سے بچا سکتی ہے جو ریفرفیوژن کے دوران ہوتا ہے۔

حوالہ جات

1. گوہل، ایم وی؛ ہیز، پی. Matsuyama, S.; Schägger، H.؛ Schlame, M.; گرین برگ، ایل ایم کارڈیولپین بائیو سنتھیسس اور مائٹوکونڈریل ریسپائریٹری چین فنکشن ایک دوسرے پر منحصر ہیں۔ J. Biol کیم 2004، 279، 42612–42618۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

2. ڈیوڈک، J. مائٹوکونڈریل سگنلنگ پاتھ ویز میں کارڈیو لیپین کا کردار۔ سامنے والا۔ سیل دیو۔ بائول 2017، 5، 1-17۔ [کراس ریف]

3. شین، زیڈ؛ ہاں، سی۔ مکین، K.؛ گرینبرگ، ایل ایم قلبی صحت میں کارڈیولپین کا کردار۔ بایومیڈ Res. انٹر 2015، 2015۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

4. اویمر، جی؛ لاکنر، K.؛ Muigg، K.؛ Krumschnabel, G.; Watschinger, K.; سیلر، ایس. لنڈنر، ایچ. Gnaiger, E.; Wortmann, SB; ورنر، ER؛ ET رحمہ اللہ تعالی. مائٹوکونڈریل کارڈیولپینز کا سالماتی ساختی تنوع۔ پروک ناٹل اکاد۔ سائنس USA 2018, 115, 4158–4163. [کراس ریف] [پب میڈ]

5. بریڈلی، RM؛ سٹارک، KD؛ ڈنکن، کارڈیولپین فیٹی ایسیل پروفائل پر ٹشو، غذا، اور انزیمیٹک دوبارہ بنانے کا اثر۔ مول نٹر خوراک Res. 2016، 60، 1804–1818۔ [کراس ریف]

6. Shilovsky, GA; پوٹیٹینا، ٹی ایس؛ اشاپکن، وی. یامسکووا، او وی؛ Lyubetsky, V.; سوروکینا، ای وی؛ شرم، ایس آئی؛ مارکوف، اے وی؛ Vyssokikh، MY حیاتیاتی تنوع اور آکسیڈیٹیو تناؤ اور عمر سے متعلق پیتھالوجیز میں کارڈیولپین کی دوبارہ تشکیل۔ بائیو کیمسٹری 2019، 84، 1469–1483۔ [کراس ریف]

7. ستپا، ایم. ایلڈر، این این کارڈیولپین کی آئنائزیشن خصوصیات اور ماڈل بیلیئرز میں اس کی مختلف حالتیں۔ بائیوکیم۔ بائیوفیس۔ ایکٹا 2016، 1858، 1362–1372۔ [کراس ریف]

8. راجہ، وی. گرینبرگ، ایل ایم سیلولر میٹابولزم میں کارڈیولپین کے افعال - بارتھ سنڈروم فینوٹائپ کے ممکنہ ترمیم کار۔ کیم طبیعیات لپڈس۔ 2014، 179، 49–56۔ [کراس ریف]

9. میگوائر، جے جے؛ Tyurina, Y.; محمدیانی، ڈی۔ کپرالوف، او۔ انتھونیموتھو، ٹی ایس؛ کیو، ایف۔ Amoscato, A.; سپارویرو، ایل جے؛ Tyurin, V.; Planas-Iglesias, J.; ET رحمہ اللہ تعالی. کارڈیولپین سگنلنگ کے بارے میں معلوم نامعلوم: بہترین ابھی آنا باقی ہے۔ بائیوکیم۔ بائیوفیس۔ ایکٹا (BBA) Mol. سیل بائیول۔ لپڈس 2017، 1862، 8–24۔ [کراس ریف]

10. پیراڈیز، جی؛ پیراڈیز، وی. ڈی بینیڈکٹس، وی. Ruggiero, FM; پیٹروسیلو، جی۔ مائٹوکونڈریل بائیو انرجیٹکس میں کارڈیو لیپین کا فنکشنل رول۔ بائیوکیم۔ بائیوفیس۔ ایکٹا – بائیو اینرج۔ 2014، 1837، 408–417۔ [کراس ریف]

11. پیراڈیز، جی۔ پیٹروسیلو، جی؛ پستول، ایم. ڈی وینوسا، این. سرینا، ڈی. Ruggiero، FM Lipid peroxidation اور mitochondria میں oxidative metabolism میں تبدیلیاں چوہے کے دل سے الگ تھلگ اسکیمیا اور ریپرفیوژن کا شکار ہیں۔ فری ریڈک۔ بائیول میڈ۔ 1999، 27، 42-50۔ [کراس ریف]

12. پیراڈیز، جی۔ پیٹروسیلو، جی؛ پستول، ایم. ڈی وینوسا، این. فیڈریسی، اے. Ruggiero، FM اسکیمک/ریپرفیوزڈ چوہے کے دل میں مائٹوکونڈریل کمپلیکس I سرگرمی میں کمی: رد عمل آکسیجن پرجاتیوں اور کارڈیولپین کی شمولیت۔ سرک Res. 2004، 94، 53-59۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

13. پیٹروسیلو، جی؛ Ruggiero, FM; ڈی وینوسا، این. پیراڈیز، جی۔ مائٹوکونڈریا میں پیچیدہ III کی سرگرمی میں کمی چوہے کے دل سے الگ تھلگ اسکیمیا اور ریپرفیوژن: رد عمل آکسیجن پرجاتیوں اور کارڈیو لیپین کا کردار۔ FASEB J. 2003, 17, 714-716. [کراس ریف] [پب میڈ]

14. Schwall, CT; گرین ووڈ، وی ایل؛ ایڈلر، این این تنفس کمپلیکس II کی استحکام اور سرگرمی کارڈیولپین پر منحصر ہے۔ بائیوکیم۔ بائیوفیس۔ ایکٹا 2012، 1817، 1588–1596۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

15. اسپائکس، ٹی ای؛ منٹگمری، ایم جی؛ واکر، بوائین مائٹوکونڈریا سے ڈائمرک اے ٹی پی سنتھیس کا جے ای سٹرکچر۔ پروک ناٹل اکاد۔ سائنس USA 2020, 117, 23519–23526. [کراس ریف]

16. Claypool, SM; Oktay, Y.; Boontheung، P.؛ لو، جے اے؛ Koehler، CM Cardiolipin mitochondrial اندرونی جھلی کے بڑے ADP/ATP کیریئر پروٹین کے تعامل کی وضاحت کرتا ہے۔ جے سیل بائول 2008، 182، 937-950۔ [کراس ریف]

17. Ishimoto, Y.; Inagi، R. Mitochondria: شدید گردے کی چوٹ میں علاج کا ہدف۔ نیفرول۔ ڈائل. ٹرانسپلانٹ. 2015، 31، 1062–1069۔ [کراس ریف]

18. پیراڈیز، جی۔ پیراڈیز، وی. Ruggiero, FM; Petrosillo, G. Cardiolipin تبدیلیاں اور دل کی اسکیمیا/ریپرفیوژن کی چوٹ میں مائٹوکونڈریل ڈیسفکشن۔ کلین لپڈول 2015، 10، 415–429۔ [کراس ریف]

19. ایلن، ME؛ Pennington, ER; پیری، جے بی؛ دادو، ایس. مکریکا کوکا، ایم؛ ڈیمبروا، ایم. مقدر، ایف۔ پٹیل، ایچ ڈی؛ ہان، ایکس۔ کڈ، جی؛ ET رحمہ اللہ تعالی. کارڈیولپین بائنڈنگ پیپٹائڈ ایلامیپریٹائڈ چوہوں میں کارڈیک اسکیمیا ریپرفیوژن کے بعد کرسٹی نیٹ ورکس کے ٹکڑے ہونے کو کم کرتا ہے۔ کمیون بائول 2020، 3، 1-12۔ [کراس ریف]

20. فالابیلا، ایم. ورنن، ایچ جے؛ حنا، ایم جی؛ Claypool, SM; Pitceathly، RDS Cardiolipin، mitochondria، اور اعصابی بیماری۔ رجحانات Endocrinol. میٹاب۔ 2021، 32، 224–237۔ [کراس ریف]

21. پیراڈیز، جی۔ پیراڈیز، وی. Ruggiero, FM; پیٹروسیلو، جی مائٹوکونڈریل بائیو اینرجیٹکس اور مایوکارڈیل اسکیمیا-ریپرفیوژن انجری میں کارڈیولپین تبدیلیاں: فارماسولوجیکل کارڈیو پروٹیکشن کے مضمرات۔ ایم۔ جے فزیول۔ ہارٹ سرک۔ فزیول 2018، 315، H1341–H1352۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

22. Vähäheikkilä، M.؛ پیلٹوما، ٹی. Róg, T.; وازدار، ایم. Pöyry, S.; Vattulainen, I. کارڈیولپین پیرو آکسیڈیشن اندرونی مائٹوکونڈریل جھلی کی خصوصیات کو کس طرح تبدیل کرتی ہے؟ کیم طبیعیات لپڈس۔ 2018، 214، 15-23۔ [کراس ریف]

23. زوروف، ڈی بی؛ Juhaszova، M.؛ سولوٹ، ایس جے مائٹوکونڈریل ری ایکٹیو آکسیجن اسپیسیز (آر او ایس) اور آر او ایس انڈسڈ آر او ایس ریلیز۔ فزیول Rev. 2014, 94, 909-950. [کراس ریف] [پب میڈ]

24. جاسم، ڈبلیو. Fuggle, SV; ریلا، ایم. کو، ڈی ڈی ایچ؛ ہیٹن، این ڈی اسکیمیا/ریپرفیوژن انجری میں مائٹوکونڈریا کا کردار۔ ٹرانسپلانٹیشن 2002، 73، 493–499۔ [کراس ریف]

25. Lesnefsky, EJ; سلیب، ٹی جے؛ سٹول، MSK؛ منکلر، پیئ؛ ہاپل، سی ایل مایوکارڈیل اسکیمیا خرگوش کے دل کے سبسرکولیمل مائٹوکونڈریا میں کارڈیولپین کو منتخب طور پر ختم کرتا ہے۔ ایم۔ جے فزیول۔ ہارٹ سرک۔ فزیول 2001، 280، 2770–2778۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

26. Lesnefsky, EJ; منکلر، پی. ہاپل، سی ایل بوڑھے دل میں اسکیمیا کے دوران کارڈیولپین کی بہتر تبدیلی۔ جے مول سیل کارڈیول۔ 2009، 46، 1008–1015۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

27. فولچ، جے؛ Lees, M.; Sloane Stanley, G. جانوروں کے ٹشوز سے کل لپڈس کو الگ تھلگ کرنے اور صاف کرنے کا ایک آسان طریقہ۔ J. Biol کیم 1957، 226، 497–509۔ [کراس ریف]

28. کاگن، VE؛ Tyurin, VA; جیانگ، جے؛ Tyurina, YY; Ritov، VB؛ Amoscato, AA; اوسیپوف، اے این؛ بیلیکووا، این اے؛ کپرالوف، او۔ کنی، وی. ET رحمہ اللہ تعالی. Cytochrome C پروپوپٹوٹک عوامل کی رہائی کے لیے ضروری کارڈیولپین آکسیجن کے طور پر کام کرتا ہے۔ نیٹ کیم بائول 2005، 1، 223–232۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

29. Tyurina, YY; کنی، وی. Tyurin, VA; ولاسوا، II؛ جیانگ، جے؛ کپرالوف، اے اے؛ بیلیکووا، این اے؛ یالووچ، جے سی؛ Kurnikov، IV؛ کاگن، سائٹوکوم کے ذریعہ کارڈیولپین آکسیڈیشن کے VE میکانزم: ایٹوپوسائڈ کے پرو اور اینٹی پوپٹوٹک افعال سے مطابقت۔ مول فارماکول۔ 2006، 70، 706–717۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

30. کم، جے؛ منکلر، پیئ؛ سالومن، آر جی؛ اینڈرسن، VE؛ ہاپل، سی ایل کارڈیولپین: مختلف آکسائڈائزڈ مالیکیولر پرجاتیوں کی خصوصیت۔ J. Lipid Res. 2011، 52، 125–135۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

31. چوئی، جے؛ ین، ٹی. شینوزاکی، K.؛ لیمپ، جے ڈبلیو؛ سٹیونز، جے ایف؛ بیکر، ایل بی؛ Kim, J. دماغ، دل، گردے اور جگر میں فاسفولیپڈز کا جامع تجزیہ: برین فاسفولیپڈز پولی ان سیچوریٹڈ فیٹی ایسڈز سے کم سے کم افزودہ ہوتے ہیں۔ مول سیل بائیو کیم۔ 2017، 442، 187–201۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

32. چاؤ، ٹی. پراتھر، ER؛ گیریژن، ڈی ای؛ زیو، ایل. کارڈیک اور کنکال کے پٹھوں میں اسکیمیا-ریپرفیوژن انجری کے دوران ROS اور اینٹی آکسیڈنٹس کے درمیان تعامل۔ انٹر جے مول سائنس 2018، 19، 417۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

33. پیٹروسیلو، جی؛ ڈی وینوسا، این. Ruggiero، F.؛ پستول، ایم. D0 Agostino, D.; تراونتی، ای. فیور، ٹی. پیراڈیز، جی۔ کارڈیک اسکیمیا/ریپرفیوژن سے وابستہ مائٹوکونڈریل ڈسکشن کو آکسیجن ٹینشن کنٹرول کے ذریعے کم کیا جا سکتا ہے۔ آکسیجن فری ریڈیکلز اور کارڈیولپین کا کردار۔ بائیوکیم۔ بائیوفیس۔ ایکٹا 2005، 1710، 78–86۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

34. Raedschelders, K.; اینسلی، ڈی ایم؛ چن، ڈی ڈی وائی مایوکارڈیل اسکیمیا اور ریپرفیوژن کے دوران ری ایکٹیو آکسیجن پرجاتیوں کی سیلولر اور سالماتی اصل۔ فارماکول۔ وہاں 2012، 133، 230–255۔ [کراس ریف]

35. ین، ایچ. Zhu, M. کارڈیولپین کا فری ریڈیکل آکسیڈیشن: کیمیکل میکانزم، پتہ لگانے، اور اپوپٹوسس، مائٹوکونڈریل ڈیسفکشن، اور انسانی امراض میں مضمرات۔ فری ریڈک۔ Res. 2012، 46، 959–974۔ [کراس ریف]

36. الوری، ایچ. سمپسن، ڈی. Allegood, JC; Hu, Y.; Szczepanek, K.; Gronert, S.; چن، Q. Lesnefsky، EJ الیکٹران کا بہاؤ سائٹوکوم c میں اور الیکٹران ٹرانسپورٹ چین سے رد عمل والی آکسیجن پرجاتیوں کے ساتھ سائٹوکوم سی کو کارڈیو لیپن پیرو آکسیڈیز میں تبدیل کرتا ہے: اسکیمیا ریپرفیوژن کے دوران کردار۔ بائیوکیم۔ بائیوفیس۔ ایکٹا (BBA) -جنرل سبج 2014، 1840، 3199–3207۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

37. ہیلمر، PO؛ Behrens, A.; Rudt, E.; کارسٹ، یو۔ ہیین، ایچ۔ ہائیڈرو پیرو آکسیلیٹڈ بمقابلہ ہائیڈرو آکسیلیٹڈ لپڈز: کثیر جہتی علیحدگی کی تکنیکوں کے ذریعہ آئسومیرک کارڈیولپین آکسیڈیشن مصنوعات کی تفریق۔ مقعد کیم 2020، 92، 12010–12016۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

38. چن، Q.؛ Lesnefsky, EJ اسکیمیا کے دوران کارڈیولپین اور سائٹوکوم سی کی کمی الیکٹران ٹرانسپورٹ چین سے ہائیڈروجن پیرو آکسائیڈ کی پیداوار کو بڑھاتی ہے۔ فری ریڈک۔ بائول میڈ. 2006، 40، 976-982۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

39. بنین، آر. ٹرمبیکاس، ڈی۔ Kincius، M.؛ Pauziene, N.; راؤڈون، ایل۔ جیوالٹاس، ایم. Trumbeckaite, S. مختصر اسکیمیا چوہے کے گردے مائٹوکونڈریا کی خرابی کو اکساتا ہے۔ J. Bioenerg. بائیو میمبر 2016، 48، 77–85۔ [کراس ریف]

40. کم، جے؛ لیمپ، جے ڈبلیو؛ ین، ٹی. شینوزاکی، K.؛ بیکر، دماغ اور دل میں ایل بی فاسفولیپڈ تبدیلیاں چوہے کے ماڈل میں دم گھٹنے سے متاثر کارڈیک گرفت اور کارڈیو پلمونری بائی پاس ریسیسیٹیشن۔ مول سیل بائیو کیم۔ 2015، 408، 273–281۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

41. لیو، ایس. سونگ، وائی۔ سیشن، ایس وی؛ Szeto، HH ناول کارڈیولپین علاج گردوں کی اسکیمیا کے دوران اینڈوتھیلیل مائٹوکونڈریا کی حفاظت کرتا ہے اور مائکرو واسکولر ریفیکشن، سوزش اور فبروسس کو کم کرتا ہے۔ ایم۔ J. Physiol-Ren. فزیول 2014، 306، 970-980۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

42. بلند، جے آر؛ واسرلوس، کے جے؛ Tyurin, V.; Tyurina, Y.; Amoscato, A.; مالم پلی، آر کے؛ چن، بی بی؛ زاؤ، جے؛ زاؤ، وائی؛ اوفوری اکواہ، ایس. ET رحمہ اللہ تعالی. لیپوپروٹین سے وابستہ فاسفولیپیس اے 2 ہائیڈولیسس کے ذریعے آکسیڈائزڈ لپڈ ثالثوں کی بایو سنتھیسز ایکسٹرا سیلولر کارڈیو لیپین کے اینڈوتھیلیل زہریلا کو متاثر کرتی ہے۔ ایم۔ جے فزیول۔ سیل مول فزیول 2016، 311، L303–L316۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

43. Pr ˚uchová, P.; Gotvaldová, K.; Smolková, K.; ایلان، ایل۔ Holendová, B.; توبر، جے؛ Galkin، A.؛ Ježek، P.؛ جب یوریک، ایم. اینٹی آکسیڈینٹ کردار اور کارڈیو لیپن کو ریڈوکس ایکٹیویٹڈ مائٹوکونڈریل Ca2 پلس - دماغ میں آزاد فاسفولیپیس A2 کے ذریعے دوبارہ تشکیل دینا۔ اینٹی آکسیڈینٹس 2022، 11، 198۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

44. وین سمالن، ٹی سی؛ ایلس، ایس آر؛ Mascini, NE; سیگل، ٹی پی؛ Cillero-Pastor, B.; ہلن، ایل ایم؛ وین ہرن، ایل ای؛ Peutz-Kootstra, CJ; ہیرن، ماس سپیکٹرو میٹری امیجنگ کے ذریعے رینل ٹشو میں اسکیمک انجری کی RMA تیزی سے شناخت۔ مقعد کیم 2019، 91، 3575–3581۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

45. ڈنکن، AL Monolysocardiolipin (MLCL) کا مائٹوکونڈریل میمبرین پروٹین کے ساتھ تعامل۔ بائیو کیم۔ Soc ٹرانس 2020، 48، 993–1004۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

ارویڈاس سٹرازڈاؤسکاس 1,2، سوناٹا ٹرمبیکائٹ 1,3، والڈاس جاکسٹاس 3,4، جسٹینا کماروسکائیٹ 3,4، لیوڈاس ایوانوسکاس 5 اور راسا بنین 1,2

1 لیبارٹری آف بایو کیمسٹری، نیورو سائنس انسٹی ٹیوٹ، لتھوانین یونیورسٹی آف ہیلتھ سائنسز، ایل ٹی-50162 کوناس، لتھوانیا؛ sonata.trumbeckaite@lsmuni.lt (ST); rasa.baniene@lsmuni.lt (RB)

2 ڈیپارٹمنٹ آف بائیو کیمسٹری، میڈیکل اکیڈمی، لتھوانین یونیورسٹی آف ہیلتھ سائنسز، ایل ٹی-50161 کوناس، لتھوانیا

3 شعبہ فارماکگنوسی، میڈیکل اکیڈمی، لتھوانیائی یونیورسٹی آف ہیلتھ سائنسز، ایل ٹی-50162 کوناس، لتھوانیا؛ valdas.jakstas@lsmuni.lt (VJ)؛ justina.kamarauskaite@lsmu.lt (جے کے)

4 لیبارٹری آف بایوفارماسیوٹیکل ریسرچ، انسٹی ٹیوٹ آف فارماسیوٹیکل ٹیکنالوجیز، لتھوانین یونیورسٹی آف ہیلتھ سائنسز، ایل ٹی-50162 کوناس، لتھوانیا

5 شعبہ تجزیاتی اور زہریلے کیمسٹری، میڈیکل اکیڈمی، لتھوانین یونیورسٹی آف ہیلتھ سائنسز، LT-50162 Kaunas، Lithuania; liudas.ivanauskas@lsmuni.lt