Cistanche کے کیمیائی فعال اجزاء کی شناخت کا طریقہ

رابطہ:joanna.jia@wecistanche.com

X500R QTOF سسٹم کا استعمال کرتے ہوئے Cistanche Deserticola کے کیمیائی اجزاء کی شناخت

لی یوجی، چینگ ہیان، لیو ٹنگ، لی لیجن، جن وینہائی ایس سی آئی ای ایکس، ایشیا پیسفک ایپلیکیشن سپورٹ سینٹر (شنگھائی)، چین

تعارف

Cistanche deserticolaپہلی بار "شین نونگ میٹیریا میڈیکا" میں ریکارڈ کیا گیا تھا۔ اسے "دیون،" "روسونگ رونگ،" اور "زونگ رونگ" کے نام سے بھی جانا جاتا ہے۔ روایتی جڑی بوٹیوں کی دوا کے طور پر، اس میں گردے یانگ کی پرورش، خون کے بہاؤ کو بہتر بنانے، جلاب کے طور پر کام کرنے، مدافعتی محرک، اور دیگر اثرات کی خصوصیات ہیں[1]۔ 1983 میں جاپانی اسکالر ایچ کوبیاشی اور دیگر نے اس کی کیمیائی ساخت کا مطالعہ شروع کیا۔Cistanche Deserticola[2]، اور اس کے بعد سے یہ چینی طب کی تحقیق میں ایک مقبول موضوع بن گیا ہے جس نے گزشتہ 30 سالوں میں اندرون اور بیرون ملک کافی دلچسپی پیدا کی ہے۔Cistanche Deserticolaفینولک پر مشتمل پودوں کی کلاس سے تعلق رکھتا ہے۔glycosides، iridoids، اور ان کےglycosides, اور lignans اور ان کےglycosides.

کواڈروپول ٹائم آف فلائٹ (QTOF) ماس سپیکٹرو میٹری چینی ادویات کے اجزاء کی شناخت کے لیے ایک حساس اور مخصوص ٹول ہے جو تحقیق کے لیے بتدریج ناگزیر ہو چکے ہیں۔ اس ٹکنالوجی نے روایتی تکنیکی چیلنجوں پر قابو پالیا ہے جس میں سنگل انجیکشن کے سابقہ ​​تجزیے ہیں جو اہم ڈیٹا کو نکالنے اور نمونے کی معلومات کے سب سے زیادہ جامع حصول کی اجازت دیتے ہیں۔ درست بڑے پیمانے پر اور اعلی ریزولیوشن TOF-MS اور TOF-MS/MS ڈیٹا کا استعمال بیک وقت، انتہائی مخصوص ٹارگٹڈ اور غیر ٹارگیٹڈ کوالٹیٹو تجزیہ کی اجازت دیتا ہے۔ تاہم، آلے کے آپریشن اور سافٹ ویئر کے استعمال کی پیچیدگی نے اس ٹیکنالوجی کے پھیلاؤ اور ترقی کو کافی حد تک محدود کر دیا ہے۔ یہاں ہم ایک نیا QTOF سسٹم متعارف کراتے ہیں جو ایک انقلابی نیا N-type جیومیٹری پر مبنی TOF پاتھ، بدیہی سافٹ ویئر، اور سالماتی وزن کی درست تکنیکوں کا استعمال کرتا ہے جو چینی ادویات کے اجزاء کی شناخت میں استعمال کرنا آسان ہے۔

اس طریقہ کار کے فوائد درج ذیل ہیں:

1. X500R پائیدار، صنعت سے منظور شدہ ٹربو VTM آئن سورس اور ایئر پردے گیس انٹرفیس ڈیزائن کا استعمال کرتا ہے، جس میں ایک مضبوط انسداد آلودگی کی خصوصیت ہے۔

2. SCIEX OS سافٹ ویئر نے ایک پلیٹ فارم پر حصول، پروسیسنگ، اور رپورٹنگ کے افعال کو مربوط کیا ہے۔ انٹرفیس بدیہی ہے، مہارت حاصل کرنے میں آسان ہے، اور اس میں ون ٹچ آٹو ایڈجسٹ کریکشن ہے تاکہ یہ یقینی بنایا جا سکے کہ کسی بھی ڈگری کی مہارت کے حامل تجزیہ کار اعلیٰ معیار کا، قابل اعتماد ڈیٹا حاصل کر سکتے ہیں۔

3. چینی ادویات کے اجزاء کی شناخت کے لیے ڈیٹا پر کارروائی کرنے کے لیے SCIEX OS سافٹ ویئر کا استعمال آسان ہے اور مفید معلومات کو تیزی سے نکالنے کی اجازت دیتا ہے، اس طرح؛

4. یہ MS/MS سپیکٹرا پر مشتمل چینی ادویات کی لائبریریوں سے زیادہ درست اور قابل اعتماد شناختی نتائج اخذ کرتا ہے۔

5. ہائی ریزولوشن MS/MS چینی ادویات کے ڈیٹا بیس "چینی فارماکوپیا" حصہ 1 TCM فعال اجزاء پر مبنی ہیں۔ فارماکوپیا میں اجزاء کے حوالہ جات اور جڑی بوٹیوں میں فعال اجزاء سمیت، تقریباً 900 مرکبات ہیں۔

cistanche deserticola افادیت کو بہتر بنانے کے

تجرباتی عمل

1. TOF-MS-IDA MS/MS موڈ کا استعمال کرتے ہوئے، ایک نمونہ لگائیں اور بیک وقت پرائمری پرسرسر آئنز اور متعلقہ سیکنڈری سپیکٹرا حاصل کریں۔

2. SCIEX OS سافٹ ویئر کی ٹارگٹڈ اسکریننگ، ٹارگٹ کمپاؤنڈز کی تصدیق، اور ثانوی سپیکٹرا کے ساتھ چینی ادویات کے معیارات اور مماثلت کے طریقوں کی اسکریننگ کا استعمال درستگی اور کام کی پیداواری صلاحیت کو بڑھا سکتا ہے۔

.

نمونے اور پری پروسیسنگ کا طریقہ

نمونہ ذریعہ:

شنگھائی فارمیسیوں سے کٹے ہوئے شکل میں خریدا گیا۔

پری پروسیسنگ کا طریقہ:

1. سلائسوں کو پاؤڈر بنانے کے لیے کچل دیا گیا تھا۔

2. 0.9mg کا وزن کیا گیا اور 3mL میتھانول میں 40 منٹ تک ڈبویا گیا۔

3. مرحلہ 2 سے نمونہ) الٹراسونیکیٹ کیا گیا تھا 1 h؛

4. ایک نمونے کے طور پر استعمال کرنے کے لیے سپرناٹینٹ کو سینٹرفیوگریشن اور ہٹانا انجام دیا گیا۔

مائع کرومیٹوگرافی (LC) کی شرائط

کرومیٹوگرافک کالم: XSelect HSS T3، 2.1*150mm، 3.5µm؛

موبائل مرحلہ: گریڈینٹ ایلیوشن استعمال کیا گیا تھا۔

موبائل مرحلہ: A ہے 0.1 فیصد فارمک ایسڈ واٹر-2mM NH4FA

B 95 فیصد acetonitrile-5 فیصد پانی-2mM NH4FA ہے

بہاؤ کی شرح: 0.5mL/منٹ

کالم درجہ حرارت: 40ºC

داخل کی گئی رقم: 5µL

ماس سپیکٹرو میٹری طریقہ:

اسکیننگ کا طریقہ: TOF MS-IDA-15 MS/MS کوالٹیٹیو اسکریننگ

ESI آئن سورس پیرامیٹرز:

ایئر پردے گیس CUR: 35psi؛ IS وولٹیج: 5500V/-4500V

ماخذ درجہ حرارت: 600ºC

ایٹمائزنگ گیس GAS1: 55psi؛ معاون گیس GAS2: 60psi

انسٹرومینٹیشن موڈ کی تلاش:

ون ٹچ (نچلے دائیں طرف MS چیک کو منتخب کریں)، مکمل طور پر خودکار TOF-MS اور TOF-MS/MS اصلاح موڈ اس بات کو یقینی بناتا ہے کہ کسی بھی مہارت کی سطح کے تجزیہ کار درست، قابل اعتماد، دوبارہ پیدا کرنے کے قابل ڈیٹا حاصل کر سکتے ہیں۔

مثبت اور منفی آئن موڈ BPCs:

کمپاؤنڈ شناختی طریقہ کار

1. ھدف شدہ اجزاء کی شناخت کا ورک فلو

1.1: مالیکیولر فارمولہ کی تلاش

صرف کیمیائی مرکب کا نام اور سالماتی فارمولہ درکار ہے۔ پروسیسنگ کا طریقہ بنانے کے لیے یہ ایکسل کے کاپی اور پیسٹ فنکشن کا استعمال کرتے ہوئے براہ راست ان پٹ یا امپورٹ کیے جا سکتے ہیں۔

ایک بار نتائج کا جدول بن جانے کے بعد، مقداری اور کوالٹیٹیو نتائج ایک ہی ونڈو میں دیکھے جا سکتے ہیں۔ ایک سرخ/سبز اشارے کا نظام بڑے پیمانے پر درستگی، برقرار رکھنے کا وقت، آاسوٹوپ کی قسم، اور ڈیٹا بیس کے ملاپ کے ذریعے شناخت میں اعتماد کی نشاندہی کرنے کے لیے استعمال کیا جاتا ہے۔

SCIEX OS سافٹ ویئر صارفین کو نتائج کو فلٹر کرنے اور صرف ان مرکبات کو ظاہر کرنے دیتا ہے جو قبولیت کے معیار پر پورا اترتے ہیں اور صارف کی طرف سے بیان کردہ اعتماد کے وقفوں کے اندر آتے ہیں۔ یہ بڑے ڈیٹا بیس میں تیزی سے ہدف کے نتائج تلاش کر سکتا ہے۔

MS/MS سپیکٹرا کا TCM ڈیٹا بیس ثانوی مماثلت کی اجازت دیتا ہے اور زیادہ قابل اعتماد نتائج دیتا ہے (ڈیٹا بیس میں سرمئی رنگ MS/MS ڈیٹا کی نشاندہی کرتا ہے)

ادب میں فینولک کے نام اور سالماتی فارمولے شامل ہیں۔glycosideفعال اجزاء. مندرجہ بالا عمل کو ہدف کے اجزاء کی شناخت کے لیے استعمال کرتے ہوئے، یہ طے پایا کہ نمونے میں 39 قسم کے فینولک گلائکوسائیڈز شامل ہیں:

فینولک کے علاوہglycosideفعال اجزاء، Cistanche میں مرکبات کی ایک بڑی تعداد بھی شامل ہے جیسے iridoids، glycosides، اور lignans. شناخت کے نتائج درج ذیل ہیں:

iridoids، glycosides، اور lignans کی شناخت کی فہرست:

1.2: ڈیٹا بیس کی تلاش:

TCM ڈیٹا بیس میں مماثل شناخت سے 53 مرکبات حاصل کیے گئے: 43 مثبت آئنز، 22 منفی آئنز، اور 12 دہرائے گئے، جو ذیل میں درج ہیں۔ فعال فینولک کے علاوہglycosides، iridoids، glycosides، اور lignans، Cistanche بھی مشتمل ہے

2. غیر ھدف شدہ اجزاء کا تجزیہ

غیر ھدف شدہ اجزاء کی شناخت بلٹ ان ChemSpider سرچ فنکشن کے ساتھ کی جا سکتی ہے تاکہ نامعلوم کی درجہ بندی اور قسم کا تعین کیا جا سکے۔ غیر ھدف شدہ اجزاء کی شناخت کے لیے، صرف "غیر ھدف شدہ" موڈ کا انتخاب کریں اور مالیکیولر فارمولہ کی تلاش ایک پروسیسنگ طریقہ تیار کرے گی۔ ورک فلو مندرجہ ذیل ہے:

مکمل نامعلوم افراد کے لیے، مالیکیولر فارمولہ تلاش کے نتائج TOF MS ماس سپیکٹرم کے نچلے حصے میں چوٹی براؤزر ونڈو میں دکھائے جاتے ہیں۔ ChemSpider ڈیٹا بیس کی تلاش کے ساتھ، نتائج کو ترجیح کے لحاظ سے درج کیا جاتا ہے، اور ChemSpider میں حاصل کردہ ساختی معلومات کا خود بخود حاصل کردہ MS/MS سپیکٹرم کے ساتھ موازنہ کیا جاتا ہے، جو تیزی سے شناخت کے لیے ثانوی رائے فراہم کرتا ہے۔

خلاصہ

1. تیز رفتار ہائی ریزولوشن ڈیٹا کا حصول؛ ایک انجیکشن سے ہائی ریزولوشن TOF MS اور MS/MS ڈیٹا ملا، جس میں 39 قابل شناخت فینولک گلائکوسائیڈ فعال اجزاء اور 16 iridoids، lignans، اور glycosides شامل ہیں۔

2. سیکنڈری سپیکٹرا کا TCM ڈیٹا بیس اضافی مماثل معلومات فراہم کرتا ہے، اور سافٹ ویئر خود بخود ڈیٹا بیس میچ سکور فراہم کرتا ہے۔ سکور کا استعمال کرتے ہوئے، کوئی بھی چینی ادویات کے اجزاء کو آسانی سے، جلدی اور درست طریقے سے پہچان سکتا ہے۔

3. ڈیوائس سادہ ہے اور اس میں ون ٹچ آٹو ایڈجسٹ کریکشن ہے تاکہ اس بات کو یقینی بنایا جا سکے کہ کسی بھی ڈگری کی مہارت کے حامل تجزیہ کار اعلیٰ معیار، قابل اعتماد ڈیٹا حاصل کر سکتے ہیں۔

4. نیا SCIEX OS سافٹ ویئر ورژن ڈیٹا کے حصول، پروسیسنگ (مقدار اور کوالٹیٹیو)، ڈسپلے، رپورٹنگ، اور ڈیٹا بیس مینجمنٹ کو مربوط کرتا ہے۔ یہ ان مشکلات کو حل کرتا ہے جن کا سامنا بہت سے صارفین کو بدیہی اور استعمال میں آسان انٹرفیس کے ساتھ ہوتا ہے۔

5. دونوں ٹارگٹڈ اور غیر ٹارگٹڈ اسکریننگ ورک فلو آسان ہیں، اور بلٹ ان میتھڈ گائیڈ صارفین کو درست طریقے سے اور تیزی سے طریقے بنانے میں مدد کرتا ہے۔

حوالہ جات

1. ISBN 978-7-5067-7337-9, PRC فارماکوپیا [S]۔ بیجنگ: نیشنل فارماکوپیا کمیشن، 2015

2. لئی، سونگ زیہونگ، ٹو پینگفی؛ Cistanche نسل کے پودوں کی کیمیائی ساخت میں تحقیقی پیشرفت، "چینی ہربل میڈیسن،" جلد 34، نمبر 5، مئی 2003،473-476۔